CN101564554A - 用于获取全肝支架的试剂盒及全肝支架获取方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种用于获取全肝支架的试剂盒，其包括灌注液I：0.1％－10％(体积分数)非离子型去污剂的Tris－HCl溶液；和灌注液II：0.1％－10％(质量分数)离子型去污剂的Tris－HCl溶液。本发明还提供利用上述试剂盒获取全肝支架的方法。本发明使实质性器官肝脏更完全地去细胞化，同时保留细胞外基质的结构及大部分成分，从而用作生物支架材料，而应用于生物人工肝的研究。

Description

用于获取全肝支架的试剂盒及全肝支架获取方法
技术领域
本发明涉及一种获取生物支架时使用的试剂盒，具体涉及用于获取全肝支架的试剂盒。本发明还涉及使用所述试剂盒获得全肝支架的方法。
背景技术
当前，对终末期肝病(肝硬化，肝性脑病、肝癌)唯一有效的治疗方法只有肝脏移植。其他的方法如透析等虽然能延长人的生命，但是不能替代肝脏的所有功能，很难防止病情恶化。肝移植目前虽然在手术方面已相当成熟，但是存在供肝短缺及术后需要长期应用免疫抑制剂等问题，严重限制了肝移植在临床上的应用。因此，通过肝组织工程来缓解供体短缺的现状具有重要的现实意义。
肝脏组织工程中理想的支架材料应具有以下性质：连通的三维多孔结构和足够的孔隙率，有利于细胞生长、养分传输和代谢产物的排放；生物相容性好，降解性能合适，使得器官能够生长并逐渐代替支架；化学表面适合细胞的粘附、增殖和分化；机械性能与所植入的组织的要求相匹配；适合细胞附着的表面式样和结构；加载促进生长和功能形成的表面因子，以及合适的支架表面涂层。目前肝脏组织工程支架材料主要选自可降解高分子材料和天然基质材料，例如聚(乳酸-羟基乙酸)共聚物(PLGA)、海藻酸钠、壳聚糖、胶原、纤维连接蛋白、层连蛋白、透明质酸等以及其经过修饰后的材料。但是，现有的支架材料在机械强度、生物降解、模拟组织三维结构及血管化方面都存在缺陷。
AtalaAnthony等在美国专利申请第US2005/0249816号中公开了一种肝脏去细胞化的方法。去细胞化是将组织或器官上的细胞利用不同的方法洗脱下来，仅保留细胞外基质的技术。器官通过去细胞化后所得细胞外基质保留了原器官的内部三维支架结构，且具有较好的生物相容性，可作为组织工程支架材料。该方法通过机械手段和化学手段来实现，主要的步骤包括：机械搅动或震荡离体肝脏使其内的细胞膜破裂，然后用细胞裂解液浸泡或灌注肝脏使细胞分离脱落，最后用灌洗液冲洗肝脏中脱离的细胞，其中细胞裂解液可以是含有去污剂的碱性溶液，如含0.5％Triton X-100的氨溶液，所述的灌洗液可以是蒸馏水、生理盐水或培养基。该方法过程较复杂，且单用一种去污剂去细胞的作用不够完全。
发明内容
为克服现有技术的缺陷，提供一种具有良好的机械强度、生物降解性、模拟组织三维结构及血管化的全肝支架，本发明一方面提供一种用于获取全肝支架的试剂盒，其包括灌注液I：0.1％-10％(体积/体积)非离子型去污剂的Tris-HCl溶液；和灌注液II：0.1％-10％(质量/体积)离子型去污剂的Tris-HCl溶液。
在本发明的一个实施方式中，所述非离子型去污剂选自Triton X-100、Tween 20、Tween 40和Tween 80。优选地，所述非离子型去污剂为Triton X-100。
在本发明的另一个实施方式中，所述离子型去污剂为十二烷基硫酸钠(SDS)或熊去氧胆酸。
在本发明的另一个实施方式中，所述灌注液I是通过将非离子型去污剂溶于pH7-8、50-100mM的Tris-HCl中制成的。
