CN101780120A - 茯神与灵芝配伍提取物的药效活性及在医药中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开两种传统菌物中药,即茯神和灵芝,两者相配伍后的镇静和镇痛的药效活性,并适于药物新产品的开发。本发明还公开了水提取物中的多糖和水溶性三萜类成分的镇静抗焦虑和镇痛药效活性。将干燥的茯神和灵芝粉碎,按1∶1混匀,加入三倍量的纯净水,微沸状态下提取1小时,提三次;合并提取液,提取液过滤,常压浓缩至干后得到配伍后的提取物。本发明具有明显的镇静抗焦虑作用,适应开发改善睡眠状态的新的药物及功能性和保健食品。
Description
技术领域:
本发明公开两种传统菌物中药,即为茯神和灵芝,两者相配伍后的药效活性,并适于药物新产品的开发。本发明还公开了以水提取物为基础的镇静抗焦虑和镇痛药效活性。将干燥的茯神和灵芝粉碎,按1∶1混匀,加入三倍量的纯净水,微沸状态下提取1小时,提三次;合并提取液,提取液过滤,常压浓缩至干后得到配伍后的提取物。属于中药配伍药效活性在医药及保健食品领域中的应用。
背景技术:
茯神来源于真菌茯苓菌核抱付松根的部分,茯神与茯苓的功效基本相同,具有利水渗湿、健脾补中、宁心安神之功效,但茯神长于宁心安神,多用于心神不宁,惊悸睡眠之症。
灵芝Ganoderma Lucidum(Curtis:Fr.)Karst.是一种传统珍贵药食两用真菌,属于担子菌门(Basidiomycota),灵芝科(Ganodermataceae),灵芝属(ganodermaP.Karst);现代药理研究表明:灵芝可改善病人的睡眠状况,用于治疗神经衰弱、失眠等有较好的疗效,并对中枢神经系统有明显的镇静作用,能使动物的自发性活动减少,肌肉轻度松驰,协同戊巴比妥的镇静作用;但是将两者配伍来增强药效作用的报道还没有报道。
发明内容
本发明公开了一种配伍,即为茯神和灵芝配伍,具有镇静抗焦虑和镇痛作用。
本发明还进一步考察了配伍的总的多糖和三萜成分的镇痛抗焦虑和镇痛作用。
本发明提供了灵芝和茯神配伍的水提取物制备工艺及其多糖和三萜成分的制备。
本发明进一步提供了茯神和灵芝配伍的水提取物在治疗失眠焦虑等症中的药物用途。
本发明配伍水提取物及其多糖和三萜成分的制备,可由下述方法制备获得:
配伍的水提取物的制备:将灵芝和茯神粉碎,按照1∶1组合,加入8倍量的纯净水,再100±0.5℃下提取50分钟,提取三次,合并提取液,减压浓缩,于水浴锅上60℃继续浓缩,得到水提取物
多糖的制备:将上述的提取物,用等量的纯净水溶解得到配伍的原液,加入三倍量的无水乙醇,醇沉12小时,倾去上清液,醇沉三次,将沉淀浓缩,用甲醇和丙酮反洗涤,干燥得到多糖。
水溶性三萜的制备:将上述倾出上清醇,合并,浓缩得到该配伍的水溶性三萜成分,减压浓缩得到三萜成分。
经过药理筛选,上述水提取物及其多糖和三萜成分,都有不不同程度的镇静抗焦虑和镇痛作用。
按药剂学方法,可以将本发明的水提取物或其中多糖或者三萜成分制成多种临床药物剂型作为治疗失眠障碍症和焦虑症的药物,所说的药剂是任何一种药剂学上所说的剂型
本发明的药物组合物含有疗效有效量的上述配伍的水提取物、多糖或三萜成分为活性成分,以及含有一种或多种药学上可以接受的载体。
上文的载体是指药学领域常规的药物载体,包括稀释剂、赋形剂、填充剂、黏合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体。
本发明可以组合物的形式通过口服、静脉、肌肉注射或胃肠外给药方式施用于这种治疗的患者。按照药学领域的常规生产方法制备各种剂型如片剂、颗粒剂、冲剂、胶囊、栓剂、喷雾剂、缓释剂和注射剂。也可使其活性成分与一种或多种载体或药物组合,自成所需剂型。
