CN101428002A - 注射用紫杉醇冻干微乳剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种注射用紫杉醇的冻干微乳剂及其制备方法。采用有效剂量的紫杉醇作为药物，并含有油相，乳化剂，助乳化剂，pH调节剂，等渗调节剂，冻干保护剂等药用辅料，称取处方量的乳化剂，助乳化剂和注射用油搅拌均匀后，将紫杉醇加入上述混合液中后搅拌至完全溶解，然后加入注射用水，充分搅匀，调节pH值后即得紫杉醇微乳剂，进一步向其加入冻干保护剂，经真空冷冻干燥后，制成冻干微乳剂。使用前用生理盐水，葡萄糖溶液或林格溶液等生理相容性溶液进行稀释，即可迅速回复成微乳。本发明的特点是通过将紫杉醇微乳进一步冷冻干燥的工艺，显著提高了紫杉醇的稳定性和疗效，大大降低了毒副作用，特别值得关注的是，冷冻干燥法对微乳起到了很好的保护作用，避免了药物的渗漏，对于建立紫杉醇微乳载药系统的稳定剂型及其长期保存开辟了新的前景。本发明提供的冻干微乳剂的制备方法，制备工艺简单，不含有机溶剂，成本低廉，适合工业化大生产。

Description

注射用紫杉醇冻干微乳剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及医药技术领域，具体地说涉及含有紫杉醇的注射用冻干微乳剂及其制备方法。

背景技术

紫杉醇是一种新的、独特的抗微管药物，被美国新化合物实体(NCE)称为近20年来极伟大的发现之一，它具有独特的微管稳定作用，是目前一类临床上用于治疗晚期卵巢癌、乳腺癌的最好药物之一，另外还发现它们对非小细胞肺癌、前列腺癌、头颈部肿瘤、类风湿性关节炎等也具有良好的疗效。由于紫杉醇类物质的水溶性极差，目前临床使用的紫杉醇制剂是用聚氧乙烯蓖麻油(

EL)与无水乙醇1∶1混合制成的油剂，注射给药前用生理盐水或5％葡萄糖溶液稀释到给药浓度。由于聚氧乙烯蓖麻油在体内能够引起严重的过敏反应，给药前需用抗过敏药物对病人进行预处理，整个过程非常不便，需谨慎监测用药过程，给患者带来了极大的痛苦。

为避免因

EL及紫杉醇自身带来的不良反应，提高紫杉醇的抗肿瘤作用，近年来，国内外药学工作者致力于紫杉醇新的给药系统研究，其中最成功的是将其制备成脂质体，但是在一周的贮存期内即能出现药物沉淀，该脂质体的粒径范围在4.5-5μm之间，同时存在大于30μm的粒子，在注射后通过毛细血管时可能引起栓塞，临床应用具有一定的危险性；专利200410068134.3和03134714.2公开了紫杉醇乳剂，是将紫杉醇与注射用油，注射用乳化剂和注射用水混合制成脂肪乳剂，这种乳剂，可以克服现有注射液的一些缺陷，并可补充营养，但仍然存在载药量低，贮存时间短，稳定性差等缺点，并且平均粒径均在500nm左右，不具备良好的器官靶向性；专利99800022.1公开了紫杉醇与非水溶性衍生物——聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯的组合物，虽然在一定程度上提高了紫杉醇的稳定性，使其在该载体溶液中不易降解，但是机体对该制剂的耐受性还有待进一步研究；专利98811010.5公开了紫杉醇与环糊精的组合物，但环糊精有较大的过敏反应和溶血现象，限制了紫杉醇包合物的广泛使用。其他紫杉醇制剂的研究还包括聚合物纳米粒，固体脂质纳米粒及供局部给药的紫杉醇微球制剂和凝胶剂，但这些制剂不同程度的存在着药物渗漏、体内药物的突释行为以及聚合物的毒性问题。因此，开发方便安全的给药系统成为了紫杉醇大规模应用的关键。

