CN101856373B - 含有灵芝的发酵菌质混合物、制备方法及其应用 - Google Patents
含有灵芝的发酵菌质混合物、制备方法及其应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN101856373B CN101856373B CN2009100588898A CN200910058889A CN101856373B CN 101856373 B CN101856373 B CN 101856373B CN 2009100588898 A CN2009100588898 A CN 2009100588898A CN 200910058889 A CN200910058889 A CN 200910058889A CN 101856373 B CN101856373 B CN 101856373B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- ganoderma
- mixture
- zymocyte
- mycoplasma
- salviae miltiorrhizae
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- 241000222336 Ganoderma Species 0.000 title claims abstract description 106
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 69
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 12
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims abstract description 77
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims abstract description 77
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims abstract description 54
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 claims abstract description 30
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 28
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims abstract description 23
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims abstract description 11
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims abstract description 11
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 claims abstract description 10
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- 230000003064 anti-oxidating effect Effects 0.000 claims abstract description 8
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims abstract description 8
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 claims abstract description 8
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 claims abstract description 7
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 claims abstract description 7
- 241000204031 Mycoplasma Species 0.000 claims description 106
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 25
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 claims description 16
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 claims description 16
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 claims description 16
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 16
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 claims description 12
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims description 7
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 235000013376 functional food Nutrition 0.000 claims description 4
- 238000002372 labelling Methods 0.000 claims description 4
- 230000000050 nutritive effect Effects 0.000 claims description 4
- WTPPRJKFRFIQKT-UHFFFAOYSA-N 1,6-dimethyl-8,9-dihydronaphtho[1,2-g][1]benzofuran-10,11-dione;1-methyl-6-methylidene-8,9-dihydro-7h-naphtho[1,2-g][1]benzofuran-10,11-dione Chemical compound O=C1C(=O)C2=C3CCCC(=C)C3=CC=C2C2=C1C(C)=CO2.O=C1C(=O)C2=C3CCC=C(C)C3=CC=C2C2=C1C(C)=CO2 WTPPRJKFRFIQKT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 claims description 2
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 claims description 2
- 239000008240 homogeneous mixture Substances 0.000 claims description 2
- 244000132619 red sage Species 0.000 claims description 2
- 241000209149 Zea Species 0.000 claims 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 24
- 241000233866 Fungi Species 0.000 abstract description 19
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 abstract description 5
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 abstract description 4
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 abstract description 4
- 241000304195 Salvia miltiorrhiza Species 0.000 abstract description 3
- 235000011135 Salvia miltiorrhiza Nutrition 0.000 abstract description 3
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 abstract description 3
- 239000012567 medical material Substances 0.000 abstract description 2
- 230000009466 transformation Effects 0.000 abstract description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 2
- 230000002457 bidirectional effect Effects 0.000 abstract 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 abstract 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 abstract 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 36
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 35
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 35
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 32
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 22
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 21
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 16
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 15
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 15
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 15
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 14
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 13
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 13
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 13
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 13
