CN101579348A - 3,6’-二芥子酰基蔗糖在制备治疗抑郁症产品中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了3，6’－二芥子酰基蔗糖(3’，6－disinapoyl sucrose，DISS)的药物新用途，具体涉及它们在制备治疗抑郁症产品中的应用。3，6’－二芥子酰基蔗糖(3’，6－disinapoyl sucrose，DISS)对于治疗各种原因引起的抑郁症具有较好的治疗作用，3，6’－二芥子酰基蔗糖在药理学抑郁模型有显著的抗抑郁活性。并且其抗抑郁活性与增强5－羟色胺(5－HT)和去甲肾上腺素能(NE)神经功能均有关。DISS在抗抑郁有效剂量范围内无中枢兴奋或抑制性作用。

Description

3，6’-二芥子酰基蔗糖在制备治疗抑郁症产品中的应用

技术领域

本发明属于中药领域，主要涉及从天然植物中提取得到的和/或化学合成中获得的3，6’-二芥子酰基蔗糖(3’，6-disinapoyl sucrose，DISS)的药物新用途，具体涉及它们在制备治疗抑郁症产品中的应用。

技术背景

抑郁症是情感性精神障碍的主要类型，以显著而持久的心境低落为主要特征。1996年，世界卫生组织(WHO)公布的一项关于“全球疾病负担”的调查显示，1990年抑郁症已成为世界第四大疾患，占全部疾病总负担的3.7％；并预测到2020年将仅次于缺血性心脏病成为第二大疾患，占全部疾病总负担的5.7％。抑郁症将是21世纪人类最严重的疾病之一。现有的抗抑郁西药主要是：三环类(TCAs)，选择性5-HT重摄取抑制剂(SSRIs)，单胺氧化酶抑制剂(MAOIs)，它们均存在着不同程度的毒副作用，且价格昂贵。此外，目前仍有约1/3的抑郁患者对临床使用的这些抗抑郁药效果欠佳。因而从传统中药中研发新的抗抑郁药具有重要的理论和实际意义。

3，6’-二芥子酰基蔗糖是广泛存在于蓼科(Polygonaceae)、远志科(Polygalaceae)和十字花科(Brassicaceae)等科中的寡糖酯类成分。近年来，远志科中此类化学成分的研究越来越多，其脑保护作用和抗老化作用越来越受到重视。我们的研究表明3，6’-二芥子酰基蔗糖在药理学抑郁模型有显著的抗抑郁活性。并且其抗抑郁活性与增强5-羟色胺(5-HT)和去甲肾上腺素能(NE)神经功能均有关。DISS在抗抑郁有效剂量范围内无中枢兴奋或抑制性作用。

发明内容

本发明首次公开3，6’-二芥子酰基蔗糖(3’，6-disinapoyl sucrose，DISS)用于治疗西医范畴的以抑郁症状为主的精神疾病和中医范畴的情志性疾病方面的应用。

本发明的3，6’-二芥子酰基蔗糖是一种药物活性成分，按照常规的制剂工艺，可以以3，6’-二芥子酰基蔗糖(3’，6-disinapoyl sucrose，DISS)为主活性组份，加入常规的赋性剂、调味剂、崩解剂、防腐剂、润滑剂、湿润剂、粘合剂、溶剂、增稠剂、增溶剂等药物辅料，制成任何一种适合于临床上使用的剂型，如片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液体制剂、注射剂等。

由于本发明首次公开了3，6’-二芥子酰基蔗糖治疗抑郁症的药用作用，因此，将3，6’-二芥子酰基蔗糖单独或与其他活性组份或辅料配合制成药剂，只要是该药剂用于治疗抑郁症，均属于本发明的保护范围。

本发明的3，6’-二芥子酰基蔗糖在制成任何一种剂型时，均具有治疗抑郁症的作用。任何药剂，如果其组份中含有3，6’-二芥子酰基蔗糖或仅以3，6’-二芥子酰基蔗糖单独成分制备成药，在其包装或说明书等标识上或者在其他任何宣传品上只要注明或提示具有治疗抑郁症的作用，也属于本发明的保护范围之内。

本发明的3，6’-二芥子酰基蔗糖是来源于民间常用的天然中草药物远志科植物远志Polygala tenuifolia willd.的干燥根。因此，也可以将3，6’-二芥子酰基蔗糖制成保健食品或保健药品。将3，6’-二芥子酰基蔗糖制成的保健食品或保健药品，如果在其包装或包装或说明书等标识上注明或提示具有治疗抑郁症的作用，也属于本发明的保护范围之内。

实施例：远志3，6’-二芥子酰基蔗糖在药物诱发抑郁模型上的药效评价

1.材料：

1.1动物：KM小鼠，♂，体重18-22g军事医学科学院动物中心提供，合格证号：SCXK-(军)2002-001。

1.2药品与试剂 地昔帕明(Desipramine，DMI)、阿扑吗啡(Apomorphine，APO)、育亨宾(Yohinbin，YOH)、5-羟色氨酸(5-hydroxytryptophan，5-HTP)、帕吉林(pargyline)，均为sigma公司产品。

1.3仪器与材料 Fab-Ms质谱仪Micromass ZabSpec(美国)，核磁共振仪JNM-ECA-400超导仪(日本)，柱色谱硅胶(200～300目)和薄层色谱硅胶F254(均为青岛海洋化工厂)。J2298-CM动物自主活动监测仪(中国医学科学院药物研究所研制)；远志为远志科植物远志Polygala tenuifolia willd.的干燥根，由中国人民解放军总医院中药房提供，解放军总医院刘萍主任鉴定。

2.方法

2.1活性指导下分离3，6’-二芥子酰基蔗糖

取远志根(965g)粉碎后用50％的乙醇回流提取3次，12层纱布热滤，合并3次的提取液，浓缩液上大孔吸附树脂(SP-825)，依次用水、30％乙醇、50％乙醇、70％乙醇、95％乙醇洗脱，洗脱物浓缩后，用冷冻干燥机制成干粉。取50％乙醇洗脱部分(86g)经硅胶柱色谱，CHCl₃-MeOH-H₂O系统梯度洗脱，根据TLC结果合并第14至20部分，取其中5g经硅胶柱色谱，CHCl₃-MeOH-H₂O系统梯度洗脱，反复纯化、富集得化合物4(133.4mg)等8个化合物。

2.2.3，6’-二芥子酰基蔗糖的结构鉴定

化合物4为黄色无定型粉末，FAB-MSm/z：755[M+H]⁺。¹H-NMR中给出了组特征性的芥子酰基信号：7.69(1H，d，J＝16.0Hz)，6.49(1H，d，J＝16.0Hz)，6.93(2H，s)，3.90(6H，s，OMe)，7.61(1H，d，J＝16.0Hz)，6.47(1H，d，J＝16.0Hz)，6.88(2H，s)，3.85(6H，s，OMe×2)及1组蔗糖H信号，对照文献，鉴定该化合物为3，6’-二芥子酰基蔗糖(3’，6-disinapoyl sucrose，DISS)。其¹³C-NMR数据见表1。

化合物4和文献【4】的¹³C-NMR谱数据比较*

*测定溶剂为CD3OD，400MHZ

3，6’-二芥子酰基蔗糖(3’，6-disinapoyl sucrose，DISS)

2.3.5-HTP诱发小鼠甩头实验

小鼠随机分为NS组(20ml·kg^-1)、DMI组(20mg·kg^-1)、DISS高、中、低剂量组(高、中、低剂量分别为4mg·kg^-1、2mg·kg^-1、1mg·kg^-1，1mg相当于生药2.3g)，每组10只，ip帕吉林10mg·kg^-1后1h，ip NS、DMI、DISS各剂量30min后，ip5-HTP20mg·kg^-1，立即放入24cm×15cm×15cm的箱内，观察记录小鼠每5min的甩头次数，共记录50min。观察者不知小鼠的用药和剂量情况。

2.4.阿朴吗啡诱导小鼠体温下降实验

小鼠随机分为NS组(20ml·kg^-1)、DMI组(20mg·kg^-1)、DISS高、中、低剂量组(高、中、低剂量分别为4mg·kg^-1、2mg·kg^-1、1mg·kg^-1)，每组10只，连续给药3d，环境温度保持20-22℃。末次给药前测量肛温2次，其均数作为基础体温，ip NS、DMI、DISS各剂量30min后，sc注射16mg·kg^-1的Apo，30min后再次测量肛温，观察药物是否能够拮抗Apo的降低体温作用。

2.5.育亨宾毒性增强小鼠试验

小鼠随机分为NS组(20ml·kg^-1)、DMI组(20mg·kg^-1)、DISS高、中、低剂量组(高、中、低剂量分别为4mg·kg^-1、2mg·kg^-1、1mg·kg^-1)，每组10只，ip NS、DMI、DISS各剂量30min后，sc注射30mg·kg-11 6mg·kg-1的YOH，记录给予YOH 18h后各组小鼠的死亡率。

2.6.DISS对自发活动小鼠的影响

小鼠随机分为NS组(20ml·kg^-1)，DISS高、中、低剂量组(高、中、低剂量分别为4mg·kg^-1、2mg·kg^-1、1mg·kg^-1)，每组10只。ip NS、DISS各剂量40min后，分别放入动物自主活动监测仪，记录5min内各组小鼠的自主活动次数，每次同时记录5只小鼠的活动情况。

2.7统计学处理 采用CHISS统计软件进行统计分析，数据以x±S表示，量反应资料组间比较用方差分析(ANAVO)，质反应资料组间比较用χ²检验。

3.结果

3.1 3，6’-二芥子酰基蔗糖对5-HTP诱发小鼠甩头行为的影响：

与NS组比较，小鼠ig给予DISS高、中、低三个剂量，对5-HTP诱导的小鼠甩头行为均有不同程度的增强作用，与DMI作用相似。(见表1)

表1.3，6’-二芥子酰基蔗糖对5-HTP诱发小鼠甩头行为的影响(.x±s)

Tab 1.Effects of DISS on 5-HTP induced head-twitch response in mice(x±s)

注：与生理盐水组相比 ¹⁾P＜0.05，²⁾P＜0.01

Note：Note:vs NS group ¹⁾P＜0.05，²⁾P＜0.01

3.2 3，6’-二芥子酰基蔗糖对高剂量阿扑吗啡引起小鼠体温降低的影响：

DISS各剂量组均能显著拮抗高剂量APO所致的小鼠体温下降，结果见表2。

表2 DISS对高剂量阿朴吗啡所致小鼠体温下降的影响(x±S n＝10)

Tab.2 Effects of DISS on antagonism of high dose of apomorphine in mice(x±S，n＝10)

注：与生理盐水组相比 ¹⁾P＜0.05，²⁾P＜0.01

Note:vs NS group ¹⁾P＜0.05，²⁾P＜0.01

3.3 给予各剂量的3，6’-二芥子酰基蔗糖后对育亨宾致死作用的影响

实验结果见表3，DISS高剂量能显著增加皮下注射YOH小鼠的死亡率，提示DISS可通过影响NE能神经传递，产生抗抑郁作用。

表3 小鼠给予3，6’-二芥子酰基蔗糖对YOH毒性的影响(n＝10)

Tab.3 Effect of administration DISS on the YOH toxicity in mice(n＝10)

注：与生理盐水组相比 ¹⁾P＜0.01

Note:vs NS group ¹⁾P＜0.01

3.4 3，6’-二芥子酰基蔗糖后对小鼠自主活动次数的影响(n＝10)，

给予各剂量的DISS对小鼠自主活动次数均没有显著的影响，结果见表4。

表4 3，6’-二芥子酰基蔗糖对小鼠自主活动次数的影响(n＝10)

Tab.4 Effect of treatment with DISS on the autonomic activities in mice(n＝10)

4.结论

在国家自然科学基金的资助下，我们通过体内外研究，发现远志中的寡糖酯类成分是抗抑郁的活性成分，富集这些成分(含量大于75％)进行进一步的研究，糖酯类部位在强迫游泳及悬尾模型上显示出非常好的抗抑郁作用，进一步从寡糖酯部位中分离得到了8个单体化合物。本研究在前期工作的基础上，运用药理学抑郁模型探讨单体化合物3，6’-二芥子酰基蔗糖的抗抑郁作用及可能的作用机制。

经典单胺理论认为，抑郁症的发生与脑内单胺递质功能不足有关，尤其以NE和5-HT系统功能关系密切；药物对高剂量阿扑吗啡引起小鼠体温下降的拮抗是通过中枢NE能机制，该实验反映了药物对NE重摄取/或NE传递的作用。育亨宾作为α2受体拮抗剂，可阻断中枢和外周交感神经突出前膜的α2受体促进NE释放，使突触间隙NE浓度升高产生中枢神经系统毒性，导致实验动物死亡。5-HT通过激动脑内5-HT：受体，引起小鼠甩头行为，给予5-HT的前体5-HTP后，使转运到脑内增加外源性5-HT，在小鼠可看到特征性反应-甩头行为，三环类抗抑郁药和选择性5-经色胺重吸收抑制剂(SSR1)均可通过增强脑内5-HT神经系统功能，加强这种甩头行为。

本研究结果表明，给予DISS可使育亨宾所致动物死亡率明显增加，提示DISS增强了育亨宾对中枢神经系统的毒性作用。而DISS对高剂量阿扑吗啡所引起的小鼠体温下降的拮抗作用，也反映了其对中枢去甲肾上泉素重摄取及/或对去甲肾上腺素传递的影响；远志中的3，6’-二芥子酰基蔗糖能增强5-HTP诱导的小鼠甩头行为，并有剂量依赖性；在本实验中的剂量范围内，DISS无中枢兴奋或抑制作用。

Claims (5)

1.3，6’-二芥子酰基蔗糖在制备治疗抑郁症产品中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其中的3，6’-二芥子酰基蔗糖是指从天然植物中提取得到的和/或化学合成中获得的3，6’-二芥子酰基蔗糖(3’，6-disinapoyl sucrose，DISS)。

3.根据权利要求1所述的应用，是指加入常规的赋形剂、调味剂、崩解剂、防腐剂、润滑剂、湿润剂、粘合剂、溶剂、增稠剂、增溶剂药物辅料，制成任何一种适合于临床上使用的剂型，包括片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液体制剂、注射剂。

4.根据权利要求1所述的应用，其中所指的抑郁症状是指由于各种原因引起的抑郁。

5.根据权利要求1所述的应用，其中所说的产品是指治疗抑郁症的药品、保健药品、保健食品和其他保健品。