CN101538296A - 过山蕨有效成分及其提取方法和用途 - Google Patents
过山蕨有效成分及其提取方法和用途 Download PDFInfo
- Publication number
- CN101538296A CN101538296A CN200810010676A CN200810010676A CN101538296A CN 101538296 A CN101538296 A CN 101538296A CN 200810010676 A CN200810010676 A CN 200810010676A CN 200810010676 A CN200810010676 A CN 200810010676A CN 101538296 A CN101538296 A CN 101538296A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- active ingredients
- ethanol
- hour
- precipitation
- extraction
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 238000000605 extraction Methods 0.000 title claims abstract description 35
- 241000134803 Asplenium ruprechtii Species 0.000 title claims abstract description 24
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 title claims abstract description 23
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 167
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims abstract description 35
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 28
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 24
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 15
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims abstract description 15
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims abstract description 15
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 10
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims abstract description 10
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 claims abstract description 9
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 claims abstract description 9
- 208000033386 Buerger disease Diseases 0.000 claims abstract description 5
- 206010043540 Thromboangiitis obliterans Diseases 0.000 claims abstract description 5
- 206010008088 Cerebral artery embolism Diseases 0.000 claims abstract description 4
- 206010019468 Hemiplegia Diseases 0.000 claims abstract description 4
- 201000009053 Neurodermatitis Diseases 0.000 claims abstract description 4
- 201000010849 intracranial embolism Diseases 0.000 claims abstract description 4
- -1 n Species 0.000 claims abstract 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims abstract 2
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 32
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims description 30
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims description 28
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 26
- 239000000470 constituent Substances 0.000 claims description 24
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 19
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 16
