CN101797239A - 马钱子总碱囊泡及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种马钱子总碱囊泡及其制备方法、含有马钱子总碱囊泡的制剂及其制备方法，属于药物制剂领域。该马钱子总碱囊泡由马钱子生物碱、非离子表面活性剂、附加剂制成。该马钱子总碱囊泡优选制备成外用凝胶剂型。马钱子总碱经皮给药外用制剂对该药物具有独特的优势，应用新型囊泡给药系统，增加药物的透皮吸收，增强临床疗效，避免口服和注射给药时的毒副作用。可用于治疗治疗类风湿关节炎、强直性脊柱炎等。

Description

马钱子总碱囊泡及其制备方法

技术领域

本发明涉及马钱子总碱囊泡及其制备方法、含有马钱子总碱囊泡的制剂及其制备方法，属于药物制剂领域。

背景技术

在中医长达几千年的临床实践中，马钱子在治疗类风湿性关节炎方面体现出了显著的疗效。马钱子为马钱科植物马钱(Srtychno6 nux-vomica L)或云南马钱(S Pierriana A.w.Hill)的成熟种子，具通络止痛、散结消肿功效，擅治风湿等疾病。临床应用已有近千年的历史，《外科全生集》谓其“能搜筋骨入骱之风湿，祛皮里膜外凝结之痰毒”。《医学衷中参西录》则对其倍加推崇，称“其开通经络透达关节之功，实过甚于他药如”，《本草纲目》称“苦、寒、无毒”，“伤寒热病，咽喉痹痛，消痞块，并含之或磨水颔咽”，可见其疗效甚著。随着人们对马钱子药理学研究的不断深入，运用马钱子为主治疗各疾病，尤其在治疗类风湿性关节炎方面，取得了较好的疗效。

药理研究中发现，马钱子总碱对类风湿性关节炎有较好的疗效，马钱子总碱中含量高组分之一马钱子碱具有镇痛、抗炎、促进软骨细胞殖、免疫调节作用，马钱子总碱中另一含量高的组分士的宁药理研究显示，其镇痛作用弱于马钱子碱，暂末发现抗炎作用。马钱子碱和士的宁均具有兴奋中枢神经作用，士的宁作用较强。药代学研究表明马钱子总碱中的马钱子碱、士的宁在体内消除较快，半衰期较短。士的宁和马钱子碱是马钱子的主要成分，他们既是有效成分也是有毒成分。

马钱子碱通过中枢和外周两种途径发挥镇痛作用，其镇痛作用可能与其镇静和麻痹感觉神经末梢有关，马钱子碱不仅能明显加吗啡镇痛作用，还能延长其镇痛时间。其中枢镇痛机制可能与增加脑部单胺类神经递质与脑啡肽含量有，而外周镇痛作用可能是通过抑制PGs合成，减少外周炎症组织PGE的释放，降低感觉神经末梢对痛觉敏感性，使疼痛得以缓解。

马钱子主要成分士的宁、马钱子碱等生物碱均穿透血脑屏障，对中枢产生作用。尤其对脑干和脊髓的后角细胞兴奋具有高度的选择性，增强脊髓的动性反射，表现为骨骼肌紧张度增强；其次是兴奋延呼吸中枢及血管运动中枢，并可提高大脑皮层感觉枢的机能。马钱子碱和士的宁对中枢神经系均有镇痛作用，但士的宁作用较弱。

士的宁对整个中枢系统都有兴奋作用能兴奋延髓的呼吸中枢及血管运动中枢，兴奋脊髓的反射功能，并能提高大脑皮质的感觉中枢功能，兴奋迷走神经，兴奋呼吸中枢，使呼吸加深加快，还可兴奋咳嗽中枢。大剂量士的宁在短暂的提高兴奋过程后即发生超限抑制现象，小剂量士的宁能加强皮质的兴奋过程，还能提高听觉、视觉、味觉和触觉等感觉。

马钱子碱有较强的抗炎作用，能抑制外周炎症组织PGE的释放，抑制大鼠血浆5一HT、6一keto-PGFla与血栓烷素(TXB)炎症介质的释放；马钱子碱对正常小鼠免疫功能元明显影响，但对Cyc所致小鼠淋巴细胞增殖及其功能的改变均有恢复作用，且作用与剂量有一定关系，表明马钱子碱对小鼠淋巴细胞功能有剂量和功能依赖性的调节作用。

马钱子碱均能增强正常鼠迟发型超敏反应，且有较明显的量效关系，对环磷酰胺造成的迟发型超敏反应降低有显著恢复作用。马钱子碱对正常鼠脾指数及胸腺指数无明显影响，也不能使迟发型超敏反应中被环磷酰胺降低的脾指数及胸腺指数恢复正常。

马钱子碱对骨关节炎有促进软骨细胞殖作用，可促进骨关节的修复。

复方马钱子片对大鼠佐剂性关节炎早期炎症和后期继发性损害以及小鼠迟发超敏反应均有明显抑制作用，而对小鼠巨噬细胞吞噬功能以及对绵羊红细胞免疫所致血凝素抗体的含量均无明显影响。

