CN101654398A

CN101654398A - 从植物针叶原料中提取高纯度聚戊烯醇的方法

Info

Publication number: CN101654398A
Application number: CN200910034931A
Authority: CN
Inventors: 郑光耀; 薄采颖; 宋强; 王成章; 周维纯
Original assignee: Institute of Chemical Industry of Forest Products of CAF
Current assignee: Institute of Chemical Industry of Forest Products of CAF
Priority date: 2009-09-09
Filing date: 2009-09-09
Publication date: 2010-02-24
Anticipated expiration: 2029-09-09
Also published as: CN101654398B

Abstract

本发明公开了一种从植物针叶原料中提取高纯度聚戊烯醇的方法，该方法以松属、云杉属、冷杉属、杉木属等植物的针叶为原料，通过石油醚溶剂提取，提取液浓缩后加入氢氧化钠溶液皂化，皂化液用石油醚溶剂萃取，萃取液浓缩后加入丙酮溶解，冷却，过滤除杂，滤液浓缩后加入乙醇溶液萃取，去除萃取液，乙醇不溶物加入丙酮溶解，冷冻，过滤除杂，滤饼经真空干燥后，得到所需的高纯度聚戊烯醇。本发明工艺较为简单，无需柱层析，溶剂损耗低，产品纯度高，易于工业化生产。

Description

从植物针叶原料中提取高纯度聚戊烯醇的方法

技术领域

本发明属于天然产物提取技术领域，具体涉及一种聚戊烯醇的提取方法，尤其是利用松属、云杉属、冷杉属、杉木属等植物的针叶为原料，提取分离精制聚戊烯醇的方法。

技术背景

聚戊烯醇(polyprenol)是由一系列异戊烯基单元和终端异戊烯醇单元组成的长链多萜类化合物，广泛地存在于被子植物、裸子植物、细菌、真菌及哺乳动物的脏器中。在松树、冷杉、云杉、杉木和银杏等高等植物的绿叶中含量较为丰富，它们是由14～24个异戊烯基单元构成，与哺乳动物脏器中所含的多萜醇结构相近。多萜醇是动物组织中糖蛋白合成时糖的载体，对维持机体生命活动具有重要作用。体内多萜醇不足，将影响免疫功能、细胞分裂和再生，并导致一系列疾病。外源性聚戊烯醇在体内经生物代谢可转化为体内所需的多萜醇，参与细胞膜糖蛋白的生物合成。临床实验表明，聚戊烯醇能够促进机体造血功能、改善肝脏机能，对各种肝脏疾病、肾功能疾病、再生障碍性贫血、糖尿病以及高血脂、痛风、红斑狼疮等免疫功能疾病有显著疗效，且无毒副作用，可用于保健食品和生物制药行业，具有广阔的开发利用前景。

中国专利ZL01113696.0公开了一种从银杏叶中制备银杏叶聚戊烯醇和银杏叶提取物(GBE)的方法，该方法采用多种混合溶剂和硅胶柱层析法制备70％以上聚戊烯醇，生产成本高，难以进行工业化生产。中国专利ZL200410041670.4公开了一种聚戊烯醇的分子蒸馏纯化方法，该方法真空度高达5×10^-3mbar，蒸馏温度高达300℃，工业化生产较为困难。中国专利ZL200410074088.8公开了一种含银杏聚戊烯醇的药物组合物及其制备方法，该方法采用超临界二氧化碳从聚戊烯醇粗提物中萃取出杂质，使萃取釜中聚戊烯醇得到纯化，但与聚戊烯醇极性和沸点相近的化合物仍会留在萃取釜中，无法得到纯度较高的聚戊烯醇。

发明内容

针对现有技术存在的聚戊烯醇的纯度不高、生产成本高的不足，本发明提供一种从植物针叶原料中提取高纯度聚戊烯醇的方法，以针叶植物的针叶为原料，提取分离精制聚戊烯醇。

本发明的技术方案为一种从植物针叶原料中提取高纯度聚戊烯醇的方法，包括步骤如下：

1、以松属、冷杉属、云杉属、杉木属等植物的针叶为原料，经切碎、烘干和粉碎后，原料的含水率＜12％wt，按原料重量与溶剂体积的比例为1∶4～10加入石油醚溶剂，在50℃～70℃条件下回流提取2次，每次2～6小时，过滤，合并石油醚提取液，减压浓缩回收溶剂，得到石油醚提取物。

