CN101838673A - 一种以米酒糟为原料液态发酵制备灵芝多糖的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种以米酒糟为原料液态发酵制备灵芝多糖的方法。本发明充分利用米酒糟这种低成本的原料,通过灭菌、添加碳源和维生素等营养成份,接入菌种,液态发酵生产灵芝多糖,采用酒精沉淀法提取多糖。本发明的方法可以变废为宝,既防止米酒糟污染环境,又可生产灵芝多糖,大大提高了米酒糟的价值,一举两得。
Description
技术领域
本发明涉及一种以米酒糟为原料液态发酵制备灵芝多糖的方法,属于发酵工程技术领域。
背景技术
我国米酒产量大,每生产1t米酒就可生产大约0.1t的湿酒糟。由于米酒糟所含蛋白质丰富,且价格低廉,目前主要用于生产饲料。但是生产饲料的能耗大,成本高,因此,很多厂家都将米酒糟当作废弃物处理,这既造成了浪费又污染了环境。米酒糟固形物含量为5-6%。米酒糟干基含蛋白质47.7%,脂肪8.7%,纤维25%,同时还含有丰富的矿物质元素,可作为灵芝液态发酵培养基。
灵芝是一种药食两用真菌,为担子菌纲、多孔菌科、灵芝属。我国古代的多部药书,如《神农本草经》,《本草纲目》中都有关于灵芝药效的记叙。主要有治疗肝病、慢性肝炎、肾炎、高血压、高血脂、神经衰弱、失眠健忘、气管炎及支气管炎、肠炎、动脉硬化、白血病、糖尿病和久病引起的体质衰弱等。近代国内外的临床实践证实灵芝多糖具有抗肿瘤、调节免疫、降低血糖等功能。近年来以灵芝多糖研制而成的抗癌抗肿瘤产品,是医学界乐意采用的热门良药之一。人工栽培灵芝一般需要三个月的时间才能收获,而且受气候的影响很大,成本也高。液态发酵法生产灵芝多糖也有较多的报道,其发酵和提取工艺也比较成熟,但是利用米酒糟这种低成本的原料生产灵芝多糖还未见报道。
发明内容
本发明的目的在于提供一种弥补现有技术的不足,以低成本原料米酒糟作为原料液态发酵制备灵芝多糖的方法。
本发明的技术方案如下:
(1)以米酒糟为原料液态发酵制备灵芝多糖的方法,其特征在于采用以下步骤:制备液体菌种:将活化好的灵芝菌种接入已灭菌的液体种子培养基,于28℃中培养5-6d后备用;
(2)液体发酵培养,以添加了碳源及辅助营养成份的米酒糟作为液体发酵培养基,对液体发酵培养菌灭菌后接种,摇床培养,28℃中培养6d;
(3)将步骤(2)得到的发酵后产物进行离心分离得到菌丝体和发酵液,在发酵液中加入95%乙醇,静置,离心沉淀得到灵芝多糖。
灵芝多糖具有抗肿瘤、调节免疫、降低血糖等功能,广泛用于保健食品和药品,本发明充分利用米酒糟这种低成本的原料,通过灭菌、添加碳源和维生素等营养成份,接入菌种,液态发酵生产灵芝多糖,是以米酒糟为原料可以变废为宝,既防止米酒糟污染环境,又可生产灵芝多糖,大大提高了米酒糟的价值,一举两得,符合可持续发展的效益。
具体实施方式
为更好理解本发明,下面结合实施例对本发明做进一步地详细说明,但是本发明要求保护的范围并不局限于实施例表示的范围。
实施例1
(1)种子培养:将100ml种子培养基装入500ml的三角瓶中,121℃灭菌15min,冷却至室温,然后将活化好后在斜面上长好的菌种接入种子培养基中。种子培养基为(单位为g/L):葡萄糖20,酵母粉2,KH2PO4 2,MgSO4 1,起始pH为自然pH;培养条件为:摇床转速为150转每分钟,28℃中培养6d。
用于生产灵芝多糖的微生物为灵芝属的菌种,例如红芝菌、赤芝菌等灵芝菌种。本例中采用由中国微生物保藏管理中心保藏,编号为CGMCC No.5.26号的菌株。
