CN101703480B - 明胶-壳聚糖/蒙脱土载药微球及制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种明胶-壳聚糖/蒙脱土载药微球及制备方法，载药微球用下述方法制成：将亲水性药物溶于明胶水溶液中，加入蒙脱土悬浮水溶液，插层反应，得到溶液A；壳聚糖溶于醋酸水溶液中，搅拌，溶解，得溶液B；将液体石蜡和司盘-80搅拌乳化，得到C；将B溶液加入A溶液中，插层反应，加入C，搅拌，静置，滴加戊二醛水溶液，交联固化，加入异丙醇搅拌，静置分层后弃去上清液并真空抽滤，除去液体；依次用无水乙醚和异丙醇清洗，干燥，得到微球。本发明的载药微球具有良好的组织相容性，低毒或无毒，是性能优良的药物载体材料。本发明的方法可减少化学交联剂用量，降低微球的毒性，并使释药速率明显降低，进一步提高对药物的缓控释能力。

Description

明胶-壳聚糖/蒙脱土载药微球及制备方法

技术领域

本发明属于医药工程的药物制剂领域，涉及一种载药高分子微球，特别是明胶-壳聚糖/蒙脱土载药微球及其制备方法。

背景技术

近年来，可生物降解的高分子材料作为药物载体在医药上的应用愈来愈引人注目，尤其是将药物包裹于高分子材料中制备的载药微球。微球可在体内特异性分布，利用对指定器官、组织的靶向性和药物的缓释性来降低药物的毒副作用，提高药物的生物利用度，减少给药次数和药量，减轻患者的痛苦，最大限度减少药物的毒副作用。

一些亲水性药物，如阿昔洛韦、5-氟嘧啶、阿霉素、庆大霉素、氧氟沙星、牛血清白蛋白、胰岛素等，由于其半衰期短，必须每天服用多次，给药次数多，病人顺应性较差，易产生漏服现象。因此有必要将这些药物制成缓释制剂，减少服药次数，提高生物利用度、维持有效的血药浓度，使药效持续时间延长。

蒙脱土(Montmorillonite，简称MMT)具有层纹状结构及非均匀性电性分布，对消化道内的一些病毒、病菌及毒素产生较强的选择性吸附作用。如由法国益普生公司研制的思密达(Smecta)就是以蒙脱土为主要成分的消化道粘膜保护剂。思密达作为粘膜吸附剂的药理作用表现为能加强粘膜屏障，抑制病毒和病菌，保持肠道微生物生态平衡(M T D Lefaix，YDrouet，B Schatz，Sodium glycodcoxycholate and sprinability of gastrointestinalmucous：protective effect of smectite，Gastroenterology，1985，88(2)：1369-1370)。在临床上用于急、慢性腹泻、食管炎、慢性胃炎及放化疗消化道副作用、以及口腔溃疡的治疗。

蒙脱土与人体有很好的相容性，对人体也不会产生毒副作用，已成功的应用于医药、化妆品等领域。蒙脱土由于具有吸水性、悬浮性、分散性、粘结性、触变性，使其作为制剂辅料具有乳化、增稠、助悬、吸附的功能，是优良的药用辅料。正因为它与人体有良好的相容性，而且没有毒副作用，适合作为缓控释制剂。最近，Aguzzi等(C Aguzzi，P Cerezo，C Viseras，et al，Use of clays as drug delivery systems：possibilities and limitations，Appl Clay Sci，2007，36：22-36)综述了药物-粘土的相互作用，以及将天然粘土及其半合成、合成衍生物用于新型药物传递系统的研究进展。Lin等(F H Lin，Y H Lee，C H Jian，et al，A study of purifiedmontmorillonite intercalated with 5-fluorouracil as drug carrier，Biomaterials，2002，23(9)：1981-1987)以蒙脱土作为载体，制备了治疗结肠癌药物5-氟尿嘧啶/蒙脱土插层材料，确定了制备过程中最佳反应条件(药物浓度、反应时间、反应温度、pH值等)，蒙脱土作为插层材料有望在结肠癌的定位治疗中得以应用。

明胶(Gelatin)和壳聚糖(Chitosan)属于天然高分子材料，它们具有良好的生物降解性，并且它们的生物相容性好，因而可以利用它们的这些优良的生物特性制备药物载体材料。但是明胶-壳聚糖复合微球作为药物载体体系尚有下述不足，明胶和壳聚糖在制成微球的过程中需使用化学交联剂进行交联，而化学交联剂对人体有一定毒性，因此，如何降低载药微球的毒性并有效的控制药物释放成为研究者普遍关注的问题。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术中存在的不足，提供一种降低载药微球毒性并有效的控制药物释放的明胶-壳聚糖/蒙脱土载药微球。

