CN101708236B - 荷丹片在制备治疗脂肪肝药物中的应用 - Google Patents

荷丹片在制备治疗脂肪肝药物中的应用 Download PDF

Info

Publication number
CN101708236B
CN101708236B CN200910186709A CN200910186709A CN101708236B CN 101708236 B CN101708236 B CN 101708236B CN 200910186709 A CN200910186709 A CN 200910186709A CN 200910186709 A CN200910186709 A CN 200910186709A CN 101708236 B CN101708236 B CN 101708236B
Authority
CN
China
Prior art keywords
fatty liver
liver
hedan tablet
dosage
model
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
CN200910186709A
Other languages
English (en)
Other versions
CN101708236A (zh
Inventor
何凯南
安少凯
王一铭
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
NANCHANG JISHUN PHARMACEUTICAL CO Ltd
Original Assignee
NANCHANG JISHUN PHARMACEUTICAL CO Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by NANCHANG JISHUN PHARMACEUTICAL CO Ltd filed Critical NANCHANG JISHUN PHARMACEUTICAL CO Ltd
Priority to CN200910186709A priority Critical patent/CN101708236B/zh
Publication of CN101708236A publication Critical patent/CN101708236A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN101708236B publication Critical patent/CN101708236B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Landscapes

  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Abstract

荷丹片在治疗脂肪肝的应用，荷丹片是由以下组分制成(用量为重量份)荷叶：60丹参：10山楂：30番泻叶：3补骨脂：10，成人一日服用量为3-12片，即42.375---169.5g生药/日。荷丹片具有降低脂肪肝小鼠模型血清ALT和TG及肝组织TG值；荷丹片能显著降低脂肪肝模型大鼠血清ALT，降低血清TG，TCH和LDL，增加血清HDL，降低肝组织CHO和TG。同时，可减轻脂肪肝模型小鼠、大鼠肝细胞肿胀，脂肪变性、坏死及炎症细胞浸润程度。提示荷丹片对脂肪肝具有一定得疗效。