马钱子及其制剂的药动学研究表明，马钱子和士的宁在血液中消除较快，半衰期较短。马钱子碱经皮吸收后能够被快速消除，半衰期较短，不利于镇痛作用的发挥。因此可以考虑将它制成透皮靶向制剂，在用药部位持续不断地释放药物，维持稳定的血药浓度，以产生稳定的镇痛疗效。

非离子表面活性剂囊泡(也有人称为非离子性表面活性剂脂质体)英文名为Non-ionic surfactant based vesicles，简称niosomes。它是以各种非离子表面活性剂为载体材料，通过自身闭合形成的双分子层微型或多室囊泡状载体。利用非离子表面活性剂囊泡包裹药物可以减少药物在达到有效部位前被破坏、延长药物的半衰期、从而延长药物的作用时间以及降低毒副作用，改变药物在体内的分布，达到被动靶向作用等，在加入适当特殊辅料后也可以达到主动靶向的作用。与脂质体相比，非离子表面活性剂囊泡的载体材料不含磷脂，避免了磷脂的氧化降解，生产和贮存皆不需特殊条件，可使工艺简化、成本降低，是一种极有希望的新型药物载体。由于非离子表面活性剂毒性较小，具有生物相容性和可降解性，不解离，不发生氧化水解，易大量生产，且可根据用途设计其结构，因此近年来对其研究的人越来越多。囊泡技术已经成为化学、药学和生命科学研究领域中的热点之一。

马钱子总碱作为中药有效部位或成分，临床疗效显著，但口服和注射给药毒副作用很大，不安全，极大地限制了其在临床的应用，经皮给药外用制剂对该药物具有独特的优势，应用新型囊泡给药系统，改善药物的透皮吸收，解决药物在口服和注射给药时的毒副作用，增加临床给药患者的顺从性，将具有广阔的应用前景，会产生良好的社会效益和可观的经济效益。

目前国内还没有关于囊泡在中药经皮吸收方面研究的报道，更没有发现非离子型表面活性剂囊泡的制剂技术应用于马钱子总碱的研究报道。

发明内容

本发明目的是提供马钱子总碱囊泡及其制备方法、还有马钱子总碱囊泡的制剂及其制备方法。

本发明所解决的技术问题，本发明的优点和技术优势为：

马钱子在治疗疾病中应用广泛，多用于治疗类风湿性关节炎、强直性脊柱炎、进行性肌营养不良、重症肌无力、瘫痪、呼吸肌麻痹、多发性神经炎、脊髓非完全断裂损伤所致的肌肉萎缩和感觉丧失等，髓损伤、氟骨症等也有使用。马钱子药理活性成分是生物碱部分，其中士的宁和马钱子碱含量最高，主要作用于中枢神经系统和炎症及免疫系统，对整个中枢神经系统均有兴奋作用。马钱子具有兴奋延髓呼吸中枢及血管运动中枢、提高大脑皮质的感觉中枢机能、兴奋迷走神经的作用。马钱子还能提高小鼠血清中超氧化物歧化酶的活力，降低小鼠血清中睾酮的含量。对于大鼠佐剂性关节炎的早期及继发损害有明显抑制作用，且仅作用于细胞免疫，对正常免疫功能无影响。药理研究证实，马钱子可明显抑制实验动物的肉芽组织增生，对佐剂性关节炎继发的炎症反应有明显的抑制作用，能选择性地抑制细胞免疫，抑制机体对免疫复合物的超敏反应。马钱子碱两种途径发挥镇痛作用，其镇痛作用可能与其镇静和麻痹感觉神经末梢有关，马钱子碱中枢镇痛机制可能与增加脑部单胺类神经递质与脑啡肽含量有关，而外周镇痛作用可能是通过抑制PGs合成，减少外周炎症组织PGE的释放，降低感觉神经末梢对痛觉敏感性，使疼痛得以缓解。

马钱子治疗量首先兴奋脊髓的反射功能，其次兴奋延髓中的呼吸中枢及血管运动中枢，并可提高大脑皮质感觉中枢的机能，中毒量可抑制呼吸中枢。士的宁还有增强阻止胆碱脂酶破坏乙酰胆碱的作用使肠蠕动加强，致腹痛、腹泻。马钱子碱和士的宁极大剂量时均可阻断神经肌肉传导，呈现箭毒样作用。马钱子也可直接损害肾小管上皮细胞，导致急性肾功能衰竭、尿毒症。马钱子对心肌有损伤作用，可阻断心肌K+、Ca2+、Na+通道的作用。

马钱子临床应用近千年不衰，说明它具有显著的疗效，可谓是“毒药猛剂善起沉疴”，但同时由于它是一味“毒药”，治疗量与中毒量接近，严重限制了其临床应用。

靶向制剂是继一代普通制剂、二代缓释制剂和前体制剂、三代控释制剂之后的第四代制剂。脂质体是研究的最多靶向药物载体，但脂质体的性能存在如下缺点：①由于其化学不稳定性，制备及贮藏困难，药物包裹率不高且易发生渗漏而失去靶向性；②所用原料磷脂难以纯化，且易氧化变质而降低膜流动性导致被包裹药物的渗漏；③纯化的磷脂价格昂贵；④生产中常需通惰性气体，制备贮藏难度较大。因此，人们广泛地研究了化学组成确定、性质较稳定、能构成脂质体样囊泡的载体。