(2)液体发酵培养:将100ml液体发酵培养基装入500ml的三角瓶中,121℃灭菌15min,冷却至室温,然后将所得的种子培养液接入液体发酵培养基中,接种量为10ml,摇床培养,摇床转速为150转/分钟,28℃中培养6d。其中,液体发酵培养基为(单位为g/L):葡萄糖16,米酒糟500,KH2PO4 1,MgSO4 0.5;
(3)将步骤(2)得到的发酵液体进行离心分离得到菌丝体和发酵液,将所得的灵芝发酵液在10000转每分钟的条件下离心分离,在上清液中加入4倍体积的95%乙醇,静置15-20小时,在10000转每分钟的条件下离心分离,将沉淀烘干得到灵芝多糖0.23g。
实施例2
其它条件同实施例1,改变步骤(2)中的液体发酵培养基为(单位为g/L):葡萄糖20,米酒糟500,豆粕粉2,KH2PO4 1,MgSO4 0.5,维生素B1 0.1起始pH为自然pH。最后得到灵芝多糖0.32g。
实施例3
其它条件同实施例1,改变步骤(2)中的液体发酵培养基为(单位为g/L):蔗糖18,米酒糟500,KH2PO4 1,MgSO4 0.5,起始pH为自然pH。最后得到灵芝多糖0.20g。
实施例4
其它条件同实施例1,改变步骤(2)中的液体发酵培养基为(单位为g/L):蔗糖18,米酒糟500,豆粕粉1,KH2PO4 1,MgSO4 0.5,起始pH为自然pH。最后得到灵芝多糖0.28g。
实施例5
其它条件同实施例1,改变液体发酵培养基为(单位为g/L):葡萄糖18,米酒糟500,麸皮2,KH2PO4 1,MgSO4 0.5,起始pH为自然pH。最后得到灵芝多糖0.25g。
Claims (9)
1.一种以米酒糟为原料液态发酵制备灵芝多糖的方法,其特征在于采用以下步骤:
(1)制备液体菌种:将活化好的灵芝菌种接入已灭菌的液体种子培养基,于28℃中培养5~6d后备用;
(2)液体发酵培养:以添加了碳源及辅助营养成份的米酒糟作为液体发酵培养基,对液体发酵培养菌灭菌后接种,摇床培养,28℃中培养5~6d;
(3)将步骤(2)得到的发酵后产物进行离心分离得到菌丝体和发酵液,在发酵液中加入95%乙醇,静置,离心沉淀得到灵芝多糖。
2.根据权利要求1所述的制备灵芝多糖的方法,其特征在于:所述步骤(2)中的液体发酵培养基的碳源为同时添加或单独添加的葡萄糖、蔗糖、豆粕粉或麸皮。
3.根据权利要求1所述的制备灵芝多糖的方法,其特征在于:所述步骤(2)中的液体发酵培养基的辅助营养成份为无机盐或维生素。
4.根据权利要求1所述的制备灵芝多糖的方法,其特征在于:所述步骤(3)中添加的乙醇的量为4倍发酵液体积。
5.根据权利要求1所述的制备灵芝多糖的方法,其特征在于:所述的液体发酵培养基为葡萄糖16g/L,米酒糟500g/L,KH2PO4 1g/L,MgSO4 0.5g/L。
6.根据权利要求1所述的制备灵芝多糖的方法,其特征在于:所述的液体发酵培养基为葡萄糖20g/L,米酒糟500g/L,豆粕粉2g/L,KH2PO4 1g/L,MgSO4 0.5g/L,维生素B1 0.1g/L。
7.根据权利要求1所述的制备灵芝多糖的方法,其特征在于:所述的液体发酵培养基为蔗糖18g/L,米酒糟500g/L,KH2PO4 1g/L,MgSO4 0.5g/L。
8.根据权利要求1所述的制备灵芝多糖的方法,其特征在于:所述的液体发酵培养基为蔗糖18g/L,米酒糟500g/L,豆粕粉1g/L,KH2PO4 1g/L,MgSO4 0.5g/L。
9.根据权利要求1所述的制备灵芝多糖的方法,其特征在于:所述的液体发酵培养基为葡萄糖18g/L,米酒糟500g/L,麸皮2g/L,KH2PO4 1g/L,MgSO4 0.5g/L。
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