CN101836663A - 一种马尾藻食用菌调理剂的制备方法 - Google Patents

一种马尾藻食用菌调理剂的制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种马尾藻食用菌调理剂的制备方法，首先取干燥马尾藻粉，采用超声波破碎法、高压浸提法、热水浸提法、酶解法、酸解法、碱解法中的任一种对马尾藻粉进行粗提取，得马尾藻粗提取液，然后采用纤维素酶解法或超声波降解法处理粗提取液，最后减压浓缩、配伍添加5ppm的维生素B2，5ppm的维生素B12，5ppm的0.1％KH2PO4和5ppm的0.1％MgSO4，得马尾藻食用菌调理剂成品。本发明的马尾藻食用菌调理剂的制备方法，能够以马尾藻属海藻为原材料制备安全无污染、对食用菌具有提质增量效果的食用菌调理剂。

Description

一种马尾藻食用菌调理剂的制备方法
技术领域
本发明涉及一种食用菌调理剂的制备方法，尤其设计一种利用马尾藻属海藻制备食用菌调理剂的方法。
背景技术
食用菌调理剂与肥料不同，肥料是指维持正常生长所不可缺少的营养元素，而调理剂是在食用菌正常生长的基础上调节其生长规律、增强其代谢功能、改善其生理状态、促进其生长发育的一类生理活性物质，可以有效提高菌物品质和增加菌物产量。
马尾藻属(Sargassum C.Ag)属褐藻门，墨角藻目，马尾藻科(Sargassaceae)，马尾藻属海藻藻体中包含海藻多糖、海藻寡糖、氨基酸、微量元素、细胞分裂素、生长素、甜菜碱、赤霉素、脱落酸、乙烯、多胺等，营养价值很高，同时马尾藻属海藻资源极其丰富，易于人工养殖，加工成本低，是一种具有巨大开发价值的海藻种属。近年来，马尾藻在食品科技领域的应用越来越广泛。许多海藻可以食用，其提取物也在被大量的开发和利用，用于食物和饲料，但尚未发展应用到食用菌的栽培和养殖领域。
另一方面，目前食用菌调理剂产品多为化学合成制得，对食用菌的生长及环境的安全卫生都有一定的副作用，并且随着对食品安全的日益注重，这些化学合成调理剂的使用受到了越来越多的限制。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种马尾藻食用菌调理剂的制备方法，能够以马尾藻属海藻为原材料制备安全无污染、对食用菌具有提质增量效果的食用菌调理剂。
为解决上述技术问题，本发明所采取的技术方案是：
一种马尾藻食用菌调理剂的制备方法，其步骤如下：
A、粗提取：取干燥马尾藻粉，采用超声波破碎法、高压浸提法、热水浸提法、酶解法、酸解法、碱解法中的任一种对马尾藻粉进行粗提取，离心取上清，得马尾藻粗提取液；
B、多糖降解：采用纤维素酶解法或超声波降解法处理步骤A所得粗提取液，促进其中的多糖降解为寡糖；
C、减压浓缩步骤B所得提取液至其原体积的2/9-4/9后，添加5ppm的维生素B2，5ppm的维生素B12，5ppm的0.1％KH2PO4和5ppm的0.1％MgSO4，得马尾藻食用菌调理剂成品。
采用步骤1-A所述的超声波破碎法对马尾藻粉进行粗提取的步骤为：在超声波发生仪内先后加入100g干燥马尾藻粉和2000ml水，常温常压，于40KHz频率、100w功率下提取4-6分钟，3000r/min离心取上清，得马尾藻粗提取液。
采用步骤1-A所述的高压浸提法对马尾藻粉进行粗提取的步骤为：取100g干燥马尾藻粉，加3000ml浓度为1％的Na2CO3溶液，于0.15MPa、室温下提取170-190min，3000r/min离心取上清，得马尾藻粗提取液。