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 11
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 11
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 10
- 230000008859 change Effects 0.000 description 9
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 9
- -1 triterpenoids chemical compound Chemical class 0.000 description 9
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 8
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 8
- 229960004756 ethanol Drugs 0.000 description 8
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 8
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 8
- 239000000463 material Substances 0.000 description 8
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 8
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 8
- 238000011160 research Methods 0.000 description 8
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 7
- 235000017276 Salvia Nutrition 0.000 description 7
- 240000007164 Salvia officinalis Species 0.000 description 7
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 7
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 7
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 7
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 7
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 6
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 6
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 6
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 6
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 5
- 201000006474 Brain Ischemia Diseases 0.000 description 5
- 235000019750 Crude protein Nutrition 0.000 description 5
- 241000581650 Ivesia Species 0.000 description 5
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 5
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 5
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 5
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 5
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 5
- 229960001031 glucose Drugs 0.000 description 5
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 5
- 230000031700 light absorption Effects 0.000 description 5
- 230000004089 microcirculation Effects 0.000 description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 description 5
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 5
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 4
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 4
- PJANXHGTPQOBST-VAWYXSNFSA-N Stilbene Natural products C=1C=CC=CC=1/C=C/C1=CC=CC=C1 PJANXHGTPQOBST-VAWYXSNFSA-N 0.000 description 4
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000002146 bilateral effect Effects 0.000 description 4
- 230000002490 cerebral effect Effects 0.000 description 4
- NKLPQNGYXWVELD-UHFFFAOYSA-M coomassie brilliant blue Chemical compound [Na+].C1=CC(OCC)=CC=C1NC1=CC=C(C(=C2C=CC(C=C2)=[N+](CC)CC=2C=C(C=CC=2)S([O-])(=O)=O)C=2C=CC(=CC=2)N(CC)CC=2C=C(C=CC=2)S([O-])(=O)=O)C=C1 NKLPQNGYXWVELD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 4
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 4
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 description 4
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 4
- PJANXHGTPQOBST-UHFFFAOYSA-N stilbene Chemical compound C=1C=CC=CC=1C=CC1=CC=CC=C1 PJANXHGTPQOBST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 235000021286 stilbenes Nutrition 0.000 description 4
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 4
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 3
- 206010053567 Coagulopathies Diseases 0.000 description 3
- 239000009636 Huang Qi Substances 0.000 description 3
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 3
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 3
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 3
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 3
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 3
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 210000002565 arteriole Anatomy 0.000 description 3
- 230000008827 biological function Effects 0.000 description 3
- 230000023555 blood coagulation Effects 0.000 description 3
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 230000035602 clotting Effects 0.000 description 3
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 3
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 3
- 230000001815 facial effect Effects 0.000 description 3
- 230000006870 function Effects 0.000 description 3
- 230000036541 health Effects 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 3
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 3
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 3
- 238000012856 packing Methods 0.000 description 3
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 3
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 3
- 210000001202 rhombencephalon Anatomy 0.000 description 3
- 239000002893 slag Substances 0.000 description 3
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 3
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 210000004243 sweat Anatomy 0.000 description 3
