TWI614018B - 使用噬菌體之動物外層消毒 - Google Patents

Abstract

本發明係關於消毒得自動物之外層的方法，包括將噬菌體施用於該外層。可在從動物之身體其餘部分移出外層之前、在移出過程中，或在從動物之身體其餘部份移出外層之後，施用該噬菌體。

Description

使用噬菌體之動物外層消毒

本發明概括來說係關於消毒動物外層的方法，而更明確地說，係關於使用病毒，如噬菌體，以控制在動物外層上之微生物，如細菌，的族群。

技術背景

從動物來源(例如食物等等)散播病原體給人類，在世界許多地方是疾病和死亡的主要原因。對動物相關疾病之健康和經濟後果之考量，已經導致抗生素和類似藥物的廣泛使用--在人類和動物兩者上。雖然抗生素一開始對於治療由細菌引起之疾病是非常有效的，並在現代歷史的重大部分中維持其等的效力，但其等的過度使用，結果已經出現了對抗生素具有抗藥性的微生物。

正在進行中的研究致力於朝向發展替代性之機制，以抑制病原體從動物傳播到人類。例如，已經利用病毒，如噬菌體，實驗性地控制動物屠體的微生物污染。然而，直接將噬菌體或其他病毒施用於準備供人類或甚至動物消費的肉類上，許多人認為是有點不受歡迎的。

此外，到目前為止，這些過程已經被限制於內部投予噬菌體，以及在將要被食用之動物產品的固體表面，如屠體表面，施用噬菌體。用於其他目的之動物產品(例如在製造衣服、家具等等)的處理已經廣泛地被忽略。在這些過 程中，有移出、獲得及保存得自動物之外層的過程。皮革、皮膚、毛皮、裸皮及其他得自動物之外層的移出和保存，經常是極不衛生的過程。當首次獲得動物外層時，無論將對其等使用的保存過程，其等都可能被糞便、尿、血液、動物脂肪、動物肉及其他可供微生物，特別是細菌，生長的儲存所污染。在實行舊式技術的場合，呈現許多讓細菌及其他微生物增殖和散播的額外機會。當使用舊式技術時，個人可能在整個保存過程中重複操作或以其他方式接觸到動物外層，該動物外層本身呈現了許多讓微生物生長和散播的額外機會(例如，在除毛、擊打和酸洗過程中)。鞣皮或其他保存動物外層，包括皮膚和毛皮，的舊式技術，仍被廣泛地實行，特別是由個人以及在世界上開發程度較低的地區。即使是在使用現代化的移出或保存動物外層過程的地方，個人仍可能處在高度不衛生的條件下。

除了對參與移出或保存過程之個人產生威脅之外，微生物，如細菌，亦可能損害正在進行保存的外層。在確認這類損害的可能性時，使用熱及/或殺生物藥劑，如五氯酚及其他化學物質，以防止微生物在來自動物的外層上生長。然而，使用熱及/或化學物質以從外層中移除微生物，可能會損傷該外層(例如真皮及/或獸毛層)。

發明之揭示內容

本發明，在各種具體事實中，包括將病毒，如噬菌體， 或病毒之混合物施用在動物之外部或外層的方法。為了簡潔起見，當在本文中使用”噬菌體”一詞時，意指噬菌體及任何其他類型的病毒，其專一地感染另一種微生物。可使被施用在動物外部的噬菌體靶定不受歡迎的微生物，如有害的微生物或除此之外不想要的微生物(例如引起損害、分解、討厭之臭味或味道等等的微生物)。在本文中使用片語”外層”時，包括任何的皮革、裸皮、皮膚或外皮，與其等之覆蓋物，如羊毛、毛、毛髮、羽毛和鱗片，一起或分開。

在某些具體事實中，可在動物還活著的時候將噬菌體施用在其上(例如，在即將被屠宰之前等等)。在其他的具體事實中，可在動物死後才將噬菌體施用在其外面(例如，藉著屠宰或其他方式)，例如，在從動物身體，如其屠體，之其他部分中移出該動物之皮革或”外層”之前。

本發明亦包括將外層從動物身體之其他部分移出時，將噬菌體施用在該動物外層上之方法的具體事實。

在其他的具體事實中，本發明包括在已經將外層從動物屠體中移出之後，將噬菌體施用在其上的方法。在更特定的具體事實中，可在保存動物皮革的過程之前及/或期間，將噬菌體施用該動物的皮革上。