下述的药理实验证实了灵芝和茯神配伍的水提取物及其多糖和三萜成分具有的药理活性。
灵芝与茯神配伍的水提物、水性三萜和多糖的镇静抗焦虑作用
1延长苯巴比妥钠睡眠时间实验
实验材料:灵芝与茯神配伍水提取物、水溶性三萜成分、多糖均为褐色的膏状,由本实验室制备。
苯巴比妥钠购于吉林省医院
动物:昆明种雄性小鼠,体重18-22g,购自吉林大学动物实验中心。
试验方法与结果
取80只雄性小鼠,随机分为:阴性组、安定组、给药组;饲养于正规的动物实验室,自然光照射,室温为25℃,正常饲养适应环境两天,第三天给药组开始按体重给药,水提取物(1.0,0.44g/Kg)水溶性三萜成分(0.49,0.2g/kg),粗多糖(0.5,0.2g/kg)连续给药7天,并观察小鼠的活动情况。
第八天给药,给小鼠禁食不禁水8小时,受试药组和安定组灌胃给药50分钟后,腹腔注射苯巴比妥钠阈下计量50mg/Kg(该计量,预实验测定60分钟内小时内反正翻反射不消失,无法进入睡眠)后,观察小鼠的催眠情况,从小鼠出现反正翻反射到消失的时间为睡眠潜伏期;小鼠的反正翻反射消失1分钟认为睡眠开始,到该反射恢复即为睡眠时间。分别记录注射苯巴比妥钠后30分钟入睡动物数、小鼠睡眠潜伏期和睡眠时间;并将药组与阴性组进行对照统计分析,30分钟入睡动物数用卡平方检验,潜伏期和睡眠时间用t-检验,结果见表1。结果表明,该配伍的水提取物,三萜及多糖的小剂量均明显的增加了30分钟内的入睡动物数,并缩短了苯巴比妥钠催眠潜伏期,同时增加了苯巴比妥钠的诱导的睡眠时间。
表1协同苯巴比妥钠催眠实验结果(mean±S.D)
注:与对照组比较*P<0.05,**P<0.01,分别表示显著差异和极显著差异。下同
结论:灵芝与茯神配伍的水提取物,可以明显的增强苯巴比妥钠催眠趋势,并且其中的三萜成分和多糖成分也表现了不同程度的活性,其中三萜成分是两个计量均表现极显著差异,而多糖只有小剂量表现很好的差异效果。究其原因,多糖量效关系可能为双向的调节作用。
2小鼠自主活动实验
实验材料:灵芝与茯神配伍水提取物、水溶性三萜成分、多糖均为褐色的膏状,由本实验室制备。安定,购自吉林农业大学附属医院。
动物:昆明种雄性小鼠,体重18-22g,购自吉林大学动物实验中心。
试验方法与结果
取80只雄性小鼠,随机分为:阴性组、阳性组、给药组;饲养于正规的动物实验室,自然光照射,室温为25℃,正常饲养适应环境两天,第三天给药组开始按体重给药,水提取物(1.0,0.44g/kg)水溶性三萜成分(0.49,0.2g/kg)多糖(0.5,0.2g/kg);连续给药7天,并观察小鼠的活动情况。
在第七天给药后,晚上给小鼠禁食不禁水8小时,第八天按体重给受试药组和阳性组灌胃给药,60分钟后,分别从40×40×27cm3的箱子中一侧放入,箱子内侧漆成白色,底部铺一层河沙,并用4cm×4cm的网格划分数个小格,每只小鼠从箱子的一端放入,测定两分钟小鼠的走动时间,起立次数和穿越的格数,并进行统计分析。结果见表2.实验结果表明,灵芝与茯神配伍的水提取物,三萜成分,多糖各剂量都明显的影响了小鼠的自主活动,与空白组比较,能显著的减少了两分钟内的小鼠的走动时间,并明显的减少了小鼠的穿越的格数,但是对小鼠的起立次数的影响,并不像安定那样显著。
表2小鼠自主活动实验结果(mean±S.D)
结论:灵芝与茯神配伍的水提取物,旷场分析中,明显的影响的小鼠的自主活动,并且从中得到的水溶性三萜成分和粗多糖也分别影响了小鼠的在旷场分析中,明显的影响了小鼠的自主活动。
1.3小鼠孔板法实验
实验材料:灵芝与茯神配伍水提取物、水溶性三萜成分、多糖均为褐色的膏状,由本实验室制备。安定,购自吉林农业大学附属医院。
动物:昆明种雄性小鼠,体重18-22g,购自吉林大学动物实验中心。
试验方法与结果