在本发明的另一实施方式中，所述灌注液II是通过将离子型去污剂溶于pH7-8、50-100mM的Tris-HCl中制成的。
本发明的另一方面提供一种获取全肝生物支架的方法，其包括以下步骤：
(a)以权利要求1所述的灌注液I灌注离体肝脏，使得肝脏由土黄色变成乳白色；
(b)以蒸馏水灌注以充分洗脱灌注液I中的非离子型去污剂；
(c)以权利要求1所述的灌注液II灌注，使得肝脏变为透明；
(d)以蒸馏水灌注以充分洗脱灌注液II中的离子型去污剂。
在本发明的一个实施方式中，优选的灌注速度为4～1000ml/min，并且步骤(a)和步骤(c)可同时进行，或连续进行。灌注速度的选择与具体的动物有关，以灌注速度不实质性地损伤支架(例如血管部分)为宜，本领域技术人员通过有限次简单的实验即可确定对于不同动物的肝脏所能采取的合适灌注速度，或者采取的灌注速度与不同动物的肝脏血流量相当，以减少对保留成分的损伤，特别是血管的损伤，例如人的门静脉血流量为750ml/min，肝动脉血流量为350ml/min，灌注时可以采用相似的速度。
在本发明的另一个实施方式中，在灌注之前或之中，对离体肝脏进行机械搅拌和/或超声波处理。
在本发明的另一个实施方式中，在灌注之前对离体肝脏施用螯合剂。优选地，所述螯合剂为乙二胺四乙酸(EDTA)或乙二醇二乙醚二胺四乙酸(EGTA)。螯合剂结合Ca2+，松解了细胞之间的桥粒连接，使得洗脱相对容易。
在本发明的又一实施方式中，在灌注之中或之后，对离体肝脏施用胰蛋白酶和/或核酸酶。其可以降解细胞破坏后的蛋白质与核酸，并使其分解而更易洗脱出来。
在本发明的其他实施方式中，所述灌注的方法采用直接灌注法或循环灌注法。
本发明提供的试剂盒及使用该试剂盒获取全肝支架的方法使实质性器官肝脏去细胞化更完全，同时保留细胞外基质的结构及大部分成分，从而用作生物支架材料，而应用于生物人工肝的研究。其中非离子型去污剂(例如TritonX-100)破坏脂质与脂质及蛋白与脂质之间的相互作用，但是蛋白质与蛋白质之间的相互作用仍被完整的保留；离子型去污剂(例如SDS)可以有效地溶解细胞质和细胞的核膜，还可以破坏蛋白蛋白之间的相互作用。两者的作用机制互补，联合应用后具有非常理想的效果。而且，本发明使用了Tris-HCl缓冲液，其缓冲能力强，可以提供更稳定的pH环境。
附图说明
图1a和图1b显示了通过实施例1方法处理后的肝脏的病理切片(HE染色)，其中未见细胞，说明本发明的方法具有非常完全的去细胞化作用；
图2a和图2b显示了Masson染色与地衣红染色后的肝脏病理切片，以分别显示胶原纤维和弹力纤维，弹力纤维的保留显示小动脉结构的存在；
图3a和图3b是扫描电镜的结果，图中显示灌注后的肝脏支架保留了纤维网格样结构与血管；
图4a、4b、4c和4d分别显示细胞在肝脏支架上的粘附生长。
具体实施方式
为了更好地理解本发明的方法，下面将通过实施例和实验证据进一步阐述本发明及其优势。
实施例1.大鼠肝脏去细胞
1.配制灌注液I和灌注液II：
灌注液I：取Triton X-10010ml，溶于pH7.5、50mM的Tris-HCl 800ml中，定容至1000ml，得到1％Triton X-100；
灌注液II：取SDS 10g溶于pH7.5、50mM的Tris-HCl中800ml，定容至1000ml，得到1％SDS。
2.灌注以实现去细胞化：
从离体肝脏的门静脉插管，以10ml/min的速度往离体肝脏灌注1％TritonX-100灌注液1小时，此时肝脏中心区变成乳白色，流出的灌注液呈混浊的棕黄色；然后用双蒸水灌注1小时充分洗脱Triton X-100，接着用1％SDS灌注液以10ml/min的速度灌注3小时，此时肝脏变为透明，可见其内的脉管结构，最后用双蒸水灌注7小时以充分洗脱SDS。