本发明的第二个目的是提供一种明胶-壳聚糖/蒙脱土载药微球的制备方法。

本发明的技术方案概述如下：

一种明胶-壳聚糖/蒙脱土载药微球，用下述方法制成：

(1)将亲水性药物溶于质量浓度为1％-5％的分子量为10万的明胶水溶液中，所述亲水性药物与明胶的质量比为0.15-0.75∶1，以1-3滴/s的速度滴加入经超声波处理后的质量浓度为1％-2％的蒙脱土悬浮水溶液，所述蒙脱土与所述明胶的质量比为0.02-0.3∶1，在50-70℃恒温搅拌下，插层反应40min-90min，得到溶液A；

(2)把分子量为30万的壳聚糖溶于1％-3％的醋酸水溶液中，并快速搅拌，直至壳聚糖完全溶解，配制成壳聚糖的质量浓度为2％的溶液为B；

(3)将体积比为18-20∶1的液体石蜡和乳化剂司盘-80于60℃-80℃恒温搅拌乳化30min-50min，得到乳液C；

(4)将B溶液以1～3滴/s的速度滴加入所述A溶液中，插层反应60min-80min，加入乳液C，搅拌30min-60min，在-5-5℃，静置60min-80min，以1～3滴/s的速度滴加质量浓度为10％的戊二醛水溶液，交联固化2h-3h，然后加入异丙醇搅拌30min-60min，静置分层后弃去上清液并真空抽滤，除去液体；所述B溶液、A溶液、乳液C、质量浓度为10％的戊二醛水溶液和异丙醇的体积比为10∶10.1-25∶190-210∶0-8∶30-40；

(5)依次用无水乙醚和异丙醇清洗，干燥，得到粒径为3-10μm的明胶-壳聚糖/蒙脱土载药微球。

所述步骤(1)优选的是：将亲水性药物溶于质量浓度为2％的分子量为10万的明胶水溶液中，所述亲水性药物与明胶的质量比为0.5∶1，以1-3滴/s的速度滴加入经超声波处理后的质量浓度为1.5％的蒙脱土悬浮水溶液，所述蒙脱土与所述明胶的质量比为0.02-0.3∶1，在50-70℃恒温搅拌下，插层反应60min，得到溶液A。

所述步骤(4)优选的是：将B溶液以1～3滴/s的速度滴加入所述A溶液中，插层反应70min加入乳液C，搅拌40min，降温至0℃，静置70min，以1～3滴/s的速度滴加质量浓度为10％的戊二醛水溶液，交联固化2.5h，然后加入异丙醇搅拌40min，静置分层后弃去上清液并真空抽滤，除去液体；所述B溶液、A溶液、乳液C、质量浓度为10％的戊二醛水溶液和异丙醇的体积比为10∶11∶200∶2.5∶35。

所述亲水性药物为阿昔洛韦、5-氟嘧啶、氧氟沙星或牛血清白蛋白。

一种明胶-壳聚糖/蒙脱土载药微球的制备方法，由如下步骤组成：

(1)将亲水性药物溶于质量浓度为1％-5％的分子量为10万的明胶水溶液中，所述亲水性药物与明胶的质量比为0.15-0.75∶1，以1-3滴/s的速度滴加入经超声波处理后的质量浓度为1％-2％的蒙脱土悬浮水溶液，所述蒙脱土与所述明胶的质量比为0.02-0.3∶1，在50-70℃恒温搅拌下，插层反应40min-90min，得到溶液A；

(2)把分子量为30万的壳聚糖溶于1％-3％的醋酸水溶液中，并快速搅拌，直至壳聚糖完全溶解，配制成壳聚糖的质量浓度为2％的溶液为B；

(3)将体积比为18-20∶1的液体石蜡和乳化剂司盘-80于60℃-80℃恒温搅拌乳化30min-50min，得到乳液C；

(4)将B溶液以1～3滴/s的速度滴加入所述A溶液中，插层反应60min-80min，加入乳液C，搅拌30min-60min，在-5-5℃，静置60min-80min，以1～3滴/s的速度滴加质量浓度为10％的戊二醛水溶液，交联固化2h-3h，然后加入异丙醇搅拌30min-60min，静置分层后弃去上清液并真空抽滤，除去液体；所述B溶液、A溶液、乳液C、质量浓度为10％的戊二醛水溶液和异丙醇的体积比为10∶10.1-25∶190-210∶0-8∶30-40；