采用步骤1-A所述的热水浸提法对马尾藻粉进行粗提取的步骤为：取100g干燥马尾藻粉，加2000ml水，在90-100℃温度下提取110-130min，3000r/min离心取上清，得马尾藻粗提取液。
采用步骤1-A所述的酶解法对马尾藻粉进行粗提取的步骤为：取100g干燥马尾藻粉，加2000ml水，添加纤维素酶并调节其浓度达0.5％，控制pH＝5.5，温度在40-50℃之间，提取110-130min，3000r/min离心取上清，得马尾藻粗提取液。
采用步骤1-A所述的酸解法对马尾藻粉进行粗提取的步骤为：取100g干燥马尾藻粉，加3％柠檬酸溶液2000ml，于90-100℃温度下提取110-130min，3000r/min离心取上清，得马尾藻粗提取液。
采用步骤1-A所述的碱解法对马尾藻粉进行粗提取的步骤为：取100g干燥马尾藻粉，加3％Na2CO3溶液2000ml，于90-100℃温度下提取25-35min，3000r/min离心取上清，得马尾藻粗提取液。
采用步骤1-B纤维素酶解法处理步骤A所得粗提取液的步骤为：在粗提取液中添加纤维素酶并调节其浓度达0.1％，控制pH＝5.5，温度在45-55℃之间，降解220-260min。
采用步骤1-B超声波法处理步骤A所得粗提取液的步骤为：将粗提取液加入超声波发生仪，常温常压，于40KHz频率、100w功率下降解4-6分钟。
采用上述技术方案所产生的有益效果在于：在不污染环境的前提下利用本发明的技术方案可以便捷、高效的以马尾藻属海藻为原料制备食用菌调理剂，且所制备的调理剂含有多种氨基酸、海藻多糖、藻朊酸、高度不饱和脂肪酸和陆生植物稀有的锌、镍、溴、碘等微量元素，还含有天然生长调节物质如细胞分裂素、生长素、甜菜碱、赤霉素、脱落酸、乙烯、多胺等，对食用菌具有优秀的提质增量作用。
侧耳亚光1号、茶树菇、刺芹侧耳、白灵侧耳的出菇实验表明，喷施本发明制备的马尾藻食用菌调理剂，能起到明显的增产作用，并能同时提高子实体多糖含量，从而改善其品质。
附图说明
下面结合附图和具体实施方式对本发明作进一步详细的说明。
图1显示马尾藻食用菌调理剂对侧耳营养生长促进作用实验的结果，左侧为加入马尾藻食用菌调理剂的试管，右侧为对照试管。
具体实施方式
以下实施例详细说明了本发明的技术方案。本发明所使用的马尾藻粉可以直接从北海国发海洋生物产业股份有限公司购买，也可通过如下工艺制备：打捞马尾藻属海藻、晾干、粉碎。
本发明所使用的超声波发生仪的型号为：KT-I1730TD/1730QTD。实施例1、一种马尾藻食用菌调理剂的制备方法，采用超声波破碎法粗提、超声波降解法降解，其步骤如下：
A、粗提取：在超声波发生仪内先后加入100g干燥马尾藻粉和2000ml水，常温常压，于40KHz频率、100w功率下提取5分钟，3000r/min离心取上清，得马尾藻粗提取液；
B、多糖降解：将步骤A制备的粗提取液再加入超声波发生仪，常温常压，于40KHz频率、100w功率下降解5分钟，促进其中的多糖降解为寡糖；
C、减压浓缩步骤B所得提取液至其原体积的1/3后，添加5ppm的维生素B2，5ppm的维生素B12，5ppm的0.1％KH2PO4和5ppm的0.1％MgSO4，得马尾藻食用菌调理剂成品。
本实施例的粗提取液中多糖得率为19.274％，可溶性固形物含量为2.5％。
由本实施例制备的马尾藻食用菌调理剂的使用效果如下。