Description

荷丹片在制备治疗脂肪肝药物中的应用
技术领域
本发明涉及中药方剂，特别是荷丹片在治疗脂肪肝的应用。
技术背景
荷丹片，是由南昌济顺制药有限公司生产，处方为荷叶、丹参、山楂、番泻叶、补骨脂(盐炒)。功能主治为化痰降浊，活血化瘀。临床用于高脂血症属挟痰浊瘀证侯者。
发明内容
本发明的目的在于提供一种荷丹片在治疗脂肪肝的应用方法。
本发明药物荷丹片是由以下组分制成(用量为重量份)：
荷叶：1～100  丹参：1～100  山楂：1～100  番泻叶：1～100补骨脂：1～100
本发明药物荷丹片优选的组分(用量为重量份)如下：
荷叶：60    丹参：10    山楂：30    番泻叶：3    补骨脂：10
将上述各组分制成本发明药物的生产方法为：将番泻叶洗净，加10倍量900C热水浸泡三次药液，滤过，滤液备用：丹参粉碎成粗粉，用乙醇加热回流1.5小时，滤过，滤液回收乙醇，备用，补骨脂盐炒后备用。荷叶、补骨脂、
山楂及丹参药渣加10倍量水煎煮二次，每次2小时，药液合并，滤过，滤液备用。将上述药液合并，减压浓缩至相对密度为1.20(600C)，放置，待药液温度降至约400C，加2倍量乙醇，搅匀，静置48小时，取上清液，滤过，回收乙醇，减压浓缩成稠膏，加适量淀粉，混匀，减压干燥(60-700C，6-8小时)，制成颗粒，加入硬脂酸镁适量，压制成1000片，包衣，即得。
本发明药物荷丹片，每片重0.73g，含生药14.125g，成人一日3次，每次1-4片，成人一日服用量为3-12片，即42.375---169.5g生药/日。
经病理组织学检查，荷丹片14.12g/kg和47.07g/kg剂量可减轻CCl4脂肪肝模型小鼠肝细胞肿胀，脂肪变性、坏死及炎症细胞浸润程度；荷丹片47.07g/kg剂量可减轻酒精性脂肪肝模型小鼠肝细胞肿胀，脂肪变性、坏死及炎症细胞浸润程度；荷丹片14.12g/kg和47.07g/kg剂量可减轻乙硫氨酸脂肪肝模型小鼠肝细胞肿胀，脂肪变性、坏死及炎症细胞浸润程度。荷丹片14.12g/kg剂量可减轻复合因素酒精性和非酒精性脂肪肝模型大鼠肝细胞肿胀，脂肪变性、坏死及炎症细胞浸润程度；荷丹片3.53g/kg剂量可减轻复合因素酒精性脂肪肝模型大鼠肝细胞肿胀，脂肪变性、坏死及炎症细胞浸润程度；荷丹片7.06g/kg剂量可减轻非酒精性脂肪肝模型大鼠肝细胞肿胀，脂肪变性、坏死及炎症细胞浸润程度。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明进行详细说明。
实施例1：
本发明药物是由以下组分制成(用量为重量份)
荷叶：60    丹参：10    山楂：30    番泻叶：3    补骨脂：10
将上述各组分制成本发明药物的生产方法为：将番泻叶洗净，加10倍量900C热水浸泡三次药液，滤过，滤液备用：丹参粉碎成粗粉，用乙醇加热回流1.5小时，滤过，滤液回收乙醇，备用，补骨脂盐炒后备用。荷叶、补骨脂、山楂及丹参药渣加10倍量水煎煮二次，每次2小时，药液合并，滤过，滤液备用。将上述药液合并，减压浓缩至相对密度为1.20(600C)，放置，待药液温度降至约40″C，加2倍量乙醇，搅匀，静置48小时，取上清液，滤过，回收乙醇，减压浓缩成稠膏，加适量淀粉，混匀，减压干燥(60-700C，6-8小时)，制成颗粒，加入硬脂酸镁适量，压制成1000片，包衣，即得。
本发明药物荷丹片，每片重0.73g，含生药14.125g，成人一日3次，每次2片，即成人一日服用量为6片，即84.75g生药/日。
我们对荷丹片进行相关药效学试验，现将试验结果报告如下：
1.试验材料
1.1供试品
荷丹片，由南昌济顺制药有限公司提供，每片重0.73g，含生药14.125g，批号：20080601。
20.1.1.1小鼠剂量确定：成人一日3次，每次2片，即成人一日服用量为6片，即84.75g生药/日；小鼠中剂量为60kg成人临床剂量的10倍计算，小鼠中剂量为14.12g生药/kg，取组间剂量比为1∶3∶10，即小鼠低、中、高剂量分别为4.71、14.12、47.07g生药/kg。
20.1.1.2大鼠剂量确定：大鼠中剂量为60kg成人临床剂量的5倍计算，大鼠中剂量为7.06g/kg，取组间剂量比为1∶2∶4，即大鼠低、中、高剂量分别为3.53、7.06、14.12g/kg。
.1.2阳性对照药
.1.2.1血脂康胶囊，北京北大维信生物科技有限公司，每粒装0.3g，批号：20080501。
小鼠剂量确定：成人一日2次，每次2粒，即成人一日服用量为4粒，即1.2g/日，小鼠剂量为60kg成人临床剂量的10倍计算，即小鼠为0.2g/kg。
大鼠剂量确定：大鼠剂量为60kg成人临床剂量的5倍计算，即大鼠为0.1g/kg。
1.2.2联苯双酯滴丸，浙江医药股份有限公司新昌药厂，规格，1.5mg/粒，批号：080102。
小鼠剂量确定：按参考文献资料[1]，小鼠剂量为0.2g/kg。
1.2.3非诺贝特片，上海黄海制药有限责任公司，规格，0.1g/片，批号：070301。
小鼠剂量确定：按参考文献[4]，小鼠剂量为0.1g/kg。
大鼠剂量确定：按参考文献[4、8]，大鼠剂量为0.05g/kg。
1.2.4复方蛋氨酸胆碱片(东宝甘泰)，通化东宝药业股份有限公司，批号：070507。
小鼠剂量确定：成人一日3次，每次3片，即成人一日服用量为9片，即9片/日，小鼠剂量为60kg成人临床剂量的10倍计算，即小鼠为1.5片/kg。
1.3试剂
乙硫氨酸(DL-Ethionine)，Sigama Chemical CO.lot：1063551。