(5)依次用无水乙醚和异丙醇清洗，干燥，得到粒径为3-10μm的明胶-壳聚糖/蒙脱土载药微球。

所述步骤(1)为：将亲水性药物溶于质量浓度为2％的分子量为10万的明胶水溶液中，所述亲水性药物与明胶的质量比为0.5∶1，以1-3滴/s的速度滴加入经超声波处理后的质量浓度为1.5％的蒙脱土悬浮水溶液，所述蒙脱土与所述明胶的质量比为0.02-0.3∶1，在50-70℃恒温搅拌下，插层反应60min，得到溶液A。

所述步骤(4)为：将B溶液以1～3滴/s的速度滴加入所述A溶液中，插层反应70min加入乳液C，搅拌40min，降温至0℃，静置70min，以1～3滴/s的速度滴加质量浓度为10％的戊二醛水溶液，交联固化2.5h，然后加入异丙醇搅拌40min，静置分层后弃去上清液并真空抽滤，除去液体；所述B溶液、A溶液、乳液C、质量浓度为10％的戊二醛水溶液和异丙醇的体积比为10∶11∶200∶2.5∶35。

所述亲水性药物为阿昔洛韦、5-氟嘧啶、氧氟沙星或牛血清白蛋白。

本发明的明胶-壳聚糖/蒙脱土载药微球具有良好的组织相容性，低毒或无毒，是性能优良的药物载体材料。本发明所采用的材料来源广泛，成本低廉。通过调节蒙脱土的比例来调节载药量与包封率和体外模拟释放速率。

本发明的方法可以减少化学交联剂的用量，降低微球的毒性，并使释药速率明显降低，进一步提高对药物的缓控释能力，在医药工程中有很好的应用前景。

附图说明

图1为本发明实施例1所得微球的SEM照片；

图2为本发明实施例2所得微球的SEM照片；

图3为本发明实施例3所得微球的SEM照片；

图4中a，b，c，d四条曲线分别为本发明实施例4，5，6，7所得微球在模拟胃液(pH＝1.26)中的累积释放率曲线；

图5中a，b，c三条曲线为本发明实施例8，9，10所得微球在模拟胃液(pH＝1.26)中的累积释放率曲线；

图6中b曲线为本发明实施例11所得微球在模拟胃液(pH＝1.26)中的累积释放率曲线；

a曲线为本发明对比例所得微球在模拟胃液(pH＝1.26)中的累积释放率曲线。在图4、5和6中，横坐标为时间t(min)，纵坐标为累计释放率Er(％)。

图7为本发明实施例5得到微球的光学显微镜照片。

具体实施方式

本发明得到的明胶-壳聚糖/蒙脱土载药微球可采用以下方式进行性能评价

一、微球的粒径

本发明所得到微球的光学显微镜照片如图7所示，粒径范围为3～10μm。

二、载药量与包封率

精确称取50mg的载药微球，放入具塞三角瓶中，加入100ml 5mol/L的HCl，放入恒温水浴振荡器中振荡24h，温度37℃，振荡速度100rpm。离心此混悬液，吸取上层清液测定吸光度，对照标准曲线，计算出载药量与包封率。

三、体外模拟释放行为评价

精确称取50mg载药微球，置于透析袋中，用5ml预热的释放液分散微球，密封后放入含有95ml释放液的具塞三角瓶中，放入恒温水浴振荡器中，温度37℃，振荡速度100rpm。在适当的时间间隔取样，每次取样5ml，同时用预热的5ml释放介质补充。用紫外分光度计测定所取释放液的吸光度，通过以下公式计算累积释放率(Er)：

$\mathrm{Er}=\frac{\mathrm{Ve}\underset{i}{\overset{n-1}{\mathrm{\Σ}}}\mathrm{Ci}+\mathrm{VoCn}}{m}\×100\%$

其中：Er为ACV的累积释放率，％；Ve为释放介质置换体积，5ml；Vo为起始释放液体积，100ml；Ci为第i次置换时，释放液中药物的浓度，μg/ml；m为微球中药物质量，μg；n为置换次数。

下面结合具体实施例对本发明作进一步的说明。

实施例1

(1)称取亲水性药物氧氟沙星溶于10ml质量浓度为1％的分子量为10万的明胶水溶液中，氧氟沙星与明胶的质量比为0.5∶1，以1滴/s的速度滴加经超声波处理后的质量浓度为2％的蒙脱土悬浮水溶液，蒙脱土与明胶的质量比为0.02∶1，在50℃恒温搅拌下，插层反应40min，得到溶液A；

