CN103923795A

CN103923795A - 一种银杏灵芝虫草酒及其制备方法

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Publication number: CN103923795A
Application number: CN201410176301.XA
Authority: CN
Inventors: 董铸华; 房舒
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2014-04-29
Filing date: 2014-04-29
Publication date: 2014-07-16
Anticipated expiration: 2034-04-29
Also published as: CN103923795B

Abstract

本实验采用双酶法水解银杏，获得银杏水解液，该水解液中含有银杏黄酮、萜类化合物、氨基酸和肽类、淀粉等活性化合物，其中氨基酸和肽类含量≥1%，淀粉含量≥2%。该水解液通过灵芝、虫草菌种转化，加入米饭酒曲发酵获得发酵液，该发酵液经过过滤、勾兑获得银杏灵芝虫草酒。其中酒精度8~16%，总黄酮含量1~5mg/L，银杏内酯1~8mg/L，总萜类化合物含量20~600mg/L，蛋白质70~260mg/L，灵芝酸12~20mg/L，可溶性糖0~3.2%，虫草酸12~25mg/L，虫草素0.2~1.6mg/L，银杏酚酸0~4ppm，氢氰酸0~O.16ug/L。该酒含有银杏、灵芝、虫草活性成分，具有预防高血压、抗氧化和增强免疫力等功效。

Description

一种银杏灵芝虫草酒及其制备方法

技术领域

本发明涉及生物工程技术领域，具体涉及一种银杏灵芝虫草酒及其制备方法。

背景技术

银杏是一种兼有药用、食用性质的植物果实，其富含银杏酣、银杏内脂等多种宝贵营养成份，对于提高人体免疫力、预防和治疗心脑血管疾病具有很好的效果。

我国中医古书，一直将白果列为重要药材，白果酸抑制多种杆菌及皮肤真菌，并对葡萄球菌、链球菌、白喉、炭瘟杆菌，枯草芽抱杆菌、大肠杆菌、伤寒菌等都有不同程度的抑制作用o从鲜白果中提取出来的白果酌酸，有降压作用，并且使血管的渗透性增加。近年来各地临床试验证明，经常食用白果，可治高血压、止白带、咳锹发热;心脑血管、呼吸系统、皮肤病、牙痛等疾病，还有清热扰菌、温肺益气、扩张血管、增加血流量、走痰喘、去皱纹、防衰老、润音喉、健身美容、延年益寿等功效。

国内关于银杏白果发酵酒有部分研究和报道，己经申请发明专利共十多项，这些专利基本上采用浸泡、勾兑或者发酵。

201110185425.0本发明涉及一种银杏金耳果酒的制备方法，是以金耳酵母状孢子与寄主菌毛韧革菌出发菌株，进行金耳酵母状孢子的液体摇瓶种子培养、金耳酵母状孢子的种子罐培养、寄主菌毛韧革菌的摇瓶种子培养、寄主菌毛韧革菌的摇瓶扩大培养、寄主菌毛韧革菌的种子罐培养，金耳酵母状孢子的种子罐种子与寄主菌毛韧革菌的种子罐种子混合发酵培养，以及金耳酵母状孢子与寄主菌毛韧革菌的混合发酵液原加白果淀粉基质和酿酒酵母进行后发酵，得到含有金耳胞外多糖、毛韧革菌萜类、银杏黄酮和白果内酯b的银杏金耳果酒，酒精度大于3%，白果酚酸小于1ppm，氢氰酸小于0.1微克/升。由该方法获得的银杏金耳果酒具有抗辐射保健功能。

CN201110197683.0本发明公开了虫草银杏白果黄酒，生物工程技术领域。其中酒精度酒精度8~16%，总黄酮含量1~5mg/L，银杏内酯1~6mg/L，总萜类化合物含量30~800mg/L，蛋白质60~200mg/L，可溶性糖≤2.0%，虫草酸10~30mg/L，虫草素0.5~2mg/L，银杏酚酸0~5ppm，氢氰酸0~O.1μg/L。采用双酶法水解银杏白果，获得银杏白果水解液，该水解液中含有银杏黄酮、萜类化合物、氨基酸和肽类、淀粉等活性化合物，该水解液通过虫草菌种转化，加入米饭酒曲发酵获得发酵液，该发酵液经过过滤、勾兑获得虫草银杏白果酒。该酒含有银杏和虫草活性成分，具有预防高血压和抗氧化等功效。

