CN101601743A - 一种治疗溃疡性结肠炎的药物组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种治疗溃疡性结肠炎的药物组合物及其制备方法。它主要由以下重量份的原料药制成，黄连5－15份、苍术5－15份。该药物的制备方法包括：a)按重量配比分别称取黄连、苍术备用；b)黄连采用乙醇回流提取，形成浸膏粉；苍术提取挥发油后，残渣再水提形成浸膏粉；c)将挥发油与浸膏粉混合，加入辅料，加工成口服剂型。本发明药物具有清热燥湿以治标、健脾补益以治本的作用，对慢性溃疡性结肠炎疗效突出。

Description

一种治疗溃疡性结肠炎的药物组合物及其制备方法

[技术领域]

本发明涉及一种治疗溃疡性结肠炎的药物组合物，以及该药物组合物的制备方法，属于中药领域。

[背景技术]

溃疡性结肠炎(ulcerative colitis，UC)又叫慢性非特异性结肠炎(简称溃结)，本病常常迁延不愈，反复发作，难以根除，是世界公认的难治性疾病，现已被世界卫生组织列为疑难病之一。本病在全球范围内均有发生，现有研究资料表明其流行病学特征受地域、种族、年龄等影响较大，北欧、西欧、北美的发病率高于世界其他地区，其发病率在5/10万-12/10万之间，另一份来自以色列的研究报告指出其发病率高达167/10万人，任何年龄均可发病，多见于20-40岁，约占70％，男女发病率无明显差别。我国虽发病率较欧美低，但已有研究报道指出，随着人们生活环境和生活方式的改变，近年来UC发病率已有增加的趋势，在过去的10年里，我国部分地区炎症性肠病的发病率增加了4倍，其中尤以UC的增加更为明显，因此，进行溃疡性结肠炎药物的研究具有实际的意义。

溃疡性结肠炎(ulcerative colitis，UC)是一种主要累及直肠、结肠粘膜的慢性非特异性炎症。病程迁延不愈，长达十几年甚至几十年。一般认为本病约80％为周期性发作，10-15％的患者呈慢性过程，5-10％表现为急性发作，须行紧急的外科手术治疗。病情反复发作，虽然许多患者可以长期完全缓解，但大宗的病例研究表明，在本病发病后18年里，只有1％的患者无复发，累及保持2年不复发的可能性只有20％，10年不复发的不到5％。而且病程越长，恶变的危险性越高，病程大于20年则恶变率可达30％。该病属于中医“泄泻”、“下痢”等范畴，急重症者则为中医的“肠风下血”、“肠澼脏毒”。临床以腹痛、腹泻、粘液血便、里急后重为主要表现，中型和重型患者可出现发热、消瘦、低蛋白血症、贫血等表现。常常引起大量便血、中毒性巨结肠、肠穿孔、息肉、癌变、肠狭窄、直肠及肛周病变、肝脏病变、关节炎、皮肤损害、眼病、血栓栓塞性并发症、生长迟滞、小肠炎等多种并发症。UC的其病因和发病机制尚不清楚，可能是环境因素、免疫、遗传、感染等多种因素相互作用，某种抗原的持续刺激，启动了肠道免疫和炎症过程，最终导致免疫反应过度亢进和难于自限，近年来氧自由基损伤、某些细胞因子如肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素等在UC发病中的作用受到重视。

目前，西医治疗UC的主要药物为氨基酸水杨酸类、皮质类固醇、免疫抑制剂等，这些药物的初期效果尚可，长期使用存在较多副作用。

现代中医对UC的病因病机、治则治法与辨证论治研究较多，积累了丰富的经，取得了许多西药所无法取得的效果，正日益受到国内外学者的高度重视。

溃疡性结肠炎的中成药研制、开发近几年取得了较快发展，上市的品种主要有：复方黄连素片、补脾益肠丸、结肠炎丸、加味香连丸、肠炎宁胶囊、固本益肠片、清肠栓、止泻灵冲剂、泻痢固肠丸、胃肠安丸、健脾理肠片、止泻定胶囊等二十余种，虽然这些品种在改善UC症状、减少复发等方面有一定的治疗作用，但要达到疗效明确、控制复发、改善预后的目的，仍需进行不断的探索与研制新药。