随着脂膜模拟化学的发展，人们在研究中发现，表面活性剂在水溶液可自组装成双层封闭结构，和脂质体结构类似的囊泡，壳层内外均是亲水基团，空的中心可容纳水性介质，夹在两层亲水基团中间的是疏水基团。许多表面活性剂都具有自我组装形成囊泡结构的能力，但由于非离子型表面活性剂毒性较小，具有生物相容性和可降解性，不解离，不发生氧化水解，易大量生产，且可根据用途设计其结构，因此对其研究较为深入。

非离子型表面活性剂囊泡(niosomes)也可称为非离子型表面活性剂脂质体(因为磷脂也是一种表面活性剂，且一直将liposomes译为脂质体)，它是非离子表面活性剂自身闭合形成的双分子层微型或多室囊泡载体，与脂质体相比，非离子型表面活性剂囊泡的载体材料不含磷脂，避免了磷脂的氧化降解，生产和贮存皆不需特殊条件，可使工艺简化、成本降低，是一种极有希望的新型药物载体。

囊泡所具有的双层膜结构使其成为潜在的理想的体内药物载体，既可以携带水溶性药物(如氨基酸、多肽、蛋白类药物)，将药物包封在微水相内，也可以携带油溶性药物，将药物增溶在双层膜中，与胶束、微乳液相比，囊泡体系作为药物载体有如下特点：(1)比表面大，更大的增溶量；(2)双层膜具有更强的牢固性和稳定性；(3)可通过组成、pH、盐来调节粒径的大小和药物分子的渗透率。由于组成囊泡的表面活性剂的高度化学稳定性，囊泡比脂质体的稳定性要高很多，且表面活性剂又具有很好的促渗透作用，因此在经皮给药系统中具有特殊的优势。

目前，提高药物透过皮肤角质层的方法包括微粒载体(泡囊、类脂毫微囊等)，化学促进剂(氮酮、挥发油等)，物理促渗技术(离子导入、电穿孔、超声波等)。脂质体经皮给药研究已较多，但传统脂质体透皮效率并不理想，它们倾向于在皮肤角质层表层，与皮肤发生融合而产生蓄积作用，无法穿透进入皮肤深层，而泡囊载体以其毒性小、刺激性小、不对皮肤造成伤害，促进各种性质药物(脂溶性、水溶性、大分子)穿透皮肤角质层、可达到循环系统而备受注目。

囊泡比脂质体更稳定，具有增加药效，减少毒副作用的优点，提供了一种可与脂质体选择使用的新型药物载体。而囊泡较脂质体的优良经皮渗透性能，对于中药尤其是毒性中药透皮靶向新型给药系统的研发，具有重要意义。

马钱子具通络止痛、散结消肿功效，善治顽疾，治风湿、类风湿性关节炎，强直性脊柱炎、进行性肌营养不良、重症肌无力、瘫痪、呼吸肌麻痹、多发性神经炎、脊髓非完全断裂损伤所致的肌肉萎缩和感觉丧失，疗效确切，但其活性成分生物碱中马钱子碱和士的宁治疗量和中毒量接近，严重限制了临床应用。本课题选择囊泡作为马钱子总碱经皮给药的新剂型，可提高局部用药部位如皮肤、关节部位的浓度，透皮吸收后可发挥全身治疗作用。

根据马钱子治疗疾病的特点，由于口服或注射给药，局部药物物浓度不易达到，影响了治疗效果。而选择囊泡经皮给药，由于囊泡较脂质体的强穿透性，易达到皮肤深层，可大大提高局部药物的浓度，充分发挥抗炎、镇痛、免疫活性、改善微循环、增加血流、修复软骨等作用，同时可在皮肤局部形成药物贮库，保持体内稳定的血药浓度，继续发挥全身治疗作用，抗炎、镇痛、抗炎、镇痛、免疫活性、改善微循环、增加血流、抗血栓形成及抑制血小板聚集、降低高切变率及低切变率下的全血黏度，可兴奋中枢神经系统，加快神经冲动在脊髓中的传导，增加肌张力。

马钱子总碱囊泡也减少了对皮肤的刺激。囊泡达到循环系统后，由于囊泡微粒自身的靶向性，在肝、脾部位浓度较高，可避免马钱子生物碱对心、肾等器官的损害，减轻对中枢神经系统的毒性作用，使用药安全性大大提高。

马钱子总碱中士的宁和马钱子碱在血液中消除较快，用囊泡包封后，消除速度减慢，可以较小的剂量达到疗效，同时提高了用药的安全性，对于临床应用具有重大的意义。

本发明是通过如下技术方案完成的：

本发明马钱子生物碱囊泡，包括下列重量份组分：

马钱子生物碱            0.5-30份

非离子表面活性剂        2.5-600份

附加剂                  0.25-600份

进一步优选为：

马钱子生物碱            1-10份

非离子表面活性剂        5-300份

附加剂                0.25-300份

更进一步优选为：

马钱子生物碱          4-8份

非离子表面活性剂      20-200份

附加剂                0.25-200份

所述马钱子生物碱可以为马钱子总生物碱，马钱子总生物碱中所含的任一种生物碱，马钱子总生物碱中任一种生物碱或一种以上的生物碱混和物。

所述非离子表面活性剂包括司盘、吐温、聚氧乙烯脂肪酸酯、聚氧乙烯脂肪醇醚、聚甘油烷基醚、冠醚、葡萄糖烷基醚、聚氧乙烯烷基醚、泊洛沙姆、蔗糖酯、脂肪酸甘油酯、聚氧乙烯聚氧丙烯共聚物中一种或一种以上或其任意比例混合物。

