CN101659629A - 鱼腥草素类高水溶性、稳定性前体药物及其制备方法与运用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种鱼腥草素类高水溶性、稳定性前体药物及其制备方法和在制药中的运用。该前体药物符合通式(I)、(II)、(III)、(IV)。其制备方法是将氨氧乙酸或氨氧乙胺与相对应的母体药物在适宜的溶剂中进行肟化反应即可。该前体药物可进行多种药物剂型的制备。具有高水溶性、高稳定性、效果好、毒副作用低的优点。

Description

鱼腥草素类高水溶性、稳定性前体药物及其制备方法与运用

一、技术领域

本发明属于前体药物领域，特别是涉及一种鱼腥草素类高水溶性、稳定性前体药物，本发明还涉及该前体药物的制备方法及其在制药中的运用。

二、背景技术

鱼腥草素钠(sodium houttuyfonate)，化学名为癸酰乙醛亚硫酸氢钠，新鱼腥草素钠(SodiumNewHouttuyfonate)，化学名为十二酰乙醛亚硫酸氢钠，二者为同系列的亚硫酸氢钠加成物，两者的药理作用和疗效基本相似，均为消炎抗菌药。同时新鱼腥草素钠具有较广的抗菌谱，还能提高血清备解素水平，增强白细胞吞噬能力，提高机体的非特异性免疫力。二者临床均用来治疗呼吸道感染、肺炎、支气管炎、尿路感染以及妇科盆腔炎、宫颈炎与附件炎等。

鱼腥草素钠与新鱼腥草素钠均为白色具鱼腥味的鳞片状或针状或结晶性粉末，微溶于水。当前临床使用主要为注射剂型。临床上为解决水溶性问题，主要采用在注射液中加入吐温-80或β-环糊精系列等做助溶剂。吐温-80为非离子表面活性剂，不仅产生溶血，而且具有一定毒性，同时该制剂在肌内注射时出现严重疼痛，患者在使用过程中产生恐惧；β-环糊精系列均具有一定的溶血性与肾脏毒性，且以上辅料的过多加入不仅影响疗效，而且毒副作用很明显。

目前新鱼腥草素钠在国内上市的有小水针、输液与冻干粉，规格涉及有4mg、8mg、10mg、16mg、20mg。上述制剂均极不稳定，长期放置极易降解，含量下降，严重影响了临床疗效与使用安全性，同时由于有效期短，给流通领域带来很多不便；其中的水针剂所含的新鱼腥草素钠还在储存期间很易析出，更加影响了临床的使用疗效与安全性。正是鱼腥草素钠与新鱼腥草素钠制剂的临床不安全性，国家卫生部已经叫停了该类注射剂型的使用。

本申请人以前在做新鱼腥草素钠小水针时发现，其水溶液极不稳定，在贮存10个月后的含量几乎为零，本申请人亦充分研究了其降解机制，发现主要是新鱼腥草素钠即十二酰乙醛亚硫酸氢钠在水溶液中易解离生成十二酰乙醛，而十二酰乙醛的化学性质很活泼，容易发生聚合和氧化，这样从而促使十二酰乙醛亚硫酸氢钠不断地解离成十二酰乙醛的缘故。同时，十二酰乙醛对光很敏感，更加促进其降解。而现有的质量标准又无法对降解产物进行准确控制，使得其注射液的质量和稳定性无法得到保证，在临床应用过程中存在严重的安全隐患。

因鱼腥草素钠与新鱼腥草素钠是同系列，二者存在着同样的问题，在此不做赘述。

氨氧乙酸(AOA)最先由Weruer合成，后来由于发现它具有一系列实际用处，例如游离AOA具有抗菌作用，可用于蛋白质溶液防腐保存，药物稳定剂，抑制α一氨基丁酸一氧代戊二酸转氨酶等。国外关于氨氧基乙酸的论文引起广泛重视，应用范围也日益扩大，许多已形成专利。氨氧乙胺亦已经在许多药物中得到运用，二者均安全无毒。

前体药物是将一种具有药理活性的母体药物，导入另一种载体基团(或与另一种作用相似的母体药物相结合)形成一种新的化合物，这种化合物在人体内通过生物转化(酶活其它生物机能)，释放出母体药物而显疗效，毒性反应因之大大降低，或提高水溶性或提高稳定性。