2、按提取物重量与溶剂体积的比例为1∶1～2加入质量百分比浓度为10～20％的氢氧化钠溶液，在50℃～70℃条件下搅拌反应1～2小时后，加入等体积的石油醚重复萃取4～6次，合并石油醚萃取液，水洗至pH值为7止，减压浓缩回收溶剂，得到针叶不皂化物。

3、按不皂化物重量与溶剂体积的比例为1∶5～10加入丙酮，加热搅拌溶解后，置于0℃～5℃条件下冷藏4～8小时，将析出物过滤除去，滤液回收溶剂，得到聚戊烯醇粗提物。

4、按粗提物重量与溶剂体积的比例为1∶4～8加入质量百分比浓度为85％～95％的乙醇溶液，加热搅拌溶解后，静置分层，吸取上清液，沉淀物加入乙醇溶液，重复操作4～6次，得到乙醇不溶物。

5、按不溶物重量与溶剂体积的比例为1∶5～10加入丙酮，搅拌溶解后，置于-20℃～-24℃条件下冷冻4～8小时，过滤去除滤液，滤饼加入丙酮溶解，重复操作4～6次，滤饼浓缩干燥后，即可得纯度为90％以上的浅黄色油状聚戊烯醇。

有益效果：

1)选择松属、云杉属、冷杉属、杉木属等植物的针叶为原料，不但来源广泛，不受季节限制，而且价格低廉、原料充足；

2)在皂化、除杂及纯化过程中不使用混合溶剂，方便溶剂回收和重复利用，降低了溶剂损耗；

3)分离提取过程反应温度低，操作条件温和，保证了聚戊烯醇品质的稳定性；

4)提取工艺较为简单，无需柱层析，溶剂损耗低，产品纯度高，易于实现工业化生产。

附图说明

图1为针叶聚戊烯醇HPLC谱图。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步的详细说明，但它们并不是对本发明的限制。

本发明的产物聚戊烯醇的纯度测定使用的高效液相色谱法，色谱柱为分析柱Kromasil C18 ODS1(150mm×4.6mm，5μm)，柱温为室温，紫外检测波长为206nm；流动相为异丙醇∶甲醇∶正己烷∶水＝50∶25∶10∶4(v/v)；流量为1mL/min。

如图1所示，针叶聚戊烯醇主要由C₇₅、C₈₀、C₈₅、C₉₀、C₉₅、C₁₀₀-Prenol等不同链长的聚戊稀烯醇同系物组成，其中C₈₅、C₉₀-Prenol含量最高。

实施例1

松树、冷杉、云杉或杉木等植物的针叶一种或几种，经切碎、烘干和粉碎后，制成含水率在12％wt以下的针叶粉末。取500g针叶粉末置于5000ml的圆底烧瓶中，加入2500ml石油醚加热至70℃回流提取2小时，过滤，滤渣再加入2000ml石油醚，重复提取1次。合并两次提取液，减压浓缩回收溶剂后，得到石油醚提取物28.1g。石油醚提取物加入60ml浓度为10％wt的氢氧化钠溶液，在60℃温度下搅拌反应2小时，用90ml石油醚萃取5次，合并石油醚萃取液，水洗至pH值为7止，减压浓缩回收溶剂，得到针叶不皂化物16.5g。针叶不皂化物加入100ml丙酮，加热搅拌溶解后，在2℃条件下静置5小时，过滤除去析出物，滤液减压浓缩回收溶剂后，得到12.7g聚戊烯醇粗提物。聚戊烯醇粗提物加入浓度为90％wt的乙醇溶液50ml，加热搅拌溶解后，冷却至室温，静置分层，吸取上清液，沉淀物加入乙醇溶液，重复操作5次，得到6.2g乙醇不溶物。乙醇不溶物加入50ml丙酮，搅拌溶解后，在-20℃温度下冷冻8小时，过滤除去滤液，滤饼加入丙酮溶解，重复操作5次，合并滤液回收丙酮，滤饼浓缩干燥后，得到3.1g聚戊烯醇含量在90.4％wt的浅黄色油状物。