附加剂可为胆固醇、胆固醇聚乙二醇聚合物、硬脂酰胺(SA)、二鲸蜡磷酸酯(DCP)、十八胺、十二烷基硫酸钠(SDS)、聚乙二醇(PEG)、泊洛沙姆188(F68)、羟丙基倍它环糊精、聚乙二醇-聚乳酸、聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺、N十六酰-L-高半胱胺酸一种或一种以上或其任意比例混合物，聚乙二醇(PEG)种类包括4000 6000 2000 400 300一种或一种以上。

非离子表面活性剂中司盘包括司盘20、司盘40、司盘60、司盘65、司盘80、司盘85等。吐温包括吐温20、吐温40、吐温60、吐温80、吐温85等。

蔗糖硬脂酸酯包括蔗糖硬脂酸酯S-3、蔗糖硬脂酸酯S-7、蔗糖硬脂酸酯S-11、蔗糖硬脂酸酯S-15等。聚氧乙烯脂肪酸酯，别名卖泽(Myrij)，如聚氧乙烯40硬脂酸酯(polyoxyl 40stearate)。聚氧乙烯脂肪醇醚，别名苄泽，包括Brij-30，Brij35，西马哥(Cetomacrogol)，平平加O(Perogol O)，埃莫尔弗(Emlphor)。

优选司盘类非离子表面活性剂，尤其是司盘40、司盘60。

本发明马钱子生物碱囊泡可采取乙醇注入法、薄膜分散法、反相蒸发法、水化法、挤出法、机械法、pH梯度法等方法，优选以下制备方法：

取非离子表面活性剂、附加剂、马钱子生物碱溶于适量有机溶剂，加热或超声溶解，溶液备用；另取水或磷酸盐缓冲液，在(15-80℃)恒温搅拌下，匀速注入上述溶液，加完后继续搅拌，至有机溶剂挥尽，加水或磷酸盐缓冲液至全量，超声或过高压乳匀机1-3次，过滤，灌装或冷冻干燥，即得。

本发明马钱子生物碱囊泡制备方法也可以为：取非离子表面活性剂、附加剂、马钱子生物碱溶于适量有机溶剂，减压蒸发至干燥薄膜，真空干燥除去残余溶媒，然后加入磷酸盐缓冲液，(25-90℃)恒温水合，水合时间10-60分钟，水合后超声处理，即得。

本发明马钱子生物碱囊泡制备方法还可以为：将非离子表面活性剂加少量的磷酸盐缓冲液溶解，加入已经熔融的附加剂中，搅拌，加入马钱子生物碱溶液，混匀后倒入25-85℃的磷酸盐缓冲液，水浴放置5-30分钟，即得。

本发明马钱子生物碱囊泡制备方法还可以为：将非离子表面活性剂、附加剂加入适量有机溶剂溶解，溶液加入1/2有机溶剂量以下的磷酸盐缓冲液，超声2-20分钟，25-65℃旋转至胶态，再加入马钱子生物碱溶液，40-80℃旋转至干，加入磷酸盐缓冲液，旋转10-30分钟，放置1-12小时，充分水合，即得。

本发明马钱子生物碱囊泡制备方法中附加剂根据其溶解性的不同，可溶于有机溶剂中，也可溶于水或不同类型的缓冲液中。马钱子生物碱可溶于有机溶剂，也可溶于水中或缓冲液中。

本发明马钱子生物碱囊泡制备方法中磷酸盐缓冲液也可以为硫酸铵缓冲液、三羟甲基氨基缓冲液、柠檬酸缓冲液、酒石酸缓冲液、水；有机溶剂包括无水乙醇，甲醇，丙酮，二氯甲烷、氯仿，乙醚、异戊醇、乙酸乙酯的一种或一种以上任意比例的混和物。

马钱子总碱囊泡可以制备为注射剂，口服液，液体胶囊等口服剂型，外用制剂等制剂，优选外用制剂，进一步优选凝胶、软膏剂、贴剂等，进一步优选为凝胶剂。

马钱子总碱囊泡凝胶由以下重量份组分组成：马钱子生物碱0.5-30、非离子表面活性剂2.5-600、附加剂0-600、增稠剂0.1-120、保湿剂1-1200、pH调节剂0-60、透皮剂0-60、防腐剂0-300。

可优选为：马钱子生物碱1-10、非离子表面活性剂5-300、附加剂0.25-300、增稠剂0.1-100、保湿剂1-1000、pH调节剂0-50、透皮剂0-50、防腐剂0.5-250。