为提高紫杉醇用药的安全性和用药的顺应性，我们选择微乳作为紫杉醇的载药系统并进行了全面的研究。微乳自20世纪90年代有药用产品上市以来，已有了较大的进展。作为药物的胶体性载体，其主要优点是毒性小、安全性高、高压乳匀法易于大生产，还可增大难溶性药物的溶解性，提高药物的稳定性，也可作为缓释给药系统，具有一定的靶向作用。微乳可认为是一种膨胀胶束体系，在其形成时，油相增溶到胶束的烃链核内部，增大了内核体积，且由于油相对药物的溶解性较好，从而极大地提高药物在微乳中的溶解度。此外，本发明还进一步采用冷冻干燥法将紫杉醇微乳制剂制成块状固体或固体粉末，该方法提高了微乳的稳定性，避免药物的渗漏，有利于制剂的贮存，运输和销售。冷冻干燥过程中由于二糖的存在，有利于降低脂质的相转变温度。这样，干膜脂质在室温下为液晶相，避免了相分离的发生，且在复溶过程中不会发生相转变和双分子层的泄漏。因此，将微乳制成冻干制品，既保持了微乳的形态特征，保证药物稳定的包裹于微乳油相内核中，又增加了产品的安全性和稳定性，为临床应用提供了可靠的保障。

发明内容

本发明的目的在于研制和向临床提供一种供注射用的安全性高，疗效显著，性质稳定，毒副作用小，制备工艺简单并且适合工业化生产的注射用紫杉醇冻干微乳剂。采用有效剂量的紫杉醇作为药物，并含有油相，乳化剂，助乳化剂，pH调节剂，等渗调节剂，冻干保护剂等药用辅料，称取处方量的乳化剂，助乳化剂和注射用油搅拌均匀后，将紫杉醇加入上述混合液中后搅拌至完全溶解，然后加入注射用水，充分搅匀，调节pH值后即得紫杉醇微乳剂，进一步向其中加入冻干保护剂，经真空冷冻干燥后，制成冻干微乳剂。使用前用生理盐水，葡萄糖溶液或林格溶液进行稀释，即可迅速回复成微乳。本发明能提高或改善药物的包封率，具有控制药物释放、靶向定位释放且稳定性好等优点。既能克服现有制剂的缺陷和不足，提供一种不含聚氧乙烯蓖麻油(

EL)，吐温以及有机溶剂的紫杉醇类物质制剂，又能提高紫杉醇类物质的生物利用度、临床上持续给药剂量以及治疗指数。

本发明的另一目的是提供了紫杉醇冻干微乳剂的制备方法，该方法均采用常规的工艺设备，可工业大规模高效率生产。并且本制剂通过冷冻干燥以块状固体或固体粉末形式保存，方便了制剂的贮存，运输和销售。在冷冻干燥过程中，保护剂形成一种具有极高粘度的“玻璃化”状态，它包围在乳滴的周围，抑制了乳滴的运动和聚集。此外，微乳冻干失水过程中，保护剂二糖分子中的羟基能在失水部位与之连接，形成一种新的保护膜，使微乳在物理状态上与有水存在时相似，从而保持了微乳的完整结构，避免了药物的渗漏。

本发明的注射用紫杉醇冻干微乳剂，各组分按重量百分比组成为：

紫杉醇            0.1％～2％

注射用油          0.5％～10％

乳化剂            0.1％～20％

助乳化剂           0.1％～15％

抗氧剂             适量

pH调节剂           调节pH3.0～8.0

等渗调节剂         适量

冻干保护剂         1.0％～30％

注射用水           适量

本发明所述的注射用油包括大豆油，红花油，橄榄油，玉米油，沙棘油，亚麻子油，花生油，茶油，葵花籽油，C6～C18中等脂肪链长度的甘油三酯类，鱼油，薏仁油，月见草油，维生素E琥珀酸酯，维生素E醋酸酯，辛酸/癸酸甘油酯，米格列醇(Miglyol 812)，油酸乙酯，油酸，亚油酸乙酯，月桂酸异丙酯，肉豆蔻酸异丙酯，丁酸乙酯，乳酸乙酯等中的一种或一种以上组合物。