- 239000005711 Benzoic acid Substances 0.000 description 2
- 206010008120 Cerebral ischaemia Diseases 0.000 description 2
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 2
- 231100000111 LD50 Toxicity 0.000 description 2
- 241000204003 Mycoplasmatales Species 0.000 description 2
- 244000046101 Sophora japonica Species 0.000 description 2
- 235000010586 Sophora japonica Nutrition 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 2
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 2
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000010233 benzoic acid Nutrition 0.000 description 2
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 2
- 239000012490 blank solution Substances 0.000 description 2
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 2
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 2
- 208000009973 brain hypoxia - ischemia Diseases 0.000 description 2
- 210000005013 brain tissue Anatomy 0.000 description 2
- 210000001168 carotid artery common Anatomy 0.000 description 2
- 206010008118 cerebral infarction Diseases 0.000 description 2
- 238000004939 coking Methods 0.000 description 2
- 238000004737 colorimetric analysis Methods 0.000 description 2
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 230000000857 drug effect Effects 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- BEFDCLMNVWHSGT-UHFFFAOYSA-N ethenylcyclopentane Chemical compound C=CC1CCCC1 BEFDCLMNVWHSGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 2
- BJRNKVDFDLYUGJ-RMPHRYRLSA-N hydroquinone O-beta-D-glucopyranoside Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC=C(O)C=C1 BJRNKVDFDLYUGJ-RMPHRYRLSA-N 0.000 description 2
- 230000000302 ischemic effect Effects 0.000 description 2
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 2
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- 230000003285 pharmacodynamic effect Effects 0.000 description 2
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 2
- 238000010298 pulverizing process Methods 0.000 description 2
- 230000029058 respiratory gaseous exchange Effects 0.000 description 2
- 235000020374 simple syrup Nutrition 0.000 description 2
- 235000010199 sorbic acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000004334 sorbic acid Substances 0.000 description 2
- 229940075582 sorbic acid Drugs 0.000 description 2
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 description 2
- 239000001117 sulphuric acid Substances 0.000 description 2
- 235000011149 sulphuric acid Nutrition 0.000 description 2
- 230000001732 thrombotic effect Effects 0.000 description 2
- 210000001186 vagus nerve Anatomy 0.000 description 2
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 2
- 210000000264 venule Anatomy 0.000 description 2
- 239000002023 wood Substances 0.000 description 2
- 239000012224 working solution Substances 0.000 description 2
- KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N (2S,3S,4S,5R,6R)-6-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-Acetamido-2-[(2S,3S,4R,5R,6R)-6-[(2R,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N 0.000 description 1
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 description 1
- 241001116389 Aloe Species 0.000 description 1
- 241000609240 Ambelania acida Species 0.000 description 1
- 201000000736 Amenorrhea Diseases 0.000 description 1
- 206010001928 Amenorrhoea Diseases 0.000 description 1
- 206010002383 Angina Pectoris Diseases 0.000 description 1
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 1
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000031404 Chromosome Aberrations Diseases 0.000 description 1
- 208000005171 Dysmenorrhea Diseases 0.000 description 1
- 206010013935 Dysmenorrhoea Diseases 0.000 description 1
- 206010013954 Dysphoria Diseases 0.000 description 1
- 102000002322 Egg Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010000912 Egg Proteins Proteins 0.000 description 1
- JOYRKODLDBILNP-UHFFFAOYSA-N Ethyl urethane Chemical compound CCOC(N)=O JOYRKODLDBILNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 1
- 206010021143 Hypoxia Diseases 0.000 description 1
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000219071 Malvaceae Species 0.000 description 1
- 208000019255 Menstrual disease Diseases 0.000 description 1
- 240000001307 Myosotis scorpioides Species 0.000 description 1
- QGMRQYFBGABWDR-UHFFFAOYSA-M Pentobarbital sodium Chemical compound [Na+].CCCC(C)C1(CC)C(=O)NC(=O)[N-]C1=O QGMRQYFBGABWDR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 244000046052 Phaseolus vulgaris Species 0.000 description 1
- 235000010627 Phaseolus vulgaris Nutrition 0.000 description 1
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000222341 Polyporaceae Species 0.000 description 1
- 208000001431 Psychomotor Agitation Diseases 0.000 description 1
- 230000002292 Radical scavenging effect Effects 0.000 description 1
- 206010038743 Restlessness Diseases 0.000 description 1
- 241000607142 Salmonella Species 0.000 description 1
- 241001072909 Salvia Species 0.000 description 1