增稠剂可为交联聚丙烯树脂类，包括卡波姆941，974，934P，及交联聚丙烯树脂不同盐及衍生物，还可为羟丙甲基纤维素、黄原胶。

保湿剂可为甘油、丙二醇、异丙醇、透明质酸中的一种或一种以上的混和物。

pH调节剂可为有机胺类如三乙醇胺，三乙胺、二乙胺，也可为氢氧化钠、碳酸氢钠、碳酸钠。

透皮剂可为氮酮、薄荷醇、精油、二甲基亚砜、丙二醇。

防腐剂可为山梨酸钾、山梨酸、羟苯乙酯、羟苯丙酯、羟苯甲酯、苯酚中的一种或一种以上。

马钱子总碱囊泡凝胶的制备方法为：

取增稠剂、保湿剂、透皮剂、防腐剂，加入蒸馏水，pH调节剂，制成凝胶基质，和所制得的马钱子生物碱囊泡混悬液混和，搅拌均匀，即得马钱子总碱囊泡凝胶。

附图说明

图1为其中一个实施例的马钱子总碱囊泡的粒径分布图

图2为其中一个实施例马钱子总碱囊泡的的Zeta图

图3为其中一个实施例马钱子总碱囊泡的电镜照片

具体实施方式

以下通过试验例来进一步阐述本发明所述组合物的有益效果。

试验方法及结果：

1.镇痛实验(扭体法)

1.1.试验材料：昆明种小鼠，雄性，18-22g，清洁级。

实验小鼠随机分为：空白对照组；阳性对照组(云南白药酊)；马钱子总碱囊泡凝胶A、B组。

1.2.方法：实验前24h，用硫化钠给小鼠腹部脱毛，脱毛面积3×3cm²，备用。于每组动物腹部涂抹不同受试药物，空白对照组涂抹等量生理盐水，共给药3次，每次间隔10min，末次给药20min后各组小鼠腹腔注射0.6％醋酸(0.2mL/10g)，观察25min内的扭体数。

1.3.统计方法

采用SPSS11.5统计软件进行统计分析。差异的显著性分析采用多组比较的单因素方差分析检验。

1.4.结果

表1各载体囊泡凝胶对醋酸致小鼠扭体的镇痛效果

A组：马钱子总碱囊泡凝胶

阳性对照组：云南白药酊；#P＜0.05与空白对照组比较。

表1的结果显示：马钱子总碱囊泡凝胶能减少小鼠的扭体次数，有显著的镇痛效果。

2.对大鼠佐剂性关节炎的抗炎试验

2.1.试验材料：SD雄性大鼠160～180g

2.2.方法：试验动物随机分为阳性对照组、模型组、马钱子总碱囊泡凝胶组，于每鼠左后足跖皮内注射FCA 0.1mL致炎。建立大鼠佐剂性关节炎模型。在致炎前和致炎后第13，15，17，19，21，22，23天用足容积测量仪测定大鼠右侧足爪容积，求出肿胀度((ΔmL＝致炎后容积-致炎前容积)，以观察大鼠的继发炎症变化情况。

2.3.统计方法

采用SPSS11.5统计软件进行统计分析。差异的显著性分析采用多组比较的单因素方差分析检验。

2.4.试验结果：

表2载药囊泡凝胶对佐剂性关节炎继发性足爪肿胀的作用

与模型组相比较*p＜0.05，**p＜0.01

A组：马钱子总碱囊泡凝胶

阳性对照组：CATA(50mg.kg^-1)

表2的结果显示：马钱子总碱囊泡凝胶对佐剂性关节炎继发性炎症有显著的抑制作用。

以下通过实施例来进一步阐述本发明所述组合物的制备方法。

实施例1

取马钱子生物碱0.5g，司盘60 2.5g，胆固醇0.25g，溶于无水乙醇，旋转蒸发除去溶剂(60℃)，加入pH为6.8的硫酸铵缓冲液中，20℃搅拌至乙醇挥尽，超声处理30min，室温静置冷却，即得马钱子生物碱的囊泡混悬液液。

取HPMC(K-6000)0.1g，甘油1g，山梨酸钾0.5g，加入纯化水100ml，制得空白凝胶基质，把囊泡混悬液和空白凝胶基质混匀，即得囊泡凝胶。

实施例2

取马钱子生物碱30g，司盘60600g，胆固醇600g，溶于乙醚中，旋转蒸发除去溶剂(60℃)，真空干燥过夜，加入pH为6.5的硫酸铵缓冲液中，水合温度60℃，水合时间30min，用高压均质机处理，即得马钱子生物碱的囊泡混悬液。

取卡波姆941 120g，甘油1200g，三乙醇胺60g，薄荷醇60g，羟苯乙酯300g，加入纯化水30000ml，制得空白凝胶基质，把空白凝胶基质和囊泡混悬液混匀，即得囊泡凝胶。

实施例3

取马钱子生物碱15g，司盘40300g，胆固醇150g，十八胺140g溶于甲醇，旋转蒸发除去溶剂(55℃)，加入纯化水水合，水合温度65℃，水合时间45min，超声处理30分钟，即得马钱子生物碱的囊泡混悬液。

实施例4

取马钱子生物碱1g，蔗糖硬脂酸酯S-15 9g，蔗糖硬脂酸酯S-3 8g，胆固醇12g，溶于乙醇，匀速注入纯化水中，80℃搅拌除去溶剂后，即得囊泡混悬液，也可超声处理5-30分钟。