本发明所述的乳化剂包括天然大豆卵磷脂，天然蛋黄卵磷脂，天然磷脂酰胆碱或半合成磷脂酰胆碱及其衍生物，泊洛沙姆188，182，407，908，聚氧乙烯脂肪酸酯类，聚氧乙烯脂肪醇醚类，胆酸或去氧胆酸及其钠盐，甘胆酸钠，牛磺胆酸钠，去氧牛磺胆酸钠等中的一种或一种以上组合物。

本发明所述的辅助乳化剂包括聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯(TPGS)，聚乙二醇660-12-羟基硬脂酸酯(HS-15)，聚氧乙烯-8-辛酸/癸酸甘油酯(Labrasol)，聚乙二醇-二硬脂酰乙醇胺(PEG-DSPE)，乙二醇单乙基醚(Transcutol)，二已基琥珀酰磺酸钠(Aerosol OT)，正丁醇，乙二醇，丙二醇和聚甘油酯等中的一种或一种以上组合物。

本发明所述的抗氧剂为亚硫酸盐类，抗坏血酸，没食子酸丙酯，抗坏血酸棕榈酸酯，叔丁基对羟基茴香醚(BHA)，二叔丁基对甲酚(BHT)，维生素E等中的一种或一种以上组合物。本发明所述的pH调节剂为氢氧化钠，柠檬酸钠，柠檬酸，磷酸，醋酸或盐酸中的一种或一种以上组合物。

本发明所述的等渗调节剂为甘油，山梨醇，甘露醇或葡萄糖中的一种或一种以上组合物。本发明所述的冻干保护剂为蔗糖，乳糖，麦芽糖，葡萄糖，海藻糖，棉籽糖，果糖，己糖，山梨醇，木糖醇，甘露醇，氨基酸等中的一种或一种以上组合物。

本发明所述的注射用紫杉醇冻干微乳剂，可通过如下方法制备：

(1)按处方量称取紫杉醇，乳化剂，辅助乳化剂和注射用油，在40～80℃加热熔融得油相；

(2)称取处方量的注射用水，加入等渗调节剂和抗氧剂，在40～80℃加热溶解得水相；

(3)以上两相在40～80℃下搅拌即得到紫杉醇微乳剂或经高压匀质形成纳米乳，调节pH值3.0～8.0；

(4)在制备好的紫杉醇微乳剂中加入适量保护剂，通过真空冷冻干燥方法得到固体制剂。本发明所述的注射用紫杉醇冻干微乳剂，粒径在100nm以下，且分布均匀。本发明所述的注射用紫杉醇冻干微乳剂，破乳后测定相分布，该微乳剂共分三层，包括油层，乳化剂层和水层，其中油层中的药物含量为90％～99％，乳化剂层的药物含量为1％～10％，水层中的药物含量低于0.01％。

