CN101444522A - 一种褐藻胶寡糖的应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及糖类的应用，尤其是一种褐藻胶寡糖的应用。特点是褐藻胶寡糖用作细菌或真菌的抑菌剂。本发明通过抑菌实验，证明褐藻胶寡糖无论对革兰氏阴性菌或阳性菌，都能有效抑制其生长，表现出广谱抗菌活性；通过动物急性炎症实验，证明褐藻寡糖具有抗炎作用和一定的镇痛作用。

Description

一种褐藻胶寡糖的应用

本申请是申请号为：200610069060.4、申请日为：2006年9月21日：发明名称为：一种褐藻胶寡糖的制备方法及应用的分案申请。

技术领域

本发明涉及糖类的应用，尤其是一种褐藻胶寡糖的应用。

背景技术

近年来，由于抗菌素的大量使用，使环境受到污染，细菌基因突变而产生耐药性，并且耐药率逐渐提高，几乎所有细菌都获得耐药基因，这一问题已日趋严重。对付细菌耐药性除了合理运用抗生素外，主要对策就是研制开发对耐药菌株有效的新药和新制剂。近年来，褐藻胶的生理活性不断被揭示，尤其在促生长作用、增强机体免疫功能、抗肿瘤和对神经元损伤的保护作用等方面的研究，日益引起人们的关注，从而使褐藻胶得到进一步的应用。而褐藻胶寡糖的用途只在2004年8月4日公告的CN1160080C的中国发明专利说明书所公开的“褐藻胶寡糖作为制备预防因东莨菪碱所致痴呆药物的应用”中提出，是用作抗衰老和抗痴呆的药物。然而，褐藻胶寡糖作为天然的具有高效抑菌活性的抑菌剂，到目前为止，国内外还没有相关报道。

发明内容

为了克服现有技术中的不足，充分利用褐藻胶寡糖的高效抑菌活性，本发明提出一种褐藻胶寡糖的应用。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：一种褐藻胶寡糖的应用，其特征在于：所述的褐藻胶寡糖可用作细菌或真菌的抑菌剂。

所述的细菌为藤黄微球菌或金黄色葡萄球菌或枯草芽孢杆菌或大肠杆菌。

所述的真菌为啤酒酵母。

所述的对藤黄微球菌或金黄色葡萄球菌或大肠杆菌的最低抑菌浓度为0.2-0.7％，对枯草芽孢杆菌最低抑菌浓度为0.5-2.5％，

所述的对啤酒酵母的最低抑菌浓度为1-10％。

本发明褐藻胶寡糖对革兰氏阴性菌或阳性菌，都能有效抑制其生长，表现出广谱抗菌活性，并具有抗炎作用和一定的镇痛作用。

具体实施方式

下面通过实验方法和实验结果说明褐藻胶寡糖可作为天然的具有高效抑菌活性的抑菌剂使用做详细叙述。

制备的褐藻胶寡糖抑菌实验的筛选及效果评价方法如下：

以2.5％褐藻胶，2.5％苯甲酸钠及生理盐水为对照，研究2.5％褐藻胶寡糖溶液对枯草芽孢杆菌等细菌的抑菌效果。经24h或72h培养后，观察样品液对不同菌种的抑制效果，用游标卡尺测量抑菌圈大小，具体数值如下表：

褐藻胶寡糖对细菌的抑制效果(抑菌圈直径，mm)

 

菌种             2.5％寡糖           2.5％褐藻胶              2.5％苯甲酸钠         生理盐水
	枯草芽孢杆菌     20.10                 —                        —                   —大肠杆菌         20.78                 —                        —                   —藤黄微球菌       28.00                 —                        —                   —金黄色葡萄球菌   28.16                 —                        —                   —

由表中可知，藤黄微球菌和金黄色葡萄球菌的抑菌圈最大，枯草芽孢杆菌和大肠杆菌的抑菌圈次之。说明，褐藻胶寡糖对藤黄微球菌和金黄色葡萄球菌的生长抑制作用最强，对枯草芽孢杆菌和大肠杆菌的生长抑制作用次之。由此可看出：褐藻胶寡糖对细菌的生长均有抑制作用。其中，对藤黄微球菌和金黄色葡萄球菌抑制效果较明显，对枯草芽孢杆菌和大肠杆菌生长抑制效果较次之。

同样，以5％苯甲酸钠和生理盐水为对照，研究5％褐藻胶寡糖溶液对青霉等真菌的抑制作用，实验数据如下表：

褐藻胶寡糖对真菌的抑制效果(抑菌圈直径，mm)

 

菌种                 5％寡糖            5％苯甲酸钠              生理盐水
	青霉                  —                    —                     —黑曲霉                —                    —                     —啤酒酵母              13.22                 —                     —