(2)把分子量为30万的壳聚糖溶于1％的醋酸水溶液中，并快速搅拌，直至壳聚糖完全溶解，配制成壳聚糖的质量浓度为2％的溶液为B；

(3)将体积比为18∶1的液体石蜡和乳化剂司盘-80于60℃恒温搅拌乳化30min，搅拌速度400rpm，得到乳液C；

(4)将10ml B溶液以2滴/s的速度滴加入10.1ml A溶液中，插层反应60min，加入190ml乳液C，搅拌30min，在0℃，静置60min，以1滴/s的速度滴加1ml质量浓度为10％的戊二醛水溶液，交联固化2h，然后加入30ml异丙醇搅拌30min，静置分层后弃去上清液并真空抽滤，除去液体；

(5)依次用无水乙醚和异丙醇清洗，干燥，得到粒径为3-10μm的明胶-壳聚糖/蒙脱土载药微球。

精确称取50mg的载药微球，放入具塞三角瓶中，加入100ml 5mol/L的HCl，放入恒温水浴振荡器中振荡24h，温度37℃，振荡速度100rpm。离心此混悬液，吸取上层清液测定吸光度，对照标准曲线，计算得到载药量为81.21mg/g，包封率为57.2％。

精确称取50mg载药微球，置于透析袋中，用5ml预热的释放液分散微球，密封后放入含有95ml释放液的具塞三角瓶中，放入恒温水浴振荡器中，温度37℃，振荡速度100rpm。在适当的时间间隔取样，每次取样5ml，同时用预热的5ml释放介质补充。用紫外分光度计测定所取释放液的吸光度，得出这种微球有缓慢释放药物的功效，微球的释放速度比较平稳，药物在480min内释放达85.26％。用扫描电镜观察微球，其照片如图1。

实施例2

(1)称取亲水性药物氧氟沙星溶于10ml质量浓度为2％的分子量为10万的明胶水溶液中，氧氟沙星与明胶的质量比为0.15∶1，以2滴/s的速度滴加经超声波处理后的质量浓度为1.5％的蒙脱土悬浮水溶液，蒙脱土与明胶的质量比为0.2∶1，在60℃恒温搅拌下，插层反应80min，得到溶液A；

(2)把分子量为30万的壳聚糖溶于2％的醋酸水溶液中，并快速搅拌，直至壳聚糖完全溶解，配制成壳聚糖的质量浓度为2％的溶液为B；

(3)将体积比为19∶1的液体石蜡和乳化剂司盘-80于70℃恒温搅拌乳化40min，搅拌速度400rpm，得到乳液C；

(4)将10ml B溶液以2滴/s的速度滴加入12.7ml A溶液中，插层反应70min，加入200ml乳液C，搅拌50min，在0℃，静置70min，以2滴/s的速度滴加2ml质量浓度为10％的戊二醛水溶液，交联固化3h，然后加入40ml异丙醇搅拌40min，静置分层后弃去上清液并真空抽滤，除去液体；

(5)依次用无水乙醚和异丙醇清洗，干燥，得到粒径为3-10μm的明胶-壳聚糖/蒙脱土载药微球。

微球载药量为60.58mg/g，包封率为51.39％。

微球的释放速度比较平稳，药物在480min内释放达69.77％。用扫描电镜观察微球，其照片如图2。

实施例3

(1)称取亲水性药物氧氟沙星溶于10ml质量浓度为5％的分子量为10万的明胶水溶液中，氧氟沙星与明胶的质量比为0.75∶1，以2滴/s的速度滴加经超声波处理后的质量浓度为1％的蒙脱土悬浮水溶液，蒙脱土与明胶的质量比为0.3∶1，在70℃恒温搅拌下，插层反应90min，得到溶液A；

(2)把分子量为30万的壳聚糖溶于3％的醋酸水溶液中，并快速搅拌，直至壳聚糖完全溶解，配制成壳聚糖的质量浓度为2％的溶液为B；

(3)将体积比为20∶1的液体石蜡和乳化剂司盘-80于80℃恒温搅拌乳化50min，搅拌速度400rpm，得到乳液C；

(4)将10ml B溶液以2滴/s的速度滴加入25mlA溶液中，插层反应80min，加入210ml乳液C，搅拌60min，在0℃，静置80min，以2滴/s的速度滴加4ml质量浓度为10％的戊二醛水溶液，交联固化3h，然后加入35ml异丙醇搅拌60min，静置分层后弃去上清液并真空抽滤，除去液体；

(5)依次用无水乙醚和异丙醇清洗，干燥，得到粒径为3-10μm的明胶-壳聚糖/蒙脱土载药微球。

微球载药量为100.02mg/g，包封率为60.14％。

微球的释放速度比较平稳，药物在480min内释放达53.12％。用扫描电镜观察微球，其照片如图3。

实施例4

(1)称取亲水性药物阿昔洛韦溶于10ml质量浓度为2％的分子量为10万的明胶水溶液中，阿昔洛韦与明胶的质量比为0.25∶1，以2滴/s的速度滴加经超声波处理后的质量浓度为2％的蒙脱土悬浮水溶液，蒙脱土与明胶的质量比为0.02∶1，在60℃恒温搅拌下，插层反应60min，得到溶液A；

