CN101449804A - 一种瓜蒌有效成分的提取方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种瓜篓有效成分的提取方法,所述方法包括:取瓜蒌的干燥植物碎片,加入有机溶剂或其水溶液提取1~3次,每次回流提取2~4小时或者常温浸提24小时以上,每次加入有机溶剂量为4~8mL/g植物碎片,过滤,提取液浓缩、冻干,得到瓜蒌提取物;所述有机溶剂为下列之一或其中两种以上的混合物:甲醇、丙酮、乙酸乙酯。本发明的有益效果主要体现在:本发明方法操作简单、成本低,提取效率高,获得提取物生物活性高,在鲜肉及果蔬保鲜上显示了良好的效果,具有较好应用前景。
Description
(一)技术领域
本发明涉及一种瓜蒌有效成分的提取方法,特别涉及具有杀菌、保鲜作用的有效成分的提取方法。
(二)背景技术
瓜篓为葫芦科多年生攀援草本植物,又名栝楼、杜瓜、药瓜、吊瓜。果实、种子、块根均供药用。中国分布于河北、河南、山东、山西、江苏、安徽、浙江、陕西、甘肃等省;朝鲜、日本亦产。野生、栽培均有。茎长可达10米,多分枝。块根肥厚,长圆柱状,富含淀粉。叶互生,近圆形或近心形,常为5~7掌状浅裂至深裂。夏秋开花,花冠白色,单性异株。雄花成总状花序,雌花单生于叶腋;花冠5裂,裂片先端流苏状。瓠果近圆形,熟时金黄色。种子多数,扁长椭圆形,喜温暖湿润环境。中药材果皮称“瓜篓皮”,种子称“瓜篓仁”,二者合用称“全瓜篓”。块根入药称“天花粉”,须选用3~4年生的雄株块根,于10月下旬采收。
瓜篓果实含皂苷、有机酸、树脂、脂肪油、糖类、色素等。块根含淀粉、皂苷、天花粉蛋白、多种氨基酸糖类等,其中天花粉蛋白有引产作用。瓜篓皮、瓜篓仁作中药功能清肺、化痰、散结、润肠,主治痰热咳嗽、胸痹疼痛、乳痛、便秘等症。瓜篓果实制成片剂,对冠心病、心绞痛有一定疗效。天花粉功能清热润燥、生津止渴、排脓消肿,主治肺热燥咳、热病伤津、口渴、痈肿等症。研究表明瓜篓皮中含有挥发油、甾醇、三萜、瓜篓酯碱等多种抗菌物质,瓜篓煎剂体外对大肠杆菌、痢疾杆菌、霍乱杆菌、伤寒杆菌、副伤寒杆菌、绿脓杆菌等G-菌有抑制作用,对溶血性链球菌、肺炎球菌、白喉杆菌、金黄色葡萄球菌、流感杆菌等均有很好的抑制作用。基于瓜篓含有的生物活性和丰富的资源,开发生产天然抗菌剂,应用于食品中,对产业发展意义深远,具有很好的经济效益和社会效益。
现有瓜蒌有效成分提取方法包括水提法、水提醇沉法、超临界CO2提取以及超声波提取方法等,其中水提法和水提醇沉法方法简单,但提取效率有限,提取物活性较低;超临界CO2提取和超声波提取方法虽然提取效率有一定提高,但是操作复杂、对设备要求高、成本高。
(三)发明内容
本发明目的是提供一种操作简单、成本低、提取效率高的瓜蒌有效成分提取方法。
本发明采用的技术方案是:
一种瓜篓有效成分的提取方法,所述方法包括:取瓜蒌的干燥植物碎片,加入4~8mL/g植物碎片(单次用量)的极性或中等极性有机溶剂或其水溶液提取3次,每次回流提取2~4小时或者常温浸提24小时以上,过滤,提取液浓缩、冻干,得到瓜蒌提取物;所述极性或中等极性有机溶剂为下列之一或其中两种以上的混合物:甲醇、丙酮、乙酸乙酯等。
为进一步提高提取效率,所述瓜蒌的干燥植物碎片在加入有机溶剂进行提取之前可先用石油醚脱脂1~3次,每次4~6小时、石油醚每次加入量为4~8mL/g植物碎片。
得到的提取液也可先用非极性有机溶剂进行萃取(或者浓缩去除部分溶剂后再萃取),萃取液再浓缩、冻干,得到瓜蒌提取物。所述非极性有机溶剂为下列之一或两种以上混合物:石油醚、乙醚、正己烷等。
优选的,所述瓜蒌的干燥植物碎片来自瓜蒌皮。
具体的,所述方法如下:取瓜蒌皮的干燥碎片,加入石油醚脱脂3次,每次4~6小时、温度30~60℃、石油醚加入量为4~8mL/g植物碎片(单次用量),过滤,滤渣挥干石油醚,加入4~8mL/g干燥碎片(单次用量)的乙酸乙酯常温提取3次、每次24小时,或加热回流提取3次、每次2~4小时,合并提取液,减压浓缩、冻干,得到瓜蒌提取物。
或者,所述方法如下:取瓜蒌皮的干燥碎片,加入石油醚脱脂3次,每次4~6小时、温度30~60℃、石油醚加入量为4~8mL/g植物碎片(单次用量),过滤,滤渣挥干石油醚,加入4~8mL/g干燥碎片(单次用量)的甲醇常温提取3次、每次24小时,或加热回流提取3次、每次2~4小时,合并提取液,减压浓缩至体积为原体积的1/5~1/4得浓缩液,浓缩液用石油醚萃取,萃取液减压浓缩、冻干,得到瓜蒌提取物。
