CN104586862A - N-乙酰神经氨酸单体、n-乙酰神经氨酸水合物或n-乙酰神经氨酸盐在外用型消炎药品中的应用 - Google Patents

N-乙酰神经氨酸单体、n-乙酰神经氨酸水合物或n-乙酰神经氨酸盐在外用型消炎药品中的应用 Download PDF

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袁方
姚建铭
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Abstract

本发明涉及一种N-乙酰神经氨酸单体、N-乙酰神经氨酸水合物或N-乙酰神经氨酸盐在外用型消炎药品中的应用，外用型消炎药品具有消炎抑菌，促进细胞修复的功效。

Description

N-乙酰神经氨酸单体、N-乙酰神经氨酸水合物或N-乙酰神经氨酸盐在外用型消炎药品中的应用
技术领域
本发明涉及生物化学领域和医药领域，具体涉N-乙酰神经氨酸单体、N-乙酰神经氨酸水合物或N-乙酰神经氨酸盐在消炎药品中的应用。本发明还涉及包含N-乙酰神经氨酸单体、N-乙酰神经氨酸水合物或N-乙酰神经氨酸盐的消炎药品组合。
技术背景
炎症是日常最常见的病状之一。随着近年来外部环境的恶化，皮肤炎症更是成为爆发之势。
目前通常用于预防和治疗炎症有头孢、大环内酯等各类抗生素类药物。而抗生素的滥用危害早已是人尽皆知。随着病菌抗药性的增强，抗生素的药价也越来越低。因此，有同样功效而又没有抗生素缺陷的天然成分药物在某些用药条件下是一种理想替代品。
N-乙酰神经氨酸是一种天然糖类物质，在自然界中广泛存在，具有诸多生物功效，但一直以来都没有得到大规模应用，在医药领域也仅限为一种合成原料。
本发明基于对N-乙酰神经氨酸单体或其水合物(N-acetylneuraminic acid,N-acetylneuraminic acid hydrate,CAS号：131-48-6)的研究，将其直接应用于外用型消炎药品中，提供消炎抑菌，促进细胞修复的功效。
发明内容
本发明的目的在于提供一种N-乙酰神经氨酸单体、N-乙酰神经氨酸水合物或N-乙酰神经氨酸盐在在外用型消炎药品的应用，具有消炎抑菌，促进细胞修复的功效。
因此本发明的一个目的，即以N-乙酰神经氨酸单体形式、N-乙酰神经氨酸水合物形式或N-乙酰神经氨酸盐形式直接加入外用型消炎药品中的应用。
根据本发明的一个优选实施方式，所述外用型消炎药品为：所述外用型消炎药品为消炎膏药、消炎喷雾剂、消炎药水、溃疡贴片或消炎眼药水，制成乳膏、液体、喷雾或贴片形式。
根据本发明的一个优选实施方式，所述外用型消炎药品还包含医药领域能接受的辅料。所述医药领域能接受的辅料为所述医药领域能接受的辅料为：软膏中的基质、抛射剂、附加剂、润滑剂、淀粉、金属络合剂、糖类、pH值调节剂、表面活性剂、水和/或用于载体的高分子化合物。
根据本发明的优选实施方式中，所述N-乙酰神经氨酸单体的使用浓度是0.01mg/ml至200mg/ml的任意浓度。如果加入的N-乙酰神经氨酸水合物形式或N-乙酰神经氨酸盐，N-乙酰神经氨酸水合物形式或N-乙酰神经氨酸盐在外用型消炎药品中最终以N-乙酰神经氨酸单体的浓度来计算，N-乙酰神经氨酸单体的浓度是0.01mg/ml至200mg/ml的任意浓度。优选1mg/ml－50mg/ml的任意浓度，更优选10mg/ml－30mg/ml的任意浓度；
本发明所述N-乙酰神经氨酸单体可以通过生物工程技术人员熟知的方法得到，如以微生物发酵法，提取法，酶解聚唾法等手段制备N-乙酰神经氨酸单体，最后可通过结晶制得高纯度的单体干粉或水合物晶体。
根据本发明的一个优选实施方式，适宜溶媒主要为水(包括蒸馏水或去离子水等)。
N-乙酰神经氨酸单体具有抗炎抑菌，促进细胞修复的功效。
本发明提供的外用型消炎药具有消炎抑菌，促进细胞修复的功效。
具体实施方式
除非另有定义，本文所用的所有技术和科学术语具有本发明所属领域普通技术人员共同理解的相同含义。虽然与本文所述相似或等同的任何方法和材料可用于实施或测试本发明，但本文描述的是优选的方法和材料。对于本发明的目的，下面定义了以下术语。
本文所用术语“约”指与参比品的数量、水平、数值、维度、大小或用量比，差异可高达30％、20％或10％的数量、水平、数值、维度、大小或用量。
在全篇说明书和权利要求书中，除非另有要求，以下词语“包含”和其变体“含有”和“包括”应理解为意指包括所述的整体或步骤，或一组整体或步骤，但不排除任何其它整体或步骤。
根据本发明，术语“N-乙酰神经氨酸单体”是指通过任何适当方式，如微生物发酵法、提取法、酶解法生产或得到的N-乙酰神经氨酸单体。术语“N-乙酰神经氨酸水合物”是指含有任意数量结晶水的N-乙酰神经氨酸单体与水分子的结合物。术语“N-乙酰神经氨酸盐”是指N-乙酰神经氨酸单体与各种金属离子的化合物。