本发明所述的注射用紫杉醇冻干微乳剂，其紫杉醇的包封率在85％以上，满足临床使用的药物包封率要求。

本发明所述的注射用紫杉醇冻干微乳剂可用生理盐水，5％葡萄糖溶液或林格溶液进行稀释，在100秒钟内即可溶解，并且粒径和包封率没有明显变化。

本发明所述的注射用紫杉醇冻干微乳剂，可被生理相容性溶液在相图微乳区大体积稀释，微乳的形态和类型保持不变，粒径在100nm以下。

本发明提供一种新的注射用紫杉醇冻干微乳剂，由于选用了合适的注射用油及乳化剂等组分以及合适的制备方法，该产品载药量大，包封率高；该微乳剂进一步采用冷冻干燥法制成粉针剂，提高了制剂的稳定性，保持了微乳的完整结构，避免了现有乳剂储存期短，药物易渗漏的缺点；该冻干微乳剂在临用前用生理性溶液配伍后即可迅速溶解，并且在相图微乳区可被大体积稀释，微乳的形态和类型保持不变，粒径和包封率没有明显变化，在48小时内稳定，未见药物晶体析出；该冻干微乳剂无毒副作用，也无刺激性，极大地减少了患者输液时的疼痛，易为患者接受；该制剂还具有一定的靶向性，提高了药物的生物利用度和治疗指数；该制剂制备工艺简单易行，适于大量制备和工业化生产注射用紫杉醇冻干微乳剂。

附图说明

图1是冻干前后微乳形态示意图，其中I为冻干前；II为冻干后；A为亲水区；B为疏水区；C为真空冷冻干燥；1为紫杉醇；2为表面活性剂；3为助表面活性剂；4为油；5为水；6为冻干保护剂。

图2是实施例1冻干前后微乳的粒径图  A冻干前  B冻干后

图3是实施例2透射电镜下观察的冻干前及冻干后复溶的微乳形态  A冻干前  B冻干后

图4是实施例3配伍稳定性粒径图  A冻干前  B冻干后

图5是反相透析法测定实施例1～3冻干微乳剂的体外释放曲线

图6是自制组与参比组多剂量组织分布图

具体实施方式

实施例1：

(1)称取注射用大豆油50g，大豆磷脂12g，维生素E2.0g，紫杉醇10g置于水浴中加热搅拌熔融，保持温度70℃，作为油相；(2)称取聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯(TPGS)15g，Poloxamer 1884.0g，山梨醇9.5g加入到适量注射用水中，加热搅拌使其溶解，保持温度70℃，作为水相。在搅拌下将水相滴入油相中，继续搅拌，形成微乳或经高压750bar高压乳匀6次形成纳米乳，用0.2％柠檬酸调pH为5.5；(3)在上述紫杉醇微乳剂中加入15％蔗糖，在-80℃预冻8h后，真空冷冻干燥72h，即得注射用紫杉醇冻干微乳剂。将冻干制剂加水复溶后测得粒径37.2nm，包封率为87.3％，以5％葡萄糖溶液或0.9％氯化钠溶液稀释后48h内无沉淀析出，冻干前后粒径结果如图2所示。

将冷冻干燥的微乳剂在室温下储存3个月后，加水复溶后测得粒径25.6nm，包封率为85.8％。

实施例2：

(1)称取中链油35g，蛋黄磷脂20g，紫杉醇18g置于水浴中加热搅拌熔融，保持温度65℃，作为油相；(2)称取乙二醇单乙基醚(Transcutol)25g，去氧胆酸钠3.0g，甘露醇8.5g，抗坏血酸1.0g加入到适量注射用水中，加热搅拌使其溶解，保持温度65℃，作为水相。在搅拌下将水相滴入油相中，继续搅拌，形成微乳，用0.1mol/L NaOH调pH7.0；(3)在上述紫杉醇微乳剂中加入20％海藻糖，在-85℃预冻7h后，真空冷冻干燥64h，即得注射用紫杉醇冻干微乳剂。将冻干制剂加水复溶后测得包封率为90.1％，粒径35.5nm，以5％葡萄糖溶液或0.9％氯化钠溶液稀释后48h内无沉淀析出。

将冷冻干燥的微乳剂在室温下储存3个月后，加水复溶后测得包封率为87.3％，粒径37.4nm。

实施例3：

(1)称取油酸乙酯45g，大豆油25g，大豆磷脂15g，紫杉醇6.0g置于水浴中加热搅拌熔融，保持温度75℃，作为油相；(2)称取聚乙二醇-二硬脂酰乙醇胺(PEG-DSPE)2.5g，Poloxamer 1885.0g，亚硫酸钠1.2g，甘油10.0g加入到适量注射用水中，加热搅拌使其溶解，保持温度75℃，作为水相。在搅拌下将水相滴入油相中，继续搅拌，形成微乳，用0.5mol/L磷酸调pH为5.5；(3)在上述紫杉醇微乳剂中加入12％甘露醇，在-55℃预冻12h，真空冷冻干燥80h，即得注射用紫杉醇冻干微乳剂。将冻干制剂加水复溶后测得包封率为89.3％，粒径30.1nm，以5％葡萄糖溶液或0.9％氯化钠溶液稀释后48h内无沉淀析出。