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 13
- 239000012535 impurity Substances 0.000 claims description 12
- 230000008030 elimination Effects 0.000 claims description 8
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 claims description 8
- 229930003944 flavone Natural products 0.000 claims description 7
- 235000011949 flavones Nutrition 0.000 claims description 7
- GAMYVSCDDLXAQW-AOIWZFSPSA-N Thermopsosid Natural products O(C)c1c(O)ccc(C=2Oc3c(c(O)cc(O[C@H]4[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O4)c3)C(=O)C=2)c1 GAMYVSCDDLXAQW-AOIWZFSPSA-N 0.000 claims description 6
- 150000002212 flavone derivatives Chemical class 0.000 claims description 6
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N phenol group Chemical group C1(=CC=CC=C1)O ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 235000013824 polyphenols Nutrition 0.000 claims description 6
- 239000001397 quillaja saponaria molina bark Substances 0.000 claims description 6
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 6
- VHBFFQKBGNRLFZ-UHFFFAOYSA-N vitamin p Natural products O1C2=CC=CC=C2C(=O)C=C1C1=CC=CC=C1 VHBFFQKBGNRLFZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- XDTMQSROBMDMFD-UHFFFAOYSA-N Cyclohexane Chemical compound C1CCCCC1 XDTMQSROBMDMFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 206010053476 Traumatic haemorrhage Diseases 0.000 claims description 4
- 238000003810 ethyl acetate extraction Methods 0.000 claims description 4
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 4
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 claims description 4
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 claims description 4
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 238000004064 recycling Methods 0.000 claims description 4
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 4
- 206010046788 Uterine haemorrhage Diseases 0.000 claims description 3
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 claims description 3
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 claims description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 2
- 239000007921 spray Substances 0.000 claims 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims 1
- 229930182486 flavonoid glycoside Natural products 0.000 claims 1
- 150000007955 flavonoid glycosides Chemical class 0.000 claims 1
- IYRMWMYZSQPJKC-UHFFFAOYSA-N kaempferol Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1=C(O)C(=O)C2=C(O)C=C(O)C=C2O1 IYRMWMYZSQPJKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 235000009048 phenolic acids Nutrition 0.000 claims 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims 1
