CN101347562A - 抗抑郁药物及其制备方法与应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种抗抑郁药物，该药物是栀子(炒)水或醇提取物经大孔树脂纯化分离部分(有效部位I)与香附(醋制)、川芎和苍术(炒)3味药乙醇提取水不溶部分(有效部位II)的混合物与药学上适用载体混合，制成各种制剂。本发明还公开了该抗抑郁药物的制备方法和医药用途。

Description

抗抑郁药物及其制备方法与应用

技术领域

本发明涉及一种抗抑郁药物。本发明还涉及该抗抑郁药物的制备方法；另外，本发明也涉及该抗抑郁药物的医药用途。

背景技术

抑郁症是指以显著而持久的情绪低落，活动能力减退，思维与认知功能迟缓为临床主要症状的一类心理障碍。随着诸多应急因素的加剧，抑郁症已经成为现代社会的常见病、高发病，其发病率正在迅速攀升。目前，抑郁症已位居世界10大疾病的第4位，预计到2020年将跃至第二，仅次于缺血性心脏病。WHO指出，21世纪人类面对的最大疾患是精神疾病，而抑郁症是其中重点。抑郁症的防治工作已引起社会和医学界的广泛重视。

对抑郁症的治疗准则是抗抑郁剂和心理干预综合治疗。20世纪30年代，以电痉挛和胰岛素休克疗法为主的治疗方法，患者和家属难以接受；50年代早期，用异丙肼改善抑郁症状，但因能引起躁狂，有类似鸦片类的兴奋剂作用而未被继续使用；1952年，氯丙嗪问世，由于疗效迅速，很快被广泛使用；1957年，瑞士科学家康雷诺合成了一种与氯丙嗪化学结构相近似的药物丙咪嗪，具有良好的抗抑郁效果，又有镇静作用而取代了氯丙嗪，但之后又因其副作用较大而停用；60年代，美国礼来药厂的研究人员，发现一种物质能够抑制5-羟色胺的再吸收，而对其他神经递质没有作用。此后，药物学家们又陆续开发了10余种类似的药物，统称为“选择性5-羟色胺再吸收抑制剂”，为抑郁症患者提供了充分的选择余地。

这些合成药大多存在抗抑郁谱窄、副作用大、药价高和易复发等缺陷。从2003年6月开始，美国FDA对发表的儿童抗抑郁药研究结果进行了回顾分析，帕罗西汀及其他抗抑郁药似乎增加患者的自杀念头和行为；美国加州大学伍莉研究发现，服用抗抑郁药后，会增加老年人骨折的危险性(达到70％)；有证据显示，儿童使用抗抑郁药物治疗有可能诱发自杀等现象。所以迄今为止，可以说临床上还未研制出一种理想的抗抑郁药物。

鉴于西药抗抑郁药物开发也仅是方向性研究，以及当前多靶点、多系统、长期适应性调节的研究目标，中药复方抗抑郁作用研究虽然起步较晚但仍有一定的优势。一是中药复方在基础实验之前已经得到较好的临床验证，从而减少了实验工作的盲目性，大大缩短了筛选试验及开发的过程。其次中药复方具有多途径、多靶点、多层次、副作用小的作用优势。当前对复方活性成分的报道尚少，但复方较之单味药物成分更复杂，因此其作用的环节应当是更广泛的。无疑这种作用方式符合当前的开发策略，同时有可能克服抗抑郁药物治疗的缺陷。国内外在抗抑郁药的研制与开发方面越来越注重传统中药的研究。但目前从纯中药制剂中分离出具有抗抑郁活性的药物有效部位及活性成分的方法及相关制剂并不多见。