实施例2.猪肝脏灌注去细胞
1.配制灌注液I和灌注液II：
灌注液I：取Triton X-100100ml溶于pH8、50mM的Tris-HCl 800ml中，定容至1000ml，得到10％Triton X-100；
灌注液II：取SDS 100g溶于pH8、50mM的Tris-HCl 800ml中，定容至1000ml，得到10％SDS。
2.灌注以实现去细胞化：
经门静脉与肝动脉分别插管后，同时灌注上述灌注液I和灌注液II，至肝脏变透明。使用的灌注速度为50ml/min。灌注后，使用双蒸水灌注以充分洗脱去污剂。
实施例3.小鼠肝脏去细胞
1.配制灌注液I和灌注液II：
灌注液I：取Triton X-1001ml溶于pH7.5、50mM的Tris-HCl 800ml中，定容至1000ml，得到0.1％Triton X-100；
灌注液II：取熊去氧胆酸1g溶于pH7.5、50mM的Tris-HCl 800ml中，定容至1000ml，得到0.1％熊去氧胆酸。
2.灌注以实现去细胞化：
经肝上下腔静脉后，结扎肝下下腔静脉，剪破门静脉进行灌注，灌注速度4ml/min。按实施例1中的方法灌注。
实施例4.小鼠肝脏去细胞
1.配制灌注液I和灌注液II：
灌注液I：取Tween2010ml溶于pH7.0、50mM的Tris-HCl 800ml中，定容至1000ml，得到1％Tween20；
灌注液II：取SDS1g溶于pH7.5、50mM的Tris-HCl 800ml中，定容至1000ml，得到0.1％SDS。
2.灌注以实现去细胞化：
经肝上下腔静脉后，结扎肝下下腔静脉，剪破门静脉进行灌注，灌注速度4ml/min。按实施例1中的方法灌注。
实施例5.手术切除肝脏去细胞
将手术切除的病肝分别处理出门静脉与肝动脉后，经门静脉与肝动脉分别插管后，同时灌注实施例2的灌注液I和灌注液II，至肝脏变透明。使用的灌注速度为门静脉750ml/min，肝动脉250ml/min。灌注后，使用双蒸水灌注以充分洗脱去污剂。
实施例6.超声波处理与灌注处理的联合使用
1.超声波处理：
将取得的肝脏放于盛满PBS缓冲液的密闭容器内(该容器经过高压消毒)，将该容器放于标准的超声池内超声约30min。
2.灌注处理：
超声波处理后进行灌注，以5ml/min的速度往离体肝脏灌注1％TritonX-100(制备方法同实施例1)1小时，然后用双蒸水灌注1小时充分洗脱TritonX-100，接着用1％SDS(制备方法同实施例1)以5ml/min的速度灌注3小时，最后用双蒸水灌注2小时充分洗脱SDS。
实施例7.酶处理与灌注处理的联合使用
1.核酸酶(DNAase)灌注液的配制：
取1％Triton X-100的Tris-HCl溶液约100ml，加入20900U的核酸酶，充分溶解后，以1％Triton X-100的Tris-HCl溶液定容至500ml，得到41.8u/ml核酸酶(DNAase)灌注液。过滤除菌后放于-20℃冰箱保存。
2.灌注处理：
以5ml/min的速度往离体肝脏灌注核酸酶灌注液1小时，然后用双蒸水灌注1小时充分洗脱Triton X-100，接着用1％SDS(制备方法同实施例1)以5ml/min的速度灌注3小时，最后用双蒸水灌注2小时充分洗脱SDS。
灌注方法可采用直接灌注与循环灌注两种方法，其中循环灌注适用于体积较大的肝脏，可以节省灌洗液，循环灌注中需加入滤网防止较大的细胞碎片堵塞灌注管道。
虽然本发明已经参考具体的实施方式进行描述，但是本领域技术人员通过阅读上述描述后，将可以对本发明做出显而易见的修改和修饰，而不违背本发明的意图和本质。本发明有意将这些修改和修饰包括在权利要求的范围内。