- BUGBHKTXTAQXES-UHFFFAOYSA-N Selenium Chemical compound [Se] BUGBHKTXTAQXES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000013738 Sleep Initiation and Maintenance disease Diseases 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 244000062793 Sorghum vulgare Species 0.000 description 1
- 208000007107 Stomach Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 208000031320 Teratogenesis Diseases 0.000 description 1
- 244000269722 Thea sinensis Species 0.000 description 1
- 241000222354 Trametes Species 0.000 description 1
- 108010093894 Xanthine oxidase Proteins 0.000 description 1
- 102100033220 Xanthine oxidase Human genes 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DGEZNRSVGBDHLK-UHFFFAOYSA-N [1,10]phenanthroline Chemical compound C1=CN=C2C3=NC=CC=C3C=CC2=C1 DGEZNRSVGBDHLK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 235000011399 aloe vera Nutrition 0.000 description 1
- 231100000540 amenorrhea Toxicity 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000001195 anabolic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000000702 anti-platelet effect Effects 0.000 description 1
- 230000002421 anti-septic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002785 anti-thrombosis Effects 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 239000006286 aqueous extract Substances 0.000 description 1
- 229960000271 arbutin Drugs 0.000 description 1
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 239000010905 bagasse Substances 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 description 1
- 230000036983 biotransformation Effects 0.000 description 1
- 239000007844 bleaching agent Substances 0.000 description 1
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 1
- 210000002798 bone marrow cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000001058 brown pigment Substances 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- OSGAYBCDTDRGGQ-UHFFFAOYSA-L calcium sulfate Chemical compound [Ca+2].[O-]S([O-])(=O)=O OSGAYBCDTDRGGQ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229920001525 carrageenan Polymers 0.000 description 1
- 235000010418 carrageenan Nutrition 0.000 description 1
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 1
- 210000004720 cerebrum Anatomy 0.000 description 1
- 231100000005 chromosome aberration Toxicity 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 208000029078 coronary artery disease Diseases 0.000 description 1
- 235000019784 crude fat Nutrition 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 230000001186 cumulative effect Effects 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 229960000935 dehydrated alcohol Drugs 0.000 description 1
- 230000002951 depilatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 230000000916 dilatatory effect Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- HHEAADYXPMHMCT-UHFFFAOYSA-N dpph Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC([N+](=O)[O-])=CC([N+]([O-])=O)=C1[N]N(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 HHEAADYXPMHMCT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 1
- 239000003797 essential amino acid Substances 0.000 description 1
- 235000020776 essential amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 210000003746 feather Anatomy 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 1
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 201000005917 gastric ulcer Diseases 0.000 description 1
- 238000005469 granulation Methods 0.000 description 1
- 230000003179 granulation Effects 0.000 description 1
- 241000411851 herbal medicine Species 0.000 description 1
- 229920002674 hyaluronan Polymers 0.000 description 1
- 229960003160 hyaluronic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000007954 hypoxia Effects 0.000 description 1
- 239000005457 ice water Substances 0.000 description 1
- 238000007654 immersion Methods 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 206010022437 insomnia Diseases 0.000 description 1
- 238000009413 insulation Methods 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L iron(2+) sulfate (anhydrous) Chemical compound [Fe+2].[O-]S([O-])(=O)=O BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000359 iron(II) sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- BEJNERDRQOWKJM-UHFFFAOYSA-N kojic acid Chemical compound OCC1=CC(=O)C(O)=CO1 BEJNERDRQOWKJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004705 kojic acid Drugs 0.000 description 1
- WZNJWVWKTVETCG-UHFFFAOYSA-N kojic acid Natural products OC(=O)C(N)CN1C=CC(=O)C(O)=C1 WZNJWVWKTVETCG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002655 kraft paper Substances 0.000 description 1
- 238000004900 laundering Methods 0.000 description 1
- 238000002386 leaching Methods 0.000 description 1
- WABPQHHGFIMREM-UHFFFAOYSA-N lead(0) Chemical compound [Pb] WABPQHHGFIMREM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 description 1
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 description 1
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 210000003141 lower extremity Anatomy 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940078752 magnesium ascorbyl phosphate Drugs 0.000 description 1