[发明内容]

本发明的目的在于提供一种治疗溃疡性结肠炎的中药新药，以及它的制备方法。

本发明的目的是这样实现的：一种治疗溃疡性结肠炎的药物组合物，其

特征在于它主要由以下重量份的原料药制成，黄连5-15份、苍术5-15份。

该药物组合物的制备方法包括以下步骤：

a)按重量配比5-15∶5-15分别称取黄连、苍术备用；

b)黄连采用乙醇回流提取，形成浸膏粉，苍术提取挥发油后，殘渣再水提，形成浸膏粉。

c)将挥发油与浸膏粉混合，加入辅料，加工成形。

溃疡性结肠炎(ulcerative colitis，UC)或慢性非特异性结肠炎(简称溃结)，是一种主要累及直肠、结肠粘膜的慢性非特异性炎症。病程迁延不愈，长达十几年甚至几十年，亦有发生癌变的可能性。临床以腹痛、腹泻、粘液血便、里急后重为主要表现，中型和重型患者可出现发热、消瘦、低蛋白血症、贫血等表现。本病归属于中医“久泄”、“久痢”“休息痢”等病症范畴，虽病变机制复杂，但其主要机制与以下二点关系密切。

1、以湿邪内盛为标：《素问·阴阳应象大论》说：“清气在下，则生飧泻……湿盛则濡泻。”《难经》亦指出：“湿多成五泄”。《医学心悟·泄泻》中提到：“书云，湿多成五泻，泻之属湿也，明矣“。当湿之产生，或因外感，内客于脾，或因饮食不节，脾胃受损，水反为湿；或情志失调，肝木乘脾，运化失常。湿性重浊黏滞，故发病多缓慢，病程长，反复难愈。湿为阴邪，其性趋下，故病位始于大肠。初病正气较强，湿邪从阳化热，或因嗜食肥甘，湿热内生，以致形成大肠湿热证，大肠者传导之官，湿热留恋肠府，气机受阻，损伤肠络，故见腹痛、下痢脓血、里急后重等症。

2、以脾气虚弱为本：脾有化生水谷精微、运化水湿、主升清等功能，是人体后天之本、气血生化之源。喜燥恶湿是脾的特点，湿邪内盛，则易困阻脾气；迁延不愈，使脾气日渐虚损，导致脾运化水湿及气血生化功能障碍、脾气不升、清气下泻，出现久泄久痢、气血虚弱之象。

总之湿邪内盛、从阳化热、脾气虚弱，虚实夹杂是溃疡性结肠炎发生、发展的重要中医病机特点，得到后世医家的认同。

本药物组合物正是针对UC的上述病机特点，在清热燥湿健脾、虚实兼顾的治法指导下组方用药。药味精简，全方寒温并用以协调阴阳、泻补同行以兼顾虚实，有利于UC肠道郁积湿热的清除、脾气虚弱的恢复，方证相符。且现代药理研究证实：本药物组合物各单味药分别含有抗溃汤、抗炎、抗菌等药理活性成分。因此本方对于UC的治疗既符合中医理论指导，又具有现代药理学的客观依据。

本发明(药物组合物)由黄连、苍术等药组成。各药配伍比例为5-15∶5-15，上述药物组合物按比例称取后，黄连采用乙醇回流提取，形成浸膏粉；苍术提取挥发油后，殘渣再水提，形成浸膏粉；将挥发油与浸膏粉混合，加入辅料，干燥后即得本发明(药物组合物)粉末剂。

方中黄连具有清热燥湿，《本草正义》谓“黄连大苦大寒，苦燥湿，寒胜热，能泻降一切有余之湿火.....中以平肝胃之呕吐，下以通腹痛之滞下，皆燥湿清热之效也”。现代药理研究证实：黄连及其主要有效成分小檗碱具有说广谱抗菌、抗炎、抗腹泻、抗溃疡等作用。

