CN101377482A - 蜂地麻滴眼液质量控制方法 - Google Patents
蜂地麻滴眼液质量控制方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN101377482A CN101377482A CNA2007101208399A CN200710120839A CN101377482A CN 101377482 A CN101377482 A CN 101377482A CN A2007101208399 A CNA2007101208399 A CN A2007101208399A CN 200710120839 A CN200710120839 A CN 200710120839A CN 101377482 A CN101377482 A CN 101377482A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- solution
- mobile phase
- hydrochloride
- eye drops
- fengdima
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 239000003889 eye drop Substances 0.000 title claims abstract description 19
- 229940012356 eye drops Drugs 0.000 title claims abstract description 18
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 title claims abstract description 15
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 26
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims abstract description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 45
- PPWHTZKZQNXVAE-UHFFFAOYSA-N Tetracaine hydrochloride Chemical compound Cl.CCCCNC1=CC=C(C(=O)OCCN(C)C)C=C1 PPWHTZKZQNXVAE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 30
- 229960002494 tetracaine hydrochloride Drugs 0.000 claims description 30
- BALXUFOVQVENIU-GNAZCLTHSA-N Ephedrine hydrochloride Chemical compound Cl.CN[C@@H](C)[C@H](O)C1=CC=CC=C1 BALXUFOVQVENIU-GNAZCLTHSA-N 0.000 claims description 28
- 229960002534 ephedrine hydrochloride Drugs 0.000 claims description 28
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 27
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 24
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 23
- 239000013558 reference substance Substances 0.000 claims description 22
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 21
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 21
- 239000012085 test solution Substances 0.000 claims description 20
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N acetonitrile Substances CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 8
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 7
- 229910000403 monosodium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 7
- 235000019799 monosodium phosphate Nutrition 0.000 claims description 7
- AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M sodium dihydrogen phosphate Chemical compound [Na+].OP(O)([O-])=O AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 7
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 4
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 4
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N ninhydrin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 claims description 4
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 239000007921 spray Substances 0.000 claims description 4
- ONBIUAZBGHXJDM-UHFFFAOYSA-J bismuth;potassium;tetraiodide Chemical compound [K+].[I-].[I-].[I-].[I-].[Bi+3] ONBIUAZBGHXJDM-UHFFFAOYSA-J 0.000 claims description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 3
- 239000000945 filler Substances 0.000 claims description 3
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 claims description 3
- YTJSFYQNRXLOIC-UHFFFAOYSA-N octadecylsilane Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC[SiH3] YTJSFYQNRXLOIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 claims description 3
- KQROHCSYOGBQGJ-UHFFFAOYSA-N 5-Hydroxytryptophol Chemical compound C1=C(O)C=C2C(CCO)=CNC2=C1 KQROHCSYOGBQGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 238000010812 external standard method Methods 0.000 claims description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims 2
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 claims 2
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 claims 2
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 claims 1
- 238000013016 damping Methods 0.000 claims 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 claims 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 claims 1
- 235000012907 honey Nutrition 0.000 abstract description 8
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 5
- 238000004945 emulsification Methods 0.000 abstract description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 abstract description 2
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 abstract description 2
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 abstract 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 abstract 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 13
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 13
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 13
- 239000000047 product Substances 0.000 description 9
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 4
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 4
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 4
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 4
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 4
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 4
- 235000015001 Cucumis melo var inodorus Nutrition 0.000 description 3
- 240000002495 Cucumis melo var. inodorus Species 0.000 description 3
- DZGCGKFAPXFTNM-UHFFFAOYSA-N ethanol;hydron;chloride Chemical compound Cl.CCO DZGCGKFAPXFTNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 3
- 238000012417 linear regression Methods 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 3
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 3
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 3
- KWGRBVOPPLSCSI-WPRPVWTQSA-N (-)-ephedrine Chemical compound CN[C@@H](C)[C@H](O)C1=CC=CC=C1 KWGRBVOPPLSCSI-WPRPVWTQSA-N 0.000 description 2
- QUSNBJAOOMFDIB-UHFFFAOYSA-N Ethylamine Chemical compound CCN QUSNBJAOOMFDIB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 2
- PVDVPOZEJCXUAM-UHFFFAOYSA-N acetonitrile;n,n-diethylethanamine Chemical compound CC#N.CCN(CC)CC PVDVPOZEJCXUAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229930013930 alkaloid Natural products 0.000 description 2
- 150000003797 alkaloid derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 238000013095 identification testing Methods 0.000 description 2
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 2
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 2
- 238000001139 pH measurement Methods 0.000 description 2
- 238000013112 stability test Methods 0.000 description 2
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 2
- 230000008733 trauma Effects 0.000 description 2
- 206010067484 Adverse reaction Diseases 0.000 description 1
- 241000254173 Coleoptera Species 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 102000016943 Muramidase Human genes 0.000 description 1
- 108010014251 Muramidase Proteins 0.000 description 1
- 108010062010 N-Acetylmuramoyl-L-alanine Amidase Proteins 0.000 description 1
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 1
- 238000013494 PH determination Methods 0.000 description 1