将冷冻干燥的微乳剂在室温下储存3个月后，加水复溶后测得包封率为87.6％，粒径32.8nm。

实施例4：

(1)称取红花油25g，亚油酸乙酯25g，蛋黄磷脂22.5g，聚氧乙烯-8-辛酸/癸酸甘油酯(Labrasol)8.0g，紫杉醇30g置于水浴中加热搅拌熔融，保持温度70℃，作为油相；(2)称取牛磺胆酸钠7.5g，抗坏血酸1.0g加入到适量注射用水中，加热搅拌使其溶解，保持温度70℃，用0.1mol/L盐酸溶液调节pH为3.0；(3)在上述紫杉醇微乳剂中加入15％蔗糖，在-65℃预冻10h后，真空冷冻干燥72h，即得注射用紫杉醇冻干微乳剂。将冻干制剂加水复溶后测得包封率为87.3％，粒径38.6nm，以5％葡萄糖溶液或0.9％氯化钠溶液稀释后48h内无沉淀析出。

将冷冻干燥的微乳剂在室温下储存3个月后，加水复溶后测得包封率为85.1％，粒径34.0nm。

实施例5：

(1)称取月桂醇异丙酯100g，大豆磷脂42.5g，正丁醇47.5g，紫杉醇65g置于水浴中加热搅拌熔融，保持温度65℃，作为油相；(2)称取Poloxamer 1886.0g，甘油150g，维生素E2.5g加入到适量注射用水中，加热搅拌使其溶解，保持温度65℃，用2.0％柠檬酸溶液调节pH为5.0；(3)在上述紫杉醇微乳剂中加入10％乳糖和10％海藻糖，在-70℃预冻8h后，真空冷冻干燥72h，即得注射用紫杉醇冻干微乳剂。将冻干制剂加水复溶后测得包封率为86.1％，粒径54.3nm，以5％葡萄糖溶液或0.9％氯化钠溶液稀释后48h内无沉淀析出。

将冷冻干燥的微乳剂在室温下储存3个月后，加水复溶后测得包封率为85.7％，粒径53.2nm。

实施例6：

(1)称取米格列醇(Miglyol 812)120g，蛋黄磷脂86.5g，乙二醇43.0g，紫杉醇75g置于水浴中加热搅拌熔融，保持温度80℃，作为油相；(2)称取聚乙二醇660-12-羟基硬脂酸酯(HS-15)200g，Poloxamer 407 12.0g，山梨醇4.5g，亚硫酸钠1.0g加入到适量注射用水中，加热搅拌使其溶解，保持温度80℃，用0.5mol/L磷酸调pH为5.5；(3)在上述紫杉醇微乳剂中加入20％葡萄糖，在-55℃预冻12h后，真空冷冻干燥74h，即得注射用紫杉醇冻干微乳剂。将冻干制剂加水复溶后测得包封率为92.7％，粒径26.3nm，以5％葡萄糖溶液或0.9％氯化钠溶液稀释后48h内无沉淀析出。

将冷冻干燥的微乳剂在室温下储存3个月后，加水复溶后测得包封率为90.1％，粒径28.3nm。

实施例7：

紫杉醇在微乳剂中的相分布试验：取3mL自制微乳剂加入氯化钠使溶液饱和后，在酒精灯上直火加热，使其破乳分层，从上到下依次为油层，乳化剂层和水层。分别取出油层和水层，按照含量测定方法进高效液相色谱仪分析，以紫杉醇微乳的含量为参比，计算油层和水层中紫杉醇的标示百分含量分别为95.37％和9.68×10-3％，结果表明药物主要分布于油相中。