方中苍术性辛、温，味苦，具有燥湿健脾之功，《珍珠囊》认为苍术：“能健胃安脾，诸湿肿非此不能除。”《本草纲目》谓：“治脾湿下流，浊沥带下，滑泻肠风。”现代药理研究证实：苍术提取物能调节运动功能，有较强的抗溃疡、增强胃肠道粘膜保护作用，同时具有一定程度的抗毒杀菌效应。

总之本复方药物中黄连、苍术二药相伍，寒热并用以协调阴阳、泻补同行以兼顾虚实，有利于溃疡性结肠炎湿浊、郁热之标实的清除、脾(胃)之本虚的恢复，方证相符。且现代药理研究证实：黄连、苍术中均含有抗炎抗菌、止泻抗溃疡的药理活性成分，因此，本方对于溃疡性结肠炎的治疗既符合中医理论指导，又具有药理客观依据。

溃疡性结肠炎是一标实本虚之病，标实以湿浊郁热为主，本虚突出的表现为脾气虚弱。本发明药物组合物具有清热燥湿以治标、补益脾(胃)以治本的作用，本方组方精简，寒温同用、清补兼施。对慢性溃疡性结肠炎疗效突出。

实施例1：本发明所述药物组合物主要由以下重量份的原料药制成，黄连5-15份、苍术5-15份。

a)按重量配比5-15∶5-15分别称取黄连、苍术备用；

b)黄连采用乙醇回流提取，形成浸膏粉；肉桂提取挥发油；苍术提取挥发油后，再水提，形成浸膏粉；

c)将挥发油与浸膏粉混合，加入辅料，加工成口服剂型。

例如：可加工成颗粒剂(冲服剂)、片剂(素片、包衣片、分散片、速崩片、泡腾片等)、胶囊剂(硬胶囊、软胶囊)、口服液体剂。

实施例2：

按重量配比10∶15分别称取黄连、苍术，其余步骤同实施例1，制得本发明(药物组合物)。

实施例3：

按重量配比10∶10分别称取黄连、苍术，其余步骤同实施例1，制得本发明(药物组合物)。

实施例4：

按重量配比10∶5分别称取黄连、苍术，其余步骤同实施例1，制得本发明(药物组合物)。

实施例5：

按重量配比15∶5分别称取黄连、苍术，其余步骤同实施例1，制得本发明(药物组合物)。

实施例6：

按重量配比5∶15分别称取黄连、苍术，其余步骤同实施例1，制得本发明(药物组合物)。

实施例7：

按重量配比5∶5分别称取黄连、苍术，其余步骤同实施例1，制得本发明(药物组合物)。

实施例8：

按重量配比15∶15分别称取黄连、苍术，其余步骤同实施例1，制得本发明(药物组合物)。

本发明(药物组合物)对大鼠溃疡性结肠炎效应观察

1材料与方法

1.1药品和试剂

受试药物：本发明药物组合物，浸膏粉，用蒸馏水溶解，即3.5g生药/ml。市面对照药物：复方黄连素片(黄连、木香等)，四川省天基生物药业有限公司，批号Z51021615，每片含盐酸小檗碱30mg。溶媒对照：氯化钠注射液(生理盐水)，由山东长富洁晶药业有限公司生产，批号07020821。三硝基苯磺酸，为SIGMA产品。SOD和MDA检测试剂盒，为南京建成生物工程公司产品，生产批号分别为20071207和20071216。TNF-a和IL-6检测试剂盒为深圳晶美生物工程有限公司产品。

