CN101600706B - Akt活性抑制剂 - Google Patents

Akt活性抑制剂 Download PDF

Info

Publication number
CN101600706B
CN101600706B CN2007800509679A CN200780050967A CN101600706B CN 101600706 B CN101600706 B CN 101600706B CN 2007800509679 A CN2007800509679 A CN 2007800509679A CN 200780050967 A CN200780050967 A CN 200780050967A CN 101600706 B CN101600706 B CN 101600706B
Authority
CN
China
Prior art keywords
phenyl
naphthyridine
triazolos
ring butylamine
methyl
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
CN2007800509679A
Other languages
English (en)
Other versions
CN101600706A (zh
Inventor
M·J·凯利
M·E·莱顿
M·E·利括里
Y·奥吉诺
Y·奥诺扎基
P·E·桑德森
J·王
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
MSDK.K. Co.
Merck Sharp and Dohme LLC
Original Assignee
MSD KK
Schering Corp
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by MSD KK, Schering Corp filed Critical MSD KK
Publication of CN101600706A publication Critical patent/CN101600706A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN101600706B publication Critical patent/CN101600706B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D407/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00
    • C07D407/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00 containing two hetero rings
    • C07D407/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00 containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D409/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/12—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains three hetero rings
    • C07D471/14—Ortho-condensed systems

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Child & Adolescent Psychology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Dermatology (AREA)

Abstract

本发明提供了抑制Akt活性的取代的二氮杂萘化合物。特别地，所公开的化合物选择性地抑制一种或两种Akt同工酶。本发明还提供了包括这种抑制性化合物的组合物以及通过给予需要治疗癌症的患者所述化合物来抑制Akt活性的方法。