根据本发明，术语“外用型消炎药品”是指以涂抹、喷洒、点滴或者其它类似方法，散布于人体表皮及内膜系统的任何部位，如皮肤、口腔、眼部等，以达到抗炎抑菌为目的的药品。根据本发明的优选实施方式中，所述外用型消炎药品包括：消炎膏药、消炎喷雾剂、消炎药水、溃疡贴片、消炎眼药水等。
本发明还提供了一种外用型消炎药品组合物，其特征在于，所述组合物含有N-乙酰神经氨酸单体和外用型消炎药品领域能接受的辅料。所述“外用型消炎药品领域能接受的辅料”可以选自：软膏中的基质、抛射剂、附加剂、润滑剂、淀粉、金属络合剂、糖类、pH值调节剂、表面活性剂、水、用于载体的高分子化合物。
在根据本发明的优选实施方式中，所述外用型消炎药品组合物为消炎膏药、消炎喷雾剂、消炎药水、溃疡贴片、消炎眼药水等，制成乳膏、液体、喷雾或贴片形式。药品组合物的这些形式可通过本领域技术人员熟知的方法制备。
N-乙酰神经氨酸单体的使用浓度是0.1mg/ml至200mg/ml。例如，N-乙酰神经氨酸单体的使用浓度可以是1mg/ml至50mg/ml，优选10mg/ml至30mg/ml。如果作为添加剂加入消炎药品中，以消炎药品组合物的总重量计，所述消炎药品组合物可以包含0.01-20％N-乙酰神经氨酸单体。在本发明一个优选的实施方式中，所述N-乙酰神经氨酸单体占所述组合物总重量的约1-3％。
N-乙酰神经氨酸的广泛存在于自然界中，主要结合在动植物细胞膜糖蛋白上，包括人体本身的细胞，其中含量最高的是燕窝。目前，对于N-乙酰神经氨酸单体的应用主要限于医药中间体，而对外用型消炎药品的应用则是一片空白。对于已知文献及相关研究的找寻，并未发现有涉及N-乙酰神经氨酸单体在外用型消炎药品中的应用及相关功效。因此，本发明首次提出N-乙酰神经氨酸单体具有消炎抑菌，促进细胞修复的功效，可作为功能添加剂加入外用型消炎药品中。
本发明所述N-乙酰神经氨酸单体可以通过生物工程领域技术人员熟知的方法制备，例如，微生物发酵法，提取法，酶解法等得到N-乙酰神经氨酸单体溶液，后经结晶得到其单体形式或水合物形式。
根据本发明的一个优选实施方式，适宜溶媒主要为水(包括蒸馏水、去离子水)。
下面结合具体实施例进一步阐述本发明。但是，这些实施例仅用于说明发明而不构成对本发明范围的限制。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议条件。除非另有说明，所有百分比和份数按质量计。一下所有实施例中N-乙酰神经氨酸单体样品均由武汉中科光谷绿色生物技术有限公司提供的95％纯度样品。
N-乙酰神经氨酸水合物或N-乙酰神经氨酸盐做消炎药后，最终都是以N-乙酰神经氨酸单体来实现其消炎药作用，故本发明只列举N-乙酰神经氨酸单体实验。
实施例：N-乙酰神经氨酸抗炎实验
实验原理
参照《药理实验方法学》等文献进行“二甲苯致小鼠耳廓肿胀法”抗炎实验。
试验准备与方法
1.燕窝酸，白色粉末，由武汉中科光谷绿色生物技术有限公司提供。试验前用蒸馏水配制成2.5mg/ml，5.0mg/ml，10.0mg/ml等三种浓度的溶液，备用。
2.阳性对照物：丁酸氢化可的松软膏，13101304,20g：20mg，天津金耀药业有限公司生产。
3.阴性对照物：纯化水。
4.实验动物
试验用小鼠为昆明种，SPF级，雄性；体重：22－25g，由湖北省实验动物研究中心提供。
饲养条件：试验动物为笼养，每笼饲养同性别动物6只。饲料为SPF级实验颗粒鼠粮，由江苏省协同医药工程有限责任公司生产。饮用水为灭菌纯化水。笼底垫料为杨木木屑，使用前已灭菌，每两日更换一次。实验室温度为20－22℃，湿度为55％－60％，12小时明暗周期。
5.试验方法
取上述规格小鼠60只，随机分成5组：阳性对照组、阴性对照组、供试样品低(2.5mg/ml)、中(5.0mg/ml)、高(10.0mg/ml)三组剂量。各组小鼠右耳涂抹相应组别受试物，0.1ml/只，每日两次，连续六天。第七天各组给药1小时后以蒸馏水洗去药液，用干棉球擦净，右耳凃二甲苯0.02ml/只，左耳作对照，2小时后处死动物，用直径8mm打孔器将双儿同部位等面积切下，称重，右、左耳片重量差为肿胀度。计算各组肿胀度，采用SPSS15.0软件的单因素方差分析功能的LSD检验(总体样本数据为方差齐性)进行统计学处理，结果见下表。
组别 剂量(mg/ml) 动物数(只) 耳廓肿胀度(g)
高剂量 10 12 0.0036±0.0010**
中剂量 5 12 0.0045±0.0012**
低剂量 2.5 12 0.0050±0.0031**
阳性对照 / 12 0.0042±0.0009**
阴性对照 / 12 0.0074±0.0026
注：与阴性对照组相比，**表示p＜0.01
结果表明，N-乙酰神经氨酸的供试样品高、中、低三剂量组及阳性对照组的耳廓肿胀度与阴性对照组相比，均有显著性差异(p＜0.01)，有统计学意义。
6.试验结论
N-乙酰神经氨酸在2.5mg/ml，5.0mg/ml，10.0mg/ml的浓度外用时，能显著抑制二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀，提示其有抗炎作用。