四氯化碳(CCl4)，分析纯，湖北大学化工厂，批号：050817。
橄榄油(Olive oil)，化学纯，国药集团化学试剂有限公司，批号：F20060404。
丙氨酸氨基转移酶(ALT)试剂盒，中生北控生物科技股份有限公司，批号：080871.200804、080891。
甘油三脂(TG)试剂盒，中生北控生物科技股份有限公司，批号：082291.200804、082611。
还原型谷胱甘肽(GSH)试剂盒，南京建成生物工程研究所，批号：20080702、20081127。
丙二醛(MDA)测试盒，南京建成生物工程研究所，批号：20080702、20081127。
胆固醇(C27H40O)，上海精析化工科技有限公司，批号：080303。
胆酸钠(Cow Sodium Cholate)，北京市海淀区微生物培养基制品厂，批号：20080117。
1，2-丙二醇(1，2-Propanediol)，上海试剂一厂，批号：试2005-05-10。
总胆固醇(TCH)试剂盒，中生北控生物科技股份有限公司，批号：080691。
低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)试剂盒，中生北控生物科技股份有限公司，批号：080231200809。
高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)试剂盒，中生北控生物科技股份有限公司，批号：080221.200807。
二锅头白酒(56％)，北京红星股份有限公司生产，批号：20071011。
北京二锅头白酒(56％)，北京双庆和酒业有限责任公司生产，批号：20071220。
1.4动物
1.4.1昆明种小鼠，雄性，清洁级，18～20g，购自湖南省长沙市开福区东创
实验动物科技服务部，生产许可证号：SCXK(湘)2006-001，合格证编号：002580。
1.4.2Wistar大鼠，雄性，SPF级，140～170g，购自上海西普尔-必凯实验动物有限公司，生产许可证号：SCXK(沪)2008-0016，合格证编号：0047636、0047391。
1.4.3动物饲养条件：
●实验动物房室温：19～26℃，
●湿度：40～70％，
●每日照明10h(8Am～6Pm)熄灯14h，
●给予常规的实验室饮食，自由饮水，
●全价营养颗粒饲料：购自江西省实验动物中心，批号：080701、081020。
1.5仪器
BT-224半自动生化分析仪，意大利产。
2试验方法与结果
2.1荷丹片对小鼠急性CCl4肝损伤脂肪肝模型的影响[2、3]
方法：将小鼠按体重随机分成7组，每组10只，分别为空白组、模型组、荷丹片低、中、高剂量组、联苯双酯组和血脂康胶囊组。供试品组灌胃给药，1次/天，空白组和模型组给予等容积蒸馏水，灌胃容积均为0.2ml/10g体重，连续给药10天；第10天，除空白组外，其余动物用0.15％的四氯化碳橄榄油溶液10mL/kg给小鼠腹腔注射，禁食16小时，摘除小鼠眼球取血，室温静置10min，3500rmp离心15min，分离血清，按试剂盒说明分别测血清ALT、TG。脱颈椎处死小鼠，剖腹取肝脏，称其湿重，并取肝脏同部位组织约0.1g，精密称定，剪碎后加入9倍0.9％的氯化钠溶液，冰浴中手动制匀浆，3500rmp离心15min，按试剂盒说明测GSH、MDA和TG含量。另取肝脏左叶，用10％甲醛固定，HE染色，于光学显微镜下观察各组织形态学变化，拍摄照片。试验结果采用t检验和Ridit检验。
肝损伤病理组织学分级标准如下。0级：正常肝组织，无肝细胞变性、坏死，无炎症细胞浸润。I级：肝小叶内肝细胞轻度脂肪变性，偶见肝细胞点状坏死。II级：肝小叶内肝细胞中度脂肪变性，可见肝细胞点状坏死，炎症细胞浸润。III级：肝小叶内肝细胞重度弥漫性脂肪变性，点状坏死多见或可见大片肝细胞坏死。
结果：荷丹片47.07g(指生药量，下同)/kg剂量和联苯双酯0.2g/kg剂量能显著增加小鼠肝系数，荷丹片47.07g/kg、血脂康0.2g/kg和联苯双酯0.2g/kg剂量能显著降低血清ALT，荷丹片4.71和14.12g/kg剂量具有显著降低血清TG，荷丹片47.07g/kg、血脂康0.2g/kg和联苯双酯0.2g/kg剂量能显著降低肝组织TG，血脂康0.2g/kg剂量和联苯双酯0.2g/kg剂量能显著降低肝组织MDA和显著增加肝组织GSH与模型组比较，差异有显著性和非常显著性意义(P＜0.05和P＜0.01)。结果见表1、2、3。
病理组织学检查，空白组肝组织结构正常，肝小叶结构清楚，细胞索排列整齐，肝血窦正常；模型组肝细胞肿胀，胞质内出现弥漫性的圆形脂滴，胞浆内出现脂肪空泡，肝小叶界限模糊，小叶内出现多个点状或大片状坏死，汇管区见大量炎症细胞浸润。荷丹片14.12和47.07g/kg组肝细胞肿胀不明显，脂肪变性及炎症细胞浸润均较模型对照组显著减轻，无大片状坏死。荷丹片4.71g/kg组时肝细胞肿胀较模型组减轻，脂肪变性、炎症细胞浸润及坏死程度改变不明显。联苯双酯0.2g/kg组和血脂康0.2g/kg组肝细胞肿胀，脂肪变性、炎症细胞浸润及坏死程度均显著降低。结果见表4。
表1、荷丹片对小鼠急性CCl4肝损伤脂肪肝模型的影响(x±s)
Figure G2009101867094D00051
与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01
表2、荷丹片对小鼠急性CCl4肝损伤脂肪肝模型的影响(x±s)