201110197681.1本发明公开了灵芝银杏白果酒，涉及生物工程技术领域。其中酒精度8~16%，总黄酮含量1~5mg/L，银杏内醋1~6mg/L，总萜类化合物含量30~800mg/L，蛋白质60~200mg/L，灵芝酸10~17mg/L，可溶性糖0~2.0%，银杏酚酸0~5ppm，氢氰酸0~O.11ug/L。采用双酶法水解银杏白果，获得银杏白果水解液，该水解液中含有银杏黄酮、萜类化合物、氨基酸和肽类、淀粉等活性化合物，其中氨基酸和肽类含量≥1%，淀粉含量≥2%，该水解液通过灵芝菌种转化，加入米饭酒曲发酵获得发酵液，该发酵液经过过滤、勾兑获得灵芝银杏白果酒。该酒含有银杏和灵芝活性成分，具有预防高血压和抗氧化等功效。

201010145712.4本发明公开了金耳银杏白果黄酒，其中酒精度8~45%，总黄酮含量≥1~5mg/L，银杏内酯≥1~6mg/f毡，总萜类化合物含量30~800mg/L,蛋白质≥60mg/Kg，可溶性糖≤2.0%，白果酚酸≤5ppm，氢氰酸≤O.11ug/L。采用双酶法水解银杏白果，获得银杏白果水解液，该水解液中含有银杏黄酮、萜类化合物、氨基酸和肽类、淀粉等活性化合物，其中氨基酸和肽类含量≥1%，淀粉含量≥2%，该水解液添加银杏叶提取物后通过金耳菌种转化，加入米饭酒曲发酵获得发酵液，该发酵液经过过滤、勾兑获得金耳银杏白果黄酒。该酒含有银杏和金耳活性成分，具有预防糖尿病、高血脂、抗氧化和增加肌体免疫力具有特效。

白果中由于含有微量的白果酚、白果酸，易导致人体食欲不振、脱皮、触痛，不等程度的肝损害、肾小球肾炎，白果酸有溶血作用引起惊厥和死亡。由于这些副作用阻碍了白果的大量的食用。因此采用一方面可以强化白果的药用价值，同时具有降低白果毒性的技术开发利用白果资源具有重要社会学意义，同时也会带来巨大的经济价值。

发明内容

本发明的目的在于提供一种银杏灵芝虫草酒及其制备方法，所述银杏灵芝虫草酒的酒精度8~16%，总黄酮含量1~5mg/L，银杏内酯1~8mg/L，总萜类化合物含量20~600mg/L，蛋白质70~260mg/L，灵芝酸12~20mg/L，可溶性糖0~3.2%，虫草酸12~25mg/L，虫草素0.2~1.6mg/L，银杏酚酸0~4ppm，氢氰酸0~O.16ug/L。

所述银杏灵芝虫草酒还可以与以下配料组合：葛根浸提液，蜂蜜、冰糖；所述葛根浸取液由天然产物葛根、半夏、茯苓、川芎、夏枯草、车前子、丹参、槐米、当归、水蛭浸取在食用乙醇里过滤制得。

所述葛根浸提液中，葛根、半夏、茯苓、川芎、夏枯草、车前子、丹参、槐米、当归、水蛭和食用乙醇按质量比1-18:2-10:1-10:1-5:1-5:2-10:2-5:5-10:5-10:1-5:220配取。

所述银杏灵芝虫草酒采用双酶法水解银杏，获得银杏水解液，该水解液中含有银杏黄酮、萜类化合物、氨基酸和肽类、淀粉等活性化合物，该水解液通过灵芝、虫草菌种转化，加入米饭酒曲发酵获得发酵液，该发酵液经过过滤、勾兑获得银杏灵芝虫草酒。

其具体制备方法如下：

（1）精确称取己经脱壳的银杏，打浆，以质量：体积g：ml计，加入银杏的5-10倍的水（即银杏白果g：水ml=1：5-10），煮沸糊化，降温至80℃，以质量：体积g：ml计，加入银杏的0.5倍的液化酶80℃水解10分钟，降温到70℃，以质量：体积g：ml计，加入银杏的0.5倍的糖化酶70℃水解10分钟，降温到50℃，以质量：质量计，加入银杏的0.15倍的木瓜蛋白酶，水解O.5小时，制得银杏水解液;