(1)马尾藻食用菌调理剂对侧耳营养生长的促进作用，将马尾藻食用菌调理剂加入到PDA培养基中，设空白对照，接入等大的侧耳菌块，恒温培养7天后，观测长势，参看附图1，实验组菌丝长速可比对照提高10％左右，并且菌丝生长浓密、整齐、洁白。
(2)不同浓度马尾藻食用菌调理剂对特抗96菌丝生长的影响，由表1可见，处理组与对照相比，2000倍处理能显著促进特抗96菌丝生长(P＜0.01)，长速达7.1mm/d，较对照组快0.6mm/d；500、1000、1500倍处理菌丝长速快于对照，2500、100倍处理略慢于对照，但经分析，500、1000、1500倍处理和2500、100倍处理与对照均无显著差异(P＞0.05)，不影响菌丝生长。
表1不同浓度马尾藻食用菌调理剂对特抗96菌丝生长影响的对重比较
Figure GSA00000071501900051
*P＜0.05
(3)不同浓度马尾藻食用菌调理剂对西德99菌丝生长的影响，由表2可见，处理组与对照相比，500、1000、1500、2000倍处理能极显著促进西德99菌丝生长(P＜0.01)，最快长速达7.0mm/d，较对照快2.7mm/d；2500、100倍处理略慢于对照，但经分析与对照无显著差异(P＞0.05)，不影响菌丝生长。
表2不同浓度马尾藻食用菌调理剂对西德99菌丝生长影响的多重比较
Figure GSA00000071501900061
*P＜0.05 **P＜0.01
(4)马尾藻食用菌调理剂对白灵菇营养生长促进作用，首先将马尾藻食用菌生长调节剂稀释成一系列的浓度，稀释400倍、800倍、1200倍、1600倍，分别记为b、c、d、e添加入PDA斜面培养基，以蒸馏水为对照，标记为a；实验中观察到白灵菇的菌丝体呈浅白色，气生菌丝较少，参看表3-1、表3-2，在含有稀释1200倍、1600倍马尾藻食用菌调理剂的培养基上，白灵菇菌丝的营养生长较对照好，马尾藻食用菌调理剂显著的促进了白灵菇菌丝体的生长长速：在稀释1200倍的培养基上菌丝的生长速度达5.46mm/天，比对照提高了0.36mm/天。表3-1马尾藻食用菌调理剂对白灵菇菌丝生长的影响
表3-2马尾藻食用菌调理剂对白灵菇菌丝生长影响的多重比较
Figure GSA00000071501900071
*P＜0.05，**P＜0.01
(5)马尾藻食用菌调理剂对茶树菇营养生长促进作用，首先将马尾藻食用菌生长调节剂稀释成一系列的浓度，稀释400倍、800倍、1200倍、1600倍，分别记为b、c、d、e添加入PDA斜面培养基，以蒸馏水为对照，标记为a；参看表4-1和4-2，稀释800倍、1200倍、1600倍的马尾藻食用菌调理剂显著的促进了茶树菇菌丝的营养生长；在含有稀释800倍马尾藻食用菌调理剂的培养基上茶树菇菌丝的生长速度达3.69mm/天，比对照的提高了0.66mm/天。
表4-1马尾藻食用菌调理剂对茶树菇菌丝生长的影响
Figure GSA00000071501900072
表4-2马尾藻食用菌调理剂对茶树菇菌丝生长影响的多重比较
Figure GSA00000071501900073
*P＜0.05，**P＜0.01
(6)马尾藻食用菌调理剂对侧耳亚光1号产量的影响，首先发菌好的菌袋经后熟，移入菇房，待显蕾菇盖直径长至2cm时喷施各种肥料，设清水组为对照组A，以含5ppm的VB2，5ppm的VB12，5ppm的0.1％KH2PO4，5ppm的0.1％MgSO4组为实验组B，以稀释800倍的马尾藻食用菌调理剂为实验组C，补水的原则为轻喷勤喷，每次转潮需养菌一周，转潮补水使用清水，二潮菇出菇时喷施规则同头潮菇；试验结果参看表5，生物转化率：C＞B＞A，马尾藻食用菌调理剂能够使亚光1号三潮菇的生物转化率达到94.2％，较清水对照提高9.1％，添加了马尾藻食用菌调理剂的复合制剂比使用无机元素的肥料也显著的提高了产量，表明马尾藻食用菌调理剂中的活性物质使亚光1号更好的利用了培养基质，将其转化成自身生物量。
