CN101652144A - 使用噬菌体对动物的外层消毒 - Google Patents

Abstract

用于对动物外消毒的方法，包括将噬菌体施用于该外层。可以在从动物体的剩余部分上除去外层之前，在除去过程中或在从动物体的剩余部分上除去外层之后施用噬菌体。

Description

使用噬菌体对动物的外层消毒

技术领域

本发明一般涉及用于对动物的外层消毒的方法，且更具体地说，本发明涉及病毒，诸如噬菌体在控制动物的外层上的微生物群体，诸如细菌中的应用。

背景技术

在世界上的大部分地区来自动物来源的病原体(例如食物等)扩散至人是疾病和死亡的一个主要原因。对与动物相关的疾病的健康和经济后果的担忧已经导致广泛应用抗生素和类似的药物-既在人体中也在动物中。尽管抗生素最初对治疗因细菌导致的疾病极为有效并且自从大部分现代史以来保持了其有效性，但是其过度使用已经导致抗生素抗性微生物出现。

正在进行中的研究努力的目的在于研发抑制病原体从动物传播给人的选择性机制。例如，经实验发现动物屠体的微生物污染受到病毒，诸如噬菌体控制。施用噬菌体或其它病毒直接意味着将其用于人和甚至动物消耗，然而，在某种程度上对许多人而言被视为不理想。

此外，迄今为止，这些方法限于体内给予噬菌体并且将噬菌体施用于可食用的动物产品的固体表面，诸如屠体表面。用于其它目的的动物产品的处理(例如在制造衣服，家具等中)被广泛忽略。在这些方法中有用于从动物中除去，获得和防腐外层的方法。除去和防腐动物兽皮，皮肤，皮毛，毛皮和其它外层通常是高度有碍健康的过程。当手性获得动物的外层时，它们可能被粪便，尿，血液，动物脂肪，动物肉体和其它微生物，特别是细菌生长贮主所污染，而与用于防腐它们的方法无关。在实施过时的技术的情况中，细菌和其它微生物增殖和传播的大量额外机会出现。当使用过时的技术时，个体可能在整个防腐处理过程中反复操作，否则就是接触动物的外层，这本身就提供了大量额外的微生物生长和传播的机会(例如在脱毛，软化和浸渍法过程中)。对兽皮制革，否则就是对动物的外层，包括皮肤和毛皮防腐的过时技术仍然在广泛应用，特别是被个体和世界上发展程度较低的地区应用。甚至当使用用于除去或防腐动物的外层的现代方法时，个体仍然可能接触高度有碍健康的条件。

除对参与除去或防腐微生物，诸如细菌的个体存在威胁外，还可能损害防腐的外层。在识别这类损害的可能性的过程中，加热和/或杀虫剂，诸如五氯苯酚和其它化学品用于防止动物的外层上的微生物生长。然而，加热和/或化学品在从外层中除去微生物中的应用损害了外层(例如真皮和/或颗粒层)。

发明披露的内容

本发明在不同的实施方案中包括将病毒，诸如噬菌体或病毒混合物施用于动物的外部或外层的方法。为简便起见，本文所用的术语“噬菌体”是指特异性感染另一种微生物的噬菌体和任意其它类型的病毒。从外部施用于动物的噬菌体可以靶向不需要的微生物，诸如有害的微生物或者不需要的的微生物(例如导致变质，分解，不良气味或味道等的微生物)。本文所用的术语“外层”包括兽皮，毛皮，皮肤或外皮中的任一种与其覆盖层或与之分离的覆盖层，诸如羊毛，毛皮，毛发，羽毛和鳞屑。

在某些实施方案中，可以将噬菌体施用于此时仍然为存活的动物(例如，恰好在屠宰前等)。在其它实施方案中，可以将噬菌体施用于动物死亡之后的外部(例如，通过屠宰或其它方式)，例如，此后从动物体，诸如屠体的其它部分上除去动物的兽皮或“外层”。

本发明还包括在从动物体的其它部分上除去外层时，将噬菌体施用于动物的外层的方法的实施方案。

在其它实施方案中，本发明包括将噬菌体施用于从动物屠体上除去后的外层上的方法。在一个更具体的实施方案中，可以在对动物的兽皮防腐之前和/或过程中将噬菌体施用于动物兽皮。

本发明的其它方面以及特征和优点在本领域的普通技术人员充分考虑了随后的描述和所附的权利要求的情况下将变得显而易见。

本发明的最佳实施方式

认为在宰杀的动物兽皮上存在不需要的微生物，包括病原体与因这类不需要的微生物污染同一动物屠体的之间具有一定的相关性。认为找到在宰杀的动物兽皮上的路径的许多不需要的微生物来自该动物自身的肠道。来自动物接触的环境(例如动物生活的环境，诸如饲料分配器，鸡舍，围栏内等，或动物另外接触的，诸如运输工具，屠宰场中等)的不需要的微生物也可能污染动物的兽皮，并且在动物被宰杀后最终可以污染其屠体。