现有技术中，尚未见栀子(炒)、香附(醋制)、苍术(炒)、川芎上述提取组合物用于治疗抑郁症的报道。

发明内容

本发明的所要解决的技术问题之一是提供一种治疗抑郁症的中药制剂。

本发明的所要解决的技术问题之二是提供该中药制剂的制备方法。

本发明人利用现代药理实验手段，发现栀子(炒)、香附(醋制)、苍术(炒)和川芎组合物对治疗抑郁症有一定疗效，对其有效部位进行筛选，并对有效部位的提取方法进行研究，得到一种全新的抗抑郁药物。

本发明所述药物制剂中所采用香附为莎草科植物莎草Cyperus rotundus L.的干燥根茎；苍术为菊科植物茅苍术Atractylodes lancea(Thunb.)DC.或北苍术Atractylodes chinensis(DC.)Koidz.的干燥根茎；川芎为伞形科植物川芎Ligusticum chuanxiong Horts.的干燥根茎；栀子为茜草科植物栀子Gardeniajasminoides Ellis的干燥成熟果实。以上药材均严格按照《全国中药材炮制规范》进行炮制。

本发明所述药物制剂是以栀子的水或醇提取物经大孔树脂纯化分离部分(有效部位I)与香附、川芎、苍术3味药的乙醇提取水不溶性部分(有效部位II)为活性成分与药用辅料组成的各种医学上可以接受的制剂。该药物制剂是由下述重量份的原料药制备而成的药剂：香附30-70；川芎30-70；苍术30-70；栀子15-35。其中所述制剂的原料药所占最佳重量比为：栀子∶香附∶川芎∶苍术为0.5∶1∶1∶1。

本发明所述制剂包括口服制剂或非肠道给药剂型。所述口服制剂选自片剂、胶囊剂、胶丸(软胶囊)、颗粒剂、丸剂(浓缩丸、蜜丸、水丸、滴丸)、口服液体制剂当中的一种；所述非肠道给药剂型选自注射剂、气雾剂、栓剂或皮下给药剂型中的一种。所述制剂的组方可含有上述药物活性成分，以及一种或多种常用辅料，例如淀粉、预胶化淀粉、蔗糖、糊精、乳糖、硫酸钙、磷酸氢钙、微晶纤维素、甘露醇、食用植物油等填充剂；水、乙醇、淀粉浆、炼蜜、液状葡萄糖等润湿剂；羧甲基纤维素钠、明胶、阿拉伯胶、羟丙基甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮等粘合剂；琼脂、乙基纤维素、羧甲基淀粉钠、碳酸钙、交联聚乙烯吡咯烷酮等崩解剂；硬脂酸镁、滑石粉、氢化植物油、微粉硅胶、聚乙二醇等润滑剂；甜菊糖、薄荷醇、香精、甜蜜素、山梨醇等矫味剂。

本发明治疗抑郁症的中药复方制剂的制备包括下列步骤：

(1)按处方量取栀子以水或乙醇进行提取，若用乙醇提取，提取物减压浓缩至无乙醇味，通过XDA-1大孔树脂进行纯化处理，上样流速2.5Br/h，上样浓度以京尼平苷计8mg/ml，先以8-15倍柱体积水冲洗，流速10Br/h，洗脱液弃去，继而以20-40倍柱体积20％乙醇洗脱，流速5Br/h，收集此部分洗脱液，减压浓缩，即得有效部位I。

(2)按处方量取香附、川芎、苍术粉碎成细粉，加6-12倍量乙醇，回流提取1-2次，每次1-2h，提取液合并，减压浓缩至无醇味后用6-10倍量水混悬，离心过滤，不溶解于水的部分干燥，即为有效部位II。

(3)将有效部位I与有效部位II混合均匀，加入适宜药用辅料，按常规方法制成各种制剂。

对本发明中药制剂的化学成分进行分析后发现：有效部位中含有但不限于α-香附酮、β-谷甾醇、乙酰蒲公英萜醇、藁本内酯、正丁基酜内酯、苍术素、苍术素醇、(4E，6E，12E)-十四三烯-8-10-二炔-1，3-二乙酸酯、苍术内酯III、京尼平苷、西红花苷-1。