- 238000005507 spraying Methods 0.000 claims 1
- 150000008130 triterpenoid saponins Chemical class 0.000 claims 1
- 235000017709 saponins Nutrition 0.000 abstract description 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 7
- 241000411851 herbal medicine Species 0.000 abstract description 4
- 208000002249 Diabetes Complications Diseases 0.000 abstract description 3
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 abstract description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 abstract description 2
- 235000009815 Momordica Nutrition 0.000 abstract 2
- 241000218984 Momordica Species 0.000 abstract 2
- 229930003935 flavonoid Natural products 0.000 abstract 2
- 150000002215 flavonoids Chemical class 0.000 abstract 2
- 235000017173 flavonoids Nutrition 0.000 abstract 2
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 abstract 2
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 abstract 2
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 abstract 1
- 206010027514 Metrorrhagia Diseases 0.000 abstract 1
- 208000034158 bleeding Diseases 0.000 abstract 1
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 abstract 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 abstract 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 abstract 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 abstract 1
- 201000008383 nephritis Diseases 0.000 abstract 1
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 abstract 1
- 238000003809 water extraction Methods 0.000 abstract 1
- 241001016465 Asplenium rhizophyllum Species 0.000 description 20
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 9
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 7
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 7
- 102000016912 Aldehyde Reductase Human genes 0.000 description 5
- 108010053754 Aldehyde reductase Proteins 0.000 description 5
- 208000031639 Chromosome Deletion Diseases 0.000 description 4
- 102000004317 Lyases Human genes 0.000 description 4
- 108090000856 Lyases Proteins 0.000 description 4
- 239000000428 dust Substances 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 235000008216 herbs Nutrition 0.000 description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 4
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 3
- 230000007760 free radical scavenging Effects 0.000 description 3
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 3
- 229940118148 Aldose reductase inhibitor Drugs 0.000 description 2
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 2
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 2