Figure G2009101867094D00052
Figure G2009101867094D00061
与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01
表3、荷丹片对小鼠急性CCl4肝损伤脂肪肝模型的影响(x±s)
Figure G2009101867094D00062
与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01
表4、荷丹片对小鼠急性CCl4肝损伤脂肪肝模型的影响
Figure G2009101867094D00071
与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01
2.2荷丹片对小鼠急性酒精性脂肪肝模型的影响[5]
方法：将小鼠按体重随机分成7组，每组10只，分别为空白组、模型组、荷丹片低、中、高剂量组、血脂康胶囊组和非诺贝特片组。除空白组外，其余各组均灌胃给予酒精度为35％的二锅头白酒，灌胃容积16ml/kg，每日1次，连续17天，造模第8天灌胃酒精后3小时开始灌胃给药，供试品组灌胃给予相应药物，1次/天，空白组和模型组给予等容积蒸馏水，灌胃容积均为0.2ml/10g体重，连续给药10天。末次给药后禁食12h，摘除小鼠眼球取血，室温静置10min，3500rmp离心15min，分离血清，按试剂盒说明分别测血清ALT、TG。脱颈椎处死小鼠，剖腹取肝脏，称其湿重，并取肝脏同部位组织约0.1g，精密称定，剪碎后加入9倍0.9％的氯化钠溶液，冰浴中手动制匀浆，3500rmp离心15min，按试剂盒说明测TG、GSH和MDA含量。另取肝脏左叶，用10％甲醛固定，HE染色，于光学显微镜下观察各组织形态学变化，拍摄照片。试验结果采用t检验和Ridit检验。
肝损伤病理组织学分级标准如下。0级：正常肝组织，无肝细胞变性、坏死，无炎症细胞浸润。I级：肝小叶内肝细胞轻度脂肪变性，偶见肝细胞点状坏死。II级：肝小叶内肝细胞中度脂肪变性，可见肝细胞点状坏死，炎症细胞浸润。III级：肝小叶内肝细胞重度弥漫性脂肪变性，点状坏死多见或可见大片肝细胞坏死。
结果：非诺贝特0.1g/kg剂量能显著增加小鼠肝系数，荷丹片4.71g(指生药，下同)/kg、47.07g/kg、血脂康0.2g/kg和非诺贝特0.1g/kg剂量具有显著降低血清TG，荷丹片4.71g/kg和非诺贝特0.1g/kg剂量能显著降低肝组织TG，荷丹片4.71和47.07g/kg剂量显著增加肝组织GSH，荷丹片4.71、14.12g/kg和非诺贝特0.1g/kg剂量能显著降低肝组织MDA，与模型组比较，差异有显著性和非常显著性意义(P＜0.05和P＜0.01)。结果见表5、6、7。
病理组织学检查，空白组肝组织结构正常，肝小叶结构清楚，细胞索排列整齐，肝血窦正常；模型组肝细胞肿胀，胞质内出现弥漫性的圆形脂滴，肝小叶界限模糊，小叶内出现多个点状或大片状坏死，汇管区见大量炎症细胞浸润。荷丹片47.07g/kg组肝细胞肿胀，脂肪变性及炎症细胞浸润均较模型对照组显著减轻，无大片状坏死。荷丹片14.12和4.71g/kg组时肝细胞肿胀较模型组减轻，脂肪变性、炎症细胞浸润及坏死程度改变不明显。非诺贝特0.1g/kg组和血脂康0.2g/kg组肝细胞肿胀，脂肪变性、炎症细胞浸润及坏死程度均显著降低。结果见表8。
表5、荷丹片对小鼠急性酒精性脂肪肝模型的影响(x±s)
与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01
表6、荷丹片对小鼠急性酒精性脂肪肝模型的影响(x±s)
Figure G2009101867094D00082
Figure G2009101867094D00091
与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01
表7、荷丹片对小鼠急性酒精性脂肪肝模型的影响(x±s)
Figure G2009101867094D00092
与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01
表8、荷丹片对小鼠急性酒精性脂肪肝模型的影响
Figure G2009101867094D00093
Figure G2009101867094D00101
与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01
2.3荷丹片对小鼠急性乙硫氨酸脂肪肝模型的影响
方法：将小鼠按体重随机分成7组，每组10只，分别为空白组、模型组、荷丹片低、中、高剂量组、复方蛋氨酸胆碱片组和血脂康组。供试品组灌胃给药，1次/天，空白组和模型组给予等容积蒸馏水，灌胃容积均为0.2ml/10g体重，连续给药10天；第10天，除空白组外，其余动物灌胃给予1.25％乙硫氨酸0.25g/kg造模，即刻禁食24h，造模后3小时，正常组和模型组给予蒸馏水，供试品组灌胃给药1次。禁食24h后小鼠眼球取血，室温静置10min，3500rmp离心15min，分离血清，按试剂盒说明分别测血清ALT、TG。脱颈椎处死小鼠，剖腹取肝脏，称其湿重，并取肝脏同部位组织约0.1g，精密称定，剪碎后加入9倍0.9％的氯化钠溶液，冰浴中手动制匀浆，3500rmp离心15min，按试剂盒说明测GSH、MDA和TG含量。另取肝脏左叶，用10％甲醛固定，HE染色，于光学显微镜下观察各组织形态学变化，拍摄照片。试验结果采用t检验和Ridit检验。