实施例8：

包封率的测定：微柱离心法测定包封率

将用蒸馏水平衡好的Sephadex G-50装入3mL固相萃取柱的针筒中(5.2cm×0.9cm)，底部放一略小于其内径的圆形筛板，离心(1000r·min-1)1min，除去多余的水分，制成Sephadex G-50的微型柱。

取实施例1～6中的紫杉醇冻干微乳剂及室温储存3个月样品，加水复溶后分别精密吸取0.2mL，缓缓加于柱顶部，1000r·min-1离心1min。由柱顶部加入1.0mL40％乙醇溶液，1000r·min-1离心1min，收集滤过液，再于柱顶部加入相同体积的40％乙醇溶液，重复以上操作，合并1～9管滤过液，加40％乙醇溶液稀释并定容至25mL，摇匀，精密吸取20μL溶液，进样，测定峰面积，用外标一点法计算紫杉醇的含量，记为M1；另吸取0.2mL微乳，置于25mL容量瓶中，加无水乙醇定容至刻度，摇匀，精密吸取20μL上清液进样，计为M0；按下式计算包封率：包封率(％)＝(M1/M0)×100％，M1为微乳中所包封的紫杉醇的量；M0为微乳中紫杉醇的总量。

实施例9：

取实施例2中冻干前和冻干后复溶的产品进行透射电镜观察，比较两者在冻干前后的微观形态变化，结果如图3所示。可以看出，冻干后，微乳的粒径与冻干前相比更加均匀，冻干过程中，保护剂分布于微粒内外，从而阻止了微粒间相互聚集、融合，起到类似空间稳定作用。因此，冷冻干燥后复溶的微乳形态依然圆整，未见药物晶体析出，冻干前后微乳形态示意图如图1所示。

实施例10：配伍稳定性试验：

取实施例3中紫杉醇冻干微乳剂，用生理盐水，5％葡萄糖溶液或林格溶液等生理相容性溶液稀释至临床给药浓度，分别于0h和放置6h后测得粒径大小为30.1nm和31.0nm，包封率为89.3％和88.7％，粒径如图4所示。

实施例11：

取实施例1～3中紫杉醇冻干微乳制剂，测定其体外释放曲线。采用反相动态透析法，以pH7.4PBS+20％乙醇溶液200mL为释放介质，转速50r·min-1，温度(37±0.5)℃。将12个大小一致，装有2mL释放介质的透析袋(截留分子量12000～14000)，浸入释放介质中，平衡12h。分别于0.25，0.5，1.0，2.0，4.0，8.0，12.0，24.0，48.0，60.0h各取出一个透析袋，吸取袋内适量溶液，同时补入等量同温释放介质，样品过滤后进样。结果表明，在释放条件下，前8小时释放速度较快，随后释放速度减慢。结果如图5所示。

实施例12：

含量测定：取实施例4～6中的紫杉醇冻干微乳剂加水复溶后，精密量取紫杉醇微乳混悬液0.5mL，置于10mL容量瓶中，加无水乙醇定容至刻度，摇匀，超声后，3500r·min-1离心3min，取上清液，进高效液相色谱仪分析，以对照溶液为外标，按外标法，以峰面积计算，得样品中紫杉醇的标示百分含量分别为98.5％，99.1％，98.0％。

实施例13：

刺激性试验：注射用紫杉醇冻干微乳剂用生理盐水或5％葡萄糖溶液配伍稀释后对兔耳缘静脉注射10.0mg/kg的剂量，未见明显刺激性。

过敏试验：注射用紫杉醇冻干微乳剂用生理盐水或5％葡萄糖溶液配伍稀释后给豚鼠0.2ml/只(0.6mg/kg)皮下注射致敏，攻击剂量为0.8ml/只(7.2mg/kg)，结果为阴性。