經由考量隨後的說明和附錄之申請專利範圍，本發明的其他方面，以及特徵和優點對所屬技術領域中具有通常知識者將會變得顯而易見。

實施發明之最佳方式

咸相信在經屠宰動物之皮革上出現不受歡迎的微生物，包括病原體，與相同動物之屠體被這類不受歡迎的微生物污染之間有一些相關性。咸相信在經屠宰動物之皮革上找到許多不受歡迎的微生物，係來自動物自己的腸道。來自動物接觸之環境(例如動物生活的環境，如飼養場、雞含、在棲息地等等，或動物另行暴露的環境，如交通工具，在屠宰場中等等)的不受歡迎微生物，亦可能污染動物的皮革，並在動物已經被屠宰後，可能最終污染其屠體。

本發明包括防止出現在動物外部之不受歡迎的微生物轉移，散播至人類及其他動物的方法。根據本發明之具體事實，施用噬菌體，結果可充分地降低足夠數量的一或多種目標微生物之族群(例如降低大約一個對數，或大約90%或更多(例如多到降低大約4個對數或99.99%))，或充分防止一或多種目標微生物的預期生長(例如防止至少大約90%，或甚至大約99.99%的預期生長)，以防止其等不受歡迎的影響，或使該微生物更易感受其他的抗微生物處理，例如化學治療用的抗生素(例如，廣效性抗生素、窄效性抗生素，如細菌素(bacteriocin)尼生素(nisin)等等)。

可用來降低微生物族群，及/或防止微生物增殖至其等之可能性的組合物之一具體事實，包括一或多個類型的溶裂性噬菌體，其會感染並殺死一或多種不受歡迎的靶定微生物(例如細菌等等)。根據本發明之教示使用的組合物之另一具體事實，可包括溶源性噬菌體，其將其等之基因組 併入其等之宿主的基因組內，並使用其等宿主的基因表現或蛋白質生產機制，以產生化合物，如溶素酵素，其會殺死或抑制一或多種不受歡迎之靶定微生物的增殖。亦可根據本發明之教示，使用包含溶裂性和溶源性噬菌體兩者之組合物的具體事實。

根據本發明之教示使用的噬菌體，可具有宿主範圍包含一種靶定微生物之野生型，以及靶定微生物之一或多種有噬菌體抵抗力之突變種，如在美國專利申請公開案US-2006-0153811-A1中描述之所謂的”h-突變種”溶裂性噬菌體，其整個揭示內容以引用方式納入本文中。

根據本發明之教示使用的噬菌體亦可使用已知的技術來選擇，使其在某些pH值條件(例如強酸性條件、強鹼性條件等等)、鹽條件、溫度改變或類似者還能存活，以便在靶定微生物可存活的條件下，維持生存並可使用。

可藉著組合物之噬菌體靶定之微生物的實例包括，但不限於一或多個品系的大腸桿菌(例如大腸桿菌O157：H7，包括但不限於”模式15”等等)，以及在沙門氏桿菌屬(Salmonella，例如腸道沙門氏菌(Salmonella enterica)等等)、葡萄球菌屬(Staphylococcus，例如金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis)等等)、假單胞菌屬(Pseudomonas，例如綠膿桿菌(Pseudomonas aeruginosa)等等)、志賀桿菌屬(Shigella)、弧形菌屬(Campylobacter)、芽孢桿菌屬(Bacillus，例如炭疽芽孢桿菌(Bacillus anthracis)、蠟狀芽 孢桿菌(Bacillus cereus )等等)、嗜血桿菌屬(Hemophilus )、博德氏桿菌屬(Bordetella )、弗朗西絲氏菌屬(Francisella )、布氏桿菌屬(Brucellus ，例如流產布氏桿菌(Brucella abortus )、豬布氏桿菌(Brucella suis )、地中海熱布氏桿菌(Brecella melitensis )等等)、李氏菌屬(Listeria )、耶爾森氏菌屬(Yersinia )、鏈球菌屬(Streptococci )和萬古黴素-抗藥性腸球菌(Vancomycin-Resistant Enterococci ，VRE，例如屎腸球菌(E.faecium )、糞腸球菌(E.faecalis )、雞腸球菌(E.gallinarium )等等)的各種細菌物種。

在一些具體事實中，可將噬菌體納入實質上不含細胞的組合物中。在其他具體事實中，可提供在載體宿主內(例如在非病原性宿主細胞內)的噬菌體。

可以乾燥形式或液體形式，使包含噬菌體的組合物具體化。微粒形式或粉劑形式之乾燥的組合物的具體事實，可藉著已知的過程製造，如在美國專利申請案序號11/033,022中揭示者，其揭示內容全部以此引用方式在此納入本文中。除了噬菌體之外，乾燥組合物還可含有填料。可將乾燥形式之含有噬菌體的組合物撒在或乾-噴霧在動物上。

