CN101474197B

CN101474197B - 化合物黄芩甙锌在制备抗消化性溃疡药物中的应用

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Publication number: CN101474197B
Application number: CN2009100940514A
Authority: CN
Inventors: 刘旭; 李玲; 杨晖; 蔡传英; 田长富; 陆瑛
Original assignee: UNMING MEDICAL COLLEGE
Current assignee: UNMING MEDICAL COLLEGE
Priority date: 2009-01-20
Filing date: 2009-01-20
Publication date: 2011-04-06
Anticipated expiration: 2029-01-20
Also published as: CN101474197A

Abstract

化合物黄芩甙锌在制备抗消化性溃疡药物中的应用，本发明涉及含黄芩甙锌的新用途。它将黄芩甙锌制成颗粒剂、或胶囊剂、或片剂、或丸剂，作为治疗消化性溃疡的药物或保健品。建议口服剂量为0.05mg～0.5mg/次，2～3次/日。本发明揭示：黄芩甙锌对水应激性小鼠胃溃疡及利血平所致大鼠胃溃疡表现出很好的保护作用，与临床常用的一线抗溃疡药奥美拉唑效果相当，但剂量仅为奥美拉唑的1/80。作为口服的抗消化性溃疡的药物和保健品它具有高效、低毒的特点，作为制备抗消化性溃疡药物具有良好的开发应用前景。

Description

化合物黄芩甙锌在制备抗消化性溃疡药物中的应用

技术领域

本发明属于含有机有效成分的医药配制品，涉及黄芩甙锌在治疗消化性溃疡方面的用途。

背景技术

消化性溃疡(peptic ulcer)是临床上的一种常见病和多发病，其形成与胃酸和胃蛋白酶的消化作用有关。现代研究表明[杨克敌.微量元素与健康[M]北京，人民卫生出版社.2003：122-123.王萍，郭玉琳，刘利伟.消化性溃疡患者血清锌、铜含量测定分析.中国社区医师.综合版.2004，6(18)：封3.胡伏莲，张希金，贾博琦，等.醋氨己酸锌在消化性溃疡病中的治疗作用.中国临床药理学杂志，1996，12(2)：65.]锌是人体必需的微量元素，对胃液分泌有抑制作用，并能阻止嗜碱性粒细胞释放组胺及致炎物质，从而具有抗溃疡作用；机体缺锌时会促使胃及十二指肠黏膜形成溃疡；同时缺锌时DNA、RNA合成量减少，创伤组织的再生能力下降，使胃黏膜的防御因素减弱，容易形成消化性溃疡。因此，对于一些缺锌患者，给予一定量的锌制剂治疗，可促进消化性溃疡的愈合，减少复发的机会。目前国内外研究和报道的抗溃疡作用的锌化合物主要有polaprezinc、双氯芬酸锌、葡萄糖酸锌、吲哚美辛锌、甘草锌、醋氨已酸锌等[Kato S；Tanaka A；Ogawa Y；KanatsuK；Seto K；Yoneda T；Takeuchi K.Effect of polaprezinc on impaired healing of chronicgastric ulcers in adjuvant-induced arthritic rats--role of insulin-like growthfactors(IGF)-1.Med Sci Monit，2001，7：20-25.Santos LH；Feres CA；Melo FH；CoelhoMM；Nothenberg MS；Oga S；Tagliati CA.Anti-inflammatory，antinociceptive andulcerogenic activity of a zinc-diclofenac complex in rats.Braz J Med Biol Res.2004，37：1205-1213.范广才.锌制剂的临床应用近况.实用医技杂志.2330-2331.胡伏莲，张希金，贾博琦，等.醋氨己酸锌在消化性溃疡病中的治疗作用[J].中国临床药理学杂志，1996，12(2)：65.]，但活性不理想。因此，国内外学者正在寻找和合成新型高活性的抗溃疡作用的锌配合物。

黄芩甙锌系中药黄芩的主要有效成分黄芩甙和锌的化学配合物，目前的研究认为黄芩甙锌主要具有抗炎、抗HIV、抗变态反应和清除自由基的作用(李延峰，梁绍蓉，耿辉.黄芩甙金属配合物的研究进展.时珍国医国药，1999.10(2)：1152-153.Wang Q，Wang YT，PuSP，Zheng YT.Zinc coupling potentiates anti-HIV-1 activity of baicalin.Biochem.Bioph.Res.Co.2004，324：605-610)，而未见黄芩甙锌应用于治疗消化性溃疡的报道。

