CN101526509B - 调味品中防腐剂含量的快速测定方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开一种调味品中防腐剂含量的快速测定方法,包括如下步骤:a)称取调味品样品;b)对样品进行预处理,获得样品溶液;c)在样品溶液中依次加入内标物溶液及提取剂;d)摇匀,取上层清液;e)将上层清液进行色谱分析,获得色谱分析数据;f)将所述色谱分析数据与预定防腐剂标准数据比对,得到调味品中防腐剂的含量。本发明所述的调味品中防腐剂含量的快速测定方法,可以准确、迅速地测定调味品中的防腐剂含量,且一次即可测出调味品中多种防腐剂的含量,因此效率高、结果准确。
Description
技术领域
本发明涉及调味品中成分组成的测定方法,尤其涉及调味品中防腐剂含量的快速测定方法。
背景技术
目前通用的检测防腐剂的方法是《GB/T 5009.29-2003食品中山梨酸、苯甲酸的测定》和《GB/T 5009.31-2003食品中对羟基苯甲酸酯类的测定》。这两种检测方法的原理相同,皆为试样酸化后,用有机溶剂提取、浓缩,再用气相色谱仪进行分离测定,采用外标法定量分析。该方法简单、稳定,已经被广泛地应用在防腐剂的检测当中。但是,采用这两种方法,平均每个样品耗费的检测时间约为90分钟,而且不能实现多种防腐剂同时检测,因此,总体检测效率较低。对于品种多、产量大的调味品生产企业来说,如此低的检测效率导致产品防腐剂检测工作量大、任务重,耗费大量的检测资源,而且检验结果的严重滞后不利于生产过程的监控。因此,如何对调味品中防腐剂含量进行快速测定,成为一个重要的研究课题。
目前,调味品中多种防腐剂快速测定方法的研究较少,只停留于酱油快速测定的研究,且均不适用于实际生产过程的防腐剂监控中。现有的研究主要有三种方法:
第一种方法为:将样品稀释酸化后置于恒温水浴中进行顶空固相微萃取,吸附20min后进气相色谱分析,此方法的吸附时间长,不能实现快速测定,且检测成本较高,不适用于企业生产控制使用;
第二种方法为:将样品酸化后加入乙醇超声提取30min后离心15min,然后进样分析,但前处理耗费的时间过长,而且由于乙醇与酱油是互溶的,离心后的乙醇提取液可能含水,从而使色谱柱遭到损坏;
第三种方法为:将样品酸化后加入氯化钠、10ml的石油醚与乙醚混合溶液以及0.2ml无水乙醇,置漩涡上混合1min后,取上层溶液,用饱和氯化钠溶液洗涤后进入气相色谱分析,这种方法不能保证防腐剂被100%提取。
由此可见,目前研究的多种方法均未能实现快速、廉价、准确测定的目标,而且均不适合蚝油和酱中苯甲酸、山梨酸、对羟基苯甲酸酯类的快速测定。
发明内容
本发明所要解决的技术问题在于,提供一种快速测定调味品中防腐剂含量的测定方法,解决了前处理时间长、提取率低、引入大分子干扰等问题,实现酱油、食醋、蚝油、酱等多种调味品中防腐剂的快速检测。
本发明的基本构思是:采用气相色谱法进行测定,以内标法定量,内标法在气相色谱定量分析中是一种分析准确的方法。使用内标法时,在样品中加入一定量的标准物质,它可被色谱柱所分离,又不受试样中其它组分峰的干扰,只要测定内标物和待测组分的峰面积与相对响应值,即可求出待测组分在样品中的含量。
为了解决以上的技术问题,本发明提供以下的技术方案:
一种调味品中防腐剂含量的快速测定方法,以气相色谱法测定,内标法定量,包括如下步骤:
a)称取调味品样品;
b)对样品进行预处理,获得样品溶液;对于不同体态的调味品,要采用不同的处理方式,以得到较稀的样品溶液;
c)在样品溶液中加入内标物溶液及提取剂;
d)摇匀,取上层清液;
e)将上层清液进行色谱分析,获得色谱分析数据;
f)将所述色谱分析数据与预定防腐剂标准数据比对,得到调味品中防腐剂的含量。在调味品中,添加的防腐剂一般为:苯甲酸、山梨酸、对羟基苯甲酸丙酯,本步骤中所述的预定防腐剂标准数据,可采用以下方式获得:将苯甲酸、山梨酸、对羟基苯甲酸丙酯分别作为标准物配置一系列已知浓度的标准物溶液,再分别加入已知浓度的内标物溶液,分别进样,测出内标物峰面积及标准物峰面积,以标准物与内标物峰面积比及浓度比,制作待测组分标准曲线,一定条件下,标准物与内标物峰面积比及浓度比成正比。
本步骤中,可将通过步骤e)获得的色谱分析数据-防腐剂与内标物峰面积比与前述相应标准曲线进行对照,即可查出样品中防腐剂的浓度。
其中,所述调味品为液体类调味品,所述预处理步骤为,对样品进行酸化处理。对于生抽酱油、老抽酱油、陈醋、米醋、调味汁等液体类,体态较稀的调味品,预处理只需进行酸化即可。
其中,所述调味品为蚝油类调味品,所述预处理步骤为,先在样品中加入淀粉酶和/或糖化酶进行酶解,再进行酸化处理。对于蚝油类淀粉含量高、体态较粘稠的调味品,预处理过程中,要先加淀粉酶和/或糖化酶进行酶解,使其稀化,再进行酸化处理。
其中,所述调味品为不含油脂酱类调味品,所述预处理步骤为,先在样品中加入水和/或糖化酶,再进行酸化处理。
其中,对于蚝油类、不含油脂酱类的调味品,步骤d)中,摇匀步骤之后,取上层液之前,还进行离心处理。
其中,步骤c)中,所述内标物溶液由C7~C11有机酸中的任一种作为内标物,以甲醇或乙醇作为溶剂配成。
其中,步骤c)中,所述提取剂为乙醚和环己烷的混合物,所述乙醚与环己烷的混合体积比为1∶4~1∶1。
其中,步骤c)中,所述提取剂也可为乙醚和正己烷混合物,所述乙醚和正己烷的混合体积比为1∶4~1∶1。
其中,上述方法中,色谱分析过程的升温模式为:开始温度80℃~110℃,保持15min~30min后,进行一次升温,升温至180℃~220℃,再进行二次升温,升温至250℃~300℃,保持0.5min~3min;所述一次升温的升温速度小于所述二次升温的升温速度。
其中,所述一次升温的升温速度为15℃/min~30℃/min,所述二次升温的升温速度为40℃/min~60℃/min
对于整个测定方法,简而言之,首先称取样品,对被测样品进行处理,提取含防腐剂及内标物的溶液,对其进行色谱分析,由测得的各防腐剂的色谱数据,结合预先制作好的相应的防腐剂标准数据,即可计算出调味品中各防腐剂的含量,整个测定过程所需时间短,测定快速、准确,且能同时测出多种防腐剂的含量,效率高。
以上对本发明的各个步骤中的细节进行了说明,其中也叙述了一些改进和优选的方案。
本发明所述的调味品中防腐剂含量的快速测定方法,可以准确、迅速地测定调味品中的防腐剂含量,且一次即可测出调味品中多种防腐剂的含量,因此效率高、结果准确。
附图说明
图1为防腐剂-山梨酸以内标法进行色谱分析所得标准曲线图。
图2为防腐剂-苯甲酸以内标法进行色谱分析所得标准曲线图。
图3为防腐剂-对羟基苯甲酸丙酯以内标法进行色谱分析所得标准曲线图。
图4为本发明测定方法第一实施例的测定流程图。
图5为本发明测定方法第二实施例的测定流程图。
图6为本发明测定方法第三实施例的测定流程图。
具体实施方式
为能进一步理解本发明,下面结合具体的实施方式对上述的技术方案做进一步的阐述和说明。
本发明的测定方法中,所采用的色谱分析方法为气相色谱法,气相色谱条件如下:
用带有氢火焰离子化检测器的气相色谱仪进行检测,以内标法进行定量。仪器条件是:气相色谱仪的载气为高纯氮气,非极性毛细管色谱柱,分流比为1∶10,载气流量为1.17ml/min,进样口温度为260℃,气相色谱仪带有的氢火焰离子化检测器的检测温度为300℃,氢气流量为40ml/min,空气流量为400ml/min。
本发明的测定方法中,在调味品样品进行防腐剂含量测定前作如下准备:
1、配制标准物溶液
分别准确称取防腐剂(以下称标准物):苯甲酸、山梨酸、对羟基苯甲酸丙酯各0.1000g,用乙醇定容至100.00ml,制成标准物溶液。
2、配制内标物溶液
准确称取正辛酸0.1000g作为内标物,用乙醇定容至100.00ml,获得配制的内标物溶液。也可选用其他C7~C11有机酸中的任一种作为内标物。
3、配制提取剂
由10毫升乙醚加40毫升环己烷获提取剂1;由15毫升乙醚加35毫升环己烷获提取剂2;由20毫升乙醚加30毫升环己烷获提取剂3;由25毫升乙醚加25毫升环己烷获提取剂4;由10毫升乙醚加40毫升正己烷获提取剂5;由15毫升乙醚加35毫升正己烷获提取剂6;由20毫升乙醚加30毫升正己烷获提取剂7;由25毫升乙醚加25毫升正己烷获提取剂8。
4、标准曲线的制作
先分别以苯甲酸、山梨酸、对羟基苯甲酸丙酯等常用防腐剂作为标准物配置一系列已知浓度的标准物溶液,再分别加入已知浓度的内标物溶液,分别进样,测出内标物峰面积及标准物峰面积,以标准物与内标物峰面积比及浓度比,制作苯甲酸、山梨酸、对羟基苯甲酸丙酯标准曲线,一定条件下,标准物与内标物峰面积比及浓度比成正比。测定样品中待测组分的含量时,以相同浓度的内标物加入到样品中,进样分析,将得到的待测组分与内标物峰面积比与前述标准曲线进行对照,即可查出样品中待测组分的浓度。具体制作过程如下:
分别准确吸取制备好的标准物溶液2.00ml、1.00ml、0.50ml、0.10ml、0.01ml,分别置于10ml容量瓶中,然后各加入内标物溶液1.00ml,再用乙醇定容至10ml,分别进样1μl,可测得不同浓度标准物及内标物峰面积响应值,由气相色谱测得各标准物与内标物的浓度比及色谱峰面积比见表1。
表1各标准物浓度与内标物的浓度比及色谱峰面积比
标准物与内标物浓度比 | 0.010 | 0.100 | 0.500 | 1.000 | 2.000 |
山梨酸与内标物峰面积的比值 | 0.0030341 | 0.0696183 | 0.3954925 | 0.7783516 | 1.546177 |
苯甲酸与内标物峰面积的比值 | 0.0032712 | 0.0548503 | 0.4184239 | 0.8804410 | 1.826348 |
对羟基苯甲酸丙酯与内标物峰面积的比值 | 0.0072641 | 0.0811214 | 0.4321578 | 0.8712497 | 1.732574 |
根据表1,以各标准物与内标物的峰面积比值作为x轴,以标准物与内
标物的浓度比值为y轴,作出山梨酸标准曲线,见图1;作出苯甲酸标准曲线,见图2;作出对羟基苯甲酸丙酯标准曲线,见图3。由图1、图2、图3可以看出,各标准物与内标物的峰面积比与浓度比成正比。
实施例1
1)准确称取生抽酱油样品、老抽酱油样品、陈醋样品、米醋样品、调味汁样品各1.000g,分别置于15ml离心管内;
2)向各个离心管内依次加入5滴盐酸、0.50ml内标物溶液、5ml提取剂5,摇匀,吸取各上层清液进样;
3)按照前述仪器条件,将仪器柱温箱温度升至100℃的初始温度,仪器稳定后,分别将各上层清液进样分析。仪器进行程序升温,即:开始温度100℃,保持0.5min,以20℃/min升至220℃,再以60℃/min升至250℃,保持1min,总共运行8.0min。
4)将得到的各待测组分峰面积与各内标物峰面积的比值与图1、图2、图3的标准曲线进行对照,计算出:
生抽酱油样品中,苯甲酸含量为0.49g/kg,山梨酸、对羟基苯甲酸均未检出;
老抽酱油样品中,苯甲酸含量为0.69g/kg,山梨酸、对羟基苯甲酸丙酯均未检出;
陈醋样品中,苯甲酸含量为0.71g/kg,山梨酸、对羟基苯甲酸丙酯均未检出;
米醋样品中,苯甲酸、山梨酸、对羟基苯甲酸丙酯均未检出;
调味汁样品中,苯甲酸含量为0.45g/kg,山梨酸、对羟基苯甲酸丙酯均未检出。
实施例2
1)准确称取蚝油1.000g,置于15ml离心管内,加入0.1ml淀粉酶,震荡片刻;
2)待样品变稀后,依次加入5滴盐酸、0.50ml内标物溶液、5.00ml提取剂1,摇匀,离心,吸取上层清液进样。
3)按照前述的仪器条件,将仪器柱温箱温度升至110的初始温度,仪器稳定后,将上层清液进样分析。仪器进行程序升温,即:开始温度110℃,保持1min,以15℃/min升至180℃,再以50℃/min升至280℃,保持1min,总共运行8.67min。
4)将得到的各待测组分峰面积与内标物峰面积的比值与图1、图2、图3的标准曲线进行对比,计算出蚝油中,苯甲酸含量为0.62g/kg,对羟基苯甲酸丙酯含量为0.13g/kg,山梨酸未检出。
实施例3
1)准确称取不含油脂的酱1.000g,置于15ml离心管内,加入0.5ml蒸馏水,振荡片刻;
2)依次加入5滴盐酸、0.50ml内标溶液、5ml提取剂7,摇匀,离心,吸取上层清液进样。
3)按照前述的仪器条件,将仪器柱温箱温度升至90的初始温度,仪器稳定后,将上层清液进样分析。仪器进行程序升温,即:开始温度90℃,保持1min,以25℃/min升至220℃,再以40℃/min升至300℃,保持1min,总共运行9.2min。
4)将得到的各待测组分峰面积与内标物峰面积的比值与图1、图2、图3的标准曲线进行对比,计算出该酱中山梨酸含量为0.38g/kg,苯甲酸和对羟基苯甲酸丙酯均未检出。
从以上实施例可以看出,利用本发明方法对样品进行防腐剂含量测定,整个测量过程,检测时间由国标法的90分钟大大缩短至15分钟,且一次即可测定出调味品样品中多种防腐剂的含量,大大提高了检测效率,有利于生产监控以及货物周转速度;检测成本只有国标法的1/3左右,节省了企业的检验成本,有利于防腐剂检测的普及;检测稳定,即相对标准偏差RSD控制在3%以下,准确度达到90%以上。
以上对本发明所提供的技术方案进行了详细介绍。本说明书中应用了具体实施例对本发明的原理及实施方式进行了阐述,对于本领域的一般技术人员,依据本发明的思想在具体实施方式及应用范围上可能在实施过程中会有改变之处。因此,本说明书记载的内容不应理解为对本发明的限制。
Claims (6)
1.一种调味品中防腐剂含量的快速测定方法,以气相色谱法测定,内标法定量,其特征在于,包括如下步骤:
a)称取调味品样品,所述调味品为蚝油类调味品或不含油脂酱类调味品;
b)对样品进行预处理,获得样品溶液,所述调味品为蚝油类调味品,所述预处理步骤为,在样品中加入淀粉酶和/或糖化酶进行酶解,再进行酸化处理;所述调味品为不含油脂酱类调味品,所述预处理步骤为,在样品中加入糖化酶,再进行酸化处理;
c)在样品溶液中依次加入内标物溶液及提取剂;
d)摇匀,取上层清液;
e)将上层清液进行色谱分析,获得色谱分析数据,所述色谱分析的条件为:载气为高纯氮气,非极性毛细管色谱柱,分流比为1∶10,载气流量为1.17ml/min,进样口温度为260℃,氢火焰离子化检测器的检测温度为300℃,氢气流量为40ml/min,空气流量为400ml/min;
色谱分析过程的升温模式为:开始温度80℃~110℃,保持0.5min~1min后,进行一次升温,升温至180℃~220℃,再进行二次升温,升温至250℃~300℃,保持0.5min~3min;所述一次升温的升温速度小于所述二次升温的升温速度;
f)将所述色谱分析数据与预定防腐剂标准数据比对,得到调味品中防腐剂的含量,所述防腐剂为苯甲酸、山梨酸和对羟基苯甲酸丙酯。
2.根据权利要求1所述的测定方法,其特征在于,步骤d)中,摇匀步骤之后,取上层清液之前,还进行离心处理。
3.根据权利要求1-2任一项所述的测定方法,其特征在于,步骤c)中,所述内标物溶液由C7~C11有机酸中的任一种作为内标物,以甲醇或乙醇作为溶剂配成。
4.根据权利要求1-2任一项所述的测定方法,其特征在于,步骤c)中,所述提取剂为乙醚和环己烷的混合物,所述乙醚与环己烷的混合体积比为1∶4~1∶1。
5.根据权利要求1-2任一项所述的测定方法,其特征在于,步骤c)中,所述提取剂为乙醚和正己烷混合物,所述乙醚和正己烷的混合体积比为1∶4~1∶1。
6.根据权利要求1所述的测定方法,其特征在于,所述一次升温的升温速度为15℃/min~30℃/min,所述二次升温的升温速度为40℃/min~60℃/min。
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