实施例5

取马钱子生物碱1g，司盘60 30g，司盘40 30g，硬脂酰胺47g，溶于乙醚中，注入pH为6.5的硫酸铵缓冲液中，60℃搅拌至乙醚挥尽，超声或用高压均质机处理，即得马钱子生物碱的囊泡混悬液。

实施例6

取司盘60 40g加少量的pH为6磷酸盐缓冲液溶解，加入已经熔融的39g胆固醇中，搅拌，加入1g马钱子生物碱磷酸盐缓冲盐溶液(pH6)，混匀后倒入55℃的磷酸盐缓冲液(pH6)，水浴放置30分钟，即得囊泡混悬液。

实施例7

取司盘100g、二鲸腊磷酸脂110g加入乙醚溶解，溶液加入1/5乙醚量的15g马钱子生物碱磷酸盐缓冲液(pH6)，超声20分钟，65℃旋转蒸发至胶态，再加入的磷酸盐缓冲溶液(pH6)，60℃水合，放置12小时，即得囊泡混悬液。

实施例8

取马钱子生物碱1g，司盘206g，泊洛沙姆2g，二鲸腊磷酸脂5g，溶于乙醇，均速注入pH为6.5的硫酸铵缓冲液中，60℃搅拌至乙醇挥尽，超声处理30min，室温静置冷却，即得马钱子生物碱的囊泡混悬液。

实施例9

取马钱子生物碱2g，司盘60 10g，蔗糖硬脂酸酯S-7 24g二鲸腊磷酸脂5g，胆固醇3g，十八胺2g溶于甲醇∶氯仿(2∶1)，旋转蒸发除去溶剂(65℃)，真空干燥过夜，加入纯化水，水合温度60℃，水合时间60min，超声处理60分钟，即得马钱子生物碱的囊泡混悬液。

实施例10

取马钱子生物碱2g，苄泽(Brij-35)10g，蔗糖硬脂酸酯S-3 15g，胆固醇聚乙二醇聚合物2g，溶于乙醚，匀速注入纯化水中，60℃搅拌除去溶剂后，即得囊泡混悬液，也可超声处理20分钟。

实施例11

将马钱子生物碱2g，聚氧乙烯(40)脂肪酸酯(Myrij)18g，蔗糖硬脂酸酯S-3 22g，硬脂酰胺3g，溶于乙醚，匀速注入纯化水中，60℃搅拌除去溶剂后，即得囊泡混悬液；

取卡波姆94 150g，甘油480g，羟苯乙酯15g，羟苯丙酯15g，氢氧化钠28g加入纯化水4900ml，制得空白凝胶基质，把空白凝胶基质和囊泡混悬液混匀，即得囊泡凝胶。

实施例12

取马钱子生物碱9g，司盘60 180g，胆固醇180g，溶于乙醇，匀速注入溶于去离子水中，60℃搅拌除去溶剂后，即得囊泡混悬液；

取卡波姆941 100g，甘油1000g，月桂胺50g，二甲亚砜50g，羟苯乙酯200g，羟苯甲酯50g，加入纯化水6000ml，制得空白凝胶基质，把空白凝胶基质和囊泡混悬液混匀，即得囊泡凝胶。

实施例13

取马钱子生物碱1g，司盘40 8g，司盘60 12g，二鲸腊磷酸脂13g，溶于乙醇，匀速注入去离子水中，25℃搅拌除去溶剂后，即得囊泡混悬液；

取HPMC(K-6000)80g，甘油700g，山梨酸钾30g，加入纯化水9000ml，制得空白凝胶基质，把空白凝胶基质和囊泡混悬液混匀，即得囊泡凝胶。

实施例14

取马钱子生物碱2g，蔗糖硬脂酸酯S-7 9g，蔗糖硬脂酸酯S-11 8g，胆固醇10g，溶于乙醇，匀速注入磷酸盐缓冲液(pH6.5)，70℃搅拌除去溶剂后，即得囊泡混悬液；

取卡波姆934P 35g，甘油400g，羟苯甲酯10g，羟苯丙酯10g，碳酸钠21g，加入纯化水7000ml，制得空白凝胶基质，把空白凝胶基质和囊泡混悬液混匀，即得囊泡凝胶。

实施例15

取马钱子生物碱1g，司盘60 5g，胆固醇0.25g，溶于无水乙醇，旋转蒸发除去溶剂(60℃)，加入pH为6.5的硫酸铵缓冲液中，60℃搅拌至乙醇挥尽，超声处理30min，室温静置冷却，即得马钱子生物碱的囊泡混悬液液。

实施例16

取马钱子生物碱4g，蔗糖硬脂酸酯S-7 20g，胆固醇0.25g，溶于乙醇，匀速注入纯化水中，50℃搅拌除去溶剂后，即得囊泡混悬液。

实施例17

取马钱子生物碱8g，司盘40 200g，胆固醇200g，溶于氯仿，匀速注入纯化水中，60℃搅拌除去溶剂后，即得囊泡混悬液。

实施例18

将马钱子生物碱10g，司盘40 300g，胆固醇300g，溶于异戊醇，匀速注入纯化水中，40℃搅拌除去溶剂后，即得囊泡混悬液。

实施例19

取马钱子生物碱6g，蔗糖硬脂酸酯S-11 36g，蔗糖硬脂酸酯S-3 60g，胆固醇94g，溶于乙醇，匀速注入溶有泊洛沙姆10g的纯化水，60℃搅拌除去溶剂后，即得囊泡混悬液；