- 206010012655 Diabetic complications Diseases 0.000 description 2
- 239000003288 aldose reductase inhibitor Substances 0.000 description 2
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 2
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 2
- 238000000151 deposition Methods 0.000 description 2
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 2
- 239000012259 ether extract Substances 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 description 2
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 2
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 2
- 230000011218 segmentation Effects 0.000 description 2
- 241000134854 Aspleniaceae Species 0.000 description 1
- 244000025254 Cannabis sativa Species 0.000 description 1
- 229920000168 Microcrystalline cellulose Polymers 0.000 description 1
- ACFIXJIJDZMPPO-NNYOXOHSSA-N NADPH Chemical compound C1=CCC(C(=O)N)=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](O2)N2C3=NC=NC(N)=C3N=C2)O)O1 ACFIXJIJDZMPPO-NNYOXOHSSA-N 0.000 description 1
- 229910003251 Na K Inorganic materials 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- YKKPYMXANSSQCA-UHFFFAOYSA-N [3-[4-(aminomethyl)-6-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl]oxyphenyl]-(3-pyrazol-1-ylazetidin-1-yl)methanone Chemical compound N1(N=CC=C1)C1CN(C1)C(=O)C1=CC(=CC=C1)OC1=NC(=CC(=C1)CN)C(F)(F)F YKKPYMXANSSQCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- HHEAADYXPMHMCT-UHFFFAOYSA-N dpph Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC([N+](=O)[O-])=CC([N+]([O-])=O)=C1[N]N(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 HHEAADYXPMHMCT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 150000002213 flavones Chemical class 0.000 description 1
- MNQZXJOMYWMBOU-UHFFFAOYSA-N glyceraldehyde Chemical compound OCC(O)C=O MNQZXJOMYWMBOU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005469 granulation Methods 0.000 description 1
- 230000003179 granulation Effects 0.000 description 1
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 description 1
- 230000003908 liver function Effects 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 235000019813 microcrystalline cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008108 microcrystalline cellulose Substances 0.000 description 1
- 229940016286 microcrystalline cellulose Drugs 0.000 description 1
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 description 1
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 1
- 229930027945 nicotinamide-adenine dinucleotide Natural products 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 150000007965 phenolic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 238000003672 processing method Methods 0.000 description 1