三、发明内容

本发明的目的在于弥补现有技术中存在的不足之处，而提供一种鱼腥草素类高水溶性、稳定性前体药物，或其可药用盐、水合物或溶剂化物。所要解决的技术问题是运用前药原理改善鱼腥草素钠与新鱼腥草素钠的水溶性差与水溶液稳定性差的缺点，同时抗菌作用增强。

本发明的目的是通过以下措施实现的：

申请人根据前药原理的基础知识对鱼腥草素钠与新鱼腥草素钠的结构进行修饰，经多次试验结果得到由以下通式(I)、(II)、(III)、(IV)表示的一种鱼腥草素类高水溶性、稳定性前体药物，或其可药用盐、水合物或溶剂化物：

其中，n为5～12

具体地说，该前药的特征在于：n为7或9

用上述通式(I)、(II)、(III)、(IV)表示的本发明一种鱼腥草素类高水溶性、稳定性前体药物，上述化合物无论形成哪种盐都包含在本发明范围之内。作为这种盐，可举出药学上所允许的盐，例如可药用酸根盐选自甲磺酸盐或苯磺酸盐或对甲苯磺酸盐或酒石酸盐或富马酸盐或马来酸盐或枸橼酸盐或柠檬酸盐或乳酸盐或苹果酸盐或杏仁酸盐或盐酸盐；可药用碱根盐选自钠盐或钾盐或氨丁三醇盐或叔丁胺盐或葡甲胺盐或乙醇胺盐或乙二胺盐或哌嗪盐。

以用上述通式(I)、(II)、(III)、(IV)表示的本发明一种鱼腥草素类高水溶性、稳定性前体药物及其盐，可以以水合物或溶剂物的形式存在，无论哪一种都包含在本发明范围之内。作为获得的溶剂物的溶剂，有甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、正丁醇等。

本发明的又一目的是提供实施本发明化合物的制造方法，可根据下述反应路线进行合成：

其中，n为5～12

由通式(I)、(II)、(III)、(IV)表示的化合物的盐，可按照下述方法合成。通过将通式(I)、(II)、(III)、(IV)的化合物，在甲醇、乙醇、异丙醇、丙酮、乙酸乙酯、异丙醚、乙腈、四氢呋喃、二甲基亚砜、二甲基甲酰胺、甲基吡咯烷酮等单一或混合的适当溶剂中，于-10℃～100℃下，最好在10℃～50℃下，和对应的酸或碱搅拌，反应0.1～20小时，最好0.3～1小时而可以合成。

上述的制造方法，只表示制造本发明的通式((I)、(II)、(III)、(IV)化合物的方法之一例。本发明化合物的制造方法并不仅限于这些方法，在本说明书的实施例中，由于更具体地说明了本发明化合物的制造方法，所以，本领域的人员，根据上述说明和具体实施例的说明，根据需要，对此加以适当的修改，就能制造出包括在上述通式(I)、(II)、(III)、(IV)的化合物或它们的盐。

本发明的再一目的是提供由通式(I)、(II)、(III)、(IV)表示的化合物或它们的可药用盐，或它们的水合物或溶剂物组成的组中选出的物质和药学上容许的制剂添加物的药物组合物。上述药物组合物可以采用注射剂、片剂、胶囊剂、滴丸剂、外用搽剂等剂型药物；还可以采用现代制药界所公知的控释或缓释剂型或纳米制剂。

本发明的又再一目的是提供由通式(I)、(II)、(III)、(IV)表示的化合物或它们的可药用盐，或它们的水合物或溶剂物组成的组中选出的物质和药学上容许的制剂添加物的药物组合物在药物制备中的应用。

本发明的优点：

本发明的主要优点就是前体药物为母体药物提供了极好的水溶性，同时其水溶液具有极好的稳定性。本发明的前体药物具有更好的生物利用度、临床使用更安全，适合开发成各种注射液、口服给药与外用制剂。本品对机体有高的安全性与很好的口服吸收性，具有重要的潜在产业化应用开发价值。