又或者,所述方法如下:取瓜蒌皮的干燥碎片,加入4~8mL/g植物碎片的丙酮(单次用量),加热回流提取3次、每次2~4小时,合并提取液、减压浓缩、冻干,得到瓜蒌提取物。
经发明人反复试验,按照本发明方法得到的瓜篓提取物具有广谱的抗菌活性,不但对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌等细菌显示出较强的抑制活性,对多种霉菌显示一定的抑制活性,特别对几种植物病原菌(番茄叶霉病菌、烟草黑胫病菌)具有较强的抑制活性,在鲜肉及果蔬保鲜上显示了良好的效果,其性能明显优于瓜蒌水提取物。
本发明的有益效果主要体现在:本发明方法操作简单、成本低,提取效率高,获得提取物生物活性高,在鲜肉及果蔬保鲜上显示了良好的效果,具有较好应用前景。
(四)具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述,但本发明的保护范围并不仅限于此:
实施例1:瓜蒌水提取物提取(对比例)
取干燥的瓜篓皮1000g,粉碎、过筛,置于提取装置中加入6L的水,浸提24小时,过滤、离心得提取液,提取液经冷冻干燥得固体提取物,低温(4℃)保存备用。
实施例2:瓜蒌乙酸乙酯提取物提取
取干燥的瓜篓皮1000g,粉碎、过筛,加入4L(单次用量)的石油醚脱脂3次、每次5小时、温度30~40℃,过滤,滤渣挥干石油醚,加入5L(单次用量)的乙酸乙酯常温提取3次,每次24小时,合并提取液,减压浓缩、冻干,即得瓜蒌乙酸乙酯提取物,4℃保存备用。
实施例3:瓜蒌石油醚萃取物的制备
取干燥的瓜篓皮1000g,粉碎、过筛,加入4L(单次用量)的石油醚脱脂3次、每次5小时、温度50~60℃,过滤,滤渣挥干石油醚,加入5L(单次用量)的甲醇加热回流提取3次,每次2小时,合并提取液,减压浓缩至体积为原体积的1/5,然后用石油醚萃取,萃取液减压浓缩、冻干,即为瓜蒌石油醚萃取物,4℃保存备用。
实施例4:瓜蒌丙酮提取物的提取
取干燥的瓜篓皮1000g,粉碎、过筛,加入5L(单次用量)的丙酮,常温提取2次,每次28小时,合并提取液,减压浓缩、冻干,即为瓜蒌丙酮提取物,4℃保存备用。
实施例5:瓜篓提取物对几种菌的抑制活性试验
采用试管倍比稀释培养法测定瓜篓提取物对几种菌的最小抑菌浓度来考察其抑制活性,具体如下:
a.供试菌种:
大肠杆菌(Escherichia coli)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、黑曲霉(Aspergillus niger)、番茄叶霉病菌(Fulvia fulva)、烟草黑胫病菌(Phytophthora parasiticavar.nicotianae)。以上菌种由浙江工业大学生物与环境工程学院微生物实验室提供。
b.测定方法:
细菌菌液用培养基调配至0.5麦氏比浊标准的菌悬液,然后稀释100倍备用;霉菌用培养基调配至104个/ml的孢子数(用血球计数板计数)备用。采用试管倍比稀释法将提取液用培养基稀释成不同浓度,加入菌悬液或孢子液,细菌于37℃恒温摇床培养24h,霉菌于28℃恒温摇床培养24h,观察有无菌落生长,无菌落生长的最低浓度即为该提取物的最低抑菌浓度(MIC)。
c.试验结果:
表1:瓜篓提取物对几种菌的最低抑菌浓度(MIC)
注:1-实施例1水提取物,2-实施例2乙酸乙酯提取物,3-实施例3石油醚萃取物,4-实施例4丙酮提取物。
实施例6:瓜篓提取物对鲜肉的保鲜效果试验