表5四种处理对侧耳亚光1号的产量的影响
Figure GSA00000071501900081
(7)马尾藻食用菌调理剂对茶树菇上产量的影响，首先发菌好的菌袋经后熟，移入菇房，待显蕾菇盖直径长至2cm时喷施各种肥料，设清水组为对照组A，以含5ppm的VB2，5ppm的VB12，5ppm的0.1％KH2PO4，5ppm的0.1％MgSO4组为实验组B，以稀释800倍的马尾藻食用菌调理剂为实验组C，补水的原则为轻喷勤喷，每次转潮需养菌一周，转潮补水使用清水，二潮菇出菇时喷施规则同头潮菇；试验结果参看表6，生物转化率：C＞B＞A，使用马尾藻食用菌调理剂所喷施后的两潮菇的生物转化率为达52.5％，比清水对照要高出6.6％，显著的提高了产量；与无机元素组比也得到提高，表明马尾藻食用菌调理剂促进了茶树菇的生长，提高了其对培养基质的利用。
表6四种处理对茶树菇的产量的影响
(8)马尾藻食用菌调理剂对刺芹侧耳产量的影响，首先发菌好的菌袋经后熟，移入菇房，待显蕾菇盖直径长2cm时喷施各种肥料，设清水组为对照组A，以含5ppm的VB2，5ppm的VB12，5ppm的0.1％KH2PO4，5ppm的0.1％MgSO4组为实验组B，以稀释800倍的马尾藻食用菌调理剂为实验组C，补水的原则为轻喷勤喷，每次转潮需养菌一周，转潮补水使用清水，二潮菇出菇时喷施规则同头潮菇；试验结果参看表7，生物转化率：C＞B＞A，马尾藻食用菌调理剂处理能显著的提高刺芹侧耳产量，生物转化率达到80.2％，比清水对照的提高9.9％，已达到显著水平；与无机元素组的比较，显著的提高了生物转化率，标明马尾藻食用菌调理剂改善了刺芹侧耳的生理变化，增强其代谢功能，使刺芹侧耳能更好的利用培养基质。
表7四种处理对刺芹侧耳的产量的影响
Figure GSA00000071501900091
(9)马尾藻食用菌调理剂对白灵侧耳产量的影响，首先发菌好的菌袋经后熟，移入菇房，待显蕾菇盖直径长至2cm时喷施各种肥料，设清水组为对照组A，以含5ppm的VB2，5ppm的VB12，5ppm的0.1％KH2PO4，5ppm的0.1％MgSO4组为实验组B，以稀释800倍的马尾藻食用菌调理剂为实验组C，补水的原则为轻喷勤喷，每次转潮需养菌一周，转潮补水使用清水，二潮菇出菇时喷施规则同头潮菇；试验结果参看表8，生物转化率：C＞B＞A，马尾藻食用菌调理剂处理能显著的提高白灵侧耳产量，生物转化率达到59.4％，比清水A的提高6.1％，达到了显著的水平；较无机元素组的生物转化率要高，促进了白灵侧耳的发育和生长。
表8四种处理对白灵侧耳的产量的影响
Figure GSA00000071501900101
实施例2
一种马尾藻食用菌调理剂的制备方法，采用高压浸提法粗提、超声波降解法降解，其步骤如下：
A、粗提取：取100g干燥马尾藻粉，加3000ml浓度为1％的Na2CO3溶液，于0.15MPa、室温下提取170-190min，3000r/min离心取上清，得马尾藻粗提取液；
B、多糖降解：将步骤A制备的粗提取液加入超声波发生仪，常温常压，于40KHz频率、100w功率下降解5分钟，促进其中的多糖降解为寡糖；