- 238000010298 pulverizing process Methods 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 230000024883 vasodilation Effects 0.000 description 1
Images
Abstract
本发明属于医药技术领域，提供了一种中草药过山蕨有效成分及其提取方法和用途。该提取方法包括水提法、醇提法、大孔树脂纯化法、溶剂萃取法。经该方法所得的提取物主要有效成分为总黄酮、总皂苷、总有机酸，其含量分别为总黄酮1％－35％，总皂苷1％－25％，总酚酸1％－3％。本发明还提供了过山蕨直接或与药学上通常用于该类制剂的固体或液体混合制成适宜剂型的方法，过山蕨有效成分及其制剂具有治疗血栓闭塞性脉管炎，肾炎，外伤出血，子宫出血，神经性皮炎，脑栓塞引起的偏瘫以及糖尿病并发症的作用。该提取方法简单易行、成本低，所得提取物无毒副作用。
Description
技术领域：
本发明属于医药技术领域，涉及中草药过山蕨的有效成分提取方法和用途，以及过山蕨有效成分制剂的生产加工方法。
背景技术：
过山蕨(Camptosorus sibiricus Rupr.)，又名马蹬草，还阳草，过桥草，为铁角蕨科，过山蕨属多年生草本植物。本属全世界共两种，中国产一种。过山蕨是一种传统草药，民间用于治疗外伤出血，子宫出血，血栓闭塞性脉管炎，肾炎，神经性皮炎，脑栓塞引起的偏瘫以及糖尿病并发症等，具有确切疗效。实验表明，该草药毒性很小，对血压无明显影响，长期给药对家兔肝功能未见不良影响。其有效成分的提取及利用其有效成分生产加工成制剂未有报道。
发明内容：
本发明的目的在于提供过山蕨有效成分的提取方法，以及利用其有效成分生产加工数种制剂，将其作为治疗血栓闭塞性脉管炎，肾炎，外伤出血，子宫出血，神经性皮炎，脑栓塞引起的偏瘫以及糖尿病并发症的药物。
过山蕨有效成分组成如下：
本发明是是通过如下方案实现的：所述过山蕨有效成分的制备方法分四种：
方法1：取原药材去杂后，加15至30倍量水煎煮不少于两次，每次提取时间不少于1小时，提取液浓缩至药液体积的五分之一至二十分之一，在0-10℃下低温静置6-24小时至沉淀完全，除去沉淀，取上清液加乙醇沉淀1-2次，控制提取液中乙醇浓度在50％-90％，在0-10℃下低温静置12-48小时至沉淀完全，再次过滤，滤液回收乙醇至无醇味，所得上清液经大孔树脂(HPD 100或D101)进行分离纯化，分别以水，5％-30％乙醇，30％-60％乙醇，60％-95％乙醇洗脱，5％-30％乙醇洗脱物为有效成分组1，30％-60％乙醇洗脱物为有效成分组2，60％-95％乙醇洗脱物为有效成分组3，三者按折合生药材量1∶1∶1组合为过山蕨有效提取物。
方法2：取原药材去杂后，加15至30倍量的5％-95％的乙醇煎煮不少于两次，每次提取时间不少于1小时，提取液浓缩至药液体积的五分之一至二十分之一，在0-10℃下低温静置12-24小时至沉淀完全，除去沉淀，所得上清液经大孔树脂(HPD 100或D101)进行分离纯化，分别以水，5％-30％乙醇，30％-60％乙醇，60％-95％乙醇洗脱，5％-30％乙醇洗脱物为有效成分组1，30％-60％乙醇洗脱物为有效成分组2，60％-95％乙醇洗脱物为有效成分组3，三者按折合生药材量1∶1∶1组合为过山蕨有效提取物。
方法3：取原药材去杂后，加15至30倍量的5％-95％的乙醇煎煮不少于两次，每次提取时间不少于1小时，提取液浓缩至药液体积的五分之一至二十分之一，在0-10℃下低温静置12-24小时至沉淀完全，除去沉淀，取上清液分别用石油醚(或环己烷、正己烷)、乙酸乙酯、正丁醇萃取两次以上至萃取完全。回收溶媒，所得正丁醇萃取层经大孔树脂(HPD 100或D101)纯化，分别以水，5％-95％乙醇，乙醇洗脱，5％-95％乙醇洗脱物为有效成分组分1，乙酸乙酯萃取层为有效成分组2，二者按折合生药材量1∶1组合为过山蕨有效提取物。
方法4：取原药材去杂后，加15至30倍量水煎煮不少于两次，每次提取时间不少于1小时，提取液浓缩至药液体积的五分之一至二十分之一，在0-10℃下低温静置6-24小时至沉淀完全，除去沉淀，取上清液分别用石油醚(或环己烷、正己烷)、乙酸乙酯、正丁醇萃取两次以上至萃取完全。回收溶媒，所得正丁醇萃取层经大孔树脂纯化，分别以水，5％-95％乙醇，乙醇洗脱，5％-95％乙醇洗脱物为有效成分组分1，乙酸乙酯萃取层为有效成分组2，二者按折合生药材量1∶1组合为过山蕨有效提取物。
所得过山蕨有效成分提取物中，总黄酮含量为1％-35％，总皂苷含量为1％-25％，总酚酸含量为1％-3％。
由上述方法可见，过山蕨有效成分提取物由总黄酮、总皂苷和总酚酸组成，可通过上述四种方法制备，可简述为方法一：水提-水沉-醇沉-大孔树脂分段纯化；方法二：醇提-水沉-大孔树脂分段纯化；方法三：醇提-溶剂分段萃取-大孔树脂纯化；方法四：水提-溶剂分段萃取-大孔树脂纯化。
本发明所述提取物具有抗氧化、清除自由基、醛糖还原酶抑制、扩张血管等活性，可用于治疗血栓闭塞性脉管炎、糖尿病性肾炎、外伤出血等症的治疗。利用本发明获得的过山蕨有效成分提取物中的部分单体化合物具有显著的抗氧化、清除自由基、醛糖还原酶抑制的活性。
本发明的优点如下：
(1)本制备方法所得过山蕨提取物成分明确，其中化合物1-12，19-21为过山蕨特有成分，质量可控性强。
(2)本发明所得过山蕨有效成分提取物由三种不同类型天然产物组成，具有多靶点协同作用且毒副作用低的优点。
(3)制备方法简便、易行，提取充分，适宜于工业生产
(4)过山蕨有效成分提取物活性显著，疗效确切，可有效降低中药服用量。
附图说明：
图1为部分单体化合物类SOD活性测试结果
*：IC50＜10uM
图2为部分单体化合物自由基清除活性测试结果
*：IC50＜15uM