肝损伤病理组织学分级标准如下。0级：正常肝组织，无肝细胞变性、坏死，无炎症细胞浸润。I级：肝小叶内肝细胞轻度脂肪变性，偶见肝细胞点状坏死。II级：肝小叶内肝细胞中度脂肪变性，可见肝细胞点状坏死，炎症细胞浸润。III级：肝小叶内肝细胞重度弥漫性脂肪变性，点状坏死多见或可见大片肝细胞坏死。
结果：荷丹片4.71、14.12和47.07g(指生药量，下同)/kg剂量能显著降低小鼠肝系数，荷丹片14.12、47.07g/kg、血脂康0.2g/kg和东宝甘泰1.5片/kg剂量具有显著降低血清ALT，东宝甘泰1.5片/kg剂量组具有显著增加血清TG，荷丹片47.07g/kg、血脂康0.2g/kg和东宝甘泰1.5片/kg剂量能显著降低肝组织TG，荷丹片14.12和47.07g/kg剂量显著增加肝组织GSH，与模型组比较，差异有显著性和非常显著性意义(P＜0.05和P＜0.01)。结果见表9、10、11。
病理组织学检查，空白组肝组织结构正常，肝小叶结构清楚，细胞索排列整齐，肝血窦正常；模型组肝细胞肿胀，胞质内出现弥漫性的圆形脂滴，脂肪空泡，肝小叶界限模糊，小叶内出现多个点状或大片状坏死，汇管区见大量炎症细胞浸润。荷丹片14.12和47.07g/kg组肝细胞肿胀，脂肪变性及炎症细胞浸润均较模型对照组显著减轻，无大片状坏死。荷丹片4.71g/kg组时肝细胞肿胀较模型组减轻，脂肪变性、炎症细胞浸润及坏死程度改变不明显。东宝甘泰1.5片/kg组和血脂康0.2g/kg组肝细胞肿胀消失，脂肪变性、炎症细胞浸润及坏死程度均显著降低。结果见表12。
表9、荷丹片对小鼠急性乙硫氨酸脂肪肝模型的影响(x±s)
与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01
表10、荷丹片对小鼠急性乙硫氨酸脂肪肝模型的影响(x±s)
Figure G2009101867094D00112
与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01
表11、荷丹片对小鼠急性乙硫氨酸脂肪肝模型的影响(x±s)
Figure G2009101867094D00121
与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01
表12、荷丹片对小鼠急性乙硫氨酸脂肪肝模型的影响
Figure G2009101867094D00122
与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01
2.4荷丹片对大鼠慢性复合因素酒精性脂肪肝模型的影响
方法：将大鼠按体重随机分成7组，每组10只，分别为空白组、模型组、荷丹片低、中、高剂量组、血脂康胶囊组和非诺贝特片组。除空白组外，其余各组均灌胃给予高脂乳剂和56％白酒，灌胃体积均为5ml/kg，每天1次，连续9周，空白组灌胃给予等容量蒸馏水。连续造模5周后，各组均于每日上午灌胃给予高脂乳剂和56％白酒，下午灌胃给药，给药灌胃容积均为1.0ml/100g体重，1次/天，空白组和模型组给予等容积蒸馏水，连续给药4周。末次给药后禁食12h，大鼠腹主动脉取血，室温静置10min，3500rmp离心15min，分离血清，按试剂盒说明分别测血清ALT、TG、TCH、LDL、HDL。脱颈椎处死大鼠，剖腹取肝脏，称其湿重，并取肝脏同部位组织精密称定0.3g，剪碎后加入9倍0.9％的氯化钠溶液，冰浴中手动制匀浆，2000rmp离心10min，取上清液测GSH和MDA含量，并取肝脏同部位组织精密称定0.2g，剪碎后加入9倍丙酮乙醇(1∶1)溶液中匀浆，3500rmp离心15min，取上清液TG、TCH。另取肝脏左叶，用10％甲醛固定，HE染色，于光学显微镜下观察各组织形态学变化，拍摄照片。试验结果采用t检验和Ridit检验。
高脂乳剂：猪油500g，胆固醇100g，胆酸33g，丙二醇150ml。
肝损伤病理组织学分级标准如下。0级：正常肝组织，无肝细胞变性、坏死，无炎症细胞浸润。I级：肝小叶内肝细胞轻度脂肪变性，偶见肝细胞点状坏死。II级：肝小叶内肝细胞中度脂肪变性，可见肝细胞点状坏死，炎症细胞浸润。III级：肝小叶内肝细胞重度弥漫性脂肪变性，点状坏死多见或可见大片肝细胞坏死。
结果：非诺贝特0.2g/kg剂量能显著增加大鼠肝系数，荷丹片3.53、14.02g/kg剂量能显著降低脂肪肝模型大鼠血清ALT；荷丹片14.12g/kg，血脂康0.1g/kg和非诺贝特0.05g/kg剂量能显著降低脂肪肝模型大鼠血清TG；荷丹片7.06、14.12g/kg和血脂康0.1g/kg剂量能显著降低脂肪肝模型大鼠血清TCH；荷丹片7.06、14.12g/kg和血脂康0.1g/kg剂量能显著增加脂肪肝模型大鼠血清HDL，非诺贝特0.05g/kg剂量组则降低；荷丹片7.06、14.12g/kg和血脂康0.1g/kg剂量能显著降低脂肪肝模型大鼠血清LDL；荷丹片14.12g/kg和非诺贝特0.05g/kg剂量能显著降低脂肪肝模型大鼠肝组织MDA；荷丹片14.12g/kg和非诺贝特0.05g/kg剂量能显著增加脂肪肝模型大鼠肝组织GSH；荷丹片7.06、14.12g/kg剂量能显著降低脂肪肝模型大鼠肝组织CHO，而非诺贝特0.05g/kg剂量增加大鼠肝组织CHO；荷丹片7.06、14.12g/kg、血脂康0.1g/kg和非诺贝特0.05g/kg剂量能显著降低脂肪肝模型大鼠肝组织TG；与模型组比较，差异有显著性和非常显著性意义(P＜0.05和P＜0.01)。结果见表13、14、15、16、17。