C、减压浓缩步骤B所得提取液至其原体积的1/3后，添加5ppm的维生素B2，5ppm的维生素B12，5ppm的0.1％KH2PO4和5ppm的0.1％MgSO4，得马尾藻食用菌调理剂成品。
本实施例的粗提取液中多糖得率为22.868％，可溶性固形物含量为3.7％。
实施例3
一种马尾藻食用菌调理剂的制备方法，采用热水浸提法粗提、超声波降解法降解，其步骤如下：
A、粗提取：取100g干燥马尾藻粉，加2000ml水，在90-100℃温度下提取110-130min，3000r/min离心取上清，得马尾藻粗提取液；
B、多糖降解：将步骤A制备的粗提取液加入超声波发生仪，常温常压，于40KHz频率、100w功率下降解5分钟，促进其中的多糖降解为寡糖；
C、减压浓缩步骤B所得提取液至其原体积的1/3后，添加5ppm的维生素B2，5ppm的维生素B12，5ppm的0.1％KH2PO4和5ppm的0.1％MgSO4，得马尾藻食用菌调理剂成品。
本实施例的粗提取液中多糖得率为9.278％，可溶性固形物含量为2.5％。
实施例4
一种马尾藻食用菌调理剂的制备方法，采用酶解法粗提、超声波降解法降解，其步骤如下：
A、粗提取：取100g干燥马尾藻粉，加2000ml水，添加纤维素酶并调节其浓度达0.5％，控制pH＝5.5，温度在40-50℃之间，提取110-130min，3000r/min离心取上清，得马尾藻粗提取液；
B、多糖降解：将步骤A制备的粗提取液加入超声波发生仪，常温常压，于40KHz频率、100w功率下降解5分钟，促进其中的多糖降解为寡糖；
C、减压浓缩步骤B所得提取液至其原体积的1/3后，添加5ppm的维生素B2，5ppm的维生素B12，5ppm的0.1％KH2PO4和5ppm的0.1％MgSO4，得马尾藻食用菌调理剂成品。
本实施例的粗提取液中多糖得率为9.842％，可溶性固形物含量为1.8％。
实施例5
一种马尾藻食用菌调理剂的制备方法，采用酸解法粗提、纤维素酶解法降解，其步骤如下：
A、粗提取：采用步骤1-A所述的酸解法对马尾藻粉进行粗提取的步骤为：取100g干燥马尾藻粉，加3％柠檬酸溶液2000ml，于90-100℃温度下提取110-130min，3000r/min离心取上清，得马尾藻粗提取液；
B、多糖降解：在步骤A制备的粗提取液中添加纤维素酶并调节其浓度达0.1％，控制pH＝5.5，温度在45-55℃之间，降解220-260min，促进其中的多糖降解为寡糖；
C、减压浓缩步骤B所得提取液至其原体积的1/3后，添加5ppm的维生素B2，5ppm的维生素B12，5ppm的0.1％KH2PO4和5ppm的0.1％MgSO4，得马尾藻食用菌调理剂成品。
本实施例的粗提取液中多糖得率为12.466％，可溶性固形物含量为4.9％。
实施例6
一种马尾藻食用菌调理剂的制备方法，采用碱解法粗提、纤维素酶解法降解，其步骤如下：
A、粗提取：取100g干燥马尾藻粉，加3％Na2CO3溶液2000ml，于90-100℃温度下提取25-35min，3000r/min离心取上清，得马尾藻粗提取液；
B、多糖降解：在步骤A制备的粗提取液中添加纤维素酶并调节其浓度达0.1％，控制pH＝5.5，温度在45-55℃之间，降解220-260min，促进其中的多糖降解为寡糖；
C、减压浓缩步骤B所得提取液至其原体积的1/3后，添加5ppm的维生素B2，5ppm的维生素B12，5ppm的0.1％KH2PO4和5ppm的0.1％MgSO4，得马尾藻食用菌调理剂成品。