图3为部分单体化合物醛糖还原酶抑制活性测试结果
*：IC50＜50uM
具体实施方式：
实施例1
按照有效成分制备方法1
(1)取干燥过山蕨全草10kg，去除杂质、灰尘
(2)在中药提取罐中加入药材和18倍量的水，加热煮沸，提取两次，每次2小时。
(3)合并两次提取液，浓缩至20L，在4℃下低温静置24小时至沉淀完全，除去沉淀。
(4)取上清液加入乙醇，调节醇浓度至50％，在10℃下低温静置24小时至沉淀完全，再次过滤，滤液回收乙醇至无醇味。
(5)上清液上样至非极性大孔树脂柱，分别用水(8VR)、20％乙醇(4VR)、60％乙醇(4VR)、90％乙醇(4VR)梯度洗脱，得水洗物弃去，20％乙醇洗脱物、60％乙醇洗脱物、90％乙醇洗脱物按照折合生药量1∶1∶1比例混合，得过山蕨有效提取物，其中总黄酮含量为30％，总皂苷含量为20％，总酚酸含量为1％。
实施例2
按照有效成分制备方法2
(1)取干燥过山蕨全草5kg，去除杂质、灰尘
(2)在中药提取罐中加入药材和20倍量的70％乙醇，加热回流提取三次，分别为2小时，1.5小时，1小时。
(3)合并三次提取液，浓缩至8L，在4℃下低温静置12小时至沉淀完全，除去沉淀。
(5)上清液上样至非极性大孔树脂柱，分别用水(8VR)、30％乙醇(4VR)、70％乙醇(4VR)、95％乙醇(4VR)梯度洗脱，得水洗物弃去30％乙醇洗脱物、70％乙醇洗脱物、95％乙醇洗脱物按照折合生药量1∶1∶1比例混合，得过山蕨有效提取物，其中总黄酮含量为33％，总皂苷含量为20％，总酚酸含量为2％。
实施例3
按照有效成分制备方法3
(1)取干燥过山蕨全草6kg，去除杂质、灰尘
(2)在中药提取罐中加入药材和25倍量的75％乙醇，加热回流提取三次，分别为2小时，1.5小时，1小时。
(3)合并三次提取液，浓缩至10L，在4℃下低温静置20小时至沉淀完全，除去沉淀。
(4)上清液用等体积石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取四次。得石油醚萃取物320克，乙酸乙酯萃取物60克，正丁醇萃取物180克。回收溶酶，所得正丁醇萃取物进一步经大孔树脂纯化，分别以水，95％乙醇洗脱，减压回收溶酶得95％乙醇洗脱物140克。将95％乙醇洗脱物与乙酸乙酯萃取物按折合生药比1∶1比例混合，得到过山蕨有效成分提取物。得过山蕨有效提取物，其中总黄酮含量为28％，总皂苷含量为21％，总酚酸含量为1.5％。
实施例4
按照有效成分制备方法4
(1)取干燥过山蕨全草10kg，去除杂质、灰尘
(2)在中药提取罐中加入药材和30倍量的水，加热煮沸提取三次，分别为2小时，1.5小时，1小时。
(3)合并三次提取液，浓缩至15L，在4℃下低温静置12小时至沉淀完全，除去沉淀。
(4)上清液用等体积环己烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取四次。得石油醚萃取物510克，乙酸乙酯萃取物70克，正丁醇萃取物310克。回收溶酶，所得正丁醇萃取物进一步经大孔树脂纯化，分别以水，90％乙醇洗脱，减压回收溶酶得95％乙醇洗脱物240克。将95％乙醇洗脱物与乙酸乙酯萃取物按折合生药比1∶1比例混合，得到过山蕨有效成分提取物。得过山蕨有效提取物，其中总黄酮含量为26％，总皂苷含量为24％，总酚酸含量为1.1％。
实施例5
采用SOD试剂盒对提取物中的单体化合物进行了抗氧化活性测试
实验方法如下
实验结果：见表1
实施例6
采用DPPH自由基清除筛选模型，对提取物中的单体化合物进行了自由基清除活性测试
实验方法如下
实验结果：见表1
实施例7
采用醛糖还原酶抑制剂(ARI)筛选模型，对提取物中的单体化合物进行了醛糖还原酶抑制活性测试。
实验方法如下
A 180mM Na-K磷酸盐缓冲液 225μL
B 1.0M Li2SO4 50μL
C 10mM DL-glyceraldehyde(样品组平行2) 50μL
H2O(空白组) 50μL
D 稀释后的醛糖还原酶 100μL
E 样品(样品组和空白组各) 25μL
A-E混合液在30℃下水浴加热3min，加入0.3M NADPH 50μL，再在30℃水浴下加热30min，加入0.5N HCl 150μL，再加入10mMimidazole 500μL(含6N NaOH)，在60℃水浴下加热20min，室温放置，向96孔板中分别加入200μL反应液，荧光检测仪检测(λex 360nm，λem 460nm)
实验结果：见表1
实施例8
取过山蕨有效提取物(制备方法如实施例1)干燥、粉碎、过80目筛，直接或加适宜稀释剂(糊精、微晶纤维等)灌装胶囊。
实施例9
取过山蕨有效提取物(制备方法如实施例2)按1∶1～1∶4比例加入稀释剂(糊精、淀粉等)，干燥、粉碎，制粒、压片或制丸剂。
Claims (6)
1、过山蕨有效成分，其特征在于：包括山柰酚型黄酮苷类、环阿尔廷型三萜皂苷类、小分子酚酸类；该有效成分的结构式为：
2、一种如权利要求1所述的过山蕨有效成分的提取方法，其特征在于：其提取方法如下：
取原药材去杂后，加15至30倍量水煎煮不少于两次，每次提取时间不少于1小时，提取液浓缩至药液体积的五分之一至二十分之一，在0-10℃下低温静置6-24小时至沉淀完全，除去沉淀，取上清液加乙醇沉淀1-2次，控制提取液中乙醇浓度在50％-90％，在0-10℃下低温静置12-48小时至沉淀完全，再次过滤，滤液回收乙醇至无醇味，所得上清液经大孔树脂进行分离纯化，分别以水，5％-95％乙醇，乙醇洗脱，5％-95％乙醇洗脱物为有效成分组；
或取原药材去杂后，加15至30倍量的5％-95％的乙醇煎煮不少于两次，每次提取时间不少于1小时，提取液浓缩至药液体积的五分之一至二十分之一，在0-10℃下低温静置12-24小时至沉淀完全，除去沉淀，取上清液加乙醇沉淀1-2次，控制提取液中乙醇浓度在50％-90％，在0-10℃下低温静置12-48小时至沉淀完全，再次过滤，滤液回收乙醇至无醇味，所得上清液经大孔树脂进行分离纯化，分别以水，5％-95％乙醇，乙醇洗脱，5％-95％乙醇洗脱物为有效成分组；