1.2仪器

MP120-1电子天平，为上海第二天平仪器厂产品；LDZ5-2离心机，为北京医用离心机厂产品。

1.3实验动物

清洁级SD大鼠，体重160-200g，合格证号：2006A064；由中山大学实验动物中心提供。

1.4造模方法

取体重160g～190g健康大鼠60只，随机分为：观察组低(1.5g生药/kg)、中(3g生药/kg)、高(6g生药/kg)组，市面对照药复方黄连素(0.14g/kg)组，正常对照组(给予生理盐水)和模型对照组(给予生理盐水)，每组10只。大鼠禁食24h后，用大鼠灌胃管从肛门插入至肠内8cm，除正常对照组大鼠灌生理盐水外，其余各组大鼠均注入50％乙醇配制的三硝基苯磺酸组成的混合药液0.5ml/只(100mg/kg)，倒置鼠30s，使药液达全结肠，然后放回笼内饲养。造模第2天开始给药，连续给药14天。造模第14天，以3％戊巴比妥钠麻醉，从腹腔静脉抽血，分离血清。

1.5药物剂量

剂量设定：按每人每天20g生药算，折算成大鼠剂量约为3g/kg，此剂量为实验中剂量，取上下2倍剂量分别为高剂量和低剂量，则大鼠给药低、中、高剂量每天分别为：1.5g生药/kg、3g生药/kg、6g生药/kg。

阳性对照药物：复方黄连素片，0.1g/片，按成人每天口服0.9g算，折算成大鼠剂量约为每天0.14g/kg。

药物稀释方法、给药途径及体积：取同一批号的各实验所用药品，用蒸馏水配成所需浓度的药液。给药途径：灌胃给药。大鼠给药容积为：1.0ml/100g。

1.6检测指标：

1.6.1症状观察  分别在造模第1、4、7、10、14d观察大鼠粪便，并利用粪便潜血试纸对每只大鼠粪便进行隐血检测，记录大鼠发生腹泻、血便的例数。并于造模前以及造模后7d、14d对各组大鼠进行体重称量并记录。

1.6.2结肠黏膜组织损伤评分  将距肛门10cm长末端结肠取出，沿肠系膜纵行切开，用冰生理盐水冲洗。将黏膜向上展开，观察黏膜损伤并参照文献方法及标准评价CMDI，评分标准为：0为无损伤；1为轻度充血，水肿，表面光滑，无糜烂或溃疡；2为充血水肿，黏膜粗糙呈颗粒状，有糜烂或肠黏连；3为高度充血水肿，黏膜表面有坏死及溃疡形成，溃疡最大纵径＜1cm，肠壁增厚或表面有坏死及炎症；4为在3分基础上溃疡最大纵径＞1cm，或全肠壁坏死。

1.6.3病理组织切片观察  取肛门以上6cm处肠段，置10％中性甲醛中固定，石蜡包埋，行4um厚连续切片，作HE染色，进行光镜下观察。

1.6.4检测血清和结肠组织中超氧化物岐化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量SOD活性采用微量快速测定法，取血清或组织匀浆液100ul加入盛有5ml生理盐水刻度离心管中，2000r/min离心10min，弃尽上清液，加预冷双蒸水0.2ml 95％乙醇0.1ml、三氯甲脘0.1ml，振摇片刻，3000r/min离心10min，取上清液，再按试剂盒要求检测；MDA含量按改良八木国夫法测定。

1.7统计学处理

所有实验数据均以x±s表示。计量数据采用Microsoft excel进行方差分析及组间检验。

2结果

2.1一般状态及腹泻与便血情况  正常对照组大鼠活动如常，反应机警，毛发有光泽，饮食正常，体重增长较多，无腹泻及便血；造模组大鼠精神萎靡，毛发无光泽，饮食减少，均出现不同程度的腹泻、便血，体重有所下降，无死亡出现。与模型组相比，观察组各组以及复方黄连素组大鼠发生腹泻、便血例数明显减少，对体重无明显影响，结果见表1-1和表1-2。

表1-1  各组大鼠发生腹泻和便血的数量(n＝10)

表1-2对结肠炎大鼠体重的影响(x±s)