取卡波姆934P 60g，甘油720g，羟苯乙酯10g，碳酸钠42g，加入纯化水7000ml，制得空白凝胶基质，把空白凝胶基质和囊泡混悬液混匀，即得囊泡凝胶。

实施例20

取马钱子生物碱1g，司盘40 15g，胆固醇15g，溶于乙醇，匀速注入溶有泊洛沙姆1g的纯化水，60℃搅拌除去溶剂后，即得囊泡混悬液；

取卡波姆941 35g，HPMC(K-6000)40g，甘油300g，碳酸钠18g，加入纯化水6320ml，制得空白凝胶基质，把空白凝胶基质和囊泡混悬液混匀，即得囊泡凝胶。

实施例21

取马钱子生物碱1g，司盘60 19g，二鲸腊磷酸脂18g，溶于乙醇，匀速注入纯化水，60℃搅拌除去溶剂后，即得囊泡混悬液；

取卡波姆941 35g，HPMC(K-4000)20g，黄原胶15g，甘油300g，三乙胺18g，加入纯化水6320ml，制得空白凝胶基质，把空白凝胶基质和囊泡混悬液混匀，即得囊泡凝胶。

实施例22

取囊泡混悬液，按常规方法制备成各种口服固体制剂。

实施例23

取囊泡混悬液，按常规方法制备成软膏剂、贴剂、喷雾剂。

Claims (37)

1.马钱子总碱囊泡，其特征是由下述重量配比的原料制成的：

马钱子生物碱            0.5-30份

非离子表面活性剂        2.5-600份

附加剂                  0.25-600份。

2.根据权利要求1的囊泡，其特征是由下述重量配比的原料制成的：

马钱子生物碱            1-10份

非离子表面活性剂        5-300份

附加剂                  0.25-300份。

3.根据权利要求1的囊泡，其特征是由下述重量配比的原料制成的：

马钱子生物碱            4-8份

非离子表面活性剂        20-200份

附加剂                  0.25-200份。

4.根据权利要求1-3中任意一项的囊泡，其特征是，所述的非离子表面活性剂为司盘、吐温、聚氧乙烯脂肪酸酯、聚氧乙烯脂肪醇醚、聚甘油烷基醚、冠醚、葡萄糖烷基醚、聚氧乙烯烷基醚、泊洛沙姆、蔗糖酯、脂肪酸甘油酯、聚氧乙烯聚氧丙烯共聚物中一种或一种以上任意比例混合物。

5.根据权利要求4的囊泡，其特征是，所述的非离子表面活性剂为吐温类非离子表面活性剂。

6.根据权利要求5的囊泡，其特征是，所述的非离子表面活性剂为吐温20，吐温40，吐温60，吐温80，吐温85。

7.根据权利要求4的囊泡，其特征是，所述的非离子表面活性剂为聚氧乙烯脂肪酸酯类非离子表面活性剂。

8.根据权利要求7的囊泡，其特征是，所述的非离子表面活性剂为聚氧乙烯(40)脂肪酸酯。

9.根据权利要求4的囊泡，其特征是，所述的非离子表面活性剂为聚氧乙烯脂肪醇醚类非离子表面活性剂。

10.根据权利要求9的囊泡，其特征是，所述的非离子表面活性剂为Brij-30，Brij35，西马哥(Cetomacrogol)，平平加O(Perogol O)，埃莫尔弗(Emlphor)。

11.根据权利要求4的囊泡，其特征是，所述的非离子表面活性剂为蔗糖酯类非离子表面活性剂。

12.根据权利要求11的囊泡，其特征是，所述的非离子表面活性剂为蔗糖硬脂酸酯S-3、蔗糖硬脂酸酯S-7、蔗糖硬脂酸酯S-11、蔗糖硬脂酸酯S-15。

13.根据权利要求4的囊泡，其特征是，所述的非离子表面活性剂为司盘类非离子表面活性剂。

14.根据权利要求13的囊泡，其特征是，所述的非离子表面活性剂为司盘20、司盘40、司盘60、司盘65、司盘80、司盘85。

15.根据权利要求14的囊泡，其特征是，所述的非离子表面活性剂为司盘40、司盘60。

16.根据权利要求1-3中任意一项的囊泡，其特征是，所述的附加剂为胆固醇、胆固醇聚乙二醇聚合物、硬脂酰胺(SA)、二鲸蜡磷酸酯(DCP)、十八胺、十二烷基硫酸钠(SDS)、聚乙二醇(PEG)、泊洛沙姆188(F68)、羟丙基倍它环糊精、聚乙二醇-聚乳酸、聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺、N-十六酰-L-高半胱胺酸一种或一种以上任意比例混合物。

17.根据权利要求16的囊泡，其特征是，所述的附加剂为胆固醇。

18.权利要求1的囊泡的制备方法，其特征在于，取非离子表面活性剂、附加剂、马钱子生物碱溶于适量有机溶剂，加热或超声溶解，溶液备用；在15-80℃恒温搅拌下，取上述溶液匀速注入磷酸盐缓冲液，加完后继续搅拌，至有机溶剂挥尽，加磷酸盐缓冲液至全量，超声或过高压乳匀机1-3次，过滤，灌装或冷冻干燥，即得。