或取原药材去杂后，加5％-95％的乙醇煎煮不少于两次，每次提取时间不少于1小时，提取液浓缩至药液体积的五分之一至二十分之一，在0-10℃下低温静置12-24小时至沉淀完全，除去沉淀，取上清液分别用石油醚(或环己烷、正己烷)、乙酸乙酯、正丁醇萃取两次以上至萃取完全。回收溶媒，所得乙酸乙酯萃取层和正丁醇萃取层为有效成分组；
或取原药材去杂后，加15至30倍量水煎煮不少于两次，每次提取时间不少于1小时，提取液浓缩至药液体积的五分之一至二十分之一，在0-10℃下低温静置6-24小时至沉淀完全，除去沉淀，取上清液分别用石油醚(或环己烷、正己烷)、乙酸乙酯、正丁醇萃取两次以上至萃取完全。回收溶媒，所得乙酸乙酯萃取层和正丁醇萃取层为有效成分组。
3、根据权利要求2所述的过山蕨有效成分的提取方法，其特征在于：所述的有效成分组中：总黄酮含量为1％-35％，总皂苷含量为1％-25％，总酚酸含量为1％-3％。
4、根据权利要求2所述的过山蕨有效成分的提取方法，其特征在于：还可以将过山蕨有效成分组提取液经喷雾干燥制成粉末状固体。
5、根据权利要求4所述的过山蕨有效成分的提取方法，其特征在于：其喷雾干燥条件为：喷入的空气预热至280±20℃，喷入的空气压力为3-6kg/cm2，干燥室内温度保持在120±20℃，提取粉中总有效成分含量＞50％。
6、过山蕨有效成分在制备治疗血栓闭塞性脉管炎，肾炎，外伤出血，子宫出血，神经性皮炎，脑栓塞引起的偏瘫以及糖尿病并发症药物中的应用。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN200810010676.3A CN101538296B (zh) | 2008-03-17 | 2008-03-17 | 过山蕨有效成分及其提取方法和用途 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN200810010676.3A CN101538296B (zh) | 2008-03-17 | 2008-03-17 | 过山蕨有效成分及其提取方法和用途 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN101538296A true CN101538296A (zh) | 2009-09-23 |
| CN101538296B CN101538296B (zh) | 2014-01-01 |
Family
ID=41121704
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN200810010676.3A Expired - Fee Related CN101538296B (zh) | 2008-03-17 | 2008-03-17 | 过山蕨有效成分及其提取方法和用途 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN101538296B (zh) |
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102526130A (zh) * | 2011-11-07 | 2012-07-04 | 卢建立 | 过山蕨的应用以及一种肝功修正茶 |
| CN103059069A (zh) * | 2012-12-13 | 2013-04-24 | 大兴安岭林格贝有机食品有限责任公司 | 一种从野生过山蕨里提取总黄酮的新型工艺方法 |
| CN104961791A (zh) * | 2015-06-05 | 2015-10-07 | 中国科学院西北高原生物研究所 | 蕨麻中一种新的三萜化合物、制备方法和用途 |
| CN105613595A (zh) * | 2015-12-22 | 2016-06-01 | 新乡医学院第一附属医院 | 一种用于ct设备的清洗消毒液及其制备方法和应用 |
| CN109796511A (zh) * | 2019-03-05 | 2019-05-24 | 山东省药学科学院 | 一种新的环烯醚萜类化合物及其制备方法和医药用途 |
| CN111808160A (zh) * | 2020-07-10 | 2020-10-23 | 山东省药学科学院 | 新的环阿尔廷型皂苷-9,19-裂环-9,11-烯衍生物及其制备方法和应用 |
| US11608353B2 (en) * | 2016-07-27 | 2023-03-21 | The University Of British Columbia | Amylase inhibitor compounds, methods of their use and compositions thereof |
-
2008
- 2008-03-17 CN CN200810010676.3A patent/CN101538296B/zh not_active Expired - Fee Related
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| PIA KAHNBERG ET AL: "The use of a pharmacophore model for identification of novel ligands for the benzodiazepine binding site of the GABAA receptor", 《JOURNAL OF MOLECULAR GRAPHICS AND MODELLING》 * |
| 李宁 等: "过山蕨中黄酮类成分的研究", 《中国药学杂志》 * |
| 李宁 等: "过山蕨的化学成分研究(Ⅱ)", 《中草药》 * |
| 李宁: "过山蕨和山茶种子的化学成分和药理活性研究", 《万方知识服务平台网》 * |
Cited By (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102526130A (zh) * | 2011-11-07 | 2012-07-04 | 卢建立 | 过山蕨的应用以及一种肝功修正茶 |
