CN101702879A - 低剂量雌三醇的用途 - Google Patents

Abstract

本发明涉及低剂量雌三醇经阴道途径在预防和/或治疗女性由于雌激素缺乏而引起的泌尿生殖道萎缩中的用途。

Description

低剂量雌三醇的用途

发明领域

本发明涉及低剂量雌三醇经阴道途径在预防和/或治疗女性由于雌激素缺乏而引起的泌尿生殖道萎缩中的用途。

发明背景

更年期被认为是女性一生中处于生育期和非生育期之间的短暂阶段。更年期期间，卵巢产生的雌三醇产量渐进性减少，通常伴随一系列体征、症状和病症。

这一过渡期的主要体征为月经的消失(绝经期)和最为常见的多激素症状和精神症状、血管舒缩失调(潮热和出汗)和泌尿生殖道萎缩的发作。

随着绝经期前后雌激素的渐进性减少，阴道、尿道及膀胱的粘膜逐渐减少。当这一萎缩变得更为显著时，生殖道症状-阴道炽热和瘙痒、萎缩性阴道炎、性交疼痛以及创伤性出血，和泌尿道症状-重复性感染、排尿困难和尿失禁可增多。激素缺乏还引发支持组织的减少，这可引起脱垂和压力性尿失禁。

尽管泌尿生殖道萎缩是更年期和绝经期固有的后果，但相关的失调经常影响女性的生活质量，因此医生快速检测到其存在并指明疗法是很重要的。

雌激素缺乏不仅发生在更年期，而且也发生在其他情形下-诸如产后期，可以治疗的泌尿生殖道萎缩也会发生。

雌激素的激素替代疗法应用于寻求矫正或降低激素缺乏的后果、对血管舒缩和泌尿生殖道症状产生有益效果、降低骨量(bone mass)的缺失及心血管风险，但也增加了患有某些类型的癌症和如血栓栓塞及高血压的其他病症的风险，所述癌症尤其是乳腺癌或子宫内膜癌。

由于这些相关的风险，常规诊疗方案引起担忧，致使医生和患者不断地要求较小毒性的激素替代建议。

就泌尿生殖道萎缩而言，并不总是需要经口服途径借助激素替代疗法对症状进行全身性治疗。可选的方案为雌激素经阴道给药。然而，这一途径并不是无风险的，因为雌激素局部给药可能会促进不需要的子宫内膜增生，且这一过度增生，如果相对大的话，可能会变性为激素依赖性癌症。

雌三醇是用于治疗泌尿生殖道萎缩尤其是经阴道的雌激素之一。

目前市售的雌三醇制剂设计为，治疗的最初2-3周，阴道给药的剂量为0.5mg/天(500μg/天)，随后0.5mg的剂量，每周2次或3次。局部用药要有效果，这一剂量是被认为必要的剂量。然而，当随着时间以延长的方式给药时，这些水平伴随子宫内膜过度增生的风险。因此，给药并不是连续不断地进行的。通常不推荐延长治疗超过2-3个月。

发明概述

如上文所述，以雌三醇阴道给药治疗方案预防和/或治疗泌尿生殖道是必要的，该治疗方案不但可以提供安全性还可以提供功效，因此被更多的医生和患者接受，从而致使这一治疗的依从性更高，患者的生活质量更好。

本发明人令人惊讶地发现，每天给予小于500μg(500μg＝0.5mg)的雌三醇即允许实现这些目标，从而逆转女性由于泌尿生殖道萎缩而不引起子宫内膜过度增生。

不管所用制剂的类型如何，这些低剂量的雌三醇都是有效且安全的，而且允许延长治疗而对患者没有风险。实际上，它可允许药品每日给药多于3周。

因此本发明涉及雌三醇在制备用于预防和/或治疗女性由于雌激素缺乏而引起的泌尿生殖道萎缩的用于阴道给药的药物组合物中的用途，其中所述组合物的给药使患者接受的雌三醇的剂量小于0.5mg/天，从而可延长治疗而没有风险。

发明的详细描述

本发明人发现，含有作为活性成分的雌三醇的局部制剂可以以特别低的剂量给予，而且即使如此，其在女性泌尿生殖道萎缩治疗中也是有效的。

非常令人吃惊的是，已观察到，比正常剂量小甚至10-250倍的剂量逆转阴道萎缩状况而不需要额外的疗法。此外，这些低剂量显著地降低由雌激素治疗而引起的风险。

本发明一方面涉及雌三醇在制备用于预防和/或治疗女性由于雌激素缺乏而引起的泌尿生殖道萎缩的用于阴道给药的药物组合物中的用途，其中所述组合物的给药使患者接受的雌三醇的剂量小于0.5mg/天。

用于本发明的药物组合物可以是任何本领域技术人员所熟知的、允许给药剂量小于0.5mg/天雌三醇药的物组合物。它可以是，例如，固体形式(胶囊、片剂等)、半固体形式(凝胶、乳剂等)、液体形式或泡沫形式。且它可以含有本领域技术人员所知的任何赋形剂。

本发明重要的方面为，可用于本发明定义的制剂中且有效治疗由于雌激素缺乏而引起的泌尿生殖道萎缩的特别低剂量的雌三醇。

在本发明的具体实施方案中，以小于或等于0.3mg/天的剂量，给予雌三醇，用于预防和/或治疗由于雌激素缺乏而引起的泌尿生殖道萎缩。

另一更为优选的实施方案涉及剂量小于或等于0.1mg/天的雌三醇的用途。

另一特别优选的实施方案涉及剂量为0.002-0.05mg/天(2-50μg/天)的雌三醇的用途。

另一特别优选的实施方案涉及剂量为0.02-0.05mg/天(20-50μg/天)的雌三醇的用途。

令人惊讶地是，当以如此低剂量使用雌三醇时，可以每天给药，并持续随时间延长的时期而没有副作用。由于本发明雌三醇给药治疗方案的高安全性，预防或治疗泌尿生殖道萎缩可以长期如数月或数年持续而没有间断。

在本发明的具体实施方案中，每日治疗方案中给予制剂至少3周。在其他实施方案中，每日给予制剂至少30天、至少60天、至少90天、至少6个月或至少1年。在这些情况中，优选不必间断治疗。

在其他实施方案中，每2天1次、每3天1次或每周1次的治疗方案中，可以给予制剂至少3周、至少30天、至少60天、至少90天、至少6个月或至少1年。

下文描述了本发明的几个实例性实施例。在任何情况都不应当认为它们限制了权利要求的解释。

实施例

利用低剂量雌三醇治疗泌尿生殖道萎缩的功效通过下述体内测定证实。

测定I

制剂

在本研究中检测了两种制剂，它们中的每一种都含有0.005％(w/w)的雌三醇。

为了溶解活性成分，制备雌三醇的甘油贮备液。为此，将25mg微粒化的雌三醇添加于50g植物甘油中，搅拌1小时，并证实雌三醇完全溶解。

为制备乳剂状制剂(制剂1)，一方面，在磁力搅拌下将外部水相中的20g Neo PCL o/w自乳化基质(PCL o/w self-emulsifying base)在75℃下加热，而另一方面，将40mg溴硝醇(Bronopol)在75℃下溶解于70ml纯化水中。将溴硝醇溶液(水性的，w)逐渐地加入到自乳化基质(油状，o)上，而且在连续搅拌下，降低温度，直至达到30℃。在不停止搅拌的情况下，添加10g以前制备的雌三醇的甘油溶液，获得含有以下组成的0.005％雌三醇制剂：

组分	数量
		Neo PCLo/w自乳化基质	20g
溴硝醇	40mg
		纯化水	70ml
甘油	10g
		微粒化的雌三醇	5mg

为制备凝胶状制剂(制剂2)，将40mg溴硝醇溶解于88ml纯化水中并在连续搅拌下缓慢加入2g羟乙基纤维素(Natrosol)。最后，在不停止搅拌的情况下，添加10g雌三醇的甘油溶液，获得含有以下组成的0.005％雌三醇制剂：

组分	数量
		羟乙基纤维素	2g
溴硝醇	40mg
		纯化水	88ml
甘油	10g
		微粒化的雌三醇	5mg

对阴道萎缩效果的评估

在本研究中，使用共计8只切除卵巢的雌性Wistar Han大鼠，将其随机分为两组，每组4只。A组以制剂1治疗，而B组以制剂2治疗。

接受卵巢切除的动物18天后，对每只大鼠定期进行几次阴道涂片，直到在所有大鼠中证实了绝经状态(特别是阴道萎缩)，从而确定阴道上皮的成熟指数(maturation index，MI)。

一旦治疗开始，分别对A实验组和B实验组给予制剂1(0.005％雌三醇乳剂)及制剂2(0.005％雌三醇凝胶)，每天1次，连续5天。利用装配有特殊吸头的正排量多道移液器(positive-displacement multipipette)，经由阴道途径，以5.8mg制剂/动物的量(相当于0.29μg雌三醇/动物)给药。

为计算待给予每只动物的剂量，考虑女性的平均体重为60kg，大鼠的为350g，由此给予每只大鼠0.29μg雌三醇来评估给予0.05mg雌三醇对女性的效果。

在给药前的第一天，对每只大鼠进行阴道涂片，在第5天给药的8小时之后，进行另一次涂片。借助于阴道灌洗技术进行涂片，并用巴氏技术(Papanicolau techinique)固定及染色。