- 230000002175 menstrual effect Effects 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 235000019713 millet Nutrition 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 1
- 238000003032 molecular docking Methods 0.000 description 1
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 1
- 210000004165 myocardium Anatomy 0.000 description 1
- 231100000957 no side effect Toxicity 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000004745 nonwoven fabric Substances 0.000 description 1
- 235000021049 nutrient content Nutrition 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 210000004681 ovum Anatomy 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- BJRNKVDFDLYUGJ-UHFFFAOYSA-N p-hydroxyphenyl beta-D-alloside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1=CC=C(O)C=C1 BJRNKVDFDLYUGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003119 painkilling effect Effects 0.000 description 1
- 239000000123 paper Substances 0.000 description 1
- 235000011837 pasties Nutrition 0.000 description 1
- 229960002275 pentobarbital sodium Drugs 0.000 description 1
- 238000005325 percolation Methods 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- OQUKIQWCVTZJAF-UHFFFAOYSA-N phenol;sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O.OC1=CC=CC=C1 OQUKIQWCVTZJAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 1
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 description 1
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 229910052711 selenium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011669 selenium Substances 0.000 description 1
- 210000000582 semen Anatomy 0.000 description 1
- 238000004904 shortening Methods 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 239000010902 straw Substances 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 1
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 1
- 150000003505 terpenes Chemical class 0.000 description 1
- 235000007586 terpenes Nutrition 0.000 description 1
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 1
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 1
- 229940126680 traditional chinese medicines Drugs 0.000 description 1
- 150000003648 triterpenes Chemical class 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
含有灵芝的发酵菌质混合物，将灵芝在至少含有真菌生长所需的碳源和氮源的营养性培养基质中经固体发酵方式发酵后，得到包含菌丝及培养基质成分在内的菌质混合物，其中在培养基质中混合有药用原料丹参。通过包括药用原料成分对灵芝菌丝体生长代谢过程的影响和灵芝真菌酶系对药材成分改造在内的双向性固体发酵后，得到兼具丹参药材和灵芝真菌功效的菌质发酵终产物，可应用于制备具有活血化瘀和抗氧化功效的药物和/或化妆品。
Description
技术领域
本发明涉及一种真菌经固体发酵得到的菌质混合物、制备方法及其应用。具体讲是一种由灵芝以含有药用原料成分的培养基质经固体发酵得到菌质混合物、其制备方法及应用。
背景技术
对多种药(食)用真菌代谢产物的研究，尤其是多糖类的抗肿瘤研究，目前已有许多报道。长期以来其生产研究主要是集中在液体深层发酵，主要借鉴抗生素生产工艺；其生产效率较高，产品质量较稳定，但存在成本较高，耗能大，且易受污染，不易操作等问题。
固体发酵生产工艺使用的培养基，多是利用农副产品如麸、糠、甘蔗渣、玉米芯等，成本大大低于液体发酵，且由于其灭菌后可在自然条件下培养，污染率较低等优点，近年来已成为真菌生产研究的热点。早期的真菌固体发酵主要是固体培养，即将培养基装袋灭菌后接种真菌，收获子实体，培养基的主要功能是提供真菌生长所需营养物质，即碳源、氮源、矿质营养与维生素等成分。自20世纪七十年代后开始研究应用菌丝体，出现了无渣型和去渣型两类生产工艺。
近来有学者进一步提出了“菌质”的概念，即真菌在固体培养基上发酵后形成的既不同于单纯的菌丝体，也不同于培养基渣滓，而是包含了真菌菌丝体活性成分、真菌代谢产物和培养基营养成分在内的复杂成分发酵终产物体系。如，庄毅等在“药用真菌新型固体发酵工程与槐芪菌质的研制”(《中国药学杂志》2004(3)Vol.39，175-178)中报道了由槐耳菌和黄芪构成发酵组合生产槐芪菌质，进行了发酵中药材的筛选、发酵终点的确定实验，并对不同菌种接种同种基质后产生菌质的药效学比较、菌质多糖提取和清膏除杂以及这两者对同一药效的比较试验。
陈华珍等在“灵芪菌质发酵工艺初报”(《中西医结合学报》2004(3)，Vol.2，216)中报道了将灵芝分别在普通基质、药性基质(含黄芪)、富硒药性基质中发酵，对三种基质中菌质的有效部位多糖的含量进行测定及动态研究，比较其变化。
谷坤睿等的“14个灵芝菌株的新型双向型固体发酵及菌质多糖含量测定”(《时珍国医国药》2005(4)，Vol.16，313)、刘学湘等的“灵芝和灵芪菌质多糖的含量动态变化初步分析”(《中医药学报》2005(6)，Vol.33，33)、秦俊哲洁等的“灵芝新型固体发酵菌质种活性成分的研究”(《食用菌》2005(1)，8)、以及郁帅陆等的“黄芪固体发酵中有效成分的变化”(《食品与药品》2007(03A)，Vol.9，8)等，分别报道了对相应菌质中的多糖、蛋白、三萜类等活性成分物质的测定及变化。
陈合等在“利用中药渣培养灵芝菌及生物活性成分的研究”(《食品工业科技》2006(10)，58)还报道了对灵芝菌最适的发酵条件、子实体生长条件及其生物活性成分(灵芝多糖及灵芝三萜化合物)和重金属含量等方面的研究。
发酵的概念是通过微生物对有机物的作用，以获得某种或几种产品。由真菌固体发酵所生产的菌质，实质是真菌与培养基质共同构成发酵组合，一方面通过酶作用于发酵基质，分解基质成分，摄取营养，生长大量菌丝体；另一方面真菌的代谢过程既使基质被分解出现新成分，同时还可以合成新成分。这些新成分的性质可因不同真菌所具酶的差异而有所不同，并还要受到基质的种类和/或性质、以及发酵条件的影响。发酵所形成的各种成分，有的可累积在菌丝体内(胞内)，有的则仍留在基质中或由菌丝体分泌到基质中去(胞外)，因此形成了发酵后复杂成分体系的终产物。
将菌质生产和中草药应用紧密联系，将适当的中药材作为真菌固体发酵培养基或培养基的一部分成分，使其既提供真菌生长所需营养，同时又因真菌的分解和合成作用产生新的成分，从而使其性质发生变化；同时因不同种类真菌的生理代谢过程不同，基质中采用的中药材品种不同而成分和功效不同，因而可得到不仅兼具真菌和中药材的功效、并可能产生新功效的药性菌质或兼有原有营养基质和中药材基质的全性菌质发酵终产物。
由于不同菌种与不同基质交叉组合可构成不同的发酵组合，并可产生种类更为繁多的菌质，因此可成为中药材特别是菌物药开发的新途径，并可被应用于药物和/或功能性食品中。
发明内容
鉴于此，本发明将在此基础上提供一种由灵芝以含有药用原料成分的培养基质经固体发酵得到菌质混合物、其制备方法及在药物和/或功能性食品中的应用。
灵芝(Ganoderma)在我国已有几千年的历史，现已记载有灵芝科真菌4属103种，其中灵芝属77种，《中国药典》(2000年版)已收载作为药用。灵芝子实体含有丰富的营养成分和药用成分，主要有水分12.49％～13.02％，粗蛋白11.98％～13.87％，粗脂肪0.81％～1.96％，总糖7.34％～8.10％，其多糖含量为1.06％～1.33％，钙1550μg/g、镁483μg/g、铁180μg/g、锌44.7μg/g及磷37.5μg/g等人体必需的常量或微量元素，还含有18种常见氨基酸，总量为6.07％～6.38％，其中必需氨基酸含量丰富(E/T＝0.528～0.545)；另有少量萜类物质。目前，灵芝的人工栽培技术已经普及，主要有代料和椴木栽培两种方式，对产品的加工技术也日趋成熟，包括保健饮料(如灵芝茶、灵芝酒)、药品(如灵芝冲剂、灵芝丸、灵芝胶囊)、美容品等多种灵芝类产品已为人们认识、接受和使用。
中药丹参是唇形科鼠尾草属的多年生草本植物丹参(Salvia miltiorrhiza Bunge)的干燥根及根茎，又称血参、紫丹参、红丹参等。作为一传统中药其已沿用久远，具有祛瘀止痛、活血通经、清心除烦的功效，主治冠心病、心绞痛、心烦不眠、月经不调、经闭痛经等症。近年来，有关丹参的药效学研究较多且日趋深入，具体表现为在扩冠脉流量、促进微循环、血液流变学、抗血小板聚集、提高耐缺氧能力、保护缺血心肌、治疗胃溃疡和肝肾损伤、抗动脉粥样硬化、抗肿瘤、降血压、增强免疫等方面具有显著疗效，目前已有包括注射、口服、贴剂等多种形式的药物制剂供使用。
本发明含有灵芝的发酵菌质混合物，是由灵芝在至少含有真菌生长所需的碳源和氮源的营养性培养基质中，还含有药用原料丹参，然后通过丹参成分对灵芝菌丝体生长代谢过程的影响和灵芝真菌酶系对药物成分的改造这一双向性生物转化的固体发酵过程，得到包含菌丝及培养基质成分在内的灵芝/丹参菌质混合物这一发酵终产物。
上述所说的营养性培养基质成分、条件的选择，可参照目前在灵芝栽培方面已有报道和/或使用的方式(如前述相关文献)。其中，固体发酵灵芝的培养基可主要使用农业的废弃生物质，如玉米芯、棉籽壳、米糠、豆粕、酒糟、锯木屑等。现有文献报道已显示，灵芝在这些基质配方中都能很好生长。