| CN103059069A (zh) * | 2012-12-13 | 2013-04-24 | 大兴安岭林格贝有机食品有限责任公司 | 一种从野生过山蕨里提取总黄酮的新型工艺方法 |
| CN103059069B (zh) * | 2012-12-13 | 2016-05-25 | 大兴安岭林格贝寒带生物科技股份有限公司 | 一种从野生过山蕨里提取总黄酮的工艺方法 |
| CN104961791A (zh) * | 2015-06-05 | 2015-10-07 | 中国科学院西北高原生物研究所 | 蕨麻中一种新的三萜化合物、制备方法和用途 |
| CN104961791B (zh) * | 2015-06-05 | 2017-03-08 | 中国科学院西北高原生物研究所 | 蕨麻中一种新的三萜化合物、制备方法和用途 |
| CN105613595A (zh) * | 2015-12-22 | 2016-06-01 | 新乡医学院第一附属医院 | 一种用于ct设备的清洗消毒液及其制备方法和应用 |
| CN105613595B (zh) * | 2015-12-22 | 2018-03-09 | 新乡医学院第一附属医院 | 一种用于ct设备的清洗消毒液及其制备方法和应用 |
| US11608353B2 (en) * | 2016-07-27 | 2023-03-21 | The University Of British Columbia | Amylase inhibitor compounds, methods of their use and compositions thereof |
| CN109796511A (zh) * | 2019-03-05 | 2019-05-24 | 山东省药学科学院 | 一种新的环烯醚萜类化合物及其制备方法和医药用途 |
| CN109796511B (zh) * | 2019-03-05 | 2021-10-22 | 山东省药学科学院 | 一种新的环烯醚萜类化合物及其制备方法和医药用途 |
| CN111808160A (zh) * | 2020-07-10 | 2020-10-23 | 山东省药学科学院 | 新的环阿尔廷型皂苷-9,19-裂环-9,11-烯衍生物及其制备方法和应用 |
| CN111808160B (zh) * | 2020-07-10 | 2022-08-09 | 山东省药学科学院 | 新的环阿尔廷型皂苷-9,19-裂环-9,11-烯衍生物及其制备方法和应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN101538296B (zh) | 2014-01-01 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN107158063B (zh) | 一种利用金银花有效部位组合物制成的肠溶微丸及其制备方法 | |
| CN101538296B (zh) | 过山蕨有效成分及其提取方法和用途 | |
| CN112870236B (zh) | 一种黄蜀葵花黄酮类有效部位及其制备方法与应用 | |
| CN102114102B (zh) | 一种具有保肝利胆作用的中药提取物混合制剂及其应用 | |
| CN110893197A (zh) | 用于治疗痛风的蔓三七提取物及其制备方法 | |
| CN101524458A (zh) | 土茯苓皂甙、黄酮类提取物及其制备方法 | |
| CN107519227A (zh) | 一种金银花组合物颗粒及其制备方法 | |
| CN103550599A (zh) | 一种毛竹叶提取物制备方法 | |
| Wu et al. | Preparation of paeoniflorin from the stems and leaves of Paeonia lactiflora Pall.‘Zhongjiang’through green efficient microwave-assisted extraction and subcritical water extraction | |
| CN101703554B (zh) | 一种菟丝子总黄酮的制备及应用 | |
| CN104971088A (zh) | 藏茵陈提取物及其制备方法、药物组合物和用途 | |
| CN101342254A (zh) | 用于预防和治疗动脉粥样硬化、高脂血症中药提取物的组合及其制备工艺 | |
| CN105732762A (zh) | 从紫苏籽中提取紫苏油和熊果酸的方法 | |
| CN109674848A (zh) | 一种甘草提取物的制备方法与用途 | |
| CN108743657A (zh) | 一种川西獐牙菜中苷类成分的制备方法 | |
| CN108126000A (zh) | 新鲜三七中三七总皂苷提取制备方法 | |
| CN111467447B (zh) | 一种皮肤过敏抑制的中草药组合物 | |
| CN101972283B (zh) | 一种大叶金花草总黄酮的制备方法 | |
| CN1943647B (zh) | 一种枇杷叶三萜酸提取物的制备方法 | |
| CN104435658B (zh) | 一种用于缺血性脑中风预防和治疗的药物及其制备方法 | |
| CN109223739B (zh) | 一种组合物及其制备方法和应用 | |
| CN104547026B (zh) | 一种丹参叶三七提取物的制备方法及其应用 | |
| CN102114063B (zh) | 逆流提取结合膜分离提取分离积雪草总苷的方法 | |
| CN101721450B (zh) | 一种用于治疗腹膜炎的苍耳根氯仿提取物的应用 | |
| CN111419940A (zh) | 一种祛痘的中草药组合物 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20140101 |
|
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |