CN101402565B - 卤代2－（a－羟基戊基）苯甲酸盐及其制法和用途 - Google Patents

Abstract

本发明公开了卤素取代2-(a-羟基戊基)苯甲酸盐类化合物、其制备方法及其在药物方面的应用，属有机化学合成技术领域。本发明化合物结构式如下，其具有对映体结构。其中：R¹代表卤原子，n＝1-3，M为一价金属离子或二价金属离子，或三价金属离子或有机碱基。该类化合物在预防和治疗心脑缺血性疾病及改善心脑循环障碍、抗血栓等方面有较好的活性。

Description

卤代2-(a-羟基戊基)苯甲酸盐及其制法和用途

技术领域

本发明涉及一类有机化合物，尤其涉及卤素取代2-(a-羟基戊基)苯甲酸盐类化合物及其制备方法，还涉及该类化合物在制备预防和治疗心脑缺血性疾病及改善心脑循环障碍、抗血栓等药物方面的应用。

背景技术

急性缺血性脑卒中和冠心病以及心肌梗死，都是由于各种因素诱发血栓形成所导致的缺血性损伤疾病，该类疾病给病人带来极大的痛苦甚至生命危险。目前，该类药物的研究一直是药物研究开发的热点和前沿。

卤素化学是药物化学中的重要研究领域，卤素是电负性大于碳的原子，当卤原子取代氢原子后，往往会使原来分子的电子云分布发生很大变化。从分子学水平来看，该改变通常会引起分子亲脂性的变化和目标结构静电作用的变化，以及一些代谢途径的改变等。从生理功能看，与一般的无卤原子药物相比，含卤原子药物具有更好的组织穿透性，更高的靶器官作用选择性，临床有效剂量大大降低，作用时间也将明显延长。

中国专利01109795.7，首次公开了2-(a-羟基戊基)苯甲酸盐及其制法和用途，涉及一价金属离子、二价金属离子和有机碱基的盐，具体公开了钾、钠、钙、镁、锌、苯胺、苄胺、吗啉、二乙胺的盐。其说明书中还公开了钾盐对局部脑缺血大鼠脑梗塞面积的影响，对大鼠血小板聚集的影响，以及大鼠离体心脏缺血，再灌注心率失常的保护作用，证明钾盐在上述实验中发挥了有益作用。

中国专利200410048268.9和中国专利200610073077.7，分别公开了相应的手性2-(a-羟基戊基)苯甲酸盐的制备和活性测试；中国专利200710054215.1，首次公开了卤代2-苯并[c]呋喃酮化合物合成以及活性测试，其卤代2-苯并[c]呋喃酮化合物的活性要明显好于丁基苯酞，但是以上专利中均未涉及到卤代2-(a-羟基戊基)苯甲酸盐的合成及应用。

本发明研究人员在研制新的心脑血管类药物时，研究了包括上述已公开的大量2-(a-羟基戊基)苯甲酸盐，发现现有的相关文献都均未涉及到卤代的2-(a-羟基戊基)苯甲酸盐。卤代的2-(a-羟基戊基)苯甲酸盐类化合物与现有技术2-(a-羟基戊基)苯甲酸盐以及3-正丁基苯酞相比，具有更加优异的心脑血管活性，并且有更好的物理和化学性。

发明内容

本发明目的就在于提供一种有良好的心脑血管活性、能明显抗脑缺血、抑制血栓形成的一类新化合物-卤代2-(a-羟基戊基)苯甲酸盐。

本发明另一目的是提供该卤代2-(a-羟基戊基)苯甲酸盐的合成方法。

本发明又一目的是提供该卤代2-(a-羟基戊基)苯甲酸盐在制备预防和治疗心、脑缺血和心、脑动脉梗塞及改善脑微循环等药物中的应用。

本发明化合物结构式如下，其具有对映体结构。

其中：R¹代表卤原子，n＝1-3，

M是一价金属离子，或是二价金属离子，或三价金属离子，或是有机碱基。M优选钾离子、钠离子、锂离子、钙离子、镁离子、锌离子、铝离子或铁离子；M优选苯胺基、苄氨基、二甲胺基、三甲胺基、二乙胺基、三乙胺基。

本发明化合物制备方法如下：

1.通式(I)中为M一价金属离子时卤代2-(a-羟基戊基)苯甲酸盐的制备

将当量的卤代-3-正丁基异并呋喃-1(3H)-酮加入等当量的或稍过量的一价碱，在-5～100℃的温度条件下使卤代3-正丁基异并呋喃-1(3H)-酮发生开环解离反应，反应时间为0.5～7小时，即制得通式(I)中M为一价金属离子的本发明化合物卤代的2-(a-羟基戊基)苯甲酸盐。