其化学结构分别为：

药效学试验证明，本发明药物可以改善小鼠抑郁状态的行为，具有一定的抗抑郁作用，其抗抑郁作用的机理可能与降低脑内5-HT的代谢有关。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步描述。

本发明下述实施例所用香附、川芎、栀子和苍术药材均购自上海养和堂中药饮片有限公司，并分别鉴定为莎草科植物莎草Cyperus rotundus L.的根茎，伞形科植物川芎Ligusticum chuanxiong Hort.的根茎，茜草科植物栀子Gardeniajasminoides Ellis.的成熟果实，菊科植物茅苍术Atractylodes lancea(Thunb.)DC.的根茎。并遵照原处方，香附为醋制，川芎为生品，栀子、苍术为炒制。

实施例1

称取栀子10kg，以水提取，提取液通过XDA-1大孔树脂进行纯化处理，上样流速2.5Br/h，上样浓度以京尼平苷计8mg/ml，先以12倍柱体积水冲洗，流速10Br/h，洗脱液弃去，继而以25倍柱体积20％乙醇洗脱，流速5Br/h，收集此部分洗脱液，减压浓缩，即得有效部位I。

另称取香附20kg、川芎20kg和苍术20kg，将其粉碎成细粉，加6倍量乙醇，浸泡0.5h，加热回流提取2h，提取液滤过，滤液回收溶剂，浓缩至无醇味。加入8倍量水混悬均匀，离心，分离不溶性部分，干燥，即得有效部位II。

将有效部位I与有效部位II混合均匀，得到提取物。在提取物中加入适量微粉硅胶、羧甲基淀粉钠，制粒，灌制胶囊。

实施例2

称取栀子10kg，以60％乙醇提取，提取液减压回收乙醇至无醇味，通过XDA-1大孔树脂进行纯化处理，上样流速2.5Br/h，上样浓度以京尼平苷计8mg/ml，先以10倍柱体积水冲洗，流速10Br/h，洗脱液弃去，继而以30倍柱体积20％乙醇洗脱，流速5Br/h，收集此部分洗脱液，减压浓缩，即得有效部位I。

另称取香附20kg、川芎20kg和苍术20kg，将其粉碎成细粉，加6倍量乙醇，浸泡0.5h，加热回流提取2h，提取液滤过，再加入6倍量乙醇，加热回流提取1h，滤液合并，回收溶剂，浓缩至无醇味。加入6倍量水混悬均匀，离心，分离不溶性部分，干燥，即得有效部位II。

将有效部位I与有效部位II混合均匀，得到提取物。在提取物中加入适量淀粉、微粉硅胶、滑石粉、硬脂酸镁，制粒，压片。

实施例3

称取栀子20kg，以水提取，提取液通过XDA-1大孔树脂进行纯化处理，上样流速2.5Br/h，上样浓度以京尼平苷计8mg/ml，先以10倍柱体积水冲洗，流速10Br/h，洗脱液弃去，继而以25倍柱体积20％乙醇洗脱，流速5Br/h，收集此部分洗脱液，减压浓缩，即得有效部位I。

另称取香附20kg、川芎20kg和苍术20kg，将其粉碎成细粉，加6倍量乙醇，浸泡0.5h，加热回流提取2h，提取液滤过，再加入6倍量乙醇，加热回流提取1h，滤液合并，回收溶剂，浓缩至无醇味。加入10倍量水混悬均匀，离心，分离不溶性部分，干燥，即得有效部位II。