Description

AKT活性抑制剂
发明背景
本发明涉及取代的二氮杂萘化合物，所述化合物是一种或多种丝氨酸/苏氨酸激酶Akt(还称为PKB；在下文中称为“Akt”)同工酶的活性抑制剂。本发明还涉及含有所述化合物的药物组合物以及在癌症治疗中使用本发明化合物的方法。
细胞凋亡(程序性细胞死亡)在胚胎发育和在多种疾病例如变性性神经元疾病、心血管疾病和癌症的发病机理中都起着至关重要的作用。近期的研究已经使得参与程序性细胞死亡调节或执行的各种促凋亡基因产物和抗凋亡基因产物得到了确认。抗凋亡基因的表达，例如BC12或BC1-xL的表达，抑制各种刺激诱导的凋亡性细胞死亡。另一方面，促凋亡基因，例如Bax或Bad的表达会导致程序性细胞死亡(Aams等人，Science，281：1322-1326(1998))。程序性细胞死亡的执行是由与半胱天冬酶(caspase)-1相关蛋白酶介导的，包括胱天蛋白酶-3、胱天蛋白酶-7、胱天蛋白酶-8和胱天蛋白酶-9等(Thornberry等人，Science，28 1：  1312-1316(1998))。
磷脂酰肌醇3’-OH激酶(PI3K)/Akt途径对调节细胞存活/细胞死亡显得很重要(Kulik等人，Mol.Cell.Biol.17：1595-1606(1997)；Franke等人，Cell，88：435-437(1997)；Kauffmann-Zeh等人，Nature385：544-548(1997)；Hemmings Science，275：628-630(1997)；Dudek等人，Science，275：66 1-665(1 997))。存活因子，例如血小板衍生生长因子(PDGF)、神经生长因子(NGF)和胰岛素样生长因子-1(IGF-1)，通过诱导PI3K的活性，促进各种条件下细胞的存活(Kulik等人，1997，Hemmings 1997)。活化PI3K导致磷脂酰肌醇(3，4，5)-三磷酸(PtdIns(3，4，5)-P3)产生，磷脂酰肌醇(3，4，5)-三磷酸继而与含有血小板白细胞C激酶底物同源(PH)结构域的丝氨酸/苏氨酸激酶Akt结合，并促进其活化(Franke等人，Cell，81：727-736(1995)；HemmingsScience，277：5 34(1 997)；Downward，Curr.Opin.Cell Biol.10：262-267(1 998)；Alessi等，EMBO J.15：6541-6551(1996))。PI3K特异性抑制剂或显性失活Akt突变体破坏了这些生长因子或细胞因子促进存活的活性。早已披露PI3K抑制剂(LY294002或渥曼青霉素)通过上游激酶阻断Akt的活化。另外，在细胞正常经历凋亡性细胞死亡的条件下，组成型活性PI3K或Akt突变体的导入可促进细胞存活(Kulik等人，1997，Dudek等人，1997)。
第二信使调节的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶Akt亚家族的3个成员已经得到了鉴定，并分别称之为Akt1/PKBα、Akt2/PKBβ和Akt3/PKBγ(在下文称为“Akt1”、“Akt2”和“Akt3”)。同工酶是同源的，特别是在编码催化结构域的区域是同源的。通过响应PI3K信号发生的磷酸化作用，Akt得到激活。PI3K使膜肌醇磷脂磷酸化，产生第二信使磷脂酰-肌醇3，4，5-三磷酸和磷脂酰肌醇3，4-二磷酸，已经表明，这些信使会结合到Akt的PH域上。Akt激活的当前模型提出，通过3’-磷酸化磷酸肌醇将酶募集到膜上，并在膜上通过上游激酶，产生Akt调节位点的磷酸化作用(B.A.Hemmings，Science 275：628-630(1997)；B.A.Hemmings，Science 276：534(1997)；J.Downward，Science 279：673-674(1998))。
Akt1磷酸化发生在两个调节位点，催化结构域活化环上的Thr308和靠近羧基端的Ser473(D.R.Alessi等人，EMBO J.15：6541-6551(1996)和R.Meier等人，J.Biol.Chem.272：30491-30497(1997))。在Akt2和Akt3中，同等的调节磷酸化位点也会发生上述作用。在活化环位点使Akt磷酸化的上游激酶被克隆，称为3’-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1(PDK1)。PDK1不仅使Akt磷酸化，而且可使p70核糖体S6激酶、p90RSK、血清及糖皮质素调节激酶(SGK)和蛋白激酶C磷酸化。上游激酶对近羧基端的Akt调节位点的磷酸化尚未得到证实，但近期的报告提示该酶对于整联蛋白偶联性激酶(ILK-1)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶或自身磷酸化的作用。
对人类肿瘤中Akt水平的分析表明，在为数众多的卵巢癌(J.Q.Cheng等人，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.89：9267-9271(1992))和胰腺癌(J.Q.Cheng等人，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.93：3636-3641(1996))中，Akt2过量表达。同样还发现在乳腺癌细胞系和前列腺癌细胞系中，Akt3过量表达(Nakatani等人，J.Biol.Chem.274：21528-21532(1999))。
肿瘤抑制剂PTEN，一种特异性去除PtdIns(3，4，5)-P3中3’磷酸的蛋白质和脂质磷酸酶，是PI3K/Akt途径的负调节蛋白(Li等人，Science275：1943-1947(1997)，Stambolic等人，Cell 95：29-39(1998)，Sun等人，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.96：6199-6204(1999))。PTEN的种系突变是造成人类癌症综合征的原因，例如Cowden病(Liaw等人，Nature Genetics 16：64-67(1997))。很大比例的人类肿瘤中的PTEN缺失，且无功能性PTEN的肿瘤细胞系显示活化Akt的水平升高(Li等人，出处同上，Guldberg等人，Cancer Research 57：3660-3663(1997)，Risinger等人，Cancer Research 57：4736-4738(1997))。
这些观察结果表明，在肿瘤发生中，PI3K/Akt途径在调节细胞存活或细胞凋亡中起着重要作用。
通过使用例如LY294002和渥曼青霉素等抑制剂抑制PI3K，可获得对Akt活化和Akt活性的抑制。但是，PI3K抑制可能不加区别地影响不仅所有3个Akt同工酶，而且影响依赖于PdtIns(3，4，5)-P3的含有其它PH结构域的信号分子，例如酪氨酸激酶的Tec家族。另外，曾有报道披露Akt可被与PI3K无关的生长信号激活。
另外，可通过阻断上游激酶PDK1的活性抑制Akt活性。尚无特异性PDK1抑制剂的报道。再者，抑制PDK1可能导致抑制其活性依赖于PDK1的许多蛋白激酶，例如，非典型PKC同工酶、SGK和S6激酶(Williams等，Curr.Biol.10：439-448(2000))。
相对于在WO 2006/135627中具体描述的环丙基取代的二氮杂萘化合物，本发明化合物具有意料不到的有利性质。
本发明的一个目的是提供新的Akt抑制剂化合物。
本发明的另一个目的是提供药物组合物，所述组合物包含是Akt抑制剂的新化合物。
本发明的另一个目的是提供治疗癌症的方法，所述方法包括给药所述Akt活性抑制剂。
发明概述
本发明提供了抑制Akt活性的取代的二氮杂萘化合物。具体地讲，所公开的化合物选择性地抑制一种或两种Akt同工酶。本发明还提供了含有所述抑制性化合物的组合物，以及通过将化合物给药至需要进行癌症治疗的患者而抑制Akt活性的方法。
发明详述
本发明化合物可以用于抑制丝氨酸/苏氨酸激酶Akt活性。在本发明的第一个实施方案中，Akt活性抑制剂由式A表示：
Figure G2007800509679D00041
其中
E、F、G、H、I、J、K、L和M独立地选自：C或N、其中每个E、F、G、H、I、J、K、L和M任选被R1取代；
a是0或1；b是0或1；m是0、1或2；p独立地为0、1、2、3、4或5；
环Y是(C4-C7)环烷基，所述环烷基任选被一个或多个选自下列的取代基取代：(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、CO2H、卤素、CN、OH和NH2；
环Z选自：(C3-C8)环烷基、芳基、杂芳基和杂环基；
R1选自：H、氧代基、(C＝O)aOb(C1-C10)烷基、(C＝O)aOb-芳基、(C＝O)aOb(C2-C10)链烯基、(C＝O)aOb(C2-C10)炔基、CO2H、卤素、OH、Ob(C1-C6)全氟烷基、(C＝O)aNR7R8、CN、(C＝O)aOb(C3-C8)环烷基、S(O)mNR7R8、SH、S(O)m-(C1-C10)烷基和(C＝O)aOb-杂环基，所述烷基、芳基、链烯基、炔基、环烷基和杂环基任选被一个或多个选自R6的取代基取代；
R2独立地选自：氧代基、(C＝O)aOb(C1-C10)烷基、(C＝O)aOb-芳基、(C＝O)aOb(C2-C10)链烯基、(C＝O)aOb(C2-C10)炔基、CO2H、卤素、OH、Ob(C1-C6)全氟烷基、(C＝O)aNR7R8、CN、(C＝O)aOb(C3-C8)环烷基、SH、S(O)mNR7R8、S(O)m-(C1-C10)烷基和(C＝O)aOb-杂环基，所述烷基、芳基、链烯基、炔基、环烷基和杂环基任选被一个或多个选自R6的取代基取代；
R6是：(C＝O)aObC1-C10烷基、(C＝O)aOb芳基、C2-C10链烯基、C2-C10炔基、(C＝O)aOb杂环基、CO2H、卤素、CN、OH、ObC1-C6全氟烷基、Oa(C＝O)bNR7R8、氧代基、CHO、(N＝O)R7R8、S(O)mNR7R8、SH、S(O)m-(C1-C10)烷基或(C＝O)aObC3-C8环烷基，所述烷基、芳基、链烯基、炔基、杂环基和环烷基任选被一个或多个选自R6a的取代基取代；
R6a选自：(C＝O)aOb(C1-C10)烷基、Oa(C1-C3)全氟烷基、(C0-C6)亚烷基-S(O)mRa、SH、氧代基、OH、卤素、CN、(C2-C10)链烯基、(C2-C10)炔基、(C3-C6)环烷基、(C0-C6)亚烷基-芳基、(C0-C6)亚烷基-杂环基、(C0-C6)亚烷基-N(Rb)2、C(O)Ra、(C0-C6)亚烷基-CO2Ra、C(O)H和(C0-C6)亚烷基-CO2H，所述烷基、链烯基、炔基、环烷基、芳基和杂环基任选被最高达3个选自下列的取代基取代：Rb、OH、(C1-C6)烷氧基、卤素、CO2H、CN、Oa(C＝O)b(C1-C6)烷基、氧代基和N(Rb)2；
R7和R8独立地选自：H、(C＝O)aOb(C1-C10)烷基、(C＝O)aOb(C3-C8)环烷基、(C＝O)aOb-芳基、(C＝O)aOb-杂环基、(C2-C10)链烯基、(C2-C10)炔基、SH、SO2Ra和(C＝O)aNRb 2，所述烷基、环烷基、芳基、杂环基、链烯基和炔基任选被一个或多个选自R6a的取代基取代，或者R7和R8可以与它们所连接的氮一起形成单环或二环杂环，所述杂环在每个环中具有3-7个环原子，并且除了该氮之外，任选含有1或2个选自N、O和S的另外的杂原子，所述单环或二环杂环任选被一个或多个选自R6a的取代基取代；
Ra是(C1-C6)烷基、(C3-C6)环烷基、芳基或杂环基；并且
Rb独立地为：H、(C1-C6)烷基、芳基、杂环基、(C3-C6)环烷基、(C＝O)aOb(C1-C6)烷基或S(O)mRa；
或其可药用盐或立体异构体。
在本发明的第二个实施方案中，所述Akt活性抑制剂由式A表示，其中：
Figure G2007800509679D00051
选自：
Figure G2007800509679D00061
并且所有其他取代基和变量如在第一个实施方案中所定义；
或其可药用盐或立体异构体。
在本发明的第三个实施方案中，Akt活性抑制剂由式B表示：
Figure G2007800509679D00071
其中：
p是0、1或2；
R2独立地选自：(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、CO2H、卤素、OH和NH2；并且所有其他取代基和变量如在第二个实施方案中所定义；
或其可药用盐或立体异构体。
在第四个实施方案中，本发明抑制剂由式C表示：
Figure G2007800509679D00072
其中：
a是0或1；b是0或1；m是0、1或2；p是0、1或2；
R2独立地选自：(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、CO2H、卤素、OH和NH2；
环Y是(C4-C7)环烷基；
R1选自：H、氧代基、(C＝O)aOb(C1-C10)烷基、(C＝O)aOb-芳基、(C＝O)aOb(C2-C10)链烯基、(C＝O)aOb(C2-C10)炔基、CO2H、卤素、OH、Ob(C1-C6)全氟烷基、(C＝O)aNR7R8、CN、(C＝O)aOb(C3-C8)环烷基、S(O)mNR7R8、SH、S(O)m(C1-C10)烷基和(C＝O)aOb-杂环基，所述烷基、芳基、链烯基、炔基、环烷基和杂环基任选被一个或多个选自R6的取代基取代；
R6是：(C＝O)aObC1-C10烷基、(C＝O)aOb芳基、C2-C10链烯基、C2-C10炔基、(C＝O)aOb杂环基、CO2H、卤素、CN、OH、ObC1-C6全氟烷基、Oa(C＝O)bNR7R8、氧代基、CHO、(N＝O)R7R8、S(O)mNR7R8、SH、S(O)m-(C1-C10)烷基或(C＝O)aObC3-C8环烷基，所述烷基、芳基、链烯基、炔基、杂环基和环烷基任选被一个或多个选自R6a的取代基取代；
R6a选自：(C＝O)aOb(C1-C10)烷基、Oa(C1-C3)全氟烷基、(C0-C6)亚烷基-S(O)mRa、SH、氧代基、OH、卤素、CN、(C2-C10)链烯基、(C2-C10)炔基、(C3-C6)环烷基、(C0-C6)亚烷基-芳基、(C0-C6)亚烷基-杂环基、(C0-C6)亚烷基-N(Rb)2、C(O)Ra、(C0-C6)亚烷基-CO2Ra、C(O)H和(C0-C6)亚烷基-CO2H，所述烷基、链烯基、炔基、环烷基、芳基和杂环基任选被最高达3个选自下列的取代基取代：Rb、OH、(C1-C6)烷氧基、卤素、CO2H、CN、Oa(C＝O)b(C1-C6)烷基、氧代基和N(Rb)2；
R7和R8独立地选自：H、(C＝O)aOb(C1-C10)烷基、(C＝O)aOb(C3-C8)环烷基、(C＝O)aOb-芳基、(C＝O)aOb-杂环基、(C2-C10)链烯基、(C2-C10)炔基、SH、SO2Ra和(C＝O)aNRb 2，所述烷基、环烷基、芳基、杂环基、链烯基和炔基任选被一个或多个选自R6a的取代基取代，或者R7和R8可以与它们所连接的氮一起形成单环或二环杂环，所述杂环在每个环中具有3-7个环原子，并且除了该氮之外，任选含有1或2个选自N、O和S的另外的杂原子，所述单环或二环杂环任选被一个或多个选自R6a的取代基取代；
Ra是(C1-C6)烷基、(C3-C6)环烷基、芳基或杂环基；并且
Rb独立地为：H、(C1-C6)烷基、芳基、杂环基、(C3-C6)环烷基、(C＝O)aOb(C1-C6)烷基或S(O)mRa；或其可药用盐或立体异构体。
在第五个实施方案中，本发明抑制剂由式D表示：
Figure G2007800509679D00081
其中：
a是0或1；b是0或1；m是0、1或2；p是0、1或2；
R2独立地选自：(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、CO2H、卤素、OH和NH2；
环Y是(C4-C7)环烷基；
R1选自：H、氧代基、(C＝O)aOb(C1-C10)烷基、(C＝O)aOb-芳基、(C＝O)aOb(C2-C10)链烯基、(C＝O)aOb(C2-C10)炔基、CO2H、卤素、OH、Ob(C1-C6)全氟烷基、(C＝O)aNR7R8、CN、(C＝O)aOb(C3-C8)环烷基、S(O)mNR7R8、SH、S(O)m-(C1-C10)烷基和(C＝O)aOb-杂环基，所述烷基、芳基、链烯基、炔基、环烷基和杂环基任选被一个或多个选自R6的取代基取代；
R6是：(C＝O)aObC1-C10烷基、(C＝O)aOb芳基、C2-C10链烯基、C2-C10炔基、(C＝O)aOb杂环基、CO2H、卤素、CN、OH、ObC1-C6全氟烷基、Oa(C＝O)bNR7R8、氧代基、CHO、(N＝O)R7R8、S(O)mNR7R8、SH、S(O)m-(C1-C10)烷基或(C＝O)aObC3-C8环烷基，所述烷基、芳基、链烯基、炔基、杂环基和环烷基任选被一个或多个选自R6a的取代基取代；
R6a选自：(CO)aOb(C1-C10)烷基、Oa(C1-C3)全氟烷基、(C0-C6)亚烷基-S(O)mRa、SH、氧代基、OH、卤素、CN、(C2-C10)链烯基、(C2-C10)炔基、(C3-C6)环烷基、(C0-C6)亚烷基-芳基、(C0-C6)亚烷基-杂环基、(C0-C6)亚烷基-N(Rb)2、C(O)Ra、(C0-C6)亚烷基-CO2Ra、C(O)H和(C0-C6)亚烷基-CO2H，所述烷基、链烯基、炔基、环烷基、芳基和杂环基任选被最高达3个选自下列的取代基取代：Rb、OH、(C1-C6)烷氧基、卤素、CO2H、CN、Oa(C＝O)b(C1-C6)烷基、氧代基和N(Rb)2；
R7和R8独立地选自：H、(C＝O)aOb(C1-C10)烷基、(C＝O)aOb(C3-C8)环烷基、(C＝O)aOb-芳基、(C＝O)aOb-杂环基、(C2-C10)链烯基、(C2-C10)炔基、SH、SO2Ra和(C＝O)aNRb 2，所述烷基、环烷基、芳基、杂环基、链烯基和炔基任选被一个或多个选自R6a的取代基取代，或者R7和R8可以与它们所连接的氮一起形成单环或二环杂环，所述杂环在每个环中具有3-7个环原子，并且除了该氮之外，任选含有1或2个选自N、O和S的另外的杂原子，所述单环或二环杂环任选被一个或多个选自R6a的取代基取代；
Ra是(C1-C6)烷基、(C3-C6)环烷基、芳基或杂环基；且
Rb独立地为：H、(C1-C6)烷基、芳基、杂环基、(C3-C6)环烷基、(C＝O)aOb(C1-C6)烷基或S(O)mRa；或其可药用盐或立体异构体。
在第六个实施方案中，Akt活性抑制剂由式B表示：
Figure G2007800509679D00101
其中：
Figure G2007800509679D00102
是
Figure G2007800509679D00103
a是0或1；b是0或1；m是0、1或2；p是0、1或2；
R2独立地选自：(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、CO2H、卤素、OH和NH2；
环Y是(C4-C7)环烷基；
X是O或NR9；
R1选自：(C＝O)aOb(C1-C10)烷基、(C＝O)aOb-芳基、(C＝O)aOb(C2-C10)链烯基、(C＝O)aOb(C2-C10)炔基、CO2H、卤素、OH、Ob(C1-C6)全氟烷基、(C＝O)aNR7R8、CN、(C＝O)aOb(C3-C8)环烷基、S(O)2NR7R8、SH、S(O)2-(C1-C10)烷基和(C＝O)aOb-杂环基，所述烷基、芳基、链烯基、炔基、环烷基和杂环基任选被下列基团取代：(C＝O)aOb(C1-C10)烷基、Oa(C1-C3)全氟烷基、(C0-C6)亚烷基-S(O)mRa、SH、氧代基、OH、卤素、CN、(C2-C10)链烯基、(C2-C10)炔基、(C3-C6)环烷基、(C0-C6)亚烷基-芳基、(C0-C6)亚烷基-杂环基、(C0-C6)亚烷基-N(Rb)2、C(O)Ra、(C0-C6)亚烷基-CO2Ra、C(O)H和(C0-C6)亚烷基-CO2H；
R7和R8独立地选自：H、(C＝O)aOb(C1-C10)烷基、(C＝O)aOb(C3-C8)环烷基、(CO)aOb-芳基、(CO)aOb-杂环基、(C2-C10)链烯基、(C2-C10)炔基、SH、SO2Ra和(C＝O)aNRb 2；
R9选自：(C＝O)aOb(C1-C10)烷基、(C＝O)aOb-芳基、(C＝O)aOb(C2-C10)链烯基、(C＝O)aOb(C2-C10)炔基、OH、Ob(C1-C6)全氟烷基、(CO)aNR7R8、CN、(C＝O)aOb(C3-C8)环烷基、S(O)2NR7R8、S(O)2-(C1-C10)烷基和(C＝O)aOb-杂环基，所述烷基、芳基、链烯基、炔基、环烷基和杂环基任选被下列基团取代：(C＝O)aOb(C1-C10)烷基、Oa(C1-C3)全氟烷基、(C0-C6)亚烷基-S(O)mRa、SH、氧代基、OH、卤素、CN、(C2-C10)链烯基、(C2-C10)炔基、(C3-C6)环烷基、(C0-C6)亚烷基-芳基、(C0-C6)亚烷基-杂环基、(C0-C6)亚烷基-N(Rb)2、C(O)Ra、(C0-C6)亚烷基-CO2Ra、C(O)H和(C0-C6)亚烷基-CO2H；
Ra是(C1-C6)烷基、(C3-C6)环烷基、芳基或杂环基；且
Rb独立地为：H、(C1-C6)烷基、芳基、杂环基、(C3-C6)环烷基、(C＝O)aOb(C1-C6)烷基或S(O)mRa；
或其可药用盐或立体异构体。
在第七个实施方案中，Akt活性抑制剂由式E表示：
Figure G2007800509679D00111
其中：
Figure G2007800509679D00121
是
Figure G2007800509679D00122
环Y是环丁基；
R1是H、嘧啶基、OH、甲基或环丙基；
或其可药用盐。
具体的本发明化合物包括：
1-{4-[3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-9)；
1-[4-(9-苯基-3-嘧啶-2-基-[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺(1-10)；
1-[4-(9-苯基-3-[1，2，4]三唑并[1，5-α]嘧啶-2-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺(1-11)；
1-[4-(9-苯基-3-吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺(1-12)；
1-[4-(3-咪唑并[2，1-b][1，3]噻唑-6-基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺(1-13)；
1-{4-[9-苯基-3-(1H-1，2，3-三唑-4-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-14)；
1-[4-(9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺(1-15)；
8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-醇(1-16)；
1-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺(1-17)；
1-{4-[3-(二氟甲基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-18)；
{8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-基}甲醇(1-19)；
1-{4-[3-(甲氧基甲基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-20)；
1-{8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-基}乙醇(1-21)；
2-{8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-基}丙-2-醇(1-22)；
1-[4-(3-环丙基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺(1-23)；
1-[4-(3-环己基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺(1-24)；
1-{4-[9-苯基-3-(四氢-2H-吡喃-2-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-25)；
1-{4-[3-(4-甲基吗啉-2-基)-9-苯基-[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-26)；
1-{4-[3-(2-甲基四氢-2H-吡喃-2-基)-9-苯基-[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-27)；
1-{4-[9-苯基-3-(四氢-2H-吡喃-3-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-28)；
1-{4-[9-苯基-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-29)；
1-[4-(3-咪唑并[1，2-a]吡嗪-2-基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺(1-30)；
1-{4-[3-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-31)；
1-[4-(3-咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺(1-32)；
1-{4-[9-苯基-3-(1H-吡唑-4-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-33)；
1-[4-(9-苯基-3-吡唑并[1，5-a]嘧啶-2-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺(1-34)；
1-(4-{3-[(2-羟基乙基)氨基甲酰基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基}苯基)环丁胺(1-35)；
1-{4-[3-(4-羟基苯基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-36)；
1-(4-{3-[4-(羟基甲基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基}苯基)环丁胺(1-37)；
1-[4-(9-苯基-3-吡啶-3-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺(1-38)；
1-[4-(9-苯基-3-吡啶-4-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺(1-39)；
1-[4-(9-苯基-3-哒嗪-3-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺(1-40)；
1-[4-(9-苯基-3-嘧啶-5-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺(1-41)；
1-[4-(9-苯基-3-吡嗪-2-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺(1-42)；
3-{8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-基}-5-氧代-4，5-二氢-1H-1，2，4-三唑(1-43)；
1-{4-[3-(6-羟基吡啶-2-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-44)；
1-{4-[3-(2-羟基苯基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-45)；
1-{4-[3-(6-吗啉-4-基吡啶-3-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-46)；
1-{4-[3-(3-羟基吡啶-2-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-47)；
1-{4-[3-(6-羟基吡啶-3-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-48)；
1-(4-{3-[5-(甲氧基羰基)吡啶-2-基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基}苯基)环丁胺(1-49)；
1-{4-[3-(5-羟基吡嗪-2-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-50)；
1-{4-[3-(4-羟基嘧啶-5-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-51)；
1-[4-(3-氨基甲酰基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺(1-52)；
4-({8-[4-(1-铵基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-基}甲基)吗啉(1-53)；
8-[4-(1-铵基环丁基)苯基]-9-苯基-3-(1H-四唑-1-基甲基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘(1-54)；
8-[4-(1-铵基环丁基)苯基]-9-苯基-3-(1H-1，2，4-三唑-1-基甲基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘(1-55)；
8-[4-(1-铵基环丁基)苯基]-9-苯基-3-(1H-吡唑-1-基甲基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘(1-56)；
1-{4-[3-(氮杂环丁烷-1-基甲基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-57)；
1-[4-(3-{[乙基(甲基)氨基]甲基}-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺(1-58)；
1-{4-[9-苯基-3-(吡咯烷-1-基甲基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-59)；
1-(4-{3-[(二乙基氨基)甲基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基}苯基)环丁胺(1-60)；
2-[({8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-基}甲基)(甲基)氨基]乙醇(1-61)；
1-{4-[9-苯基-3-(哌啶-1-基甲基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-62)；
1-{4-[9-苯基-3-(哌嗪-1-基甲基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-63)；
(3R)-1-({8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-基}甲基)吡咯烷-3-醇(1-64)；
(3S)-1-({8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-基}甲基)吡咯烷-3-醇(1-65)；
1-[4-(3-{[(2-甲氧基乙基)(甲基)氨基]甲基}-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺(1-66)；
2，2′-[({8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-基}甲基)亚氨基]二乙腈(1-67)；
4-({8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-基}甲基)哌嗪-2-酮(1-68)；
1-({8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-基}甲基)哌啶-3-醇(1-69)；
1-(4-{3-[(4-氟哌啶-1-基)甲基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基}苯基)环丁胺(1-70)；
2-[({8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-基}甲基)(丙基)氨基]乙醇(1-71)；
(3R)-1-({8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-基}甲基)-N，N-二甲基吡咯烷-3-胺(1-72)；
[1-({8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-基}甲基)哌啶-2-基]甲醇(1-73)；
[1-({8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-基}甲基)哌啶-3-基]甲醇(1-74)；
1-[4-(3-{[(2R)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]甲基}-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺(1-75)；
[1-({8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-基}甲基)哌啶-4-基]甲醇(1-76)；
2-[({8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-基}甲基)(丁基)氨基]乙醇(1-77)；
1-({8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-基}甲基)哌啶-4-甲酰胺(1-78)；
1-(4-{3-[(4-乙酰基哌嗪-1-基)甲基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基}苯基)环丁胺(1-79)；
2-[1-({8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-基}甲基)哌啶-4-基]乙醇(1-80)；
1-{4-[3-(3，4-二氢异喹啉-2(1H)-基甲基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-81)；
1-[4-(3-{[甲基(2-苯基乙基)氨基]甲基}-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺(1-82)；
1-(4-{9-苯基-3-[(丙基氨基)甲基][1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基}苯基)环丁胺(1-83)；
1-(4-{3-[(苄基氨基)甲基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基}苯基)环丁胺(1-84)；
1-(4-{3-[(甲基氨基)甲基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基}苯基)环丁胺(1-85)；
1-{4-[9-苯基-3-(1H-1，2，4-三唑-3-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-86)；
1-{4-[3-(5-羟基吡啶-2-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-87)；
1-{4-[3-(铵基甲基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-88)；
8-[4-(1-铵基环丁基)苯基]-3-[(1-甲基-1H-咪唑-4-基)甲基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘(1-89)；
1-[4-(9-苯基-3-吡啶-2-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺(1-90)；
1-[4-(9-苯基-3-嘧啶-4-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺(1-91)；
1-{4-[3-(3-羟基苯基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-92)；
1-(4-{3-[羟基(甲氧基)甲基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基}苯基)环丁胺(1-93)；
1-[4-(3，9-二苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺(1-94)；
1-[4-(3-环丁基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺(1-95)；
1-{4-[3-(环丙基甲基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-96)；
2-{8-[4-(1-铵基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-基}哌啶(1-97)；
1-[4-(9-苯基-3-丙基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺(1-98)；
1-[4-(3-乙基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺(1-99)；
1-[4-(3-乙氧基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺(1-100)；
1-({8-[4-(1-铵基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-基}甲基)-4-羟基哌啶(1-101)；
1-[4-(3-异丁基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺(1-102)；
1-{4-[3-(2-羟基-2-甲基丙基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-103)；
1-{4-[3-(1-羟基丙基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-104)；
1-{4-[9-苯基-3-(1H-吡唑-5-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-107)；
1-{4-[3-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-108)；
1-{4-[3-(5-甲基-1H-吡唑-3-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-109)；
1-{4-[9-苯基-3-(4-哒嗪基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-110)；
1-{4-[3-(3-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-111)；
1-{4-[3-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-112)；
1-{4-[3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-113)；
1-{4-[9-苯基-3-(1，4，5，6-四氢环戊二烯并[c]吡唑-4-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-114)；
1-{4-[3-(2-甲基-1，3-噻唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-115)；
1-{4-[3-(1-苯并噻吩-2-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-116)；
1-{4-[3-(1H-吲哚-2-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-117)；
1-{4-[3-(1H-吲哚-3-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-118)；
1-{4-[3-(5-甲基-4-异噁唑基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-119)；
1-{4-[3-(2-甲基-3-呋喃基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-120)；
1-{4-[3-(1，3-噁唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-121)；
1-{4-[9-苯基-3-(3-噻吩基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-122)；
4-{8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-基}-1H-吡唑-3-胺(1-123)；
1-{4-[3-(1H-吲唑-3-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-124)；
1-{4-[3-(5-甲基-3-异噁唑基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-125)；
1-{4-[3-(5-甲基-1，2，3-噻二唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-126)；
1-{4-[9-苯基-3-(1，2，5-噻二唑-3-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-127)；
1-{4-[3-(1，2，5-噁二唑-3-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-128)；
1-{4-[3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9-(4-氟苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(2-6)；
1-{4-[3-甲基-9-(4-氟苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-/|-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(2-7)；
1-{4-[3-(乙基氨基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(3-2)；
1-[2-({8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-基}氨基)乙基]-1-甲基哌啶(3-3)；
8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-N-环己基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-胺(3-4)；
8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-N-(叔丁基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-胺(3-5)；
N′-{8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-基}-N，N-二甲基丙-1，3-二胺(3-6)；
1-{4-[3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环戊胺(4-7)；
1-{4-[3-甲基-9-(4-氟苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环戊胺(4-8)；
1-{4-[3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环己胺(5-1)；
1-{4-[3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环己胺(5-2)；
8-[4-(1-氨基环己基)苯基]-N-乙基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-胺(6-1)；
1-[4-(2-苯基-9-吡啶-4-基[1，2，4]三唑并[4’，3’:1，6]吡啶并[2，3-b]吡嗪-3-基)苯基]环丁胺(7-8)；
1-[4-(2-苯基-9-吡啶-3-基[1，2，4]三唑并[4’，3’:1，6]吡啶并[2，3-b]吡嗪-3-基)苯基]环丁胺(7-9)；
1-[4-(2-苯基-9-吡嗪-2-基[1，2，4]三唑并[4’，3’:1，6]吡啶并[2，3-b]吡嗪-3-基)苯基]环丁胺(8-8)；和
1-[4-(2-苯基-9-丙基[1，2，4]三唑并[4’，3’:1，6]吡啶并[2，3-b]吡嗪-3-基)苯基]环丁胺(8-9)；
或其可药用盐或立体异构体。
本发明化合物的实例包括下列化合物的HCl盐：
1-{4-[3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-9)；
1-[4-(9-苯基-3-嘧啶-2-基-[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺(1-10)；
1-[4-(9-苯基-3-[1，2，4]三唑并[1，5-α]嘧啶-2-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺(1-11)；
1-[4-(9-苯基-3-吡唑并[1，5-α]嘧啶-3-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺(1-12)；
1-[4-(3-咪唑并[2，1-b][1，3]噻唑-6-基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺(1-13)；
1-{4-[9-苯基-3-(1H-1，2，3-三唑-4-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-14)；
1-[4-(9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺(1-15)；
8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-醇(1-16)；
1-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺(1-17)；
1-{4-[3-(二氟甲基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-18)；
{8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-基}甲醇(1-19)；
1-{4-[3-(甲氧基甲基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-20)；
1-{8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-基}乙醇(1-21)；
2-{8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-基}丙-2-醇(1-22)；
1-[4-(3-环丙基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺(1-23)；