通过角质化细胞的存在、阴道上皮成熟指数的测定及总体营养性(overall trophism)的评价，对每一制剂的治疗效果进行评估。

所获得的结果如下表所示。

0天

第5天

结果证明，给予比当今通常所用剂量小10倍的雌三醇剂量逆转了两组大鼠的阴道萎缩状况，治疗后获得了与营养正常的子宫内膜相符的角质化细胞和中间细胞的出现和成熟指数。

因此可以得到如下结论：本发明所提议的给药治疗方案将允许获得与目前所用治疗方案类似的治疗效果，但具有更高的安全性。

测定II

在本研究中检测两种凝胶状制剂，一种含有0.002％雌三醇，另一种含有0.0002％(w/w)雌三醇，组成如下：

雌三醇                              0.002％或0.0002％

卡波姆(Carbopol)971P                0.5％

聚卡波菲(Polycarbophil)AA-1         1.5％

甘油                                10％

对羟基苯甲酸甲酯(Methylparaben)     0.15％

对羟基苯甲酸丙酯(Propylparaben)     0.05％

37％盐酸                            适量pH 2.5-3.5

10％氢氧化钾                        适量pH 4.5

水                                  适量100％

阴道萎缩效果的评估

本次测定使用圈养于铺有锯屑或此类的255×405×197mm聚碳酸酯E型笼子中的卵巢切除的成年雌性Wistar大鼠。

将它们分组，每一笼中5只，随机选择，并圈养于控制条件的动物圈养单元(animal housing units)中：温度(22±2℃)、光周期(12/12小时光/黑暗)、大气压、更新次数及相对湿度(40-60％)。

给予它们Harlan Ibérica S.L供应的大鼠标准饮食，即颗粒状饲料，并且允许它们随意使用饮用水(用于大众消费的可饮用水)。

本研究使用5个实验组，每组5只动物。待测定的物质为基于雌三醇的三种药物制剂和安慰剂：

A组：对照(模拟)

B组：用凝胶状安慰剂治疗

C组：用0.0002％凝胶状制剂(Gel)治疗

D组：用0.002％凝胶状制剂治疗

E组：用参照物(0.1％欧维婷(Ovestinon))治疗

为计算给予每只动物的测定物质的量，考虑每天1g凝胶的人的剂量。

取女性60Kg及大鼠350g为平均体重。

60Kg＝1g凝胶状制剂

350g大鼠＝5.8mg凝胶状制剂

就参照物(0.1％欧维婷)而言，人的剂量为每天0.5g。

取女性60Kg及大鼠350g为平均体重。

60Kg＝0.5g乳剂

350g大鼠＝2.9mg乳剂

因此将5.8mg相应测定物质给予B、C和D组的每只动物，而E组的动物将接受2.9mg的参照物。

0.0002％/0.002％凝胶状制剂＝100g凝胶中含有0.0002g/0.002g雌三醇

1g凝胶中含有0.002/0.02mg雌三醇

0.1％欧维婷＝100g乳剂中含有0.1g雌三醇

0.5g乳剂中含有0.0005g雌三醇

因此，给予每一组的有效成分的当量为：

A组：对照＝0μg雌三醇

B组：安慰剂＝0μg雌三醇

C组：0.0002％凝胶状制剂＝0.01μg雌三醇：剂量1

D组：0.002％凝胶状制剂＝0.1μg雌三醇：剂量2

E组：0.1％欧维婷＝2.9μg雌三醇：剂量3

包括对照组，其中模拟阴道给药，能确定可能的“机械性”效果对观察到的营养性反应的贡献。

这一研究包含四个时相：

·第一时相持续15天，涉及到动物的每日治疗。

·第二时相持续15天，涉及到动物每周两次的治疗(所有组)。

·第三时相持续7天，涉及到动物每周一次的治疗(所有组)。

·第三时相持续15天，不涉及治疗。

在第一次给予测定物质和参照物质(24小时)之前，对每一只大鼠进行阴道涂片，以证实其绝经期状况(阴道萎缩)，从而确定阴道上皮的成熟指数。

为此，借助于灌洗技术进行阴道涂片、用水溶性定影喷雾(water-soluble fixing spray)固定进行细胞诊断并根据巴氏技术染色评定成熟指数。

然后将相应制剂的第一剂量给药于每一治疗组。这一投药法每天重复一次(每24小时)，连续15天。

这一阶段过去后，对所有的组A、B、C、D和E(对照、安慰剂、0.0002％凝胶状制剂、0.002％凝胶状制剂及0.1％欧维婷)，剂量变为每两周给药，持续2周。

当这一2周阶段结束时，剂量再次变为对所有组每周给药，持续1周。

在初始的重复给药阶段(连续15天)，对应那天给药之前，每天对所有的动物进行阴道涂片，直至第8天(包括在内)。第16天即在最后一次给药后24小时对所有动物同样进行阴道涂片。

从这时开始，对所有的动物每3天进行阴道涂片，直至本研究结束。

将所有的涂片用水溶性定影喷雾固定进行细胞诊断并根据巴氏技术染色评定成熟指数。

依照以下方案进行所应用的不同疗法的营养效果的定性评估：

A-萎缩细胞学(atrophic cytology)

H-营养不良性细胞学(hypotrophic cytology)

M-中等营养性细胞学(intermediate trophism cytology)

B-优良营养性细胞学(Cytology with good trophism)

为进行初始统计分析，对这些诊断中的每一个给予数值：

0-A-萎缩细胞学

1-H-营养不良性细胞学

2-M-中等营养性细胞学

3-B-优良营养性细胞学

根据这些前提，获得如下结果：

按治疗类型和持续时间组织的定性分析平均值

因此，可以观察到：

·在对照(模拟)和安慰剂组，在第2天和第8天间观察到的中等营养效果，在第4天和第7天(仅在某些天)间观察到优良营养性。这一增长之所以有所贡献可归因于实际细胞学取样的机械效果，就如随后的降低之所以成为因素可以归因于如之前研究(见表8和9)中所观察到的对所述机械性效果的适应性或脱敏作用。

·在给予具雌三醇的物质(剂量1(0.01μg雌三醇)、剂量2(0.1μg雌三醇)、剂量3(2.9μg雌三醇))的组中，在第2天和第37天间观察到优良营养性。从这一阶段往后，其变为营养不良，这与停止给予不同的测定物质和参照物质相一致(第36天是给药的最后一天)。

因此极低剂量的雌三醇制剂是非常有利的，它可以使得长期服药成为可能，预防营养不良或泌尿生殖道萎缩时期，并为患者提供高安全性。

利用细胞成熟指数(MI)进行定量分析，从而将总细胞的百分比归因于基细胞/副基细胞、中间细胞及表面细胞(surface cells)的量(B/I/S)。

为进行初始统计分析，为了给每一样本分配数值，使用以下公式：

数值＝(-1*B)+(0*I)+(1*S)

利用这一公式获得了从-100(100％基细胞/副基细胞)到100(100％表面细胞)范围内的数值，小于-90的数值认为是完全萎缩，-89和-30间为营养不良，-29和+20间为中等营养性，大于+20为优良营养性。

根据这些前提，获得了下列结果：

按治疗类型和持续时间组织的定量分析平均值

因此，可以观察到：

·结果、评定及分析都与定性评定所获得的非常类似。

·在对照(模拟)和安慰剂组中，在第2天和第8天间观察到的中等营养效果，在第4天和第7天间观察到优良营养性。这由中间细胞及某些情况下表面细胞的出现证明。在整个研究中，该效果渐进性降低。

·在剂量1组(0.01μg雌三醇)中，在治疗的第2天和第16天间观察到伴随中间细胞及表面细胞的优良营养性，这与每天给药一直到第15天一致。然后，观察到优良营养性和中等营养性之间的波动，导致自本研究的第37天(第36天是给药的最后一天)出现中等营养性状况，自第40天达到营养不良状况。

·其余含有雌三醇(剂量2(0.1μg雌三醇)及剂量3(2.9μg雌三醇))的组具有类似的表现。在第2天和第36天间观察到优良营养性。在第37天，对剂量3而言，存在优良营养性，而对剂量2而言，存在为中等营养性。在剂量2中，营养不良状况的获得比剂量3早1天。

Claims (9)

1.雌三醇在制备预防和/或治疗女性由于雌激素缺乏而引起的泌尿生殖道萎缩的用于阴道给药的药物组合物中的用途，其中所述组合物的给药使患者接受的雌三醇的剂量小于0.5mg/天。

2.如权利要求1所述的用途，其中所述患者接受的雌三醇的剂量小于或等于0.3mg/天。

3.如权利要求1或2所述的用途，其中所述患者接受的雌三醇的剂量小于或等于0.1mg/天。

4.如权利要求1所述的用途，其中所述患者接受的雌三醇的剂量为0.002-0.05mg/天。

5.如权利要求1所述的用途，其中所述患者接受的雌三醇的剂量为0.02-0.05mg/天之间。

6.如上述权利要求中任一项所述的用途，其中所述给药为每天给药，持续至少3周。

7.如权利要求6所述的用途，其中所述给药为每天给药，持续至少30天。

8.如权利要求6所述的用途，其中所述给药为每天给药，持续至少60天。

9.如权利要求6所述的用途，其中所述给药为每天给药，持续至少90天。