将有效部位I与有效部位II混合均匀，得到提取物。在提取物中加入适量PEG10000、PEG4000、甘油，按栓剂工艺制成栓剂。

为叙述方便，将本发明任一上述实施例制备获得的提取物简称为YJ-XCC1Z3，并进行如下药效学试验：

1、试验材料

1.1试验药品：

盐酸丙咪嗪(30mg/kg，中国科学院上海药物研究所合成室提供，纯度99.9％)；帕吉林(sigma P8013)；5-HTP(sigma H8127)；利血平注射液(上海医科大学制药厂，批号：050402)；去甲肾上腺素(NE，Fluka 74490)；多巴胺(DA，Sigma H8502)；5-羟色胺(5-HT，Aldrich 460559)；3，4-二羟基苯乙酸(DOPAC，Fluka 37860)；高香草酸(HVA，Sigma 1252)、5-羟基吲哚乙酸(5-HIAA，Fluka55360)。

1.2试验动物：

ICR小鼠，♂，体重18～23g。北京维通利华实验动物技术有限公司，动物合格证号：NO.0089743。

1.3试验仪器：

张力换能器(100g，北京新航机电设备有限公司)；Medlab生物信号采集处理系统(南京美易科技有限公司)；数字监温仪(北京师范大学司南仪器厂，型号SN2202)；玻璃量筒(高25cm，直径10cm)；小鼠自主活动监测仪(MUROMACHI KIKAI CO.，LTD.TOKYO)。ESA HPLC仪(美国ESA公司)包括Model coulochem III电化学检测器，Model 582Pump，C₁₈色谱柱(MD-150×3.2mm，ESA，1nc)。

2、试验方法：

2.1对自主活动的影响。

雄性ICR小鼠40只，随机分为4组，每组10只。YJ-XCC1Z3高、低剂量组分别灌胃YJ-XCC1Z3 405mg·kg^-1和135mg·kg^-1，丙咪嗪组灌胃丙咪嗪30mg·kg^-1，溶剂对照组给予等容积的0.5％CMC-Na溶液。连续给药3天，每天给药2次，末次给药45min后，将各组小鼠放入自主活动仪，观察4min内活动次数。

2.2对小鼠强迫游泳不动时间的影响。

雄性ICR小鼠60只，随机分为4组，每组15只。YJ-XCC1Z3高、低剂量组分别灌胃YJ-XCC1Z3405mg·kg^-1和135mg·kg^-1，丙咪嗪组灌胃丙咪嗪30mg·kg^-1，溶剂对照组给予等容积的0.5％CMC-Na溶液。量筒内装21～23℃水，水深10cm，量筒之间放置一个不透明板，防止小鼠彼此看到。持续给药3天，每天给药2次。末次灌药后45min，小鼠被投入量筒，并滞留6min，记录后4min的不动时间。

2.3对小鼠悬尾不动时间的影响。

分组和给药方式同2.2项下。持续给药3天，每天给药2次。末次灌药后45min，用胶带在距离小鼠尾尖20mm处将之固定于张力换能器上，换能器连接到生物信号采集系统，通过Medlab软件记录动物的挣扎和不动状态。共悬挂6min，累计后4min的不动时间。

2.4对利血平所致小鼠体温降低的影响。

分组和给药方式同2.1项下。先测定各组小鼠基础体温，给予利血平2.5mg·kg^-1，腹腔注射，同时给受试药和阳性药，2h后，在肛门2cm处测定小鼠肛温。

2.5对5-羟色胺酸(5-HTP)诱导小鼠甩头次数的影响。

分组和给药方式同2.1项下。帕吉林100mg·kg^-1，腹腔注射，2h后给受试药和阳性药，45min后给予5-HTP 10mg·kg^-1，腹腔注射，15min后观察小鼠的甩头次数。

2.6对小鼠脑内单胺类神经递质的影响。

分组和给药方式同2.1项下。各组动物给药7d，每天1次。末次给药后45min给予利血平，2.5mg·kg^-1，腹腔注射。2h后将小鼠断头处死，在冰上剥离大脑，去除脑干、小脑，称重。按100mg组织加入500μl裂解液，匀浆，14000rpm高速离心，15min，取上清，过膜(0.45um)，取20μl进样，检测单胺类神经递质及其主要代谢产物的浓度。待测样品于-70℃保存。

色谱分析条件：流动相500ml中含醋酸钠3.402g，柠檬酸5.25g，正辛基磺酸钠(1-octanesulfonic acid)0.05g，TEA(三乙胺)660μl，Na₂EDTA0.1g，色谱甲醇25ml。流速0.4ml·min^-1，电压0.3v。

3、试验结果：

3.1对小鼠自主活动的影响。

试验结果如表1所示。试验结果表明：YJ-XCC1Z3组小鼠的自主活动与对照组比较没有显著差异(P＞0.05)。

表1YJ-XCC1Z3对小鼠自主活动的影响(x±s)

3.2对小鼠强迫游泳实验不动时间的影响。

试验结果如表2所示。试验结果表明：YJ-XCC1Z3高剂量组能缩短小鼠强迫游泳不动时间，与对照组比较P＜0.05，低剂量组与对照组比较无明显差异。

表2YJ-XCC1Z3对小鼠强迫游泳不动时间的影响(x±s)

¹⁾P＜0.01，vs.control ²⁾P＜0.05，vs.control

3.3对小鼠悬尾实验不动时间的影响。

试验结果如表3所示。试验结果表明：YJ-XCC1Z3高剂量组缩短小鼠悬尾不动时间，与对照组比较P＜0.05，低剂量组与对照组比较无明显差异。

表3YJ-XCC1Z3对小鼠悬尾不动时间的影响(x±s)

¹⁾P＜0.01，vs.control ²⁾P＜0.05，vs.control

3.4对利血平所致小鼠体温降低的影响。

试验结果如表4所示。试验结果表明：YJ-XCC1Z3低、高剂量组在120min均可拮抗利血平所致的小鼠体温下降(P＜0.01)。

表4YJ-XCC1Z3对利血平所致小鼠体温降低的影响(x±s)

¹⁾P＜0.01，vs.control

3.5对5-羟色胺酸诱导小鼠甩头实验的影响。

试验结果如表5所示。试验结果表明：YJ-XCC1Z3高剂量组可增加5-HTP诱导小鼠甩头总次数，与对照组比较P＜0.05。

表5YJ-XCC1Z3对5-羟色胺酸诱导小鼠甩头次数的影响(x±s)

¹⁾P＜0.01，vs.control

3.6对给予利血平小鼠脑内单胺类神经递质的影响。

对小鼠脑内单胺类神经递质的影响试验结果如表6所示。试验结果表明：与对照组比较，YJ-XCC1Z3组大、小剂量均使5-HT含量增加(p＜0.01)、NE的含量增加(分别为p＜0.05，p＜0.01)，YJ-XCC1Z3大剂量组多巴胺含量减少(p＜0.05)。

表6YJ-XCC1Z3对小鼠脑内单胺类神经递质的影响(x±s)

¹⁾P＜0.01，vs.control ²⁾P＜0.05，vs.control

对小鼠脑内单胺类神经递质代谢产物的影响试验结果如表7所示。试验结果表明：与对照组比较，YJ-XCC1Z3组小剂量使5-HIAA含量增加(p＜0.01)，HVA和DOPAC的含量与对照组无统计差异。

表7YJ-XCC1Z3对小鼠脑内单胺类神经递质代谢产物的影响(x±s)

¹⁾P＜0.01，vs.control ²⁾P＜0.05，vs.control

对小鼠脑内单胺类神经递质代谢的影响试验结果如表8所示。试验结果表明：与对照组比较，YJ-XCC1Z3组大小剂量均使5-HIAA/5-HT比值减少(p＜0.01)，YJ-XCC1Z3小剂量组DOPAC/DA比值增加(P＜0.05)。

表8YJ-XCC1Z3对小鼠脑内单胺类神经递质代谢的影响(x±s)

¹⁾P＜0.01，vs.control ²⁾P＜0.05，vs.control

综上所述：

小鼠强迫游泳实验和悬尾实验属于行为绝望实验，用于抗抑郁的筛选和评价。结果显示YJ-XCC1Z3高剂量组可显著缩短不动时间，表明具有较强的抗抑郁作用。小鼠的自主活动观察，显示YJ-XCC1Z3低、高剂量组对小鼠自主活动无显著影响，说明无精神运动兴奋作用。

拮抗利血平、5-HTP诱导的小鼠甩头实验表明，YJ-XCC1Z3能显著拮抗利血平所致小鼠体温下降。YJ-XCC1Z3高剂量组显著增加5-HTP诱导的甩头行为。以上结果表明YJ-XCCIZ3抗抑郁作用的作用机理可能与引起突触间隙中NE、5-HT浓度升高有关。

抑郁症的生物学基础是5-HT和/或NE的利用缺陷，阻断5-HT、NE重吸收和代谢的化合物已经广泛的用于治疗抑郁症。利血平可以耗竭脑内单胺类神经递质，丙咪嗪为三环类抗抑郁药，可以阻断单胺递质在神经末梢的再摄取，从而增加突触间隙的递质浓度，发挥抗抑郁作用。YJ-XCC1Z3和丙咪嗪均可以通过增加脑内5-HT、NE的含量而发挥抗抑郁作用，其中对5-HT的影响与YJ-XCC1Z3降低脑内5-HT的代谢有关。

总之，YJ-XCC1Z3可以改善小鼠抑郁状态的行为，具有一定的抗抑郁作用，其抗抑郁作用的机理可能与降低脑内5-HT的代谢有关。

Claims (8)

1、一种抗抑郁药物，其特征是，它是由下述重量份的原料药制备而成的药剂：香附30-70；川芎30-70；苍术30-70；栀子15-35。

2、根据权利要求1所述的抗抑郁药物，其特征是，各原料药的重量比为：栀子∶香附∶川芎∶苍术为0.5∶1∶1∶1。

3、根据权利要求1或2所述的抗抑郁药物，其特征是，含有如下化合物：α-香附酮、β-谷甾醇、乙酰蒲公英萜醇、藁本内酯、正丁基酜内酯、苍术素醇、苍术醇、(4E，6E，12E)-十四三烯-8-10-二炔-1，3-二乙酸酯、苍术内酯III、京尼平苷、西红花苷-1。

4、根据权利要求1或2或3所述的抗抑郁药物，其特征是，所述药剂是任何一种药剂学上所说的药用制剂。

5、根据权利要求4所述的抗抑郁药物，其特征是，所述的药用制剂为口服制剂或非肠道给药剂型。

6、根据权利要求5所述的抗抑郁药物，其特征是，所述口服制剂选自片剂、胶囊剂、胶丸、颗粒剂、丸剂和口服液体制剂；所述非肠道给药剂型选自注射剂、气雾剂、栓剂和皮下给药制剂。

7、权利要求1-6中任何一项所述的抗抑郁药物的制备方法，其特征是，包括如下步骤：

称取栀子并将其以水或乙醇进行提取，若用乙醇提取，提取物减压浓缩至无乙醇味，通过XDA-1大孔树脂进行纯化处理，上样流速2.5Br/h，上样浓度以京尼平苷计8mg/ml，先以8-15倍柱体积水冲洗，流速10Br/h，洗脱液弃去，继而以20-40倍柱体积20％乙醇洗脱，流速5Br/h，收集此部分洗脱液，减压浓缩，即得有效部位I；

称取香附、川芎和苍术并将其粉碎成细粉，加6-12倍量乙醇，回流提取1-2次，每次1-2h，提取液合并，减压浓缩至无醇味后用6-10倍量水混悬，离心过滤，将不溶解于水的部分干燥，即为有效部位II；

将有效部位I与有效部分II混合，加入适宜药用辅料，按常规方法制成各种药用制剂。

8、权利要求1-6中任何一项所述药物在制备治疗抑郁症药物中的应用。