1-[4-(3-环己基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺(1-24)；
1-{4-[9-苯基-3-(四氢-2H-吡喃-2-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-25)；
1-{4-[3-(4-甲基吗啉-2-基)-9-苯基-[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-26)；
1-{4-[3-(2-甲基四氢-2H-吡喃-2-基)-9-苯基-[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-27)；
1-{4-[9-苯基-3-(四氢-2H-吡喃-3-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-28)；
1-{4-[9-苯基-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-29)；
1-(4-{3-[(2-羟基乙基)氨基甲酰基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基}苯基)环丁胺(1-35)；
1-{4-[3-(4-羟基苯基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-36)；
1-(4-{3-[4-(羟基甲基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基}苯基)环丁胺(1-37)；
1-[4-(9-苯基-3-吡啶-3-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺(1-38)；
1-[4-(9-苯基-3-吡啶-4-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺(1-39)；
1-[4-(9-苯基-3-哒嗪-3-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺(1-40)；
1-[4-(9-苯基-3-嘧啶-5-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺(1-41)；
1-[4-(9-苯基-3-吡嗪-2-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺(1-42)；
3-{8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-基}-5-氧代-4，5-二氢-1H-1，2，4-三唑(1-43)；
1-{4-[3-(6-羟基吡啶-2-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-44)；
1-(4-{3-[5-(甲氧基羰基)吡啶-2-基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基}苯基)环丁胺(1-49)；
1-{4-[3-(5-羟基吡嗪-2-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-50)；
1-[4-(3-氨基甲酰基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺(1-52)；
4-({8-[4-(1-铵基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-基}甲基)吗啉(1-53)；
8-[4-(1-铵基环丁基)苯基]-9-苯基-3-(1H-四唑-1-基甲基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘(1-54)；
8-[4-(1-铵基环丁基)苯基]-9-苯基-3-(1H-1，2，4-三唑-1-基甲基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘(1-55)；
8-[4-(1-铵基环丁基)苯基]-9-苯基-3-(1H-吡唑-1-基甲基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘(1-56)；
1-{4-[9-苯基-3-(1H-1，2，4-三唑-3-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-86)；
1-{4-[3-(5-羟基吡啶-2-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-87)；
1-{4-[3-(铵基甲基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-88)；
8-[4-(1-铵基环丁基)苯基]-3-[(1-甲基-1H-咪唑-4-基)甲基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘(1-89)；
1-[4-(9-苯基-3-吡啶-2-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺(1-90)；
1-[4-(9-苯基-3-嘧啶-4-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺(1-91)；
1-{4-[3-(3-羟基苯基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-92)；
1-(4-{3-[羟基(甲氧基)甲基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基}苯基)环丁胺(1-93)；
1-[4-(3，9-二苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺(1-94)；
1-[4-(3-环丁基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺(1-95)；
1-{4-[3-(环丙基甲基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-96)；
2-{8-[4-(1-铵基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-基}哌啶(1-97)；
1-[4-(9-苯基-3-丙基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺(1-98)；
1-[4-(3-乙基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺(1-99)；
1-[4-(3-乙氧基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺(1-100)；
1-({8-[4-(1-铵基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-基}甲基)-4-羟基哌啶(1-101)；
1-[4-(3-异丁基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺(1-102)；
1-{4-[3-(2-羟基-2-甲基丙基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-103)；
1-{4-[3-(1-羟基丙基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-104)；
1-{4-[3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9-(4-氟苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(2-6)；
1-{4-[3-甲基-9-(4-氟苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(2-7)；
1-{4-[3-(乙基氨基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(3-2)；
1-[2-({8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-基}氨基)乙基]-1-甲基哌啶(3-3)；
8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-N-环己基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-胺(3-4)；
8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-N-(叔丁基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-胺(3-5)；
N′-{8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-基}-N，N-二甲基丙-1，3-二胺(3-6)；
1-{4-[3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环戊胺(4-7)；
1-{4-[3-甲基-9-(4-氟苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环戊胺(4-8)；
1-{4-[3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环己胺(5-1)；
1-{4-[3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环己胺(5-2)；和
8-[4-(1-氨基环己基)苯基]-N-乙基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-胺(6-1)；
1-[4-(2-苯基-9-吡嗪-2-基[1，2，4]三唑并[4’，3’:1，6]吡啶并[2，3-b]吡嗪-3-基)苯基]环丁胺(8-8)；
或其立体异构体。
本发明化合物的实例包括下列化合物的TFA盐：
1-[4-(3-咪唑并[1，2-a]吡嗪-2-基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺(1-30)；
1-{4-[3-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-31)；
1-[4-(3-咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺(1-32)；
1-{4-[9-苯基-3-(1H-吡唑-4-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-33)；
1-[4-(9-苯基-3-吡唑并[1，5-a]嘧啶-2-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺(1-34)；
1-{4-[3-(2-羟基苯基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-45)；
1-{4-[3-(6-吗啉-4-基吡啶-3-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-46)；
1-{4-[3-(3-羟基吡啶-2-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-47)；
1-{4-[3-(6-羟基吡啶-3-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-48)；
1-{4-[3-(4-羟基嘧啶-5-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺(1-51)；和
1-[4-(2-苯基-9-吡啶-4-基[1，2，4]三唑并[4’，3’:1，6]吡啶并[2，3-6]吡嗪-3-基)苯基]环丁胺(7-8)；
或其立体异构体。
本发明化合物是：
1-[4-(9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺(1-15)；或其可药用盐。
本发明化合物是：
1-[4-(9-苯基-3-嘧啶-2-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺(1-10)；或其可药用盐。
本发明化合物是：
8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3(2H)-酮(1-16)；或其可药用盐。
本发明化合物是：
1-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺(1-17)；或其可药用盐。
本发明化合物是：
1-[4-(3-环丙基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺(1-23)；或其可药用盐。
本发明化合物是：
1-[4-(2-苯基-9-吡嗪-2-基[1，2，4]三唑并[4’，3’:1，6]吡啶并[2，3-6]吡嗪-3-基)苯基]环丁胺(8-8)；或其可药用盐。
本发明化合物可以具有不对称中心、手性轴和手性面(如E.L.Eliel和S.H.Wilen，Stereochemistry of Carbon Compounds，John Wiley &Sons，New York，1994，p.1119-1190中所述)，并且可以存在为外消旋物、外消旋混合物和作为单一非对映异构体与所有可能的异构体及其混合物，包括旋光异构体，所有这些立体异构体都包括在本发明内。
此外，本申请公开的化合物可以作为互变异构体存在，并且其两种互变异构形式都意图包括在本发明范围内，即使仅仅一种互变结构得到表明时。例如，下面的互变异构体形式在本发明范围内：
Figure G2007800509679D00271
四唑作为1H/2H互变异构体的混合物存在。四唑部分的互变异构形式同样包括在本发明范围内。
本发明还包括本文公开的化合物的前药。任何化合物的前药都可以使用众所周知的制药技术制得。
当任何变量(例如R2等)在任何结构中出现多于一次时，它在各次出现时的定义独立于下一次出现时的定义。并且，只有当组合能够产生稳定的化合物时，取代基和变量的组合才是允许的。从取代基画入环系统中的线表示所示键可以连接在任何可取代环原子上。如果所述环系统为二环系统，那么其意图是该键连接双环部分的任一个环的任何适宜原子上。
应当理解，本领域技术人员可以向本发明化合物内引入一个或多个硅(Si)原子以替代一个或多个碳原子，从而提供化学稳定的，并且易于通过本领域已知技术由容易获得的原料合成的化合物。碳和硅的共价半径不同，导致当比较类似C-元素和Si-元素键相比，键长和空间排列不同。这些差异导致当与碳相比，含有硅的化合物的尺寸和形状发生轻微变化。本领域技术人员应当理解，这样的尺寸和形状差异可导致效力、溶解度、缺乏靶活性、包装性质等的轻微或显著改变等(Diass，J.O.等人，Organometallics(2006)5：1188-1198；Showell，G.A.等人，Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters(2006)16：2555-2558)。
应当理解，本发明化合物上的取代基和取代方式可以由本领域普通技术人员进行选择，从而提供化学性质稳定并且可以由轻易获得的原料通过本领域熟知的方法以及下述方法轻易进行合成的化合物。如果取代基自身被多于一个基团取代，那么应当理解，这些多个基团可以在相同碳原子或者不同碳原子上，只要得到稳定结构即可。短语“任选被一个或者多个取代基取代”应当理解为等同于短语“任选被至少一个取代基取代”，在这种情形下，优选的实施方案将具有0～4个取代基，并且更优选的实施方案将具有0～3个取代基。
本文使用的“烷基”意指包括具有指定碳原子数目的支链和直链饱和脂族烃基团。例如，C1-C10，如在“(C1-C10)烷基”中应用的C1-C10定义为包括在直链或者支链结构中具有1、2、3、4、5、6、7、8、9或者10个碳原子的基团。例如，“(C1-C10)烷基”具体包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基、戊基、己基、庚基、辛基、壬基和癸基等等。
术语“环烷基”是指具有指定数目碳原子的单环饱和脂族烃基。例如，“环烷基”包括环丙基、甲基-环丙基、2，2-二甲基-环丁基、2-乙基-环戊基和环己基等等。
“烷氧基”表示经氧桥连接的具有指定数目碳原子的环烷基或者非环烷基。由此，“烷氧基”包含以上定义的烷基和环烷基。
如果碳原子数目没有明确说明，那么术语“链烯基”是指含有2-10个碳原子和至少一个碳碳双键的直链、支链或者环状非芳香烃基。优选其中存在一个碳碳双键，并且可以存在最多四个非芳香碳碳双键。由此，“(C2-C10)链烯基”是指具有2-10个碳原子的链烯基。链烯基包括乙烯基、丙烯基、丁烯基、2-甲基丁烯基和环己烯基。链烯基的直链、支链或者环部分可以含有双键，并且如果表明为取代烯基，那么所述链烯基可以被取代。
术语“炔基”是指含有2-10个碳原子和至少一个碳碳三键的直链、支链或者环状烃基。其中可以存在最多三个碳碳三键。由此，“(C2-C10)炔基”是指具有2-10个碳原子的炔基。所述炔基包括乙炔基、丙炔基、丁炔基、3-甲基丁炔基等。炔基的直链、支链或者环部分可以含有三键，并且如果表明为取代炔基，那么其可以被取代。
在某些情况下，取代基可以定义具有包括0的碳原子范围，比如(C0-C6)亚烷基-芳基。如果芳基取值为苯基，那么该定义将包括苯基自身以及-CH2Ph、-CH2CH2Ph和CH(CH3)CH2CH(CH3)Ph等等。
本文使用的“芳基”是指任何在各环中有最多7个原子的稳定的单环或者二环碳环，其中至少一个环是芳香环。所述芳基的实例包括苯基、萘基、四氢萘基、茚满基和联苯基。可以理解，在芳基取代基是二环取代基并且一个环是非芳香环的情况中，连接是经芳环进行的。
本文使用的术语杂芳基表示在各环中具有最多7个原子的稳定的单环或者二环，其中至少一个环是芳香环并且含有1-4个选自O、N、和S的杂原子。在此定义范围内的杂芳基包括但不限于：吖啶基、咔唑基、噌啉基、喹喔啉基、吡唑基、吲哚基、苯并三唑基、呋喃基、噻吩基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、喹啉基、异喹啉基、噁唑基、异噁唑基、吲哚基、吡嗪基、哒嗪基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、四氢喹啉。正如以下杂环的定义一样，“杂芳基”还应当理解为包括任何含氮杂芳基的N-氧化物衍生物。在其中杂芳基取代基是二环取代基并且一个环是非芳香环或者不包含杂原子的情况下，可以理解，所述连接分别经芳香环或者经含杂原子环进行。对于取代基Q，所述杂芳基部分包括但不限于：2-苯并咪唑基、2-喹啉基、3-喹啉基、4-喹啉基、1-异喹啉基、3-异喹啉基和4-异喹啉基。
本文使用的术语“杂环”或者“杂环基”是指含有1-4个选自O、N和S的杂原子的3-10元芳香或者非芳香杂环，并且包括二环基团。由此，“杂环基”包括上述杂芳基及其二氢或者四氢类似物。“杂环基”的其它实例包括但不限于以下：苯并咪唑基、苯并咪唑酮基、苯并呋喃基、苯并呋咱基、苯并吡唑基、苯并三唑基、苯并噻吩基、苯并噁唑基、咔唑基、咔啉基、噌啉基、呋喃基、咪唑基、二氢吲哚基、吲哚基、吲嗪基(indolazinyl)、吲唑基、异苯并呋喃基、异吲哚基、异喹啉基、异噻唑基、异噁唑基、二氮杂萘基、噁二唑基、噁唑基、噁唑啉、异噁唑啉、氧杂环丁烷基、吡喃基、吡嗪基、吡唑基、哒嗪基、吡啶并吡啶基、哒嗪基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、喹喔啉基、四氢吡喃基、四唑基、四唑并吡啶基、噻二唑基、噻唑基、噻吩基、三唑基、氮杂环丁烷基、1，4-二氧杂环己烷基、六氢氮杂
Figure G2007800509679D00291
基、哌嗪基、哌啶基、吡啶-2-酮基、吡咯烷基、吗啉基、硫代吗啉基、二氢苯并咪唑基、二氢苯并呋喃基、二氢苯并噻吩基、二氢苯并噁唑基、二氢呋喃基、二氢咪唑基、二氢吲哚基、二氢异噁唑基、二氢异噻唑基、二氢噁二唑基、二氢噁唑基、二氢吡嗪基、二氢吡唑基、二氢吡啶基、二氢嘧啶基、二氢吡咯基、二氢喹啉基、二氢四唑基、二氢噻二唑基、二氢噻唑基、二氢噻吩基、二氢三唑基、二氢氮杂环丁烷基、亚甲二氧基苯甲酰基、四氢呋喃基和四氢噻吩基及其N-氧化物。杂环基取代基可以经碳原子或者经杂原子进行连接。
如本领域技术人员所理解，本文使用的“卤代”或“卤素”包括氯(Cl)、氟(F)、溴(Br)和碘(I)。
在式B的一个实施方案中，下式表示的部分：
Figure G2007800509679D00301
包括以下结构：
Figure G2007800509679D00302
在式B的另一个实施方案中，下式表示的部分：
Figure G2007800509679D00311
是：
Figure G2007800509679D00312
在式B的另一个实施方案中，下式表示的部分：
是：
Figure G2007800509679D00314
在一个实施方案中，环Z选自：苯基和杂环基。
在另一个实施方案中，环Z选自：
在另一个实施方案中，环Z是苯基。
在一个实施方案中，p独立地为0、1、2或3。
在另一个实施方案中，p独立地为0、1或2。
在另一个实施方案中，p独立地为1。
在一个实施方案中，R1选自：氧代基、(C＝O)aOb(C1-C10)烷基、(C＝O)aOb-芳基、(C＝O)aOb(C2-C10)链烯基、(C＝O)aOb(C2-C10)炔基、CO2H、卤素、OH、Ob(C1-C6)全氟烷基、(C＝O)aNR7R8、CN、(C＝O)aOb(C3-C8)环烷基、S(O)2NR7R8、SH、S(O)2-(C1-C10)烷基和(C＝O)aOb-杂环基，所述烷基、芳基、链烯基、炔基、环烷基和杂环基任选被R6a取代。
在另一个实施方案中，R1选自：氧代基、(C＝O)aOb(C1-C10)烷基、CO2H、卤素、OH、CN、(C1-C6)烷氧基、S(O)2NR7R8、SH、S(O)2-(C1-C10)烷基、O(CO)(C1-C6)烷基和N(Rb)2，所述烷基任选被R6a取代。
在另一个实施方案中，R1选自：氧代基、NH2、OH、SH、Oa(C1-C6)烷基，所述烷基任选被R6a取代。
在另一个实施方案中，R2选自：氧代基、(C＝O)aOb(C1-C10)烷基、CO2H、卤素、OH、CN、(C1-C6)烷氧基、O(C＝O)(C1-C6)烷基、(C2-C10)链烯基和N(Rb)2，所述烷基任选被Rb、OH、(C1-C6)烷氧基、卤素、CO2H、CN、O(C＝O)(C1-C6)烷基、氧代基和N(Rb)2取代。
在一个实施方案中，Rb独立地选自H和(C1-C6)烷基。
在式C的另一个实施方案中，环Y是环丁基；R1选自：H、杂环基、(C3-C6)环烷基、OH、(C1-C6)烷基、NH(C1-C6)烷基、NH-杂环基、NH-环烷基，所述杂环基、环烷基和烷基任选被以下基团取代：卤素、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基-NH2、OH、O(C1-C6)烷基，并且R2是H或F。
在式B的一个实施方案中，环Y是环丁基；R1是：H或(C1-C6)烷基；并且R2是H或F。
在式B的另一个实施方案中，环Y是环丁基；R1是：H、OH或(C1-C6)烷基；并且R2是H或F。
在式B的另一个实施方案中，环Y是环丁基；p是0；并且R1是H、嘧啶基、氧代基、OH、甲基或环丙基。
在式B的另一个实施方案中，环Y是环丁基；p是0；并且R1是OH或氧代基。
在式C的一个实施方案中，R1选自：氧代基、(C＝O)aOb(C1-C10)烷基、(C＝O)aOb-芳基、(C＝O)aOb(C2-C10)链烯基、(C＝O)aOb(C2-C10)炔基、CO2H、卤素、OH、Ob(C1-C6)全氟烷基、(C＝O)aNR7R8、CN、(C＝O)aOb(C3-C8)环烷基、S(O)2NR7R8、SH、S(O)2-(C1-C10)烷基和(C＝O)aOb-杂环基，所述烷基、芳基、链烯基、炔基、环烷基和杂环基任选被R6a取代。
在式C的另一个实施方案中，R1选自：氧代基、(C＝O)aOb(C1-C10)烷基、CO2H、卤素、OH、CN、(C1-C6)烷氧基、S(O)2NR7R8、SH、S(O)2-(C1-C10)烷基、O(C＝O)(C1-C6)烷基和N(Rb)2，所述烷基任选被R6a取代。
在式C的另一个实施方案中，R1选自：氧代基、NH2，OH、SH、O3(C1-C6)烷基，所述烷基任选被R6a取代。
在式C的另一个实施方案中，R2选自：氧代基、(C＝O)aOb(C1-C10)烷基、CO2H、卤素、OH、CN、(C1-C6)烷氧基、O(C＝O)(C1-C6)烷基、(C2-C10)链烯基和N(Rb)2，所述烷基任选被Rb、OH、(C1-C6)烷氧基、卤素、CO2H、CN、O(C＝O)(C1-C6)烷基、氧代基和N(Rb)2取代。
在式C的另一个实施方案中，R1选自：H、杂环基、(C3-C6)环烷基、OH、(C1-C6)烷基、NH(C1-C6)烷基、NH-杂环基、NH-环烷基，所述杂环基、环烷基和烷基任选被下列基团取代：卤素、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基-NH2、OH、O(C1-C6)烷基，并且R2选自：H和卤素。
在式C的另一个实施方案中，环Y是环丁基；R1选自：H、杂环基、(C3-C6)环烷基、OH、(C1-C6)烷基、NH(C1-C6)烷基、NH-杂环基、NH-环烷基，所述杂环基、环烷基和烷基任选被下列基团取代：卤素、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基-NH2、OH、O(C1-C6)烷基，并且R2是H或F。
在式C的另一个实施方案中，环Y是环丁基；R1是：H或(C1-C6)烷基；并且R2是H或F。
在式C的另一个实施方案中，环Y是环丁基；R1是：H、OH或(C1-C6)烷基；并且R2是H或F。
在式C的另一个实施方案中，环Y是环丁基；p是0；并且R1是H、嘧啶基、氧代基、OH、甲基或环丙基。
在式C的另一个实施方案中，环Y是环丁基；p是0；并且R1是OH或氧代基。
在式D的一个实施方案中，R1选自：氧代基、(C＝O)aOb(C1-C10)烷基、(C＝O)aOb-芳基、(C＝O)aOb(C2-C10)链烯基、(C＝O)aOb(C2-C10)炔基、CO2H、卤素、OH、Ob(C1-C6)全氟烷基、(C＝O)aNR7R8、CN、(C＝O)aOb(C3-C8)环烷基、S(O)2NR7R8、SH、S(O)2-(C1-C10)烷基和(C＝O)aOb-杂环基，所述烷基、芳基、链烯基、炔基、环烷基和杂环基任选被R6a取代。
在式D的另一个实施方案中，R1选自：氧代基、(C＝O)aOb(C1-C10)烷基、CO2H、卤素、OH、CN、(C1-C6)烷氧基、S(O)2NR7R8、SH、S(O)2-(C1-C10)烷基、O(C＝O)(C1-C6)烷基和N(Rb)2，所述烷基任选被R6a取代。
在式D的另一个实施方案中，R1选自：氧代基、NH2、OH、SH、Oa(C1-C6)烷基，所述烷基任选被R6a取代。
在式D的另一个实施方案中，R2选自：氧代基、(C＝O)aOb(C1-C10)烷基、CO2H、卤素、OH、CN、(C1-C6)烷氧基、O(C＝O)(C1-C6)烷基、(C2-C10)链烯基和N(Rb)2，所述烷基任选被Rb、OH、(C1-C6)烷氧基、卤素、CO2H、CN、O(C＝O)(C1-C6)烷基、氧代基和N(Rb)2取代。
在式D的另一个实施方案中，R1选自：H、杂环基、(C3-C6)环烷基、OH、(C1-C6)烷基、NH(C1-C6)烷基、NH-杂环基、NH-环烷基，所述杂环基、环烷基和烷基任选被下列基团取代：卤素、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基-NH2、OH、O(C1-C6)烷基，并且R2选自：H和卤素。
在式D的另一个实施方案中，环Y是环丁基；R1选自：H、杂环基、(C3-C6)环烷基、OH、(C1-C6)烷基、NH(C1-C6)烷基、NH-杂环基、NH-环烷基，所述杂环基、环烷基和烷基任选被下列基团取代：卤素、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基-NH2、OH、O(C1-C6)烷基，并且R2是H或F。
在式D的另一个实施方案中，环Y是环丁基；R1是：H或(C1-C6)烷基；并且R2是H或F。
本发明包括游离形式的式A化合物以及其可药用盐和立体异构体。在此例证说明的一些分离的具体化合物为胺化合物的质子化盐。术语“游离形式”是指为非盐形式的胺化合物。本发明所包含的可药用盐不仅包括对于在此所述具体化合物而例证说明的分离的盐，而且包括游离形式的式A化合物的所有一般可药用盐。所述化合物的具体盐的游离形式可以通过应用本领域已知的工艺进行分离。例如，上述游离形式可以通过用适宜的稀碱水溶液处理所述盐而重新得到，所述稀碱水溶液比如稀NaOH、碳酸钾、氨水和碳酸氢钠水溶液。所述游离形式在某些物理性能上可能略微不同于其相应的盐形式，比如在极性溶剂中的溶解度，但是基于本发明目的，其酸和碱盐在其它药学方面等同于它们相应的游离形式。
本发明化合物可药用盐可以由含有碱性或者酸性部分的本发明化合物通过常规化学方法进行合成。通常，碱性化合物的盐通过离子交换色谱法进行制备，或者通过在适当溶剂或者溶剂的多种组合中，使游离碱与化学计量或者与过量的形成期望盐的无机酸或有机酸反应进行制备。类似地，酸性化合物的盐通过与适当的无机或者有机碱反应而得到形成。
由此，本发明化合物可药用盐包括通过使本发明碱性化合物与无机或者有机酸反应而形成的本发明化合物的常规无毒盐。例如，常规的无毒盐包括由无机酸得到的盐，例如盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、胺磺酸盐、磷酸盐和硝酸盐等等，以及由有机酸制备的盐，例如醋酸盐、丙酸盐、琥珀酸盐、乙醇酸盐、硬脂酸盐、乳酸盐、苹果酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、抗坏血酸盐、扑酸盐、马来酸盐、羟基马来酸盐、苯基马来酸盐、谷氨酸盐、安息香酸盐、水杨酸盐、磺胺酸盐、2-乙酰氧基-安息香酸盐、富马酸盐、甲苯磺酸盐、甲磺酸盐、乙基二磺酸盐、草酸盐、羟乙磺酸盐和三氟乙酸盐(TFA)等。
当本发明化合物为酸性化合物时，适宜的“可药用盐”是指由可药用无毒碱(包括无机碱和有机碱)制备得到的盐。由无机碱衍生得到的盐包括铝盐、铵盐、钙盐、铜盐、三价铁盐、二价铁盐、锂盐、镁盐、锰盐、亚锰盐、钾盐、钠盐和锌盐等等。特别优选铵、钙、镁、钾和钠盐。由可药用有机无毒碱衍生得到的盐包括伯胺盐、仲胺盐、叔胺盐、取代胺盐(包括天然存在的取代胺盐)、环胺盐和阳离子离子交换树脂盐，比如精氨酸、甜菜碱咖啡因、胆碱、N，N1-二苄基乙二胺、二乙基胺、2-二乙氨基乙醇、2-二甲氨基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基吗啉、N-乙基哌啶、葡糖胺、葡糖胺、组氨酸、哈胺、异丙胺、赖氨酸、甲基葡萄糖胺、吗啉、哌嗪、哌啶、聚胺树脂、普鲁卡因、嘌呤、可可碱、三乙胺、三甲胺、三丙胺和氨基丁三醇等。
如上所述可药用盐以及其它一般可药用盐的制备由Berg等人，“Pharmaceutical Salts”，J.Pharm.Sci.，1977，66：1-19，进行了更全面的描述。
还应当指出，本发明化合物是潜在地内盐或者两性离子化合物，因为在生理条件下，化合物中的去质子酸性部分(比如羧基)可以成为阴离子，随后此电荷可以通过质子化阳离子电荷或者烷基化碱性部分(比如季氮原子)而得到内部平衡。
用途
本发明化合物是Akt活性的抑制剂，因此用于治疗癌症，特别是治疗与Akt活性紊乱及Akt下游细胞靶有关的癌症。这些癌症包括但不限于卵巢癌、胰腺癌、乳癌和前列腺癌，以及在其中肿瘤抑制剂PTEN发生突变的癌症(包括恶性胶质瘤)(Cheng等人，Proc.Natl.Acad.Sd.(1992)89：9267-9271；Cheng等人，Proc.Natl.Acad.ScL(1996)93：3636-3641；Bellacosa等人，Int.J.Cancer(1995)64：280-285；Nakatani等人，J.Biol.Chem.(1999)274：21528-21532；Graff，Expert.Opin.Ther.Targets(2002)6(1)：103-113；和Yamada和Araki，J.Cell Science.(2001)114：2375-2382；Mischel和Cloughesy，Brain Pathol.(2003)13(1)：52-61)。
本文所提供的化合物、组合物和方法，被视为特别用于治疗癌症。可以通过本发明化合物、组合物和方法治疗的癌症包括但不限于：心 脏：(血管肉瘤、纤维肉瘤、横纹肌肉瘤、脂肉瘤)、粘液瘤、横纹肌瘤、纤维瘤、脂肪瘤和畸态瘤；肺：非小细胞肺癌，支气管癌(鳞状上皮细胞、未异化小细胞、未异化大细胞、恶性腺瘤)、肺泡(细支气管)癌、支气管腺瘤、肉瘤、淋巴瘤、软骨瘤错构瘤、间皮瘤；胃肠：食道(鳞状细胞癌、恶性腺瘤、平滑肌肉瘤、淋巴瘤)、胃(癌、淋巴瘤、平滑肌肉瘤)、胰腺癌(导管腺癌、胰岛瘤、胰高血糖素瘤、胃泌素瘤、类癌瘤(carcinoid tumors)、血管活性肠多肽瘤)、小肠癌(腺癌、淋巴瘤、类癌瘤、卡波西肉瘤、平滑肌瘤、血管瘤、脂肪瘤、神经纤维瘤、纤维瘤)、大肠癌(腺癌、管状腺瘤、绒毛状腺瘤、错构瘤、平滑肌瘤)，结肠癌，结肠直肠癌，直肠癌；泌尿生殖道癌：肾癌(腺癌、维尔姆斯瘤[肾胚胎瘤]、淋巴瘤、白血病)、膀胱癌和尿道癌(鳞状细胞癌、移行细胞癌、腺癌)、前列腺癌(腺癌、肉瘤)、睾丸癌(精原细胞瘤、畸胎瘤、胚性癌、恶性畸胎瘤、绒膜癌、肉瘤、间质细胞癌、纤维瘤、纤维腺瘤、腺瘤样瘤、脂肪瘤)；肝癌：肝细胞瘤(肝细胞癌)、胆管癌、肝胚细胞瘤、血管肉瘤、肝细胞腺瘤、血管瘤；骨癌：骨原性肉瘤(骨肉瘤)、纤维肉瘤、恶性皮肤纤维瘤、软骨肉瘤、尤因氏肉瘤、恶性淋巴瘤(网状细胞肉瘤)、多发性骨髓瘤、恶性骨巨细胞瘤、脊索瘤、骨软骨瘤(骨软骨外生骨疣)、良性软骨瘤、成软骨细胞瘤、软骨粘液纤维瘤、骨样骨瘤和巨细胞瘤；神经系统癌：颅骨癌(骨瘤、血管瘤、肉芽瘤、黄瘤、畸形性骨炎)、脑膜癌(脑膜瘤、脑膜肉瘤、神经胶质瘤病)、脑癌(星形细胞瘤、成神经管细胞瘤、神经胶质瘤、室管膜瘤、生殖细胞瘤[松果体瘤]、多形性成胶质细胞瘤、少突神经胶质细胞瘤、神经鞘瘤、成视网膜细胞瘤、先天性肿瘤)、脊髓癌(神经纤维瘤、脑膜瘤、神经胶质瘤、肉瘤)；妇科癌症：子宫癌(子宫内膜癌)、宫颈癌(宫颈癌、肿瘤发生前宫颈发育异常、卵巢癌(卵巢癌[浆液性囊腺癌、粘蛋白囊腺癌、未分类癌]、粒层-泡膜细胞瘤、Sertoli-Leydig细胞瘤、无性细胞瘤、恶性畸胎瘤)、外阴癌(鳞状细胞癌、上皮内癌、腺癌、纤维肉瘤、黑素瘤)、阴道癌(明细胞癌、鳞状细胞癌、葡萄状肉瘤(胚胎横纹肌肉瘤)、输卵管(癌)；血液癌：血癌(髓细胞性白血病[急性和慢性]、急性成淋巴细胞性白血病、慢性淋巴性白血病、骨髓组织增生性疾病、多发性骨髓瘤、骨髓增生异常综合征)、霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤[恶性淋巴瘤]；皮肤癌：恶性黑素瘤、基底细胞癌、鳞状细胞癌、卡波西肉瘤、胎块发育不良痣(moles dysplastic nevi)、脂肪瘤、血管瘤、皮肤纤维瘤、瘢痕瘤、牛皮癣；以及肾上腺癌：成神经细胞瘤。因此，本文使用的术语“癌细胞”包括患上述任何一种已确定病症的细胞。
可以通过本发明化合物、组合物和方法进行治疗的癌症包括但不限于：乳腺癌、前列腺癌、结肠癌、结肠直肠癌、肺癌、非小细胞肺癌、脑癌、睾丸癌、胃癌、胰腺癌、皮肤癌、小肠癌、大肠癌、喉癌、头颈癌、口腔癌、骨癌、肝癌、膀胱癌、肾癌、甲状腺癌和血癌。
可以通过本发明化合物、组合物和方法进行治疗的癌症包括但不限于：乳腺癌、前列腺癌、结肠癌、卵巢癌、结肠直肠癌、肺癌和非小细胞肺癌。
可以通过本发明化合物、组合物和方法进行治疗的癌症包括但不限于：乳腺癌、结肠癌(结肠直肠癌)和肺癌(非小细胞肺癌)。
可以通过本发明化合物、组合物和方法进行治疗的癌症包括但不限于：淋巴瘤和白血病。
本发明化合物可用于治疗乳腺癌。
本发明化合物可用于治疗前列腺癌。
Akt信号调节血管生成中的多个关键步骤(Shiojima和Walsh，Circ.Res.(2002)90：1243-1250)。血管生成抑制剂在治疗癌症中的应用在文献资料已有记载，参见例如J.Rak等人，Cancer Research，55：4575-4580，1995和Dredge等人，Expert Opin.Biol.Ther.(2002)2(8)：953-966。血管生成在癌症中的作用已在下述多种癌症和组织类型中得到了表明：乳癌(G.Gasparini和A.L.Harris，J.Clin.Oncol.，1995，13：765-782；M.Toi等，Japan.J.Cancer Res.，1994，85：1045-1049)；膀胱癌(A.J.Dickinson等，Br.J.Urol.，1994，74：762-766)；结肠癌(L.M.Ellis等，Surgery，1996，120(5)：871-878)和口腔肿瘤(J.K.Williams等，Am.J.Surg.，1994，168：373-380)。其它癌症包括晚期肿瘤、毛细胞白血病、黑素瘤、晚期头颈癌、转移性肾细胞癌、非霍奇金淋巴瘤、转移性乳癌、乳腺癌，晚期黑素瘤、胰腺癌、胃癌、成胶质细胞瘤、肺癌、卵巢癌、非小细胞肺癌、前列腺癌、小细胞肺癌、肾细胞癌、各种实体瘤、多发性骨髓瘤、转移性前列腺癌、恶性神经胶质瘤、肾癌、淋巴瘤、顽固性转移性疾病、顽固性多发性骨髓瘤、宫颈癌、卡波西肉瘤、复发性间变神经胶质瘤和转移性结肠癌(Dredge等，Expert Opin.Biol.Ther.(2002)2(8)：953-966)。由此，本申请所公开的Akt抑制剂也可以用于治疗这些血管生成相关的癌症。
已经历新血管形成的肿瘤显示升高的转移可能性。事实上，血管生成对肿瘤生长和转移是至关重要的(S.P.Cunningham等人，Can.Research，61：3206-3211(2001))。因此，在本申请中公开的Akt抑制剂也可以用于预防或降低肿瘤细胞的转移。
还包含在本发明范围的是治疗或预防涉及血管生成的疾病的方法，该方法包括向需要所述治疗的哺乳动物给药治疗有效量的本发明化合物。眼部新血管形成病是其中大部分组织损害可以归咎于眼内血管的异常浸润的症状的一个实例(参见WO 00/30651，2000年6月2日公布)。不期望的浸润可以由局部缺血性视网膜病(比如由糖尿病性视网膜病、早熟儿视网膜病、视网膜静脉闭塞等)或变性疾病(比如在老龄化相关性黄斑变性中观察到的脉胳膜新血管形成)引起。因此，通过给予本发明化合物对血管生长的抑制作用可以预防血管浸润，和可以预防或治疗涉及血管生成的疾病，例如视网膜血管化、糖尿病性视网膜病、老年黄斑变性等。
还包括在本发明范围的是治疗或预防涉及血管生成的非恶性疾病的方法，所述疾病包括但不限于：眼疾病(例如视网膜血管化、糖尿病性视网膜病和老龄化相关性黄斑变性)、动脉粥样硬化、关节炎、牛皮癣、肥胖症和阿尔茨海默病(Dredge等人，Expert Opin.Biol.Ther.(2002)2(8)：953-966)。在另一个实施方案中，治疗或预防涉及血管生成的疾病的方法包括：眼疾病(例如视网膜血管化、糖尿病性视网膜病和老龄化相关性黄斑变性)、动脉粥样硬化、关节炎和牛皮癣。
还包括在本发明范围的是治疗过度增殖性病症，例如再狭窄、炎症、自身免疫病和变态反应/哮喘的方法。
还包括在本发明范围内的是本发明化合物涂覆支架(stent)的用途，以及由此本发明化合物在涂覆支架上用于治疗和/或预防再狭窄的用途(WO03/032809)。
还包括在本发明范围内的是本发明化合物用于治疗和/或预防骨关节炎的用途(WO03/035048)。
还包括在本发明范围的是治疗高胰岛素血症的方法。
本发明化合物还可以用于制备用于治疗上述疾病，特别是癌症的药物。
在本发明的一个实施方案中，本发明化合物为选择性抑制剂，其抑制效力取决于PH结构域。在该实施方案中，所述化合物对缺乏PH结构域的截短Akt蛋白表现为体外抑制活性降低或无体外抑制活性。
在另一个实施方案中，本发明化合物选自Akt1选择性抑制剂、Akt2选择性抑制剂及Akt1和Akt2二者的选择性抑制剂。
在另一个实施方案中，本发明化合物选自Akt1选择性抑制剂、Akt2选择性抑制剂、Akt3选择性抑制剂及上述三种Akt同工酶中两种Akt的选择性抑制剂。
在另一个实施方案中，本发明化合物为所有三种Akt同工酶的选择性抑制剂，但不是经改造而删除PH结构域、删除铰链区或删除PH结构域和铰链区二者后的1种、2种或所有这些Akt同工酶的抑制剂。
本发明还涉及抑制Akt活性的方法，所述方法包括给药需要其的哺乳动物药用有效量的本发明化合物。
根据标准药物实践，本发明化合物可以单独或者以药物组合物的形式联用药学上可接受载体、赋形剂或稀释剂一起给药至哺乳动物，包括人类。所述化合物可以口服给药或胃肠外给药，包括静脉内、肌内、腹膜内、皮下、直肠内和局部等给药途径。
含有活性成分的药物组合物可为适于口服应用的形式，例如，片剂、糖锭剂、锭剂、水性混悬剂或油性混悬剂、分散粉剂或颗粒剂、乳剂、硬质胶囊剂或软质胶囊剂、糖浆剂或酏剂。用于口服的组合物可以根据本领域已知的任何制备药物组合物的方法进行制备，并且为了提供美观适口的药物制剂，所述组合物可以包含一种或多种选自甜味剂、矫味剂、着色剂和防腐剂的成分。片剂包含与适用于片剂制备的无毒可药用赋形剂混合的活性成分。所述赋形剂可以是，例如惰性稀释剂，比如碳酸钙、碳酸钠、乳糖、磷酸钙或磷酸钠；制粒剂和崩解剂，例如微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠、玉米淀粉或藻酸；粘合剂，例如淀粉、明胶、聚乙烯吡咯烷酮或阿拉伯树胶；以及润滑剂，例如硬脂酸镁、硬脂酸或滑石粉。可以不对片剂进行包衣，或者可以用已知技术对其进行包衣以掩盖药物的不适味道，或延迟其在胃肠道中的崩解和吸收，从而在较长时间内提供持续作用。例如，可以使用水溶性味道掩蔽材料，例如羟丙基甲基纤维素或羟丙基纤维素，或者，可以使用延时材料例如乙基纤维素、乙酸丁酸纤维素。
用于口服应用的制剂还可为硬明胶胶囊剂，其中活性成分与碳酸钙、磷酸钙或高岭土等惰性固体稀释剂进行混合；或者为软明胶胶囊剂，其中活性成分与聚乙二醇等水可溶性载体进行混合，或与花生油、液体石蜡或橄榄油等油性介质进行混合。
水性混悬剂含有与适于制备水性混悬剂的赋形剂混合的活性材料。所述赋形剂为悬浮剂、分散剂或湿润剂，悬浮剂例如羧甲基纤维素纳、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、黄芪树胶和阿拉伯树胶；分散剂或湿润剂可为天然磷脂，例如卵磷脂，或烯化氧与脂肪酸的缩合产物，例如聚氧乙烯硬脂酸酯，或环氧乙烷与长链脂肪醇的缩合产物，例如十七碳乙烯氧基十六醇，或环氧乙烷与脂肪酸和己糖醇衍生的偏酯的缩合产物，例如聚氧乙烯山梨糖醇单油酸酯，或环氧乙烷与脂肪酸和己糖醇酐衍生的偏酯的缩合产物，例如聚氧乙烯脱水山梨醇单油酸酯。水性混悬剂还可以包含一种或多种防腐剂(例如对羟基苯甲酸乙酯或对羟基苯甲酸正丙酯)、一种或多种着色剂、一种或多种矫味剂及一种或多种甜味剂(例如蔗糖、糖精或天冬甜素)。
油性混悬剂可以通过将活性成分悬浮在植物油(例如花生油、橄榄油、芝麻油或椰子油)或矿物油(例如液体石蜡)中得到制备。所述油性混悬剂可包含增稠剂，例如蜂蜡、固体石蜡或鲸蜡醇。还可以向其中加入比如如上所述的甜味剂和矫味剂以提供适口的口服制剂。这些组合物可通过加入抗氧化剂(例如丁羟茴醚或α-生育酚)予以保存。
通过向适于制备水性混悬剂的分散粉剂和颗粒剂中加入水，提供活性成分与分散剂或湿润剂、悬浮剂和一种或多种防腐剂的混合物。适宜的分散剂或湿润剂和悬浮剂如上述例证说明。其中还可存在另外的赋形剂，例如甜味剂、矫味剂和着色剂。这些组合物可通过加入抗氧化剂(例如抗坏血酸)予以保存。
本发明的药物组合物还可以是水包油乳剂的形式。所述油相可以为植物油(例如橄榄油或花生油)、矿物油(例如液体石蜡)或其混合物。合适的乳化剂可为天然存在的磷脂，例如大豆卵磷脂，也可为从脂肪酸和己糖醇酐衍生的酯或偏酯，例如脱水山梨糖醇单油酸酯，和所述偏酯与环氧乙烷的缩合产物，例如聚氧乙烯脱水山梨醇单油酸酯。所述乳剂还可包含甜味剂、矫味剂、防腐剂和抗氧化剂。
糖浆剂和酏剂可以利用甜味剂进行制备，例如甘油、丙二醇、山梨醇或蔗糖。所述制剂还可包含缓和剂、防腐剂、矫味剂和着色剂，以及抗氧化剂。
所述药物组合物可以是无菌注射水溶液剂的形式。可以使用的可接受的载体和溶剂包括水、林格氏溶液和等渗氯化钠溶液。
所述无菌注射制剂还可是无菌注射水包油微乳剂，其中活性成分溶解在油相中。例如，可以首先将活性成分溶于大豆油和卵磷脂的混合物中。然后，将油性溶液掺入水和甘油的混合物中，从而制备形成微乳剂。
所述注射液或注射微乳剂可以通过局部快速浓注引入到患者血管中。另外，还可以有利地以保持本发明化合物处于恒定的循环浓度的方式给药所述溶液剂或微乳剂。为了保持这种恒定浓度，可以使用恒定静脉递药装置。所述装置的实例为Deltec CADD-PLUSTM 5400型静脉泵。
所述药物组合物可以是用于肌内和皮下给药的无菌注射水性混悬剂或油性混悬剂。所述混悬剂可以根据本领域已知技术，使用上述适宜的分散剂或湿润剂及悬浮剂进行配制。所述无菌注射制剂还可以是无菌注射溶液剂或混悬剂，其中含有无毒胃肠外可接受的稀释剂或溶剂，例如1，3-丁二醇的溶液剂。另外，通常将无菌固定油用作溶剂或悬浮介质。为此目的，可使用任何品牌的固定油，包括合成甘油单酯或合成甘油二酯。另外，在注射剂制备中还可以使用脂肪酸例如油酸。
式A化合物还可以用于直肠内给药的栓剂形式进行给药。这些组合物可以通过将药物与合适的无刺激赋形剂混合得到制备，其中所述赋形剂在常温下为固体，但在直肠温度下为液体，因此可在直肠中熔化释放药物。这类材料包括可可脂、甘油化明胶、氢化植物油、各种分子量的聚乙二醇混合物和聚乙二醇脂肪酸酯。
对于局部使用，可以使用含有式A化合物的乳膏剂、软膏剂、凝胶剂、溶液剂或混悬剂等(对于本申请，局部使用应当包括漱口水和含漱剂)。
本发明化合物可以通过局部应用合适的鼻内载体和递药装置以鼻内形式给药，或可以通过应用本领域普通技术人员熟知的经皮皮肤贴剂形式经皮途径进行给药。在以经皮递药系统的形式给药时，剂量给药在整个给药方案中当然将是连续的而不是间歇性的。本发明化合物还可以栓剂给药，所述栓剂使用比如可可脂、甘油化明胶、氢化植物油、各种分子量的聚乙二醇的混合物和聚乙二醇脂肪酸酯的基料。
当将本发明的组合物给药至人类对象时，其日剂量通常将由处方医师进行确定，并且所述剂量通常将随着年龄、体重和个体患者的反应以及患者症状的严重程度而变化。
使用本发明化合物的剂量方案可以根据多种因素来选择，包括类型、物种、年龄、体重、性别和所治疗癌症的类型；所治疗癌症的严重程度(即阶段)；给药途径；患者的肾和肝脏功能；以及所用具体化合物或其盐。本领域医生或兽医可以容易地确定和规定治疗所需药物的有效量，以例如预防、抑制(完全或部分)或阻抑疾病的进展。例如，本发明化合物可以以最高达10,000mg的总日剂量给药。本发明化合物可以每日给药一次(QD)，或者分成多个日剂量例如每日两次(BID)，以及每日三次(TID)。本发明化合物可以以最高达10,000mg，例如2,000mg、3,000mg、4,000mg、6,000mg、8,000mg或10,000mg的总日剂量给药，所述剂量可以作为每日一次剂量施用，或者可以分成如上所述的多个日剂量来施用。
例如，本发明化合物可以以最高达1,000mg的总日剂量施用。本发明化合物可以每日给药一次(QD)，或者分成多个日剂量例如每日两次(BID)，以及每日三次(TID)。本发明化合物可以以最高达1,000mg，例如200mg、300mg、400mg、600mg、800mg或1,000mg的总日剂量给药，所述剂量可以作为每日一次剂量施用，或者可以分成如上所述的多个日剂量来施用。
另外，给药可以是连续的(即每天给药)或间歇的。本文使用的术语“间歇的”或“间歇地”是指以规则或不规则间隔停止和开始。例如，本发明化合物的间歇给药可以是每周给药1-6天，或者其可以是指周期性给药(例如每天给药，连续2-8周，然后是最多1周的不给药的休息期)或者其是指隔天给药。
另外，本发明化合物可根据上面描述的任何方案持续给药几周，然后是休息期。例如，本发明化合物可根据上面描述的任一方案持续给药2-8周，然后是1周的休息期，或者以100-500mg剂量每天给药两次，1周3-5天。在另外的特定实施方案中，本发明化合物可以每天给药三次，持续2周，然后是1周的休息期。
本发明化合物的任何一种或多种特定剂量和剂量给药方案还可适用于要在联合治疗中使用的任何一种或多种治疗剂(下文称为“第二治疗剂”)。
另外，该第二治疗剂的特定剂量的和剂量给药方案可以进一步改变，并且最适剂量、剂量给药方案和给药途径将根据所用的特定的第二治疗剂为基础进行确定。