取80只雄性小鼠,随机分为:阴性组、安定组、给药组;饲养于正规的动物实验室,自然光照射,室温为25℃,正常饲养适应环境两天,第三天给药组开始按体重给药,水提取物水溶性(1.0,0.44g/kg)三萜成分(0.49,0.2g/kg)多糖(0.5,0.2g/kg);连续给药7天,并观察小鼠的活动情况。
在第七天给药后,晚上给小鼠禁食不禁水8小时,第八天按体重给受试药组和阳性组灌胃给药,60分钟后,分别从40×40×27cm3的箱子中一侧放入,箱子内侧漆成白色,底部设四个小黑洞(直径为3cm,深为1.8cm),每只小鼠从箱子的一端放入,从小鼠放入木箱开始记时到小鼠发现第一个小黑洞,即为小鼠的探头潜伏期;测定五分钟小鼠的测定小鼠探头潜伏期,和探头次数。并采用t-检验进行统计分析。从表3可以看出,灵芝与茯神配伍,的水提物可以明显的影响的延长小鼠的探头潜伏期,减少了啊探头的次数;并从中提取得到的水溶性三萜和粗多糖同样的延长了小鼠的探头潜伏期,减少了探头的次数,并不存在量效依赖性。
表3小鼠孔板法实验结果(mean±S.D.)
注:与对照组比较*P<0.05,**P<0.01,分别表示显著差异和极显著差异。
1.4小鼠肌肉松弛实验
实验材料:灵芝与茯神配伍水提取物、水溶性三萜成分、多糖均为褐色的膏状,由本实验室制备。安定,购自吉林农业大学附属医院。
动物:昆明种雄性小鼠,体重18-22g,购自吉林大学动物实验中心。
试验方法与结果
正式实验前,对小鼠进行正式实验用鼠的筛选,将小鼠四肢抓紧距地面50cm的铜线开始记时,倒落为止,即为悬挂时间;把悬挂时间大于15分钟或小于5分钟小鼠剔除。取40只合格的雄性小鼠,随机分为:阴性组、阳性组、给药组;饲养于正规的动物实验室,自然光照射,室温为25℃,正常饲养适应环境两天,第三天给药组开始按体重给药,水提取物(1.0,0.44g/kg)水溶性三萜成分(0.49,0.2g/kg)多糖(0.5,0.2g/kg);连续给药7天,并观察小鼠的活动情况,末次给药,给小鼠禁食不禁水8小时,受试药组和阳性组灌胃给药60分钟后,分别将小鼠放到涂有凡士林的距地面50cm的铜线上,以小鼠四肢抓紧铜线开始记时,到倒落为止,记下小鼠的悬挂时间。采用t-检验进行统计分析。从表4可看出,灵芝与茯神配伍的水提取物,只有小剂量的明显的缩短的小鼠的在金属丝上的悬挂时间;并从中提取得到的水溶性三萜和粗多糖同样减少了小鼠的悬挂时间。
表4小鼠悬挂实验结果(mean±S.D)
注:与对照组比较*P<0.05,**P<0.01,分别表示显著差异和极显著差异。
结论:灵芝与茯神配伍的水提物,在小鼠肌肉松弛能力上,不存在量效的依赖性;从上述的实验结果可以得出,灵芝与茯神的配伍可以在适当的剂量下有肌肉松弛作用。
1.5小鼠负重游泳实验
实验材料:灵芝与茯神配伍水提取物、水溶性三萜成分、多糖均为褐色的膏状,由本实验室制备。
动物:昆明种雄性小鼠,体重18-22g,购自吉林大学动物实验中心。
试验方法与结果
取24只雄性小鼠,饲养于动物实验室,随机分为:阴性组、阳性组、给药组;正常饲养适应环境两天,第三天给药组开始按体重给药,水提取物(1.0,0.44g/kg)水溶性三萜成分(0.49,0.2g/kg)多糖(0.5,0.2g/kg);连续给药7天。末次给药,给小鼠禁食不禁水8小时,受试药组和阳性组灌胃给药60分钟后,分别负重2g,然后放入45×45×55cm3的水箱中,水深为30cm,水温为20℃;从小鼠放入水箱开始计时,到小鼠四肢不动第一次下沉为止,即为小鼠的游泳时间,并与对照组进行统计分析。从表5中可以看出,灵芝与茯神的配伍的水总提取物的大剂量可以延长小鼠在水中的存活时间,即为延长了小鼠的游泳时间,并且从中得到的水溶性三萜成分和粗多糖没有延长小鼠的游泳时间。
表5小鼠游泳实验结果(mean±S.D.)