（2）1000mLPDA培养基含200g马铃薯提取液，加入蔗糖20g、琼脂20g，煮沸待琼脂完全溶化后分装试管，塞上棉塞，121℃灭菌，制成斜面。无菌接种灵芝、虫草菌种，28℃培养7天，4℃冷藏待用。

（3）将银杏水解液分装到250mL三角瓶，每瓶100mL，120℃灭菌10分钟，冷却后接入灵芝试管斜面菌种，在转速100-180转/分钟，温度33-35℃培养5天，制得灵芝液体摇瓶菌种;白果水解液经过120℃灭菌，以10%接种量接入灵芝的液体摇瓶菌种，在温度33-35℃，搅拌转速200-250转/分，通风量1:1.2v/v/m培养3天，制得灵芝银杏一级液体菌种;银杏白果水解液经过120℃灭菌10分钟，以10%接种量接入灵芝的一级液体菌种，在温度33℃，搅拌转速250转/分，通风量1:1.2v/v/m培养3天，制得灵芝银杏发酵液;

（4）将银杏水解液分装到250mL三角瓶，每瓶100mL，120℃灭菌10分钟，冷却后接入虫草试管斜面菌种，在转速100-180转/分钟，温度33-35℃培养5天，制得虫草液体摇瓶菌种;白果水解液经过120℃灭菌，以10%接种量接入虫草的液体摇瓶菌种，在温度33-35℃，搅拌转速200-250转/分，通风量1:1.2v/v/m培养3天，制得虫草银杏一级液体菌种;银杏白果水解液经过120℃灭菌10分钟，以10%接种量接入虫草的一级液体菌种，在温度33℃，搅拌转速250转/分，通风量1:1.2v/v/m培养3天，制得虫草银杏发酵液;

（5）灵芝银杏发酵液、虫草银杏发酵液加入大米饭，以及大米重的5%的黄酒酒曲和2%酵母，40℃发酵10天后，离心取清液加入食用酒精，柠檬酸，蜂蜜勾兑即为银杏灵芝虫草酒。该酒为褐色。

优选地，所述方法具体包括如下步骤：

（1）精确称取己经脱壳的银杏200g，打浆，加入2000mL水，煮沸糊化，降温至80℃，加入100mL液化酶80℃水解10分钟，降温到70℃，加入100mL糖化酶70℃水解10分钟，降温到50℃，加入30g木瓜蛋白酶，水解O.5小时，制得银杏水解液;

（3）将银杏水解液分装到250mL三角瓶，每瓶100mL，120℃灭菌10分钟，冷却后接入灵芝试管斜面菌种，在转速180转/分钟，温度33℃培养5天，制得灵芝液体摇瓶菌种;白果水解液经过120℃灭菌，以10%接种量接入灵芝的液体摇瓶菌种，在温度33℃，搅拌转速250转/分，通风量1:1.2v/v/m培养3天，制得灵芝银杏一级液体菌种;银杏白果水解液经过120℃灭菌10分钟，以10%接种量接入灵芝的一级液体菌种，在温度33℃，搅拌转速250转/分，通风量1:1.2v/v/m培养3天，制得灵芝银杏发酵液;

（4）将银杏水解液分装到250mL三角瓶，每瓶100mL，120℃灭菌10分钟，冷却后接入虫草试管斜面菌种，在转速180转/分钟，温度33℃培养5天，制得虫草液体摇瓶菌种;白果水解液经过120℃灭菌，以10%接种量接入虫草的液体摇瓶菌种，在温度33℃，搅拌转速250转/分，通风量1:1.2v/v/m培养3天，制得虫草银杏一级液体菌种;银杏白果水解液经过120℃灭菌10分钟，以10%接种量接入虫草的一级液体菌种，在温度33℃，搅拌转速250转/分，通风量1:1.2v/v/m培养3天，制得虫草银杏发酵液;

（5）灵芝银杏发酵液、虫草银杏发酵液加入1000g大米和1000mL水煮成的米饭，以及大米重的5%(50g)黄酒酒曲(购自浙江力克生物科技有限公司)和2%(20g)酵母，40℃发酵10天后，离心取清液加入食用酒精100mL，柠檬酸0.05g，蜂蜜20g勾兑即为银杏灵芝虫草酒。该酒为褐色。