理所当然的是，本发明化合物的给药途径与第二治疗剂的给药途径无关。在一个实施方案中，本发明化合物的给药是口服给药。在另一个实施方案中，本发明化合物的给药是静脉内给药。因此，根据这些实施方案，本发明化合物的给药是口服或静脉内给药，第二治疗剂的给药可以是口服、肠胃外、腹膜内、静脉内、动脉内、透皮、舌下、肌肉内、直肠、经口颊、鼻内、脂质体方式、通过吸入方式、阴道、眼内、通过导管或支架局部递送、皮下、脂肪内、关节内、鞘内或缓慢释放剂型给药途径。
另外，本发明化合物和第二治疗剂可以通过相同的给药形式给药，即，两种药物通过例如口服或IV给药。然而，还处在本发明范围内的是通过一种给药方式如口服途径给药本发明化合物，通过另一种给药方式如IV或在上文描述的任何其它的给药方式给药第二治疗剂。
第一治疗过程(本发明化合物的给药)可以在第二治疗过程(即第二治疗剂的给药)之前进行，在使用第二治疗剂的治疗之后进行，与第二治疗剂同时进行治疗，或者它们的组合。例如，可以确定本发明化合物的总的疗程。第二治疗剂可在开始用本发明化合物治疗之前给药，或者在使用本发明化合物治疗后给药。另外，抗癌治疗可以在本发明化合物的给药期间进行，但是无需在本发明化合物的整个治疗期间内进行。
本发明化合物还可用于与治疗剂、化疗剂和抗癌剂联合。本发明公开的化合物与治疗剂、化疗剂和抗癌剂的联合在本发明的范围内。这些药物可以在V.T.Devita和S.Hellman(编辑)的Cancer Principles andPractice of Oncology，第六版(February 15，2001)，Lippincott Williams &Wilkins Publishers中找到。本领域技术人员能够根据所涉及的药物的特性和癌症辨别哪种药物联合将是有用的。这些药物包括以下：雌激素受体调节剂、雄激素受体调节剂、类视黄醇受体调节剂、细胞毒剂/细胞抑制剂、抗增殖药、异戊烯基-蛋白转移酶抑制剂、HMG-CoA还原酶抑制剂和其他血管生成抑制剂、HIV蛋白酶抑制剂、逆转录酶抑制剂、细胞增殖和存活信号转导抑制剂、双膦酸盐类、芳香酶抑制剂、siRNA治疗剂、γ-分泌酶抑制剂、干扰受体酪氨酸激酶(RTKs)的药物和干扰细胞周期关卡的药物。本发明化合物当与放射治疗共同给予时特别有用。
“雌激素受体调节剂”是指不论通过何种机制干扰或抑制雌激素与受体结合的化合物。雌激素受体调节剂的实例包括但不限于，他莫昔芬、雷洛昔芬、艾多昔芬、LY353381、LY117081、托瑞米芬、氟维司群、4-[7-(2，2-二甲基-1-氧代丙氧基-4-甲基-2-[4-[2-(1-哌啶基)乙氧基]苯基]-2H-1-苯并吡喃-3-基)]-苯基2，2-二甲基丙酸酯、4，4’-二羟基二苯甲酮-2，4-二硝基苯腙和SH646。
“雄激素受体调节剂”是指不论通过何种机制干扰或抑制雄激素与受体结合的化合物。雄激素受体调节剂的实例包括非那雄胺和其它5α-还原酶抑制剂、尼鲁米特、氟他胺、比卡鲁胺、利阿唑和醋酸阿比特龙。
“类视黄醇受体调节剂”是指不论通过何种机制干扰或抑制类视黄醇与受体结合的化合物。这些类视黄醇受体调节剂的实例包括贝沙罗汀、维A酸、13-顺-视黄酸、9-顺-视黄酸、α-二氟甲基鸟氨酸、ILX23-7553、反-N-(4’-羟基苯基)视黄酰胺和N-4-羧基苯基视黄酰胺。
“细胞毒剂/细胞抑制剂”是指主要通过直接干扰细胞功能引起细胞死亡或抑制细胞增殖、或者抑制或干扰细胞减数分裂的化合物，包括烷化剂、肿瘤坏死因子、嵌入剂、低氧可激活化合物、微管抑制剂/微管稳定剂、有丝分裂驱动蛋白抑制剂、组蛋白脱乙酰基酶抑制剂、参与有丝分裂进程的激酶抑制剂、参与生长因子和细胞因子信号转导途径的激酶抑制剂、抗代谢药、生物反应调节剂、激素/抗激素治疗药物、造血生长因子、单克隆抗体靶向治疗剂、拓扑异构酶抑制剂、蛋白体抑制剂、遍在蛋白连接酶抑制剂和aurora激酶抑制剂。
细胞毒剂/细胞抑制剂的实例包括但不限于sertenef、恶液质素(cachectin)、异环磷酰胺、他索纳明、氯尼达明、卡铂、六甲蜜胺、泼尼莫司汀、二溴卫矛醇、雷莫司汀、福莫司汀、奈达铂、奥沙利铂、替莫唑胺、庚铂、雌莫司汀、托西酸英丙舒凡、曲磷胺、尼莫司汀、二溴螺氯铵、嘌嘧替派、洛铂、沙铂、泊非霉素(profiromycin)、顺铂、依罗夫文、右异环磷酰胺、顺-胺二氯(2-甲基-吡啶)合铂、苄基鸟嘌呤、葡磷酰胺、GPX100、四氯化(反式，反式，反式)-双-μ-(己烷-1，6-二胺)-μ-[二胺-铂(II)]双[二胺(氯)铂(II)]、二吖丙啶基精胺、三氧化二砷、1-(11-十二烷基氨基-10-羟基十一烷基)-3，7-二甲基黄嘌呤、佐柔比星、伊达比星、柔红霉素、比生群、米托蒽醌、吡柔比星、吡萘非特、戊柔比星、氨柔比星、抗瘤酮、3’-脱氨基-3’-吗啉代-13-脱氧代-10-羟基洋红霉素、脂质体蒽环霉素(annamycin)、加柔比星、依利奈法德、MEN10755、4-脱甲氧基-3-脱氨基-3-吖丙啶基-4-甲基磺酰基-柔红霉素(参见WO 00/50032)、Raf激酶抑制剂(例如Bay43-9006)和mTOR抑制剂(例如Wyeth公司的CCI-779)。
低氧可激活化合物的一个实例为替拉扎明。
蛋白体抑制剂的实例包括但不限于乳胞素和MLN-341(Velcade)。
微管抑制剂/微管稳定剂的实例包括紫杉醇、硫酸长春地辛、3’，4’-二脱氢-4’-脱氧-8’-去甲长春碱、多西他赛、根霉素、多拉司他汀、依西酸米伏布林、奥利他汀(auristatin)、西马多丁、RPR109881、BMS184476、长春氟宁、缩酚酸肽类抗肿瘤药(cryptophycin)、2，3，4，5，6-五氟-N-(3-氟-4-甲氧基苯基)苯磺酰胺、脱水长春碱、N，N-二甲基-L-缬氨酰-L-缬氨酰-N-甲基-L-缬氨酰-L-脯氨酰-L-脯氨酸-叔丁酰胺、TDX258、埃博霉素(参见例如美国专利6,284,781和6,288,237)和BMS188797。在一个实施方案中，微管抑制剂/微管稳定剂不包括大环内酯类抗肿瘤药。
拓扑异构酶抑制剂的一些实例为托泊替康、hycaptamine、伊立替康、卢比替康、6-乙氧基丙酰基-3’，4’-O-外-亚苄基-教酒菌素、9-甲氧基-N，N-二甲基-5-硝基吡唑并[3，4，5-kl]吖啶-2-(6H)丙酰胺、1-氨基-9-乙基-5-氟-2，3-二氢-9-羟基-4-甲基-1H，12H-苯并[de]呋喃并[3’，4’:b，7]-中氮茚并[1，2b]喹啉-10，13(9H，15H)二酮、勒托替康、7-[2-(N-异丙氨基)乙基]-(20S)喜树碱、BNP1350、BNPI1100、BN80915、BN80942、磷酸依托泊苷、替尼泊苷、索布佐生、2’-二甲氨基-2’-脱氧-依托泊苷、GL331、N-[2-(二甲氨基)乙基]-9-羟基-5，6-二甲基-6H-吡啶并[4，3-b]咔唑-1-甲酰胺、asulacrine、(5a，5aB，8aa，9b)-9-[2-[N-[2-(二甲氨基)乙基]-N-甲氨基]乙基]-5-[4-羟基-3，5-二甲氧基苯基]-5，5a，6，8，8a，9-六氢呋喃并(3’，4’:6，7)萘并(2，3-d)-1，3-二氧杂环戊烯-6-酮、2，3-(亚甲基二氧基)-5-甲基-7-羟基-8-甲氧基苯并[c]-菲啶鎓、6，9-双[(2-氨基乙基)氨基]苯并[g]异喹啉-5，10-二酮、5-(3-氨基丙氨基)-7，10-二羟基-2-(2-羟乙基氨基甲基)-6H-吡唑并[4，5，1-de]吖啶-6-酮、N-[1-[2(二乙基氨基)乙基氨基]-7-甲氧基-9-氧代-9H-噻吨-4-基甲基]甲酰胺、N-(2-(二甲氨基)乙基)吖啶-4-甲酰胺、6-[[2-(二甲基氨基)乙基]氨基]-3-羟基-7H-茚并[2，1-c]喹啉-7-酮和地美司钠。
有丝分裂驱动蛋白抑制剂的实例，特别是人类有丝分裂驱动蛋白KSP的实例描述于以下PCT公布文本中：WO03/039460、WO03/050064、WO03/050122、WO03/049527、WO03/049679、WO03/049678、WO04/039774、WO03/079973、WO03/099211、WO03/105855、WO03/106417、WO04/037171、WO04/058148、WO04/058700、WO04/126699、WO05/018638、WO05/019206、WO05/019205、WO05/018547、WO05/017190、US2005/0176776。在一个实施方案中，有丝分裂驱动蛋白的抑制剂包括但不限于KSP抑制剂、MKLP1抑制剂、CENP-E抑制剂、MCAK抑制剂和Rab6-KIFL抑制剂。
“组蛋白脱乙酰基酶抑制剂”的实例包括但不限于SAHA、TSA、oxamflatin、PXD101、MG98和scriptaid。进一步涉及的其它组蛋白脱乙酰基酶抑制剂可以发现于以下文献中：Miller，T.A.等J.Med.Chem.46(24)：5097-5116(2003)。
“参与有丝分裂进程的激酶抑制剂”包括但不限于aurora激酶抑制剂、Polo样激酶抑制剂(PLK；特别是PLK-1抑制剂)、bub-1抑制剂和bub-R1抑制剂。“aurora激酶抑制剂”的例子为VX-680。
“抗增殖药”包括反义RNA寡核苷酸和反义DNA寡核苷酸，比如G3139、ODN698、RVASKRAS、GEM231和INX3001，还包括抗代谢药，比如依诺他滨、卡莫氟、替加氟、喷司他丁、去氧氟尿苷、三甲曲沙、氟达拉滨、卡培他滨、加洛他滨、阿糖胞苷十八烷基磷酸钠、氨磷汀(fosteabine)钠水合物、雷替曲塞、paltitrexid、乙嘧替氟、噻唑呋啉、地西他滨、诺拉曲塞、培美曲塞、内扎拉滨(nelzarabine)、2’-脱氧-2’-亚甲基胞苷、2’-氟亚甲基-2’-脱氧胞苷、N-[5-(2，3-二氢-苯并呋喃基)磺酰基]-N’-(3，4-二氯苯基)脲、N6-[4-脱氧-4-[N2-[2(E)，4(E)-十四烷二烯酰]甘氨酰氨基]-L-甘油基-B-L-甘露糖基-吡喃庚糖基]腺嘌呤、阿吡利丁(aplidine)、海鞘素(ecteinascidin)、曲沙他滨、4-[2-氨基-4-氧代-4，6，7，8-四氢-3H-嘧啶并[5，4-b][1，4]噻嗪-6-基-(S)-乙基]-2，5-噻吩甲酰基-L-谷氨酸、氨蝶呤、5-氟尿嘧啶、阿拉诺新、乙酸11-乙酰基-8-(氨甲酰基氧基甲基)-4-甲酰基-6-甲氧基-14-氧杂-1，11-二氮杂四环(7.4.1.0.0)-十四碳-2，4，6-三烯-9-基酯、八氢吲嗪三醇(swainsonine)、洛美曲索、右雷佐生、甲硫氨酸酶、2’-氰基-2’-脱氧-N4-棕榈酰-1-B-D-阿糖呋喃糖基胞嘧啶、3-氨基吡啶-2-甲醛缩氨基硫脲和曲妥单抗。
单克隆抗体靶向治疗药物的实例包括那些具有连接癌细胞特异性单克隆抗体或靶细胞特异性单克隆抗体的细胞毒剂或放射性同位素的治疗剂。其实例包括Bexxar。
“HMG-CoA还原酶抑制剂”是指3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶抑制剂。可以使用的HMG-CoA还原酶抑制剂的实例包括但不限于洛伐他汀(MEVACOR
Figure G2007800509679D00481
，参见美国专利4,231,938、4,294,926和4,319,039)、辛伐他汀(ZOCOR
Figure G2007800509679D00482
，参见美国专利4,444,784、4,820,850和4,916,239)、普伐他汀(PRAVACHOL
Figure G2007800509679D00483
，参见美国专利4,346,227、4,537,859、4,410,629、5,030,447和5,180,589)、氟伐他汀(LESCOL
Figure G2007800509679D00484
，参见美国专利5,354,772、4,911,165、4,929,437、5,189,164、5,118,853、5,290,946和5,356,896)、阿托伐他汀(LIPITOR，参见美国专利5,273,995、4,681,893、5,489,691和5,342,952)以及西立伐他汀(亦称雷伐它汀和BAYCHOL
Figure G2007800509679D00486
，参见美国专利5,177,080)。M.Yalpani，“Cholesterol Lowering Drugs”，Chemistry & Industry，第85-89页(1996年2月5日)中的第87页，以及美国专利4,782,084和4,885,314中描述了这些HMG-CoA还原酶抑制剂和其它可用于本发明使用方法的HMG-CoA还原酶抑制剂的结构式。本文所用的术语HMG-CoA还原酶抑制剂包括所有可药用内酯和开链酸(即其内酯环打开形成游离酸)的形式，还包括具有HMG-CoA还原酶抑制活性的化合物的盐和酯的形式，因而此类盐、酯、开链酸和内酯形式的用途都包括在本发明的范围内。
“异戊烯基-蛋白转移酶抑制剂”是指抑制异戊烯基-蛋白转移酶中任何一种或任何组合的化合物，包括法尼基蛋白转移酶(FPTase)、香叶基香叶基蛋白转移酶I型(GGPTase-I)和香叶基香叶基蛋白转移酶II型(GGPTase-II，亦称Rab GGPTase)。
异戊烯基-蛋白转移酶抑制剂的实例可发现于以下公开文本和专利中：WO 96/30343、WO 97/18813、WO 97/21701、WO 97/23478、WO97/38665、WO 98/28980、WO 98/29119、WO 95/32987、美国专利5,420,245、美国专利5,523,430、美国专利5,532,359、美国专利5,510,510、美国专利5,589,485、美国专利5,602,098、欧洲专利公布号0 618 221、欧洲专利公布号0 675 112、欧洲专利公布号0 604 181、欧洲专利公布号0 696 593、WO 94/19357、WO 95/08542、WO 95/11917、WO 95/12612、WO 95/12572、WO 95/10514、美国专利5,661,152、WO95/10515、WO 95/10516、WO 95/24612、WO 95/34535、WO 95/25086、WO 96/05529、WO 96/06138、WO 96/06193、WO 96/16443、WO96/21701、WO 96/21456、WO 96/22278、WO 96/24611、WO 96/24612、WO 96/05168、WO 96/05169、WO 96/00736、美国专利5,571,792、WO96/17861、WO 96/33159、WO 96/34850、WO 96/34851、WO 96/30017、WO 96/30018、WO 96/30362、WO 96/30363、WO 96/31111、WO96/31477、WO 96/31478、WO 96/31501、WO 97/00252、WO 97/03047、WO 97/03050、WO 97/04785、WO 97/02920、WO 97/17070、WO97/23478、WO 97/26246、WO 97/30053、WO 97/44350、WO 98/02436和美国专利5,532,359。异戊烯基-蛋白转移酶抑制剂对血管生成的作用的实例参见European J.of Caner，第35卷，第9期，第1394-1401页(1999年)。
“血管生成抑制剂”是指不论通过何种机制抑制新血管形成的化合物。血管生成抑制剂的实例包括但不限于：酪氨酸激酶抑制剂(例如酪氨酸激酶受体Flt-1(VEGFR1)和Flk-1/KDR(VEGFR2)抑制剂)、表皮衍生生长因子抑制剂、成纤维细胞衍生生长因子抑制剂或血小板衍生生长因子抑制剂、MMP(基质金属蛋白酶)抑制剂、整联蛋白阻断剂、干扰素-α、白介素-12、聚硫酸戊聚糖、环加氧酶抑制剂(包括非甾族抗炎剂(NSAID)，比如阿斯匹林和布洛芬，以及选择性环氧加酶-2抑制剂，比如西利考昔和罗非考昔)(PNAS，第89卷，第7384页(1992年)；JNCI，第69卷，第475页(1982年)；Arch.Opthalmol.，第108卷，第573页(1990年)；Anat.Rec.，第238卷，第68页(1994年)；FEBS Letters，第372卷，第83页(1995年)；Clin，Orthop.第313卷，第76页(1995年)；J.Mol.Endocrinol.，第16卷，第107页(1996年)；Jpn.J.Pharmacol.，第75卷，第105页(1997年)；Cancer Res.，第57卷，第1625页(1997年)；Cell，第93卷，第705页(1998年)；Intl.J.Mol.Med.，第2卷，第715页(1998页)；J.Biol..Chem.，第274，第9116页(1999年))、甾族抗炎药(例如皮质甾类、盐皮质甾类固醇、地塞米松、泼尼松、泼尼松龙、甲泼尼龙、培他米松)、羧基酰胺基三唑、考布他汀A-4、角鲨胺、6-O-氯乙酰-羰基-烟曲霉醇、沙利度胺、血管生长抑素、肌原蛋白-1、血管紧张素II拮抗剂(参见Fernandez等，J.Lab.Clin.Med.105：141-145(1985))和抗VEGF抗体(参见Nature Biotechnology，第17卷，第963-968页(1999年10月)；Kim等，Nature，362，841-844(1993)；WO 00/44777和WO 00/61186)。
其它调节或抑制血管生成且也可以与本发明化合物联合使用的治疗剂，包括调节或抑制凝固系统和纤维蛋白溶解系统的试剂(参见Clin.Chem.La.Med.38：679-692(2000)中的综述)。所述调节或抑制凝固途径和纤维蛋白溶解途径的试剂的实例包括但不限于：肝素(参见Thromb.Haemost.80：10-23(1998))、低分子量肝素和羧肽酶U抑制剂(亦称活性凝血酶激活的纤维蛋白溶解抑制剂[TAFIa]抑制剂)(参见ThrombosisRes.101：329-354(2001))。TAFIa抑制剂已经在美国序列号60/310,927(2001年8月8日提交)和60/349,925(2002年1月18日提交)中进行了描述。
“干扰细胞周期关卡的药物”是指抑制转导细胞周期关卡信号的蛋白激酶，因而使癌细胞对DNA损伤剂敏感。所述试剂包括ATR抑制剂、ATM抑制剂、CHK11和CHK12激酶抑制剂、及cdk和cdc激酶抑制剂，其中的具体实例为7-羟基星孢素、黄酮类抗肿瘤药(flavopiridol)、CYC202(Cyclacel)和BMS-387032。
“干涉受体酪氨酸激酶(RTK)的药物”是指抑制RTKs并因此抑制参与肿瘤生成和肿块进展的机构的化合物。此类药物包括c-Kit、Eph、PDGF、Flt3和c-Met的抑制剂。进一步的药物包括如Bume-Jensen和Hunter，Nature，411：355-365，2001所述的RTK抑制剂。
“细胞增殖和存活信号转导途径抑制剂”是指抑制细胞表面受体信号转导级联系统下游的化合物。此类抑制剂包括丝氨酸/苏氨酸激酶抑制剂(包括但不限于例如在WO 02/083064、WO 02/083139、WO02/083140、US 2004-0116432、WO 02/083138、US 2004-0102360、WO03/086404、WO 03/086279、WO 03/086394、WO 03/084473、WO03/086403、WO 2004/041162、WO 2004/096131、WO 2004/096129、WO 2004/096135、WO 2004/096130、WO 2005/100356、WO2005/100344、US 2005/029941、US 2005/44294、US 2005/43361、60/734188、60/652737和60/670469中描述的Akt抑制剂)、Raf激酶抑制剂(例如BAY-43-9006)、MEK抑制剂(例如CI-1040和PD-098059)、mTOR抑制剂(例如Wyeth CCI-779)和PI3K抑制剂(例如LY294002)。
如上所述，与NSAID的联合涉及作为有效的COX-2抑制剂的NSAID的应用。对于本说明书，如果通过细胞或微粒体测定测得一NSAID对COX-2抑制的IC50为1μM或更低，则其是有效的。
本发明还包括与作为选择性的COX-2抑制剂的NSAID的联合。对于本说明书，当NSAID具有抑制COX-2比抑制COX-1超过至少100倍的特异性时，该NSAID被定义为选择性的COX-2抑制剂，该特异性可通过细胞或微粒体测定，测出COX-2的IC50与COX-1的IC50之比来评价。此类化合物包括但不限于以下文献所公开的化合物：美国专利5,474,995、美国专利5,861,419、美国专利6,001,843、美国专利6,020,343、美国专利5,409,944、美国专利5,436,265、美国专利5,536,752、美国专利5,550,142、美国专利5,604,260、美国专利5,698,584、美国专利5,710,140、WO 94/15932、美国专利5,344,991、美国专利5,134,142、美国专利5,380,738、美国专利5,393,790、美国专利5,466,823、美国专利5,633,272和美国专利5,932,598，它们都在此引入作为参考。
特别可用于本发明治疗方法中的COX-2抑制剂为：3-苯基-4-(4-(甲磺酰基)苯基)-2-(5H)-呋喃酮；和5-氯-3-(4-甲磺酰基)苯基-2-(2-甲基-5-吡啶基)吡啶；或者其可药用盐。
被描述为特异性COX-2抑制剂并因而用于本发明中的化合物包括但不限于：帕瑞考昔、BEXTRA
Figure G2007800509679D00511
和CELEBREX
Figure G2007800509679D00512
或者其可药用盐。
血管生成抑制剂的其它实例包括但不限于：内皮生长抑素(endostatin)、ukrain、豹蛙酶、IM862、(氯乙酰基)氨基甲酸5-甲氧基-4-[2-甲基-3-(3-甲基-2-丁烯基)环氧乙烷基]-1-氧杂螺[2，5]辛-6-基酯、乙酰dinanaline、5-氨基-1-[[3，5-二氯-4-(4-氯苯甲酰基)苯基]甲基]-1H-1，2，3-三唑-4-甲酰胺、CM 101、角鲨胺、考布他汀、RPI4610、NX31838、硫酸化磷酸甘露戊糖、7，7-(羰基-二[亚氨基-N-甲基-4，2-吡咯并羰基亚氨基[N-甲基-4，2-吡咯]-羰基亚氨基]-双-(1，3-萘二磺酸酯)和3-[(2，4-二甲基吡咯-5-基)亚甲基]-2-二氢吲哚酮(SU5416)。
以上所应用的“整联蛋白抑制剂”是指选择性地拮抗、抑制或对抗生理配体与ανβ3整联蛋白结合的化合物；选择性地拮抗、抑制或对抗生理配体与ανβ5整联蛋白结合的化合物；拮抗、抑制或对抗生理配体与ανβ3整联蛋白和ανβ5整联蛋白两者结合的化合物；以及拮抗、抑制或对抗毛细血管内皮细胞表达的特殊整联蛋白活性的化合物。该术语还指ανβ6、ανβ8、α1β1、α2β1、α5β1、α6β1和α6β4整联蛋白的拮抗剂。该术语还指ανβ3、ανβ5、ανβ6、ανβ8、α1β1、α2β1、α5β1、α6β1和α6β4整联蛋白中任何组合的拮抗剂。
酪氨酸激酶抑制剂的一些具体实例包括：N-(三氟甲基苯基)-5-甲基异噁唑-4-甲酰胺、3-[(2，4-二甲基吡咯-5-基)亚甲基(methylidenyl)]二氢吲哚-2-酮、17-(烯丙基氨基)-17-去甲氧格尔德霉素、4-(3-氯-4-氟苯氨基)-7-甲氧-6-[3-(4-吗啉基)丙氧基]喹唑啉、N-(3-乙炔基苯基)-6，7-双(2-甲氧基乙氧基)-4-喹唑啉胺、BIBX1382、2，3，9，10，11，12-六氢-10-(羟甲基)-10-羟基-9-甲基-9，12-环氧-1H-二吲哚并[1，2，3-fg:3’，2’，1’-kl]吡咯并[3，4-i][1，6]苯并二吖辛因-1-酮、SH268、金雀异黄素、STI571、CEP2563、4-(3-氯苯基氨基)-5，6-二甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶甲烷磺酸酯、4-(3-溴-4-羟苯基)氨基-6，7-二甲氧基喹唑啉、4-(4’-羟苯基)氨基-6，7-二甲氧基喹唑啉、SU6668、STI571A、N-4-氯苯基-4-(4-吡啶基甲基)-1-酞嗪胺和EMD121974。
与除抗癌化合物外的其它化合物的联合也包括在本发明的方法内。例如，本申请要求保护的化合物与PPAR-γ激动剂和PPAR-δ激动剂的联合可用于治疗某些恶性疾病。PPAR-γ和PPAR-δ是核过氧化物酶体增殖物激活受体γ和核过氧化物酶体增殖物激活受体δ。PPAR-γ在内皮细胞上的表达及其参与血管生成已经在文献中得到了报道(参见J.Cardiovasc.Pharmacol.1998；31：909-913；J.Biol.Chem.1999；274：9116-9121；Invest.Ophthalmol Vis.Sci.2000；41：2309-2317)。最近，有报告说明PPAR-γ激动剂在体外抑制对VEGF的血管生成反应；在小鼠中，马来酸曲格列酮和马来酸罗格列酮两者都抑制视网膜新血管形成的发育(Arch.Ophthamol.2001；119：709-717)。PPAR-γ激动剂和PPAR-γ/α激动剂的实例包括但不限于噻唑烷二酮类(例如DRF2725、CS-011、曲格列酮、罗格列酮和吡格列酮)、非诺贝特、吉非贝齐、氯贝丁酯、GW2570、SB219994、AR-H039242、JTT-501、MCC-555、GW2331、GW409544、NN2344、KRP297、NP0110、DRF4158、NN622、GI262570、PNU182716、DRF552926、2-[(5，7-二丙基-3-三氟甲基-1，2-苯基异噁唑-6-基)氧基]-2-甲基丙酸(公开于USSN 09/782,856中)和2(R)-7-(3-(2-氯-4-(4-氟苯氧基)苯氧基)丙氧基)-2-乙基苯并二氢吡喃-2-甲酸(公开于USSN 60/235,708和60/244,697中)。
本发明的另一个实施方案为现公开的化合物与用于治疗癌症的基因治疗的联合应用。有关治疗癌症的基因策略的概况参见Hall等(Am.J.Hum.Genet.61：785-789，1997)和Kufe等(Cancer Medicine，第五版，第876-889页，BC Decker，Hamilton 2000)。基因治疗可用于传递任何肿瘤抑制基因。此类基因的实例包括但不限于p53，p53可通过重组病毒介导的基因转移进行传递(参见，例如美国专利6,069,134)、uPA/uPAR拮抗剂(“Adenovirus-Mediated Delivery of a uPA/uPAR AntagonistSuppresses Angiogenesis-Dependent Tumor Growth and Dissemination inMice”，Gene Therapy，1998年8月，5(8)：1105-13)和干扰素γ(J.Immunol.2000；164：217-222)。
本发明化合物还可以与固有多药耐药性(MDR)抑制剂，特别是与转运蛋白高水平表达有关的MDR抑制剂联合用药。此类MDR抑制剂包括p-糖蛋白(P-gp)的抑制剂，例如LY335979、XR9576、OC 144-093、R101922、VX853和PSC833(伐司朴达)。
本发明化合物可与止吐药联合使用从而治疗恶心或呕吐，包括急性呕吐、延迟呕吐、晚期呕吐和先期呕吐，所述恶心或者呕吐可能是因单独使用本发明化合物或与放疗一起使用而引起。为了预防或治疗呕吐，本发明化合物可与其它止吐药联合使用，特别是与下述止吐药联合使用：神经激肽-1受体拮抗剂；5HT3受体拮抗剂，例如昂丹司琼、格拉司琼、托烷司琼和扎托司琼；GABAB受体激动剂，例如巴氯芬；皮质甾类，例如Decadron(地塞米松)、Kenalog、Aristocort、Nasalide、Preferid、Benecorten或其它公开于美国专利2,789,118、2,990,401、3,048,581、3,126,375、3,929,768、3,996,359、3,928,326和3,749,712中的皮质甾类，例如吩噻嗪类(如丙氯拉嗪、氟奋乃静、硫利达嗪和美索达嗪)、甲氧氯普胺或屈大麻酚等抗多巴胺能药。在另一个实施方案中，与选自神经激肽-1受体拮抗剂、5HT3受体拮抗剂和皮质甾类等止吐药的联合疗法得到了公开，其用于治疗或预防由于给予本发明化合物而引起的呕吐。
与本发明化合物联用的神经激肽-1受体拮抗剂在以下专利中得到了全面公开，例如，U.S.专利Nos.5,162,339、5,232,929、5,242,930、5,373,003、5,387,595、5,459,270、5,494,926、5,496,833、5,637,699、5,719,147；欧洲专利公开Nos.EP 0 360 390、0 394 989、0 428 434、0 429366、0 430 771、0 436 334、0 443 132、0 482 539、0 498 069、0 499 313、0 512 901、0 512 902、0 514 273、0 514 274、0 514 275、0 514 276、0515 681、0 517 589、0 520 555、0 522 808、0 528 495、0 532 456、0 533280、0 536 817、0 545 478、0 558 156、0 577 394、0 585 913，0 590 152、0 599 538、0 610 793、0 634 402、0 686 629、0 693 489、0 694 535、0 699 655、0 699 674、0 707 006、0 708 101、0 709 375、0 709 376、0 714 891、0 723 959、0 733 632和0 776 893；PCT国际专利公开Nos.WO 90/05525、90/05729、91/09844、91/18899、92/01688、92/06079、92/12151、92/15585、92/17449、92/20661、92/20676、92/21677、92/22569、93/00330、93/00331、93/01159、93/01165、93/01169、93/01170、93/06099、93/09116、93/10073、93/14084、93/14113、93/18023、93/19064、93/21155、93/21181、93/23380、93/24465、94/00440、94/01402、94/02461、94/02595、94/03429、94/03445、94/04494、94/04496、94/05625、94/07843、94/08997、94/10165、94/10167、94/10168、94/10170、94/11368、94/13639、94/13663、94/14767、94/15903、94/19320、94/19323、94/20500、94/26735、94/26740、94/29309、95/02595、95/04040、95/04042、95/06645、95/07886、95/07908、95/08549、95/11880、95/14017、95/15311、95/16679、95/17382、95/18124、95/18129、95/19344、95/20575、95/21819、95/22525、95/23798、95/26338、95/28418、95/30674、95/30687、95/33744、96/05181、96/05193、96/05203、96/06094、96/07649、96/10562、96/16939、96/18643、96/20197、96/21661、96/29304、96/29317、96/29326、96/29328、96/31214、96/32385、96/37489、97/01553、97/01554、97/03066、97/08144、97/14671、97/17362、97/18206、97/19084、97/19942和97/21702；以及英国专利公开Nos.2 266 529、2268 931、2 269 170、2 269 590、2 271 774、2 292 144、2 293 168、2 293 169和2 302 689。所述化合物的制备完全公开在上述专利和公布说明书中，它们都在此引入作为参考。
在一种实施方案中，用于与本发明化合物联用的神经激肽-1受体拮抗剂选自：2-(R)-(1-(R)-(3，5-双(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟苯基)-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑并)甲基)吗啉，或者其可药用盐，有关内容描述于美国专利5,719,147中。
本发明化合物也可与用于治疗贫血的治疗剂一起给药。所述贫血治疗剂为，例如，连续红血球生成受体激活剂(例如阿法依泊汀)。
本发明化合物还可与用于治疗中性粒细胞减少症的治疗剂一起给药。所述中性粒细胞减少症的治疗剂为，例如，调节嗜中性粒细胞的形成和功能的造血生长因子(比如，人类粒细胞集落刺激因子(G-CSF))。G-CSF的实例包括非格司亭。
本发明化合物还可与例如左旋咪唑、异丙肌苷和日达仙(Zadaxin)的免疫增强药一起给药。
本发明化合物还可用于与P450抑制剂联合治疗或预防癌症，所述P450抑制剂包括：异型生物质药物(xenobiotics)、奎尼丁、酪胺、酮康唑、睾酮、奎宁、甲吡酮(methyrapone)、咖啡因、苯乙肼、多柔比星、醋竹桃霉素、环苯扎林、红霉素、可卡因、呋拉茶碱(furafyline)、西眯替丁、右美沙芬、利托那韦、茚地那韦、安普那韦、地尔硫
Figure G2007800509679D00551
、特非那定、维拉帕米、氢化可的松、伊曲康唑、米贝拉地尔、奈法唑酮和奈非那韦。
本发明化合物还可用于与PgP和/或BCRP抑制剂联合治疗或预防癌症，Pgp和/或BCRP抑制剂包括：环孢菌素A、PSC833、GF120918、克列莫佛EL(cremophorEL)、烟曲霉毒素C、Ko132、Ko134、易瑞沙、甲磺酸伊马替尼、EKI-785、C11033、新生霉素、己烯雌酚、他莫昔芬、利血平(resperpine)、VX-710、色丙他汀(tryprostatin)A、类黄酮、利托那韦、沙奎那韦、奈非那韦、奥美拉唑、奎尼丁、维拉帕米、特非那定、酮康唑、硝苯地平、FK506、胺碘酮、XR9576、茚地那韦、安普那韦、氢化可的松、睾酮、LY335979、OC144-093、红霉素、长春新碱、地高辛和他林洛尔。
本发明化合物还可以与双膦酸盐类(理解为包括双膦酸盐类、二膦酸盐、双膦酸和二膦酸)联合用于治疗或预防癌症，包括骨癌。双膦酸盐的实例包括但不限于：依替膦酸盐(Didronel)、帕米膦酸盐(Aredia)、阿仑膦酸盐(Fosamax)、利塞膦酸盐(Actonel)、唑来膦酸盐(Zometa)、伊班膦酸盐(ibandronate)(Boniva)、伊卡膦酸盐(incadronate)或西马膦酸盐(cimadronate)、氯膦酸盐、EB-1053、米诺膦酸盐(minodronate)、奈立膦酸盐(neridronate)、吡膦酸盐(piridronate)及替鲁膦酸盐(tiludronate)，包括其任何及所有药学上可接受的盐、衍生物、水合物及它们的混合物。
本发明化合物还可用于与芳香酶抑制剂联合治疗或预防乳腺癌。芳香酶抑制剂的例子包括但不限于：阿那曲唑、来曲唑和依西美坦。
本发明化合物还可用于与siRNA治疗剂联合治疗或预防癌症。
本发明化合物还可与γ-分泌酶抑制剂和/或NOTCH信号转导抑制剂联合给药。这些抑制剂包括在WO 01/90084、WO 02/30912、WO01/70677、WO 03/013506、WO 02/36555、WO 03/093252、WO03/093264、WO 03/093251、WO 03/093253、WO 2004/039800、WO2004/039370、WO 2005/030731、WO 2005/014553、USSN 10/957,251、WO 2004/089911、WO 02/081435、WO 02/081433、WO 03/018543、WO 2004/031137、WO 2004/031139、WO 2004/031138、WO2004/101538、WO 2004/101539和WO 02/47671中所述的化合物(包括LY-450139)。
如WO 02/083064、WO 02/083139、WO 02/083140、US2004-0116432、WO 02/083138、US 2004-0102360、WO 03/086404、WO 03/086279、WO 03/086394、WO 03/084473、WO 03/086403、WO2004/041162、WO 2004/096131、WO 2004/096129、WO 2004/096135、WO 2004/096130、WO 2005/100356、WO 2005/100344、US 2005/029941、US 2005/44294、US 2005/43361、60/734188、60/652737、60/670469中公开的Akt抑制剂，包括本发明化合物在内，还可用于与钾盐、镁盐、β-阻断剂(诸如阿替洛尔)和内皮肽-a(ETa)拮抗剂联合使用，目的是保持心血管的动态平衡。
如WO 02/083064、WO 02/083139、WO 02/083140、US2004-0116432、WO 02/083138、US 2004-0102360、WO 03/086404、WO 03/086279、WO 03/086394、WO 03/084473、WO 03/086403、WO2004/041162、WO 2004/096131、WO 2004/096129、WO 2004/096135、WO 2004/096130、WO 2005/100356、WO 2005/100344、US 2005/029941、US 2005/44294、US 2005/43361、60/734188、60/652737、60/670469中公开的Akt抑制剂，包括本发明化合物在内，还可与胰岛素、胰岛素促泌剂、PPAR-γ激动剂、二甲双胍、生长抑素受体激动剂诸如奥曲肽、DPP4抑制剂、磺酰脲和α-葡糖苷酶抑制剂联合使用，目的是保持葡萄糖动态平衡。
本发明化合物还可用于与PARP抑制剂联合治疗或预防癌症。
本发明化合物还可用于与以下的药物联合治疗癌症：abarelix(Plenaxis贮剂
Figure G2007800509679D00571
)；阿地白介素(Prokine
Figure G2007800509679D00572
)；Aldesleukin(Proleukin)；Alemtuzumabb(Campath
Figure G2007800509679D00574
)；alitretinoin(Panretin
Figure G2007800509679D00575
)；别嘌醇(Zyloprim
Figure G2007800509679D00576
)；六甲蜜胺(Hexalen
Figure G2007800509679D00577
)；氨磷汀(Ethyol
Figure G2007800509679D00578
)；阿那曲唑(Arimidex
Figure G2007800509679D00579
)；三氧化二砷(Trisenox
Figure G2007800509679D005710
)；门冬酰胺酶(Elspar
Figure G2007800509679D005711
)；阿扎胞苷(Vidaza)；bevacuzimab(Avastin)；蓓萨罗丁胶囊(Targretin
Figure G2007800509679D005714
)；蓓萨罗丁凝胶剂(Targretin
Figure G2007800509679D005715
)；博来霉素(Blenoxane
Figure G2007800509679D005716
)；bortezomib(Velcade
Figure G2007800509679D005717
)；白消安静脉内制剂(Busulfex
Figure G2007800509679D005718
)；白消安口服剂(Myleran
Figure G2007800509679D005719
)；卡普睾酮(Methosarb
Figure G2007800509679D005720
)；卡培他滨(Xeloda
Figure G2007800509679D005721
)；卡铂(Paraplatin
Figure G2007800509679D005722
)；卡莫司汀(BCNU
Figure G2007800509679D005723
，BiCNU
Figure G2007800509679D005724
)；卡莫司汀(Gliadel)；卡莫司汀+聚苯丙生20植入物(Gliadel Wafer)；塞来昔布(Celebrex
Figure G2007800509679D005727
)；西妥昔单抗(Erbitux)；苯丁酸氮芥(Leukeran
Figure G2007800509679D005729
)；顺铂(Platinol
Figure G2007800509679D005730
)；克拉屈滨(Leustatin，2-CdA
Figure G2007800509679D005732
)；氯法拉宾(clofarabine)(Clolar)；环磷酰胺(Cytoxan
Figure G2007800509679D005734
，Neosar)；环磷酰胺(Cytoxan注射液)；环磷酰胺(Cytoxan片
Figure G2007800509679D005737
)；阿糖胞苷(Cytosar-U
Figure G2007800509679D005738
)；阿糖胞苷脂质体(DepoCyt
Figure G2007800509679D005739
)；达卡巴嗪(DTIC-Dome
Figure G2007800509679D005740
)；D-放线菌素，放线菌素D(Cosmegen
Figure G2007800509679D005741
)；α-Darbepoetin(Aranesp)；柔红霉素脂质体(DanuoXome
Figure G2007800509679D005743
)；柔红霉素、柔毛霉素(Daunorubicin
Figure G2007800509679D005744
)；柔红霉素、柔毛霉素(Cerubidine
Figure G2007800509679D005745
)；地尼白介素-毒素连接物(Denileukindiftitox)(Ontak
Figure G2007800509679D005746
)；右雷佐生(Zinecard
Figure G2007800509679D005747
)；多西他赛(Taxotere
Figure G2007800509679D005748
)；多柔比星(Adriamycin PFS
Figure G2007800509679D005749
)；多柔比星(Adriamycin
Figure G2007800509679D005750
，Rubex
Figure G2007800509679D005751
)；多柔比星(Adriamycin PFS注射液
Figure G2007800509679D005752
)；多柔比星脂质体(Doxil
Figure G2007800509679D005753
)；丙酸屈他雄酮(dromostanolone
Figure G2007800509679D005754
)；丙酸屈他雄酮(masterone注射液
Figure G2007800509679D005755
)；Elliott′s B溶液(Elliott′s B溶液
Figure G2007800509679D005756
)；表柔比星(Ellence
Figure G2007800509679D005757
)；阿法依伯汀(epogen
Figure G2007800509679D005758
)；erlotinib(Tarceva
Figure G2007800509679D005759
)；雌莫司汀(Emcyt
Figure G2007800509679D005760
)；磷酸依托泊苷(Etopophos
Figure G2007800509679D005761
)；依托泊苷、VP-16(Vepesid
Figure G2007800509679D005762
)；依西美坦(Aromasin
Figure G2007800509679D005763
)；非格司亭(Neupogen)；氮尿苷(动脉内)(FUDR
Figure G2007800509679D005765
)；氟达拉滨(Fludara
Figure G2007800509679D005766
)；氟尿嘧啶、5-FU(Adrucil
Figure G2007800509679D005767
)；氟维司群(Faslodex
Figure G2007800509679D005768
)；吉非替尼(gefitinib)(Iressa
Figure G2007800509679D005769
)；吉西他滨(Gemzar
Figure G2007800509679D005770
)；吉姆单抗奥佐米星(Mylotarg
Figure G2007800509679D005771
)；醋酸性瑞林(Zoladex植入物
Figure G2007800509679D005772
)；醋酸性瑞林(Zoladex
Figure G2007800509679D005773
)；醋酸组氨瑞林(Histrelin植入物
Figure G2007800509679D005774
)；羟基脲(Hydrea
Figure G2007800509679D00581
)；Ibritumomab Xiuxetan(Zevalin
Figure G2007800509679D00582
)；伊达比星(Idamycin
Figure G2007800509679D00583
)；异环磷酰胺(IFEX
Figure G2007800509679D00584
)；甲磺酸伊马替尼(imatinib)(Gleevec)；干扰素α-2a(Roferon A
Figure G2007800509679D00586
)；干扰素α-2b(Intron A
Figure G2007800509679D00587
)；伊立替康(Camptosar
Figure G2007800509679D00588
)；lenalidomide(Revlimid)；来曲唑(Femara
Figure G2007800509679D005810
)；亚叶酸(Wellcovorin
Figure G2007800509679D005811
，Leucovorin
Figure G2007800509679D005812
)；醋酸利普安醋酸亮内瑞林(Eligard
Figure G2007800509679D005813
)；左旋咪唑(Ergamisol
Figure G2007800509679D005814
)；洛莫司汀、CCNU(CeeBU
Figure G2007800509679D005815
)；甲氯乙胺(meclorethamine)、氮芥(Mustargen
Figure G2007800509679D005816
)；醋酸甲地孕酮(Megace
Figure G2007800509679D005817
)；美法仑、L-PAM(Alkeran
Figure G2007800509679D005818
)；巯嘌呤、6-MP(Purinethol)；美司钠(Mesnex
Figure G2007800509679D005820
)；美司钠(Mesnex tabs
Figure G2007800509679D005821
)；甲氨蝶呤(Methotrexate
Figure G2007800509679D005822
)；甲氧沙林(Uvadex
Figure G2007800509679D005823
)；丝裂霉素C(Mutamycin
Figure G2007800509679D005824
)；米托坦(Lysodren
Figure G2007800509679D005825
)；米托蒽醌(Novantrone
Figure G2007800509679D005826
)；苯丙酸诺龙(nandrolone phenpropionate)(Durabolin-50
Figure G2007800509679D005827
)；奈拉滨(Arranon
Figure G2007800509679D005828
)；Nofetumomab(VeR1uma
Figure G2007800509679D005829
)；Oprelvekin(Neumega
Figure G2007800509679D005830
)；奥沙利铂(Eloxatin
Figure G2007800509679D005831
)；紫杉醇(Paxene
Figure G2007800509679D005832
)；紫杉醇(Taxol
Figure G2007800509679D005833
)；紫杉醇蛋白质结合粒子(Abraxane
Figure G2007800509679D005834
)；帕立夫明(palifermin)(Kepivance)；帕米膦酸盐(Aredia
Figure G2007800509679D005836
)；培加酶(Adagen(牛培加酶)
Figure G2007800509679D005837
)；培门冬酶(Oncaspar
Figure G2007800509679D005838
)；Pegfilgrastim(Neulasta
Figure G2007800509679D005839
)；培美曲塞二钠(Alimta
Figure G2007800509679D005840
