CN101736000B - 提高固定化脂肪酶活性和稳定性的方法 - Google Patents
提高固定化脂肪酶活性和稳定性的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN101736000B CN101736000B CN2009102490004A CN200910249000A CN101736000B CN 101736000 B CN101736000 B CN 101736000B CN 2009102490004 A CN2009102490004 A CN 2009102490004A CN 200910249000 A CN200910249000 A CN 200910249000A CN 101736000 B CN101736000 B CN 101736000B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- immobilized
- lipase
- enzyme
- organic solvent
- activity
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- 102000004882 Lipase Human genes 0.000 title claims abstract description 49
- 108090001060 Lipase Proteins 0.000 title claims abstract description 49
- 239000004367 Lipase Substances 0.000 title claims abstract description 46
- 235000019421 lipase Nutrition 0.000 title claims abstract description 46
- 230000000694 effects Effects 0.000 title claims abstract description 22
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 16
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims abstract description 28
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims abstract description 28
- 108010093096 Immobilized Enzymes Proteins 0.000 claims abstract description 28
- 238000005809 transesterification reaction Methods 0.000 claims abstract description 12
- 239000003495 polar organic solvent Substances 0.000 claims abstract description 8
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 6
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims abstract description 4
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 57
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 20
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 14
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 11
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 10
- BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N propan-1-ol Chemical compound CCCO BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 8
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 7
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 6
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 claims description 6
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 6
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 6
- 238000011084 recovery Methods 0.000 claims description 6
- 238000000151 deposition Methods 0.000 claims description 5
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 5
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 230000010355 oscillation Effects 0.000 claims description 5
- 230000003534 oscillatory effect Effects 0.000 claims description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 5
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims description 5
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims description 5
- 238000000967 suction filtration Methods 0.000 claims description 5
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 claims description 3
- SPOMEWBVWWDQBC-UHFFFAOYSA-K tripotassium;dihydrogen phosphate;hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].[K+].OP(O)([O-])=O.OP([O-])([O-])=O SPOMEWBVWWDQBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims 1
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 abstract description 9
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 abstract description 9
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 abstract description 8
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 7
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 abstract description 7
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 abstract description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 abstract description 3
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 abstract description 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 abstract description 2
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 abstract description 2
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 abstract description 2
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 abstract 3
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 abstract 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 abstract 1
- 239000004519 grease Substances 0.000 abstract 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 abstract 1
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 abstract 1
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 abstract 1
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 description 7
- HPEUJPJOZXNMSJ-UHFFFAOYSA-N Methyl stearate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC HPEUJPJOZXNMSJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 6
- ZWEHNKRNPOVVGH-UHFFFAOYSA-N 2-Butanone Chemical compound CCC(C)=O ZWEHNKRNPOVVGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- MLFHJEHSLIIPHL-UHFFFAOYSA-N isoamyl acetate Chemical compound CC(C)CCOC(C)=O MLFHJEHSLIIPHL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 4
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 4
- 239000001149 (9Z,12Z)-octadeca-9,12-dienoate Substances 0.000 description 3
- WTTJVINHCBCLGX-UHFFFAOYSA-N (9trans,12cis)-methyl linoleate Natural products CCCCCC=CCC=CCCCCCCCC(=O)OC WTTJVINHCBCLGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- DVWSXZIHSUZZKJ-UHFFFAOYSA-N 18:3n-3 Natural products CCC=CCC=CCC=CCCCCCCCC(=O)OC DVWSXZIHSUZZKJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LNJCGNRKWOHFFV-UHFFFAOYSA-N 3-(2-hydroxyethylsulfanyl)propanenitrile Chemical compound OCCSCCC#N LNJCGNRKWOHFFV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PKIXXJPMNDDDOS-UHFFFAOYSA-N Methyl linoleate Natural products CCCCC=CCCC=CCCCCCCCC(=O)OC PKIXXJPMNDDDOS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FLIACVVOZYBSBS-UHFFFAOYSA-N Methyl palmitate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC FLIACVVOZYBSBS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 3
- CAMHHLOGFDZBBG-UHFFFAOYSA-N epoxidized methyl oleate Natural products CCCCCCCCC1OC1CCCCCCCC(=O)OC CAMHHLOGFDZBBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000019387 fatty acid methyl ester Nutrition 0.000 description 3
- DVWSXZIHSUZZKJ-YSTUJMKBSA-N methyl linolenate Chemical compound CC\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCCCCC(=O)OC DVWSXZIHSUZZKJ-YSTUJMKBSA-N 0.000 description 3
- QYDYPVFESGNLHU-KHPPLWFESA-N methyl oleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC QYDYPVFESGNLHU-KHPPLWFESA-N 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003225 biodiesel Substances 0.000 description 2
- 230000032050 esterification Effects 0.000 description 2
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 description 2
- 229940117955 isoamyl acetate Drugs 0.000 description 2
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 2
- 241000222120 Candida <Saccharomycetales> Species 0.000 description 1
- 241000222175 Diutina rugosa Species 0.000 description 1
- 235000011449 Rosa Nutrition 0.000 description 1
- 241000698291 Rugosa Species 0.000 description 1
- 241001575049 Sonia Species 0.000 description 1
- 239000002551 biofuel Substances 0.000 description 1
- 238000001311 chemical methods and process Methods 0.000 description 1
- 229960002783 dexketoprofen Drugs 0.000 description 1
- DKYWVDODHFEZIM-NSHDSACASA-N dexketoprofen Chemical compound OC(=O)[C@@H](C)C1=CC=CC(C(=O)C=2C=CC=CC=2)=C1 DKYWVDODHFEZIM-NSHDSACASA-N 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- 125000002768 hydroxyalkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000007654 immersion Methods 0.000 description 1
- 229960000991 ketoprofen Drugs 0.000 description 1
- DKYWVDODHFEZIM-UHFFFAOYSA-N ketoprofen Chemical compound OC(=O)C(C)C1=CC=CC(C(=O)C=2C=CC=CC=2)=C1 DKYWVDODHFEZIM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019626 lipase activity Nutrition 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 150000004965 peroxy acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000002203 pretreatment Methods 0.000 description 1
- 238000004064 recycling Methods 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
一种提高固定化脂肪酶活性和稳定性的方法。采用能改变脂肪酶分子构象以及载体对脂肪酶的吸附状态的极性有机溶剂为处理剂，对吸附固定的脂肪酶浸泡适当时间而成；所述的固定化载体选取40目活性炭、或硅胶G、或DM-130树脂，所述的有机化合物选取醇、酮、酯中的一种为固定化酶处理剂。将吸附固定的脂肪酶浸泡于有机化合物处理剂中，再对浸泡的固定化脂肪酶进行分离收集和干燥处理，即得催化活性和稳定性得以提高的固定化脂肪酶。所得处理的固定化脂肪酶可用作于油脂的转酯化、合成或水解，其酶活力为对照的1.5～2.5倍、半衰期延长3～8h、催化大豆油转酯化反应延长使用3-6批。改善了固定化酶的使用性能。
Description
技术领域
本发明属于酶化学领域，涉及固定在无机的活性炭、硅胶和有机的树脂上用化学方法提高酶其活性和稳定性的技术；同时还涉及有机物的催化酯化和转酯化的技术。
背景技术
脂肪酶通常被用于工业上在有机媒介中催化酯化或转酯化反应。以脂肪酶为催化剂制备生物柴油，反应条件温和、醇用量少、甘油易回收、无废物，可以解决目前化学法生产生物柴油所用催化剂存在的分离难、耗能多的问题。酶的固定化技术解决了脂肪酶在催化反应过程中易结块、不易回收、很难重复利用等问题，并且提高了脂肪酶的活性和稳定性[1]。
提高固定化酶在有机媒介中的催化活性和稳定性意义重大。采用某些极性有机溶剂处理脂肪酶可以明显提高其催化活性和稳定性[2-4]。通过极性有机溶剂改变脂肪酶分子的构象[5]以及载体对脂肪酶的吸附状态，促进酶与底物的结合，提高酶的催化性能，进而提高生物催化剂的经济性和实用性。
参考文献
[1]蔡志强，杨广花，赵希岳，等.固定化酶催化高酸废油脂合成生物柴油的研究.中国粮油学报，2008，23(4)：160-162.
[2]Min G K，Eun G L，Bung H C.Improved enantioselectivity of Candidarugosa lipase towards ketoprofen ethyl ester by a simple two-step treatment.ProcessBiochemistry，2000(35)：977-982.
[3]Michiakim，KojiK，Kazuo K.Enhanced activities of lipase pretreated withorganic solvents.Journal of Chemical Technology and Biotechnology，2001(76)：1070-1073.
[4]Sonia C，Andres R A，Rosa M C，et al.Small water amounts increase thecatalytic behaviour of polar organic solvents pre-treated Candida rugosa lipase.Journal of Molecular Catalysis B：Enzymatic，2001(11)：939-947.
[5]Chang C S，Hsu C S.Enhancement of enantioselectivity an reaction rate onthe synthesis of(S)-ketoprofen hydroxyalkyl ester in organic solvents viaisopropanol-dried immobilized lipase.Journal of Chemical Technology andBiotechnology，2005(80)：537-544.
发明内容
本发明的目的旨在提高固定化脂肪酶在有机媒介中的催化活性和稳定性，进而提高生物催化剂的经济性和实用性。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：提供一种应用有机化合物处理固定化脂肪酶的方法，采用醇、酮和酯为固定化酶处理剂，将吸附固定的脂肪酶浸泡于处理剂中，再对浸泡的固定化脂肪酶进行分离收集和干燥处理，即得催化活性和稳定性得以提高的固定化脂肪酶。其方法包括如下步骤：
a、脂肪酶液制备：取15g酶粉溶于300ml、pH7.0的磷酸缓冲液(0.05mol/LK2HPO4-KH2PO4)，制得0.05mg/ml的脂肪酶液。
b、脂肪酶固定化：将1g经预处理的固定化载体(预处理的方法：用1mol/LHCl于室温下浸泡3h，然后水洗至中性)加入30～50ml酶液中，于30℃、150rpm振荡吸附2h。
c、固定化脂肪酶的分离和存放：过滤分离得湿固定化酶，于4℃放置24h。
d、有机溶剂处理：在20～50ml极性有机溶剂中加入1g湿固定化酶，于25～35℃、150rpm振荡处理1～1.5h，抽滤得处理过的固定化酶，于4℃放置24h，测定酶活力。
所述有机溶剂为极性有机溶剂醇、酮、酯。醇以C2～C3醇、酮以C3～C4酮、酯以乙酸的C2～C4酯为好。最佳溶剂：醇为丙醇、或异丙醇；酮为丙酮或丁酮；酯为乙酸乙酯或乙酸异戊酯。
e、大豆油转酯化：将22.5g大豆油、11ml正己烷及1g有机溶剂处理过的固定化酶混合，于30℃预热20min，按醇油摩尔比3∶1(大豆油的1摩尔质量是854，甲醇的摩尔质量是46，甲醇的摩尔数为甲醇质量除以甲醇的摩尔质量，大豆油的摩尔数为大豆油的质量除以大豆油的摩尔质量，醇油摩尔比为甲醇的摩尔数除以大豆油的摩尔数)平均分3次加入无水甲醇，于150rpm振荡反应24h。
f、固定化脂肪酶催化剂回收：转酯化反应结束后，用丙酮洗涤固定化脂肪酶催化剂3次，于4℃干燥24～48h，测定酶活力。
其中，所述的固定化载体为40目活性炭、或硅胶G、或DM-130树脂，所述的醇为丙醇、或异丙醇，所述的酮为丙酮、或丁酮、所述的酯为乙酸乙酯、或乙酸异戊酯。
采用本发明方法，通过使用极性有机溶剂浸泡处理吸附固定的脂肪酶LVK-F100一定时间，即可得到催化活性和稳定性得以提高的固定化脂肪酶，其脂肪酶活力是对照的1.5～2.5倍、半衰期延长3～8h、催化大豆油转酯化反应延长使用3-6批。所得固定化脂肪酶可用作于油脂的转酯化、合成或水解。
与现有技术相比较，其突出优点为：本方法操作简单，能有效提高固定化脂肪酶催化活性和稳定性，具有很高的推广利用价值。
以下结合实施例和说明书附图对本发明作进一步说明。
附图说明
图1为应用有机化合物提高固定化脂肪酶活性和稳定性的工艺流程示意图。
具体实施方式
实施例1
a、脂肪酶液制备：取15g酶粉溶于300ml、pH7.0的磷酸缓冲液(0.05mol/LK2HPO4-KH2PO4)，制得0.05mg/ml的脂肪酶液。
b、脂肪酶固定化：将1g经预处理的40目活性炭加入30ml酶液中，于30℃、150rpm振荡吸附2h。所述预处理是用1mol/LHCl于室温下浸泡3h，然后水洗至中性。
c、固定化脂肪酶的分离和存放：过滤分离得湿固定化酶，于4℃放置24h。
d、有机溶剂处理：选择丙酮为固定化酶处理剂。在30ml丙酮中加入1g湿固定化酶，于25℃、150rpm振荡处理1h，抽滤得处理过的固定化酶，于4℃放置24h，测定酶活力。
e、大豆油转酯化：将22.5g大豆油、11ml正己烷及1g有机溶剂处理过的固定化酶混合，于30℃预热20min，按醇油摩尔比3∶1平均分3次加入无水甲醇(每次加无水甲醇1.1ml)，于150rpm振荡反应24h，分析粗脂肪酸甲酯(棕榈酸甲酯4.27g；硬脂酸甲酯：1.86g；油酸甲酯：7.83g；亚油酸甲酯：4.18g；亚麻酸甲酯：1.47g)。
f、固定化脂肪酶催化剂回收：转酯化反应结束后，用丙酮洗涤固定化脂肪酶催化剂3次，于4℃干燥24h，测定酶活力。
所得固定化脂肪酶活力为150u/g，是对照酶活力的1.5倍，半衰期延长6h，催化大豆油转酯化反应延长使用5批次。
实施例2
a、脂肪酶液制备：取15g酶粉溶于300ml、pH7.0的磷酸缓冲液(0.05mol/LK2HPO4-KH2PO4)，制得0.05mg/ml的脂肪酶液。
b、脂肪酶固定化：将1g经预处理的硅胶G加入40ml酶液中，于30℃、150rpm振荡吸附2h。硅胶G预处理方法同实施例1。
c、固定化脂肪酶的分离和存放：过滤分离得湿固定化酶，于4℃放置24h。
d、以乙酸乙酯为固定化酶处理剂，在20ml乙酸乙酯中加入1g湿固定化酶，于30℃、150rpm振荡处理1.5h，抽滤得处理过的固定化酶，于4℃放置24h，测定酶活力。
e、大豆油转酯化：将22.5g大豆油、11ml正己烷及1g有机溶剂处理过的固定化酶混合，于30℃预热20min，按醇油摩尔比3∶1平均分3次加入无水甲醇(每次加无水甲醇1.1ml)，于150rpm振荡反应24h，分析粗脂肪酸甲酯(棕榈酸甲酯4.03g；硬脂酸甲酯：1.82g；油酸甲酯：7.69g；亚油酸甲酯：4.09g；亚麻酸甲酯：1.47g)。
f、固定化脂肪酶催化剂回收：转酯化反应结束后，用丙酮洗涤固定化脂肪酶催化剂3次，于4℃干燥24h，测定酶活力。
所得固定化脂肪酶活力为180u/g，是对照酶活力的1.8倍，半衰期延长8h，催化大豆油转酯化反应延长使用3批次。
实施例3
a、脂肪酶液制备：取15g酶粉溶于300ml、pH7.0的磷酸缓冲液(0.05mol/LK2HPO4-KH2PO4)，制得0.05mg/ml的脂肪酶液。
b、脂肪酶固定化：将1g经预处理的DM-130树脂加入50ml酶液中，于30℃、150rpm振荡吸附2h。DM-130树脂预处理方法同实施例1。
c、固定化脂肪酶的分离和存放：过滤分离得湿固定化酶，于4℃放置24h。
d、以丙醇为固定化酶处理剂，在40ml丙醇中加入1g湿固定化酶，于35℃、150rpm振荡处理1.5h，抽滤得处理过的固定化酶，于4℃放置24h，测定酶活力。
e、大豆油转酯化：将22.5g大豆油、11ml正己烷及1g有机溶剂处理过的固定化酶混合，于30℃预热20min，按醇油摩尔比3∶1平均分3次加入无水甲醇(每次加无水甲醇1.1ml)，于150rpm振荡反应24h，分析粗脂肪酸甲酯(棕榈酸甲酯4.05g；硬脂酸甲酯：1.82g；油酸甲酯：7.58g；亚油酸甲酯：3.98g；亚麻酸甲酯：1.54g)。
f、固定化脂肪酶催化剂回收：转酯化反应结束后，用丙酮洗涤固定化脂肪酶催化剂3次，于4℃干燥48h，测定酶活力。
所得固定化脂肪酶活力为170u/g，是对照酶活力的1.7倍，半衰期延长3h，催化大豆油转酯化反应延长使用3批次。
Claims (1)
1.提高固定化脂肪酶活性和稳定性的方法，其特征在于包括如下步骤：
a、脂肪酶液制备：取15g酶粉溶于300ml、pH7.0的磷酸缓冲液；
所述pH7.0的磷酸缓冲液组成为：0.05mol/L K2HPO4-KH2PO4；
所述酶粉为脂肪酶LVK-F100；
b、脂肪酶固定化：将1g经预处理的固定化载体加入30～50ml酶液中，于30℃、150rpm振荡吸附2h；
所述固定化载体为40目活性炭、或硅胶G、或DM-130树脂，其预处理方法为：用1mol/LHCl于室温下浸泡3h，然后水洗至中性；
c、固定化脂肪酶的分离和存放：过滤分离得湿固定化酶，于4℃放置24h；
d、有机溶剂处理：在20～50ml极性有机溶剂中加入1g湿固定化酶，于25～35℃、150rpm振荡处理1～1.5h，抽滤得处理过的固定化酶，于4℃放置24h，测定酶活力；
所述有机溶剂为极性有机溶剂丙醇、丙酮、乙酸乙酯；
e、大豆油转酯化：将22.5g大豆油、11ml正己烷及1g有机溶剂处理过的固定化酶混合，于30℃预热20min，按醇油摩尔比3：1平均分3次加入无水甲醇，于150rpm振荡反应24h；
f、固定化脂肪酶催化剂回收：转酯化反应结束后，用丙酮洗涤固定化脂肪酶催化剂3次，于4℃干燥24～48h，测定酶活力。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2009102490004A CN101736000B (zh) | 2009-12-30 | 2009-12-30 | 提高固定化脂肪酶活性和稳定性的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2009102490004A CN101736000B (zh) | 2009-12-30 | 2009-12-30 | 提高固定化脂肪酶活性和稳定性的方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN101736000A CN101736000A (zh) | 2010-06-16 |
| CN101736000B true CN101736000B (zh) | 2012-07-04 |
Family
ID=42460030
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN2009102490004A Expired - Fee Related CN101736000B (zh) | 2009-12-30 | 2009-12-30 | 提高固定化脂肪酶活性和稳定性的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN101736000B (zh) |
Families Citing this family (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102676493A (zh) * | 2011-03-31 | 2012-09-19 | 南京工业大学 | 一种含猪胰脂肪酶的介孔生物材料及其制备方法 |
| CN103468668B (zh) * | 2012-06-06 | 2017-10-24 | 益海(佳木斯)生物质能发电有限公司 | 一种固定脂肪酶的方法及其用途 |
| CN104745646B (zh) * | 2013-12-31 | 2019-12-10 | 丰益(上海)生物技术研发中心有限公司 | 一种用于酶法酯化处理油脂的设备 |
| CN107686834A (zh) * | 2016-08-04 | 2018-02-13 | 天津农学院 | 脱脂棉固定化脂肪酶及其制备方法和应用 |
| CN109234252B (zh) * | 2018-11-06 | 2021-02-02 | 浙江工业大学 | 一种印迹脂肪酶及其应用 |
| CN114438072B (zh) * | 2022-04-08 | 2022-05-31 | 山东天力药业有限公司 | 一种海藻糖的生产方法 |
-
2009
- 2009-12-30 CN CN2009102490004A patent/CN101736000B/zh not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN101736000A (zh) | 2010-06-16 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN101736000B (zh) | 提高固定化脂肪酶活性和稳定性的方法 | |
| You et al. | Biodiesel production from jatropha oil catalyzed by immobilized Burkholderia cepacia lipase on modified attapulgite | |
| Wang et al. | Recent advances in the catalytic production of glucose from lignocellulosic biomass | |
| Zhang et al. | Functionalized organic–inorganic hybrid porous coordination polymer-based catalysts for biodiesel production via trans/esterification | |
| CN102247871B (zh) | 一种生物质水解用固体酸催化剂的制备方法 | |
| CN107099815B (zh) | 一种双极膜表面粉末态光催化剂在co2还原中的应用 | |
| BR112013000819A2 (pt) | catalisador imobilizado, reator, cartucho, e, métodos para produzir um catalisador imobilizado e para produzir um produto químico | |
| US20120196337A1 (en) | Heterogenous enzymatic catalyst, preparation method, and use | |
| CN101280297A (zh) | 一种固定化脂肪酶的制备方法 | |
| Ning et al. | Catalytic capability of phosphotungstic acid supported on bamboo activated carbon in esterification for biodiesel production with density functional theory | |
| Wang et al. | Biocatalytic anti-Prelog stereoselective reduction of ethyl acetoacetate catalyzed by whole cells of Acetobacter sp. CCTCC M209061 | |
| CN102489316A (zh) | 糖基碳微球催化剂的制备及用于纤维素水解的工艺 | |
| CN102417937A (zh) | 一种催化水解纤维素制备还原糖的方法 | |
| CN103131692A (zh) | 以改性核桃壳为载体的固定化脂肪酶的制备方法 | |
| CN101712951A (zh) | 一种基于固定化方法的脂肪酶固定方法及其在阿魏酸酯化反应中的应用 | |
| CN106400466B (zh) | 一种改性碳纤维在固定化中的应用 | |
| Wang et al. | Engineering balanced anions coupling with tailored functional groups of poly (ionic liquid) s immobilized lipase enables effective biodiesel production | |
| CN106582716A (zh) | 生物质碳磺酸的制备方法 | |
| CN101671663B (zh) | 玉米芯固定化脂肪酶制备方法及其产品 | |
| US10870869B2 (en) | Enzymatic method for preparing glyceryl butyrate | |
| CN105195095A (zh) | 一种利用污泥发酵废弃物制备重金属吸附剂的方法 | |
| CN102660386A (zh) | 碱催化与脂肪酶催化联合制备生物柴油的方法 | |
| CN102776256B (zh) | 一种固定化磷脂酶 a1催化合成果糖月桂酸单酯的方法 | |
| CN102321489A (zh) | 一种利用离子液体催化液化农业废弃物的方法 | |
| CN105349519A (zh) | 脂肪酶固定化载体及其酶固定方法及提高拆分性能的方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20120704 Termination date: 20141230 |
|
| EXPY | Termination of patent right or utility model |