CN101445530B - 一种橙皮苷的高生物利用率衍生物的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种橙皮苷的高生物利用率衍生物的制备方法，其特征在于通过对橙皮苷适度的水解，并通过一定的分离纯化方法，得到纯度较高的橙皮素-7-葡萄糖苷和橙皮素。其制备方法为：以从柑桔中提取的橙皮苷为原料，溶于一定量的碱性溶液中，添加一定量的有机溶剂，充分溶解后，预热，最后加入也预热过的一定量的盐酸，沸水浴回流一定时间，冷却，调节pH后，静置，过滤得到水解混合产物。混合物经分离提纯得到橙皮素-7-葡萄糖苷、橙皮素。产物经分离提纯后未分解的橙皮苷可以循环利用于下一次的酸水解。本发明通过简单的酸水解方法，即可得到高生物利用率的橙皮苷衍生物橙皮素-7-葡萄糖苷和橙皮素，因此具有成本低廉、工艺简单的优点，可循环生产，易于实现工业化生产。

Description

一种橙皮苷的高生物利用率衍生物的制备方法

一、技术领域

本发明是一种橙皮苷的高生物利用率衍生物的制备方法，属柑桔功能性成分的二次深加工领域。

二、背景技术

橙皮苷是柑桔中含量最为丰富的黄酮类物质之一，但是橙皮苷在柑桔果实中是以活性较低的糖苷形式存在，提取得到的橙皮苷其糖苷键并没有断开，这种糖苷键的存在特别是鼠李糖糖苷键的存在，阻碍了其被生物体消化吸收，降低了其生物利用率。而且橙皮苷的溶解性很差，它的水溶性和脂溶性都相当低，使得它不易被生物酶类利用，也不易透过生物细胞膜，因而也限制了它在食品等领域中的应用。

从柑桔中提取橙皮苷在上世纪70年代就已经工业化生产了，这些橙皮苷大部分应用于医药和化妆品领域中，在食品和保健品领域几乎没有应用。因为橙皮苷中糖基的存在，经人体口服后需要经人体大肠中微生物分解后才能被吸收，未被分解的部分则随大便排出体外，而对于肠胃功能不好的人则橙皮苷的药效也会降低。至于人体皮肤吸收，也由于糖基的存在，降低了橙皮苷的亲脂性，不易通过皮肤细胞，因此也会降低它对皮肤作用的效果。而去除糖基或部分糖基后，橙皮苷的衍生物在水溶性、脂溶性和生物利用率上面都会改善。本发明就是针对橙皮苷所连的糖基对橙皮苷理化性质和活性的影响，利用酸对糖基的水解作用，得到生物利用率较高的橙皮素-7-葡萄糖苷以及副产品橙皮素。另外，橙皮素-7-葡萄糖苷也是合成高倍甜味剂的原料，合成药物的原材料。

目前除了用酸来水解橙皮苷外，也有用酶法水解的。相对于酸法水解，酶法水解温度较低，水解反应较好控制，但是经发酵产酶的产率并不高，价格昂贵，而且水解率较低，若酶系中含有多种酶，得到的反应产物仍然复杂，使得分离纯化困难。而用酸法来水解，水解率高，成本低廉，水解产物橙皮素-7-葡萄糖苷和橙皮素易于分开，未经水解的橙皮苷也可以循环利用用于下一次水解。

三、发明内容

本发明公开了一种橙皮苷的高生物利用率衍生物的制备方法，其特征在于通过对橙皮苷适度的水解，并通过一定的分离纯化方法，得到纯度较高的橙皮素-7-葡萄糖苷和橙皮素。本发明的内容分为两部分，一部分为通过橙皮苷的酸水解得到水解混合产物，一部分为水解混合产物的分离提纯。为了达到这一目的，本发明的技术方案如下：

橙皮苷的酸水解时，采用的方法如下：称取橙皮苷适量，先加碱溶液，使橙皮苷溶解，再加入一定量的有机溶剂，预热使其中的橙皮苷完全溶解，最后加入预热过的盐酸溶液，加热回流一段时间，终止反应，调节pH值，静置，过滤，滤液浓缩，浓缩到一定倍数后，过滤析出的物质，两次滤渣合并，烘干用于下一步提纯用。

对水解混合产物的分离提纯时，所用的方法特征在于混合物中的三种组分在纯丙酮和丙酮的水溶液中的溶解度不同，通过这一性质对混合产物进行提纯。将混合产物按固液比为1∶10溶解在纯的丙酮中，在40～50℃下搅拌1-2h，过滤，得到滤液I和滤渣I，滤渣I溶解在40～50℃60％～80％的丙酮中，水浴20-60min，再过滤，滤液II和滤渣II，滤液II经真空蒸干，得到橙皮素-7-葡萄糖苷，滤渣II可循环利用再用来酸水解。滤液I蒸干得到橙皮素。反复上述步骤，即可得到纯度较高的橙皮素-7-葡萄糖苷和橙皮素。

本发明的优点：

(1)本发明独特的酸水解工艺，先用碱对橙皮苷进行溶解，加入有机溶剂促进其溶解，使得橙皮苷在整个溶液中呈分散状态，再加入酸后，橙皮苷能够较快地被水解。

(2)本发明通过橙皮苷的酸水解，改善了其理化性质和生物利用率。

(3)本发明独特的分离提纯工艺，与以前树脂层析方法相比，具有快速、溶剂消耗低、工艺简单、成本低廉等优点。

(4)本发明把分离提纯得到的未分解的橙皮苷进行循环利用，再用于下一步的酸水解，从而提到了橙皮苷总的水解率。

四、具体实施方式

下面通过具体的实施方式对本发明作进一步描述，但绝不是要对本发明作任何限制。

实施例1：橙皮苷购自浙江衢州天圣植物提取有限公司，含量为96％(HPLC)。橙皮苷称取3g，溶解于15ml 1M的氢氧化钠溶液中，加入20ml的异丙醇，预热，充分溶解后加入预热过的5M的盐酸溶液18ml，补水至50-60ml，加热沸腾回流15min，终止反应，调节pH值至4，静置，过滤，得到水解产物2.2g，经HPLC分析，可知橙皮苷水解率为17.31％，橙皮素-7-葡萄糖苷、橙皮素含量分别为16.26％、4.36％。把得到的水解产物进行分离提纯，得到橙皮素-7-葡萄糖苷制品0.6g，纯度为64％，得到橙皮素制品0.2g，纯度达84％。

实施例2：称取橙皮苷3g，溶解于15ml 1M的氢氧化钠溶液中，加入20ml的异丙醇，预热，加入预热过的5M的盐酸溶液18ml，加热沸腾回流45min，得到水解产物2.3g，经HPLC分析，可知橙皮苷水解率为35.53％，橙皮素-7-葡萄糖苷、橙皮素含量分别为28.05％、10.06％。水解产物经过分离提纯，得到橙皮素-7-葡萄糖苷制品1g，纯度为70％，得到橙皮素制品0.4g，纯度达86％。

实施例3：称取橙皮苷3g，溶解于15ml 1M氢氧化钠溶液中，加入20ml的乙醇，预热，加入预热过的5M的盐酸溶液18ml，加热沸腾回流45min，得到水解产物2.5g，经HPLC分析，可知橙皮苷水解率为9.18％，橙皮素-7-葡萄糖苷、橙皮素含量分别为8.68％、4.50％。水解产物经过分离提纯，得到橙皮素-7-葡萄糖苷制品0.22g，纯度为63％，得到橙皮素制品0.1g，纯度达82％。

实施例4：称取橙皮苷3g，溶解于15ml 1M氢氧化钠溶液中，加入20ml的DMF(N，N-二甲基甲酰胺)，预热，加入预热过的5M的盐酸溶液18ml，加热沸腾回流45min，得到水解产物2.3g，经HPLC分析，可知橙皮苷水解率为16.3％，橙皮素-7-葡萄糖苷、橙皮素含量分别为20.06％、0.24％。水解产物经过分离提纯，得到橙皮素-7-葡萄糖苷制品0.3g，纯度为63％，得到橙皮素制品0.1g，纯度达82％。

实施例5：称取橙皮苷3g，溶解于15ml 1M氢氧化钠溶液中，加入20ml异丙醇，预热，充分溶解后加入预热过的5M盐酸，使反应体系中盐酸浓度为1.0N，加热沸腾回流45min，得到水解产物2.3g，经HPLC分析，可知橙皮苷水解率为15.51％，橙皮素-7-葡萄糖苷、橙皮素含量分别为12.39％、6.50％。水解产物经过分离提纯，得到橙皮素-7-葡萄糖苷制品0.4g，纯度为68％，得到橙皮素制品0.2g，纯度达84％。

实施例6：称取橙皮苷3g，溶解于15ml 1M氢氧化钠溶液中，加入20ml异丙醇，预热，加入预热过的盐酸，使反应体系中使盐酸浓度2.0N，加热沸腾回流45min，终止反应，得到水解产物2.3g，经HPLC分析，可知橙皮苷水解率为48.0％，橙皮素-7-葡萄糖苷、橙皮素含量分别为含量为22.05％、28.06％。水解产物经过分离提纯，得到橙皮素-7-葡萄糖苷制品0.8g，纯度为70％，得到橙皮素制品0.6g，纯度达85％。

Claims (2)

1.一种橙皮苷的高生物利用率衍生物的制备方法，其特征在于以从柑桔中提取的橙皮苷为原料，溶于10～30ml 1M的碱性溶液中，添加20～40ml的有机溶剂，充分溶解后，预热，最后加入预热过的5M盐酸10～30ml，沸水浴回流15～60min，冷却，调节pH值至3～6，静置，过滤得到水解混合物；混合物经分离提纯得到橙皮素-7-葡萄糖苷和橙皮素，分离提纯方法是采用60％～80％丙酮水溶液和纯丙酮两种有机溶剂来进行的，所述的方法为：(1)水解混合产物先用纯丙酮来溶解，搅拌1～2h，过滤，得到滤渣，滤渣用纯的丙酮再洗涤两次；(2)用60％～80％丙酮溶液溶解滤渣，过滤，滤液真空蒸发至干；(3)蒸干物在40℃真空干燥，即得含量较高的橙皮素-7-葡萄糖苷，重复步骤(2)，得到步骤(1)滤渣中残留的橙皮素-7-葡萄糖苷，把步骤(1)中得到的滤液真空蒸干，得到含量较高的橙皮素；其中的碱性溶液为氢氧化钠或氢氧化钙溶液。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于水解产物经过分离提纯后，把产物中的三种组分分开，其中的橙皮苷部分进行循环利用，再用于下一次的酸水解。