根據本發明之其他具體事實的液體形式之組合物，包含在溶液中的噬菌體，該溶液亦可含有在儲存和運送期間使噬菌體穩定的成分。可將液體形式之含有噬菌體的組合物噴灑或噴霧(例如作為霧或煙，作為高壓流等等)在動物上，或可將動物導入為經濃縮或經稀釋形式的組合物浴 中。

在任一噬菌體施用技術中，噬菌體可穿透(例如在使用乾組合物時塗佈，在使用液體組合物時浸透)對其施用該組合物之動物的外皮(例如羊毛、毛、毛髮、羽毛、鱗片等等)。可將噬菌體施用於動物外部的所有區域，或僅施用在動物外部最有可能攜帶不想要之靶定微生物的局部(例如屁股、腳、腿等等)。

可施用噬菌體一次或許多次(即定期地)。

此外，在某些具體事實中，可將化學治療用的抗微生物劑，如細菌素尼生素，與噬菌體一起或在對外層施用噬菌體之後施用於外層。

一方面，這類過程可降低或排除一或多種不受歡迎的靶定微生物對動物屠體的傳播，且最後降低或排除了對衍生自該動物屠體之食物產品的傳播。

在將動物外層從其屠體中移出之前，將噬菌體施用在動物外部的具體事實中，亦可使藉以施用噬菌體之技術(例如在高壓下施用、浸泡等等)具有從動物外部移出微生物，如志賀桿菌和產生志賀毒素之大腸桿菌的儲存所(例如糞便、尿、土壤等等)的配置。關於此一考量，可將施用過程當作沖洗或消毒過程(例如利用表面活性劑、濕潤劑、肥皂或其他化學消毒劑等等)的一部分來進行。在替代性的的具體事實中，可在將噬菌體施用於動物外部至少一部分之前，藉著傳統的沖洗過程，從動物外側局部移出微生物可能的儲存所。

可在動物還活著的時候，或在動物已經被屠宰之後，進行噬菌體的施用和任何沖洗。無論在哪一種情況下，都可在施用噬菌體之後測量，將其從動物外部的移出減至最少，並可視需要使動物外部與更多不想要之微生物的接觸減至最少。

一旦動物已經被屠宰，便可將已經施用噬菌體的外層或外層之一部分從動物身體的另一部分(例如其屠體等等)中移出。隨著使一或多種不想要的微生物族群減至最少，或至少與會溶解相同微生物的噬菌體接觸，可以降低之風險移出外層，該風險為在其上任何不想要的靶定微生物會被轉移至，或污染，並在動物屠體或動物身體之任何其他部分上增殖。此外，會降低或盡可能減少不想要之靶定微生物會在移出外層並隨後加工動物產品的環境中被轉移並在表面上增殖)的可能性。

在其他的具體事實中，藉著在從動物身體之其他部分，如其屠體，移出動物外層時，將噬菌體施用在外層，可防止微生物從動物外層傳播到其屠體上。

這類施用可藉著噴霧、撒、浸泡或以任何其他適當的方式完成，當然至少一部分會視施用在外層之組合物中所含有的噬菌體之形式(例如乾燥的、液體等等)而定。在從動物中移出外層之前施用噬菌體的具體事實中，可將施用噬菌體當作沖洗或消毒過程的一部分，或在其之後施用。

在一些具體事實中，可將噬菌體同時施用於外層以及從其中移出外層之動物的部分。照這樣施用噬菌體，防止 任何可從外層轉移至動物其他部分的靶定微生物在其他部分生長。將噬菌體同時施用在外層和從其中移出外層之動物的部分，亦可增加與噬菌體施用過程有關的效率和經濟，因為單一噬菌體施用過程可代替多次過程。

本發明的另一方面包括在從動物身體之其他部分中移出外層之後，將噬菌體施用在動物外層。在這類具體事實中，可將噬菌體施用在外層的外表面和先前為外層的內表面兩者上。

可藉著噴霧、撒、浸泡或以任何其他適合的方式完成這類施用，當然至少一部分會視施用在外層之組合物中所含有的噬菌體之形式(例如乾燥的、液體等等)而定。在從動物中移出外層之前或期間施用噬菌體的具體事實中，可將施用噬菌體當作沖洗或消毒過程的一部分，或在其之後施用。

在欲操作或加工外層時，以及在這類操作或加工期間，可能出現散播一或多種不想要之微生物的風險，在將外層從動物身體之其他部分中移出時或之後，將噬菌體施用在外層的具體事實是特別有用的。這類加工的實例包括，但不限於，藉以加工該動物外層的過程，如從動物剪下羊毛和其他毛髮，或保存，如在鞣製過程和保存毛的過程中。