本发明所述银杏灵芝虫草酒，色质褐色，含有银杏活性成分、灵芝活性性成分和虫草活性成分；使银杏灵芝虫草与葛根等提取物结合，更好发挥药用保健功效；不但芳香、甘醇，还对预防心脑血管疾病、预防高血压和抗氧化等强身健体功效，具有良好的社会效益。

附图说明图1是银杏灵芝虫草酒的生产工艺流程图

具体实施方式

现通过以下实施例来进一步描述本发明的有益效果，实施例仅用于例证的目的，不限制本发明的范围，同时本领域普通技术人员根据本发明所做的显而易见的改变和修饰也包含在本发明范围之内。

实施例1

（1）精确称取己经脱壳的银杏白果200g，打浆，加入2000mL水，煮沸糊化，降温至80℃，加入100mL液化酶(无锡赛德生物工程有限公司，16万单位/mL)80℃水解10分钟，降温到70℃，加入100mL糖化酶(无锡赛德生物工程有限公司，2万单位/mL)70℃水解10分钟，降温到50℃，加入30g木瓜蛋白酶(广西南宁东恒华道生物科技有限公司，80万单位/g)，水解O.5小时，制得银杏水解液;

（2）1000mLPDA培养基（马铃薯葡萄糖琼脂培养基）含200g马铃薯提取液(去皮马铃薯切成碎片、1000mL蒸馏水煮沸30分钟，八层纱布过滤，滤液定容至1000mL，滤液即为马铃薯提取液)加入蔗糖20g、琼脂20g，煮沸待琼脂完全溶化后分装试管，塞上棉塞，121℃灭菌，制成斜面。无菌接种灵芝、虫草菌种，28℃培养7天，4℃冷藏待用。

实施例2

（1）精确称取己经脱壳的银杏白果200g，打浆，加入1000mL水，煮沸糊化，降温至80℃，加入100mL液化酶(无锡赛德生物工程有限公司，16万单位/mL)80℃水解10分钟，降温到70℃，加入100mL糖化酶(无锡赛德生物工程有限公司，2万单位/mL)70℃水解10分钟，降温到50℃，加入30g木瓜蛋白酶(广西南宁东恒华道生物科技有限公司，80万单位/g)，水解O.5小时，制得银杏水解液;

（3）将银杏水解液分装到250mL三角瓶，每瓶100mL，120℃灭菌10分钟，冷却后接入灵芝试管斜面菌种，在转速120转/分钟，温度33℃培养5天，制得灵芝液体摇瓶菌种;白果水解液经过120℃灭菌，以10%接种量接入灵芝的液体摇瓶菌种，在温度35℃，搅拌转速220转/分，通风量1:1.2v/v/m培养3天，制得灵芝银杏一级液体菌种;银杏白果水解液经过120℃灭菌10分钟，以10%接种量接入灵芝的一级液体菌种，在温度33℃，搅拌转速250转/分，通风量1:1.2v/v/m培养3天，制得灵芝银杏发酵液;

（4）将银杏水解液分装到250mL三角瓶，每瓶100mL，120℃灭菌10分钟，冷却后接入虫草试管斜面菌种，在转速120转/分钟，温度35℃培养5天，制得虫草液体摇瓶菌种;白果水解液经过120℃灭菌，以10%接种量接入虫草的液体摇瓶菌种，在温度35℃，搅拌转速220转/分，通风量1:1.2v/v/m培养3天，制得虫草银杏一级液体菌种;银杏白果水解液经过120℃灭菌10分钟，以10%接种量接入虫草的一级液体菌种，在温度33℃，搅拌转速250转/分，通风量1:1.2v/v/m培养3天，制得虫草银杏发酵液;

实施例3

将实施例1所得银杏灵芝虫草酒10000份与葛根浸取液10000份，蜂蜜40-150份，糖浆20-220份，混合。

验证实施例1

60只ICR小鼠随机分为5组，每组12只。正常对照组25℃饲养;冷激对照组，

冷激银杏灵芝虫草酒组每组每天上午8:00-12:00置于(4士2)℃光照培养箱中，随后取出放回25℃环境中，冷激银杏灵芝虫草酒组分别于每日16:00灌胃实施例1、实施例2酒，剂量为10mL/Kg体重，正常对照组、冷激对照组每天灌胃等量生理盐水作对照;所有组别正常投喂饲料，饮自来水。14d后按5mL/Kg体重腹腔注射质量分数20%氨基甲酸乙醋将小鼠麻醉，颈动脉括管法测量并记录血压。结果(表1)所有供试药物血压和模型对照组相比，均显著降低。

表1:对照组与实验组小鼠血压值比较(1mmHg=O.133KPa，平均值士标准误)

验证实施例2

DPPH自由基清除实验

DPPH用无水乙醇配制成200μmol/L的储备液，冷藏避光保存，现用现配。以市售葛根素作为对照组，对照组和银杏灵芝虫草酒分别以DMSO配制浓度为2.5、5和10mg/mL溶液。取50μL的样品（或乙醇）加入到200μL的已配制的DPPH溶液中，室温反应30min后，520nm测定吸光度值，DMSO代替样品溶液测得空白吸光度值A_空，乙醇代替DPPH溶液，测得本底吸光度A_乙醇，测定三次，DPPH清除活率SC%=[A空-（A样品-A乙醇）]/A空×100%，其抗氧化活性以半数抑制率EC50表示。

结果显示，在本实验条件下，本发明实施例均能有效地清除DPPH自由基，其中，DPPH自由基清除率的EC50如表2所示：

表2：对照组与实验组小鼠抗氧化能力比较

Claims

1.一种银杏灵芝虫草酒，其特征在于，酒精度8~16%，总黄酮含量1~5mg/L，银杏内酯1~8mg/L，总萜类化合物含量20~600mg/L，蛋白质70~260mg/L，灵芝酸12~20mg/L，可溶性糖0~3.2%，虫草酸12~25mg/L，虫草素0.2~1.6mg/L，银杏酚酸0~4ppm，氢氰酸0~O.16ug/L。

2.根据权利要求1所述银杏灵芝虫草酒，其特征在于，它还可以与以下配料组合：葛根浸提液，蜂蜜、冰糖；所述葛根浸取液由天然产物葛根、半夏、茯苓、川芎、夏枯草、车前子、丹参、槐米、当归、水蛭浸取在食用乙醇里过滤制得。

3.根据权利要求2所述银杏灵芝虫草酒，其特征在于，所述葛根浸提液中，葛根、半夏、茯苓、川芎、夏枯草、车前子、丹参、槐米、当归、水蛭和食用乙醇按质量比1-18:2-10:1-10:1-5:1-5:2-10:2-5:5-10:5-10:1-5:220配取。

4.一种银杏灵芝虫草酒的制备方法，其特征在于，它采用双酶法水解银杏，获得银杏水解液，该水解液通过灵芝、虫草菌种转化，加入米饭酒曲发酵获得发酵液，该发酵液经过过滤、勾兑获得银杏灵芝虫草酒。

5.根据权利要求4所述制备方法，其特征在于，它具体包括如下步骤：

（1）精确称取己经脱壳的银杏，打浆，以质量：体积g：ml计，加入银杏的5-10倍的水，煮沸糊化，降温至80℃，以质量：体积g：ml计，加入银杏的0.5倍的液化酶80℃水解10分钟，降温到70℃，以质量：体积g：ml计，加入银杏的0.5倍的糖化酶70℃水解10分钟，降温到50℃，以质量：质量计，加入银杏的0.15倍的木瓜蛋白酶，水解O.5小时，制得银杏水解液;

（2）1000mLPDA培养基含200g马铃薯提取液，加入蔗糖20g、琼脂20g，煮沸待琼脂完全溶化后分装试管，塞上棉塞，121℃灭菌，制成斜面，无菌接种灵芝、虫草菌种，28℃培养7天，4℃冷藏待用;

（5）灵芝银杏发酵液、虫草银杏发酵液加入大米饭，以及大米重的5%的黄酒酒曲和2%酵母，40℃发酵10天后，离心取清液加入食用酒精，柠檬酸，蜂蜜勾兑即为银杏灵芝虫草酒，该酒为褐色。

6.根据权利要求5所述制备方法，其特征在于，它具体包括如下步骤：

（5）灵芝银杏发酵液、虫草银杏发酵液加入1000g大米和1000mL水煮成的米饭，以及大米重的5%(50g)黄酒酒曲(购自浙江力克生物科技有限公司)和2%(20g)酵母，40℃发酵10天后，离心取清液加入食用酒精100mL，柠檬酸0.05g，蜂蜜20g勾兑即为银杏灵芝虫草酒，该酒为褐色。

7.根据权利要求1所述银杏灵芝虫草酒在预防高血压、抗氧化和增强免疫力方面的用途。