Claims (8)

1.N-乙酰神经氨酸单体、N-乙酰神经氨酸水合物或N-乙酰神经氨酸盐在外用型消炎药品中的应用。
2.如权利要求1所述N-乙酰神经氨酸单体、N-乙酰神经氨酸水合物或N-乙酰神经氨酸盐在外用型消炎药品中的应用，其特征在于：所述外用型消炎药品为消炎膏药、消炎喷雾剂、消炎药水、溃疡贴片或消炎眼药水。
3.如权利要求2所述N-乙酰神经氨酸单体、N-乙酰神经氨酸水合物或N-乙酰神经氨酸盐在外用型消炎药品中的应用，其特征在于：所述外用型消炎药品制成乳膏、液体、喷雾或贴片形式。
4.如权利要求1所述N-乙酰神经氨酸单体、N-乙酰神经氨酸水合物或N-乙酰神经氨酸盐在外用型消炎药品中的应用，其特征在于：所述外用型消炎药品还包含医药领域能接受的辅料。
5.如权利要求4所述N-乙酰神经氨酸单体、N-乙酰神经氨酸水合物或N-乙酰神经氨酸盐在外用型消炎药品中的应用，其特征在于：所述医药领域能接受的辅料为：软膏中的基质、抛射剂、附加剂、润滑剂、淀粉、金属络合剂、糖类、pH值调节剂、表面活性剂、水和/或用于载体的高分子化合物。
6.如权利要求1所述N-乙酰神经氨酸单体、N-乙酰神经氨酸水合物或N-乙酰神经氨酸盐在外用型消炎药品中的应用，其特征在于：所述N-乙酰神经氨酸在任一外用型消炎药品中的最终使用浓度是0.1mg/ml－200mg/ml的任意浓度。
7.如权利要求6所述N-乙酰神经氨酸单体、N-乙酰神经氨酸水合物或N-乙酰神经氨酸盐在外用型消炎药品中的应用，其特征在于：所述N-乙酰神经氨酸在任一外用型消炎药品中的最终使用浓度是1mg/ml－50mg/ml的任意浓度。
8.如权利要求1所述N-乙酰神经氨酸单体、N-乙酰神经氨酸水合物或N-乙酰神经氨酸盐在外用型消炎药品中的应用，其特征在于：所述N-乙酰神经氨酸在任一外用型消炎药品中的最终使用浓度是10mg/ml－30mg/ml的任意浓度。
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