将所用刀具和案板经75%的酒精棉球擦拭,将超市购得的后腿纯精肉在无菌操作条件下切成30g左右的肉块,随机分组。分别用20%(v/v)乙醇溶液(对照)、1%(w/v)山梨酸钾水溶液、1%(w/v)实施例2瓜篓乙酸乙酯提取物(溶于20%(v/v)乙醇)喷雾处理,晾干后装入保鲜袋中于4℃保存,同时作一组空白试验。每隔二天测定肉的感官指标、pH值、挥发性盐基氮和细菌总数。感官指标评定肉的颜色、气味、煮沸后肉汤状况,采用5段评分法,评分标准:10分最好,8分好,6分一般,4分较差,2分差;肉样剪碎磨细,加10倍蒸馏水,过滤后用pH计测定pH值;挥发性盐基氮按GB5009.44中2.1条《半微量定氮法》进行测定,参考标准为:一级鲜肉≤15mg/100g,二级鲜肉≤20mg/100g,变质肉>20mg/100g;细菌总数按照GB4789.2-2003《食品卫生微生物学检测菌落总数测定》进行,用平皿计数法,结果以对数表示lg cfu/g,评定标准为:菌落总数的对数值小于4为新鲜肉,菌落总数的对数值为4~6为次鲜肉,菌落总数的对数值在6以上的为变质肉。试验结果见表2~表6。
表2:不同样品感官综合评定结果
注:感官指标综合评价三个项目总分30分,24分以上为一级鲜肉,18~24分为二级鲜肉,18分以下为变质肉。
表3:不同样品pH随时间变化结果
表4:不同样品挥发性盐基氮(mg/g)测定结果
表5:不同样品细菌总数对数值(lg cfu/g)测定结果
实施例7:瓜篓提取物对葡萄的保鲜效果试验
将刚采摘下的葡萄随机分组,其中一组喷洒1%(w/v,即100mL溶液中含有溶质1g)的瓜篓石油醚萃取物(溶于20%乙醇),一组喷洒1%(w/v)的山梨酸钾水溶液,另取一组作为对照,稍干后装入保鲜袋中于4℃保存,隔一定时间观察葡萄的外观和好果率,结果见表6:
表6:不同处理方法对葡萄的保鲜效果影响
实施例8:瓜篓提取物对花菜的保鲜效果试验
将购于农贸市场的新鲜花菜随机分组,其中一组喷洒1%(w/v)的瓜篓丙酮提取物(溶于20%乙醇),一组喷洒1%(w/v)的山梨酸钾水溶液,另取一组作为对照,稍干后装入保鲜袋中于4℃保存,隔一定时间观察花菜的表观特征,结果见表7:
表7:不同处理方法对花菜的保鲜效果影响
Claims (7)
1.一种瓜篓有效成分的提取方法,所述方法包括:取瓜蒌的干燥植物碎片,加入有机溶剂或其水溶液提取1~3次,每次回流提取4~10小时或者常温浸提24小时以上,每次加入有机溶剂量为4~8mL/g植物碎片,过滤,提取液浓缩、冻干,得到瓜蒌提取物;所述有机溶剂为下列之一或其中两种以上的混合物:甲醇、丙酮、乙酸乙酯。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于所述瓜蒌的干燥植物碎片在加入有机溶剂进行提取之前先用石油醚脱脂1~3次,每次4~6小时、石油醚加入量为4~8mL/g植物碎片,温度30~60℃。
3.如权利要求1和2所述的方法,其特征在于:将得到的提取液进一步先用非极性有机溶剂进行萃取,萃取液再浓缩、冻干,得瓜篓萃取物,所述非极性有机溶剂为下列之一或两种以上混合物:石油醚、乙醚、正己烷。
4.如权利要求1或2所述的方法,其特征在于所述瓜蒌的干燥植物碎片为瓜蒌皮的干燥碎片。
5.如权利要求1所述的方法,其特征在于所述方法如下:取瓜蒌皮的干燥碎片,加入石油醚脱脂3次,每次4~6小时、温度30~60℃、石油醚加入量为4~8mL/g植物碎片,过滤,滤渣挥干石油醚,加入4~8mL/g干燥碎片的乙酸乙酯常温提取3次、每次24小时,或加热回流提取3次、每次2~4小时,合并提取液,减压浓缩、冻干,得瓜蒌乙酸乙酯提取物。
6.如权利要求1所述的方法,其特征在于所述方法如下:取瓜蒌皮的干燥碎片,加入石油醚脱脂3次,每次4~6小时、温度30~60℃、石油醚加入量为4~8mL/g植物碎片,过滤,滤渣挥干石油醚,加入4~8mL/g干燥碎片的甲醇常温提取3次、每次24小时,或加热回流提取3次、每次2~4小时,合并提取液,减压浓缩至体积为原体积的1/5~1/4得浓缩液,浓缩液用石油醚萃取,萃取液减压浓缩、冻干,得瓜蒌石油醚萃取物。
7.如权利要求1所述的方法,其特征在于所述方法如下:取瓜蒌皮的干燥碎片,加入4~8mL/g植物碎片的丙酮,加热回流提取3次、每次2~4小时,合并提取液、减压浓缩、冻干,得瓜蒌丙酮提取物。
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CN106176890A (zh) * | 2016-06-30 | 2016-12-07 | 潜山县有余瓜蒌开发有限责任公司 | 一种从瓜蒌籽中提取三萜皂苷的方法 |
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