(2)把分子量为30万的壳聚糖溶于2％的醋酸水溶液中，并快速搅拌，直至壳聚糖完全溶解，配制成壳聚糖的质量浓度为2％的溶液为B；

(3)将体积比为20∶1的液体石蜡和乳化剂司盘-80于60℃恒温搅拌乳化30min，搅拌速度400rpm，得到乳液C；

(4)将10ml B溶液以2滴/s的速度滴加入10.2ml A溶液中，插层反应60min，加入210ml乳液C，搅拌30min，在0℃，静置60min，以2滴/s的速度滴加2.5ml质量浓度为10％的戊二醛水溶液，交联固化2h，然后加入40ml异丙醇搅拌60min，静置分层后弃去上清液并真空抽滤，除去液体；

(5)依次用无水乙醚和异丙醇清洗，干燥，得到粒径为3-10μm的明胶-壳聚糖/蒙脱土载药微球。

微球载药量为62.28mg/g，包封率为49.82％。

微球的释放速度比较平稳，药物在480min内释放达40.49％。见图4-a。

实施例5

(1)称取亲水性药物阿昔洛韦溶于10ml质量浓度为2％的分子量为10万的明胶水溶液中，阿昔洛韦与明胶的质量比为0.25∶1，以2滴/s的速度滴加经超声波处理后的质量浓度为2％的蒙脱土悬浮水溶液，蒙脱土与明胶的质量比为0.1∶1，在70℃恒温搅拌下，插层反应70min，得到溶液A；

(2)把分子量为30万的壳聚糖溶于2％的醋酸水溶液中，并快速搅拌，直至壳聚糖完全溶解，配制成壳聚糖的质量浓度为2％的溶液为B；

(3)将体积比为20∶1的液体石蜡和乳化剂司盘-80于70℃恒温搅拌乳化40min，搅拌速度400rpm，得到乳液C；

(4)将10ml B溶液以2滴/s的速度滴加入11mlA溶液中，插层反应70min，加入210ml乳液C，搅拌45min，在0℃，静置65min，以2滴/s的速度滴加2.5ml质量浓度为10％的戊二醛水溶液，交联固化2.5h，然后加入40ml异丙醇搅拌60min，静置分层后弃去上清液并真空抽滤，除去液体；

(5)依次用无水乙醚和异丙醇清洗，干燥，得到粒径为3-10μm的明胶-壳聚糖/蒙脱土载药微球。

微球载药量为48.25mg/g，包封率为38.60％。

微球的释放速度比较平稳，药物在480min内释放达37.86％。见图4-b。用光学显微镜观察微球，其照片如图7。

实施例6

(1)称取亲水性药物阿昔洛韦溶于10ml质量浓度为2％的分子量为10万的明胶水溶液中，阿昔洛韦与明胶的质量比为0.25∶1，以2滴/s的速度滴加经超声波处理后的质量浓度为2％的蒙脱土悬浮水溶液，蒙脱土与明胶的质量比为0.2∶1，在65℃恒温搅拌下，插层反应75min，得到溶液A；

(2)把分子量为30万的壳聚糖溶于2％的醋酸水溶液中，并快速搅拌，直至壳聚糖完全溶解，配制成壳聚糖的质量浓度为2％的溶液为B；

(3)将体积比为20∶1的液体石蜡和乳化剂司盘-80于75℃恒温搅拌乳化45min，搅拌速度400rpm，得到乳液C；

(4)将10ml B溶液以2滴/s的速度滴加入12mlA溶液中，插层反应75min，加入210ml乳液C，搅拌50min，在0℃，静置70min，以2滴/s的速度滴加2.5ml质量浓度为10％的戊二醛水溶液，交联固化3h，然后加入40ml异丙醇搅拌60min，静置分层后弃去上清液并真空抽滤，除去液体；

(5)依次用无水乙醚和异丙醇清洗，干燥，得到粒径为3-10μm的明胶-壳聚糖/蒙脱土载药微球。

测得载药量为51.83mg/g，包封率为41.46％。

微球的释放速度比较平稳，药物在480min内释放可达34.61％。见图4-c。

实施例7

(1)称取亲水性药物阿昔洛韦溶于10ml质量浓度为2％的分子量为10万的明胶水溶液中，阿昔洛韦与明胶的质量比为0.25∶1，以2滴/s的速度滴加经超声波处理后的质量浓度为2％的蒙脱土悬浮水溶液，蒙脱土与明胶的质量比为0.3∶1，在70℃恒温搅拌下，插层反应80min，得到溶液A；