实施例2

取含水率10％wt的马尾松针叶粉700g，置于5000ml的圆底烧瓶中，加入3500ml石油醚加热至70℃回流提取3小时，过滤，滤渣再加入2800ml石油醚，重复提取1次。合并两次提取液，减压浓缩回收溶剂后，得到石油醚提取物40.2g。石油醚提取物加入80ml浓度为20％wt的氢氧化钠溶液，在70℃温度下搅拌反应1小时，用120ml石油醚萃取5次，合并石油醚萃取液，水洗至pH值为7止，减压浓缩回收溶剂，得到针叶不皂化物20.7g。针叶不皂化物加入200ml丙酮，加热搅拌溶解后，在0℃条件下静置4小时，过滤除去析出物，滤液浓缩回收溶剂后，得到16.9g聚戊烯醇粗提物。聚戊烯醇粗提物加入浓度为92％wt的乙醇溶液80ml，加热搅拌溶解后，冷却至室温，静置分层，吸取上清液，沉淀物加入乙醇溶液，重复处理5次，得到9.2g乙醇不溶物。乙醇不溶物加入100ml丙酮，搅拌溶解后，在-22℃温度下冷冻6小时，过滤除去滤液，滤饼加入丙酮，重复操作5次，合并滤液回收丙酮，滤饼浓缩干燥后，得到4.7g聚戊烯醇含量91.2％wt的浅黄色油状物。

实施例3

取冷杉石油醚提取物100g，加入200ml浓度为15％wt的氢氧化钠溶液，在60℃温度下搅拌反应2小时，用300ml石油醚萃取4次，合并石油醚萃取液，水洗至pH值为7止，减压浓缩回收溶剂，得到针叶不皂化物57.4g。针叶不皂化物加入300ml丙酮，加热搅拌溶解后，在2℃条件下静置6小时，将析出物过滤除去，滤液浓缩回收溶剂后，得到40.7g聚戊烯醇粗提物。聚戊烯醇粗提物加入浓度为95％wt的乙醇溶液200ml，加热搅拌溶解后，冷却至室温，静置分层，吸取上清液，沉淀物加入乙醇，重复萃取5次，得到22.8g乙醇不溶物。乙醇不溶物加入150ml丙酮，搅拌溶解后，在-20℃温度下冷冻5小时，过滤除去滤液，滤饼加入丙酮，重复操作5次，合并滤液回收丙酮，滤饼浓缩干燥后，得到14.1g聚戊烯醇含量90.7％wt的浅黄色油状物。

Claims

1、一种从植物针叶原料中提取高纯度聚戊烯醇的方法，其特征在于，该提取分离精制方法是通过以下步骤实现的：

第一步，以植物的针叶为原料，经切碎、烘干和粉碎后，按原料重量与溶剂体积的比例为1∶4～10加入石油醚溶剂，在50℃～70℃条件下回流提取2次，每次2～6小时，过滤，合并石油醚提取液，减压浓缩回收溶剂，得到石油醚提取物；

第二步，将经过第一步处理得到的石油醚提取物，按提取物重量与溶剂体积的比例为1∶1～2加入氢氧化钠溶液，在50℃～70℃条件下搅拌反应1～2小时后，加入等体积的石油醚重复萃取4～6次，合并石油醚萃取液，水洗至pH值为7止，减压浓缩回收溶剂，得到针叶不皂化物；

第三步，将经过第二步处理得到的不皂化物按不皂化物重量与溶剂体积的比例为1∶5～10加入丙酮，加热搅拌溶解后，置于0℃～5℃条件下冷藏4～8小时，将析出物过滤除去，滤液浓缩回收溶剂，得到聚戊烯醇粗提物；

第四步，将经过第三步处理得到的聚戊烯醇粗提物按粗提物重量与溶剂体积的比例为1∶4～8加入乙醇溶液，加热搅拌溶解后，静置分层，吸取上清液，沉淀物加入乙醇溶液，重复操作4～6次，得到乙醇不溶物；

第五步，将经过第四步处理得到的乙醇不溶物按不溶物重量与溶剂体积的比例为1∶5～10加入丙酮，搅拌溶解后，置于-20℃～-24℃条件下冷冻4～8小时，过滤去除滤液，滤饼加入丙酮溶解，重复操作4～6次，滤饼浓缩干燥后，即可得纯度为90％wt以上的浅黄色油状聚戊烯醇。

2、按权利要求1所述的从植物针叶原料中提取高纯度聚戊烯醇的方法，其特征在于，所述的针叶植物指松属、冷杉属、云杉属、杉木属植物中的任意一种或几种的混合物。

3、按权利要求1所述的从植物针叶原料中提取高纯度聚戊烯醇的方法，其特征在于，第二步中的氢氧化钠溶液的质量百分比浓度为10～20％。

4、按权利要求1所述的从植物针叶原料中提取高纯度聚戊烯醇的方法，其特征在于，第四步中的乙醇溶液的质量百分比浓度为85％～95％。

5.按权利要求1所述的从植物针叶原料中提取高纯度聚戊烯醇的方法，其特征在于，第一步中以植物的针叶为原料，经切碎、烘干和粉碎后的原料的含水率＜12％wt。