)；喷司他丁(Nipent
Figure G2007800509679D005841
)；哌泊溴烷(Vercyte
Figure G2007800509679D005842
)；普卡霉素、米拉霉素(Mithracin)；卟吩姆钠(Photofrin)；丙卡巴肼(Matulane
Figure G2007800509679D005845
)；米帕林(Atabrine
Figure G2007800509679D005846
)；拉布立酶(Elitek
Figure G2007800509679D005847
)；利妥西单抗(Rituxan
Figure G2007800509679D005848
)；沙格司亭(Leukine
Figure G2007800509679D005849
)；沙格司亭(Prokine
Figure G2007800509679D005850
)；sorafenib(Nexavar
Figure G2007800509679D005851
)；链佐星(Zanosar)；马来酸苏尼替尼(sunitinib)(Sutent
Figure G2007800509679D005853
)；滑石(Sclerosol
Figure G2007800509679D005854
)；他莫昔芬(Nolvadex
Figure G2007800509679D005855
)；替莫唑胺(Temodar
Figure G2007800509679D005856
)；替尼泊苷、VM-26(Vumon
Figure G2007800509679D005857
)；睾内酮(Teslac
Figure G2007800509679D005858
)；硫鸟嘌呤、6-TG(Thioguanine)；塞替派(Thioplex
Figure G2007800509679D005860
)；拓扑替康(Hycamtin
Figure G2007800509679D005861
)；托瑞米芬(Fareston
Figure G2007800509679D005862
)；托西奠单抗(Bexxar)；托西奠单抗/I-131托西奠单抗(Bexxar
Figure G2007800509679D005864
)；曲妥珠单抗(Herceptin
Figure G2007800509679D005865
)；维甲酸、ATRA(Vesanoid
Figure G2007800509679D005866
)；乌拉莫司汀(Uracil Mustard胶囊
Figure G2007800509679D005867
)；伐如比星(valrubicin)(Valstar
Figure G2007800509679D005868
)；长春碱(Velban
Figure G2007800509679D005869
)；长春新碱(Oncovin
Figure G2007800509679D005870
)；长春瑞滨(Navelbine
Figure G2007800509679D005871
)；唑来膦酸盐(Zometa)；和vorinostat(Zolinza)。
本发明化合物可以与紫杉烷类药物联合用于治疗癌症。
本发明化合物可以与多西他赛(Taxotere
Figure G2007800509679D005874
)联合用于治疗癌症。
本发明化合物可以与vorinostat(Zolinza)联合用于治疗癌症。
本发明化合物可以与激酶抑制剂MK-0457联合用于治疗癌症。
本发明化合物可以与mTor抑制剂AP 23573联合用于治疗癌症。
本发明化合物可以与IGF1R抑制剂MK-0646联合用于治疗癌症。
本发明化合物可以与satraplatin联合用于治疗癌症。
本发明化合物可以与lapatinib(Tykerb
Figure G2007800509679D00591
)联合用于治疗癌症。
因此，本发明的范围包括本发明要求保护的化合物与选自以下的第二化合物的联合应用：雌激素受体调节剂、雄激素受体调节剂、类视黄醇受体调节剂、细胞毒剂/细胞抑制剂、抗增殖药、异戊烯基-蛋白转移酶抑制剂、HMG-CoA还原酶抑制剂、HTV蛋白酶抑制剂、逆转录酶抑制剂、血管生成抑制剂、PPAR-γ激动剂、PPAR-δ激动剂、固有多药耐药性抑制剂、止吐药、用于治疗贫血的药物、用于治疗嗜中性白细胞减少症的药物、免疫增强药、细胞增殖和存活信号转导抑制剂、双膦酸盐类、芳香酶抑制剂、siRNA治疗剂、γ-分泌酶抑制剂、干扰受体酪氨酸激酶(RTK)的药物、干扰细胞周期关卡的药物，以及上列的任何治疗剂。
关于本发明化合物的术语“给药”及其变形(例如“给予”化合物)是指将化合物或化合物前药引入到需要治疗的动物系统中。当将本发明化合物或其前药与一种或多种其它活性剂(例如细胞毒剂等)联合提供时，“给药”及其变形可以各自理解为包括同时和顺序引入化合物或其前药及其它试剂。
在此使用的术语“组合物”是指含有规定量的规定成分的产品，以及任何通过组合规定量的规定成分而直接或间接得到的产品。
本文所用的术语“治疗有效量”是指由研究人员、兽医、医疗医生或其它临床医师所确定的在组织、系统、动物或人类中引发生物学或者医学反应的活性化合物或药物的量。
术语“治疗癌症”或“癌症的治疗”是指对患有癌性病况的哺乳动物进行给药，并涉及通过杀死癌细胞以减轻癌性病况的效果，也涉及使癌的生长和/或转移受到抑制的效果。
在一个实施方案中，作为第二化合物使用的血管生成抑制剂选自酪氨酸激酶抑制剂、表皮衍生生长因子抑制剂、成纤维细胞衍生生长因子抑制剂、血小板衍生生长因子抑制剂、MMP(基质金属蛋白酶)抑制剂、整联蛋白阻断剂、干扰素-α、白介素-12、聚硫酸戊聚糖、环加氧酶抑制剂、羧基酰胺基三唑、考布他汀A-4、角鲨胺、6-O-氯乙酰基-羰基)-烟曲霉醇、沙利度胺、血管生长抑素、肌原蛋白-1或抗VEGF抗体。在一个实施方案中，雌激素受体调节剂为他莫昔芬或雷洛昔芬。
要求保护的范围还包括治疗癌症的方法，该方法包括与放射治疗和/或第二化合物联合给予治疗有效量的本发明化合物，所述第二化合物选自：雌激素受体调节剂、雄激素受体调节剂、类视黄醇受体调节剂、细胞毒剂/细胞抑制剂、抗增殖药、异戊烯基-蛋白转移酶抑制剂、HMG-CoA还原酶抑制剂、HIV蛋白酶抑制剂、逆转录酶抑制剂、血管生成抑制剂、PPAR-γ激动剂、PPAR-δ激动剂、固有多药耐药性抑制剂、止吐药、用于治疗贫血的药物、用于治疗中性粒细胞减少症的药物、免疫增强药、细胞增殖和存活信号转导抑制剂、双膦酸盐类、和芳香酶抑制剂、siRNA治疗剂、γ-分泌酶抑制剂、干扰受体酪氨酸激酶(RTK)的药物、干扰细胞周期关卡的药物，以及上列的任何治疗剂。
本发明的另一个实施方案是治疗癌症的方法，包括与紫杉醇或曲妥珠单抗联合给药治疗有效量的本发明化合物。
本发明进一步包括治疗或预防癌症的方法，包括给药治疗有效量的本发明化合物和COX-2抑制剂。
本发明还包括可用于治疗或预防癌症的药物组合物，该药物组合物包括治疗有效量的本发明化合物和选自以下的第二化合物：雌激素受体调节剂、雄激素受体调节剂、类视黄醇受体调节剂、细胞毒剂/细胞抑制剂、抗增殖药、异戊烯基-蛋白转移酶抑制剂、HMG-CoA还原酶抑制剂、HIV蛋白酶抑制剂、逆转录酶抑制剂、血管生成抑制剂、PPAR-γ激动剂、PPAR-δ激动剂、细胞增殖和存活信号转导抑制剂、双膦酸盐类、芳香酶抑制剂、siRNA治疗剂、γ-分泌酶抑制剂、干扰受体酪氨酸激酶(RTK)的药物、干扰细胞周期关卡的药物，以及上列的任何治疗剂。
所有的专利、公开和未决专利申请并入本文作为参考。
化学方案和实施例说明中使用的缩写如下：AEBSF(对氨基乙基苯磺酰基氟)；BSA(牛血清白蛋白)；BuLi(正丁基锂)；CDCl3(氯仿-d)；CuI(碘化铜)；CuSO4(硫酸铜)；DCE(二氯乙烷)；DCM(二氯乙烷)；DEAD (偶氮二甲酸二乙酯)；DMF(N，N-二甲基甲酰胺)；DMSO(二甲基亚砜)；DTT(二硫苏糖醇)；EDTA(乙二胺-四乙酸)；EGTA(乙二醇-四乙酸)；EtOAc(乙酸乙酯)；EtOH(乙醇)；Hex(己烷)；HOAc(乙酸)；HPLC(高效液相色谱法)；HRMS(高分辨率质谱)；iPr(异丙基)；IPA(异丙醇)；LCMS(液相色谱-质谱仪)；LHMDS(双(三甲基甲硅烷基)氨基锂)；LRMS(低分辨率质谱)；MeOH(甲醇)；MP-B(CN)H3(大孔氰基硼氢化物)；NaHCO3(碳酸氢钠)；Na2SO4(硫酸钠)；Na(OAc)3BH(三乙酰氧基硼氢化钠)；NH4OAC(醋酸铵)；NBS(N-溴琥珀酰胺)；NMR(核磁共振)；PBS(磷酸盐缓冲盐水)；PCR(聚合酶链式反应)；Pd(dppf)([1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁]钯)；Pd(Ph3)4(钯(0)四-三苯基膦)；POCl3(三氯氧化磷)；PS-DIEA(聚苯乙烯二异丙基乙胺)；PS-PPh3(聚苯乙烯-三苯基膦)；TBAB(四丁基溴化铵)；TBAF(四丁基氟化铵)；THF(四氢呋喃)；TFA(三氟乙酸)；TMSCH2N2(三甲基甲硅烷基重氮甲烷)和Ac(乙酰基)；BOC(叔丁氧基羰基)；Bu(丁基)；Cal(计算值)；Calc′d(计算值)；DIEA(二异丙基乙胺)；DMAP(4-二甲基氨基吡啶)；EDC(N-乙基-N′-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺)；Eq(当量)；Et(乙基)；HOBT(羟基苯并三唑)；IPA(异丙醇)；LC/MS(液相色谱-质谱仪)；Me(甲基)；MeCN(乙腈)；NMP(N-甲基吡咯烷酮)；Pr(丙基)；Pyr(吡啶)；Sat(饱和的)和Tosic(对甲苯磺酸)和Bn(苄基)；t-Bu(叔丁基)；dba(二亚苄基丙酮)；DIPEA(二异丙基乙胺)；IPAC(乙酸异丙酯)；MTBE(叔丁基甲基醚)；OAc(乙酸根)；RT(室温)；Tf(三氟甲磺酰基)；Wt(重量)；和XRPD(X-射线粉末衍射)。
除了在文献中已知的或在实验方法中举例说明的其它标准操作之外，本发明化合物可通过采用以下反应方案中所述的反应制备。因此，以下的说明性反应方案不受列举的化合物或用于说明性目的使用的任何具体的取代基的限制。反应方案中所示的取代基编号不必须与权利要求中使用的那些相关，通常为了简便，在上述式A的定义下允许的多个取代基表示为与该化合物连接的单独取代基。
反应方案概要
以下的反应方案，即反应方案I-V，提供了制备本发明化合物的有用细节。必需中间体在某些情况下可在市场上买到，或者可根据文献过程制得。
如反应方案I所示，首先将环烷基(苯基)乙酸衍生物，在该反应方案中是环丁基，在Curtius-型条件下进行反应和重排，以生成氨基甲酸酯I-1。进行氰化，在该反应方案中是通过钯进行催化，生成腈I-2。将I-2去质子化，然后与亲核性苄基格氏试剂反应，并且进行水解后处理，生成酮I-3。将I-3与醛I-4在碱性条件下缩合，生成氯二氮杂萘I-5。将氯用肼置换，生成酰肼I-6。酰化，生成酰肼酰肼I-7，在酸性条件下将其环合，生成三唑并二氮杂萘I-8。将胺脱保护，在该反应方案中是用HCl，生成I-9。
稠合三唑可通过将酰肼I-6用活化的羰基等同物例如羰基二咪唑或者用甲酸在碳二亚胺存在下酰化来制得，无需环合步骤。或者，可将氯二氮杂萘I-5与衍生化的肼例如烷基肼羧酸盐在酸催化下反应，生成肼加合物，其在碱性条件下环合，生成三唑。
其中R1是氨基烷基的本发明化合物可根据反应方案II中描绘的方法制得。将酰肼I-6与碳二亚胺反应，生成脲，其在酸性条件下原位环合，生成烷基氨基三唑II-1。然后脱保护，生成II-2。
反应方案III中显示了合成氯二氮杂萘1-5的另一种方法。首先将(4-卤代苯基)乙腈衍生物III-1，在该反应方案中是溴，在碱性条件下烷基化，生成环丁烷III-2，在碱存在下将其用过氧化氢水合，生成酰胺III-3。然后酰胺在叔丁醇存在下重排，生成氨基甲酸酯III-4。或者，将III-2水解成羧酸，然后如I-1的合成中所述(反应方案I)将酸重排，生成氨基甲酸酯III-4。进行氰化，在该反应方案中是通过钯进行催化，生成腈I-2。将I-2与过量亲核性苄基格氏试剂反应，并且进行水解后处理，生成酮I-3。将醛I-4用酸例如TFA脱保护，生成氨基吡啶III-5。将I-3与醛III-5在碱性条件下缩合，生成氯二氮杂萘1-5。
本发明化合物可以根据反应方案IV中描述的方法制得。在过渡金属催化的反应中，将溴苯基衍生物III-4与乙炔，在该反应方案中是苯基乙炔反应，生成二苯基乙炔衍生物IV-1。将其氧化成二酮IV-2。然后将该二酮与芳基二胺，在该反应方案中是6-氯吡啶-2，3-二胺反应，生成氯吡啶并吡嗪IV-3a和IV-3b的区域异构体混合物。然后可将该混合物进行由I-5合成I-9所描述的类似反应顺序(反应方案I)，并且分离异构体，生成三唑并吡啶并吡嗪IV-4。
反应方案V中描述了三唑并吡啶并吡嗪的另一合成方法。在该反应方案中，首先将6-氯吡啶-2，3-二胺与α-酮基酯在碱性条件下反应，生成氯吡啶并吡嗪醇V-1.然后将中间体V-1与肼反应，并且与羧酸以用于将I-5转化成I-7的类似方式(反应方案I)进行偶联，生成碳酰肼V-2。将其在脱水条件下用试剂例如三氯氧化磷环合，生成三唑并吡啶并吡嗪V-3。然后将中间体V-3与适当官能化苯衍生物，在该反应方案中是硼酸衍生物V-4偶联，生成V-5。然后将V-5脱保护，生成V-6。由相应的卤代衍生物I-1，通过与相应的联-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷制得硼酸酯V-4。
反应方案I
Figure G2007800509679D00631
反应方案II
反应方案III
Figure G2007800509679D00641
反应方案IV
Figure G2007800509679D00642
反应方案V
Figure G2007800509679D00651
提供实施例和反应方案的目的是为了帮助进一步了解本发明。使用的具体材料、物质和条件是为了进一步说明本发明而不是对本发明的合理范围构成限制。
反应方案1
Figure G2007800509679D00661
[1-(4-氯苯基)环丁基]氨基甲酸叔丁酯(1-1)
向圆底烧瓶中加入1-(4-氯苯基)环丁烷甲酸(40.4g，192mmol)、二碳酸二叔丁酯(46.0g，211mmol)、叠氮化钠(43.6g，671mmol)、溴化四丁基铵(9.27g，28.7mmol)、三氟甲磺酸锌(2.30g，6.32mmol)和THF(1L)。将该反应混合物加热至60℃，同时在连接有水冷却回流冷凝器的热油浴中于氮气氛下搅拌18小时。向该粗制反应混合物中加入饱和碳酸氢钠溶液，悬浮在乙酸乙酯中，并且依次用饱和碳酸氢钠溶液、水、盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤，并浓缩。通过硅胶色谱纯化所得残余物(0-3％ IPA/DCM)，获得了[1-(4-氯苯基)环丁基]氨基甲酸叔丁酯(1-1)，为白色固体。HRMS(M+Na)+：实测值＝304.1075，计算值＝304.1075。
[1-(4-氰基苯基)环丁基]氨基甲酸叔丁酯(1-2)
向[1-(4-氯苯基)环丁基]氨基甲酸叔丁酯(1-1)(5.32g，18.9mmol)在无水1，4-二氧杂环己烷(70mL)内的溶液中加入氰化锌(2.44g，20.8mmol)，然后加入二(三叔丁基膦)钯(0)(0.965g，1.89mmol)。将该反应混合物加热至100℃，同时在连接有水冷却回流冷凝器的热油浴中于氮气氛下搅拌1.5小时。将该反应混合物过滤，并真空浓缩。通过硅胶色谱纯化所得残余物(0-5％ IPA/DCM)，获得了[1-(4-氰基苯基)环丁基]氨基甲酸叔丁酯(1-2)，为蜡状灰白色/黄色固体。HRMS(M+H)+：实测值-273.1598，计算值＝273.1597。
{1-[4-(苯基乙酰基)苯基]环丁基}氨基甲酸叔丁酯(1-3)
将[1-(4-氰基苯基)环丁基]氨基甲酸叔丁酯(1-2)(16.6g，61.0mmol)在无水THF(300mL)中的溶液冷却至-78℃，同时在氮气氛下搅拌。然后用5分钟滴加2.0M氯化异丙基镁在THF中的溶液(30.5mL，61.0mmol)。让该反应混合物在-78℃于氮气氛下搅拌10分钟。然后用10分钟滴加2.0M氯化苄基镁在THF中的溶液(116mL，232mmol)。让该反应温热至0℃。2小时后，在0℃通过加入饱和氯化铵溶液来处理该反应混合物。让该反应温热至室温，悬浮在乙酸乙酯中，依次用饱和氯化铵溶液、饱和碳酸氢钠溶液、水、盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。通过硅胶色谱纯化所得残余物(1-40％ EtOAc/5％DCM/己烷)，获得了{1-[4-(苯基乙酰基)苯基]环丁基}氨基甲酸叔丁酯(1-3)，为蜡状灰白色固体。HRMS(M+Na)+：实测值＝388.1892，计算值＝388.1883。
{1-[4-(5-氯-3-苯基-1，6-二氮杂萘-2-基)苯基]环丁基}氨基甲酸叔丁酯 (1-5)
向圆底烧瓶中加入{1-[4-(苯基乙酰基)苯基]环丁基}氨基甲酸叔丁酯(1-3)(2.7g，6.1mmol)、(2-氯-3-甲酰基吡啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(1-4)(1.6g，6.1mmol)、碳酸钾(5.0g，6.0mmol)和DMF(20mL)。将该反应混合物加热至80℃，同时在热油浴中于氮气氛下搅拌15小时。然后将该反应混合物温热至120℃，并且保持1小时。让该反应混合物冷却至室温，加入水，悬浮在乙酸乙酯中，依次用饱和碳酸氢钠溶液、水、盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。通过硅胶色谱纯化所得残余物(5-50％ EtOAc/5％ DCM/己烷)，获得了{1-[4-(5-氯-3-苯基-1，6-二氮杂萘-2-基)苯基]环丁基}氨基甲酸叔丁酯(1-5)，为灰白色固体。HRMS(M+H)+：实测值＝486.1954，计算值＝486.1943。
{1-[4-(5-肼基-3-苯基-1，6-二氮杂萘-2-基)苯基]环丁基}氨基甲酸叔丁酯 (1-6)
向微波瓶中加入{1-[4-(5-氯-3-苯基-1，6-二氮杂萘-2-基)苯基]环丁基}氨基甲酸叔丁酯(1-5)(4.05g，8.34mmol)、无水肼(5.24mL，167mmol)和1，4-二氧杂环己烷(15mL)。将该反应混合物在微波照射下于100℃(高吸收)加热5分钟。让该反应混合物冷却至室温，悬浮在乙酸乙酯中，依次用饱和碳酸氢钠溶液、水、盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤，并且真空浓缩，获得了{1-[4-(5-肼基-3-苯基-1，6-二氮杂萘-2-基)苯基]环丁基}氨基甲酸叔丁酯(1-6)，为橙色固体/泡沫状物。MS(M+H)+：实测值＝482.3，计算值＝482.59。
{1-[4-(5-{2-[(1-甲基-1H-咪唑-4-基)羰基]肼基}-3-苯基-1，6-二氮杂萘-2- 基)苯基]环丁基}氨基甲酸叔丁酯(1-7)
向圆底烧瓶中加入{1-[4-(5-肼基-3-苯基-1，6-二氮杂萘-2-基)苯基]环丁基}氨基甲酸叔丁酯(1-6)(3.94g，8.18mmol)、EDC(1.34g，10.6mmol)、HOBt(1.44g，10.6mmol)、1-甲基-1H-咪唑-4-甲酸(1.34g，10.6mmol)和DMF(40mL)。将该反应混合物加热至60℃，同时在热油浴中于氮气氛下搅拌。45分钟后，让该反应混合物冷却至室温，悬浮在乙酸乙酯中，依次用饱和碳酸氢钠溶液、水、盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩，获得了{1-[4-(5-{2-[(1-甲基-1H-咪唑-4-基)羰基]肼基}-3-苯基-1，6-二氮杂萘-2-基)苯基]环丁基}氨基甲酸叔丁酯(1-7)，为红色泡沫状物。MS(M+H)+：实测值＝590.3，计算值＝590.69。
(1-{4-[3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂 萘-8-基]苯基}环丁基)氨基甲酸叔丁酯(1-8)
向圆底烧瓶中加入{1-[4-(5-{2-[(1-甲基-1H-咪唑-4-基)羰基]肼基}-3-苯基-1，6-二氮杂萘-2-基)苯基]环丁基}氨基甲酸叔丁酯(1-7)(2.73g，4.63mmol)、乙酸(5.30mL，93mmol)和1，4-二氧杂环己烷(20mL)。将该反应混合物加热至80℃，同时在热油浴中在暴露于空气下(用盖子封闭)搅拌。3小时后，让该反应混合物冷却至室温，悬浮在乙酸乙酯中，依次用饱和碳酸氢钠溶液、水、盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。通过硅胶色谱纯化所得残余物(1-15％ IPA/DCM)。将合适的级份合并，并且真空除去溶剂。通过反相柱色谱再纯化所得残余物(Sunfire C18)，使用5-95％乙腈/(0.1％ TFA/水)梯度进行洗脱。通过悬浮在乙酸乙酯中来将合适的级份游离碱化，依次用饱和碳酸氢钠溶液、水、盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩，获得了(1-{4-[3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁基)氨基甲酸叔丁酯(1-8)，为灰白色固体。MS(M+H)+：实测值＝572.3，计算值＝572.7。
1-{4-[3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘 -8-基]苯基}环丁胺二盐酸盐(1-9)
向(1-{4-[3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁基)氨基甲酸叔丁酯(1-8)(2.52g，4.41mmol)在MeOH(5mL)和DCM(15mL)内的溶液中加入4N HCl在EtOAc中的溶液(22mL，88mmol)。让密封的反应混合物在室温搅拌。4小时后，将该反应混合物真空浓缩，获得了1-{4-[3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺二盐酸盐(1-9)，为黄色固体。HRMS(M+H)+：实测值＝472.2249，计算值＝472.2244。
以类似于实施例1-9的方法制备了下列化合物：
Figure G2007800509679D00701
Figure G2007800509679D00711
Figure G2007800509679D00721
Figure G2007800509679D00731
Figure G2007800509679D00741
Figure G2007800509679D00751
Figure G2007800509679D00761
Figure G2007800509679D00771
Figure G2007800509679D00801
Figure G2007800509679D00811
Figure G2007800509679D00821
Figure G2007800509679D00831
Figure G2007800509679D00841
Figure G2007800509679D00851
Figure G2007800509679D00861
Figure G2007800509679D00871
Figure G2007800509679D00881
Figure G2007800509679D00901
Figure G2007800509679D00911
Figure G2007800509679D00921
Figure G2007800509679D00931
Figure G2007800509679D00941
Figure G2007800509679D00951
反应方案1A
Figure G2007800509679D00952
8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3- 醇(1-16)
向圆底烧瓶中加入在1，4-二氧杂环己烷(30mL)中的{1-[4-(5-肼基-3-苯基-1，6-二氮杂萘-2-基)苯基]环丁基}氨基甲酸叔丁酯(1-6)(2.77g，5.75mmol)和1，1′-羰基二(1H-咪唑)(4.10g，4.40mmol)。然后将密封的反应混合物在95℃于氮气氛下加热。向该粗制反应混合物中加入饱和碳酸氢钠溶液(100mL)和乙酸乙酯。将有机层依次用饱和碳酸氢钠溶液、水、盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤，并浓缩。然后通过硅胶色谱纯化所得残余物，用0-10％ IPA/DCM洗脱。然后将合适的级份合并，并且真空除去溶剂，获得了{1-[4-(3-羟基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁基}氨基甲酸叔丁酯(1-6a)，为褐色固体。MS(M+H)+：实测值＝508.1，计算值＝508.6。
在室温向{1-[4-(3-羟基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁基}氨基甲酸叔丁酯(1-6a)(1.14g，2.25mmol)在MeOH(5mL)和DCM(15mL)内的溶液中加入4N HCl在EtOAc中的溶液(22mL，88mmol)。4小时后，将该反应混合物真空浓缩，获得了8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-醇盐酸盐(1-16)，为黄色固体。HRMS(M+H)+：实测值＝408.1803，计算值＝408.1819。
随后，该黄色固体的X-射线晶体学分析表明固体化合物1-16作为以下化学结构存在：
8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3(2H)-酮盐酸盐
Figure G2007800509679D00961
反应方案1B
Figure G2007800509679D00962
{1-[4-(9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁基}氨基 甲酸叔丁酯(1-6b)
向圆底烧瓶中加入EDC(569mg，2.97mmol)、HOBt(401mg，10.6mmol)、甲酸(248mg，5.40mmol)、DCM(20mL)和NMP(2.5mL)。然后将该反应混合物在室温于氮气氛下搅拌30分钟。然后加入{1-[4-(5-肼基-3-苯基-1，6-二氮杂萘-2-基)苯基]环丁基}氨基甲酸叔丁酯(1-6)(1.30g，2.70mmol)。之后让该反应混合物在室温于氮气氛下搅拌过夜。然后将该反应混合物悬浮在乙酸乙酯中，依次用饱和碳酸氢钠溶液、水、盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。通过硅胶色谱纯化所得残余物(50-90％ EtOAc/DCM，然后1-15％ IPA/DCM)。将合适的级份合并，并且真空除去溶剂，获得了{1-[4-(9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁基}氨基甲酸叔丁酯(1-6b)，为褐色固体。MS(M+H)+：实测值＝492.2，计算值＝492.6。
1-[4-(9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺盐酸盐 (1-15)
向{1-[4-(9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁基}氨基甲酸叔丁酯(1-6b)(1.07g，2.177mmol)在MeOH(5mL)和DCM(15mL)内的溶液中加入4N HCl在EtOAc中的溶液(5.44mL，21.77mmol)。让密封的反应混合物在室温搅拌。4小时后，将该反应混合物过滤，获得了1-[4-(9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺盐酸盐(1-15)，为褐色固体。HRMS(M+H)+：实测值＝392.1872，计算值＝392.1870。
反应方案1C
Figure G2007800509679D00981
1-(4-溴苯基)环丁烷甲腈(1-2c)
将TBAB(1.61g，0.5mmol)、二溴丙烷(22.2g，110mmol)和腈1-1c(19.6g，100mmol)加到KOH(31.17g，500mmol)在15mL水和200mL甲苯的混合物内的搅拌着的溶液中(温度保持在72至79℃)。通过蒸汽加热该混合物，并且在99-108℃搅拌2.5小时。将该混合物冷却至80℃，并且加入200mL庚烷。将所得混合物在搅拌下冷却至室温后，把上层澄清溶液过滤，用水(3×30mL)洗涤，并真空浓缩，获得了油状产物1-2c。
1-(4-溴苯基)环丁烷甲酰胺(1-3c)
在40-87℃，用3小时将H2O2(30％ 11.3mL，118mmol)加到腈1-2c(13.88g，-58.9mmol)和K2CO3(1.62g，11.8mol)在59mL DMSO内的搅拌着的混合物中，用水浴冷却。将所得混合物冷却至27℃，并且用30分钟加入水(100mL)。形成了结晶产物1-3c。再用1小时加入水(100mL)。将所得浆液在室温老化16小时，然后过滤。将滤饼用100mL水洗涤，然后用100mL庚烷洗涤。在真空烘箱中于50℃干燥后，获得了产物1-3c，为白色固体。
[1-(4-溴苯基)环丁基]氨基甲酸叔丁酯(1-4c)
在57℃-86℃于水浴冷却下，将Pb(OAc)4(25.7g，25.7mmol)加到酰胺1-3c(12.7g，50mmol)在64mL t-BuOH内的搅拌着的溶液中。将所得混合物在65-86℃搅拌0.5小时。将该混合物冷却至26℃，并且加入12.7g Na2CO3，然后加入65mL MTBE。10分钟后，将该混合物过滤。将滤饼用10L MTBE洗涤，并且将合并的滤液用20mL水洗涤，然后将有机层用3×10mL 10％KHCO3(注意：起泡)洗涤，用硫酸钠干燥，并真空浓缩。将所得固体用8mL IPAc和8mL庚烷洗涤，并且在真空烘箱中于40℃干燥，获得了产物1-4c，为灰色固体。
[1-(4-氰基苯基)环丁基]氨基甲酸叔丁酯(1-2)
将Pd2dba3(101mg；1mol％)和dppf(122mg；2mole％)在DMF(25mL)中的搅拌着的浆液用氮气鼓泡5分钟，然后温热至65℃，并且老化30分钟。在该温度加入加入芳基溴化物1-4c(3.6g，11mmol)、锌粉(51mg；6mol％)和氰化锌(777mg；0.60equiv)，用DMF(5mL)洗涤。将该溶液加热至92-95℃，并且老化4小时。将该溶液冷却至室温过夜，并且经由Solka Floe垫过滤，用DMF(5mL)洗涤滤饼。在25-33℃用3.5小时加入水(30mL)和晶种。在室温老化过夜后，将所得晶体溶液过滤，并且用含水甲醇洗涤，干燥过夜，获得了1-2，为黄色固体。
{1-[4-苯基乙酰基]苯基]环丁基}氨基甲酸叔丁酯(1-3)
将苄基格氏试剂(19mL，38.5mmol)加到腈1-2(3g，11mmol)在THF(25mL)内的冷却至约-20℃的搅拌着的轻微混浊溶液中，加入速度使得反应温度不超过-10℃。将该溶液老化3-4小时，将反应温度保持在-10℃至-20℃之间。将该搅拌着的溶液冷却至-30℃，并且加到预先冷却至5-10℃的15wt％柠檬酸水溶液(60mL)中，把温度保持在15℃以下。分离各层，并且将水层用MTBE洗涤。
合并有机层，用一半饱和盐水(60mL)洗涤，并且减压浓缩。加入庚烷，将该混合物浓缩至浆液，将该浆液过滤，用庚烷(15mL)洗涤，并且在氮气下干燥，获得了1-3。
4-氨基-2-氯烟醛(1-5c)
将三氟乙酸(17.4mL，234mmol)小心地加到Boc醛1-4(20g，78.1mmol)和二氯甲烷(60mL)的搅拌着的混合物中，将温度保持在25℃以下。将该溶液温热至35℃，老化过夜(剧烈地释放气体)，然后冷却至室温。加入25mL MTBE，并且将所得白色浆液老化1小时，过滤，将滤饼用MTBE(10mL×2)洗涤。将固体1-5c TFA盐真空干燥。
{1-[4-(5-氯-3-苯基-1，6-二氮杂萘-2-基)苯基]环丁基}氨基甲酸叔丁酯 (1-5)
将45wt％氢氧化钾溶液(18mL；5equiv)用20分钟滴加到氯吡啶TFA盐1-5c(19.5g)、环丁基氨基酮1-3(26g)和异丙醇(200mL)的搅拌着的混合物中，并且将温度保持在低于24℃。1小时后，加入水(100mL)，又过了1小时后，将所得浆液过滤，用2∶1 IPA/水(30mL，然后24mL)洗涤，然后用水(80mL，然后2×60mL)洗涤。将固体在氮气流下干燥，获得了1-5，为灰白色固体。
{1-[4-(5-肼基-3-苯基-1，6-二氮杂萘-2-基)苯基]环丁基}氨基甲酸叔丁酯 (1-6)
在氮气氛下将无水肼(25mL，797mmol)加到氯二氮杂萘(1-5)(25.12g，51.7mmol)在1，4-二氧杂环己烷(200mL)内的搅拌着的溶液中，并且将该反应混合物加热至95℃。30分钟后，将该溶液冷却至室温，加入乙酸乙酯(400mL)，并且将该溶液依次用饱和碳酸氢钠溶液、水和盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩，获得了(1-6)，为橙色固体。
反应方案1D
{1-[4-(9-苯基-3-嘧啶-2-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基] 环丁基}氨基甲酸叔丁酯(1-6d)
向圆底烧瓶中加入{1-[4-(5-肼基-3-苯基-1，6-二氮杂萘-2-基)苯基]环丁基}氨基甲酸叔丁酯(1-6)(267mg，0.554mmol)、EDC(138mg，0.721mmol)、HOBt(97mg，0.721mmol)、嘧啶-2-甲酸(89mg，0.721mmol)、DIPEA(0.367mL，2.218mmol)和DMF(3mL)。然后将该反应混合物用盖子封闭，并且在微波照射下于100℃加热5分钟。将该混合物冷却，加入乙酸(0.476mL，8.32mmol)，然后盖上，并且在微波照射下于80℃加热5分钟。让该反应混合物冷却至室温，悬浮在乙酸乙酯中，依次用饱和碳酸氢钠溶液、水、盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。通过硅胶色谱纯化所得残余物(0-10％ IPA/DCM)。将合适的级份合并，并且真空除去溶剂，获得了{1-[4-(9-苯基-3-嘧啶-2-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁基}氨基甲酸叔丁酯(1-6d)，为橙色固体。MS(M+H)+：实测值＝570.2，计算值＝570.7。
1-[4-(9-苯基-3-嘧啶-2-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基] 环丁胺盐酸盐(1-10)
向{1-[4-(9-苯基-3-嘧啶-2-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁基}氨基甲酸叔丁酯(1-6d)(71mg，0.125mmol)在MeOH(2mL)和DCM(3mL)内的溶液中加入4N HCl在EtOAc中的溶液(3mL，12mmol)。让密封的反应混合物在室温搅拌。4小时后，将该反应混合物浓缩。4小时后，将该反应混合物真空浓缩。通过反相柱色谱纯化所得残余物(Sunfire C18)，用1-50％乙腈/(0.1％ TFA/水)进行梯度洗脱。将合适的级份真空浓缩。然后将所得残余物溶解在DCM(5mL)&MeOH(5mL)中，然后加入4N HCl在EtOAc中的溶液(5mL，20mmol)，然后真空浓缩，获得了1-[4-(9-苯基-3-嘧啶-2-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺盐酸盐(1-10)，为褐色固体。HRMS(M+H)+：实测值＝470.2098，计算值＝470.2088。
反应方案1E
(合成化合物1-16的另一方法)
Figure G2007800509679D01021
中间体(1-5e)
将氯二氮杂萘1-5(1.8g)、肼甲酸甲酯(0.318g)和异丙醇(20L)的搅拌着的浆液温热至66℃，然后变得均匀。加入5-6N HCl在IPA中的溶液(0.05ml)，将温度提高至70℃并保持16小时，然后冷却至室温。冷却至室温后，将45wt％氢氧化钾溶液(0.52mL)与水(5.5mL)混合，并且用15分钟加入。30分钟后，加入乙酸水溶液(0.7mL在6mL水中)，然后加入水(2mL)。将所得浆液在室温老化3小时，过滤，并且用1∶1IPA/水(2×2.4mL)洗涤。将产物在氮气流下干燥，然后在二氯甲烷中于20℃浆化4小时，过滤并且在氮气流下干燥，获得了1-5e，为灰白色固体。
8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘 -3(2H)-酮(1-16)
在50℃将浓HCl水溶液(12.1M，1.64mL)在乙醇(2.0mL)中的溶液用30分钟滴加到1-5e(500mg，0.985mol)在乙醇(1.7mL)和水(0.2mL)内的搅拌着的浆液中。加入酸3小时后，向该混合物中加入晶种，并且在50℃老化过夜，冷却至室温并过滤。在0℃用小时将乙酰氯(0.5g，7mmol)加到乙醇(2mL)中。然后将该溶液冷却至室温，并且老化30分钟。将滤饼用该溶液(1mL×2)洗涤，然后用乙酸乙酯(4mL×2)洗涤，并且干燥，最后在真空烘箱中于75.0℃在氮气吹扫(50托)下干燥，直至通过XRPD表明由1-16形式IV转化成形式II。
反应方案1A中采用的方法给出了称为形式I的结晶二-HCl盐1-16。反应方案1E中描述的方法生成了二-HCl盐1-16的三种新多晶型物，称为形式II、III和IV。发现，在氮气吹扫下将形式III或形式IV减压干燥后，它们完全转化成了形式II。将形式I和II的混合物在酸性乙醇中浆化，在浆液中生成了形式III。分离形式III，并且如上所述干燥，生成了形式II。
通过在水中溶解，还生成了1-16的单-HCl盐。6小时后，水浆液变为浅黄色，并且将其过滤。该固体的氯化银滴定显示了存在1当量氯化物。最好，用KOH水溶液(2当量)处理二-HCl盐1-16，获得了中性1-16，这是通过氯化物滴定确定的。
反应方案1F
Figure G2007800509679D01031
{1-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁 基}氨基甲酸叔丁酯(1-6f)
向圆底烧瓶中加入EDC(4.63g，24.17mmol)、HOBt(3.27g，24.17mmol)、无水DCM(50mL)和乙酸(13.2mL，13.86mmol)。然后将该反应混合物在室温于氮气氛下搅拌30分钟。加入{1-[4-(5-肼基-3-苯基-1，6-二氮杂萘-2-基)苯基]环丁基}氨基甲酸叔丁酯(1-6)(10.58g，21.97mmol)。让该反应混合物在室温于氮气氛下搅拌过夜(18小时)，然后在80℃加热2小时。将该反应混合物悬浮在乙酸乙酯中，缓慢地倒入饱和碳酸氢钠溶液中，之后倒入水和盐水中，用硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。通过硅胶色谱纯化所得残余物(1-20％ IPA/DCM)。将合适的级份合并，并且真空除去溶剂，获得了{1-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁基}氨基甲酸叔丁酯(1-6f)，为褐色固体。MS(M+H)+：实测值＝506.2，计算值＝506.6。
1-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁 胺盐酸盐(1-17)
向{1-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁基}氨基甲酸叔丁酯(1-6f)(9.23g，18.26mmol)在MeOH(20mL)和DCM(100mL)内的溶液中加入4N HCl在EtOAc中的溶液(91mL，365mmol)。让密封的反应混合物在室温搅拌。18小时后，将该反应混合物过滤，获得了1-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺盐酸盐(1-17)，为灰白色固体。HRMS(M+H)+：实测值＝406.2047，计算值＝406.2026。
反应方案1G
Figure G2007800509679D01051
{1-[4-(3-环丙基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环 丁基}氨基甲酸叔丁酯(1-6g)
向圆底烧瓶中加入EDC(535mg，2.79mmol)、HOBt(377mg，2.79mmol)、无水DCM(17.5mL)、无水NMP(.2.5mL)和环丙烷甲酸(248mg，5.40mmol)。然后将该反应混合物在室温于氮气氛下搅拌30分钟。加入{1-[4-(5-肼基-3-苯基-1，6-二氮杂萘-2-基)苯基]环丁基}氨基甲酸叔丁酯(1-6)(1.221g，2.54mmol)。然后将该反应混合物在室温于氮气氛下搅拌过夜(18小时)。加入乙酸(2.178mL，38.0mmol)，并且将该反应混合物在热油浴中于80℃加热2小时。将该反应混合物冷却至室温，加入乙酸乙酯，并且将该混合物用饱和碳酸氢钠溶液、水和盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。通过硅胶色谱纯化所得残余物90％EtOAc/DCM(等度)。将合适的级份合并，并且真空除去溶剂，获得了{1-[4-(3-环丙基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁基}氨基甲酸叔丁酯(1-6g)，为粉色固体。HRMS(M+H)+：实测值＝532.2729，计算值＝532.2707。
1-[4-(3-环丙基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环 丁胺盐酸盐(1-23)
向{1-[4-(3-环丙基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁基}氨基甲酸叔丁酯(MJK-9)(899.4mg，18.26mmol)在MeOH(5mL)和DCM(15mL)内的溶液中加入4N HCl在EtOAc中的溶液(4.23mL，16.92mmol)。让密封的反应混合物在室温搅拌。18小时后，将该反应混合物过滤，获得了1-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺盐酸盐(1-23)，为黄色固体。HRMS(M+H)+：实测值＝432.2186，计算值＝432.2183。
反应方案2
Figure G2007800509679D01061
{1-[4-(4-氟苯基乙酰基)苯基]环丁基}氨基甲酸叔丁酯(2-1)
化合物{1-[4-(4-氟苯基乙酰基)苯基]环丁基}氨基甲酸叔丁酯(2-1)是按照类似于1-3的方法由溴化4-氟苄基镁制得的；MS(M+H)+＝327.2。
{1-[4-(5-氯-3-(4-氟苯基)-1，6-二氮杂萘-2-基)苯基]环丁基}氨基甲酸叔 丁酯(2-2)
化合物{1-[4-(5-氯-3-(4-氟苯基)-1，6-二氮杂萘-2-基)苯基]环丁基}氨基甲酸叔丁酯(2-2)是按照类似于1-5的方法制备的；MS(M+H)+＝504.2。
{1-[4-(5-肼基-3-(4-氟苯基)-1，6-二氮杂萘-2-基)苯基]环丁基}氨基甲酸 叔丁酯(2-3)
化合物{1-[4-(5-肼基-3-4-氟苯基-1，6-二氮杂萘-2-基)苯基]环丁基}氨基甲酸叔丁酯(2-3)是按照类似于1-6的方法制备的；MS(M+H)+＝500.3。
{1-[4-(5-{2-[(1-甲基-1H-咪唑-4-基)羰基]肼基}-3-(4-氟苯基)-1，6-二氮杂 萘-2-基)苯基]环丁基}氨基甲酸叔丁酯(2-4)
化合物{1-[4-(5-{2-[(1-甲基-1H-咪唑-4-基)羰基]肼基}-3-(4-氟苯基)-1，6-二氮杂萘-2-基)苯基]环丁基}氨基甲酸叔丁酯(2-4)是按照类似于1-7的方法制备的；MS(M+H)+＝608.4。
(1-{4-[3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9-(4-氟苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二 氮杂萘-8-基]苯基}环丁基)氨基甲酸叔丁酯(2-5)
化合物(1-{4-[3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9-(4-氟苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁基)氨基甲酸叔丁酯(2-5)是按照类似于1-8的方法制备的；MS(M+H)+＝590.4。
1-{4-[3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9-(4-氟苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二 氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺二盐酸盐(2-6)
化合物1-{4-[3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9-(4-氟苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺二盐酸盐(2-6)是按照类似于1-9的方法制备的；MS(M+H)+＝490.3。
化合物2-7
Figure G2007800509679D01081
1-{4-[3-甲基-9-(4-氟苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基} 环丁胺二盐酸盐(2-7)
化合物2-7是按照类似于实施例2-6的方法制备的；MS(M+H)+＝424.2。
反应方案3
(1-{4-[3-(乙基氨基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基} 环丁基)氨基甲酸叔丁酯(3-1)
向微波瓶中加入{1-[4-(5-肼基-3-苯基-1，6-二氮杂萘-2-基)苯基]环丁基}氨基甲酸酯(1-6)(51.2mg，0.106mmol)、EDC(102mg，0.532mmol)和DMF(0.6mL)。将该反应混合物在微波照射下于80℃(高吸收)加热5分钟。加入乙酸(0.5mL)，并且将该反应混合物在微波照射下于80℃(高吸收)加热5分钟。通过反相柱色谱纯化所得残余物(SunfireC18)，用5-95％乙腈/(0.1％ TFA/水)进行梯度洗脱。通过悬浮在乙酸乙酯中来将合适的级份游离碱化，依次用饱和碳酸氢钠溶液、水、盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩，获得了(1-{4-[3-(乙基氨基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁基)氨基甲酸叔丁酯(3-1)，为灰白色固体。HRMS(M+H)+：实测值＝535.2800，计算值＝535.2816。
1-{4-[3-(乙基氨基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基} 环丁胺二盐酸盐(3-2)
向3-1(108mg，0.202mmol)在MeOH(2niL)和DCM(5mL)内的溶液中加入4N HCl在EtOAc中的溶液(5mL，20mmol)。将盖上的反应混合物在室温搅拌。4小时后，将该反应混合物真空浓缩，获得了1-{4-[3-(乙基氨基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺二盐酸盐(3-2)，为黄色固体。HRMS(M+H)+：实测值＝435.2302，计算值＝435.2292。
按照类似于实施例3-2的方法制备了下列化合物：
Figure G2007800509679D01101
反应方案4
Figure G2007800509679D01102
[1-(4-氯苯基)环戊基]氨基甲酸叔丁酯(4-1)
化合物4-1是按照类似于1-1的方法制备的；HRMS(M+Na)+：实测值＝318.1233，计算值＝318.1231。
[1-(4-氰基苯基)环戊基]氨基甲酸叔丁酯(4-2)
化合物4-2是按照类似于1-2的方法制备的；MS(M-55)：实测值＝231.2。
{1-[4-(苯基乙酰基)苯基]环戊基}氨基甲酸叔丁酯(4-3)
化合物4-3是按照类似于1-3的方法制备的；MS(M+H)+＝380.2。
{1-[4-(5-氯-3-苯基-1，6-二氮杂萘-2-基)苯基]环戊基}氨基甲酸叔丁酯 (4-4)
化合物4-4是按照类似于1-4的方法制备的；HRMS(M+H)+：实测值＝500.2082，计算值＝500.2100。
{1-[4-(5-肼基-3-苯基-1，6-二氮杂萘-2-基)苯基]环戊基}氨基甲酸叔丁酯 (4-5)
化合物4-5是按照类似于1-6的方法制备的；HRMS(M+H)+：实测值＝496.2702，计算值＝496.2707。
(1-{4-[3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂 萘-8-基]苯基}环戊基)氨基甲酸叔丁酯(4-6)
化合物4-6是按照类似于1-8的方法制备的；HRMS(M+H)+：实测值＝586.2910，计算值＝586.2925。
1-{4-[3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘 -8-基]苯基}环戊胺二盐酸盐(4-7)
化合物4-7是按照类似于1-9的方法制备的；HRMS(M+H)+：实测值＝486.2401，计算值＝486.239。
化合物4-8
Figure G2007800509679D01121
1-{4-[3-甲基-9-(4-氟苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基} 环戊胺盐酸盐(4-8)
化合物4-8是按照类似于实施例4-7的方法制得的；HRMS(M+H)+：实测值＝420.2176，计算值＝420.2183。
化合物5-1
Figure G2007800509679D01122
1-{4-[3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘 -8-基]苯基}环己胺二盐酸盐(5-1)
化合物5-1是按照类似于1-9的方法由1-(4-氯苯基)环己烷甲酸制得的；MS(M+H)+：实测值＝502，计算值＝502。
化合物5-2
1-{4-[3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环己 胺盐酸盐(5-2)
化合物5-2是按照类似于实施例5-1的方法制得的；MS(M+H)+：实测值＝435，计算值＝435。
化合物6-1
Figure G2007800509679D01131
8-[4-(1-氨基环己基)苯基]-N-乙基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮 杂萘-3-胺二盐酸盐(6-1)
化合物6-1是按照类似于实施例3-2的方法制备的；MS(M+H)+：实测值＝465，计算值＝465。
反应方案7
1-(4-溴苯基)环丁烷甲酸(7-1)
将1-(4-溴苯基)环丁烷甲腈(1-2c，12.04g，51.0mmol)、氢氧化钾(11.44g，204mmol)和乙二醇(50mL，897mmol)加热回流4小时。将该反应混合物冷却至室温，然后用EtOAc和水稀释。将水层用1M HCl酸化，然后萃取到EtOAc内。将有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，获得了7-1，为褐色油状物。
[1-(4-溴苯基)环丁基]氨基甲酸叔丁酯(7-2)
将1-(4-溴苯基)环丁烷甲酸(7-1，10.89g，42.7mmol)、Boc酐(10.90mL，47.0mmol)、叠氮化钠(9.71g，149mmol)、溴化四丁基铵(2.048mL，6.40mmol)和三氟甲磺酸锌(0.155g，0.427mmol)在THF(100ml)中于60℃搅拌4小时。将该反应混合物冷却至室温，向该混合物中加入EtOAc和饱和碳酸氢钠水溶液。将该悬浮液经由玻璃料过滤，并且将滤液用EtOAc萃取，用水和盐水洗涤。将有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩至褐色油状物。通过正相快速色谱法纯化粗产物，用5-15％EtOAc/己烷洗脱，获得了7-2，为白色固体。
{1-[4-(苯基乙炔基)苯基]环丁基}氨基甲酸叔丁酯(7-3)
将碘化铜(I)(0.092g，0.481mmol)和二(三叔丁基膦)钯(0)(0.369g，0.722mmol)溶解在1，4-二氧杂环己烷(4ml)中，抽空，并且用氮气回填。经由注射器滴加二异丙基胺(16.23ml，116mmol)、[1-(4-溴苯基)环丁基]氨基甲酸叔丁酯(7-2，7.85g，24.06mmol)和苯基乙炔(12.68ml，116mmol)的溶液。将该反应混合物搅拌过夜，通过LCMS检查原料已经完全消耗。加入EtOAc，然后将该混合物经由二氧化硅过滤，用EtOAc洗涤。将滤液真空浓缩，通过正相快速色谱纯化残余物，用50-100％CH2Cl2/己烷洗脱，获得了7-3，为棕色油状物。MS(M+H)+：实测值＝348.1，计算值＝348.2。
(1-{4-[氧代(苯基)乙酰基]苯基}环丁基)氨基甲酸叔丁酯(7-4)
向{1-[4-(苯基乙炔基)苯基]环丁基}氨基甲酸叔丁酯(7-3，6.65g，19.14mmol)在无水丙酮(38.3mL)内的溶液中加入KMnO4(12.10g，77mmol)。将该反应混合物在35℃加热2小时。将该反应混合物冷却至室温，向该混合物中加入EtOAc和水。将该悬浮液经由玻璃料过滤，并且将滤液萃取到EtOAc内用水和盐水洗涤。将有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，获得了7-4，为棕色油状物。
{1-[4-(6-氯-3-苯基吡啶并[2，3-b]吡嗪-2-基)苯基]环丁基}甲基氨基甲酸 叔丁酯(7-5-1)和{1-[4-(6-氯-2-苯基吡啶并[2，3-b]吡嗪-3-基)苯基]环丁基} 氨基甲酸叔丁酯(7-5-2)
向6-氯吡啶-2，3-二胺(8-1，1.706g，11.89mmol)和(1-{4-[氧代(苯基)乙酰基]苯基}环丁基)氨基甲酸叔丁酯(7-4，4.51g，11.89mmol)在乙醇(50mL)内的溶液中加入乙酸(40ml，699mmol)。将该混合物在60℃搅拌45分钟。将该反应混合物冷却至室温，用EtOAc稀释，并且用饱和碳酸氢钠水溶液、水和盐水洗涤。将有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余油状物通过正相快速色谱纯化，用7-50％EtOAc/己烷洗脱，获得了7-5-1和7-5-2的混合物。MS(M+H)+：实测值＝487.1，计算值＝487.2
{1-[4-(6-肼基-3-苯基吡啶并[2，3-b]吡嗪-2-基)苯基]环丁基}氨基甲酸叔 丁酯(7-6-1)和{1-[4-(6-肼基-2-苯基吡啶并[2，3-b]吡嗪-3-基)苯基]环丁基} 氨基甲酸叔丁酯(7-6-2)
将{1-[4-(6-氯-3-苯基吡啶并[2，3-b]吡嗪-2-基)苯基]环丁基}甲基氨基甲酸叔丁酯(7-5-1)和{1-[4-(6-氯-2-苯基吡啶并[2，3-b]吡嗪-3-基)苯基]环丁基}氨基甲酸叔丁酯(7-5-2)的混合物(1.97g，4.05mmol)和肼(2.54ml，81mmol)溶解在二氧杂环己烷(10ml)中，并且加热回流2小时。将该反应混合物冷却至室温，用EtOAc稀释，并且用饱和碳酸氢钠水溶液、水和盐水洗涤。将有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余油状物通过正相快速色谱纯化，用5-50％ MeOH/CH2Cl2洗脱，获得了(7-6-1)和(7-6-2)的混合物，为棕色固体。MS(M+H)+：实测值＝483.1，计算值＝483.2
{1-[4-(2-苯基-9-吡啶-4-基[1，2，4]三唑并[4’，3’:1，6]吡啶并[2，3-b]吡嗪-3- 基)苯基]环丁基}氨基甲酸叔丁酯(7-7-1)和{1-[4-(3-苯基-9-吡啶-4-基 [1，2，4]三唑并[4’，3’:1，6]吡啶并[2，3-b]吡嗪-2-基)苯基]环丁基}氨基甲酸 叔丁酯(7-7-2)
将{1-[4-(6-肼基-3-苯基吡啶并[2，3-b]吡嗪-2-基)苯基]环丁基}氨基甲酸叔丁酯(7-6-1)和{1-[4-(6-肼基-2-苯基吡啶并[2，3-b]吡嗪-3-基)苯基]环丁基}氨基甲酸叔丁酯的混合物(7-6-2)(921mg，1.912mmol)、异烟酸(1.91mmol)、EDC(403mg，2.104mmol)和HOBT(322mg，2.104mmol)溶解在DMF(4ml)中，并且在微波下于100℃加热15分钟。将该反应混合物冷却至室温，萃取到EtOAc内，用饱和碳酸氢钠水溶液、水和盐水洗涤。将有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将中间体粗产物溶解在AcOH(5ml，52.4mmol)和DMF(1ml)中，并且在微波下于100℃加热15分钟。将该反应混合物冷却至室温并真空浓缩，获得了(7-7-1)和(7-7-2)的混合物。MS(M+H)+：实测值＝570.2，计算值＝570.3
3-[4-(1-铵基环丁基)苯基]-2-苯基-9-吡啶-4-基[1，2，4]三唑并[4’，3’:1，6]吡 啶并[2，3-b]吡嗪-8-鎓二(三氟乙酸盐)(7-8-1)和2-[4-(1-铵基环丁基)苯 基]-3-苯基-9-吡啶-4-基[1，2，4]三唑并[4’，3’:1，6]吡啶并[2，3-δ]吡嗪-8-鎓 二(三氟乙酸盐)(7-8-2)
将{1-[4-(2-苯基-9-吡啶-4-基[1，2，4]三唑并[4’，3’:1，6]吡啶并[2，3-b]吡嗪-3-基)苯基]环丁基}氨基甲酸叔丁酯(7-7-1)和{1-[4-(3-苯基-9-吡啶-4-基[1，2，4]三唑并[4’，3’:1，6]吡啶并[2，3-b]吡嗪-2-基)苯基]环丁基}氨基甲酸叔丁酯(7-7-2)的混合物(1.091g，1.915mmol)溶解在EtOAc中，加入饱和HCl/EtOAc(10mL)，并且将该反应用盖子封闭1小时。将该溶液真空浓缩，通过自动反相色谱纯化(乙腈/水，0.1％ TFA梯度)，获得了7-8-1和7-8-2.MS(M+H)+：实测值＝470.1，计算值＝470.2。
化合物7-9
Figure G2007800509679D01171
1-[4-(2-苯基-9-吡啶-3-基[1，2，4]三唑并[4’，3’:1，6]吡啶并[2，3-b]吡嗪-3-基) 苯基]环丁胺(7-9)
化合物7-9是按照类似于制备化合物7-8-1的方法制得的。MS(M+H)+：实测值＝470.0，计算值＝470.2。
反应方案8
Figure G2007800509679D01181
1-[4-(2-苯基-9-吡嗪-2-基[1，2，4]三唑并[4’，3’:1，6]吡啶并[2，3-b]吡嗪-3-基) 苯基]环丁胺盐酸盐(8-8)
6-氯-3-苯基吡啶并[2，3-b]吡嗪-2-醇(8-2)
向6-氯吡啶-2，3-二胺(8-1，Oguchi，等人，J.Med.Chem.(2000)，43，3052-3066；15g，105mmol)在DMF(53mL)内的搅拌着的溶液中加入氧代(苯基)乙酸乙酯(23mL，160mmol)和DEPEA(37ml，210mmol)。72小时后，将该反应浓缩至干。将所得残余物悬浮在乙酸乙酯/水中，并过滤，获得了8-2，为固体。将有机相用水、NaHCO3和盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将粗混合物悬浮在DCM(200mL)中并过滤，获得了另一批8-2，为固体。MS计算值：257.7；实测值：258.0。
6-肼基-3-苯基吡啶并[2，3-b]吡嗪-2-醇(8-3)
向烧瓶中依次加入6-氯-3-苯基吡啶并[2，3-b]吡嗪-2-醇(8-2，3.41g，13.23mmol)、无水肼(5.0mL，159mmol)和1，4-二氧杂环己烷(60mL)。然后将该搅拌着的反应混合物在连接有气冷回流冷凝器的热油浴中加热至100℃。反应完全后，将该反应混合物冷却至室温，悬浮在乙酸乙酯中，并且依次用饱和碳酸氢钠溶液、水和盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩，获得了8-3，为橙色/褐色泡沫状物。HRMS(M+H)+：实测值＝254.1041，计算值＝254.1037。
N’-(2-羟基-3-苯基吡啶并[2，3-b]吡嗪-6-基)吡嗪-2-甲酰肼(8-4)
向微波瓶中依次加入6-肼基-3-苯基吡啶并[2，3-b]吡嗪-2-醇(8-4，1.0g，3.95mmol)、EDC(0.757g，3.95mmol)、HOBt(0.534g，3.95mmol)、吡嗪-2-甲酸(0.490g，3.95mmol)和NMP(15mL)。然后将该反应混合物在微波照射下于100℃加热5分钟。将该反应混合物冷却至室温，悬浮在乙酸乙酯中，并且用半饱和碳酸氢钠溶液洗涤。将该悬浮液过滤，用水洗涤固体，然后用乙醚洗涤。将残余物真空干燥，获得了8-4，为棕色固体。HRMS(M+H)+：实测值＝360.1217，计算值＝360.1204。
3-氯-2-苯基-9-吡嗪-2-基[1，2，4]三唑并[4’，3’:1，6]吡啶并[2，3-b]吡嗪(8-5)
向微波瓶中依次加入N’-(2-羟基-3-苯基吡啶并[2，3-b]吡嗪-6-基)吡嗪-2-甲酰肼(8-4，0.412g，1.147mmol)、MeCN(5.0mL)和三氯氧化磷(0.687mL，7.37mmol)。然后将该反应混合物在热油浴中于100℃加热(用盖子封闭)过夜。将该反应混合物冷却至室温，用MeCN稀释，并真空浓缩。然后将所得残余物悬浮在乙酸乙酯中中，依次用饱和碳酸氢钠溶液、水和盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩，获得了8-5，为棕色固体。HRMS(M+H)+：实测值＝360.0773，计算值＝360.0759。
{1-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]环丁基}氨基 甲酸叔丁酯(8-6)
将[1-(4-氯苯基)环丁基]氨基甲酸叔丁酯(1-1，2g，7mmol)和Pd(PBu3)2(0.1g，0.2mmol)、KOAc(1g，10.6mmol)和4，4，4′，4′，5，5，5′，5′-八甲基-2，2′-联-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷(2g，8.5mmol)在1，4-二氧杂环己烷(51mL)中的混合物于80℃搅拌46小时。将该反应混合物冷却，并且过滤，将滤液真空浓缩，并且在EtOAc与饱和NaHCO3之间分配。将有机层依次用水和盐水洗涤，分离并且用MgSO4干燥。除去溶剂后，将残余物溶解在有限量的DMSO中，并且通过快速硅胶色谱纯化(100％己烷至90％己烷/10％EtOAc)，获得了8-6，为白色固体。MS(M+H)+：实测值＝374.3，计算值＝374.3
{1-[4-(2-苯基-9-吡嗪-2-基[1，2，4]三唑并[4’，3’:1，6]吡啶并[2，3-b]吡嗪-3- 基)苯基]环丁基}氨基甲酸叔丁酯(8-7)
向微波瓶中加入3-氯-2-苯基-9-吡嗪-2-基[1，2，4]三唑并[4’，3’:1，6]吡啶并[2，3-b]吡嗪(8-5，0.151g，0.421mmol)、{1-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]环丁基}氨基甲酸叔丁酯(8-6，0.236g，0.631mmol)、碳酸钾(0.174g，1.262mmol)、二(三叔丁基膦)钯(0)(21.51mg，0.042mmol)、水(0.2mL)、NMP(0.2mL)和1，4-二氧杂环己烷(0.8mL)。然后将该反应混合物在微波照射下于80℃加热10分钟。将该反应混合物冷却至室温，用NMP/MeOH稀释，并且经由注射滤器过滤。将所得残余物通过反相柱色谱纯化(Sunfire C18)，用5-100％乙腈/(0.1％TFA/水)进行梯度洗脱。然后将合适的级份真空浓缩，获得了8-7，为绿色固体。HRMS(M+H)+：实测值＝571.2591，计算值＝571.2565。
1-[4-(2-苯基-9-吡嗪-2-基[1，2，4]三唑并[4’，3’:1，6]吡啶并[2，3-b]吡嗪-3-基) 苯基]环丁胺盐酸盐(8-8)
将4N HCl在EtOAc中的溶液(10mL，40mmol)加到{1-[4-(2-苯基-9-吡嗪-2-基[1，2，4]三唑并[4’，3’:1，6]吡啶并[2，3-b]吡嗪-3-基)苯基]环丁基}氨基甲酸叔丁酯(8-7，0.110g，0.193mmol)在MeOH(2mL)和DCM(2mL)内的搅拌着的溶液中。4小时后，将该反应混合物真空浓缩，获得了1-[4-(2-苯基-9-吡嗪-2-基[1，2，4]三唑并[4’，3’:1，6]吡啶并[2，3-b]吡嗪-3-基)苯基]环丁胺盐酸盐(8-8)，为橙色/褐色固体。HRMS(M+H)+：实测值＝471.2076，计算值＝471.2040。
化合物8-9
Figure G2007800509679D01211
1-[4-(2-苯基-9-丙基[1，2，4]三唑并[4’，3’:1，6]吡啶并[2，3-b]吡嗪-3-基)苯 基]环丁胺(8-9)
化合物8-9是按照类似于制备化合物8-8的方法制得的。MS(M+H)+：实测值＝435.2276，计算值＝435.2292。
反应方案9
Figure G2007800509679D01212
{1-[4-(3-乙氧基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环 丁基}氨基甲酸叔丁酯(9-1)
向微波瓶中依次加入{1-[4-(3-羟基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁基}氨基甲酸叔丁酯(1-5e)(113mg，0.223mmol)、氧化银(310mg，1.336mmol)、溴乙烷(0.062mL，0.826mmol)和NMP(1mL)。然后将该反应混合物在微波照射下于80℃加热10分钟。将该反应混合物过滤后，通过反相柱色谱纯化(Sunfire C18)，用20-100％乙腈/(0.1％ TFA/水)进行梯度洗脱。然后将合适的级份合并，悬浮在乙酸乙酯中，依次用饱和碳酸氢钠溶液、水和盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，获得了{1-[4-(3-乙氧基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁基}氨基甲酸叔丁酯(9-1)，为褐色固体。MS(M+H)+：实测值＝536.4，计算值＝536.64。
1-[4-(3-乙氧基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环 丁胺(1-100)
将{1-[4-(3-乙氧基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁基}氨基甲酸叔丁酯(9-1)(0.775g，0.133mmol)溶解在MeOH(2mL)和DCM(2mL)中，加入4N HCl在EtOAc中的溶液(10mL，40mmol)。然后将该反应混合物在室温搅拌，用盖子封闭，但是不在氮气氛下。1小时后，将该反应混合物真空浓缩，通过反相柱色谱纯化所得残余物(Sunfire C18)，用5-95％乙腈/(0.1％ TFA/水)进行梯度洗脱。然后将合适的级份合并，悬浮在乙酸乙酯中，依次用饱和碳酸氢钠溶液、水和盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，获得了1-[4-(3-乙氧基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺(1-100)，为灰白色固体。HRMS(M+H)+：实测值＝436.215，计算值＝436.2132。
实施例1
人Akt同工型和ΔPH-Akt1的克隆
pS2neo载体(于2001年4月3日保藏于ATCC，保藏号为ATCCPTA-3253)按下述方法制备：用BglII切割pRmHA3载体(按照Nucl.AcidRes.16：1043-1061(1988)中介绍的方法制备)，分离出2734bp片段。也用BglII切割pUChsneo载体(按照EMBO J.4：167-171(1985)中介绍的方法制备)，分离出4029bp片段。将所分离出的这两个片段连接起来产生载体，被称为pS2neo-1。该质粒在金属硫蛋白启动子和醇脱氢酶聚腺苷酸添加位点间含有多接头。它还有一个热休克启动子驱动的neo抗性基因。用Psp5II和BsiWI切割pS2neo-1载体。合成两个互补寡核苷酸，然后退火(CTGCGGCCGC(SEQ.ID.NO.：1)和GTACGCGGCCGCAG(SEQ.ID.NO.：2))。将经切割的pS2neo-1与经退火的寡核苷酸连接起来产生第二个载体，即pS2neo。这一基因转变加入了NotI位点，有助于在转染到S2细胞前线性化。
用以下引物将人脾cDNA(Clontech)通过PCR(Clontech)扩增人Akt1基因：5’引物：
5’CGCGAATTCAGATCTACCATGAGCGACGTGGCTATTGTG 3’(SEQ.ID.NO.：3)，和3’引物：5’CGCTCTAGAGGATCCTCAGGCCGTGCTGCTGGC3’(SEQ.ID.NO.：4)。5’引物包括EcoRI和BglII位点。3’引物包括用于克隆目的的XbaI和BamHI位点。所得的PCR产物作为EcoRI/Xba I片段亚克隆到pGEM3Z(Promega)中。为了表达/纯化目的，用PCR引物：
5’GTACGATGCTGAACGATATCTTCG 3’(SEQ.ID.NO.：5)。在全长Akt1基因的5’末端加上中间T标记。所得的PCR产物包含5’KpnI位点和3’BamHI位点，用于与含有生物素标记的昆虫细胞表达载体pS2neo一起符合读框地亚克隆所述片段。
为了表达Akt1的血小板白细胞C激酶底物同系结构域(PH)缺失模型(Δaa 4-129，其中包括Akt1铰链区一部分的缺失)，用pS2neo载体中的全长Akt1基因作为模板，进行PCR缺失诱变。分两步进行PCR，使用重叠内部引物
(5’GAATACATGCCGATGGAAAGCGACGGGGCTGAAGAGATGGAGGTG 3’(SEQ.ID.NO.：6)，和5’CCCCTCCATCTCTTCAGCCCCGTCGCTTTCCATCGGCATGTATTC 3’(SEQ.ID.NO.：7))，该重叠内部引物包含缺失；以及5’和3’侧翼引物，该5’和3’侧翼引物在5’端具有KpnI位点和中间T标记。最终的PCR产物用KpnI和SmaI消化，并连接成为pS2neo全长Akt1 KpnI/SmaI切割载体，用缺失形式有效地替换克隆的5’端。
用氨基端寡聚引物：
5’GAATTCAGATCTACCATGAGCGATGTTACCATTGTG 3’(SEQ.ID.NO.：8)；和羧基端寡聚引物：
5’TCTAGATCTTATTCTCGTCCACTTGCAGAG 3’(SEQ.ID.NO.：9)。
通过成年脑cDNA(Clontech)的PCR，扩增人Akt3基因。这些引物包括用于克隆目的的5’EcoRI/BglII位点和3’XbaI/BglII位点。将所得的PCR产物克隆到pGEM4Z(Promega)的EcoRI和XbaI位点。为了表达/纯化目的，用PCR引物将中间T标记加到全长Akt3克隆的5’端，该PCR引物为：
5’GGTACCATGGAATACATGCCGATGGAAAGCGATGTTACCATTGTGAAG
3’(SEQ.ID.NO.：10)。所得的PCR产物包含5’KpnI位点，允许用含有生物素标记的昆虫细胞表达载体pS2neo进行符合读框地克隆。
用以下引物，通过从人胸腺cDNA(Clontech)的PCR扩增人Akt2基因：氨基端寡聚引物
5’AAGCTTAGATCTACCATGAATGAGGTGTCTGTC 3’(SEQ.ID.NO.：11)；和羧基端寡聚引物：5’GAATTCGGATCCTCACTCGCGGATGCTGGC 3’(SEQ.ID.NO.：12)。这些引物包括用于克隆目的的5’HindIII/BglII位点和3’EcoRI/BamHI位点。所得的PCR产物可亚克隆到pGem3Z(Promega)的HindIII/EcoRI位点。为了表达/纯化目的，用PCR引物：
5’GGTACCATGGAATACATGCCGATGGAAAATGAGGTGTCTGTCATCAAAG 3’(SEQ.ID.NO.：13)。将中间T标记加到全长Akt2的5’端。所得的PCR产物亚克隆到如上所述的pS2neo载体内。
实施例2
人Akt同工型和ΔPH-Akt1的表达
用磷酸钙方法，将pS2neo表达载体中含有经克隆的Akt1、Akt2、Akt3和ΔPH-Akt1基因的DNA纯化，并转染果蝇(Drosophila)S2细胞(ATCC)。选出抗生素(G418，500μg/ml)抗性细胞集合体。将细胞扩展至1.0L体积(约7.0×106/ml)，加入生物素和CuSO4，使之终浓度分别为50μM和50mM。细胞在27℃下生长72小时，通过离心收获。细胞沉淀物(paste)置于-70℃冷藏待用。
实施例3
人Akt同工型和ΔPH-Akt1的纯化
将实施例2中描述的由1L S2细胞中得到的细胞沉淀物，在50ml含1％CHAPS的缓冲液A(50mM Tris pH 7.4、1mM EDTA、1mM EGTA、0.2mM AEBSF、10μg/ml苯甲脒、各5μg/ml的亮抑酶肽、抑蛋白酶肽和抑胃酶肽、10％甘油和1mM DTT)中，用超声处理进行裂解。可溶性部分用装有9mg/ml抗中间T单克隆抗体的G蛋白琼脂糖凝胶(Sepharose)快流(Pharmacia)柱纯化，用75μM EYMPME(SEQ.ID.NO.：14)肽于含25％甘油的缓冲液A中的溶液洗脱。合并含有Akt/PKB的级分，通过SDS-PAGE对蛋白质纯度进行评价。使用标准Bradford方案定量测定纯化蛋白质。用液氮快速冷冻纯化蛋白质，并贮藏于-70℃。
需要激活从S2细胞中纯化的Akt和Akt血小板白细胞C激酶底物同系结构域缺失。Akt和Akt血小板白细胞C激酶底物同系结构域缺失在含有下述成分的反应物中被激活(Alessi等，Current Biology 7：261-269)：10nM PDK1(Upstate Biotechnology，Inc.)、脂囊泡(10μM磷脂酰肌醇-3，4，5-三磷酸(Metreya，Inc.)、100μM磷脂酰胆碱和100μM磷脂酰丝氨酸(Avanti Polar lipids，Inc.))以及激活缓冲液(50mM TrispH7.4、1.0mM DTT、0.1mM EGTA、1.0μM微囊藻素—LR、0.1mM ATP、10mM MgCl2、333μg/ml BSA和0.1mM EDTA)。反应物在22℃下孵育4小时。将等分试样在液氮中快速冷冻。
实施例4
Akt激酶测定
用GSK衍生生物素化肽底物，对活化的Akt同种型和血小板白细胞C激酶底物同系结构域缺失构建体进行测定。可使用对磷酸肽特异性的镧螯合物(Lance)偶联的单克隆抗体，以及将会在肽上与生物素部分结合的与链霉抗生物素蛋白连接的别藻蓝蛋白(allophycocyanin)(SA-APC)荧光团，通过均相时间分辨荧光(HTRF)测定肽磷酸化的程度。当镧螯合物和APC接近时(即与同一磷酸肽分子结合)，从镧螯合物到APC产生非辐射能量转移，随后在665nm从APC发出发射光。
测定所需的材料：
A.活化的Akt同工酶或血小板白细胞C激酶底物同系结构域缺失构建体；
B.Akt肽底物：GSK3α(S21)肽#3928生物素-GGRARTSSFAEPG(SEQ.ID.NO.：15)，MacromolecularResources；
C.Lance标记的抗磷酸GSK3α单克隆抗体(Cell SignalingTechnology，克隆#27)；
D.SA-APC(Prozyme目录号PJ25S批号896067)；
E.Microfluor
Figure G2007800509679D01251
B U形底微量滴定板(Dynex Technologies，目录号7205)；
F.Discovery
Figure G2007800509679D01252
HTRF微型板分析仪，Packard InstrumentCompany；
G.100×蛋白酶抑制剂混合物(Protease Inhibitor Cocktail)(PIC)：1mg/ml苯甲脒，0.5mg/ml抑胃酶肽，0.5mg/ml亮抑酶肽，0.5mg/ml抑蛋白酶肽；
H.10X测定缓冲液：500mM HEPES，pH 7.5，1％PEG，mMEDTA，1mM EGTA，1％ BSA，20mM 
Figure G2007800509679D01261
-甘油磷酸酯；
I.猝灭缓冲液：50mM HEPES pH 7.3，16.6mM EDTA，0.1％BSA，0.1％Triton X-100，0.17nM Lance标记的单克隆抗体克隆#27，0.0067mg/ml SA-APC；
J.ATP/MgCl2使用液：1X测定缓冲液，1mM DTT，1X PIC，125mM KCl，5％甘油，25mM MgCl2，375TM ATP；
K.酶使用液：1X测定缓冲液，1mM DTT，1X PIC，5％甘油，活性Akt。选择最终的酶浓度，使得测定在线性反应范围内；
L.肽使用液：1X测定缓冲液，1mM DTT，1X PIC，5％甘油，2TM GSK3生物素化肽#3928。
在96孔微量滴定板适当的孔中加入16TL ATP/MgCl2使用液，以便组建反应。加入抑制剂或媒介物(1.0Tl)，随后加入10Tl肽使用液。加入13Tl酶使用液并混合，反应即开始。反应进行50分钟，然后加入60Tl HTRF猝灭缓冲液停止反应。在室温下，孵育停止反应的反应物至少30分钟，然后在Discovery仪器上读数。
用于抗生物素蛋白链菌素快速板测定的方法：
步骤1：
将1μl测试化合物的100％ DMSO溶液加入到20μl 2X底物溶液(20uM GSK3肽，300μM ATP，20mM MgCl2，20μCi/ml[γ33P]ATP，IX测定缓冲液，5％甘油，1mM DTT，1X PIC，0.1％BSA和100mM KCl)中。通过加入19μl 2X酶溶液(6.4nM活性Akt/PKB，1X测定缓冲液，5％甘油，1mM DTT，1X PIC和0.1％BSA)，来引发磷酸化反应。然后，在室温下将上述反应孵化45分钟。
步骤2：
通过加入170μl 125mM EDTA，使反应终止。将200μl终止的反应转移入抗生物素蛋白链菌素Flashplate
Figure G2007800509679D01262
PLUS(NEN Life Sciences，目录号SMP103)中。在平板振荡器上，在室温下将上述反应孵化≥10分钟。将孔中物质从各孔中吸出，并且用200μl TBS/孔清洗各孔两次。然后，用200μl TBS/孔将各孔洗涤5分钟，洗涤三次，在洗涤步骤的同时，在平台振荡器上在室温下对板进行孵化。
用密封带盖上板并且利用具有适当设置的Packard TopCount对Flashplates中的[33P]进行计数。
用于抗生物素蛋白链菌素滤板测定的方法：
步骤1：
如以上用于抗生物素蛋白链菌素快速板分析的步骤1中所述的方式进行酶促反应。
步骤2：
通过加入20μl 7.5M的盐酸胍终止反应。将50μl终止的反应物转移入抗生物素蛋白链菌素滤板(SAM2TM Biotin Capture Plate，Promega，目录号V7542)中，并且在施加真空之前，在过滤器上将反应孵化1～2分钟。
然后，如下所述利用真空歧管对板进行洗涤：1)4×200μl/孔的2MNaCl；2)6×200μl/孔的2M NaCl与1％H3PO4；3)2×200μl/孔的双蒸水；和4)2×100μl/孔的95％乙醇。然后，在加入闪烁剂之前，使得膜得到完全风干。
用白色基带将板的底部密封，将30μl/孔的Microscint 20(PackardInstruments，目录号6013621)加入其中。用透明密封带密封板的顶部，然后利用具有[33P]的适当设置和液体闪烁剂的Packard TopCount对板进行计数。
磷酸纤维素滤板测定的方法：
步骤1：
如上述抗生物素蛋白链菌素快速板分析的步骤1中所述的方式进行酶促反应，使用KKGGRARTSSFAEPG(SEQ.ID.NO.：16)作为底物代替生物素-GGRARTSSFAEPG。
步骤2：
通过加入20μl 0.75％ H3PO4终止反应。将50μl终止的反应物转移入滤板(UNIFILTERTM，Whatman P81强阳离子交换剂，白色聚苯乙烯96孔板，Polyfiltronics，目录号7700-3312)中，并且在施加真空之前，在过滤器上将反应孵化1～2分钟。
然后，如下所述利用真空歧管对板进行洗涤：1)9×200μl/孔的0.75％ H3PO4；2)2×200μl/孔的双蒸水。用白色基带将板的底部密封，将30μl/孔的Microscint 20加入其中。用透明密封带密封板的顶部，然后利用具有[33P]的适当设置和液体闪烁剂的Packard TopCount对板进行计数。
PKA测定：
每个单独的PKA测定由下列成分组成：
A.5X PKA测定缓冲液(200mM Tris pH7.5，100mM MgCl2，5mM 
Figure G2007800509679D01281
-巯基乙醇，0.5mM EDTA)；
B.50μM用水稀释的肯普肽(Kemptide)(Sigma)贮液；
C.通过将1.0μl 33P-ATP[10mCi/ml]稀释成200Tl 50μM未标记ATP贮液制备的33P-ATP；
D.10μl稀释至0.5mg/ml BSA的70nM PKA催化亚基(UBI目录#14-114)贮液；
E.PKA/肯普肽使用液：等体积的5X PKA测定缓冲液，肯普肽溶液和PKA催化亚基。
在96深孔测定板中进行反应。向10Tl 33P-ATP溶液中加入抑制剂或媒介物(10Tl)。向各孔中加入30Tl PKA/肯普肽使用液，反应即开始。反应物经混合，在室温下孵育20分钟。加入50Tl 100mM EDTA和100mM焦磷酸钠，混合，反应停止。
用p81磷酸纤维素96孔滤板(Millipore)收集酶反应产物(磷酸化肯普肽)。向p81滤板各孔中加入75mM磷酸以制板。通过板底抽真空，经过滤，排空各孔。向各孔中加入磷酸(75mM，170μl)。在含磷酸滤板的相应孔中，加入30μl等分的各已停止反应的PKA反应物。抽真空后，肽被截留在滤板上，用75mM磷酸洗涤滤板5次。最后一次洗涤后，将滤板风干。向各孔中加入闪烁液(30μl)，在TopCount(Packard)上对滤板进行计数。
PKC测定：
每个PKC测定都由下列成分组成：
A.10X PKC辅激活缓冲液：2.5mM EGTA、4mM CaCl2；
B.5X PKC激活缓冲液：1.6mg/ml磷脂酰丝氨酸，0.16mg/ml二酰甘油，100mM Tris pH 7.5，50mM MgCl2，5mM 
Figure G2007800509679D01291
-巯基乙醇；
C.在将1.0μl 33P-ATP[10mCi/ml]稀释成100μl 100μM未标记的ATP贮液制备的33P-ATP；
D.用水稀释的髓鞘碱性蛋白(350μg/ml，UBI)；
E.稀释至0.5mg/ml BSA的PKC(50ng/ml，UBI目录#14-115)；
F.PKC/髓鞘碱性蛋白使用液：将PKC辅激活缓冲液和髓鞘碱性蛋白各5倍体积与PKC激活缓冲液和PKC各10倍体积混合而制得。
在96深孔测定板中进行测定。在5.0μl 33P-ATP中加入抑制剂或媒介物(10Tl)。加入PKC/髓鞘碱性蛋白使用液，混合，反应即开始。反应物在30℃下孵育20分钟。加入50Tl 100mM EDTA和100mM焦磷酸钠，混合后，停止反应。在96孔滤板的PVDF膜上收集磷酸化髓鞘碱性蛋白，用闪烁计数进行定量测定。
用上述测定法，对反应方案和表格中描述的本发明化合物进行测定，发现所述化合物对Akt1、Akt2和Akt3中的一种或多种具有≤50μM的IC50。
实施例5
基于细胞的测定以便确定Akt/PKB的抑制
将细胞(例如具活化Akt/PKB的LnCaP或PTEN(-/-)肿瘤细胞系)接种到100mM培养皿中。当细胞生长至约70-80％汇合时，再补加5ml新培养基和试验化合物溶液。对照包括未处理细胞、经媒介物处理的细胞和分别用以20μM或者200nM存在的LY294002(Sigma)或渥曼青霉素(Sigma)处理的细胞。细胞孵育2、4或6小时，弃培养基。细胞用PBS洗涤，刮出，并转移到离心管中。使细胞成团粒，再次用PBS洗涤。最后，将细胞团粒重悬于裂解缓冲液(20mM Tris pH8、140mM NaCl、2mM EDTA、1％ Triton、1mM焦磷酸钠、10mM 
Figure G2007800509679D01301
-甘油磷酸酯、10mMNaF、0.5mM NaVO4、1μM Microsystine和1x蛋白酶抑制剂混合物)中，在冰上放置15分钟，温和涡旋使细胞裂解。将裂解液放入Beckman台式超速离心机中，在4℃以100,000×g离心20分钟。通过标准Bradford方案(BioRad)对上清液中的蛋白质进行定量分析，贮藏于-70℃待用。
按下述方法，对澄清裂解液中的蛋白质进行免疫沉淀(IP)：对于Akt1/PKBI，将裂解液与NETN(100mM NaCl、20mM Tris pH 8.0、1mMEDTA、0.5％ NP-40)中的Santa Cruz sc-7126(D-17)混合，加入A/G蛋白琼脂糖凝胶(Santa Cruz sc-2003)。对于Akt2/PKB，将裂解液与NETN中的抗Akt-2琼脂糖(Upstate Biotechnology #16-174)混合，至于kt3，将裂解液与NETN中的抗Akt3琼脂糖(Upstate Biotechnology #16-175)混合。免疫沉淀物(IP)在4℃下孵育过夜，洗涤，用SDS-PAGE进行分离。
使用蛋白质印迹分析总Akt，pThr308 Akt1，pSer473 Akt1，以及Akt2和Akt3上相应的磷酸化位点，和Akt下游目标，其中利用特异性抗体(Cell Signaling Technology)进行：抗总Akt(目录号9272)、抗磷酸Akt丝氨酸473(目录号9271)和抗磷酸Akt苏氨酸308(目录号9275)。在4℃下，与用PBS+0.5％脱脂奶粉(NFDM)稀释的合适第一抗体孵育过夜后，洗涤印迹，在室温下与PBS+0.5％NFDM中的辣根过氧化物酶(HRP)标记的第二抗体孵育1小时。用ECL试剂(Amersham/PharmaciaBiotech RPN2134)检测蛋白质。
实施例6
调蛋白刺激的Akt活化
将MCF7细胞(为PTEN+/+的一种人乳癌系)以1×106细胞/100mM板接种到培养板中。当细胞为70-80％汇合时，再补加5ml无血清培养基并孵育过夜。次日上午，加入化合物，孵育细胞1-2小时，然后加入调蛋白(诱导Akt的活化)30分钟，用上述方法对细胞进行分析。
实施例7
肿瘤生长的抑制
癌细胞生长抑制剂的体内功效，可通过几种本领域众所周知的方案加以确定。
第0天，在6-10周龄的雌性无胸腺小鼠(雄性小鼠[10-14周龄]还用于前列腺肿瘤异种移植[LnCaP和PC3])(Harlan)左胁处，皮下注射人肿瘤细胞系，该细胞系具有PI3K途径(例如LnCaP、PC3、C33a、OVCAR-3、MDA-MB-468、A2780等)失调。随机将小鼠分为媒介物组、化合物组或联合治疗组。从第一天起，每天经皮下给药，并在实验过程中连续给药。或者，可选用连续输注泵，给予抑制剂试验化合物。化合物、化合物组合或媒介物以总体积为0.2ml给药。通常在注射细胞后4-5.5周，当所有媒介物治疗的动物的损害直径为0.5-1.0cm时，切除肿瘤并称重。计算每一治疗组每一细胞系肿瘤的平均重量。
实施例8
斑点多路测定(Spot Multiplex Assay)
该方法描述了用于检测在96孔格式板中相同的孔内多个磷酸化蛋白质的三明治免疫测定(sandwich immunoassay)。在96孔板中培养细胞裂解液，在该96孔板上，不同的捕捉抗体在空间上布置在相同孔内的不同斑点上。添加磷酸化-特异性兔多克隆抗体，通过用电化学荧光标记物做标记的抗兔抗体检测复合物。
96孔LNCaP板+/-化合物：
在Beckman J6中以1200rpm离心10分钟，吸出介质。添加50μl/孔：TBS(Pierce #28376-20mM Tris pH 7.5，150mM NaCl)+1％TritonX-100+蛋白酶和磷酸酶抑制剂。包在塑料包装内，在完全冷冻前放置在-70℃冷冻器内。用3％封阻剂A在1X的Tris洗涤缓冲液中封阻多路(Multiplex)板(Meso Scale Discovery，Gaithersburg，MD)，150μl/孔。用板密封带覆盖，在Micromix振荡器上在室温下培养2小时(最少2小时)。用1X RCM 51(TTBS)洗涤。在冰上解冻细胞裂解液板，向被封阻的板内添加40μl的裂解液/孔。用板密封带覆盖，在Micromix振荡器上在4℃ O/N培养，用1X RCM 51洗涤。在1％封阻剂A在1X Tris洗涤缓冲液中稀释二级抗体：抗磷酸AKT(T308)，抗磷酸马铃薯球蛋白(Tuberin)(T1462)，单独或组合。添加25μl/孔，用板密封带覆盖，在Micromix振荡器上在室温下培养3小时，用1X RCM 51洗涤。在1％封阻剂A在1X Tris洗涤缓冲液中稀释Ru-GAR。添加25μl/孔，用板密封带覆盖，在Micromix振荡器上在室温下培养1小时，用1X RCM51洗涤。用水将4X读数缓冲液T稀释到1X，添加每孔200μl经稀释的读数缓冲液。
在Sector 6000成像器上读数。
蛋白酶和磷酸酶抑制剂：
微囊藻素-LR，Calbiochem# 475815到1μM的最终浓度(贮液＝500μM)
Calbiochem # 524624，100X Set I
Calbiochem # 524625，100X Set H
Calbiochem # 539134，100X Set III
抗磷酸AKT(T308)：
Cell Signalling Technologies # 9275
抗磷酸马铃薯球蛋白(T1462)：
Covance Affinity Purified(兔 MS 2731/2732)
Ru-GAR＝钌化(Ruthenylated)山羊抗兔抗体
10X Tris洗涤缓冲液、封阻剂A和4X读数缓冲液T
10X RCM 51(10X TTBS，RCM 51)
1X＝20mM Tris pH 7.5，140mM NaCl，0.1％吐温-20
实施例9
细胞基(体内)试验
该方法描述了用于Akt丝氨酸/苏氨酸激酶的细胞基(体内)活性试验。活化的内源性Akt能够使生物素酰化的特异性Akt底物(GSK3β)肽磷酸化。通过均相时间分辨荧光(HTRF)使用与铕Kryptate[Eu(K)]结合的磷肽特异性抗体和与链霉抗生物素蛋白连接的XL665荧光团(其将与肽上的生物素部分结合)进行检测。当[Eu(K)]和XL665接近时(即与同一磷肽分子结合时)，从Eu(K)向XL665发生非辐射能量转移，然后在665nm从XL665发射光。
如果各自都存在特异性抗体的话，该试验可用于检测来自各种不同物种的所有三种Akt同功酶(Akt1、Akt2和Akt3)的抑制剂。
材料和试剂
A.Cell Culture Microtiter Flat Bottom 96孔板，CorningCostar，目录编号3598
B.Reacti-Bind蛋白A覆层96孔板，Pierce，目录编号15130
C.Reacti-Bind蛋白G覆层96孔板，Pierce，目录编号15131
D.Micromix 5振荡器
E.Microfluor
Figure G2007800509679D01331
B U形底微量滴定板，Dynex Technologies，目录编号7205
F.96孔板洗涤器，Bio-Tek Instruments，目录编号EL 404
G.Discovery
Figure G2007800509679D01332
HTRF微量滴定板分析器，Packard InstrumentCompany
缓冲液
A.IP激酶细胞裂解缓冲液：1X TBS；0.2％吐温20；1X蛋白酶抑制剂混合物III(贮液为100X，Calbiochem，539134)；1X磷酸酶抑制剂混合物I(贮液为100X，Calbiochem，524624)；和1X磷酸酶抑制剂混合物II(贮液为100X，Calbiochem，524625)。
B.10X测定缓冲液：500mM Hepes pH 7.5；1％PEG；1mMEDTA；1mM EGTA；和20mM β-甘油磷酸酯。
C.IP激酶测定缓冲液：1X测定缓冲液；50mM KCl；150μMATP；10mM MgCl2；5％甘油；1mM DTT；每50ml测定缓冲液1片蛋白酶抑制剂混合物；和0.1％BSA。
D.GSK3β底物溶液：IP激酶测定缓冲液；和500nM生物素酰化GSK3β肽。
E.Lance缓冲液：50mM Hepes pH 7.5；0.1％BSA；和0.1％Triton X-100。
F.Lance终止缓冲液：Lance缓冲液；和33.3mM EDTA。
G.Lance检测缓冲液：Lance缓冲液；13.3μg/ml SA-APC；和0.665nM EuK Ab a-磷酸(Ser-21)GSK3β。
多步骤免疫沉淀Akt激酶测定
第一天
A.接种C33a细胞步骤：板60,000 C33a细胞/孔，在96孔微量滴定板。
B.在37℃培养细胞过夜。
第二天
D.化合物添加步骤：将在新鲜培养基(α-MEM/10％FBS，室温)中的化合物添加到上述的96孔板并在组织培养保温箱中培养5小时。
E.细胞裂解步骤：吸出培养基并添加100μl的IP激酶细胞裂解缓冲液。
F.在-70℃冷冻96孔微量滴定板(注解：该步骤可进行至少1小时或过夜。)
第三天
G.涂覆蛋白质A/G 96孔板步骤：向以下孔中添加在100μl PBS中的适当浓度的α-Akt抗体(Akt1、Akt2或Akt3)：
α-Akt1(20ng/孔/100μl)    B2>>>>>>B10/行B-G/Akt1板
α-Akt2(50ng/孔/100μl)    B2>>>>>>B10/行B-G/Akt2板
兔-IgG(150ng/孔/100μl)：   在每个板上的B11-G11(Akt1和Akt2)
H.在Micromix 5上在冷房间(+4℃)培养4小时(形式(Form)20；姿态(Attitude)2)(注解：姿态根据Micromix 5机器而定)。
I.吸出α-Akt抗体溶液并向每个孔中添加100μl的PBS。
J.Akt免疫沉淀步骤：向得自步骤(I)的100μl的PBS中添加5μl解冻的细胞裂解液用于Akt1板和添加10μl解冻的细胞裂解液用于Akt2板。
注解：在冰上解冻细胞裂解液。在转移到抗体板之前通过移液管上下吸取10次混合解冻的裂解液。在冰上保存细胞裂解液。在将细胞裂解液转移到抗体板之后在-70℃重新冷冻细胞裂解液的板。
K.在Micromix 5振荡器(形式20，姿态3)上在冷的房间(+4℃)培养过夜。
第4天
L.免疫沉淀板洗涤步骤：使用96孔板洗涤器用TTBS(RCM 51，1X＝2个循环)洗涤96孔板1X。用TTBS填充各孔并培养10分钟。用TTBS洗涤96孔板2X。(注解：使用前准备好板洗涤器：1.检查缓冲液容器，确保它们装满，和2.腾空废液容器。
M.手动板洗涤步骤：添加180μl的IP激酶测定缓冲液。
N.开始Akt酶反应：吸出上清液。添加60μl的GSK3β底物溶液。
O.在Micromix 5振荡器上在室温培养2.5小时。注解：应当调整培养时间，使得柱10/柱11的比不大于10。
P.将30μl的Lance检测缓冲液与30μl的Lance终止缓冲液合并(60μl总体积/孔)，并添加到Microfluor U形底96孔黑色板中。
Q.停止Akt酶反应：将得自步骤(O)的蛋白质A/G 96孔板由来的40μl的Akt酶反应混合物转移到得自步骤(P)的Microfluor U形底96孔黑色板中。
U.在Micromix 5振荡器(形式20，姿态3)上在室温下培养1-2小时，然后使用Akt程序用Discovery HTRF微板分析器读数。
IP激酶细胞裂解缓冲液
100μl/孔
 8ml(1个板)  45ml(6个板)
  1X TBS吐温201X蛋白酶抑制剂混合物III1X蛋白酶抑制剂混合物I1X蛋白酶抑制剂混合物II微囊藻素LR(500X)  7744μl20μl80μl80μl80μl  NANANA450μl450μl450μl90μl
IP激酶测定缓冲液
100μl/孔
  8ml(1个板)   50ml(3个板)
  10X测定缓冲液1M KCl250mM ATP1M MgCl2甘油1M DTT蛋白酶抑制剂混合物10％ BSAdi dH2O   800μl400μl4.8μl80μl400μl8μl1片/50ml80μl6227.2μl   5ml2.5ml30μl500μl2.5ml50μl1500μl38.9ml
GSK3β底物溶液
60μl/孔
  5ml(1个板)   7ml
  IP激酶测定缓冲液1mM GSK3β肽   5ml2.5μl   -3.5μl
Lance终止缓冲液
30μl/孔
  3ml(1个板)   5ml   5ml
  1X Lance缓冲液EDTA 0.5M   2800.2μl199.8μl
Lance检测缓冲液
30μl/孔
  3ml(1个板)   5ml
  SA-APC(1mg/ml在ddH2O中，在Lance缓冲液中稀释1/75.2)EuK Ab a-磷酸(Ser 21)GSK3β(680nM，在Lance缓冲液中稀释1/1133)   40μl2.7μl   66.7μl4.5μl
Figure IYZ000005979432400011
Figure IYZ000005979432400021
Figure IYZ000005979432400031
Figure IYZ000005979432400041
Figure IYZ000005979432400051
Figure IYZ000005979432400061
Figure IYZ000005979432400071

Claims (11)

1.式E化合物：
Figure FSB00001079941900011
其中：
Figure FSB00001079941900012
是
或
Figure FSB00001079941900014
环Y是环丁基；
R1是H、嘧啶基、OH、甲基或环丙基；
或其可药用盐。
2.化合物，其选自下列的化合物：
1-{4-[3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺；
1-[4-(9-苯基-3-嘧啶-2-基-[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺；
1-[4-(9-苯基-3-[1，2，4]三唑并[1，5-α]嘧啶-2-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺；
1-[4-(9-苯基-3-吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺；
1-[4-(3-咪唑并[2，1-b][1，3]噻唑-6-基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺；
1-{4-[9-苯基-3-(1H-1，2，3-三唑-4-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺；
1-[4-(9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺；
8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-醇；
1-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺；
1-{4-[3-(二氟甲基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺；
{8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-基}甲醇；
1-{4-[3-(甲氧基甲基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺；
1-{8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-基]乙醇；
2-{8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-基}丙-2-醇；
1-[4-(3-环丙基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺；
1-[4-(3-环己基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺；
1-{4-[9-苯基-3-(四氢-2H-吡喃-2-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺；
1-{4-[3-(4-甲基吗啉-2-基)-9-苯基-[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺；
1-{4-[3-(2-甲基四氢-2H-吡喃-2-基)-9-苯基-[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺；
1-{4-[9-苯基-3-(四氢-2H-吡喃-3-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺；
1-{4-[9-苯基-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺；
1-[4-(3-咪唑并[1，2-a]吡嗪-2-基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺；
1-{4-[3-(1-甲基-1H-1，2，3-三唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺；
1-[4-(3-咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺；
1-{4-[9-苯基-3-(1H-吡唑-4-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺；
1-[4-(9-苯基-3-吡唑并[1，5-a]嘧啶-2-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺；
1-(4-{3-[(2-羟基乙基)氨基甲酰基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基}苯基)环丁胺；
1-{4-[3-(4-羟基苯基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺；
1-(4-{3-[4-(羟基甲基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基}苯基)环丁胺；
1-[4-(9-苯基-3-吡啶-3-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺；
1-[4-(9-苯基-3-吡啶-4-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺；
1-[4-(9-苯基-3-哒嗪-3-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺；
1-[4-(9-苯基-3-嘧啶-5-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺；
1-[4-(9-苯基-3-吡嗪-2-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺；
3-{8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-基}-5-氧代-4，5-二氢-1H-1，2，4-三唑；
1-{4-[3-(6-羟基吡啶-2-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺；
1-{4-[3-(2-羟基苯基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺；
1-{4-[3-(6-吗啉-4-基吡啶-3-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺；
1-{4-[3-(3-羟基吡啶-2-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺；
1-{4-[3-(6-羟基吡啶-3-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺；
1-(4-{3-[5-(甲氧基羰基)吡啶-2-基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基}苯基)环丁胺；
1-{4-[3-(5-羟基吡嗪-2-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺；
1-{4-[3-(4-羟基嘧啶-5-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺；
1-[4-(3-氨基甲酰基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺；
4-({8-[4-(1-铵基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-基}甲基)吗啉；
8-[4-(1-铵基环丁基)苯基]-9-苯基-3-(1H-四唑-1-基甲基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘；
8-[4-(1-铵基环丁基)苯基]-9-苯基-3-(1H-1，2，4-三唑-1-基甲基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘；
8-[4-(1-铵基环丁基)苯基]-9-苯基-3-(1H-吡唑-1-基甲基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘；
1-{4-[3-(氮杂环丁烷-1-基甲基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺；
1-[4-(3-{[乙基(甲基)氨基]甲基}-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺；
1-{4-[9-苯基-3-(吡咯烷-1-基甲基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺；
1-(4-{3-[(二乙基氨基)甲基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基}苯基)环丁胺；
2-[({8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-基}甲基)(甲基)氨基]乙醇；
1-{4-[9-苯基-3-(哌啶-1-基甲基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺；
1-{4-[9-苯基-3-(哌嗪-1-基甲基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺；
(3R)-1-({8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-基}甲基)吡咯烷-3-醇；
(3S)-1-({8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-基}甲基)吡咯烷-3-醇；
1-[4-(3-{[(2-甲氧基乙基)(甲基)氨基]甲基}-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺；
2，2′-[({8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-基}甲基)亚氨基]二乙腈；
4-({8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-基}甲基)哌嗪-2-酮；
1-({8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-基}甲基)哌啶-3-醇；
1-(4-{3-[(4-氟哌啶-1-基)甲基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基}苯基)环丁胺；
2-[({8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-基}甲基)(丙基)氨基]乙醇；
(3R)-1-({8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-基}甲基)-N，N-二甲基吡咯烷-3-胺；
[1-({8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-基}甲基)哌啶-2-基]甲醇；
[1-({8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-基}甲基)哌啶-3-基]甲醇；
1-[4-(3-{[(2R)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]甲基}-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺；
[1-({8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-基}甲基)哌啶-4-基]甲醇；
2-[({8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-基}甲基)(丁基)氨基]乙醇；
1-({8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-基}甲基)哌啶-4-甲酰胺；
1-(4-{3-[(4-乙酰基哌嗪-1-基)甲基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基}苯基)环丁胺；
2-[1-({8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-基}甲基)哌啶-4-基]乙醇；
1-{4-[3-(3，4-二氢异喹啉-2(1H)-基甲基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺；
1-[4-(3-{[甲基(2-苯基乙基)氨基]甲基}-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺；
1-(4-{9-苯基-3-[(丙基氨基)甲基][1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基}苯基)环丁胺；
1-(4-{3-[(苄基氨基)甲基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基}苯基)环丁胺；
1-(4-{3-[(甲基氨基)甲基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基}苯基)环丁胺；
1-{4-[9-苯基-3-(1H-1，2，4-三唑-3-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺；
1-{4-[3-(5-羟基吡啶-2-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺；
1-{4-[3-(铵基甲基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺；
8-[4-(1-铵基环丁基)苯基]-3-[(1-甲基-1H-咪唑-4-基)甲基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘；
1-[4-(9-苯基-3-吡啶-2-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺；
1-[4-(9-苯基-3-嘧啶-4-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺；
1-{4-[3-(3-羟基苯基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺；
1-(4-{3-[羟基(甲氧基)甲基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基}苯基)环丁胺；
1-[4-(3，9-二苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺；
1-[4-(3-环丁基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺；
1-{4-[3-(环丙基甲基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺；
2-{8-[4-(1-铵基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-基}哌啶；
1-[4-(9-苯基-3-丙基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺；
1-[4-(3-乙基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺；
1-[4-(3-乙氧基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺；
1-({8-[4-(1-铵基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-基}甲基)-4-羟基哌啶；
1-[4-(3-异丁基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺；
1-{4-[3-(2-羟基-2-甲基丙基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺；
1-{4-[3-(1-羟基丙基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺；
1-{4-[9-苯基-3-(1H-吡唑-5-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺；
1-{4-[3-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺；
1-{4-[3-(5-甲基-1H-吡唑-3-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺；
1-{4-[9-苯基-3-(4-哒嗪基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺；
1-{4-[3-(3-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺；
1-{4-[3-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺；
1-{4-[3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺；
1-{4-[9-苯基-3-(1，4，5，6-四氢环戊二烯并[c]吡唑-4-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺；
1-{4-[3-(2-甲基-1，3-噻唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺；
1-{4-[3-(1-苯并噻吩-2-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺；
1-{4-[3-(1H-吲哚-2-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺；
1-{4-[3-(1H-吲哚-3-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺；
1-{4-[3-(5-甲基-4-异
Figure FSB00001079941900081
唑基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺；
1-{4-[3-(2-甲基-3-呋喃基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺；
1-{4-[3-(1，3-唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺；
1-{4-[9-苯基-3-(3-噻吩基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺；
4-{8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-基}-1H-吡唑-3-胺；
1-{4-[3-(1H-吲唑-3-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺；
1-{4-[3-(5-甲基-3-异
Figure FSB00001079941900091
唑基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺；
1-{4-[3-(5-甲基-1，2，3-噻二唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺；
1-{4-[9-苯基-3-(1，2，5-噻二唑-3-基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺；
1-{4-[3-(1，2，5-
Figure FSB00001079941900092
二唑-3-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺；
1-{4-[3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9-(4-氟苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺；
1-{4-[3-甲基-9-(4-氟苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺；
1-{4-[3-(乙基氨基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环丁胺；
1-[2-({8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-基}氨基)乙基]-1-甲基哌啶；
8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-N-环己基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-胺；
8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-N-(叔丁基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-胺；
N′-{8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-基}-N，N-二甲基丙-1，3-二胺；
1-{4-[3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环戊胺；
1-{4-[3-甲基-9-(4-氟苯基)[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环戊胺；
1-{4-[3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环己胺；
1-{4-[3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基]苯基}环己胺；
8-[4-(1-氨基环己基)苯基]-N-乙基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3-胺；
1-[4-(2-苯基-9-吡啶-4-基[1，2，4]三唑并[4’，3’：1，6]吡啶并[2，3-b]吡嗪-3-基)苯基]环丁胺；
1-[4-(2-苯基-9-吡啶-3-基[1，2，4]三唑并[4’，3’：1，6]吡啶并[2，3-b]吡嗪-3-基)苯基]环丁胺；
1-[4-(2-苯基-9-吡嗪-2-基[1，2，4]三唑并[4’，3’：1，6]吡啶并[2，3-b]吡嗪-3-基)苯基]环丁胺；和
1-[4-(2-苯基-9-丙基[1，2，4]三唑并[4’，3’：1，6]吡啶并[2，3-b]吡嗪-3-基)苯基]环丁胺；
或其可药用盐。
3.权利要求2所述的化合物，所述化合物是：1-[4-(9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺；或其可药用盐。
4.权利要求2所述的化合物，所述化合物是：1-[4-(9-苯基-3-嘧啶-2-基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺；或其可药用盐。
5.权利要求2所述的化合物，所述化合物是：8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-3(2H)-酮；或其可药用盐。
6.权利要求2所述的化合物，所述化合物是：1-[4-(3-甲基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺；或其可药用盐。
7.权利要求2所述的化合物，所述化合物是：1-[4-(3-环丙基-9-苯基[1，2，4]三唑并[3，4-f]-1，6-二氮杂萘-8-基)苯基]环丁胺；或其可药用盐。
8.权利要求2所述的化合物，所述化合物是：1-[4-(2-苯基-9-吡嗪-2-基[1，2，4]三唑并[4’，3’：1，6]吡啶并[2，3-b]吡嗪-3-基)苯基]环丁胺；或其可药用盐。
9.药物组合物，所述组合物包含可药用载体和分散在其中的治疗有效量的权利要求1的化合物。
10.权利要求1的化合物在制备用于治疗或预防需要该治疗的哺乳动物的癌症的药物中的用途。
11.权利要求1所述的化合物，所述化合物是：
Figure FSB00001079941900111
CN2007800509679A 2006-12-06 2007-12-03 Akt活性抑制剂 Expired - Fee Related CN101600706B (zh)

Applications Claiming Priority (7)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US87319806P 2006-12-06 2006-12-06
US60/873,198 2006-12-06
US88066107P 2007-01-16 2007-01-16
US60/880,661 2007-01-16
US96787207P 2007-09-06 2007-09-06
US60/967,872 2007-09-06
PCT/US2007/024722 WO2008070016A2 (en) 2006-12-06 2007-12-03 Inhibitors of akt activity

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN101600706A CN101600706A (zh) 2009-12-09
CN101600706B true CN101600706B (zh) 2013-10-16

Family

ID=39492823

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN2007800509679A Expired - Fee Related CN101600706B (zh) 2006-12-06 2007-12-03 Akt活性抑制剂

Country Status (30)

Country Link
US (3) US7576209B2 (zh)
EP (1) EP2104669B1 (zh)
JP (2) JP4431636B1 (zh)
KR (1) KR101110598B1 (zh)
CN (1) CN101600706B (zh)
AR (1) AR064010A1 (zh)
AU (1) AU2007328286B2 (zh)
BR (1) BRPI0719580A2 (zh)
CA (1) CA2670760C (zh)
CL (1) CL2007003495A1 (zh)
CO (1) CO6190528A2 (zh)
CR (1) CR10851A (zh)
EA (1) EA016195B1 (zh)
EC (1) ECSP099376A (zh)
ES (1) ES2527567T3 (zh)
GE (1) GEP20125469B (zh)
GT (1) GT200900146A (zh)
HK (1) HK1137758A1 (zh)
HN (1) HN2009001112A (zh)
IL (2) IL198826A (zh)
MA (1) MA31027B1 (zh)
MX (1) MX2009006052A (zh)
NI (1) NI200900106A (zh)
NO (1) NO20092569L (zh)
NZ (2) NZ595829A (zh)
PE (1) PE20081341A1 (zh)
SV (1) SV2009003283A (zh)
TN (1) TN2009000224A1 (zh)
TW (1) TWI386410B (zh)
WO (2) WO2008070016A2 (zh)

Families Citing this family (52)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20100047338A1 (en) 2008-03-14 2010-02-25 Angela Brodie Novel C-17-Heteroaryl Steroidal CYP17 Inhibitors/Antiandrogens, In Vitro Biological Activities, Pharmacokinetics and Antitumor Activity
CA2610888C (en) * 2005-06-10 2011-02-08 Merck & Co., Inc. Inhibitors of akt activity
AR064010A1 (es) * 2006-12-06 2009-03-04 Merck & Co Inc Inhibidores de la actividad de la akt
CA2670767A1 (en) * 2006-12-06 2008-06-12 Merck & Co., Inc. Inhibitors of akt activity
US8207169B2 (en) * 2008-06-03 2012-06-26 Msd K.K. Substituted [1,2,4]triazolo[4′,3′:1,6]pyrido[2,3-b]pyrazines of the formula D
CA2726358A1 (en) * 2008-06-03 2009-12-10 Merck Sharp & Dohme Corp. Inhibitors of akt activity
CA2729412A1 (en) 2008-07-04 2010-01-07 Banyu Pharmaceutical Co., Ltd. Novel spirochromanone carboxylic acids
ES2797955T3 (es) 2008-08-25 2020-12-04 Novartis Ag Moduladores de la ruta de hedgehog
DE102008043724A1 (de) * 2008-11-13 2010-05-20 Biotronik Vi Patent Ag Erhöhung der Effizienz pharmazeutische Wirkstoffe-freisetzender Medizinprodukte durch Kombination mit einem Inhibitor des Transportproteins P-Glycoprotein
CA2750051A1 (en) * 2009-02-02 2010-08-05 Merck Sharp & Dohme Corp. Inhibitors of akt activity
CN102686600A (zh) 2009-02-05 2012-09-19 托凯药业股份有限公司 甾体cyp17抑制剂/抗雄激素物质的新型药物前体
WO2010101734A1 (en) 2009-03-06 2010-09-10 Merck Sharp & Dohme Corp. Combination cancer therapy with an akt inhibitor and other anticancer agents
US8168652B2 (en) 2009-03-12 2012-05-01 Merck Sharp & Dohme Corp. Inhibitors of AKT activity
WO2010114780A1 (en) 2009-04-01 2010-10-07 Merck Sharp & Dohme Corp. Inhibitors of akt activity
SG178986A1 (en) 2009-09-08 2012-04-27 Hoffmann La Roche 4-substituted pyridin-3-yl-carboxamide compounds and methods of use
WO2011033265A1 (en) 2009-09-18 2011-03-24 Almac Discovery Limited Pharmaceutical compounds
GB0919380D0 (en) 2009-11-04 2009-12-23 Almac Discovery Ltd Pharmaceutical compouds
GB0922589D0 (en) 2009-12-23 2010-02-10 Almac Discovery Ltd Pharmaceutical compounds
WO2011130921A1 (en) * 2010-04-23 2011-10-27 Merck Sharp & Dohme Corp. Inhibitors of akt activity
JP2013526578A (ja) 2010-05-21 2013-06-24 グラクソスミスクライン・リミテッド・ライアビリティ・カンパニー 組合せ
CN103097384B (zh) 2010-07-12 2017-02-15 拜耳知识产权有限责任公司 取代的咪唑并[1,2‑a]嘧啶和吡啶
JP2013530250A (ja) 2010-07-13 2013-07-25 バイエル・インテレクチュアル・プロパティ・ゲゼルシャフト・ミット・ベシュレンクテル・ハフツング 二環式ピリミジン化合物
JP5926727B2 (ja) * 2010-07-28 2016-05-25 バイエル・インテレクチュアル・プロパティ・ゲゼルシャフト・ミット・ベシュレンクテル・ハフツングＢａｙｅｒ Ｉｎｔｅｌｌｅｃｔｕａｌ Ｐｒｏｐｅｒｔｙ ＧｍｂＨ 置換イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン
JP5886868B2 (ja) * 2010-12-16 2016-03-16 バイエル・インテレクチュアル・プロパティ・ゲゼルシャフト・ミット・ベシュレンクテル・ハフツングＢａｙｅｒ Ｉｎｔｅｌｌｅｃｔｕａｌ Ｐｒｏｐｅｒｔｙ ＧｍｂＨ 置換ピリミド［１，２−ｂ］インダゾールおよびＰＩ３Ｋ／ＡＫＴ経路のモジュレーターとしてのそれらの使用
CN103298345B (zh) * 2011-01-11 2016-12-14 诺瓦蒂斯公司 组合
HUE027509T2 (en) 2011-04-06 2016-10-28 Taiho Pharmaceutical Co Ltd New imidazo-oxazine compounds or salts thereof
ME02316B (me) 2011-04-07 2016-06-20 Bayer Ip Gmbh Imidazopiridazini kao inhibitori akt kinaze
US8609688B2 (en) * 2011-06-24 2013-12-17 Arqule, Inc. Substituted imidazopyridinyl-aminopyridine compounds
US8815854B2 (en) 2011-06-24 2014-08-26 Arqule, Inc. Substituted imidazopyridinyl compounds
US9408885B2 (en) 2011-12-01 2016-08-09 Vib Vzw Combinations of therapeutic agents for treating melanoma
JP6088542B2 (ja) 2012-01-10 2017-03-01 バイエル・インテレクチュアル・プロパティ・ゲゼルシャフト・ミット・ベシュレンクテル・ハフツングＢａｙｅｒ Ｉｎｔｅｌｌｅｃｔｕａｌ Ｐｒｏｐｅｒｔｙ ＧｍｂＨ Ａｋｔキナーゼ阻害剤としての置換イミダゾピラジン類
EP2802588B1 (en) 2012-01-10 2016-05-25 Bayer Intellectual Property GmbH Substituted pyrazolopyrimidines as akt kinase inhibitors
CA2865202A1 (en) 2012-01-20 2013-07-25 Board Of Supervisors Of Louisiana State University And Agricultural And Mechanical College Enhanced glycemic control using ad36e4orf1 and akt1 inhibitor
GB201205164D0 (en) 2012-03-23 2012-05-09 Almac Discovery Ltd Pharmaceutical compounds
HUE036188T2 (hu) 2012-07-02 2018-06-28 Taiho Pharmaceutical Co Ltd Egy imidazooxazin vegyületet tartalmazó tumorellenes hatás potenciátor
EP2968370A4 (en) 2013-03-14 2016-09-21 Univ Maryland AGENT FOR ANDROGEN RECEPTOR DOWNWARD CONTROL AND USES THEREOF
EP3024457A4 (en) 2013-07-26 2017-06-28 Update Pharma Inc. Compositions to improve the therapeutic benefit of bisantrene
JP2016528252A (ja) 2013-08-12 2016-09-15 トーカイ ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド アンドロゲン標的治療を使用する新生物障害の処置のためのバイオマーカー
RU2016116915A (ru) 2013-10-01 2017-11-13 Новартис Аг Комбинация
BR112016006970A2 (pt) 2013-10-01 2017-08-01 Novartis Ag enzalutamida em combinação com afuresertib para o tratamento de câncer
WO2015094928A1 (en) * 2013-12-17 2015-06-25 Merck Sharp & Dohme Corp. Liposomal compositions for allosteric akt inhibitors
CA3100140C (en) 2014-01-28 2023-10-24 Buck Institute For Research On Aging Methods and compositions for killing senescent cells and for treating senescence-associated diseases and disorders
CN106456642A (zh) 2014-03-12 2017-02-22 诺华股份有限公司 含btk抑制剂与akt抑制剂的组合
WO2015142605A2 (en) 2014-03-17 2015-09-24 Merck Sharp & Dohme Corp. Polymeric nanoparticles and methods of making and using same
EP3263573B1 (en) 2015-02-27 2019-12-04 Taiho Pharmaceutical Co., Ltd. Crystal of imidazo-oxazine, pharmaceutical composition containing said crystal, and method for producing said crystal
FR3033499A1 (fr) 2015-03-11 2016-09-16 Centre Leon-Berard Composition pour le traitement des tumeurs neuroendocrines pancreatiques
EP3372601B1 (en) * 2015-10-22 2022-09-21 Mitsubishi Tanabe Pharma Corporation Novel bicyclic heterocyclic compound
US11883404B2 (en) 2016-03-04 2024-01-30 Taiho Pharmaceuticals Co., Ltd. Preparation and composition for treatment of malignant tumors
US10722484B2 (en) 2016-03-09 2020-07-28 K-Gen, Inc. Methods of cancer treatment
CN108426971B (zh) * 2018-03-09 2020-03-20 浙江中一检测研究院股份有限公司 一种快速检测水中微囊藻毒素的方法
US20230181563A1 (en) * 2020-05-08 2023-06-15 Georgiamune Llc Akt3 modulators and methods of use thereof
WO2024083716A1 (en) 2022-10-17 2024-04-25 Astrazeneca Ab Combinations of a serd for the treatment of cancer

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2004096130A2 (en) * 2003-04-24 2004-11-11 Merck & Co., Inc. Inhibitors of akt activity
WO2006036395A2 (en) * 2004-08-23 2006-04-06 Merck & Co., Inc. Inhibitors of akt activity
EP1679308A1 (en) * 2003-10-15 2006-07-12 Ube Industries, Ltd. Novel indazole derivative

Family Cites Families (23)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2004527531A (ja) * 2001-04-10 2004-09-09 メルク　エンド　カムパニー　インコーポレーテッド 癌を治療する方法
AU2002252614B2 (en) 2001-04-10 2006-09-14 Merck Sharp & Dohme Corp. Inhibitors of Akt activity
US20030187026A1 (en) 2001-12-13 2003-10-02 Qun Li Kinase inhibitors
AU2003226250B2 (en) 2002-04-08 2007-08-16 Merck Sharp & Dohme Corp. Inhibitors of Akt activity
CA2480800C (en) 2002-04-08 2008-09-23 Mark T. Bilodeau Inhibitors of akt activity
US20050130977A1 (en) 2002-04-08 2005-06-16 Lindsley Craig W. Inhibitors of akt activity
WO2003086404A1 (en) 2002-04-08 2003-10-23 Merck & Co., Inc. Fused quinoxaline derivatives as inhibitors of akt activity
AU2003284981B2 (en) 2002-10-30 2009-05-28 Merck Sharp & Dohme Corp. Inhibitors of Akt activity
US7304063B2 (en) 2003-04-24 2007-12-04 Merck & Co., Inc. Inhibitors of Akt activity
JP4679514B2 (ja) 2003-04-24 2011-04-27 メルク・シャープ・エンド・ドーム・コーポレイション Ａｋｔ活性の阻害剤
CN1809354A (zh) 2003-04-24 2006-07-26 麦克公司 Akt活性抑制剂
WO2005007099A2 (en) 2003-07-10 2005-01-27 Imclone Systems Incorporated Pkb inhibitors as anti-tumor agents
JP2007008816A (ja) * 2003-10-15 2007-01-18 Ube Ind Ltd 新規イソキノリン誘導体
JP2007532551A (ja) 2004-04-09 2007-11-15 メルク　エンド　カムパニー　インコーポレーテッド Ａｋｔ活性の阻害剤
CA2561311A1 (en) 2004-04-09 2005-10-27 Merck & Co., Inc. Inhibitors of akt activity
EP1824849A4 (en) * 2004-12-02 2009-09-30 Merck & Co Inc INHIBITORS OF AKT ACTIVITY
US7910561B2 (en) 2004-12-15 2011-03-22 Merck Sharp & Dohme Corp. Inhibitors of Akt activity
AU2006216998B2 (en) 2005-02-14 2010-12-23 Merck Sharp & Dohme Corp. Inhibitors of Akt activity
EP1871376A4 (en) * 2005-04-12 2010-04-28 Merck Sharp & Dohme INHIBITOR OF AKT ACTIVITY
CA2610888C (en) 2005-06-10 2011-02-08 Merck & Co., Inc. Inhibitors of akt activity
EP1978966A4 (en) * 2006-01-23 2010-11-10 Amira Pharmaceuticals Inc TRICYCLIC INHIBITORS OF 5-LIPOXYGENASE
AR064010A1 (es) * 2006-12-06 2009-03-04 Merck & Co Inc Inhibidores de la actividad de la akt
ES2470341T3 (es) * 2007-04-05 2014-06-23 Amgen, Inc Moduladores de la aurora cinasa y método de uso

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2004096130A2 (en) * 2003-04-24 2004-11-11 Merck & Co., Inc. Inhibitors of akt activity
EP1679308A1 (en) * 2003-10-15 2006-07-12 Ube Industries, Ltd. Novel indazole derivative
WO2006036395A2 (en) * 2004-08-23 2006-04-06 Merck & Co., Inc. Inhibitors of akt activity

Also Published As

Publication number Publication date
WO2008070016A2 (en) 2008-06-12
SV2009003283A (es) 2009-11-09
KR101110598B1 (ko) 2012-03-08
NI200900106A (es) 2010-01-20
WO2008070016A3 (en) 2008-09-12
CN101600706A (zh) 2009-12-09
US20090253734A1 (en) 2009-10-08
IL205220A0 (en) 2011-07-31
CO6190528A2 (es) 2010-08-19
TW200831509A (en) 2008-08-01
AU2007328286A1 (en) 2008-06-12
NZ577470A (en) 2011-11-25
KR20090086095A (ko) 2009-08-10
NO20092569L (no) 2009-07-06
US20080161317A1 (en) 2008-07-03
BRPI0719580A2 (pt) 2013-12-17
HN2009001112A (es) 2011-07-22
AU2007328286A2 (en) 2009-08-06
MA31027B1 (fr) 2009-12-01
US7576209B2 (en) 2009-08-18
AU2007328286B2 (en) 2011-01-20
JP4431636B1 (ja) 2010-03-17
EP2104669A2 (en) 2009-09-30
TWI386410B (zh) 2013-02-21
ES2527567T3 (es) 2015-01-26
JP5364454B2 (ja) 2013-12-11
NZ595829A (en) 2013-04-26
EA016195B1 (ru) 2012-03-30
CA2670760C (en) 2012-01-24
EA200970542A1 (ru) 2009-12-30
GEP20125469B (en) 2012-04-10
MX2009006052A (es) 2009-06-17
US8288407B2 (en) 2012-10-16
AR064010A1 (es) 2009-03-04
WO2008070041A2 (en) 2008-06-12
US20110160183A1 (en) 2011-06-30
CL2007003495A1 (es) 2008-05-30
IL198826A (en) 2010-11-30
EP2104669B1 (en) 2014-10-15
GT200900146A (es) 2010-04-13
HK1137758A1 (en) 2010-08-06
PE20081341A1 (es) 2008-10-19
TN2009000224A1 (en) 2010-10-18
JP2009298786A (ja) 2009-12-24
CR10851A (es) 2009-06-25
WO2008070041A3 (en) 2008-08-28
CA2670760A1 (en) 2008-06-12
ECSP099376A (es) 2009-07-31
JP2010511703A (ja) 2010-04-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101600706B (zh) Akt活性抑制剂
US8207169B2 (en) Substituted [1,2,4]triazolo[4′,3′:1,6]pyrido[2,3-b]pyrazines of the formula D
US20110288090A1 (en) Inhibitors of AKT Activity
US20120028918A1 (en) Pharmaceutical compositions and methods of making same
EP2299825B1 (en) Inhibitors of akt activity
EP2405756B1 (en) Inhibitors of akt activity
US20100022573A1 (en) Inhibitors of akt activity
US20130102605A1 (en) Inhibitors of akt activity
CN101374515B (zh) Akt活性抑制剂
WO2011130921A1 (en) Inhibitors of akt activity

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
REG Reference to a national code

Ref country code: HK

Ref legal event code: DE

Ref document number: 1137758

Country of ref document: HK

ASS Succession or assignment of patent right

Owner name: MSD K.K. CORP.

Free format text: FORMER OWNER: BANYU PHARMACEUTICAL CO., LTD.

C41 Transfer of patent application or patent right or utility model
TA01 Transfer of patent application right

Effective date of registration: 20110511

Address after: New jersey, USA

Applicant after: MERCK SHARP & DOHME Corp.

Co-applicant after: MSDK.K. Co.

Address before: New jersey, USA

Applicant before: MERCK SHARP & DOHME Corp.

Co-applicant before: BANYU PHARMACEUTICAL Co.,Ltd.

ASS Succession or assignment of patent right

Owner name: SCHERING CORP (US)

Free format text: FORMER OWNER: MSD CORP.

Effective date: 20121030

C41 Transfer of patent application or patent right or utility model
C53 Correction of patent of invention or patent application
CB02 Change of applicant information

Address after: New jersey, USA

Applicant after: MERCK SHARP & DOHME Corp.

Applicant after: MSDK.K. Co.

Address before: New jersey, USA

Applicant before: SCHERING Corp.

Applicant before: MSDK.K. Co.

COR Change of bibliographic data

Free format text: CORRECT: APPLICANT; FROM: SCHERING CORP (US) TO: MSD CORP.

TA01 Transfer of patent application right

Effective date of registration: 20121030

Address after: New jersey, USA

Applicant after: SCHERING Corp.

Applicant after: MSDK.K. Co.

Address before: New jersey, USA

Applicant before: MERCK SHARP & DOHME Corp.

Applicant before: MSDK.K. Co.

C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
REG Reference to a national code

Ref country code: HK

Ref legal event code: GR

Ref document number: 1137758

Country of ref document: HK

CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20131016

Termination date: 20181203