- 208000025865 Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 230000006838 adverse reaction Effects 0.000 description 1
- 239000008476 aike Substances 0.000 description 1
- 230000003113 alkalizing effect Effects 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 230000003444 anaesthetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 239000003659 bee venom Substances 0.000 description 1
- 235000019658 bitter taste Nutrition 0.000 description 1
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- KWGRBVOPPLSCSI-UHFFFAOYSA-N d-ephedrine Natural products CNC(C)C(O)C1=CC=CC=C1 KWGRBVOPPLSCSI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000010891 electric arc Methods 0.000 description 1
- 206010014801 endophthalmitis Diseases 0.000 description 1
- 229960002179 ephedrine Drugs 0.000 description 1
- 210000003560 epithelium corneal Anatomy 0.000 description 1
- 239000012259 ether extract Substances 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 1
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 1
- 239000004325 lysozyme Substances 0.000 description 1
- 229960000274 lysozyme Drugs 0.000 description 1
- 235000010335 lysozyme Nutrition 0.000 description 1
- 230000008558 metabolic pathway by substance Effects 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000000149 penetrating effect Effects 0.000 description 1
- 210000000578 peripheral nerve Anatomy 0.000 description 1
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 235000019605 sweet taste sensations Nutrition 0.000 description 1
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 1
- 229940126585 therapeutic drug Drugs 0.000 description 1
- SWGJCIMEBVHMTA-UHFFFAOYSA-K trisodium;6-oxido-4-sulfo-5-[(4-sulfonatonaphthalen-1-yl)diazenyl]naphthalene-2-sulfonate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].C1=CC=C2C(N=NC3=C4C(=CC(=CC4=CC=C3O)S([O-])(=O)=O)S([O-])(=O)=O)=CC=C(S([O-])(=O)=O)C2=C1 SWGJCIMEBVHMTA-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 231100000397 ulcer Toxicity 0.000 description 1
- 230000024883 vasodilation Effects 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Medicinal Preparation (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Abstract
本发明公开了一种蜂地麻滴眼液质量控制方法，属于制药领域。蜂地麻滴眼液质量控制方法：包括特征鉴别、pH值检查和定量测定。本发明的优点在于：克服了蜂蜜造成的乳化现象，不影响所鉴定物质的显色；能够准确定量，并能同时测定两个主要成分的含量；测定中运用梯度洗脱法，所测物质可分离完全，并缩短测定时间、节省流动相；操作简便，重现性好。
Description
技术领域
本发明涉及蜂地麻滴眼液质量控制方法，属于制药领域。
背景技术
电弧性眼外伤，如电光性眼炎、角膜上皮损伤是眼科常见病、多发病，平时常见，战时多见，严重影响人们的生活质量和部队战斗力，治疗不及时可成为感染诱发因素。
蜂地麻滴眼液为中国人民解放军总医院特色制剂，为战伤和非战时电弧性眼外伤的救治提供方便、安全、经济、有特效的治疗药物。该制剂以蜂蜜、盐酸丁卡因和盐酸麻黄碱为主要成分，为淡棕黄色粘稠澄明液体，气芳香，味甜，微苦，有麻舌感。该制剂制备方法简单，价格低廉，不良反应小，疗效显著。处方和制备工艺参见《复方蜂蜜滴眼液的制备和质量控制》(徐红等，中国人民解放军总医院，中国医院药学杂志2006年第26卷第4期)。
蜂蜜中微量蜜蜂毒素作用于末梢神经，刺激血液循环和物质代谢，保护角膜上皮，促使溃疡愈合，能迅速缓解疼痛，蜂蜜主要成分含果糖、葡萄糖，并含有蛋白质、酶、有机酸、多种维生素和矿物质，具有渗透性、保水性、吸湿性，且因其高渗性、酸性和过氧化氢、溶菌酶等因子的作用而具有显著的抗菌作用，可防止药品的微生物生长或污染；丁卡因属麻醉剂，具有起效快、无局部刺激和血管扩张作用，对粘膜穿透力强，可止痛；麻黄碱收缩局部毛细血管，减轻充血、水肿，相互配伍起协同作用。
现有技术只能实现对该制剂进行定性质量控制，尚无定量测定方法。
发明内容
本发明要解决的技术问题是：提供一种定量和定性测定蜂地麻滴眼液中有效成分的质量控制方法。
为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：
蜂地麻滴眼液质量控制方法，采用高效液相色谱法测定含量：
用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.05mol/L磷酸二氢钠溶液用磷酸调节pH值至4.0为流动相A，0.05mol/L磷酸二氢钠溶液用磷酸调节pH值至4.0为流动相B，进行梯度洗脱，柱温40℃，流速为1.0ml/min，检测波长为218nm；其中流动相A含体积比为90：10的三乙胺-乙腈混合液，三乙胺的浓度为0.2％(ml/ml)；流动相B含体积比为70：30的三乙胺-乙腈混合液，三乙胺的浓度为0.2％(ml/ml)；
梯度程序为：流动相A在0-30分钟内由95％降至70％，流动相B在0-30分钟内由5％升至30％；流动相A和B的体积比在此后8分钟保持不变；流动相A在第38-39分钟内由70％升至95％，流动相B在第38-39分钟内由30％降至5％；流动相A和B的体积比在此后保持不变；(参见表1)