(2)把分子量为30万的壳聚糖溶于2％的醋酸水溶液中，并快速搅拌，直至壳聚糖完全溶解，配制成壳聚糖的质量浓度为2％的溶液为B；

(3)将体积比为20∶1的液体石蜡和乳化剂司盘-80于80℃恒温搅拌乳化50min，搅拌速度400rpm，得到乳液C；

(4)将10ml B溶液以2滴/s的速度滴加入13mlA溶液中，插层反应80min，加入210ml乳液C，搅拌60min，在0℃，静置80min，以2滴/s的速度滴加2.5ml质量浓度为10％的戊二醛水溶液，交联固化3h，然后加入40ml异丙醇搅拌60min，静置分层后弃去上清液并真空抽滤，除去液体；

(5)依次用无水乙醚和异丙醇清洗，干燥，得到粒径为3-10μm的明胶-壳聚糖/蒙脱土载药微球。

测得载药量为48.04mg/g，包封率为38.43％。

微球的释放速度比较平稳，药物在480min内释放可达26.96％。见图4-d。

实施例8

(1)称取亲水性药物5-氟嘧啶溶于10ml质量浓度为4％的分子量为10万的明胶水溶液中，5-氟嘧啶与明胶的质量比为0.25∶1，以1滴/s的速度滴加经超声波处理后的质量浓度为2％的蒙脱土悬浮水溶液，蒙脱土与明胶的质量比为0.2∶1，在50℃恒温搅拌下，插层反应60min，得到溶液A；

(2)把分子量为30万的壳聚糖溶于2％的醋酸水溶液中，并快速搅拌，直至壳聚糖完全溶解，配制成壳聚糖的质量浓度为2％的溶液为B；

(3)将体积比为18∶1的液体石蜡和乳化剂司盘-80于60℃恒温搅拌乳化30min，搅拌速度400rpm，得到乳液C；

(4)将10ml B溶液以1滴/s的速度滴加入14mlA溶液中，插层反应60min，加入190ml乳液C，搅拌30min，在-5℃，静置65min，然后加入40ml异丙醇搅拌30min，静置分层后弃去上清液并真空抽滤，除去液体；

(5)依次用无水乙醚和异丙醇清洗，干燥，得到粒径为3-10μm的明胶-壳聚糖/蒙脱土载药微球。

测得载药量为35.78mg/g，包封率为28.76％。

微球的释放速度比较平稳，药物在480min内释放可达83.12％。见图5-a。

实施例9

(1)称取亲水性药物5-氟嘧啶溶于10ml质量浓度为4％的分子量为10万的明胶水溶液中，5-氟嘧啶与明胶的质量比为0.25∶1，以2滴/s的速度滴加经超声波处理后的质量浓度为2％的蒙脱土悬浮水溶液，蒙脱土与明胶的质量比为0.2∶1，在60℃恒温搅拌下，插层反应70min，得到溶液A；

(2)把分子量为30万的壳聚糖溶于2％的醋酸水溶液中，并快速搅拌，直至壳聚糖完全溶解，配制成壳聚糖的质量浓度为2％的溶液为B；

(3)将体积比为19∶1的液体石蜡和乳化剂司盘-80于70℃恒温搅拌乳化40min，搅拌速度400rpm，得到乳液C；

(4)将10ml B溶液以2滴/s的速度滴加入14mlA溶液中，插层反应70min，加入200ml乳液C，搅拌40min，在0℃，静置60min，以3滴/s的速度滴加6ml质量浓度为10％的戊二醛水溶液，交联固化2h，然后加入40ml异丙醇搅拌40min，静置分层后弃去上清液并真空抽滤，除去液体；

(5)依次用无水乙醚和异丙醇清洗，干燥，得到粒径为3-10μm的明胶-壳聚糖/蒙脱土载药微球。

测得载药量为68.22mg/g，包封率为54.58％。

微球的释放速度比较平稳，药物在480min内释放可达26.89％。见图5-b。

实施例10

(1)称取亲水性药物5-氟嘧啶溶于10ml质量浓度为4％的分子量为10万的明胶水溶液中，5-氟嘧啶与明胶的质量比为0.25∶1，以3滴/s的速度滴加经超声波处理后的质量浓度为2％的蒙脱土悬浮水溶液，蒙脱土与明胶的质量比为0.2∶1，在70℃恒温搅拌下，插层反应80min，得到溶液A；