试验结果显示，在本发明所说发酵菌质混合物的培养基质中，丹参含量的高低对灵芝的生长并无明显的干扰或影响，但所得到的发酵菌质混合物的特殊药理作用的显著与否，则主要取决于在发酵培养基中所含丹参的比例，有由量变向质变的变化过程。例如，一种可供参考的培养基质的重量比例组成可以采用：玉米芯5％～80％，麦麸10％～25％，其余为药用原料丹参。其进一步的优选比例可以为：玉米芯5％，麦麸25％，其余为药用原料丹参。固体发酵的条件及过程等，同样也可参照前述相关文献的方式进行。
例如，以上述至少含有真菌生长所需的碳源和氮源营养成分与药用原料丹参粉末的均匀混合物为培养基质，在灵芝的适宜栽培条件下(如每年3～10月期间的自然栽培或不限时间的人工栽培，和/或22℃～25℃条件等)，使灵芝在其中进行固体发酵30～50天，一般也可在35～40天后，收集包含菌丝及培养基质成分在内的菌质混合物。
以本发明的上述灵芝/丹参发酵菌质或其提取物(如按常规煎煮、回流、渗漉、浸泡等方式得到的水提物)为有效药用成分，与药学中可接受的辅助成分可以共同组成具有活血化瘀、抗氧化功效的药物。将上述的灵芝/丹参发酵菌质或其提取物作为添加成分，与药用或保健品的辅料成分(如乳糖、淀粉、硬脂酸镁等赋形剂；蜂蜜、单糖浆等调味剂；山梨酸、苯甲酸等防腐剂)可以共同组成具有活血化瘀、抗氧化功效的保健品；还可以以上述的灵芝/丹参发酵菌质或其提取物为主要成分，与化妆品中允许使用的其它辅助和/或添加剂共同组成具有抗氧化作用的化妆品。所说的这些药物、食品、化妆品等都可以通过目前相关行业的常规方式或工艺实现，对制备方法并无特别的要求、限制，也不存在任何技术困难或障碍。
以下结合附图及实施例的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。在不脱离本发明上述技术思想情况下，根据本领域普通技术知识和惯用手段做出的各种替换或变更，均应包括在本发明的范围内。
附图说明
图1是本发明灵芝/丹参全性菌质的各种组合固体发酵过程中菌丝体生长速度曲线。
图2是本发明灵芝/丹参全性菌质的各种组合固体发酵过程中总多糖含量动态变化曲线。
图3是本发明灵芝/丹参全性菌质的各种组合固体发酵过程中粗蛋白含量动态变化曲线。
具体实施方式
在如表1所示的不同组成形式的培养基质中按灵芝常规发酵方式操作，对灵芝的生长适应性进行了试验。实验中选择玉米芯与麦麸(可根据当地情况可作调整)与丹参混合作为灵芝发酵培养基，主要考察灵芝在各培养基上的生长情况，以及在不同含量比例丹参的培养基质中经固体发酵制备得到的本发明所说的灵芝/丹参菌质(简称灵丹菌质)混合物的药理活性。
试验所用的灵芝的常规发酵方式：母种由PDA斜面培养基保存。按表1的各培养基配方，将各成分加水拌匀，含水量为40％，装袋后压实，每袋装料500g，中间打一个圆洞，封口(可用牛皮纸等)并扎紧，115MPa高压保持3小时灭菌，或煮沸后保持24小时的常压灭菌。冷却后，无菌操作接入灵芝母菌种，把接好种的瓶子放在培养室培养，培养室内温度应保持在22-25℃。
发酵结果显示，所有组合的培养基质均适于灵芝菌丝体生长，无生长抑制现象，证明了在常规营养性培养基质中含有不同比例量的丹参，均能作为制备本发明所说灵芝-丹参菌质混合物的发酵培养基，灵芝在其中均能很好地生长而无明显不利影响和干扰。
表1 灵芝-丹参全性菌质固体发酵培养基
| 试验组编号 | 丹参(w％) | 玉米芯(w％) | 麦麸(w％) |
| 1 | 10 | 80 | 10 |
| 2 | 10 | 73 | 17 |
| 3 | 10 | 65 | 25 |
| 4 | 30 | 60 | 10 |
| 5 | 30 | 53 | 17 |
| 6 | 30 | 45 | 25 |
| 7 | 50 | 40 | 10 |
| 8 | 50 | 33 | 17 |
| 9 | 50 | 25 | 25 |
| 10 | 70 | 20 | 10 |
| 11 | 70 | 13 | 17 |
| 12 | 70 | 5 | 25 |
从接种开始记录灵芝菌丝体在固体发酵培养基上的平均生长速度，得到如图1所示的灵芝菌丝体生长曲线。由图1可以看出，菌丝生长可分为四个阶段：(1)适应期(0-6d)：菌丝生长较慢，菌丝较纤弱；(2)旺盛期(6-8d)：菌丝活力较强，代谢旺盛，生长快；(3)下降期(8-13d)：菌丝生长速度急剧下降；(4)回升期(13-15d)：菌丝生长速度有所回升；(5)衰退期(15-35d)：菌丝活力衰退，菌丝老龄化，开始分泌黄褐色素。该实验结果表明，菌丝生长至接种13天后，生长速度趋于平稳且不断下降，至30天后，生长速度趋于平缓不变。
以苯酚-硫酸比色法观察上述灵丹菌质固体发酵体系总多糖含量的动态变化：
(1)取样方法：从接种日起，每隔10d每组合的固体发酵样品各取3袋，烘干打粉(40目)作为样品。
(2)供试品溶液的制备：①提取上清液：精密称取样品细粉5g(约相当于多糖0.22g)，置烧瓶中，加水100ml置电炉上加热回流提取1.5h，放冷至室温，3000～4000rpm离心10min后收集上清液，少量水分次洗涤烧瓶及离心管，同样离心收集上清液。②提取多糖沉淀：合并全部上清液置蒸发皿中，置电炉上小心加热(避免焦化)浓缩到约15ml，放冷至室温，加乙醇100ml，搅匀，放置使其沉淀15分钟。转移此溶液连同沉淀于离心管中，继续用少量80％乙醇以玻棒充分刮洗蒸发皿，洗液和沉淀同样转移至离心管中，以3000～4000rpm速度离心15min，弃去上清液，在离心管中加入少量80％乙醇，轻轻洗涤，同样离心弃去上清液(保留沉淀物)。然后将离心管(连同沉淀物)于50℃烘箱挥干乙醇，然后加热水溶解沉淀，转移至250ml量瓶中，继续用热水以玻棒充分刮洗离心管，洗液同样转移至250ml量瓶中，放冷至室温，用水定容至刻度，摇匀，精密量取5ml置100ml量瓶中，用水定容至刻度，摇匀即得供试品溶液。
(3)标准曲线的制作：精密称取105℃干燥至恒重的无水葡萄糖适量，加水配制成0.85mg/ml的贮备液。精密吸取1.0，2.0，3.0，4.0，5.0ml分别置于50ml量瓶中加水定容至刻度，摇匀得葡萄糖稀释液。再分别精密量取上述各稀释液2ml置具塞试管中，同时精密量取水2.0ml置另一具塞试管中，各管分别加5％苯酚溶液(新制)1ml，摇匀，然后迅速加入浓硫酸5.0ml，立即摇匀，于40℃水浴中保温30min，取出，置冰水浴中5min。以上述2.0ml水所制得的空白溶液做参比，于490nm波长处测定各溶液吸收度，以葡萄糖稀释液的浓度(μg/ml)为横坐标，吸收度为纵坐标，绘制标准曲线。
(4)样品测定：取供试品溶液2.0ml置具塞试管中，按“标准曲线的制作”项下同法加苯酚溶液和浓硫酸，测定吸收度。根据样品吸收度从标准曲线上读取葡萄糖浓度，再计算出样品中总多糖的含量(以葡萄糖计)。实验结果如图2所示。
图2结果显示，随着发酵时间的增长，各组合粗多糖含量基本呈逐渐下降趋势，从接种后10天到30天，变化较为剧烈；接种后30天到50天，变化趋势变缓，至50天取样时粗多糖含量与40天时相比已基本不变。
以考马斯亮蓝法观察该灵丹菌质固体发酵体系粗蛋白含量动态变化：
(1)取样方法：从接种日起，每隔10d取各组的固体发酵样品2-4袋，按组分别混合后烘干打粉(40目)作为样品。
(2)供试品溶液的制备：①提取上清液：精密称取样品细粉5g(约相当于多糖0.22g)，置烧瓶中，加水100ml置电炉上加热回流提取1.5h，放冷至室温，3000～4000rpm离心10min，收集上清液，用少量水分次洗涤烧瓶及离心管，同样离心收集上清液。合并全部上清液置蒸发皿中，置电炉上小心加热(避免焦化)浓缩到约20ml，放冷至室温。
(3)标准曲线的制作：准确称取100mg牛血清白蛋白，溶于100ml蒸馏水中，即为1000μg/ml的牛血清白蛋白标准溶液。精密吸取牛血清白蛋白标准溶液0.02ml、0.04ml、0.06ml、0.08ml、0.10ml、0.20ml、0.40ml、0.60ml、0.80ml、1.00ml分别置于具塞试管中加水定容至1ml，摇匀得牛血清白蛋白稀释液，各管分别加考马斯亮蓝工作液(新制)5ml，摇匀，以1.0ml水所制得的空白溶液做参比，于590nm波长处测定各溶液吸收度，以牛血清白蛋白稀释液的浓度(μg/ml)为横坐标，吸收度为纵坐标，绘制标准曲线。
(4)样品测定：取供试品溶液1.0ml置具塞试管中，按“标准曲线的制作”项下同法加考马斯亮蓝工作液，测定吸收度。根据样品吸收度从标准曲线上读取蛋白质浓度，再计算出样品中蛋白质的含量。实验结果如图3所示。
由图3结果可以看出，随着发酵时间的增长，各组合灵丹菌质混合物中的粗蛋白含量基本呈逐渐下降趋势，从接种后10天到30天，变化较为剧烈；接种后30天到50天，变化趋势变缓，至50天取样时粗蛋白含量与40天时相比已基本不变。
上述试验结果显示，采用营养性成分的比例为玉米芯5％～80％(均为w％)，麦麸10％～25％和余量为药用原料丹参，特别是以玉米芯5％，麦麸25％和余量为药用原料丹参形式的培养基质，使灵芝按常规方式，在灵芝的自然栽培时期(每年的3～10月)于22℃～25℃的常温下进行的固体发酵，灵芝的生长均是正常和满意的。固体发酵时间一般可为30～50天，更好的是在固体发酵35～40天后，收集包含菌丝及培养基质成分在内的菌质混合物，都可以获得理想的效果。并且，随培养基质中丹参药材添加比例的增高，所得菌质混合物的多糖和蛋白含量也呈现逐渐增高的趋势。
以下的实验还进一步显示，本发明上述的灵丹菌质混合物(以下均简称“灵丹菌质”)可以具有明显优于单一的灵芝、丹参，及其按常规方式相互组合的混合药物的生物学功能，而灵丹菌质的生物学功能随丹参在培养基中的比例增加而升高。
实验1 灵丹菌质对小鼠凝血时间(CT)的影响
实验动物：KM种小鼠80只，体重20±2g。
实验方法：将小鼠分为正常组(蒸馏水0.2ml/10g)、灵丹菌质组10％、30％、50％、70％(0.15g/10g，即每10g体重小鼠灌胃黄丹菌质中丹参含量为0.15g，折算成灵丹菌质为0.15÷丹参在灵丹菌质中的比例，以下同)、灵芝菌质组(无丹参单独发酵的灵芝菌质，灌胃剂量与灵丹菌质组10％相同，即0.15/0.1＝1.5g/10g，以下同)、灵芝/丹参混合药物组(以不含丹参的培养基质单独发酵得到的灵芝菌质代替除与灵丹菌质10％中等比例的丹参药材外的其余部分，以下同)、和丹参药材组(与灵丹菌质同批次药材，0.15g丹参生药/10g，即每10g体重小鼠灌胃0.15g丹参水提取液，以下同)，每组各10只，雌雄各半，每日灌胃给药，正常组每日给予等量水灌胃，连续7d。末次给药后1h用内径1mm玻璃毛细管插入小鼠内眦球后静脉丛取血，自血液流人管中开始计时，血液注满后取出毛细管平放于桌上，每隔30s折断两端毛细管，并缓慢向左右拉开，观察折断处是否有血凝丝，至血凝丝出现时停止计时，所得时间即为CT。结果以X±S表示，组间行t检验。
实验结果：与正常组相比，灵丹菌质组有明显延长小鼠凝血时间的作用(P＜0.05，P＜0.01)，量效关系明显，提示其具备抗凝血作用，且随着丹参在培养基中比例增加其效果随之增加。结果如表2所示。
表2 灵丹菌质对小鼠凝血时间(CT)的影响
注：与正常对照组相比：**P＜0.01，*P＜0.05。
实验2 灵丹菌质对小鼠尾出血时间的影响
实验动物：KM种小鼠80只，体重20±2g。
实验方法：将小鼠分为正常组、灵丹菌质组10％、30％、50％、70％、灵芝菌质组、灵芝/丹参混合药物组、和丹参药材组，每组各10只，雌雄各半，每日灌胃给药，模型组每日给予等量水灌胃，连续7d。末次给药后1h取小鼠置于固定器中，使其尾部垂直，距尾尖1.5mm处剪断，用滤纸吸血直至吸不出血为止，记录断尾尖至吸不出血的时间即为尾出血时间。
实验结果：与正常组相比，灵丹菌质组有明显延长小鼠出血时间的作用(P＜0.05，P＜0.01)，量效关系明显，提示其具备延长出血时间作用，且随着丹参在培养基中比例增加其效果随之增加。结果如表3所示。
表3 灵丹菌质对小鼠尾出血时间的影响