溶血试验：在装有注射用紫杉醇冻干微乳剂用生理盐水或5％葡萄糖溶液配伍稀释后2.5mL的试管中加入浓度为2％家兔红血球混悬液2.5mL，结果无溶血作用。

实施例14：

急性毒性试验：18只SD大鼠六只一组分成三组，第一组对照组注射生理盐水，第二组注射市售紫杉醇(Taxol)注射液，第三组注射自制的紫杉醇冻干微乳剂，给药前，用生理盐水将紫杉醇(Taxol)注射液和紫杉醇冻干微乳剂稀释为浓度1.0mg/mL，尾静脉注射给药15mg/kg，注射15天后检查动物的存活率和器官重量(单位：克)，结果如表1所示。市售紫杉醇注射液尾静脉注射后立即表现出运动失调并对外界刺激不反应，24小时内全部死亡。而自制紫杉醇冻干微乳剂给药后动物行为正常，实验后的几天，体重并未明显下降，死亡的一只动物在给药后的第9天。因此，从结果中可以得出，自制组制剂静脉注射后毒副作用明显小于市售制剂。

表1 市售紫杉醇注射液与自制紫杉醇冻干微乳剂的毒性比较

 

	存活率	心	肝脏	脾	肺	肾	脑	胰脏	卵巢	胸骨	股骨
												对照组	6/6	0.729	1.565	0.552	0.850	0.953	1.564	0.805	1.050	0.131	0.668
自制组	5/6	0.864	1.368	0.497	0.914	1.147	1.347	1.084	0.173	0.143	0.567
												市售组	0/6	——	——	——	——	——	——	——	——	——	——

实施例15：

组织分布试验：雌性荷瘤小鼠12只，随机分成2组，分别按4mg/kg剂量尾静脉缓慢推注自制紫杉醇冻干微乳剂和市售紫杉醇(Taxol)注射液，连续给药6天，第6天给药后4h乙醚麻醉，摘眼球采血，立即解剖采集心、肝、脾、肺、肾、脑、胰腺、生殖腺、股骨、胸骨、胃、小肠、大肠、平滑肌、骨骼肌、脂肪、膀胱、瘤体，匀浆后测定各组织中的药物浓度，结果除肺部外，自制组在各个组织中的浓度普遍高于参比组，其中在肿瘤部位的药物浓度约为市售组的2倍。自制组脏器中药物的分布顺序为：肝>膀胱>胸骨>胰腺>小肠>脾>肾>卵巢>心>大肠>子宫>肺>胃>骨骼肌>平滑肌>股骨>肿瘤>脑>血浆>脂肪；市售组脏器中药物的分布顺序为：肺>肝>小肠>胰腺>胸骨>脾>大肠>卵巢>肾>膀胱>子宫>心>骨骼肌>胃>平滑肌>脂肪>血浆>股骨>脑>肿瘤。结果见图6所示。

Claims (10)