其中，开环解离反应的溶剂介质是甲醇、乙醇、丙酮、异丙醇，水或水-醇(酮)混合物中的任一种。

所使用的结晶溶剂可以是甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、丙酮、乙酸乙酯、氯仿、乙醚、二氯甲烷、苯、甲苯、石油醚或以上结晶溶剂中的任一种或任意组合；一价碱可以是无机碱如氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化锂等，或有机醇金属盐如甲醇钠(钾)、乙醇钠(钾)等。

2.通式(I)中M为二价或三价金属离子时卤代的2-(a-羟基戊基)苯甲酸盐制备方法：

将通式(I)中M为一价金属离子的本发明化合物卤代2-(a-羟基戊基)苯甲酸盐(如钾盐、钠盐)溶于溶剂介质中后，加入等量的二价或三价金属盐，在室温条件下使其发生交换反应，反应时间为0.5～8小时，再经过常规操作处理和结晶纯化，即可得通式(I)中M为二价或三价金属离子时本发明卤代2-(a-羟基戊基)苯甲酸盐。

其中，溶剂介质可以是甲醇、乙醇、丙酮、异丙醇，水或水-醇(酮)混合物中的任一种。所使用的二价金属盐可以是氯化镁、氯化锌、硫酸镁、硫酸锌等二价金属盐中的任一种；三价金属盐可以是氯化铝、氯化铁、硫酸铝、硫酸铁等三价金属盐中的任一种。所使用的结晶溶剂可以是水、甲醇、乙醇、异丙醇、乙酸乙酯！氯仿、乙醚、二氯甲烷，或上述结晶溶剂中的两种或三种不同比例的混合溶剂中的任一种。

3.通式(I)中M为有机碱基时卤代2-(a-羟基戊基)苯甲酸盐制备方法：

(1)将本发明化合物卤代2-(a-羟基戊基)苯甲酸盐(如钾盐、钠盐)溶于溶剂介质后，加入无机酸调溶液的PH值至2.0～6.0，在-25～+25℃、优选在-20～+20℃的温度条件下，使卤代的2-(a-羟基戊基)苯甲酸盐与无机酸发生酸化反应，生成卤代的2-(a-羟基戊基)苯甲酸。

(2)向上述溶液中加入有机提取溶剂，在-20～10℃的条件下，利用公知的提取技术，提取游离的卤代2-(a-羟基戊基)苯甲酸，得游离的卤代2-(a-羟基戊基)苯甲酸有机溶液，将该溶液在-20～10℃的温度条件下保存，优选的温度条件为-20～0℃之间，备用。

(3)在-10～0℃的温度条件下，向步骤(2)所得溶液中加入含有与卤代2-(a-羟基戊基)苯甲酸等当量或稍过量的一价碱溶液，如氢氧化钾醇溶液，反应生成M为一价金属离子的本发明化合物卤代2-(a-羟基戊基)苯甲酸盐，如钾盐，待其充分反应后，采用与制备方法1相同的提纯方法，即可制得M为一价金属离子本发明化合物卤代2-(a-羟基戊基)苯甲酸盐。

(4)在-10～0℃的温度条件下，向步骤(2)中所得含游离卤代2-(a-羟基戊基)苯甲酸的溶液中，加入含有与卤代2-(a-羟基戊基)苯甲酸等当量或稍过量的二价无机碱或二价金属盐溶液，三价金属盐溶液，如氢氧化钙醇水溶液，反应生成M为二价或三价金属离子的本发明化合物卤代2-(a-羟基戊基)苯甲酸盐，如钙盐，待其充分反应后，采用与制备方法2相同的提纯方法，即可制得M为二价或三件金属离子的本发明化合物卤代2-(a-羟基戊基)苯甲酸盐。

(5)在-10～0℃的温度条件下，向步骤(2)中所得含游离卤代2-(a-羟基戊基)苯甲酸的溶液中，加入含有与卤代2-(a-羟基戊基)苯甲酸等当量或稍过量的有机碱，如化学纯苯胺，生成M为有机碱基的本发明化合物卤代2-(a-羟基戊基)苯甲酸有机碱盐，如苯胺盐，待其充分反应后，采用与制备方法2相同的提纯方法，即可制得M为有机碱基的本发明化合物卤代2-(a-羟基戊基)苯甲酸有机碱盐。