注：与正常对照组相比：**P＜0.01，*P＜0.05。
实验3 灵丹菌质对小鼠尾部血栓形成的影响
实验动物：KM种小鼠50只，体重20±2g。
实验方法：将小鼠分为模型组、灵丹菌质组10％、30％、50％、70％、灵芝菌质组、灵芝/丹参混合药物组、和丹参药材组，每组各10只，雌雄各半，每日灌胃给药，模型组和正常组每日给予等量水灌胃，连续7d。给药第4天注射1.5％角叉菜胶于小鼠左右后肢脚掌皮下，每只脚掌0.03ml(0.06ml/只)，注射完毕后保持17℃温度饲养，继续给药3天，并于注射后24h，48h，72h测量小鼠全尾长度和尾部血栓长度，计算血栓率。
实验结果：与模型组相比，灵丹菌质组有明显缩短小鼠尾部血栓长度的作用(P＜0.05，P＜0.01)，量效关系明显，提示其具备抗血栓作用，且随着丹参在培养基中比例增加其效果随之增加。结果如表4所示。
表4 灵丹菌质对小鼠尾部血栓形成的影响
注：与正常对照组相比：**P＜0.01，*P＜0.05。
实验4 灵丹菌质对小鼠耳廓微循环的影响
实验动物：KM种小鼠80只，体重20±2g。
实验方法：将小鼠分为正常组、灵丹菌质组10％、30％、50％、70％、灵芝菌质组、灵芝/丹参混合药物组、和丹参药材组，每组各10只，雌雄各半，每日灌胃给药，模型组和正常组每日给予等量水灌胃，连续7d。末次给药前，各小鼠ip12.5％戊巴比妥钠0.4mg/kg麻醉，将小鼠右耳廓部用脱毛剂脱毛，耳廓平展于耳托上，64倍物镜观察，观察部位的确定：距耳廓边缘约1.5～2mm处，在平行于耳廓边缘方向，自中间细动脉开始右行约1mm范围内为观察部位。将测微尺(0-1000μm)置于此处。凡与该测微尺相交之血管均视为有效，对其进行BI.2000图像系统分析。选择流速稳定区域微动脉(A)、微静脉(V)各一条并标记，记录血管管径及血液流速。而后给药3d。在末次给药后0.5h，同法麻醉并测定标记血管管径及血液流速。分析给药前后管径及血液流速变化情况。以给药前后两次结果差值(ΔV，ΔA)及血流速度之差作为微循环改善情况的指标。实验数据进行t值检验和方差分析。
实验结果：与正常组相比，灵丹菌质组可明显增加微血管管径(P＜0.01)，加快小鼠微动脉、微静脉血流速度(P＜0.01)，量效关系明显，提示其具备改善微循环作用，且随着丹参在培养基中比例增加其效果随之增加。结果如表5所示。
表5 灵丹菌质对小鼠耳廓微循环的影响
注：与正常对照组相比：**P＜0.01，*P＜0.05。
实验5 灵丹菌质对急性脑缺血缺氧小鼠的保护作用
实验动物：KM种小鼠80只，体重20±2g。
实验方法：将小鼠分为正常组、阳性对照组(红景天，0.06g/10g，即每10g小鼠体重灌胃0.06g红景天的水提物)、灵丹菌质组10％、30％、50％、70％、灵芝菌质组、灵芝/丹参混合药物组，每组各10只，雌雄各半，每日灌胃给药，模型组和正常组每日给予等量水灌胃，连续7d。末次给药后30min，200g/L乌拉坦1.0g/kg静脉注射麻醉，分离双侧颈总动脉及迷走神经，用手术线同时结扎，观察小鼠的存活时间(每分钟呼吸少于或等于5次为死亡)。
实验结果：与正常组相比，灵丹菌质组有明显延长小鼠结扎双侧颈总动脉及迷走神经后的存活时间的作用(P＜0.05，P＜0.01)，量效关系明显，提示其具备改善缺血脑组织的血氧供应作用，且随着丹参在培养基中比例增加其效果随之增加。结果如表6所示。
表6 灵丹菌质对急性脑缺血缺氧小鼠的保护作用
注：与正常对照组相比：**P＜0.01，*P＜0.05。
实验6 灵丹菌质对断头小鼠喘息时间的影响
实验动物：KM种小鼠80只，体重20±2g。
实验方法：将小鼠分为正常组、阳性对照组(红景天，0.06g/10g，即每10g小鼠体重灌胃0.06g红景天的水提物)灵丹菌质组10％、30％、50％、70％、灵芝菌质组、灵芝/丹参混合药物组，每组各10只，雌雄各半，每日灌胃给药，模型组每日给予等量水灌胃，连续7d，每组各10只，雌雄各半，每日灌胃给药，模型组每日给予等量自来水灌胃，连续7d。术次给药1h后，自小鼠耳后根部快速断头，记录小鼠断头后喘息的时间(s)。
实验结果：与正常组相比，灵丹菌质组具有延长小鼠断头后喘气时间的作用的趋势，提示其具备一定抗急性耐缺氧作用，且随着丹参在培养基中比例增加其效果随之增加。结果如表7所示。
表7 灵丹菌质对断头小鼠喘息时间的影响
注：与正常对照组相比：**P＜0.01，*P＜0.05。
实验7 灵丹菌质抗氧化能力测评
1.灵丹菌质抗氧化功效检测样品制备
灵丹发酵产物粉碎后过40目筛，取粉末5g溶于100ml水，60℃超声提取1h后，3000g离心10min，过滤后收集滤液定容为5ml，即浓度为1g/ml，然后稀释成40-400mg/ml。
2.清除·OH自由基能力的测定
在试管中分别加入1mlpH值为7.4的磷酸盐缓冲溶液(0.05mol/L)，0.4ml 6mmol/L的邻二氮菲溶液(无水乙醇配制)，充分混匀后，加入0.4ml 6mmol/L FeSO4溶液，加入后立即混匀。然后向其中加入0.5ml一定浓度的样品溶液，混匀，再加入0.5ml 0.1％的H2O2，最后补充体积至4ml，同时做空白试验。另再做损伤和未损伤管。其中损伤管中加入0.5ml 0.1％的H2O2，未损伤管不加H2O2，最后补充各体积至4ml。于37℃下保温1h，测在536nm下的吸光度，重复两次，计算平均值。羟自由基清除率＝(Ai-A)/(A0-A)×100％。
A为不加样品时溶液的吸光值，A0为不加样和H2O2时溶液的吸光值。注意浓度控制，先实验3-4倍浓度，再逐步稀释至最适浓度，控制温度。
3.提取物清除DPPH自由基能力的测定
取待测样品1ml和事先用95％乙醇配好的0.4mg/ml的DPPH自由基试剂1ml于10ml的玻璃试管中。样品加入后振动30s，37℃保温10min后517nm波长下测定其吸光值(Ai)。同时测定不加DPPH自由基试剂的样品空白吸光值(Aj)和加DPPH自由基试剂但不加样品的吸光值(A0)，如下表8所示。
表8
样品对DPPH的清除百分比I＝1-[(Ai-Aj)/A0]×100％，
实验结果：通过清除率推算出样品的EC50。在清除·OH、DPPH自由基方面，灵丹菌质组的EC50均低于灵芝菌质组，且随着丹参在培养基中比例增加，其抗氧化效果随之增强，这说明灵丹菌质有较好的自由基清除能力，结果如表9所示。
表9 灵丹菌质清除·OH、DPPH自由基的EC50试验结果
注：与灵芝菌质组相比：**P＜0.01，*P＜0.05。
实验8 灵丹菌质对脑缺血小鼠脑组织MDA含量、SOD活性的影响
实验动物：KM种小鼠90只，体重20±2g。
实验方法：将小鼠分为模型组、假手术组、灵丹菌质组10％、30％、50％、70％、灵芝菌质组、灵芝/丹参混合药物组、和丹参药材组，每组各10只，雌雄各半，每日灌胃给药，模型组每日给予等量水灌胃，连续7d。①小鼠脑缺血后脑组织匀浆液的制备：末次给药后1h，假手术组分离两侧颈总动脉但不结扎，其余各组在结扎两侧颈总动脉3h后断头，小心剥取两侧大脑半球，称重，按重量∶体积＝1∶9的比例加入预冷的生理盐水(4℃)，用组织匀浆器充分匀浆，将匀浆液以1500g，4℃离心12min，取上清液，用考马斯亮蓝法测定总蛋白含量，-70℃冻存备用。②脑组织SOD活性、MDA含量的测定：i.取1％大脑组织匀浆液，采用黄嘌呤氧化酶法(SOD检测试剂盒)，于波长550nm处分别测定各组小鼠大脑组织匀浆液的吸光度值。ii.取1％大脑组织匀浆液，采用TBA比色法(MDA检测试剂盒)，于波长532nm处分别测定各组小鼠大脑组织匀浆液的吸光度值。
实验结果显示，与假手术组比较，模型组小鼠脑缺血后脑中MDA含量明显增高，SOD活性明显降低；与模型组比较，灵丹菌质能显著降低小鼠脑缺血后脑中MDA含量，并显著提高脑组织SOD活性(P＜0.05)。试验结果如表10所示。
表10 灵丹菌质对脑缺血小鼠脑组织MDA含量、SOD活性的影响
注：与假手术组比较，**P＜0.01；与模型组比较，△p＜0.05，△△p＜0.01。
实验9 灵丹菌质的安全性性试验
1.给小鼠灌食最大给药浓度和剂量都不致死，不能测出灵丹菌质的半数致死量。
2.用灵丹菌质进行了Ames试验、小鼠骨髓微核试验和染色体畸变试验，证明该物质无致畸和致突作用。
3.用灵丹菌质进行30天喂养实验研究，证明该物质不会对实验动物引起有害效应，无毒副作用。
安全性实验结果证明本发明的灵芝/丹参菌质混合物安全无毒。
上述各项试验结果充分表明，本发明的灵芝/丹参全性菌质固体发酵混合物不仅无明显毒副作用，而且在活血化瘀方面，具有明显优于单一的灵芝、丹参药物原料、也优于其常规方式混合(复方)药物的生物学功能，其药理学功能随丹参在培养基质中的含量增加而增加，且原料来源丰富，提取和制备方法并无特殊要求和限制。
在上述研究实验的基础上，进一步可供参考的具体实施方式还可包括下述各实施例，其中的操作方式和条件可参考上述内容。
实施例1
灵芝/丹参发酵菌质混合物的固体发酵培养基及培养条件：
培养基组成：玉米芯5％，麦麸20％，谷草5％，丹参70％。
固体发酵条件：常温(15～25℃)发酵30天。
实施例2
灵芝/丹参发酵菌质混合物的固体发酵培养基及培养条件：
培养基组成：玉米芯25％，麦麸25％，丹参50％。
固体发酵条件同上例。
实施例3
灵芝/丹参发酵菌质混合物的固体发酵培养基及培养条件：
培养基组成：玉米芯45％，麦麸25％，丹参30％。
固体发酵条件同上例。
实施例4
灵芝/丹参发酵菌质混合物的固体发酵培养基及培养条件：
培养基组成：玉米芯70％，麦麸10％，棉籽壳10％，丹参10％。
固体发酵条件同上例。
实施例5
灵芝/丹参发酵菌质混合物的固体发酵培养基及培养条件：
培养基组成：玉米芯2％，麦麸24％，玉米粉2％，蔗糖1％，
食用级石膏粉1％，丹参70％。
固体发酵条件：常温(15～25℃)发酵45天。
实施例6
灵芝/丹参发酵菌质混合物的固体发酵培养基及培养条件：
培养基组成：玉米芯5％，锯木屑25％，丹参70％。
固体发酵条件：常温(15～25℃)发酵50天。
以下是本发明发酵菌质混合物的应用实例。
实施例7
灵丹菌质口服液：
原料：由上述方式得到的固体发酵终产物灵芝/丹参菌质混合物1kg
制备方法：将所说原料经水提醇沉后得到的提取物浸膏与口服液中的常规辅料(蜂蜜、单糖浆、山梨酸、苯甲酸等)混合均匀后，分装灭菌，制成灵丹菌质口服液。
实施例8
灵丹菌质颗粒
原料：由上述方式得到的固体发酵终产物灵芝/丹参菌质混合物1kg
制备方法：将原料粉碎后或经水提醇沉后得到的提取物浸膏与口服固体颗粒制剂的常规辅料(水溶性赋形剂、乙醇等)通过制粒、干燥、整粒、包装等过程，制成灵丹菌质颗粒。
实施例9
灵丹菌质片剂
原料：由上述方式得到的固体发酵终产物灵芝/丹参菌质混合物100g，
淀粉60g，乳糖30g，硬酯酸镁10g。
制备方法：将灵芝/丹参菌质混合物粉碎或水提醇沉后得到的提取物浸膏、淀粉、乳糖混匀并按常规方法制粒后，加入硬酯酸镁整粒，压片，共制成1000片，得到每片含灵芝/丹参菌质混合物100mg的片剂。
实施例10
灵丹面膜
原料：由上述方式得到的固体发酵终产物灵芝/丹参菌质混合物100g。
制备方法：将灵芝/丹参菌质混合物干燥、粉碎、过120目筛，灭菌、包装制得粉状面膜。使用时用100g～150g水或蜂蜜或蛋清或牛奶调成糊状，然后按面膜的使用方法往脸部均匀涂抹，半小时后用清水洗净。
实施例11
灵丹面膜贴
原料：由上述方式得到的固体发酵终产物灵芝/丹参菌质混合物100g。
制备方法：将灵芝/丹参菌质混合物干燥、粉碎、过60目筛。加入10倍量纯水浸泡半小时，加热至沸后，维持沸腾半小时，精滤药液。煮提三次，合并提取液备用。加热浓缩提取液至浸膏状，边搅拌边加入90％以上浓度乙醇，调节溶液含醇量为75％，停止搅拌，加盖密闭，静置24小时，使沉淀完全，滤取上清液。在上清液中加入总体积3％～5％的活性炭，加热回流脱色30分钟，滤净活性炭。将脱色后的溶液回收乙醇至无醇味即得灵丹提取液。