1.本发明的注射用紫杉醇冻干微乳剂，各组分按重量百分比组成为：

紫杉醇           0.1％～2％

注射用油         0.5％～10％

乳化剂           0.1％～20％

辅助乳化剂       0.1％～15％

抗氧剂           适量

pH调节剂         调节pH3.0～8.0

等渗调节剂       适量

冻干保护剂       1.0％～30％

注射用水         适量

2.根据权利要求1所述的注射用紫杉醇冻干微乳剂，其特征在于所述的注射用油包括大豆油，红花油，橄榄油，玉米油，沙棘油，亚麻子油，花生油，茶油，葵花籽油，C6～C18中等脂肪链长度的甘油三酯类，鱼油，薏仁油，月见草油，维生素E琥珀酸酯，维生素E醋酸酯，辛酸/癸酸甘油酯，米格列醇(Miglyol 812)，油酸乙酯，油酸，亚油酸乙酯，月桂酸异丙酯，肉豆蔻酸异丙酯，丁酸乙酯，乳酸乙酯等中的一种或一种以上组合物；乳化剂包括天然大豆卵磷脂，天然蛋黄卵磷脂，天然磷脂酰胆碱或半合成磷脂酰胆碱及其衍生物，泊洛沙姆188，182，407，908，聚氧乙烯脂肪酸酯类，聚氧乙烯脂肪醇醚类，胆酸或去氧胆酸及其钠盐，甘胆酸钠，牛磺胆酸钠，去氧牛磺胆酸钠等中的一种或一种以上组合物；辅助乳化剂包括聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯(TPGS)，聚乙二醇660-12-羟基硬脂酸酯(HS-15)，聚氧乙烯-8-辛酸/癸酸甘油酯(Labrasol)，聚乙二醇-二硬脂酰乙醇胺(PEG-DSPE)，乙二醇单乙基醚(Transcutol)，二已基琥珀酰磺酸钠(Aerosol OT)，正丁醇，乙二醇，丙二醇和聚甘油酯等中的一种或一种以上组合物；抗氧剂为亚硫酸盐类，抗坏血酸，没食子酸丙酯，抗坏血酸棕榈酸酯，叔丁基对羟基茴香醚(BHA)，二叔丁基对甲酚(BHT)，维生素E等中的一种或一种以上组合物；pH调节剂为氢氧化钠，柠檬酸钠，柠檬酸，磷酸，醋酸或盐酸中的一种或一种以上组合物；等渗调节剂为甘油，山梨醇，甘露醇或葡萄糖中的一种或一种以上组合物；冻干保护剂包括蔗糖，乳糖，麦芽糖，葡萄糖，海藻糖，棉籽糖，果糖，己糖，山梨醇，木糖醇，甘露醇，氨基酸等中的一种或一种以上组合物。

3.根据权利要求1所述的注射用紫杉醇冻干微乳剂的制备方法，其特征包括如下步骤：(1)按处方量称取紫杉醇，乳化剂，辅助乳化剂和注射用油，在40～80℃加热熔融得油相；(2)称取处方量的注射用水，加入等渗调节剂和抗氧剂，在40～80℃加热溶解得水相；(3)以上两相在40～80℃下搅拌即得到紫杉醇微乳剂或经高压匀质形成纳米乳，调节pH值3.0～8.0；(4)在制备好的紫杉醇微乳剂中加入适量保护剂，通过真空冷冻干燥方法得到固体制剂。

4.根据权利要求1所述的注射用紫杉醇冻干微乳剂，其特征在于所述的粒径在100nm以下，且分布均匀。

5.根据权利要求1所述的注射用紫杉醇冻干微乳剂，其特征在于破乳后测定相分布，该微乳剂共分三层，包括油层，乳化剂层和水层，其中油层中的药物含量为85％～99％，乳化剂层的药物含量为1％～15％，水层中的药物含量低于0.01％。

6.根据权利要求1所述的注射用紫杉醇冻干微乳剂，其特征在于所述的紫杉醇的包封率在85％以上，满足临床使用的药物包封率要求。

7.根据权利要求1所述的注射用紫杉醇冻干微乳剂，其特征在于使用前可用生理盐水，5％葡萄糖溶液或林格溶液等生理相容性溶液进行稀释，在100秒钟内即可溶解，并且粒径和包封率没有明显变化。

8.根据权利要求1所述的注射用紫杉醇冻干微乳剂，其特征在于可被生理相容性溶液在相图微乳区大体积稀释，微乳的形态和类型保持不变，粒径在100nm以下。

9.根据权利要求1所述的注射用紫杉醇冻干微乳剂，其特征在于与溶液配伍后，在48小时内稳定，未见药物晶体析出。

10.根据权利要求1所述的注射用紫杉醇冻干微乳剂，其特征在于具有缓慢释药特性，可增大单次给药剂量，减少临床给药次数。临床应用无致敏及变态反应，无需进行预防过敏治疗，缩短治疗准备时间。

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