大体病理检查，空白组肝组织外观红褐色，质软富弹性。模型组大鼠肝脏色泽稍色黄，肝脏肿大，边缘钝厚，质脆。病理组织学检查，空白组肝组织结构正常，肝小叶结构清楚，细胞索排列整齐，肝血窦正常；模型组中央静脉周围的肝细胞肿胀，胞浆内出现脂肪空泡，肝小叶界限模糊，小叶内出现多个点状或大片状坏死，汇管区见大量炎症细胞浸润。荷丹片3.53和14.12g/kg组肝细胞肿胀不明显，脂肪变性及炎症细胞浸润均较模型对照组显著减轻，无大片状坏死。荷丹片7.06g/kg组时肝细胞肿胀较模型组减轻，脂肪变性、炎症细胞浸润及坏死程度改变不明显。血脂康0.1g/kg组肝细胞肿胀，脂肪变性、炎症细胞浸润及坏死程度均显著降低。结果见表18。
表13、荷丹片对复合因素酒精脂肪肝大鼠模型的影响(x±s)
Figure G2009101867094D00141
与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01
表14、荷丹片对复合因素酒精脂肪肝大鼠模型的影响(x±s)
与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01
表15、荷丹片对复合因素酒精脂肪肝大鼠模型的影响(x±s)
Figure G2009101867094D00143
Figure G2009101867094D00151
与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01
表17、荷丹片对复合因素酒精脂肪肝大鼠模型的影响(x±s)
Figure G2009101867094D00152
与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01
表18、荷丹片对大鼠复合因素酒精性脂肪肝模型的影响
Figure G2009101867094D00153
与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01
2.5荷丹片对大鼠慢性非酒精性脂肪肝模型的影响
方法：将大鼠按体重随机分成7组，每组10只，分别为空白组、模型组、荷丹片低、中、高剂量组、血脂康胶囊组和非诺贝特片组。除空白组外，其余各组均灌胃给予高脂乳剂和高糖溶液，灌胃容积均为5ml/kg，每日1次，连续8周。连续造模4周后，各组均于每日上午灌胃给予高糖高脂乳剂，下午灌胃给药，灌胃给药容积均为1.0ml/100g，空白组和模型组给予等容积蒸馏水，1次/天，连续给药4周。末次给药后禁食12h，大鼠腹主动脉取血，室温静置10min，3500rmp离心15min，分离血清，按试剂盒说明分别测血清ALT、TG、TCH、LDL、HDL。脱颈椎处死大鼠，剖腹取肝脏，称其湿重，并取肝脏同部位组织精密称定0.3g，剪碎后加入9倍0.9％的氯化钠溶液，冰浴中手动制匀浆，2000rmp离心10min，取上清液测GSH和MDA含量，并取肝脏同部位组织精密称定0.2g，剪碎后加入9倍丙酮乙醇(1∶1)溶液中匀浆，3500rmp离心15min，取上清液TG、TCH。另取肝脏左叶，用10％甲醛固定，HE染色，于光学显微镜下观察各组织形态学变化，拍摄照片。试验结果采用t检验和Ridit检验。
高脂乳剂：玉米油400g、胆固醇100g、胆酸钠33g、丙二醇300ml。
高糖溶液：奶粉40g、蔗糖75g、蒸馏水100ml。
肝损伤病理组织学分级标准如下。0级：正常肝组织，无肝细胞变性、坏死，无炎症细胞浸润。I级：肝小叶内肝细胞轻度脂肪变性，偶见肝细胞点状坏死。II级：肝小叶内肝细胞中度脂肪变性，可见肝细胞点状坏死，炎症细胞浸润。III级：肝小叶内肝细胞重度弥漫性脂肪变性，点状坏死多见或可见大片肝细胞坏死。
结果：非诺贝特0.2g/kg剂量能显著增加大鼠肝系数，荷丹片3.53、7.06、14.02g/kg和血脂康0.1g/kg剂量能显著降低脂肪肝模型大鼠血清ALT；荷丹片7.06、14.12g/kg，血脂康0.1g/kg和非诺贝特0.05g/kg剂量能显著降低脂肪肝模型大鼠血清TG；荷丹片3.53、7.06、14.12g/kg和血脂康0.1g/kg剂量能显著降低脂肪肝模型大鼠血清TCH，而非诺贝特0.05g/kg增加血清TCH；荷丹片3.53、7.06、14.12g/kg能显著增加脂肪肝模型大鼠血清HDL，非诺贝特0.05g/kg剂量则降低血清HDL；荷丹片3.53、7.06、14.12g/kg和血脂康0.1g/kg剂量能显著降低脂肪肝模型大鼠血清LDL，而非诺贝特0.05g/kg剂量则增加血清LDL；荷丹片14.12g/kg和血脂康0.1g/kg能显著降低脂肪肝模型大鼠肝组织MDA；非诺贝特0.05g/kg能显著增加脂肪肝模型大鼠肝组织GSH；荷丹片7.06、14.12g/kg和血脂康0.1g/kg剂量能显著降低脂肪肝模型大鼠肝组织CHO；荷丹片3.53、14.12g/kg、血脂康0.1g/kg和非诺贝特0.05g/kg剂量能显著降低脂肪肝模型大鼠肝组织TG；与模型组比较，差异有显著性和非常显著性意义(P＜0.05和P＜0.01)。结果见表19、20、21、22、23。
大体病理检查，空白组肝组织外观红褐色，质软富弹性。模型组大鼠肝脏色泽稍色黄，肝脏肿大，边缘钝厚，质脆。病理组织学检查，空白组肝组织结构正常，肝小叶结构清楚，细胞索排列整齐，肝血窦正常，核圆，位于细胞中央，胞质均匀；模型组中央静脉周围的肝细胞肿胀，胞浆内出现脂肪空泡，肝小叶界限模糊，小叶内出现多个点状或大片状坏死，汇管区见大量炎症细胞浸润。荷丹片7.06和14.12g/kg组肝细胞肿胀不明显，脂肪变性及炎症细胞浸润均较模型对照组显著减轻，无大片状坏死。荷丹片3.53g/kg组时肝细胞肿胀较模型组减轻，脂肪变性、炎症细胞浸润及坏死程度改变不明显。血脂康0.1g/kg组肝细胞肿胀，脂肪变性、炎症细胞浸润及坏死程度均显著降低。结果见表24。
表19、荷丹片对非酒精脂肪肝大鼠模型的影响(x±s)
Figure G2009101867094D00171
与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01
表20、荷丹片对非酒精脂肪肝大鼠模型的影响(x±s)
Figure G2009101867094D00172
与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01
表21、荷丹片对非酒精脂肪肝大鼠模型的影响(x±s)
Figure G2009101867094D00181
与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01
表22、荷丹片对非酒精脂肪肝大鼠模型的影响(x±s)
Figure G2009101867094D00182
与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01
表23、荷丹片对非酒精脂肪肝大鼠模型的影响(x±s)
Figure G2009101867094D00183
与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01
表24、荷丹片对大鼠非酒精性脂肪肝模型的影响
Figure G2009101867094D00184
Figure G2009101867094D00191
与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01
3结论
综上所述，荷丹片具有降低脂肪肝小鼠模型血清ALT和TG及肝组织TG值；荷丹片能显著降低脂肪肝模型大鼠血清ALT，降低血清TG，TCH和LDL，增加血清HDL，降低肝组织CHO和TG。同时，可减轻脂肪肝模型小鼠、大鼠肝细胞肿胀，脂肪变性、坏死及炎症细胞浸润程度。提示荷丹片对脂肪肝具有一定得疗效。
荷丹片47.07g/kg剂量能降低CCl4脂肪肝模型小鼠血清ALT和肝组织TG，荷丹片4.71和14.12g/kg剂量组能降低其血清TG。荷丹片4.71g/kg、47.07g/kg剂量能降低酒精性脂肪肝模型小鼠血清TG和增加肝组织GSH，荷丹片4.71g/kg剂量能降低其肝组织TG，荷丹片4.71、14.12g/kg剂量能显著降低肝组织MDA。荷丹片4.71、14.12和47.07g/kg剂量能降低乙硫氨酸脂肪肝模型小鼠肝系数，荷丹片14.12、47.07g/kg剂量能降低血清ALT和增加肝组织GSH，荷丹片47.07g/kg剂量能降低肝组织TG。荷丹片3.53、14.02g/kg剂量能显著降低复合因素酒精性脂肪肝模型大鼠血清ALT，荷丹片14.12g/kg剂量能显著降低其血清TG，荷丹片7.06和14.12g/kg剂量能显著降低其血清TCH和LDL，荷丹片7.06和14.12g/kg能显著增加其血清HDL，荷丹片14.12g/kg能显著降低其肝组织MDA和增加GSH，荷丹片7.06和14.12g/kg剂量能显著降低其肝组织CHO和TG。荷丹片3.53、7.06和14.02g/kg剂量能显著降低非酒精性脂肪肝模型大鼠血清ALT和TCH，荷丹片7.06和14.12g/kg剂量能显著降低其血清TG，荷丹片3.53、7.06和14.12g/kg能显著增加其血清HDL和降低LDL，荷丹片14.12g/kg能显著降低其肝组织MDA，荷丹片7.06和14.12g/kg剂量能显著降低其肝组织TCH；荷丹片3.53和14.12g/kg剂量能显著降低其肝组织TG。
病理组织学检查，荷丹片14.12g/kg和47.07g/kg剂量可减轻CCl4脂肪肝模型小鼠肝细胞肿胀，脂肪变性、坏死及炎症细胞浸润程度；荷丹片47.07g/kg剂量可减轻酒精性脂肪肝模型小鼠肝细胞肿胀，脂肪变性、坏死及炎症细胞浸润程度；荷丹片14.12g/kg和47.07g/kg剂量可减轻乙硫氨酸脂肪肝模型小鼠肝细胞肿胀，脂肪变性、坏死及炎症细胞浸润程度。荷丹片14.12g/kg剂量可减轻酒精性和非酒精性脂肪肝模型大鼠肝细胞肿胀，脂肪变性、坏死及炎症细胞浸润程度；荷丹片3.53g/kg剂量可减轻复合因素酒精性脂肪肝模型大鼠肝细胞肿胀，脂肪变性、坏死及炎症细胞浸润程度；荷丹片7.06g/kg剂量可减轻非酒精性脂肪肝模型大鼠肝细胞肿胀，脂肪变性、坏死及炎症细胞浸润程度。
实施例2：
本发明药物是由以下组分制成(用量为重量份)
荷叶：50    丹参：8    山楂：30    番泻叶：3    补骨脂：10
本发明药物荷丹片，每片重0.73g，含生药14.125g，成人一日3次，每次1片，成人一日服用量为3片，即42.375g生药/日。
实施例3：
本发明药物是由以下组分制成(用量为重量份)
荷叶：30    丹参：10    山楂：20    番泻叶：3    补骨脂：10
本发明药物荷丹片，每片重0.73g，含生药14.125g，成人一日3次，每次3片，成人一日服用量为9片，即127.125g生药/日。