其中酸化反应所使用的酸可以是浓或稀盐酸、硫酸中的任一种；酸化反应的温度控制在-25～+25℃之间；用于提取卤代2-(a-羟基戊基)苯甲酸的有机溶剂可以是乙醚、乙酸乙酯、氯仿、二氯甲烷、苯、甲苯、石油醚、正己烷、环己烷中任意一种；一价碱可以是氢氧化钾、氢氧化钠、氢氧化锂、甲醇钠(钾)、乙醇钠(钾)中任意一种；二价无机金属盐和二价无机碱可以是氯化镁、碳酸镁、氯化钙、碳酸钙、氯化锌、碳酸锌、硫酸镁或氢氧化钙中任意一种；三价无机金属盐可以是氯化铁、氯化铝，硫酸铁、硫酸铝中任意一种；有机碱可以是苯胺基、苄氨基、二甲胺基、三甲胺基、二乙胺基、三乙胺基或其它生物碱基类；溶解M为一价金属离子的本发明化合物卤代2-(a-羟基戊基)苯甲酸盐所使用的溶剂介质可以是水，甲醇一水、乙醇一水、丙酮一水、异丙醇一水混合物中的任一种。

本发明化合物具有如下优异的性能：

1、良好的结晶形态，只需简单的后处理即可达到较高纯度。化学稳定性好，适合制药工业的储藏和加工。

2、动物急性毒性试验表明，与已公开的丁基苯酞、卤代2-苯并[c]呋喃酮、2-(a-羟基戊基)苯甲酸盐相比，本发明的化合物毒性更小。

3、在动物药效模型试验中，与已公开的丁基苯酞、卤代2-苯并[c]呋喃酮、2-(a-羟基戊基)苯甲酸盐相比，在相同剂量下对脑动脉阻塞引起的脑组织损伤显示出更加优异的保护作用和抗血小板聚集作用。说明本发明化合物对心、脑缺血具有更好的预防和治疗作用，并具有抗血小板聚集，治疗心、脑动脉阻塞，改善心、脑微循环等药理作用。

4、在动物药效模型试验中，与已公开的丁基苯酞、卤代2-苯并[c]呋喃酮、2-(a-羟基戊基)苯甲酸盐相比，具有更小的显著性疗效剂量，即在较低剂量下，本发明的化合物即可表现出显著性的效果。

本发明化合物在动物试验中显示出优异的心脏缺血性损伤的保护作用、抗血小板聚集作用和减轻脑动脉阻塞引起的脑组织损伤作用，而且没有兴奋和导致出血等副作用。对心、脑缺血具有很好的预防和治疗作用，并具有抗血小板聚集，治疗心、脑动脉阻塞，改善心、脑微循环等药理作用。可用于制备预防和治疗心、脑缺血性疾病，心、脑动脉阻塞，改善心、脑微循环障碍等疾病药物。

本发明化合物可以组合物的形式通过口服、静脉注射等方式施用于需要这种治疗的患者。用于口服时，可将其制成相应的片剂、粒剂、胶囊剂等；用于注射给药时，可以将其制成注射用的溶液、水或油性悬浮剂等。优选的形式是片剂、胶囊剂和注射剂。本发明药物组合物的各种剂型可以按照药学领域的常规生产方法制备。例如使活性成分与一种或多种载体混合，然后将其制成所需的剂型。本发明药物活性成分与其他成分重量比为3：2，最优选的重量比为1：1。本发明化合物的使用量可根据用药途径、患者年龄、体重、所治疗的疾病的类型和严重程度等变化，其日剂量可以是200-600毫克，优选100毫克，可一次或分多次使用。

具体实施方式

下面的实施例可以帮助本领域的技术人员更全面地理解本发明，但不以任何方式限制本发明。

实施例1：卤代的2-(a-羟基戊基)苯甲酸的制备

在反应瓶中加入卤代-3-正丁基异并呋喃-1(3H)-酮(卤代3-正丁基苯酞)50g甲醇100ml，NaOH 20g和水30ml，回流6小时后，减压除去甲醇后再补加100ml水，冷却。搅拌下滴加浓度为2M的盐酸，调PH＝2～3。用乙醚萃取，萃取液用水洗，干燥，过滤，减压将乙醚抽干，得白色固体100g，收率为：90％。

实施例2：卤代的2-(a-羟基戊基)苯甲酸钠盐的制备

在反应瓶中加入NaOH 2.0g(0.1mol)、甲醇30ml，卤代的2-(a-羟基戊基)苯甲酸(0.1mol)，室温搅拌2小时，分批加入500ml乙醚，析出白色油状物，搅拌2小时后静置，倾出上层清液，油状物减压蒸干，得白色的卤代的2-(a-羟基戊基)苯甲酸钠盐。