Claims (12)

1.一种用于获取全肝支架的试剂盒，其包括灌注液I：0.1％-10％(体积/体积比)非离子型去污剂的Tris-HCl溶液；和灌注液II：0.1％-10％(质量/体积比)离子型去污剂的Tris-HCl溶液。
2.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述非离子型去污剂选自Triton X-100、Tween 20、Tween 40和Tween 80。
3.如权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述非离子型去污剂为Triton X-100。
4.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述离子型去污剂为十二烷基硫酸钠或熊去氧胆酸。
5.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述灌注液I是通过将非离子型去污剂溶于pH7-8、50-100mM的Tris-HCl中制成的。
6.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述灌注液II是通过将离子型去污剂溶于pH7-8、50-100mM的Tris-HCl中制成的。
7.一种获取全肝生物支架的方法，其包括以下步骤：
(a)以权利要求1所述的灌注液I灌注离体肝脏，使得肝脏由土黄色变成乳白色；
(b)以蒸馏水灌注，以充分洗脱灌注液I中的非离子型去污剂；
(c)以权利要求1所述的灌注液II灌注，使得肝脏变为透明；
(d)以蒸馏水灌注，以充分洗脱灌注液II中的离子型去污剂。
8.如权利要求7所述的方法，其特征在于，在灌注之前或之中，对离体肝脏进行机械搅拌和/或超声波处理。
9.如权利要求7所述的方法，其特征在于，在灌注之前对离体肝脏施用螯合剂。
10.如权利要求9所述的方法，其特征在于，所述螯合剂为乙二胺四乙酸或乙二醇二乙醚二胺四乙酸。
11.如权利要求7所述的方法，其特征在于，在灌注之中或之后，对离体肝脏施用胰蛋白酶和/或核酸酶。
12.如权利要求7所述的方法，其特征在于，所述灌注的方法为直接灌注法或循环灌注法。
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Cited By (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101850136A (zh) * 2010-06-11 2010-10-06 四川大学华西医院 一种植入式生物人工肝脏
WO2010139209A1 (zh) * 2009-06-03 2010-12-09 南方医科大学珠江医院 用于获取全肝支架的试剂盒及全肝支架获取方法
CN103690997A (zh) * 2013-12-05 2014-04-02 南方医科大学珠江医院 用于制备去细胞肝脏支架的试剂盒及其使用方法
CN103751843A (zh) * 2013-12-05 2014-04-30 南方医科大学珠江医院 制备全肝脏生物支架的试剂盒及全肝脏生物支架制备方法
CN104353115A (zh) * 2014-10-29 2015-02-18 南通大学附属医院 用于胰腺脱细胞支架的试剂盒、支架的制备及再种植方法
CN104726398A (zh) * 2013-12-20 2015-06-24 江阴司特易生物技术有限公司 固定化的全人源ecm包被基质的制备方法
CN105031731A (zh) * 2015-08-18 2015-11-11 温州医科大学 一种快速去细胞单叶肝脏生物支架的制备方法
CN107281551A (zh) * 2017-07-11 2017-10-24 温旭东 冰冻法制备肝脏生物支架的方法
CN109536436A (zh) * 2018-10-17 2019-03-29 重庆医科大学附属儿童医院 一种人源性肝硬化ecm生物支架的制备方法

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20050249816A1 (en) * 1999-12-29 2005-11-10 Wake Forest University Health Services Tissue engineered liver constructs
CN1903382A (zh) * 2005-07-29 2007-01-31 芮钢 一种脱细胞基质异种骨的制作方法
CN101095963A (zh) * 2006-06-30 2008-01-02 中国人民解放军总医院 一种异体神经移植物、其制备方法及其应用
CN101564554A (zh) * 2009-06-03 2009-10-28 南方医科大学珠江医院 用于获取全肝支架的试剂盒及全肝支架获取方法

Cited By (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2010139209A1 (zh) * 2009-06-03 2010-12-09 南方医科大学珠江医院 用于获取全肝支架的试剂盒及全肝支架获取方法
CN101850136A (zh) * 2010-06-11 2010-10-06 四川大学华西医院 一种植入式生物人工肝脏
CN101850136B (zh) * 2010-06-11 2013-01-23 四川大学华西医院 一种植入式生物人工肝脏
CN103690997A (zh) * 2013-12-05 2014-04-02 南方医科大学珠江医院 用于制备去细胞肝脏支架的试剂盒及其使用方法
CN103751843A (zh) * 2013-12-05 2014-04-30 南方医科大学珠江医院 制备全肝脏生物支架的试剂盒及全肝脏生物支架制备方法
CN103751843B (zh) * 2013-12-05 2015-09-16 南方医科大学珠江医院 制备全肝脏生物支架的试剂盒及全肝脏生物支架制备方法
CN103690997B (zh) * 2013-12-05 2016-06-29 南方医科大学珠江医院 用于制备去细胞肝脏支架的试剂盒及其使用方法
CN104726398A (zh) * 2013-12-20 2015-06-24 江阴司特易生物技术有限公司 固定化的全人源ecm包被基质的制备方法
CN104353115A (zh) * 2014-10-29 2015-02-18 南通大学附属医院 用于胰腺脱细胞支架的试剂盒、支架的制备及再种植方法
CN105031731A (zh) * 2015-08-18 2015-11-11 温州医科大学 一种快速去细胞单叶肝脏生物支架的制备方法
CN107281551A (zh) * 2017-07-11 2017-10-24 温旭东 冰冻法制备肝脏生物支架的方法
CN109536436A (zh) * 2018-10-17 2019-03-29 重庆医科大学附属儿童医院 一种人源性肝硬化ecm生物支架的制备方法

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