CN101699960A - Am菌根菌在脱毒马铃薯试管苗移栽中的应用方法 - Google Patents

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白灯莎
李利民
冯固
孙良斌
张少民
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Institute Of Nuclear Technology And Biotechnology Xinjiang Academy Of Agricultural Sciences
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COLLEGE OF RESOURCES AND ENVIRONMENTAL SCIENCES CHINA AGRICULTURAL UNIVERSITY
Institute Of Nuclear Technology And Biotechnology Xinjiang Academy Of Agricultural Sciences
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Abstract

一种AM菌根菌在脱毒马铃薯试管苗移栽中的应用技术,首先以三叶草为寄主植物制作含有真菌孢子、根外菌丝,感染的三叶草根系及河沙混合物的接种剂,再制作移栽基质,基质中间层加入以每公斤土3000-5000个孢子比例的接种剂。采用如上的方法进行移栽,脱毒马铃薯微型薯产量可增加25%以上。

Description

AM菌根菌在脱毒马铃薯试管苗移栽中的应用方法
一、技术领域
本发明涉及一种生物菌种在农业生产中的应用方法,具体为一种AM菌根真菌在脱毒马铃薯试管苗移栽中的应用方法。
二、背景技术
马铃薯是重要的粮食、蔬菜、饲料和工业原料,具有产量高、适应性强、营养丰富等特性,已成为世界第四大粮食作物。我国是世界上最大的马铃薯种植和生产国,种植面积居世界首位。随着组织培养方法在生产上的应用,利用组织培养技术生产脱毒苗从而提高作物产量的方法在蔬菜、花卉等园艺作物上得以广泛应用。近年来马铃薯脱毒苗技术正在被快速推广,在提高马铃薯产量和改善其品质方面发挥了积极作用。在该项技术中,马铃薯脱毒试管苗的移栽成活率是制约生产效率的重要因素,如何控制移栽条件,为试管苗提供适宜的移栽环境,促进植株对养分的吸收进而快速生长,保证试管苗从无菌环境顺利过渡到普通栽培条件下生长,从而提高移栽成活率,是生产实践中需要解决的技术难题。
丛枝菌根真菌(Arbuscular mycorrhizal fungus),简称AM真菌,是一类能够与大多数植物形成共生关系的真菌,是目前已探明的与植物关系最为密切的土壤微生物之一。菌根与植物营养关系中研究最多的是磷素营养。菌根能够显著地改善植物的磷营养状况、提高植物耐干旱、耐盐、耐重金属污染和抗病能力。已有报道在灭菌土壤中接种菌根真菌可对盆栽马铃薯根部发生侵染,并明显促进马铃薯对氮、磷、钾的吸收,提高马铃薯的植株鲜、干重,块茎结实数和产量。虽然AM真菌在盆栽试验中已有应用先例,但目前尚无AM真菌在脱毒马铃薯生产中的应用方法的报道,特别是没有关于在试管苗移栽环节中应用AM真菌并得到有益效果的报道。
三、发明内容
本发明的目的是为脱毒马铃薯试管苗移栽提供一种提高试管苗移栽成活率并促进其生长进而增加微型薯产量的方法,特别是利用AM菌根真菌共生促生性能的低成本环保增产方法。
本发明的技术方案为AM菌根真菌在脱毒马铃薯试管苗移栽中的应用方法,该方法包括以下的步骤:
(1)原料准备:准备三叶草种子、AM菌根真菌菌种,将河沙过筛并用104GyCo60γ-射线辐照灭菌;
(2)接种剂制备:以河沙为培养基质,以三叶草为寄主植物,在栽培盆内从下往上依次铺上河沙、AM菌、河沙、三叶草种子、河沙,浇透水后放在培养室内培养;70-120天后将三叶草的地上部分全部剪掉,将含有真菌孢子、根外菌丝、感染的三叶草根系的河沙混合拌匀,用作菌根菌接种剂;
(3)苗床制备:从下往上按照“土--接种剂--土”的顺序铺设苗床,其中底层与面层土的厚度比为3∶1,加入接种剂的量以其所含AM菌根真菌孢子数确定,比例为每公斤土加入3000--3500个孢子;
(4)移栽与管护:将苗床浇透水后,移栽扦插脱毒马铃薯试管苗,定植后除草、保持土壤湿度、防治病虫害和杂草。
在移栽基质中接入AM菌根真菌,接种剂接入密度、厚度、深度,保证了真菌能有效侵染马铃薯脱毒苗根系(主要为新生根系),显著促进植株对磷的吸收,改善作物的营养状况,促进植株的生长发育,提高作物的抗逆性并实现增产。采用如上的方法后,脱毒马铃薯试管苗成活率提高30%以上,微型薯产量提高25%以上。
四、具体实施方式
本发明中涉及的AM菌根真菌--球囊霉属丛枝菌根真菌(Glomusmosseae)的菌种是从北京市农林科学院植物营养与资源研究所“中国丛枝菌根真菌种质资源库(BGC)”购得。
实施例1
(1)原料准备:准备三叶草种子、球囊霉属丛枝菌根真菌(Glomusmosseae)菌种,将河沙过筛并用104GyCo60γ-射线辐照灭菌。
(2)接种剂制备:以河沙为培养基质,以三叶草为寄主植物,在栽培盆内从下往上依次铺上河沙、AM菌、河沙、三叶草种子、河沙,浇透水后放在培养室内培养;120天后将三叶草的地上部分全部剪掉,将含有真菌孢子、根外菌丝、感染的三叶草根系的河沙混合拌匀,制得菌根菌接种剂。用湿筛倾析法测定接种剂中的孢子数,测得每克接种剂中有AM真菌孢子约100个。
(3)苗床制备:将土用104GyCo60γ-射线辐照灭菌;在长45cm、宽27cm、高6cm的苗盘中从下往上按照“土--接种剂--土”的顺序铺设苗床,其中底土3.75公斤,接种剂175克,面层土1.25公斤。
(4)移栽与管护:将苗床浇透水后,移栽扦插脱毒马铃薯试管苗,每个苗盘200株,定植后除草,保持土壤湿度,防治病虫害和杂草。
本实施例为最佳实施例。
实施例2
本实施例与实施例1的不同在于苗床制备阶段所用土不经过灭菌处理。
经过试验调查统计,实施例1及实施例2比不进行接种AM菌根真菌的对照在侵染率和产量上有显著的提高,具体见表1。并且对不同大小的微型薯产量影响不同,其中实施例1显著增加了4克以上较大薯的产量,而实施例2对个体重2-4克的中等微型薯增产作用最为明显,具体见表2。
表1不同处理的侵染率和产量
  侵染率(%)   产量(克/盘)
 CK1(灭菌)   0   200.9
 实施例1   26.7   309.7
  侵染率(%)   产量(克/盘)
 比对照提高   --   54.2%
 CK2(不灭菌)   21.6   204.8
 实施例2   43.8   256.4
 比对照提高   102.8%   25.2%
表2不同处理对不同级别微型薯产量的影响(克/盘)
  <1克   2-4克   >4克
 CK1(灭菌)   37.1   44.6   119.2
 实施例1   47.9   58.4   203.4
 比对照提高   29.1%   30.9%   70.6%
 CK2(不灭菌)   37.8   32.2   134.8
 实施例2   46.4   51.4   158.6
 比对照提高   22.8%   59.6%   17.7%
实施例3
(1)原料准备:准备三叶草种子、球囊霉属丛枝菌根真菌(Glomusmosseae)菌种,将河沙过筛并用104GyCo60γ-射线辐照灭菌。
(2)接种剂制备:以河沙为培养基质,以三叶草为寄主植物,在栽培盆内从下往上依次铺上河沙、AM菌、河沙、三叶草种子、河沙,浇透水后放在培养室内培养;70天后将三叶草的地上部分全部剪掉,将含有真菌孢子、根外菌丝、感染的三叶草根系的河沙混合拌匀,制得菌根菌接种剂。用湿筛倾析法测定接种剂中的孢子数,测得每克接种剂中有AM真菌孢子约50个。
(3)苗床制备:将土用104GyCo60γ-射线辐照灭菌;在长45cm、宽27cm、高6cm的苗盘中从下往上按照“土--接种剂--土”的顺序铺设苗床。其中底土3.75公斤,接种剂300克,面层土1.25公斤。
(4)移栽与管护:将苗床浇透水后,移栽扦插脱毒马铃薯试管苗,每个苗盘200株,定植后除草,保持土壤湿度,防治病虫害和杂草。

Claims (2)

1.一种AM菌根菌在脱毒马铃薯试管苗移栽中的应用方法,其特征在于该方法包括以下的步骤:
(1)原料准备:准备三叶草种子、球囊霉属丛枝菌根真菌(Glomusmosseae)菌种,将河沙过筛并用104GyCo60γ-射线辐照灭菌;
(2)接种剂制备:以河沙为培养基质,以三叶草为寄主植物,在栽培盆内从下往上依次铺上河沙、AM菌、河沙、三叶草种子、河沙,浇透水后放在培养室内培养;70-120天后将三叶草的地上部分全部剪掉,将含有真菌孢子、根外菌丝、感染的三叶草根系的河沙混合拌匀,用作菌根菌接种剂;
(3)苗床制备:从下往上按照“土--接种剂--土”的顺序铺设苗床,其中底层与面层土的厚度比为3∶1,加入接种剂的量以其所含菌根菌孢子数确定,比例为每公斤土加入3000--3500个孢子;
(4)移栽与管护:将苗床浇透水后,移栽扦插脱毒马铃薯试管苗,定植后除草,保持土壤湿度,防治病虫害和杂草。
2.如权利要求1所述的应用方法,其特征在于所述的接种剂制备过程培养时间为120天,并且苗床制备过程中加入接种剂的量为每公斤土加入3500个孢子。
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