四、具体实施方式

下面的实施例可以对本发明进行进一步的描述，然而，这些实施例不应作为对本发明范围的限制。

制备例1：盐酸氨氧乙酸的制备

1.1、丙酮肟的制备

在250ml锥形瓶中将14g羟胺盐酸(0.2mol)与约20g结晶醋酸钠溶解在60ml水中，升温至35～40℃，每次2ml分批加入10.3ml(0.14mol)丙酮，边加边摇动，此时即有固体析出。加完后，用橡皮塞塞住瓶口，激烈摇动2～3min，丙酮肟呈无色绪晶析出，冷却后，抽滤并用滤液洗涤。抽干后，在滤纸上进一步压于，干燥，得到无色针状晶体7.5g，产率为71％。

1.2、丙酮肟氧乙酸的制备

617g(4.4mol)2-溴乙酸和500g碎冰在冰水浴中冷却，加入约440g 40％的NaOH溶液使成碱性，在中和过程中另加500g碎冰，然后往溶液中加入202g(4.0mob丙酮肟和440g(40％)NaOH溶液(4.4mol)，在加碱过程中反应温度控制在20℃以下。让混合物呈滴状通过蒸气加热的管道(75cm长，内经10mm，约20的倾斜度)，流入用流水冷却的5L圆底烧瓶中，约3～4h加完。反应后的溶液用500ml新蒸乙醚萃取3次，然后水溶液在冷却下(小于15℃)用500ml(6mol)浓HCI酸化，溶液用固体NaCl饱和后立即用1500ml/次新蒸乙醚萃取6次，蒸去乙醚，得粗产品350g，供下一步使用。

1.3、盐酸氨氧乙酸的制备

上一步反应得到的粗产品溶解在大约等于其重量两倍的苯中，溶液过滤，在减压蒸馏下除去苯，在200g(1.52m0l)残留物中加入1L水、2mg氢酿，1L浓HCl进行水蒸汽蒸馏，至丙酮不再馏出(30～40min)，溶液减压浓缩至180～220ml，加入400ml异丙醇，在冰箱中放置过夜，得到白色晶体，在红外灯下烘干。母液经过浓缩和加入异丙醇可以再结晶。粗产品(120～135g)可以用下法重结晶：溶于其重量两倍的温水(50℃)中，加入2体积的异丙醇，冰箱中放置结晶，得产品110～120g白色晶体，mp；152～153℃(分解)。

制备例2：十二酰乙醛的制备

2.1、2一十三酮的制备

於反应瓶中加入2.3g金属钠，再加入24ml无水乙醇，反应结束后加入20ml乙酰乙酸乙酯，搅拌回流30min，降温，加入22.1g 1一溴正癸烷，搅拌回流1h，加入40ml氢氧化钠(5％)溶液，搅拌回流2h，降温，分层，有机层水洗至中性，无水硫酸钠干燥，减压蒸馏收取5mmHg115～118℃馏份15g，冷后得晶体，熔点：29～30℃。

2.2、十二酰乙醛的制备

在反应瓶里加入1.2g金属钠，加入12ml无水乙醇，反应结束后加入9.9g 2一十三酮，加热回流30min，降温，加入3.7g甲酸乙醋，搅拌反应3h，水洗，乙醚提取，干燥，除去乙醚，得产物8.5g，收率73.3％.

制备例3：新鱼腥草素钠的制备

于反应瓶中加入5.7g十二酰乙醛和50ml饱和亚硫酸氢钠溶液，加热回流15min，降温，过滤，洗涤，干燥，得干品7.8g，白色针状结晶，熔点：163～165℃，收率94.5％，含量经HPLC测定为99.5％。

制备例4：十酰乙醛的制备

参照制备例2的方法，由1一溴正辛烷代替1一溴正癸烷制得目标化合物。

制备例5：鱼腥草素钠的制备

参照制备例3的方法，由十酰乙醛代替十二酰乙醛制得目标化合物.。

实施例1：十二酰乙醛氨氧乙酸肟(新鱼腥草素氨氧乙酸肟)的制备

於干燥洁净的1000mL的四颈圆底烧瓶，安装上机械搅拌器、回流冷凝管和加料漏斗。向其中加入45.2g(0.2mol)十二酰乙醛(制备例2化合物)与绝对无水乙醇600ml，搅拌下加入无水吡啶130ml，於室温下，分批加入16.7g(0.22mol)氨氧乙酸盐酸盐(制备例1化合物)，加完保持室温搅拌1h。反应完毕，减压浓缩至干，残留物加入200ml水溶解，然后用盐酸调节pH值至4.5～5.0，用乙酸乙酯200ml×3萃取，合并乙酸乙酯层，依次用适量饱和碳酸氢钠溶液洗、饱和氯化钠溶液洗，无水硫酸钠干燥。过滤除去干燥剂，浓缩至干，得白色结晶性固体39.5g，收率66％。HPLC含量99.3％。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：