实施例3：卤代的2-(a-羟基戊基)苯甲酸钾盐的制备

取10.7gKOH(0.19mol)溶于60ml甲醇中，然后分批加入卤代的2-(a-羟基戊基)苯甲酸(0.48m01)，1小时加完；加毕，继续搅拌2小时，然后慢慢倒入2升乙醚溶液中，立即有白色固体析出，加毕，继续搅拌2小时，过滤，真空干燥得54g白色固体。

实施例4：卤代的2-(a-羟基戊基)苯甲酸钙盐的制备

(1)3氟-2-(a-羟基戊基)苯甲酸钙盐制备

取3氟-2-(a-羟基戊基)苯甲酸钾盐(0.20mol)，溶于230ml水中，另取11gCaCl₂(0.2m01)溶于150ml水中，放冷，然后将CaCl₂水溶液在搅拌下慢慢滴入3氟-2-(a-羟基戊基)苯甲酸钾盐中，1小时加完，加毕，继续搅拌2小时；过滤，抽干后，真空干燥得白色固体，收率67.8％

¹H NMR(DMSO-d₆，300MHz)δ：7.62(1H，d)，7.50(1H，dd)，7.26(1H，t)，5.42(1H，m)，2.25(1H，m)，1.70(1H，m)，1.50-1.20(4H，m)，0.87(3H，t).

(2)4氟-2-(a-羟基戊基)苯甲酸钙盐制备

类似(1)所述方法，将4氟-2-(a-羟基戊基)苯甲酸钾盐进行反应，得到白色固体。

¹H NMR(DMSO-d₆，300MHz)δ：7.83(1H，dd)，7.20(1H，dd)，7.12(1H，dt)，5.41(1H，m)，2.13(1H，m)，1.86(1H，m)，1.42-1.30(4H，m)，0.89(3H，t).

(3)5氟-2-(a-羟基戊基)苯甲酸钙盐制备

类似(1)所述方法，将5氟-2-(a-羟基戊基)苯甲酸钾盐进行反应，得到白色固体。

¹H NMR(DMSO-d₆，300MHz)δ：7.55-7.32(3H，m)，5.42(1H，m)，2.07(1H，m)，1.70(1H，m)，1.47-1.21(4H，m)，0.90(3H，t).

(4)6氟-2-(a-羟基戊基)苯甲酸钙盐制备

类似(1)所述方法，将6氟-2-(a-羟基戊基)苯甲酸钾盐进行反应，得到白色固体。

¹H NMR(DMSO-d₆，300MHz)δ：7.65(1H，dt，J＝4.39，7.68Hz)，7.24(1H，d，J＝7.68Hz)，7.10(1H，t，J＝8.42Hz)，5.41(1H，m)，2.08(1H，m)，1.73(1H，m)，1.49-1.35(4H，m)，0.91(3H，t).

实施例5：卤代的2-(a-羟基戊基)苯甲酸苄胺盐的制备

将卤代的2-(a-羟基戊基)苯甲酸(0.12mol)溶于700ml乙醚中，加入苄胺12.8g(0.12mol)，室温搅拌10分钟后析出白色固体，继续搅拌2小时。抽滤，滤饼用乙醚洗，抽干，干燥得白色固体。实施例6:药用片剂制备方法：

 

成分	数量(mg/片)
		活性成分	200
药用淀粉	50
		微晶纤维素	35
硬脂酸镁	0.5
		滑石粉	1
羰甲基纤维素钠	5

制备方法：将活性成分、药用淀粉、微晶纤维素、羰甲基纤维素钠磨粉，混匀，用水均匀润湿，把湿润后的混合物制成粉，过筛并干燥，再过筛，加入硬脂酸镁、滑石粉，然后将混合物压片，加包薄膜衣(可以选用羟丙基甲基纤维素或同类产品)。活性成分含量为200毫克。

实施例7：药用胶囊剂的制备方法

 

成分	数量(mg/胶囊)
		活性成分	200
药用淀粉或甘露糖	20～50
		甲基纤维素	3～4
交联PVP	0.5～1

制备方法：按配方将活性成分与助剂混匀后制粒，过筛，把得到的混合物按定量装入胃溶性硬胶囊中，活性成分含量为200毫克。

实施例8：静脉注射剂的制备方法

 

成分	数量
		活性成分	50～100mg/瓶
氢氧化钠	适量
		注射用水或盐水	5～50m1

实施例9：静脉注射冻干剂的制备方法

 