19.权利要求1的囊泡的制备方法，其特征在于，取非离子表面活性剂、附加剂、马钱子生物碱溶于适量有机溶剂，减压蒸发至干燥薄膜，真空干燥去残余溶媒，然后加入磷酸盐缓冲液，25-90℃恒温水合，水合时间10-60分钟，水合后超声处理，即得。

20.权利要求1的囊泡的制备方法，其特征在于，将非离子表面活性剂加少量的磷酸盐缓冲液溶解，加入已经熔融的附加剂中，搅拌，加入马钱子生物碱溶液，混匀后倒入25-85℃的磷酸盐缓冲液，水浴放置5-30分钟，即得。

21.权利要求1的囊泡的制备方法，其特征在于，将非离子表面活性剂、附加剂加入适量有机溶剂溶解，溶液加入1/2有机溶剂量以下的磷酸盐缓冲液，超声2-20分钟，25-65℃旋转至胶态，再加入马钱子生物碱溶液，40-80℃旋转至干，加入磷酸盐缓冲液，旋转10-30分钟，放置1-12小时，充分水合，即得。

22.根据权利要求18、19、20、21的囊泡的制备方法，其特征在于，附加剂根据其溶解性的不同，可溶于有机溶剂中，也可溶于水、磷酸盐缓冲液、硫酸铵缓冲液、三羟甲基氨基缓冲液、柠檬酸缓冲液、酒石酸缓冲液中的一种。马钱子生物碱可溶于有机溶剂，也可溶于水、磷酸盐缓冲液、硫酸铵缓冲液、三羟甲基氨基缓冲液、柠檬酸缓冲液、酒石酸缓冲液中的一种。

23.根据权利要求18、19、20、21的囊泡的制备方法，其特征在于，有机溶剂包括无水乙醇，甲醇，丙酮，二氯甲烷、氯仿，乙醚、异戊醇、乙酸乙酯的一种或一种以上任意比例的混和物；磷酸盐缓冲液也可以为硫酸铵缓冲液、三羟甲基氨基缓冲液、柠檬酸缓冲液、酒石酸缓冲液、水。

24.含有权利要求1的马钱子总碱囊泡的制剂，其特征在于，为口服剂型或外用制剂。

25.根据权利要求24的马钱子总碱囊泡的制剂，其特征在于，为外用制剂。

26.根据权利要求25的马钱子总碱囊泡的制剂，其特征在于，所述外用制剂为凝胶剂、软膏剂、贴剂、喷雾剂。

27.根据权利要求26的马钱子总碱囊泡的制剂，其特征在于，为凝胶剂。

28.根据权利要求27的马钱子总碱囊泡的制剂，其特征在于，所述凝胶剂是由下述重量份的组分组成：

马钱子生物碱0.5-30、非离子表面活性剂2.5-600、附加剂0-600、增稠剂0.1-120、保湿剂1-1200、pH调节剂0-60、透皮剂0-60、防腐剂0-300。

29.根据权利要求28的马钱子总碱囊泡的制剂，其特征在于，所述凝胶剂是由下述重量份的组分组成：

马钱子生物碱1-10、非离子表面活性剂5-300、附加剂0.25-300、增稠剂0.1-100、保湿剂1-1000、pH调节剂0-50、透皮剂0-50、防腐剂0.5-250。

30.权利要求27、28的马钱子总碱囊泡的制剂，其特征在于，所述增稠剂为交联聚丙烯树脂类、交联聚丙烯树脂不同种类盐及衍生物、或羟丙甲基纤维素、黄原胶一种或一种以上混和物。

31.根据权利要求30的马钱子总碱囊泡的制剂，其特征在于，所述交联聚丙烯树脂类增稠剂，包括卡波姆941，974，934P。

32.根据权利要求27或28的马钱子总碱囊泡的制剂，其特征在于，所述保湿剂为甘油、丙二醇、异丙醇、透明质酸中的一种或一种以上混和物。

33.根据权利要求28或29的马钱子总碱囊泡的制剂，其特征在于，所述pH调节剂为有机胺类，或氢氧化钠、碳酸氢钠、碳酸钠。

34.根据权利要求33的马钱子总碱囊泡的制剂，其特征在于，所述有机胺类为三乙醇胺，三乙胺、二乙胺、月桂胺。

35.根据权利要求28或29的马钱子总碱囊泡的制剂，其特征在于，所述透皮剂为氮酮、薄荷醇、精油、二甲基亚砜、丙二醇。

36.根据权利要求28或29的马钱子总碱囊泡的制剂，其特征在于，所述防腐剂可为山梨酸钾、山梨酸、羟苯乙酯、羟苯丙酯、羟苯甲酯、苯酚中的一种或一种以上混和物。

37.权利要求28或29马钱子总碱囊泡的制剂，其特征在于，所述马钱子总碱囊泡凝胶的制备方法为：

取增稠剂、保湿剂、透皮剂、防腐剂，加入水，pH调节剂，制成凝胶基质，和所制得的马钱子生物碱囊泡混悬液混和，搅拌均匀，即得马钱子总碱囊泡凝胶。

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