本发明包括用于防止存在于动物外部上的不需要的微生物转移扩散至人体和其它动物的方法。根据本发明的实施方案的噬菌体施用可以导致足够数量的一种或多种靶向微生物群的充分减少(例如约1个log或约90％或90％以上的减少(例如，至多约4log或99.99％的减少))，或足以防止预计的一种或多种靶向微生物生长(例如防止至少约90％，乃至约99.99％的预计的生长)，从而预防了其不需要的作用或使得这些微生物对其它抗微生物处理，例如化疗抗生素(例如广谱抗生素，窄谱抗生素，诸如细菌素乳链球菌素等)更为敏感。

可以用于减少微生物群体和/或防止微生物增殖到其潜力的组合物的一个实施方案包括一种或多种类型的裂解性噬菌体，它们会感染并且杀灭一种或多种不需要的靶向微生物(例如细菌等)。可以按照本发明的教导使用的组合物的另一个实施方案可以包括溶源性噬菌体，它们可将其基因组掺入其宿主基因组并且使用其宿主的基因表达或蛋白质产生机制所产生杀灭或抑制一种或多种不需要的靶向微生物的化合物，诸如溶解素酶。还可以按照本发明的教导使用既包括裂解性噬菌体又包括溶源性噬菌体的组合物的实施方案。

按照本发明教导使用的噬菌体可以具有包括野生型靶向微生物以及一种或多种靶向微生物的噬菌体抗性突变株，诸如所谓的美国专利申请公开号US-2006-0153811-A1中所述的“h-突变体”裂解性噬菌体的宿主范围，将该文献的全部披露内容引入本文作为参考。

还可以使用公知技术选择按照本发明教导使用的噬菌体，以便在某些pH条件(例如高度酸性条件，高度碱性条件等)，盐条件，温度变动等下生存，使得它们可以在靶向微生物可以生存的条件下保持存活并且有用。

所述组合物中噬菌体可以靶向的微生物的实例包括，但不限于大肠埃希氏杆菌(Escherichia coli)中的一种或多种菌株(例如，大肠杆菌(E.coli)O157：H7，包括，但不限于“Pattern 15”等)和沙门菌属(Salmonella)(例如，Salmonella enterica等)，葡萄球菌属(Staphylococcus)(例如，金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)，表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis)等)，假单胞细菌属(Pseudomonas)(例如，铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa)等)，志贺氏菌属(Shigella)，弯曲杆菌属(Campylobacter)，芽孢杆菌属(Bacillus)，(例如，炭疽芽孢杆菌(Bacillus anthracis)，蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)等)，嗜血杆菌属(Hemophilus)，博德特氏菌(Bordetella)，弗朗西斯氏菌属(Francisella)，布鲁杆菌属(Brucella)(例如流产布鲁杆菌(Brucella abortus)，猪布鲁氏菌(Brucella suis)，马尔他布鲁氏菌(Brucella melitensis)等)，利斯特氏菌属(Listeria)，耶尔森氏菌属(Yersinia)，链球菌属(Streptococci)和万古霉素-抗性肠球菌(Enterococci)(VRE)(例如(例如屎肠球菌(E.faecium)，粪肠球菌(E.faecalis)，鹑鸡肠球菌(E.gallinarium)等)中的细菌的不同种。

在某些实施方案中，基本上不含细胞的组合物中可以包括噬菌体。可以在载体宿主内(例如，在非致病性宿主细胞内)提供在其它实施方案中的噬菌体。

包括噬菌体的组合物可以以干燥形式或液体形式体现。可以通过公知方法，诸如美国专利申请顺序号US60/976,727中披露的那些制备干燥，颗粒或粉状形式的组合物的实施方案，将该文献披露的内容完整地引入本文作为参考。除噬菌体外，干燥组合物还可以包括填充剂。可以将包含干燥形式噬菌体的组合物撒在或干燥喷雾到动物上。

根据本发明的另一种实施方案的组合物的液体形式包括溶液形式的噬菌体，该溶液还可以包括使所述噬菌体在储存和运输过程中保持稳定的组分。可以将包含液体形式的噬菌体的组合物喷洒或喷雾(例如作为喷雾或雾，作为高压气流等)到动物上或可以将动物引入浓缩或稀释形式的组合物的浴槽中。