由表中表明：褐藻胶寡糖溶液对啤酒酵母稍有抑制作用外，对曲霉和青霉则无抑制效果。而对照组褐藻胶、苯甲酸钠溶液和生理盐水对细菌和真菌的生长均无抑制效果。同时也考察了褐藻胶寡糖抑菌剂对细菌和真菌的最低抑菌浓度，实验数据如下表：

褐藻胶寡糖对几种微生物的最低抑菌浓度

得出：对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、藤黄微球菌的最低抑菌浓度仅为0.2-0.7％，对枯草芽孢杆菌最低抑菌浓度为0.5-2.5％，而对啤酒酵母的最低抑菌浓度则为1-10％。

总而言之，无论是革兰氏阴性还是阳性菌，本发明中的褐藻胶寡糖作为抑菌剂都能有效抑制其生长，表现出广谱抗菌活性。

通过建立以血管通透性为主要改变的动物急性炎症模型来进一步说明褐藻胶寡糖对急性炎症的抑制作用及效果。

1、褐藻胶寡糖对二甲苯致小鼠耳肿胀的消炎效果

取小鼠50只，雌雄各半，随机分成5组，每组10只，暂养一段时间，待适应环境后开始实验。第1组颈背部皮下注射无菌生理盐水，作为阴性对照组；第2组注射剂量为25mg/kg鼠体重的氢化可的松稀乙醇溶液，作为阳性对照组；第3、4、5组分别注射剂量为50mg/kg、100mg/kg、200mg/kg鼠体重的褐藻胶寡糖溶液，注射量为每只0.5ml。各组分别在实验前一天给药，实验当天各组给药1.5h后，在每只小鼠右耳前后两面分别均匀涂布二甲苯0.02ml致炎。致炎约1h后，将小鼠颈椎脱臼致死，沿耳廓基线剪下两耳，用直径6mm打孔器分别在两耳的同一部位打下圆耳片，称重，精确到0.0001g。右耳片与左耳片的重量差即为肿胀度，肿胀抑制率计算公式如下：抑制率(％)＝100×(对照组平均肿胀度-给药组平均肿胀度)/对照组平均肿胀度。肿胀厚度经方差分析，比较给药组和生理盐水组组间差异。

2、褐藻胶寡糖对鸡蛋清致大鼠足爪肿胀的消炎效果评价

取大鼠21只，雌雄各半，随机分为3组，每组7只，暂养一段时间。第1组右腹部皮下注射无菌生理盐水，作为阴性对照组；第2组注射剂量为25ml/kg鼠体重的氢化可的松稀乙醇溶液，作为阳性对照组；第3组注射剂量为80mk/kg鼠体重的褐藻胶寡糖溶液，注射量为每只1.3ml。各组分别在实验前一天给药，实验当天各组给药约2h后，在每只大鼠右后足跖注射10％新鲜鸡蛋清0.1ml(生理盐水配制)。于致炎后30min，1.5h，2.5h，4.5h用游标卡尺测量足爪厚度，观察厚度达到高峰时间和消退时间。以致炎前后足爪厚度的差值为肿胀厚度，厚度减少百分率作为抑制率，计算公式如下：抑制率(％)＝100×(对照组平均肿胀厚度-给药组平均肿胀厚度)/对照组平均肿胀厚度。肿胀厚度经方差分析，比较给药组和生理盐水组间差异。。

实验结果表明：所制备的褐藻胶寡糖能明显抑制二甲苯致小鼠耳肿胀炎症反应，对肿胀的抑制率呈明显的剂量依赖关系，抑制作用随剂量的增加而增加。当褐藻胶寡糖剂量为100mg/kg时，抑制二甲苯致小鼠耳肿胀作用优于剂量为25mg/kg的氢化可的松。褐藻胶寡糖对鸡蛋清致大鼠足爪肿胀有抑制作用，总体效果低于氢化可的松，当时间达到4.5h时，抑制率与氢化可的松相当，抑制作用较持久。

总之，褐藻胶寡糖对动物急性炎症模型具有抗炎作用和一定的镇痛作用，为临床研究提供了实验依据。

Claims (5)

1、一种褐藻胶寡糖的应用，其特征在于：所述的褐藻胶寡糖用作细菌或真菌的抑菌剂。

2、根据权利要求1所述的一种褐藻胶寡糖的应用，其特征在于：所述的细菌为藤黄微球菌或金黄色葡萄球菌或枯草芽孢杆菌或大肠杆菌。

3、根据权利要求1所述的一种褐藻胶寡糖的应用，其特征在于：所述的真菌为啤酒酵母。

4、根据权利要求2所述的一种褐藻胶寡糖的应用，其特征在于：所述的藤黄微球菌或金黄色葡萄球菌或大肠杆菌的最低抑菌浓度为0.2-0.7％，对枯草芽孢杆菌最低抑菌浓度为2.5-0.5％，

5、根据权利要求3所述的一种褐藻胶寡糖的应用，其特征在于：所述的啤酒酵母的最低抑菌浓度为1-10％。