(2)把分子量为30万的壳聚糖溶于2％的醋酸水溶液中，并快速搅拌，直至壳聚糖完全溶解，配制成壳聚糖的质量浓度为2％的溶液为B；

(3)将体积比为20∶1的液体石蜡和乳化剂司盘-80于80℃恒温搅拌乳化50min，搅拌速度400rpm，得到乳液C；

(4)将10ml B溶液以3滴/s的速度滴加入14mlA溶液中，插层反应80min，加入210ml乳液C，搅拌60min，在3℃，静置80min，以3滴/s的速度滴加8ml质量浓度为10％的戊二醛水溶液，交联固化3h，然后加入40ml异丙醇搅拌60min，静置分层后弃去上清液并真空抽滤，除去液体；

(5)依次用无水乙醚和异丙醇清洗，干燥，得到粒径为3-10μm的明胶-壳聚糖/蒙脱土载药微球。

测得载药量为65.15mg/g，包封率为52.12％。

微球的释放速度比较平稳，药物在480min内释放可达22.34％。见图5-c。

实施例11

(1)称取亲水性药物牛血清白蛋白溶于10ml质量浓度为2％的分子量为10万的明胶水溶液中，牛血清白蛋白与明胶的质量比为0.25∶1，以2滴/s的速度滴加经超声波处理后的质量浓度为2％的蒙脱土悬浮水溶液，蒙脱土与明胶的质量比为0.1∶1，在70℃恒温搅拌下，插层反应60min，得到溶液A；

(2)把分子量为30万的壳聚糖溶于2％的醋酸水溶液中，并快速搅拌，直至壳聚糖完全溶解，配制成壳聚糖的质量浓度为2％的溶液为B；

(3)将体积比为20∶1的液体石蜡和乳化剂司盘-80于60℃恒温搅拌乳化30min，搅拌速度400rpm，得到乳液C；

(4)将10ml B溶液以3滴/s的速度滴加入11mlA溶液中，插层反应60min，加入210ml乳液C，搅拌30min，在5℃，静置60min，然后加入40ml异丙醇搅拌30min，静置分层后弃去上清液并真空抽滤，除去液体；

(5)依次用无水乙醚和异丙醇清洗，干燥，得到粒径为3-10μm的明胶-壳聚糖/蒙脱土载药微球。

测得载药量为37.02mg/g，包封率为29.62％。

微球的释放速度比较平稳，药物在480min内释放达69.70％。见图6-b。

对比例

(1)称取亲水性药物牛血清白蛋白溶于10ml质量浓度为2％的分子量为10万的明胶水溶液中，牛血清白蛋白与明胶的质量比为0.25∶1，在70℃恒温搅拌下，反应60min，得到溶液A；

(2)把分子量为30万的壳聚糖溶于2％的醋酸水溶液中，并快速搅拌，直至壳聚糖完全溶解，配制成壳聚糖的质量浓度为2％的溶液为B；

(3)将体积比为20∶1的液体石蜡和乳化剂司盘-80于60℃恒温搅拌乳化30min，搅拌速度400rpm，得到乳液C；

(4)将10ml B溶液以3滴/s的速度滴加入10ml A溶液中，反应60min，加入210ml乳液C，搅拌30min，在5℃，静置60min，然后加入40ml异丙醇搅拌30min，静置分层后弃去上清液并真空抽滤，除去液体；

(5)依次用无水乙醚和异丙醇清洗，干燥，得到粒径为3-10μm的明胶-壳聚糖/蒙脱土载药微球。

测得载药量为16.44mg/g，包封率为13.15％。

微球的释放速度比较平稳，药物在480min内释放达87.13％。见图6-a。

Claims (6)

1.一种明胶-壳聚糖/蒙脱土载药微球，其特征是用下述方法制成：

(1)将亲水性药物溶于质量浓度为1％-5％的分子量为10万的明胶水溶液中，所述亲水性药物与明胶的质量比为0.15-0.75∶1，以1-3滴/s的速度滴加入经超声波处理后的质量浓度为1％-2％的蒙脱土悬浮水溶液，所述蒙脱土与所述明胶的质量比为0.02-0.3∶1，在50-70℃恒温搅拌下，插层反应40min-90min，得到溶液A；

(2)把分子量为30万的壳聚糖溶于1％-3％的醋酸水溶液中，并快速搅拌，直至壳聚糖完全溶解，配制成壳聚糖的质量浓度为2％的溶液为B；

(3)将体积比为18-20∶1的液体石蜡和乳化剂司盘-80于60℃-80℃恒温搅拌乳化30min-50min，得到乳液C；

(4)将B溶液以1～3滴/s的速度滴加入所述A溶液中，插层反应60min-80min，加入乳液C，搅拌30min-60min，在-5-5℃，静置60min-80min，以1～3滴/s的速度滴加质量浓度为10％的戊二醛水溶液，交联固化2h-3h，然后加入异丙醇搅拌30min-60min，静置分层后弃去上清液并真空抽滤，除去液体；所述B溶液、A溶液、乳液C、质量浓度为10％的戊二醛水溶液和异丙醇的体积比为10∶10.1-25∶190-210∶0-8∶30-40；