本实施例的粗提取液中多糖得率为11.201％，可溶性固形物含量为4.9％。
上述描述仅作为本发明一种马尾藻食用菌调理剂的制备方法可实施的技术方案提出，不作为对其技术方案本身的单一限制条件。

Claims (9)

1.一种马尾藻食用菌调理剂的制备方法，其特征步骤如下：
A、粗提取：取干燥马尾藻粉，采用超声波破碎法、高压浸提法、热水浸提法、酶解法、酸解法、碱解法中的任一种对马尾藻粉进行粗提取，离心取上清，得马尾藻粗提取液；
B、多糖降解：采用纤维素酶解法或超声波降解法处理步骤A所得粗提取液，促进其中的多糖降解为寡糖；
C、减压浓缩步骤B所得提取液至其原体积的2/9-4/9后，添加5ppm的维生素B2，5ppm的维生素B12，5ppm的0.1％KH2PO4和5ppm的0.1％MgSO4，得马尾藻食用菌调理剂成品。
2.根据权利要求1所述的马尾藻食用菌调理剂的制备方法，其特征在于：采用步骤1-A所述的超声波破碎法对马尾藻粉进行粗提取的步骤为：在超声波发生仪内先后加入100g干燥马尾藻粉和2000ml水，常温常压，于40KHz频率、100w功率下提取4-6分钟，3000r/min离心取上清，得马尾藻粗提取液。
3.根据权利要求1所述的马尾藻食用菌调理剂的制备方法，其特征在于：采用步骤1-A所述的高压浸提法对马尾藻粉进行粗提取的步骤为：取100g干燥马尾藻粉，加3000ml浓度为1％的Na2CO3溶液，于0.15MPa、室温下提取170-190min，3000r/min离心取上清，得马尾藻粗提取液。
4.根据权利要求1所述的马尾藻食用菌调理剂的制备方法，其特征在于：采用步骤1-A所述的热水浸提法对马尾藻粉进行粗提取的步骤为：取100g干燥马尾藻粉，加2000ml水，在90-100℃温度下提取110-130min，3000r/min离心取上清，得马尾藻粗提取液。
5.根据权利要求1所述的马尾藻食用菌调理剂的制备方法，其特征在于：采用步骤1-A所述的酶解法对马尾藻粉进行粗提取的步骤为：取100g干燥马尾藻粉，加2000ml水，添加纤维素酶并调节其浓度达0.5％，控制pH＝5.5，温度在40-50℃之间，提取110-130min，3000r/min离心取上清，得马尾藻粗提取液。
6.根据权利要求1所述的马尾藻食用菌调理剂的制备方法，其特征在于：采用步骤1-A所述的酸解法对马尾藻粉进行粗提取的步骤为：取100g干燥马尾藻粉，加3％柠檬酸溶液2000ml，于90-100℃温度下提取110-130min，3000r/min离心取上清，得马尾藻粗提取液。
7.根据权利要求1所述的马尾藻食用菌调理剂的制备方法，其特征在于：采用步骤1-A所述的碱解法对马尾藻粉进行粗提取的步骤为：取100g干燥马尾藻粉，加3％Na2CO3溶液2000ml，于90-100℃温度下提取25-35min，3000r/min离心取上清，得马尾藻粗提取液。
8.根据权利要求1所述的马尾藻食用菌调理剂的制备方法，其特征在于：采用步骤1-B纤维素酶解法处理步骤A所得粗提取液的步骤为：在粗提取液中添加纤维素酶并调节其浓度达0.1％，控制pH＝5.5，温度在45-55℃之间，降解220-260min。
9.根据权利要求1所述的马尾藻食用菌调理剂的制备方法，其特征在于：采用步骤1-B超声波法处理步骤A所得粗提取液的步骤为：将粗提取液加入超声波发生仪，常温常压，于40KHz频率、100w功率下降解4-6分钟。
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