在噬菌体施用技术中，噬菌体可以穿透(例如在使用干燥组合物时涂布，在使用液体组合物时浸入)组合物所施用于的动物的外层(例如羊毛，毛皮，毛发，羽毛，鳞屑等)。可以将噬菌体施用于动物外部的所有区域，或仅施用于动物的外部的最有可能携带不需要的靶向微生物的特定区域(例如臀部，足部，腿部等)。

可以将噬菌体施用一次或多次(即，定期地)。

此外，在某些实施方案中，可以将化疗用抗微生物剂，诸如细菌素乳链球菌素以结合方式或在将噬菌体施用于外层之后施用于外层。

在一个方面中，这类方法可以减少或消除一种或多种不需要的靶向微生物传播至动物屠体，且最终传播至来源于该动物屠体的食品的情况得到减少或消除。

在从动物屠体上除去外层前将噬菌体施用于动物外部的实施方案中，施用噬菌体的技术(例如在高压下施用，浸入等)的具体目的在于从动物外部上除去微生物，诸如志贺氏菌属和产生志贺毒素的大肠杆菌的贮主(例如粪便，尿，污物等)。在这方面，本申请的方法可以作为洗涤或消毒过程的组成部分进行(例如使用表面活性剂，湿润剂，皂或其它化学消毒剂等)。在备选的实施方案中，可以通过常规的洗涤方法从动物外部局部上除去微生物的潜在贮主，此后将噬菌体施用于动物外部的至少部分。

在施用噬菌体和任意的洗涤的同时，动物仍然可以存活，或在宰杀动物后施用噬菌体和任意的洗涤。在任一情况中，在施用噬菌体后可以采取措施以便将其从动物的外部除去减至最少，且任选使动物的外部接触更多不需要的微生物减至最少。

一旦宰杀了动物，就可以从动物体的另一部分(例如其屠体等)上除去施用于的外层或部分外层。由于将一种或多种不需要的微生物群体减至最少，或至少接触了可以裂解它们的噬菌体，所以可以在任何不需要的在其上的靶向微生物转移至动物屠体或动物体任意的另一部分上或污染它并且在其上增殖风险降低的情况下除去外层。另外，不需要的靶向微生物被转移至除去外层和随后加工产品的环境中的表面上并且在其上增殖的可能性降低或减至最少。

在其它实施方案中，可以通过在从动物体的其它部分，诸如其屠体除去外层的过程中将噬菌体施用于外层防止微生物从动物的外层传播至其屠体。

可以通过喷雾，撒布，浸入或任意其它合适的方式进行这类施用，当然，这至少部分取决于施用于外层的组合物中包含的噬菌体的形式(例如干燥，液体等)。正如在从动物上除去外层前施用噬菌体的实施方案中，可以将噬菌体作为洗涤或消毒过程的组成部分或在其之后施用。

在某些实施方案中，可以同时将噬菌体施用于外层和除去了外层的动物部分。按照这种方式施用噬菌体防止了可能从外层转移至动物其它部分的任意靶向微生物在其它部分上生长。同时将噬菌体施用于外层和除去了外层的动物部分还可以增加与噬菌体施用方法相关的效率和经济性，因为单一噬菌体施用方法可以替代多种方法。

本发明的另一个方面包括在将外层从动物体的其它部分上除去后将噬菌体施用于动物的外层。在这类实施方案中，可以将噬菌体施用于外层的外部面和预先的外层内表面。

可以通过喷雾，撒布，浸入或任意其它合适的方式进行这类施用，当然，这至少部分取决于施用于外层的组合物中包含的噬菌体的形式(例如干燥，液体等)。正如在从动物上除去外层前施用噬菌体的实施方案中，可以将噬菌体作为洗涤或消毒过程的组成部分或在其之后施用。

在从动物体的其它部分上除去外层过程中或之后将噬菌体施用于外层的实施方案在操作或加工外层时，并且在这类可能存在一种或多种微生物传播的风险的操作或加工过程中特别有用。这类加工的实例包括，但不限于加工动物的外层，诸如羊毛和其它来自动物的短的毛发的过程，或防腐的过程，诸如在鞣皮过程和对毛皮防腐的过程中。

在根据本发明的外层防腐法的实施方案中，可以使外层在鞣皮过程的自始至终在一个或多个点上接触包括噬菌体的组合物。例如，可以在从动物体的剩余部分上除去外层后即刻将噬菌体施用于外层，此后烘烤外层。在烘烤前施用噬菌体可以防止微生物可能在从动物体的剩余部分上除去外层时与防腐过程实际开始的时间之间导致的任何损害。作为另一个实例，可以在烘烤过程后和其过程中将外层浸入含噬菌体的溶液(并且在从外层上除去毛发后的皮革制造过程中)，但此后使外层接触鞣剂，即，这是在外层可能对微生物感染敏感时的过程中的另一点。还可以在完成防腐过程期间或之后将噬菌体施用于外层。

本发明在另一个方面中包括用于在对动物的外层防腐过程中防止微生物生长的组合物。这类组合物包括由针对至少一种靶向的微生物的噬菌体，并且可以主要由其组成。可以选择该噬菌体以便耐受使用它的过程(例如外层处理，外层防腐等)的条件(例如pH，含盐性，极端温度等)。当然，在某些实施方案中，防腐组合物还可以包括可以用于总体防腐过程中的某些组成部分的缓冲剂和其它成分。

尽管上述描述包含许多具体内容，但是不应将它们视为限定本发明的范围，而仅是作为对某些实施方案的例证。类似地，设计了本发明的其它实施方案，它们未超越本发明的范围。可以以不同组合方式使用来自不同实施方案的特征。因此，本发明的范围仅由所附的权利要求及其法定等效技术方案，而不是由上述描述表示和限定。由此包括了属于权利要求的含义和范围内的如本文公开的对本发明的所有添加，删除和变型。

权利要求书(按照条约第19条的修改)

1.用于对动物产品消毒的方法，包括：

将靶向至少一种微生物的噬菌体施用于动物体的外层；和

从该动物体的剩余部分上除去外层。

2.权利要求1所述的方法，其中施用包括将包括噬菌体的干燥组合物施用于外层。

3.权利要求1所述的方法，其中施用包括将包括噬菌体的液体组合物施用于外层。

4.权利要求1所述的方法，其中施用包括基本上穿透外层上的涂层。

5.权利要求4所述的方法，其中施用包括在压力下将噬菌体施用于外层。

6.权利要求1所述的方法，其中施用包括在从动物体的剩余部分上除去外层前将噬菌体施用于外层。

7.权利要求1所述的方法，其中施用包括将噬菌体施用于动物的外层，同时从动物体的剩余部分上除去外层。

8.权利要求7所述的方法，其中施用包括将噬菌体施用于外层的外和内表面。

9.权利要求8所述的方法，其中施用包括将噬菌体施用于动物体的剩余部分。

10.权利要求1所述的方法，其中施用包括在从动物体的剩余部分上除去外层后将噬菌体施用于外层。

11.权利要求1所述的方法，包括洗涤或消毒外层。

12.权利要求11所述的方法，其中同时进行洗涤或消毒和施用。

13.权利要求11所述的方法，其中在施用前进行洗涤或消毒。

14.权利要求13所述的方法，其中洗涤或消毒包括从外层上除去用于至少一种微生物生长的至少一种贮主。

15.权利要求1所述的方法，其中施用作为用于对外层防腐过程的组成部分进行。

16.权利要求15所述的方法，其中施用包括施用为耐受用于对外层防腐过程的至少一种条件而选择的噬菌体。

17.权利要求1所述的方法，其中施用包括施用裂解性噬菌体。

18.权利要求1所述的方法，其中施用包括施用溶源性噬菌体。

Claims (18)

1.用于对动物产品消毒的方法，包括将靶向至少一种微生物的噬菌体施用于动物体的外层。

2.权利要求1所述的方法，其中施用包括将包括噬菌体的干燥组合物施用于外层。

3.权利要求1所述的方法，其中施用包括将包括噬菌体的液体组合物施用于外层。

4.权利要求1所述的方法，其中施用包括基本上穿透外层上的涂层。

5.权利要求4所述的方法，其中施用包括在压力下将噬菌体施用于外层。

6.权利要求1所述的方法，其中施用包括在从动物体的剩余部分上除去外层前将噬菌体施用于外层。

7.权利要求1所述的方法，其中施用包括将噬菌体施用于动物的外层，同时从动物体的剩余部分上除去外层。

8.权利要求7所述的方法，其中施用包括将噬菌体施用于外层的外和内表面。

9.权利要求8所述的方法，其中施用包括将噬菌体施用于动物体的剩余部分。

10.权利要求1所述的方法，其中施用包括在从动物体的剩余部分上除去外层后将噬菌体施用于外层。

11.权利要求1所述的方法，包括洗涤或消毒外层。

12.权利要求11所述的方法，其中同时进行洗涤或消毒和施用。

13.权利要求11所述的方法，其中在施用前进行洗涤或消毒。

14.权利要求13所述的方法，其中洗涤或消毒包括从外层上除去用于至少一种微生物生长的至少一种贮主。

15.权利要求1所述的方法，其中施用作为用于对外层防腐过程的组成部分进行。

16.权利要求1所述的方法，其中施用包括施用为耐受用于对外层防腐的至少一种条件而选择的噬菌体。

17.权利要求1所述的方法，其中施用包括施用裂解性噬菌体。

18.权利要求1所述的方法，其中施用包括施用溶源性噬菌体。