Claims (1)

1.荷丹片在制备治疗脂肪肝药物中的应用，其特征在于：荷丹片是由以下组分制成，用量为重量份：荷叶：60；丹参：10；山楂：30；番泻叶：3；补骨脂：10，其中所述脂肪肝为急性四氯化碳肝损伤脂肪肝、急性酒精性脂肪肝、急性乙硫氨酸脂肪肝、慢性复合因素酒精性脂肪肝、慢性非酒精性脂肪肝中的一种。
CN200910186709A 2009-12-14 2009-12-14 荷丹片在制备治疗脂肪肝药物中的应用 Expired - Fee Related CN101708236B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN200910186709A CN101708236B (zh) 2009-12-14 2009-12-14 荷丹片在制备治疗脂肪肝药物中的应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN200910186709A CN101708236B (zh) 2009-12-14 2009-12-14 荷丹片在制备治疗脂肪肝药物中的应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN101708236A CN101708236A (zh) 2010-05-19
CN101708236B true CN101708236B (zh) 2012-09-19

Family

ID=42401057

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN200910186709A Expired - Fee Related CN101708236B (zh) 2009-12-14 2009-12-14 荷丹片在制备治疗脂肪肝药物中的应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN101708236B (zh)

Families Citing this family (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103191224A (zh) * 2013-04-16 2013-07-10 南昌济顺制药有限公司 荷丹制剂的保肝护肝作用
CN103191225A (zh) * 2013-04-16 2013-07-10 南昌济顺制药有限公司 荷丹制剂在制备预防与治疗血脂紊乱药物中的应用
CN103191221A (zh) * 2013-04-16 2013-07-10 南昌济顺制药有限公司 荷丹制剂的减肥作用
CN103191222B (zh) * 2013-04-16 2014-07-23 南昌济顺制药有限公司 荷丹制剂在制备糖尿病药物中的应用
CN103705594B (zh) * 2013-12-12 2016-02-03 南昌济顺制药有限公司 治疗高脂血症的中药组合物及其制备方法
CN103655791B (zh) * 2013-12-12 2016-11-23 南昌济顺制药有限公司 一种痰瘀同治的荷丹制剂及其应用
CN103749852B (zh) * 2014-01-23 2015-01-07 蓝照斓 一种芦子藤保健茶
CN105456520A (zh) * 2015-12-29 2016-04-06 兖矿集团有限公司总医院 一种治疗酒精性肝病的药物配方及实验方法

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1483429A (zh) * 2002-09-17 2004-03-24 南昌济顺制药有限公司 一种治疗高脂血症的药物

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1483429A (zh) * 2002-09-17 2004-03-24 南昌济顺制药有限公司 一种治疗高脂血症的药物

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
张京春.中药调脂的临床实践.《中国实用内科杂志》.2009,第29卷(第1期), *

Also Published As

Publication number Publication date
CN101708236A (zh) 2010-05-19

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101708236B (zh) 荷丹片在制备治疗脂肪肝药物中的应用
CN102038720B (zh) 一种桦褐孔菌降血糖有效部位及其制备方法与应用
CN101524389B (zh) 芫根多糖用于制备抗缺氧的药物的用途
CN102058632B (zh) 一种药物组合物在制备防治酒精性肝损伤、脂肪肝及降血脂的药物中的应用
CN102349675A (zh) 一种红参饮料及其制作方法
CN101953866A (zh) 一种白背三七总黄酮的制备方法及应用
CN105030984B (zh) 一种具有降糖、调脂及缓解糖尿病并发症的荔枝核保健口服液及制备方法
CN105816505A (zh) 一种治疗糖尿病的中药复方制剂及其制备和应用
CN100427136C (zh) 一种治疗脂肪肝的药物组合物及制备方法和应用
CN102247413B (zh) 续断总皂苷及木通皂苷d的降血脂作用
CN102008598B (zh) 一种降脂护肝组合物、制剂及其制备方法
CN102579530A (zh) 具有抗糖尿病作用的太白楤木总皂苷的制备方法及药物
CN106265717B (zh) 狗肝菜多糖在制备防治糖尿病药物或保健品中的应用
CN106138164A (zh) 一种具有调血脂功能的中药复方制剂
CN103479875A (zh) 一种高活性玉竹浓缩液的制备方法及其应用
CN101406676A (zh) 一种用于治疗脂肪肝的软胶囊及其制备方法
CN101524386B (zh) 用于治疗脂肪肝的中药主要成分组方
CN101612251B (zh) 治原发性肝癌的中药
CN104770817A (zh) 一种蜜枳解酒饮料
CN110403967A (zh) 一种增加人参皂苷Rg3、Rh2含量的人参加工方法及得到的加工人参和应用
CN103191222A (zh) 荷丹制剂在制备糖尿病药物中的应用
CN109985206A (zh) 用于防治酒精性肝损伤的组合物
CN103191224A (zh) 荷丹制剂的保肝护肝作用
CN102430001A (zh) 防治糖尿病的复方蔷薇果黄酮制剂及其制备方法
CN106138518B (zh) 一种降血脂的中药组合物、药物制剂及其制备方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C53 Correction of patent for invention or patent application
CB03 Change of inventor or designer information

Inventor after: He Kainan

Inventor after: An Shaokai

Inventor after: Wang Yiming

Inventor before: He Kainan

COR Change of bibliographic data

Free format text: CORRECT: INVENTOR; FROM: HE KAINAN TO: HE KAINAN AN SHAOKAI WANG YIMING

C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20120919

Termination date: 20191214