成分	数量
		活性成分	100mg/瓶
氢氧化钠	适量

制备方法：将活性成分溶于注射用水，用氢氧化钠调节pH8.5～9.5，过滤溶液，装瓶冻干得饼状或粉状冻干剂。使用时用0.9％生理盐水或注射用水或5％葡萄糖注射液稀释后，进行静脉注射或静脉点滴。

实施例10：本发明化合物对局部脑缺血大鼠脑梗塞面积的影响

(1)实验材料与方法

Wistar大鼠，雌雄各半；卤代的2-(a-羟基戊基)苯甲酸钾盐，用双蒸水配置；TTC为白色粉末，北京化工厂出品。

预防组给药方法：MCAO前1小时灌胃给与卤代的2-(a-羟基戊基)苯甲酸钾盐，剂量分别为20，30，60，120mg/kg。

治疗组给药方法：MCAO后2小时分别灌胃给与卤代的2-(a-羟基戊基)苯甲酸钾盐，剂量同上。

长期给药方法：MCAO前连续给药7d，灌胃20mg/kg，2次/天。末次给药后24h行MCAO术。NBP给药体积为2ml/kg。

MCAO模型的制备：线拴法建立大鼠大脑中动脉阻塞局灶性脑缺血—再灌注损伤模型，大鼠用10％水合氯醛腹腔注射麻醉，仰位固定，颈部正中切开皮肤，钝性分离左颈总动脉，颈外动脉，颈内动脉，结扎翼腭动脉，仅保留颈内动脉入颅主干；将预备好的尼龙线(烧灼直径为0.3mm)经颈外动脉主干切口插入到颈总静脉分叉处，缓慢向颈内动脉入颅方向推进，以分叉处为标记，推进约17mm时可感到阻力，表明尼龙线的头端已通过大脑中动脉的起始处，此时即完成一侧大鼠大脑中动脉阻塞模型，缝合切口，将尼龙线的尾端留在皮外，再灌注时将尼龙线轻轻外抽，感到阻力，表明尼龙线头端已回到颈外动脉主干中，从而实现再灌注。

神经病学评分手术后功能缺损按Longa5分制标准进行评分：0分，无明显神经病学症状；1分，不能完全伸展左前肢；2分，向左侧旋转；3分，行走时向左侧倾倒；4分，不能自行行走，有意识障碍。累积1分以上即为成功模型。动物苏醒后，观察缺血动物的神经功能缺失症状。

实验分组：共9组，每组6只，共54只

假手术组；缺血再灌注组；卤代的2-(a-羟基戊基)苯甲酸钾盐高(60mg/kg)、中(30mg/kg)、低剂量组(20mg/kg)；卤代的2-(a-羟基戊基)苯甲酸钾盐于缺血2小时灌胃给与大鼠。

梗塞体积的测定：缺血2小时再灌注24小时后，将大鼠断头，取前脑，冠状切成6片，每片2毫米，用TTC染色，37℃孵育30分钟，正常组织染成红色，梗塞组织染成白色。数码照相，然后由photoshop计算出梗塞区域面积占大脑球面积的百分比。

(2)实验结果

其中预防组的实验结果中对照组的脑梗塞面积为37.44±2.88％，我们合成的化合物都具有的预防和治疗效果，其中化合物5-氟-2-(a-羟基戊基)苯甲酸钾盐和5-溴-2-(a-羟基戊基)苯甲酸钾盐较好，其脑梗塞面积为20.12±7.93％和13.19±2.93％，经统计学处理，二者有显著性差异。

(3)结论：卤代的2-(a-羟基戊基)苯甲酸钾盐可明显减轻大鼠脑动脉阻塞引起的脑组织损伤，减轻脑梗塞面积。相对于目前已公开的丁基苯酞、卤代2-苯并[c]呋喃酮、2-(a-羟基戊基)苯甲酸盐，卤代的2-(a-羟基戊基)苯甲酸钾盐具有更好的活性。

Claims (3)

1.卤代2-(a-羟基戊基)苯甲酸盐化合物，其特征在于，其具有式I结构，且该化合物为非对映异构体；

其中：R¹代表卤原子，n＝1-3，

M是一价金属离子，或是二价金属离子，或三价金属离子，或是有机碱基。

2.如权利要求1所述的卤代2-(a-羟基戊基)苯甲酸盐化合物，其特征在于，M为钾离子、钠离子、锂离子、钙离子、镁离子、锌离子、铝离子或铁离子。

3.如权利要求1所述的卤代2-(a-羟基戊基)苯甲酸盐化合物，其特征在于，M为苯胺基、苄氨基、二甲胺基、三甲胺基、二乙胺基、三乙胺基。