先将美白剂(如熊果苷或曲酸或L-抗坏血酸磷酸镁)2份和保湿剂(如芦荟提取液或卵磷脂或透明质酸或烷基葡糖苷)混匀，再加入8份灵丹提取液。用无纺布制成的面膜巾在最后混匀的溶液中浸泡30min，然后真空封装，灭菌即得。
Claims (9)
1.含有灵芝的发酵菌质混合物，由灵芝在至少含有真菌生长所需的碳源和氮源的营养性培养基质中经固体发酵后得到的包含菌丝及培养基质成分在内的菌质混合物，其特征是培养基质中含有为培养基质重量10％～70％的药用原料丹参。
2.如权利要求1所述的含有灵芝的发酵菌质混合物，其特征是所说培养基质的重量比例组成为：玉米芯5％～80％，麦麸10％～25％，其余为药用原料丹参。
3.如权利要求1或2所述的含有灵芝的发酵菌质混合物，其特征是所说的药用原料丹参的量为培养基质重量的70％。
4.如权利要求3所述的含有灵芝的发酵菌质混合物，其特征是所说培养基质的重量比例组成为：玉米芯5％，麦麸25％，其余为药用原料丹参。
5.权利要求1至4之一所述含有灵芝的发酵菌质混合物的制备方法，其特征是以至少含有真菌生长所需的碳源和氮源的营养成分与药用原料丹参粉末的均匀混合物为培养基质，在灵芝的适宜栽培条件下生长和固体发酵30～50天后，收集包含菌丝及培养基质成分在内的菌质混合物。
6.如权利要求5的制备方法，其特征是所说的固体发酵时间为35～40天。
7.含有灵芝的发酵菌质混合物在制药中的应用，以权利要求1所说的含有灵芝的发酵菌质混合物或其提取物为有效药用成分，与药学中可以接受的辅助成分共同组成具有活血化瘀、抗氧化功效的药物。
8.含有灵芝的发酵菌质混合物在制备功能性食品中的应用，以权利要求1所说的含有灵芝的发酵菌质混合物或其提取物为添加成分，与食品中可以接受的辅助成分共同组成具有活血化瘀、抗氧化功效的功能性食品。
9.含有灵芝的发酵菌质混合物在制备化妆品中的应用，以权利要求1所说的含有灵芝的发酵菌质混合物或其提取物为主要成分，与化妆品中可以接受的添加剂共同组成具有抗氧化作用的化妆品。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2009100588898A CN101856373B (zh) | 2009-04-10 | 2009-04-10 | 含有灵芝的发酵菌质混合物、制备方法及其应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2009100588898A CN101856373B (zh) | 2009-04-10 | 2009-04-10 | 含有灵芝的发酵菌质混合物、制备方法及其应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN101856373A CN101856373A (zh) | 2010-10-13 |
| CN101856373B true CN101856373B (zh) | 2012-11-21 |
Family
ID=42942676
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN2009100588898A Expired - Fee Related CN101856373B (zh) | 2009-04-10 | 2009-04-10 | 含有灵芝的发酵菌质混合物、制备方法及其应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN101856373B (zh) |
Families Citing this family (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103202460A (zh) * | 2012-01-16 | 2013-07-17 | 张平 | 食用菌生物发酵水飞蓟的方法 |
| CN103461963B (zh) * | 2013-08-05 | 2014-12-10 | 福建农林大学 | 一种黄豆玉米桑黄健康食品及其制备方法 |
| CN103493682A (zh) * | 2013-09-24 | 2014-01-08 | 成都信息工程学院 | 一种利用三七渣发酵生产灵芝三七菌质的方法 |
| CN103493681A (zh) * | 2013-09-24 | 2014-01-08 | 成都信息工程学院 | 一种利用三七渣混菌发酵生产药性菌质的方法 |
| CN103932895A (zh) * | 2013-12-18 | 2014-07-23 | 刘存花 | 面膜的制备方法 |
| CN105147587A (zh) * | 2015-09-30 | 2015-12-16 | 上海全丽生物科技有限公司 | 一种灵芝发酵原浆化妆品及其制备方法与应用 |
| CN106148200B (zh) * | 2016-07-22 | 2019-12-17 | 青海珠峰冬虫夏草工程技术研究有限公司 | 一种富硒低铅、砷的冬虫夏草菌丝体的培养基及其培植方法 |
| CN110218656B (zh) * | 2019-05-31 | 2022-05-17 | 南京工业大学 | 利用空气压力脉动的灵芝-药渣双向固体发酵方法及应用 |
| CN112106981A (zh) * | 2020-09-21 | 2020-12-22 | 绿之韵生物工程集团有限公司 | 一种抗疲劳的灵芝制剂及其制备方法 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1663424A (zh) * | 2005-03-10 | 2005-09-07 | 南京晓庄学院 | 一种饲料添加剂及其制备工艺和在制造预防禽流感的饲料中的应用 |
-
2009
- 2009-04-10 CN CN2009100588898A patent/CN101856373B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1663424A (zh) * | 2005-03-10 | 2005-09-07 | 南京晓庄学院 | 一种饲料添加剂及其制备工艺和在制造预防禽流感的饲料中的应用 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 肖智杰等.灵芝产品的研究与开发现状.《食品科学》.2006,第27卷(第12期),第837-842页. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN101856373A (zh) | 2010-10-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN101856373B (zh) | 含有灵芝的发酵菌质混合物、制备方法及其应用 | |
| CN102242070B (zh) | 一种蝉拟青霉人工培养的方法及其培养产物的应用 | |
| CN103315362B (zh) | 一种茯苓固态发酵功能饮品及制备方法 | |
| CN102613330B (zh) | 发酵红曲茶及提取物、提取物组合物及其制备方法 | |
| CN106072610A (zh) | 营养流失少、易被人体吸收的石斛复合超微粉的制备方法 | |
| CN104187947A (zh) | 一种猴头菇液体发酵饮料及其制备方法 | |
| CN105358168B (zh) | 具有用于缓解经前期综合征及痛经的功能的组合物 | |
| KR101959986B1 (ko) | 갈색거저리 또는 번데기를 이용하여 배양된 동충하초 추출물을 포함하는 조성물 및 그 제조 방법 | |
| CN109938332A (zh) | 一种含麦角硫因的猴头菌保健品制剂及其制备方法 | |
| CN107223983A (zh) | 鸡腿菇固态转化山药的发酵物及其应用 | |
| CN102613331B (zh) | 蜜环菌发酵茶、蜜环菌发酵茶组合物及其制备及方法 | |
| CN102274256B (zh) | 具有活血化瘀和抗氧化功效的菌质混合物、制备方法及应用 | |
| CN103315359B (zh) | 一种灰树花固态发酵功能饮品及制备方法 | |
| CN112680312B (zh) | 一种发酵型橄榄果醋及其生产方法 | |
| CN101524374B (zh) | 黄背木耳发酵物、含该发酵物的口服制剂及制法和应用 | |
| CN102885352A (zh) | 香菇红枣浓浆 | |
| CN101720798A (zh) | 枸杞面条及其生产方法 | |
| CN107535934A (zh) | 一种蓝莓果冻及其制备方法 | |
| CN110731503A (zh) | 一种参杞蛹虫草片及其制备方法 | |
| CN105394515A (zh) | 一种凤尾菇-香蒲固态发酵功能饮品及制备方法 | |
| CN110279053A (zh) | 一种补气补血的果蔬酵素饮料及其制备方法 | |
| CN101810649A (zh) | 一种松针蒸馏浓缩液的制备方法 | |
| CN106497795A (zh) | 一种含有枸杞子的冬虫夏草菌种子培养基及其应用 | |
| KR101962893B1 (ko) | 갈색거저리 또는 번데기를 이용하여 배양된 동충하초 추출물을 포함하는 조성물 및 그 제조 방법 | |
| CN101810664B (zh) | 芫根总皂苷制备减肥降血脂药物的用途 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| ASS | Succession or assignment of patent right |
Owner name: CHENGDU YUZE BIOLOGICAL GENE COSMETIC CO., LTD. Free format text: FORMER OWNER: DEYANG EDIBLE FUNGUS PROFESSOR YARD Effective date: 20140730 |
|
| C41 | Transfer of patent application or patent right or utility model | ||
| COR | Change of bibliographic data |
Free format text: CORRECT: ADDRESS; FROM: 610101 CHENGDU, SICHUAN PROVINCE TO: 610000 CHENGDU, SICHUAN PROVINCE |
|
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20140730 Address after: 610000, B-11, dragon road, Qingyang Industrial Zone, Qingyang District, Chengdu, Sichuan Patentee after: Chengdu Yuze Biological Gene Cosmetic Co.,Ltd. Address before: 610101, Chengdu District, Sichuan City, Longquanyi Province on the north side of large North River Road, No. 561 love home C District 3-2-11 Patentee before: DEYANG EDIBLE FUNGUS EXPERTS YARD |
|
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20121121 |
|
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |