CN101703490A

CN101703490A - 聚多糖/无机纳米粒子杂化微纳米载药胶囊

Info

Publication number: CN101703490A
Application number: CN200910154597A
Authority: CN
Inventors: 梁媛媛; 黄志坚; 陈灿玉; 焦艳华
Original assignee: Hangzhou Normal University
Current assignee: Hangzhou Normal University; Xuzhou Normal University
Priority date: 2009-11-13
Filing date: 2009-11-13
Publication date: 2010-05-12
Anticipated expiration: 2029-11-13
Also published as: CN101703490B

Abstract

本发明公开了一种聚多糖/无机纳米粒子杂化微纳米载药胶囊，具有下述结构特征：(1)脂溶性药物A或溶于油状溶剂的脂溶性药物B、带负电的OSA改性多糖衍生物分散剂和水形成的水包油的微乳液囊芯；(2)聚多糖和带负电的无机纳米粒子通过基于静电作用的层层自组装形成的囊壁；(3)微纳米载药胶囊的粒径在50～1000nm之间。本发明提供的微纳米载药胶囊，具有药物原位包埋的高载药率，原料均采用生物相容性好、生物可降解材料，具有良好的生物相容性与生物可降解性。此外，该载药系统具有靶向与控制释放双重“智能”功能。

Description

聚多糖/无机纳米粒子杂化微纳米载药胶囊

(一)技术领域

本发明涉及一种聚合物/无机纳米粒子杂化的微纳米载药胶囊。

(二)背景技术

治疗性药物特别是抗肿瘤药物通常对正常组织和细胞具有较强的毒副作用。因此将药物靶向输送到病灶部位并缓慢释放出来，减少药物在正常组织中的分布和释放，具有重要意义。开发药物传输载药系统成为近年来纳米医药领域研究的热点，是有希望从根本上改变药物治疗效果的途径之一。

脂溶性药物常见载体是脂质体，其制备工艺简单，主要由磷脂通过疏水缔合作用在水中自发形成。脂质体属于热力学不稳定的胶体粒子，容易发生自发融合与沉降；由磷脂非共价力所支持的膜结构也容易发生改变，造成被包埋药物的渗漏。

聚合物胶囊具有聚合物刚性外壳，具有良好的密闭性与稳定性，特别是纳米尺寸的胶囊，用于体内给药时容易被含有丰富网状内皮系统的肝、脾等脏器所摄取，具有被动的肝靶向功能，是一种理想的药物载体。

将功能性纳米粒子引入聚合物胶囊，可以设计制备多功能的聚合物胶囊，从而拓宽了聚合物胶囊的应用领域，是目前的研究热点。如，聚合物载药胶囊中包载金纳米粒子在红外光作用下可发生光吸收共振并产生大量热量，破坏聚合物载药胶囊结构，起到定时、定量释放药物的目的，此外，该热量可引起作用部位局部温度升高，达到除去肿瘤细胞的目的。包载在聚合物胶囊中的磁性纳米粒子在外加磁场作用下，不仅使胶囊具有靶向定位功能，还可发生振动促进局部药物释放，并产生热量，促使局部组织温度升高，起到直接杀死癌细胞的作用，对药物治疗有辅助作用。

常规的聚合物胶囊制备方法主要是溶剂蒸发法、凝聚法、界面聚合法和喷雾干燥法等，获得的胶囊尺寸一般在微米到毫米尺寸，并且很难将纳米粒子引入到聚合物胶囊中。最近，层层自组装法(layer-by-layer，LBL)引起了人们的广泛关注，其原理是通过交替更改层与层组分之间的电荷正负性实现对模板粒子的多层包覆，通过在纳米尺度上对胶囊囊壁的组成、厚度、结构形态、表面状态进行准确的裁控，可以在纳米尺度范围内实现对粒子的设计和剪裁。Iler在1966年就提出了将带正、负电荷的物质通过静电引力层层交替沉积(layer by layer，LbL)的自组装技术。1990年以来，Decher等人把此技术用于在平板上构筑纳米自组装聚电解质多层复合膜(polyelectrolyte multilayer，PEM)。1995年，Keller等报道了用LbL技术在SiO₂表面包裹片状磷酸锆与带电氧化还原聚合物，制备多层复合膜。德国马普胶体与表面研究所的研究者们将LbL技术发展到以纳米或微米直径的胶体粒子为模板的聚电解质自组装，制成了具有核-壳结构的粒子。采用不同的模板和囊壁材料，通过溶解或熔融除去做模板的胶体粒子，可以制备出壁厚为10-40nm的各种纳米或微米胶囊(nano-or micro-capsule)。

用LbL法制备纯聚电解质胶囊和聚电解质/无机纳米粒子杂化或纯无机纳米粒子胶囊的过程一般如下：先将胶体粒子的悬浮液加入到过量的、与其表面电荷极性相反的聚电解质溶液中，利用静电相互吸引作用在胶体粒子表面吸附一层带相反电荷的聚电解质层；通过离心、洗涤除去过量的聚电解质.然后再选择另外一种带相反电荷的聚电解质溶液或无机纳米粒子溶胶，重复上述过程，使聚电解质或无机纳米粒子在胶体粒子表面交替吸附，形成多层膜.由LbL法制备出的核-壳结构粒子，通过溶解或灼烧的方法除去核，即可得到具有纳米或微米直径空腔的胶囊.比如国际专利(WO99/47252)采用带负电聚苯乙烯磺酸钠(PSS)和带正电的聚苯烯胺(PAH)在三聚氰胺甲醛微球(MF)进行多层包覆，最后采用氟化氢除去MF，得到中空聚合物胶囊；上述专利的不足之处在于需要采用MF模板需要通过强酸除去才能得到中空胶囊，步骤繁琐；核溶解时产生的渗透压对胶囊的完整性、尺寸、透过性、表面形态和弹性有很大影响，往往会造称胶囊的破裂.另外，后续药物的负载通常通过囊壁渗透获得，载药率偏低.

对于脂溶性药物，通过LBL法制备载药胶囊，有两种方式，一是将药物溶于水-有机溶剂的混合溶液中，然后蒸发有机溶剂，然后药物通过胶囊壁内外侧的浓度梯度差，进入胶囊内部沉淀，完成载药，该方法不足之处在于载药胶囊制备过程中使用大量的有机溶剂和非生物降解表面活性剂。二是将脂溶性药物结晶作为模板，通过层层自组装完成药物的微囊化，其不足之处在于仍然需要使用有机溶剂使得药物结晶溶解。

目前报道的通过LBL法制备胶囊所采用的囊壁材料主要是PAH、PSS、聚二烯丙基氯化铵(PADAMAC)等，不具有生物相容性与生物可降解性，在生物医药方面的应用受到限制。最近国际专利(WO2008/028264)描述了在海藻酸钠/壳聚糖微胶囊中形成Fe₃O₄纳米粒子获得磁性微胶囊的方法。虽然获得的胶囊具有良好的生物相容性，但其不足之处在于该方法所制备的磁性微胶囊的粒径在微米级(＞100μm)，很难应用于体内血液给药。

(三)发明内容

本发明的首要目的在于克服上述现有技术的不足之处，提供一种具有生物相容性及靶向与控制释放双重“智能”功能的聚多糖/无机纳米粒子载药纳米胶囊。

为实现上述发明目的，本发明采用如下技术方案：

一种微纳米载药胶囊，具有下述结构特征：(1)脂溶性药物A或溶于油状溶剂的脂溶性药物B、带负电的OSA改性多糖衍生物分散剂和水形成的水包油的微乳液囊芯；(2)聚多糖和带负电的无机纳米粒子通过基于静电作用的层层自组装形成的囊壁；(3)微纳米载药胶囊的粒径在50～1000nm之间。

进一步，所述微纳米载药胶囊的粒径优选80～150nm。

本发明通过将脂溶性药物A或溶于油状溶剂的脂溶性药物B制成微乳液，使微乳液滴表面由于分散剂的作用带有电荷，然后在微乳液滴表面通过静电作用进行层层自组装得到所述的载药胶囊。本发明所述的分散剂选用OSA改性多糖衍生物，优选OSA改性淀粉钠、OSA改性纤维素钠、OSA改性葡聚糖钠等，更优选OSA改性淀粉钠，本领域技术人员公知以OSA改性多糖衍生物为分散剂形成的水包油的微乳液滴表面带负电。OSA是辛烯基琥珀酸(Octenyl SuccinicAnhydride)的简称，OSA改性多糖衍生物是指以辛烯基琥珀酸酐分别和淀粉、纤维素或葡聚糖在碱性条件经酯化反应制得的改性的多糖衍生物，通常以Na盐形式出现.如OSA改性淀粉钠即辛烯基琥珀酸酐淀粉衍生物是以辛烯基琥珀酸酐和淀粉经酯化反应制得的，通常以辛烯基琥珀酸淀粉钠的形式出现.用辛烯基琥珀酸酐改性后的淀粉，因具有亲水亲油的两亲性质，是一种优良的乳液分散剂.

本发明所述的脂溶性药物A可为榄香烯、莪术油等油状药物；所述的溶于油状溶剂的脂溶性药物B，油状溶剂优选三甘酸酯，所述的脂溶性药物B可以是紫杉醇等。本发明用A和B对脂溶性药物进行标识，只是用于区分脂溶性药物的两种使用情况，并不表示脂溶性药物A和脂溶性药物B不可以是相同的药物。

本发明所述的聚多糖可以是带正电的聚多糖，即阳离子多糖，所述的阳离子多糖优选下列一种或两种的组合：壳聚糖、季铵盐改性壳聚糖。或者，本发明所述的聚多糖为阳离子多糖和阴离子多糖(即带负电的聚多糖)的组合，所述的阳离子多糖优选下列一种或两种的组合：壳聚糖、季铵盐改性壳聚糖，所述的阴离子多糖优选下列一种或两种的组合：λ-角叉胶、海藻酸钠。季铵盐改性壳聚糖是指以用季铵化试剂对壳聚糖进行改性的壳聚糖，常见的季铵化试剂是3-氯-2-羟丙基三甲基氯化铵(CTA)、2、3-环氧丙基三甲基氯化铵(GTA)等三元环氧衍生物。其反应原理是利用壳聚糖氨基的活性，与三元环氧衍生物发生亲核取代反应。由于壳聚糖季铵盐的季铵基团比壳聚糖原有氨基具有更强的静电吸引力，因此此类壳聚糖季铵盐都适用本发明。

本发明所述的带负电的无机纳米粒子优选带负电的磁性纳米粒子和光敏纳米粒子中的一种或两种的组合。所述的磁性纳米粒子优选下列一种或两种的组合：Fe₃O₄、γ-Fe₂O₃，所述的光敏纳米粒子优选为Au纳米粒子。本发明中，上述无机纳米粒子表面需要带有负电荷，因此通常先采用带有羧酸功能基团的化合物如柠檬酸钠、枸橼酸钠、柠檬酸钠/鞣酸等进行表面修饰，以得到柠檬酸钠改性的Fe₃O₄、柠檬酸钠/鞣酸改性的Au纳米粒子等表面带负电的无机纳米粒子。本发明中使用的带负电的无机纳米粒子，本领域技术人员可以根据现有文献自行制备。

本发明制得的纳米载药胶囊，具有药物原位包埋的高载药率，原料均采用生物相容性好、生物可降解材料，具有良好的生物相容性与生物可降解性。此外，该载药系统具有靶向与控制释放双重“智能”功能。具体来说，光敏纳米粒子如Au纳米粒子在红外线(800-1200nm)的照射下可产生的热量，改变载药胶囊的渗透率，达到可控释放药物的目的，此外，其产生的热量还可以杀死病灶部位的癌变细胞，对肿瘤的治疗具有局部选择性；而磁性纳米粒子可在外加磁场引导下，靶向富集于病灶部位，同时通过共振破坏载药胶囊结构，达到可控释药的目的，另外，共振产生的热量，具有热疗效果。

本发明的第二个目的是提供一种上述微纳米载药胶囊的制备方法，该制备方法同传统的LBL技术不同的是，胶囊制备过程不需要繁琐的洗涤、离心过程，也无须通过灼烧或酸蚀除去模板，再后续载药。而是以OSA改性多糖衍生物为大分子表面活性剂稳定的脂溶性药物微乳液滴作为胶囊构筑的软模板，采用层层自组装和高压均质方法相结合，以获得纳米尺寸的聚合物胶囊，药物的负载在胶囊的制备过程中即可以完成。同时该方法采用了工业常用的高压均质技术，可实现纳米胶囊的工业化生产。

本发明采用的具体技术方案如下：

一种上述微纳米载药胶囊的制备方法：先将脂溶性药物或溶于油状溶剂的脂溶性药物与带负电的OSA改性多糖衍生物分散剂、水制成水包油的微乳液；然后聚多糖和带负电的无机纳米粒子在微乳液滴表面通过静电相互作用进行层层自组装，再经高压均质，得到所述的微纳米载药胶囊。

所述的OSA改性多糖衍生物、聚多糖、带负电的无机纳米粒子的含义和选择同上所述，在此不再赘述。

微乳液是至少由水相、油相、分散剂等物质以适当比例、适当条件分散成的一种透明或半透明的、低粘度的、稳定的特殊乳状液。它的分散质点的粒径在10nm～100nm之间，故也叫纳米乳液。本发明所述的微乳液具体按照如下方法制备：将脂溶性药物、带负电的OSA改性多糖衍生物分散剂、水按照质量比1∶1～0.5∶20～10投料，在强分散条件下形成水包油的微乳液。所述的强分散条件具体推荐如下：15000～23000rpm条件下剧烈机械搅拌，然后在高压均质机中800～1000bar条件下均质4～6次。在上述条件下，本发明可以制得粒径在50nm～100nm的微乳液。

本发明在制得微乳液后，先在剧烈搅拌下向微乳液中加入与其微乳液滴表面电荷极性相反的聚多糖溶液，利用静电相互吸引作用在带负电的微乳液滴表面吸附一层阳离子多糖层；然后再选择另外一种阴离子多糖溶液或带负电的无机纳米粒子溶胶，重复上述过程，使聚多糖和无机纳米粒子在胶体粒子表面交替吸附，形成多层膜。本发明中聚多糖和带负电的无机纳米粒子通常用水进行分散，但本领域技术人员可根据实际采用的聚多糖或带负电的无机纳米粒子的溶解性和分散性能以及常规技术手段进行适应性调整，比如壳聚糖，其必须在酸性条件下溶解，通常采用盐酸或者醋酸溶液作为溶剂。本发明推荐阳离子多糖溶液的浓度为0.2％～0.5％(w/w)，阴离子多糖溶液或带负电的无机纳米粒子溶胶的浓度控制在0.3％～0.6％(w/w)，需要在18000rpm～23000rpm强搅拌条件下加入。本发明可根据所需纳米胶囊的机械强度以及囊壁的厚度要求和性能要求，选择聚多糖和无机纳米离子，阳离子多糖和阴离子多糖均可以取一种或多种混合使用，即每一自组装层在满足电性要求外，可根据性能要求选择材料。

本发明在层层自组装完成后，将所得分散液加入到高压均质机中均质，本发明推荐在高压均质机中800～1000bar的条件下均质4～6次。均质后离心得到所述的载药胶囊，将其置于水中保存。

本发明与现有技术相比，具有如下优点和有益效果：

a)本发明所述的载药胶囊，以OSA改性的多糖衍生物分散的脂溶性药物或溶于油相的脂溶性药物的微乳液滴为囊芯，以聚多糖/无机纳米粒子为胶囊壁。如此实现了高效率的药物原位包载；所有原料均采用生物相容性好、生物可降解材料，尤其是分散剂使用OSA改性的多糖衍生物，避开了十二烷基苯磺酸钠、十二烷基硫酸钠等常规不易降解分散剂的使用，使得载药胶囊具有良好的生物相容性与生物可降解性；本发明在制备胶囊壁时采用层层自组装技术，使得载药胶囊尺寸在纳米至微米可调，由于胶囊壁中无机纳米粒子层的存在，具有靶向与控制释放双重“智能”功能。

b)本发明所述载药胶囊的制备方法，以脂溶性药物或溶于油相的脂溶性药物制成的微乳液滴为软模板，不涉及有机溶剂的使用，生物相容性好，且可一步完成药物负载，获得的胶囊载药率可达到80％以上。

(四)附图说明

图1是本发明所述的聚多糖/无机纳米粒子杂化微纳米载药胶囊的结构示例图；其中①为脂溶性药物或溶于油相的脂溶性药物，②为OSA改性淀粉钠，③聚多糖层，由阳离子多糖的一种或多种组成，④无机纳米粒子.

(五)具体实施方法

下面以具体实施例对本发明的技术方案做进一步说明，但本发明的保护范围不限于此：

一、纳米乳液的制备：固定油相的加入量，配置一系列[油相/分散剂＝1∶1～0.5]混合液，其中油相为脂溶性药物如榄香烯、紫杉醇/中链三酸甘油酯溶液、莪术油中的一种，分散剂为OSA改性淀粉钠(德清三富食品有限公司，Puritygum2000)，在强分散条件下形成水包油的纳米乳液。

实施例1：以榄香烯、OSA改性淀粉钠溶液为例进行说明

在常温下，将脂溶性药物榄香烯加入到5wt％OSA改性淀粉水溶液中，浓度控制在5wt％，15000～18000rpm条件下剧烈机械搅拌，然后将上述粗乳液加入到高压均质机中(100bar)均质4遍，得到纳米乳液。

实施例2：以紫杉醇/中链三酸甘油酯、OSA改性淀粉钠溶液为例进行说明

将5g紫杉醇溶解于50ml中链甘油三酸酯(Miglyol 812，上海国药集团化学试剂有限公司)，充分搅拌得10wt％(w/w)紫杉醇油相溶液。在常温下，将制备的50mL 10wt％(w/w)的紫杉醇溶液加入到50mL的OSA改性淀粉(5wt％)水相介质中，15000～18000rpm条件下剧烈机械搅拌，然后将上述粗乳液加入到高压均质机中(100bar)均质4遍，得到纳米乳液。

实施例3：以莪术油、OSA改性淀粉钠溶液进行说明。

在常温下，将莪术油加入到OSA改性淀粉(5wt％)水相介质中，浓度控制在10wt％，15000～18000rpm条件下剧烈机械搅拌，然后将上述粗乳液加入到高压均质机中(100bar)均质4遍，得到纳米乳液。

二、胶囊的制备：以纳米乳液中的油相液滴为软模板，以壳聚糖、2-羟丙基三甲基壳聚糖季铵盐中的一种或多种作为聚阳离子，以海藻酸钠、λ-角叉胶、表面带负电荷的Fe₃O₄/Fe₂O₃磁性纳米粒子以及Au纳米粒子的一种或多种为聚阴离子，通过层层自组装在高压均质条件下形成杂化微纳米载药胶囊。

实施例4：结合纳米乳液体系，以榄香烯为油相，OSA改性淀粉钠为分散剂、壳聚糖为聚阳离子，柠檬酸钠表面改性的Fe₃O₄纳米离子为聚阴离子为例进行说明，并对胶囊平均粒径和载药率进行考察。

(1)柠檬酸钠改性的Fe₃O₄的制备

称取0.85g FeCl₃·6H₂O与0.30g FeCl₂·4H₂O，在氮气保护下将其溶解于200mL二次纯水中；待溶解完全，在60℃快速机械搅拌下滴加10mL浓度为1.5mol/L的NaOH溶液，并继续搅拌反应2h；然后升温至90℃陈化2h，经洗涤和磁分离直至中性后放入真空干燥箱内，在30℃下真空干燥24h。取1.00g Fe₃O₄干燥粉末，加入经N₂除氧的200mL 0.5mol/L的柠檬酸钠溶液中，在超声下使Fe₃O₄粉术充分分散，获得均匀的Fe₃O₄胶体分散体系，然后在60℃下氮气氛中机械搅拌12h，待体系冷却到室温后，用磁铁将产物从水相中分散出来，并用纯水洗涤1～2次后重新分散在100mL的纯水中，制备得到浓度为0.3％的柠檬酸钠稳定的Fe₃O₄磁性纳米粒子。

(2)载药胶囊的制备

5min内向18000rpm剧烈搅拌的100mL实施例1制得的纳米乳液(榄香烯/OSA改性淀粉钠＝1∶1)缓慢滴加10mL 0.2％的壳聚糖醋酸溶液，最后22000rpm搅拌l min；同样，在5min内继续向18000rpm剧烈搅拌的上述溶液中滴加10mL 0.3％柠檬酸钠改性的Fe₃O₄分散液，最后22000rpm搅拌1min；同样，在5min内向18000rpm剧烈搅拌的溶液中滴加10mL 0.2％壳聚糖醋酸溶液，22000rpm搅拌1min，最后，将上述分散液加入到高压均质机内(800bar)均质4遍后，离心15min，除去未成囊的聚电解质复合物以及无机纳米粒子，得到成型胶囊转移到10mL水中保存。

胶囊的平均粒径采用动态光散射测定，He-Ne激光源波长为532nm，平均粒径由Mean diameter-Intensity的分布图得到入射波长为532nm。本实施实例的榄香烯载药胶囊的平均粒径为1000nm以下。

载药胶囊的载药率采用HPLC测定，用乙腈稀释，20μl进样。色谱条件：Altima C18柱(5μm，4.6mm×150mm)，进样温度33℃，流动相乙腈/水(50∶50，v/v)，流速1.0ml/min，251nm检测。

载药率：LC％＝(投入的总药量-上清液中未被包埋的总的总药量)/投入的总药量

本实施实例制备的榄香烯载药胶囊的包封率可达到80％以上。

实施例5：结合纳米乳液体系，以榄香烯为油相，OSA改性淀粉钠为分散剂、2-羟丙基三甲基壳聚糖季铵盐为聚阳离子，柠檬酸钠表面改性的Fe₃O₄纳米离子为聚阴离子为例进行说明

(1)柠檬酸钠改性的Fe₃O₄的制备

同实施例4

(2)2-羟丙基三甲基壳聚糖季铵盐的制备

将3.0g壳聚糖溶于120mL 10％的醋酸溶液中，加入乙醇60mL后室温搅拌下30min内逐渐滴加苯甲醛15.8g，继续搅拌1h后胶状物于烘箱(55℃～60℃)中放置20h，加稀NaOH溶液调pH至中性，析出沉淀，过滤，固体用甲醇多次洗涤除去未反应的苯甲醛，得纤维状浅黄色固体。将上述产物2.75g置于圆底烧瓶中，加入异丙醇50mL和2，3-环氧丙基三甲基氯化铵9.0g，水浴70℃搅拌反应16h，过滤，依次用甲醇、丙酮洗涤沉淀，得乳白色固状物即O-季铵盐-N-苯亚甲基壳聚糖。将3.0g上述产物加入50mL 0.25mol/L的HCl乙醇溶液中室温搅拌24h后蒸去大部分乙醇，得胶状物，加入15mL H₂O充分溶解，再用丙酮沉淀，过滤，固体于烘箱(80℃)中烘干，得浅灰色固状物即为2-羟丙基三甲基壳聚糖季铵盐。

(3)载药胶囊的制备

在5min内向18000rpm剧烈搅拌的100mL实施例1制得的纳米乳液(榄香烯/OSA改性淀粉钠＝1∶1)缓慢滴加10mL 0.1％的2-羟丙基三甲基壳聚糖季铵盐溶液，最后22000rpm搅拌1min；同样，在5min内继续向18000rpm剧烈搅拌的上述溶液中滴加10mL 0.3％柠檬酸钠改性的Fe₃O₄分散液，最后22000rpm搅拌1min；同样，在5min内向18000rpm剧烈搅拌的溶液中滴加10mL 0.1％2-羟丙基三甲基壳聚糖季铵盐溶液，22000rpm搅拌1min。最后将上述分散液加入到高压均质机内(800bar)均质4遍后，离心15min，除去未成囊的聚电解质复合物以及无机纳米粒子，得到成型胶囊转移到10mL水中保存。

胶囊的平均粒径测定同实施例4。实施例的榄香烯载药胶囊的平均粒径为1000nm以下。

胶囊的载药率测定同实施例4。实施例制备的榄香烯载药胶囊的载药率包封率为80％以上。

实施例6：结合纳米乳液体系，以紫杉醇/中链三酸甘油酯溶液为油相，OSA改性淀粉钠为分散剂、壳聚糖为聚阳离子，柠檬酸钠表面改性的Fe₃O₄纳米离子为聚阴离子为例进行说明。

(1)柠檬酸钠改性的Fe₃O₄的制备

同实施实例4

(2)载药胶囊的制备

5min内向18000rpm剧烈搅拌的100mL实施例2制得的纳米乳液(紫杉醇中链三酸甘油酯溶液/OSA改性淀粉钠＝1∶0.5)缓慢滴加10mL 0.2％的壳聚糖醋酸溶液，最后22000rpm搅拌1min；同样，在5min内继续向18000rpm剧烈搅拌的上述溶液中滴加10mL 0.3％柠檬酸钠改性的Fe₃O₄分散液，最后22000rpm搅拌1min；同样，在5min内向18000rpm剧烈搅拌的溶液中滴加10mL 0.2％壳聚糖醋酸溶液，22000rpm搅拌1min，最后将上述分散液加入到高压均质机内(800bar)均质4遍后，离心15min，除去未成囊的聚电解质复合物以及无机纳米粒子，得到成型胶囊转移到10mL水中保存。

胶囊的平均粒径测定同实施例4。实施实例的紫杉醇载药胶囊的平均粒径为1000nm以下。

载药胶囊的载药率采用HPLC测定，用乙酸乙酯稀释，20μl进样。色谱条件：Altima C18柱(4.6mm×150mm)，进样温度35℃，流动相甲醇/水乙腈/(20∶30∶50，v/v)，流速1.0ml/min，228nm检测。

本实施例制备的紫杉醇载药胶囊的包封率可达到80％以上。

实施例7：结合纳米乳液体系，以莪术油为油相，OSA改性淀粉钠为分散剂、壳聚糖为聚阳离子，柠檬酸钠/鞣酸改性的Au纳米粒子为聚阴离子为例进行说明。

(1)柠檬酸钠/鞣酸改性的Au纳米粒子的制备

取质量分数为1％的柠檬酸钠水溶液4ml，加入浓度为0.1mol/L的碳酸钾溶液0.025ml，质量分数为1％的鞣酸0.1ml，双蒸水15.9ml组成还原保护试剂；取质量分数为1％的氯金酸1ml，双蒸水79ml组成氯金酸水溶液；在60℃、360～400r/min搅拌速度的条件下，将还原保护试剂加入到氯金酸水溶液中，继续搅拌15min，冷却至室温，得到Au纳米粒子。

(2)载药胶囊的制备

室温下，5min内向18000rpm剧烈搅拌的100mL实施例3制得的纳米乳液(莪术油/OSA改性淀粉钠＝1∶0.5)缓慢滴加10mL 0.2％的壳聚糖醋酸溶液，最后22000rpm搅拌1min，在5min内向18000rpm剧烈搅拌的上述纳米乳液缓慢滴加10mL 0.2％的壳聚糖醋酸溶液，最后22000rpm搅拌1min；同样，在5min内继续向18000rpm剧烈搅拌的上述溶液中滴加10mL 0.3％柠檬酸钠/鞣酸改性的Au纳米粒子分散液，最后22000rpm搅拌1min；同样，在5min内向18000rpm剧烈搅拌的溶液中加入10mL 0.2％壳聚糖醋酸溶液，22000rpm搅拌1min。最后将上述分散液加入到高压均质机内(800bar)均质4遍后，离心15min，除去未成囊的聚电解质复合物以及无机纳米粒子，得到成型胶囊转移到10mL水中保存。

胶囊的平均粒径测定同实施例4。本实施实例制备的莪术油载药胶囊的平均粒径为1000nm以下。

载药胶囊的载药率采用HPLC测定，用乙醇稀释，20μl进样。色谱条件：Altima C18柱(4.6mm×150mm)，进样温度33℃，流动相乙腈/水(65∶35，v/v)，流速1.0ml/min，254nm检测。

本实施例制备的莪术油载药胶囊的包封率可达到80％以上。

Claims

1.一种微纳米载药胶囊，具有下述结构特征：(1)脂溶性药物A或溶于油状溶剂的脂溶性药物B、带负电的OSA改性多糖衍生物分散剂和水形成的水包油的微乳液囊芯；(2)聚多糖和带负电的无机纳米粒子通过基于静电作用的层层自组装形成的囊壁；(3)微纳米载药胶囊的粒径在50～1000nm之间。

2.如权利要求1所述的微纳米载药胶囊，其特征在于所述的脂溶性药物A为榄香烯或莪术油。

3.如权利要求1所述的微纳米载药胶囊，其特征在于所述的油状溶剂为三甘酸酯。

4.如权利要求1所述的微纳米载药胶囊，其特征在于所述的OSA改性多糖衍生物为下述的一种或数种的组合：OSA改性淀粉钠，OSA改性纤维素钠，OSA改性葡聚糖钠。

5.如权利要求1所述的微纳米载药胶囊，其特征在于所述的聚多糖为阳离子多糖，所述的阳离子多糖选自下列一种或两种的组合：壳聚糖或季铵盐改性壳聚糖。

6.如权利要求1所述的微纳米载药胶囊，其特征在于所述的聚多糖为阳离子多糖和阴离子多糖的组合，所述的阳离子多糖选自下列一种或两种的组合：壳聚糖或季铵盐改性壳聚糖；所述的阴离子多糖选自下列一种或两种的组合：λ-角叉胶或海藻酸钠。

7.如权利要求1所述的微纳米载药胶囊，其特征在于所述的无机纳米粒子为磁性纳米粒子或光敏纳米粒子之一或两种的组合。

8.如权利要求7所述的微纳米载药胶囊，其特征在于所述的磁性纳米粒子选自下列一种或两种的组合：Fe₃O₄或λ-Fe₂O₃。

9.如权利要求7所述的微纳米载药胶囊，其特征在于所述的光敏纳米粒子为Au纳米粒子。