δ7.73(1H，三重峰，J＝8.1Hz，14号氢)；δ4.87(2H，单峰，18号氢)；δ2.69～2.74(2H，双重峰，13号氢)；δ2.41(2H，，三重峰，11号氢)；δ1.63～0.75(21H，，1～10号氢)。

MS：m/z(M⁺)299.2(100％)，300.2(17.8％)。

实施例2：十二酰乙醛氨氧乙酸肟钠盐(新鱼腥草素氨氧乙酸肟钠盐)的制备

将实施例1化合物12g(0.04mol)十二酰乙醛氨氧乙酸肟溶于150ml异丙醇中，搅拌下加入2.0g(0.05mol)氢氧化钠溶于20ml无水乙醇的溶液，常温搅拌20min，冰箱中冷却，得大量白色结晶性粉末，过滤，固体用冷的异丙醇洗涤，真空50℃干燥即得9.3g白色结晶性粉末固体，收率54％。

其它有机胺盐如法炮制，在这里不再赘述。

实施例3：十酰乙醛氨氧乙酸肟(鱼腥草素氨氧乙酸肟)的制备

参照实施例1的方法，由十酰乙醛代替十二酰乙醛制得目标化合物.。

实施例4：十酰乙醛氨氧乙酸肟钠盐(鱼腥草素氨氧乙酸肟钠盐)的制备

参照实施例2的方法，由十酰乙醛氨氧乙酸肟代替十二酰乙醛氨氧乙酸肟制得目标化合物。

实施例5：新鱼腥草素亚硫酸氢钠加成物氨氧乙酸肟的制备

於干燥洁净的1000mL的四颈圆底烧瓶，安装上机械搅拌器、回流冷凝管和加料漏斗。向其中加入65.8g(0.2mol)十二酰乙醛亚硫酸氢钠加成物(制备例3化合物)与绝对无水乙醇400ml，搅拌下加入无水吡啶130ml，於室温下，加入16.7g(0.22mol)氨氧乙酸盐酸盐(制备例1化合物)，加完回流搅拌1h。反应完毕，减压浓缩至干，残留物加入200ml水溶解，然后用盐酸调节pH值至6.5～7.0，用乙酸乙酯300ml×3萃取，合并乙酸乙酯层，依次用适量饱和碳酸氢钠溶液洗、饱和氯化钠溶液洗，无水硫酸钠干燥。过滤除去干燥剂，浓缩至干，得白色结晶性固体58.2g，收率49％。HPLC含量98.9％。

实施例6：新鱼腥草素亚硫酸氢钠加成物氨氧乙酸肟钠盐的制备

参照实施例2的方法，用实施例5化合物代替十二酰乙醛氨氧乙酸肟，得目标化合物。

实施例7：十二酰乙醛氨氧乙胺肟(新鱼腥草素氨氧乙胺肟)的制备

7.1、十二酰乙醛肟的制备

於干燥洁净的1000mL的四颈圆底烧瓶，安装上机械搅拌器、回流冷凝管和加料漏斗。向其中加入45.2g(0.2mol)十二酰乙醛(制备例2化合物)、盐酸羟胺21g(0.3mol)与95％乙醇300ml及水20ml，0℃下搅拌下分次加入氢氧化钠20g(0.5mol)，搅拌20min后，升温至室温搅拌1h，将反应液用盐酸酸化至pH 2.0～3.0，用二氯甲烷300ml×3萃取，合并二氯甲烷层，无水硫酸镁干燥。过滤除去干燥剂，浓缩至干，得无色油状液体37，9g，冷却后固化，直接用于下一步。

7.2、十二酰乙醛氨氧乙胺肟(新鱼腥草素氨氧乙胺肟)的制备

於洁净的2000mL的四颈圆底烧瓶，安装上机械搅拌器、回流冷凝管和加料漏斗。向其中加入PEG一400(200ml)、甲苯(600ml)和十二酰乙醛肟(48g，0.2mol)，于搅拌下加入KOH(42.8g，0.8mol)和2一氯乙胺盐酸盐(25.3g，0.2mol)，于35～40″C搅拌反应2h，加水(600ml)后继续搅拌30min。静置分层，有机相依次用水(600ml×3)和饱和食盐水(300ml×2)洗涤，用无水硫酸钠干燥后蒸除甲苯，得无色透明液体，冷却后固化。HPLC含量99.1％。

实施例8：十二酰乙醛氨氧乙胺肟(新鱼腥草素氨氧乙胺肟马来酸盐)马来酸盐的制备

实施例6化合物(28.4g，0.1mol)的无水乙醇(150ml)溶液中加入马来酸(15.6g，0.1mol)，加热搅拌至溶，减压蒸除乙醇，剩余物用乙腈重结晶，得到33.2g白色晶体十二酰乙醛氨氧乙胺肟马来酸盐，收率75.4％。

其它有机酸盐如法炮制。

实施例9：十酰乙醛氨氧乙胺肟(鱼腥草素氨氧乙胺肟)的制备

参照实施例7的方法，由十酰乙醛代替十二酰乙醛制得目标化合物。

实施例10：新鱼腥草素亚硫酸氢钠加成物氨氧乙胺肟的制备

参照实施例7的方法，由新鱼腥草素亚硫酸氢钠加成物(制备例3化合物)代替十二酰乙醛，反应温度改为回流1h，制得目标化合物。

实施例11；新鱼腥草素亚硫酸氢钠加成物氨氧乙胺肟富马酸盐的制备

参照实施例8的方法，由富马酸代替马来酸，制得目标化合物。

实施例12：鱼腥草素亚硫酸氢钠加成物氨氧乙胺肟的制备

参照实施例6的方法，由鱼腥草素亚硫酸氢钠加成物(制备例5合物)代替十二酰乙醛，反应温度改为回流1h，制得目标化合物。

实施例13：水溶性试验

方法：於2ml水中，将化合物配制成饱和水溶液，然后用HPLC逐级稀释法检测溶液中的浓度，结果见表1.

表1  化合物溶解度试验

结论：实施例的化合物水溶性比新鱼腥草素钠与鱼腥草素钠大的很多，本发明化合物水溶性良好。

实施例14：水溶液稳定性试验

方法：取样品适量，用水溶解并制成约含本品0.2mg/ml的溶液，作为供试品溶液；取上述溶液20μl，分别于0、2、6、10、14、18、20小时测定，记录色谱图。结果见表2.

表2  水溶液稳定性试验

结论：实施例的化合物水溶液稳定性比新鱼腥草素钠与鱼腥草素钠大的很多，本发明化合物稳定性良好。

Claims (7)

1、一种鱼腥草素类高水溶性、稳定性前体药物，或其可药用盐、水合物或溶剂化物，其特征在于：由以下通式(I)、(II)、(III)、(IV)所示的化合物：

其中，n为5～12

2、根据权利要求1所述的一种鱼腥草素类高水溶性、稳定性前体药物，或其可药用盐、水合物或溶剂化物，其特征在于：n为7或9

3、根据权利要求或1或2所述的一种鱼腥草素类高水溶性、稳定性前体药物，其特征在于：所述的可药用酸根盐选自甲磺酸盐或苯磺酸盐或对甲苯磺酸盐或酒石酸盐或富马酸盐或马来酸盐或枸橼酸盐或柠檬酸盐或乳酸盐或苹果酸盐或杏仁酸盐或盐酸盐；所述的可药用碱根盐选自钠盐或钾盐或氨丁三醇盐或叔丁胺盐或葡甲胺盐或乙醇胺盐或乙二胺盐或哌嗪盐。

4、根据权利要求或1或2所述的一种鱼腥草素类高水溶性、稳定性前体药物，药物，其特征在于：所述的溶剂化物为水合物或C₁～C₄的醇的溶剂化物。

5、含有治疗有效量的如权利要求1～4中任一项所述的一种鱼腥草素类高水溶性、稳定性前体药物，或其可药用盐、水合物或溶剂化物的药物组合物。

6、权利要求1～5任一所述的鱼腥草素类高水溶性、稳定性前体药物与药学上可接受的辅料制成任何一种允许的剂型。

7、如权利要求1～5任一所述的鱼腥草素类高水溶性、稳定性前体药物，或其可药用盐、水合物或溶剂化物在制药中的运用。