注：与正常对照组比较*为P＜0.01；给药各组与模型组比较△为P＜0.05

2.2结肠黏膜组织损伤评分  将大鼠解剖后观察结肠外观及黏膜表面发现，模型组大鼠的结肠有多例与相邻脏器有轻度的粘连，结肠充血水肿，在距肛门8cm的肠段有较大的溃疡病灶，病灶处结肠壁增厚，肠黏膜表面发生溃疡糜烂成糊状。给药各组大鼠结肠充血水肿等炎性症状明显改善，溃疡面积减小，修复愈合较好。与模型组比较，观察组各剂量均明显改善修复(P＜0.01)。其中观察组中、高剂量修复损伤效果明显优于复方黄连素组(P＜0.05)。具体结果见表1-3。

表1-3对结肠炎大鼠肉眼结肠黏膜组织损伤评分(x±s)

注：与正常对照组比较#P＜0.01；与模型对照组比较：*P＜0.05  **P＜0.01；

与复方黄连素组组比较，^A为P＜0.05

2.3结肠组织病理学变化  正常组大鼠结肠组织结构清晰，黏膜完整，肠腺丰富，排列紧密；模型组大鼠结肠组织黏膜坏死脱落，溃疡形成，溃疡面积较大，大量中性粒细胞浸润，腺体排列不齐或消失；与模型组比较，观察组高剂量组大鼠结肠组织均表现肠黏膜上皮少数脱落缺损，溃疡区域明显减少，黏膜周围上皮增生修复，大部分覆盖，炎细胞减少，肉芽组织增生显著，腺体排列较整齐，表现出明显的改善修复效果。观察组中剂量大鼠肠黏膜上皮脱落缺损明显减轻，溃疡区域明显减少，黏膜周围上皮增生修复，大部分覆盖，炎细胞减少，肉芽组织增生，腺体排列较整齐，表现出明显的改善修复效果。观察组低剂量大鼠肠黏膜上皮脱落缺损相对减轻，溃疡区域减少，黏膜周围上皮增生修复，部分覆盖，炎细胞浸润较明显，肉芽组织增生，部分腺体排列不齐，有一定改善修复效果。复方黄连素片组大鼠肠黏膜上皮脱落缺损减轻，溃疡区域减少，黏膜周围上皮增生修复，部分覆盖，肉芽组织增生，部分腺体排列不齐，少数粘膜上皮还有出血点，炎细胞浸润明显，多数有一定改善修复效果。总的来说，观察组中、高剂量修复较佳，优于复方黄连素组，复方黄连素组与观察组低剂量组相近。

2.4血清和结肠组织中SOD活性和MDA含量  与正常对照组比较，模型组大鼠血清与结肠组织中SOD活力明显下降(P＜0.01)，MDA含量显著上升(P＜0.01)。观察组各剂量组与复方黄连素组均能明显抑制SOD的下降和MDA的上升((P＜0.05或P＜0.01).苍术合剂中、高剂量组血清SOD水平明显高于黄连素组(P＜0.05)；观察组中剂量组组织SOD水平明显高于黄连素组(P＜0.05)。详细如表1-4所示。

表1-4对血清以及肠组织SOD和MDA的影响(x±s)

注：与正常对照组比较^#P＜0.01；与模型对照组比较，*P＜0.05  **P＜0.01；与复方黄连素组比较，^A为P＜0.05

结论：本药物组合物具有明显抗大鼠溃疡性结肠炎的效应，其作用可能与抗氧化、抑制肠道氧化应激损伤密切相关。

Claims (3)

1、一种治疗溃疡性结肠炎的药物组合物，其特征在于它主要由以下重量份的原料药制成，黄连5-15份、苍术5-15份。

2、一种治疗溃疡性结肠炎的药物组合物的制备方法，它包括以下步骤：

a)按重量配比5-15∶5-15分别称取黄连、苍术备用；

b)黄连采用乙醇回流提取，形成浸膏粉；苍术提取挥发油后，殘渣再水提形成浸膏粉；

c)将挥发油与浸膏粉混合，加入辅料，加工成形。

3、根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于将黄连、苍术提取加工成治疗溃疡性结肠炎的口服剂型、肠道给药剂型，包括颗粒剂、片剂、胶囊剂、口服液体剂、肠道给药液体剂、栓剂等。