(5)依次用无水乙醚和异丙醇清洗，干燥，得到粒径为3-10μm的明胶-壳聚糖/蒙脱土载药微球，所述亲水性药物为阿昔洛韦、5-氟嘧啶、氧氟沙星或牛血清白蛋白。

2.根据权利要求1所述的一种明胶-壳聚糖/蒙脱土载药微球，其特征是所述步骤(1)为：将亲水性药物溶于质量浓度为2％的分子量为10万的明胶水溶液中，所述亲水性药物与明胶的质量比为0.5∶1，以1-3滴/s的速度滴加入经超声波处理后的质量浓度为1.5％的蒙脱土悬浮水溶液，所述蒙脱土与所述明胶的质量比为0.02-0.3∶1，在50-70℃恒温搅拌下，插层反应60min，得到溶液A。

3.根据权利要求1所述的一种明胶-壳聚糖/蒙脱土载药微球，其特征是所述步骤(4)为：将B溶液以1～3滴/s的速度滴加入所述A溶液中，插层反应70min加入乳液C，搅拌40min，降温至0℃，静置70min，以1～3滴/s的速度滴加质量浓度为10％的戊二醛水溶液，交联固化2.5h，然后加入异丙醇搅拌40min，静置分层后弃去上清液并真空抽滤，除去液体；所述B溶液、A溶液、乳液C、质量浓度为10％的戊二醛水溶液和异丙醇的体积比为10∶11∶200∶2.5∶35。

4.一种明胶-壳聚糖/蒙脱土载药微球的制备方法，其特征是由如下步骤组成：

(1)将亲水性药物溶于质量浓度为1％-5％的分子量为10万的明胶水溶液中，所述亲水性药物与明胶的质量比为0.15-0.75∶1，以1-3滴/s的速度滴加入经超声波处理后的质量浓度为1％-2％的蒙脱土悬浮水溶液，所述蒙脱土与所述明胶的质量比为0.02-0.3∶1，在50-70℃恒温搅拌下，插层反应40min-90min，得到溶液A；

(2)把分子量为30万的壳聚糖溶于1％-3％的醋酸水溶液中，并快速搅拌，直至壳聚糖完全溶解，配制成壳聚糖的质量浓度为2％的溶液为B；

(3)将体积比为18-20∶1的液体石蜡和乳化剂司盘-80于60℃-80℃恒温搅拌乳化30min-50min，得到乳液C；

(4)将B溶液以1～3滴/s的速度滴加入所述A溶液中，插层反应60min-80min，加入乳液C，搅拌30min-60min，在-5-5℃，静置60min-80min，以1～3滴/s的速度滴加质量浓度为10％的戊二醛水溶液，交联固化2h-3h，然后加入异丙醇搅拌30min-60min，静置分层后弃去上清液并真空抽滤，除去液体；所述B溶液、A溶液、乳液C、质量浓度为10％的戊二醛水溶液和异丙醇的体积比为10∶10.1-25∶190-210∶0-8∶30-40；

(5)依次用无水乙醚和异丙醇清洗，干燥，得到粒径为3-10μm的明胶-壳聚糖/蒙脱土载药微球，所述亲水性药物为阿昔洛韦、5-氟嘧啶、氧氟沙星或牛血清白蛋白。

5.根据权利要求4所述的一种明胶-壳聚糖/蒙脱土载药微球的制备方法，其特征是所述步骤(1)为：将亲水性药物溶于质量浓度为2％的分子量为10万的明胶水溶液中，所述亲水性药物与明胶的质量比为0.5∶1，以1-3滴/s的速度滴加入经超声波处理后的质量浓度为1.5％的蒙脱土悬浮水溶液，所述蒙脱土与所述明胶的质量比为0.02-0.3∶1，在50-70℃恒温搅拌下，插层反应60min，得到溶液A。

6.根据权利要求4所述的一种明胶-壳聚糖/蒙脱土载药微球的制备方法，其特征是所述步骤(4)为：将B溶液以1～3滴/s的速度滴加入所述A溶液中，插层反应70min加入乳液C，搅拌40min，降温至0℃，静置70min，以1～3滴/s的速度滴加质量浓度为10％的戊二醛水溶液，交联固化2.5h，然后加入异丙醇搅拌40min，静置分层后弃去上清液并真空抽滤，除去液体；所述B溶液、A溶液、乳液C、质量浓度为10％的戊二醛水溶液和异丙醇的体积比为10∶11∶200∶2.5∶35。

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