发明内容

本发明目的是将黄芩甙锌用于制备治疗消化性溃疡的药物和保健品的新用途，提供一种治疗消化性溃疡的、具有活性高的、毒副作用低的锌配合物药物。

本发明化合物黄芩甙锌在制备抗消化性溃疡药物中的应用通过以下方式达到：

将黄芩甙锌制成颗粒剂、或胶囊剂、或片剂、或丸剂，通过口服给药，作为治疗消化性溃疡的药物或保健品。

所述的黄芩甙锌口服剂量为0.05mg～0.5mg/次，2～3次/日。

经过大量试验我们发现黄芩甙锌不但具有目前报道的药理作用，而且对水应激性小鼠胃溃疡及利血平所致大鼠胃溃疡即表现出很好的保护作用，黄芩甙锌50μg/kg产生的疗效与临床常用的一线抗溃疡药奥美拉唑4mg/kg效果相当，但所用剂量仅为奥美拉唑的1/80，却产生了预想不到的治疗效果，且毒副作用低，小鼠灌胃给药的LD₅₀为4.76±0.48g/kg，显示出黄芩甙锌作为抗消化性溃疡药物的高效、低毒的特点，而且，黄芩甙锌制取成本低，因此，它在制备抗消化性溃疡药物中具有良好的开发应用前景。

具体实施方式

一.本发明化合物对水浸应激致小鼠急性胃溃疡的作用

70只健康雌性ICR小鼠，体重随机分为6组，每组10只，分别为模型对照组、配体对照黄芩苷组、黄芩苷锌高剂量组0.2mg/kg、黄芩苷锌中剂量组0.1mg/kg、黄芩苷锌低剂量0.05mg/kg、阳性对照奥美拉唑组，锌剂对照组葡萄糖酸锌组。各组均用0.5％的羧甲基纤维素钠配制，按20ml/kg灌胃给药，一天一次，共6天。末次给药1小时后将小鼠固定在夹鼠板上，齐剑突水平放入20℃的恒温水浴锅中应激20小时，造成应激性胃溃疡，之后，脱颈处死动物，取胃放入1％的甲醛中固定10分钟，在体视显微镜下观察纪录胃粘膜的溃疡形成情况，并按下式计算溃疡面积和抑制率。

溃疡面积(mm²)＝Л×通过溃疡中心的最大横径/2×通过溃疡中心的最常长纵径/2

溃疡抑制率(％)＝[(对照组溃疡长度总和-药物组溃疡长度总和)/对照组溃疡长度总和]×100

结果表明：在黄芩苷锌0.05、0.1、0.2mg/kg组分中，黄芩苷锌剂量依赖性地减少溃疡面积，其抑制率分别27.2％，78.9％，7.0％；在阳性对照组奥美拉唑8mg/kg中，对溃疡的抑制率为65.8％；而在以1mg/kg的10倍量葡萄糖酸锌中，其抑制率为67.5％。如表1所显示的，黄芩苷锌具有明显的抗急性胃溃疡作用。

表1.黄芩苷锌灌胃给药对小鼠水应激性胃溃疡的影响

x±s，n＝10.^aP＜0.05，与模型对照组比较；^bP＜0.05，与葡萄糖酸锌比较，^cP＜0.05，与奥美拉唑比较(秩和检验).

二.本发明化合物对利血平致大鼠慢性胃溃疡的作用

取70只健康SD雌性大鼠，随机分组，组别同前。分别给予0.5％的羧甲基纤维素钠溶液、黄芩苷锌0.013mg/kg、0.025mg/kg和0.05mg/kg，阳性对照药奥美拉唑4.0mg/kg和葡萄糖酸锌0.5mg/kg。各组均按20ml/kg分别灌胃给药，一天一次，共6天。末次灌胃后1小时腹腔注射利血平注射液3mg/kg，并将大鼠禁食不禁水饲养，10小时后脱颈处死大鼠，取胃，沿胃大弯剪开，体视显微镜下观察各组大鼠的胃溃疡面积，计算方法同上。

结果表明：给予黄芩苷锌后，大鼠胃粘膜溃疡程度明显减轻，且呈剂量依赖性，低中高三个剂量组的溃疡抑制率分别为56.16％、74.61％和87.61％，与模型组比较差异有显著性意义(P＜0.05)，与葡萄糖酸锌组相比，抗溃疡作用明显强于葡萄糖酸锌组(P＜0.05)，而奥美拉唑组的溃疡抑制率虽高达97.3％，但所用剂量却高于黄芩苷锌80倍，显示黄芩苷锌具有较强的抗慢性胃溃疡作用。本发明与利血平致大鼠慢性胃溃疡的关系由表2显示：

表2黄芩苷锌对利血平致大鼠胃溃疡溃疡面积的影响

x±s，n＝10.^aP＜0.05，与模型对照组比较；^bP＜0.05与葡萄糖酸锌组比较；^cP＜0.05，与奥美拉唑比较(秩和检验)；

三.本发明化合物对冰醋酸致大鼠胃溃疡的影响

健康SD雌性大鼠，随机分组，组别同前。禁食24小时后，腹腔注射2％的戊巴比妥钠按30mg/kg麻醉动物，暴露胃，于胃体和幽门窦交界处，用微量注射器刺入浆膜下0.4～0.5mm注入100％的冰醋酸20μl，形成皮丘，或形成2～3mm的半透明白斑，将胃轻轻回纳，缝合皮肤，放入笼中继续常规饲养。

术后次日，灌胃各供试药品，即0.5％的羧甲基纤维素钠溶液、黄芩苷锌0.013mg/kg、0.025mg/kg和0.05mg/kg，阳性对照药奥美拉唑4.0mg/kg和葡萄糖酸锌0.5mg/kg，一天一次，连续9天。实验结束时，取含溃疡边缘约3mm组织在内的溃疡组织块，组织块约1.0×1.2cm大小，迅速置于10％的中性甲醛中固定，常规脱水、石蜡包埋，切片、HE染色，在光学显微镜下观察各组大鼠的溃疡面积，并按下式计算粘膜修复指数：

粘膜修复指数＝(R₁+R₂)/(C×B)×100

其中，B：粘膜缺损破损的肌层，C：边缘溃疡的高度，R₁+R₂：溃疡增生修复的组织区域

结果表明，黄芩苷锌剂量依赖性地减小冰醋酸致大鼠胃粘膜溃疡的面积，其粘膜修复指数分别为15％，16.32％，57％，明显强于葡萄糖酸锌，黄芩苷锌高剂量的效价虽与奥美拉唑相当，但所用剂量却是奥美拉唑的1/80，揭示黄芩苷锌具有较强的抗胃溃疡作用，见表3。

表3.黄芩苷锌对冰醋酸致大鼠胃溃疡的影响

n＝10，x±s.^aP＜0.05，与模型对照组比较；^bP＜0.05与葡萄糖酸锌组比较；^cP＜0.05，与奥美拉唑比较；(单因素方差分析)

四.本发明化合物对胃酸及胃蛋白酶活力的影响

健康SD雌性大鼠，随机分组，组别及给药方法同前。末次给药后禁食不禁水24小时，用2％的戊巴比妥钠30mg/kg腹腔麻醉，结扎幽门，放回原条件下饲养6小时，脱颈处死大鼠，收集胃液，1500转/分钟，离心5分钟，上清液用于测定胃液的pH值和用胃蛋白酶的活力。

结果表明，结扎幽门后，胃液pH值明显降低，胃蛋白酶活力增强，与空白组比较有统计学意义(P＜0.05)，给予黄芩苷锌后显著升高胃酸值，降低胃蛋白酶活力，且呈现出明显的量效关系，高剂量黄芩苷锌的作用与阳性对照药奥美拉唑相比，无显著性差异(P＞0.05)，但强于葡萄糖酸锌。见表4。

表4黄芩苷锌灌胃给药对幽门结扎大鼠胃酸和胃蛋白酶的影响

一个酶活力单位(U)＝1ug络氨酸/分钟/ml胃液

n＝10，x±s，^aP＜0.05与空白组比较，^bP＜0.05，与模型组比较，^cP＜0.05，与奥美拉唑比较；^dP＜0.05，与葡萄糖酸锌比较(单因素方差分析)

五.本发明化合物的初步毒性和安全性研究

选择健康的ICR小鼠60只，雄雌各半，体重18-22g，随机分为6组，每组10只，分别为黄芩苷锌3.01、3.62、4.34、5.21、6.25和7.50g/kg剂量组。给药前动物禁食约10小时，黄芩苷锌用0.5％羧甲基纤维素钠配制成混悬液，按40ml/kg体重一次性灌胃给药，给药后4小时内严密观察动物的中毒反应及死亡情况，然后每天上午和下午各纪录一次，连续观察14天，记录动物的中毒和死亡情况。死亡动物做大体解剖，观察各主要脏器的病变。

结果表明，黄芩苷锌给药后，动物出现活动减少、呼吸急促，给药后6小时出现动物死亡，直到第7天，死亡动物大体解剖发现肠胀气，其他各主要脏器肉眼未见明显改变的异常反应，Bliss法求得LD₅₀为4.76±0.48g/kg，表5说明了毒性和安全性试验及分析结果。

表5黄芩苷锌一次性灌胃给药的小鼠死亡情况

六.建议人体使用剂量和方法

作为治疗消化性溃疡的药物或保健品。将黄芩甙锌制成颗粒剂、或胶囊剂、或片剂、或丸剂，口服给药。

口服剂量为0.05mg～0.5mg/次，2～3次/日。

Claims

1.化合物黄芩甙锌在制备抗消化性溃疡药物中的应用，其特征是将黄芩甙锌制成颗粒剂、或胶囊剂、或片剂、或丸剂，通过口服给药。

2.如权利要求1所述的化合物黄芩甙锌在制备抗消化性溃疡药物中的应用，其特征是黄芩甙锌口服剂量为0.05mg～0.5mg/次，2～3次/日。