在根據本發明之外層保存方法的具體事實中，可在鞣製過程中的一或多個時間點使該外層與含有噬菌體的組合物接觸。例如，可在將外層從動物身體之其餘部分中移出之後不久，在該外層硬化之前，將噬菌體施用在其上。在 硬化之前施用噬菌體，可在從動物身體之其餘部分移出外層時到實際上開始保存加工之間，防止微生物可能引起的任何損害。如同另一實例，可在硬化過程之後和期間(以及在羽毛製造過程中，在從外層移出毛髮之後)，但在使外層接觸鞣劑之前，即在加工時外層可能易感受微生物感染的另一個時間點之前，將外層浸泡在含有噬菌體的溶液中。亦可在完成保存過程的期間或之後，將噬菌體施用在外層上。

在另一方面，本發明包括防止微生物在動物外層之保存期間生長的組合物。這類組合物包括，且基本上可由對抗至少一種靶定微生物的噬菌體組成。可選擇噬菌體以抵抗可能使用之加工(例如外層處理、外層保存等等)的條件(例如pH值、鹽性、極端的溫度等等)。當然，在一些具體事實中，保存組合物亦可含有緩衝溶液，以及可用在整個保存過程之某些部分中的其他成分。

雖然前面的說明含有許多細節，這些不應被解讀為限制本發明的範圍，而僅是提供某些具體事實的解釋。同樣的，可設計不超過本發明範圍的本發明之其他具體事實。可混合使用來自不同具體事實的特徵。因此，僅藉著附錄之申請專利範圍及其等合法的同等物，而非藉著前面的說明，指定並限制本發明之範圍。所有對本發明所作之增添、刪除和修改，如在此處揭示且落在申請專利範圍之含義和範圍內，將藉此被納入。

Claims (19)

1. 一種消毒動物產品的方法，其包括：當屠宰動物時或剛屠宰動物之後將靶定至少一種微生物的噬菌體施用至該動物之身體的外層以及該外層之任何一般覆蓋物；以及於該動物已被屠宰之後，從該動物之身體之其餘部分移出該外層及該外層上的噬菌體。
2. 一種消毒動物產品的方法，其包括：於即將屠宰動物之前、當屠宰動物時或剛屠宰動物之後，將靶定至少一種微生物的噬菌體施用至該動物之身體的外層以及該外層之任何一般覆蓋物；以及於該動物已被屠宰之後，從該動物之身體之其餘部分移出該外層及該外層上的噬菌體，其中該施用步驟包含施用溶裂性噬菌體和溶源性噬菌體之至少一者。
3. 如申請專利範圍第1或2項之方法，其中該施用包括將含有該噬菌體之乾燥組合物施用在該外層上。
4. 如申請專利範圍第1或2項之方法，其中該施用包括將含有該噬菌體之液體組合物施用在該外層上。
5. 如申請專利範圍第1或2項之方法，其中該施用包括穿透在該外層上的外皮。
6. 如申請專利範圍第5項之方法，其中該施用包括在壓力下將噬菌體施用在該外層上。
7. 如申請專利範圍第1或2項之方法，其中該施用包括 在從動物身體之其餘部分中移出該外層之前，將該噬菌體施用在該動物外層上。
8. 如申請專利範圍第1或2項之方法，其中該施用包括在從動物身體之其餘部分中移出該外層的同時，將該噬菌體施用在該動物外層上。
9. 如申請專利範圍第8項之方法，其中該施用包括將該噬菌體施用在該外層的外和內表面上。
10. 如申請專利範圍第9項之方法，其中該施用進一步包括將該噬菌體施用在該動物身體的其餘部分上。
11. 如申請專利範圍第1或2項之方法，其中該施用包括在已經從該動物身體之其餘部分中移出外層之後，將該噬菌體施用在該外層上。
12. 如申請專利範圍第1或2項之方法，包括沖洗或消毒該外層。
13. 如申請專利範圍第12項之方法，其中同時完成沖洗或消毒和施用。
14. 如申請專利範圍第12項之方法，其中在施用之前完成沖洗或消毒。
15. 如申請專利範圍第14項之方法，其中沖洗或消毒包括自該外層移除至少一個可供至少一種微生物生長的儲存所。
16. 如申請專利範圍第1或2項之方法，其中將施用當作保存該外層之過程的一部分來完成。
17. 如申請專利範圍第16項之方法，其中施用包括施用 經選擇能抵抗至少一個保存該外層之加工條件的噬菌體。
18. 如申請專利範圍第1項之方法，其中施用包括施用溶裂性噬菌體。
19. 如申請專利範圍第1項之方法，其中施用包括施用溶源性噬菌體。