注:与对照组比较*P<0.05,**P<0.01,分别表示显著差异和极显著差异。
结论:灵芝与茯神配伍,小鼠在游泳实验中,水提取物的小剂量和其中的某些组分不具备提高小鼠的抗应激能力。结合以上述的实验结论,可以看出灵芝与茯神的配伍,在某些活性方面,存在计量上的双向的调节能力。
2灵芝与茯神配伍的水总提物、水性三萜和多糖的镇痛作用
2.1热办法
实验材料:灵芝与茯神配伍水提取物、水溶性三萜成分、多糖均为褐色的膏状,由本实验室制备。
去痛片:购于吉林农业大学附属医院
动物:昆明种雄性小鼠,体重18-22g,购自吉林大学动物实验中心。
试验方法与结果
取体重为18g±0.2g雌雄小鼠,将YLS-6B智能热板仪调到55±1℃,预热10分钟,取雌性KM小鼠数只,将小鼠放置热板仪中,记录下小鼠自投入热板到舔后足(或跳跃反应)的时间,即为该鼠的痛阈值;正式实验前进行小鼠筛选,将反应潜伏期小于5s或大于30s的小鼠剔除。
取64只合格的雌性性小鼠,饲养于动物实验室,随机分为:阴性组、阳性组、给药组;正常饲养适应环境两天,第三天给药组开始按体重给药,水提取物(1.0,0.44g/kg),水溶性三萜成分(0.49,0.2g/kg),多糖成分(0.5,0.2g/kg);连续给药7天。
第七天晚上给药组禁食不禁水8小时,第八天给药组给药30分钟、60分钟后分别测定每只小鼠的痛阈值。并对其进行t-检验,进行统计分析。
从表6可以得到,灵芝与茯神配伍的水总提物和从中得到的水溶性三萜的大剂量可以在给药后60分钟可以提高小鼠的痛阈分别为:49%,37%和31%。
表6热办法实验结果(mean±S.D.)
注:与对照组比较*P<0.05,**P<0.01,分别表示显著差异和极显著差异。
结论:从上述的实验结果可以得出,灵芝和茯神的配伍水提取物大剂量和小计量不同程度的提高了小鼠的疼痛潜伏期,并存在计量的依赖性;水溶性三萜成分的大剂量组可以影响小鼠的疼痛潜伏期;而粗多糖没有相应的活性。
2.2扭体法
实验材料:灵芝与茯神配伍水提取物、水溶性三萜成分、多糖均为褐色的膏状,由本实验室制备。去痛片,购自吉林农业大学附属医院。
动物:昆明种雌性小鼠,体重18-22g,购自吉林大学动物实验中心。
试验方法与结果
取64只雌性小鼠,随机分为:阴性组、阳性组、给药组;饲养于正规的动物实验室,自然光照射,室温为25℃,正常饲养适应环境两天,第三天给药组开始按体重给药,水提取物(1.0,0.44g/kg),水溶性三萜成分(0.49,0.2g/kg),多糖(0.5,0.2g/kg);连续给药7天,并观察小鼠的活动情况。
末次给药禁食不禁水8小时,给药50分钟后,每只鼠腹腔注射0.2mL,0.5%冰醋酸溶液,然后测定15分钟内出现扭体反应的动物数和扭体次数。采用t-检验进行统计分析,结果见表7.
结果表明,灵芝与茯神配伍,水总提取物,三萜成分和多糖可以明显的阻抗冰醋酸诱导的局部疼痛,并且,水溶性三萜成分的两个计量也存在差别,小剂量的较大剂量的明显的减少了出现扭体反应的动物数,扭体的次数也较显著。而粗多糖表现出了量效上的依赖性。
表7冰醋酸诱导的扭体实验结果(mean±S.D.)
注:与对照组比较*P<0.05,**P<0.01,分别表示显著差异和极显著差异。
结论:灵芝与茯神配伍的水总提取物,粗多糖及水溶性三萜成分均可以拮抗由冰醋酸诱导的局部疼痛。综上热板法考察镇痛是实验结果,可得出该配伍中多糖成分的镇痛的机理并非是影响神经中枢。
综上所述,茯神与灵芝配伍,丰富了祖国中药配伍在医药行业中的应用,研究表明,完全可以开改善睡眠,镇静抗焦虑方面的新的药物或者是功能性食品,弥补了失眠患者对西药(安定,利眠宁,硝基安定,舒乐安定等)药效依赖性及带来的副作用。
具体实施方式:
灵芝子实体和茯神菌核,两者配伍的水提取物的制备:将灵芝子实体和茯神干燥的菌核,粉碎,按照1∶1组合,加入8倍量的纯净水,在100±0.5℃下提取50分钟,提取三次,合并提取液,减压浓缩,于水浴锅上60℃继续浓缩,得到水提取物。
多糖的制备:灵芝的子实体和茯神菌核,粉碎,按照1∶1组合,加入8倍量的水,在100±0.5℃下提取50分钟,提取三次,合并提取液,减压浓缩,于水浴锅上60℃继续浓缩,到小体积,加入无水乙醇,浓度为85%,醇沉12小时,倾倒上清液,然后在醇沉两次,每次醇沉浓度为85%,将沉淀浓缩,用甲醇和丙酮反洗涤,然后用savage试剂除去蛋白,干燥得到粗多糖。
水溶性三萜的制备:将上述倾出上清醇,合并,浓缩得到该配伍的水溶性三萜成分,减压浓缩得到水溶性三萜成分。
Claims (4)
1.灵芝子实体和茯神菌核配伍的水提取物,水溶性三萜成分和粗多糖的获得:灵芝子实体和茯神菌核,两者配伍的水提取物的制备:将灵芝子实体和茯神干燥的菌核,粉碎,按照1∶1组合,加入8倍量的纯净水,在100±0.5℃下提取50分钟,提取三次,过滤去药渣,合并提取液,减压浓缩,于水浴锅上60℃继续浓缩,得到水提取物。
多糖的制备:灵芝的子实体和茯神菌核,粉碎,按照1∶1组合,加入8倍量的水,在100±0.5℃下提取50分钟,提取三次,过滤去药渣,合并提取液,减压浓缩,于水浴锅上60℃继续浓缩,到小体积,加入无水乙醇,浓度为85%,醇沉12小时,倾倒上清液,然后在醇沉两次,每次醇沉浓度为85%,将沉淀浓缩,用甲醇和丙酮反洗涤,然后用savage试剂除去蛋白,干燥得到粗多糖。
水溶性三萜的制备:将上述倾出上清醇,合并,浓缩得到该配伍的水溶性三萜成分,减压浓缩得到水溶性三萜成分。
2.灵芝子实体与茯神菌核配伍的水提取物、粗多糖和水溶性三萜在镇静抗焦虑、镇痛和抗疲劳药物中的应用。
3.用在镇静抗焦虑、镇痛和抗疲劳的药物组合物,其中含有治疗有效量的灵芝子实体和茯神菌核配伍后的成分和药学上的可接受的载体。
4.根据权利要求2、3所述的药物,其特征在于所说的药剂是任何一种药剂学上所说的剂型。
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CN200910066454A CN101780120A (zh) | 2009-01-19 | 2009-01-19 | 茯神与灵芝配伍提取物的药效活性及在医药中的应用 |
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CN (1) | CN101780120A (zh) |
Cited By (3)
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---|---|---|---|---|
JP2012158536A (ja) * | 2011-01-31 | 2012-08-23 | Noda Shokukin Kogyo Kk | 抗うつ剤 |
CN109999122A (zh) * | 2019-04-25 | 2019-07-12 | 武汉圣润生物科技有限公司 | 一种改善抑郁症的大麻二酚保健酒及其制备方法 |
CN111494406A (zh) * | 2020-06-12 | 2020-08-07 | 河南中医药大学 | 灵芝水煎液及其多糖在制备抗焦虑药物中的应用 |
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2009
- 2009-01-19 CN CN200910066454A patent/CN101780120A/zh active Pending
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JP2012158536A (ja) * | 2011-01-31 | 2012-08-23 | Noda Shokukin Kogyo Kk | 抗うつ剤 |
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