取供试品适量，加水制成每1ml含盐酸丁卡因0.25mg的溶液，用自动进样器量取10μl注入色谱仪，记录色谱图；另取对照品盐酸丁卡因和盐酸麻黄碱适量，分别精密称定，各加水溶解并制成每1ml含0.25mg的溶液，同法测定；按外标法以峰面积计算；本品含盐酸麻黄碱和盐酸丁卡因应为标示量的90％～110％。
所述蜂地麻滴眼液质量控制方法，还包括特征鉴别和pH值检查：
(一)特征鉴别：
(1)盐酸丁卡因鉴别：取8ml蜂地麻滴眼液供试品，加水42ml，摇匀；加碳酸钠溶液(无水碳酸钠10.6g，加水溶解并稀释成100ml)5ml，摇匀，用乙醚振摇提取2次，每次50ml，合并乙醚提取液，用水20ml洗涤1次，分取乙醚层，加盐酸乙醇溶液1-20ml，摇匀，水浴蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取盐酸丁卡因对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；采用薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-浓氨试液(30：5：0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以改良碘化铋钾试液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
(2)盐酸麻黄碱鉴别：取盐酸麻黄碱对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；采用照薄层色谱法，吸取对照品溶液及步骤(1)中的供试品溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-浓氨试液(30：5：0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，于80℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
(二)pH值检查：应为3.0～4.5。
本发明方法简单，克服了现有技术的不足。
由于本制剂含大量蜂蜜，样品直接碱化用有机溶剂提取时乳化严重，不易分层，故本法采用将样品稀释后，再碱化，用乙醚将生物碱提取，水洗除去水溶性杂质，加盐酸乙醇使生物碱成盐酸盐，再用薄层分离鉴别，可检出盐酸丁卡因橙红色特征斑点，但盐酸麻黄碱斑点显色不明显。通过阴性对照试验及三批样品的实验观察，表明本法成立，因盐酸丁卡因为方中主要有效成分，故将其鉴别试验收入质量控制方法。
由于盐酸麻黄碱在鉴别盐酸丁卡因的系统中斑点显色不明显，故采用茚三酮试液为显色剂，可检出盐酸麻黄碱紫红色特征斑点。但此条件下，盐酸丁卡因斑点显色不明显，因此采取分别鉴别的方法。通过阴性对照试验及三批样品的实验观察，表明本法成立，因盐酸麻黄碱为方中主要有效成分，故将其鉴别试验收入质量控制方法。
pH值测定为常规方法。经对本制剂多批次测定，pH值均在3.0～4.5范围内，故确定本品pH值为3.0～4.5。
发明人曾试对方中主要成分盐酸丁卡因和盐酸麻黄碱进行含量测定，样品稀释、碱化后，用有机溶剂提取，用高效液相色谱法进行定量，但回收率低于90％；后将样品稀释后用反相高效液相梯度洗脱法进行定量，试验表明方法简便可行，重现性良好。因盐酸丁卡因和盐酸麻黄碱为方中主要有效成分，故将其含量测定列入质量控制方法。
本发明的优点在于：克服了蜂蜜造成的乳化现象，不影响所鉴定物质的显色；能够准确定量，并能同时测定两个主要成分的含量；测定中运用梯度洗脱法，所测物质可分离完全，并缩短测定时间、节省流动相；操作简便，重现性好。
下面结合附图和较佳实施方式对本发明做进一步说明，以使公众对发明内容有整体和充分的了解，而并非对本发明保护范围的限定。前述部分已经充分公开了本发明可以实施的保护范围，因此凡依照本发明公开内容进行的任何本领域公知的等同替换，均属于对本发明的侵犯。
附图说明
图1-1为系统适用性液相色谱图：盐酸麻黄碱的保留值约为5.4min左右。
图1-2为系统适用性液相色谱图：盐酸丁卡因的保留值约为32.4min左右。
图1-3为空白辅料的液相色谱图。
图2-1为盐酸麻黄碱线性回归图。
图2-2为盐酸丁卡因线性回归图。
具体实施方式
实施例1：蜂地麻滴眼液质量控制方法
一.材料和仪器：
Agilent 1090A高效液相色谱仪(美国安捷伦公司)
乙腈(色谱纯，北京化工厂，批号20040926)
三乙胺(分析纯)
磷酸二氢钠(分析纯)
蜂地麻滴眼液(自制，批号：20060828、20061128、20061204)
盐酸麻黄碱(赤峰艾克制药科技有限公司，批号：040404)
盐酸丁卡因(北京市燕京制药厂，批号：060401)
二.方法
(一)特征鉴别：
1.盐酸丁卡因鉴别：取8ml蜂地麻滴眼液供试品，加水42ml，摇匀；加碳酸钠溶液(无水碳酸钠10.6g，加水溶解并稀释成100ml)5ml，摇匀，用乙醚振摇提取2次，每次50ml，合并乙醚提取液，用水20ml洗涤1次，分取乙醚层，加盐酸乙醇溶液1-20ml，摇匀，水浴蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取盐酸丁卡因对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；采用薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-浓氨试液(30：5：0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以改良碘化铋钾试液。
2.盐酸麻黄碱鉴别：取盐酸麻黄碱对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；采用照薄层色谱法，吸取对照品溶液及步骤(1)中的供试品溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-浓氨试液(30：5：0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，于80℃加热至斑点显色清晰。
(二)pH值测定：
取样品5瓶，混匀，以磷酸盐标准缓冲液作为pH值测定缓冲液，用精密pH计进行测定。
(三)含量测定
1.样品供试液的制备：取滴眼液适量，加水溶解并制成每1ml约含盐酸麻黄碱0.25mg的溶液，摇匀，即得。
2.对照品溶液的制备：取对照品盐酸丁卡因和盐酸麻黄碱各25mg，精密称定，分别置10ml容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取各溶液1ml置10ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得对照品供试液，浓度为0.25mg/ml。
3.空白辅料供试液的制备：量取蜂蜜适量，加水制成与样品同浓度的溶液作为空白辅料供试液。
4.测定：
(1)系统适用性：
照高效液相色谱法(中国药典2005版二部附录V D)，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相A泵为0.05mol/L磷酸二氢钠溶液(含0.2％三乙胺)-乙腈(90：10，磷酸调pH至4.0)，B泵为0.05mol/L磷酸二氢钠溶液-乙腈(70：30，磷酸调pH至4.0)，检测波长218nm，柱温40℃，流速为1.0ml/min，按下述梯度洗脱：
表1：梯度程序
(2)溶液稳定性试验：取滴眼液样品按上述方法配制样品供试液，在不同的时间进样，记录峰面积，计算。
(3)精密度试验
取批号20061128的样品5瓶，按上述方法配制样品供试液，连续进样6次，以峰面积计算其含量。
(4)线性与范围：分别取盐酸丁卡因、盐酸麻黄碱对照品适量，精密称定，按处方比例加入辅料，加水配成每1ml中含盐酸丁卡因0.25mg，盐酸麻黄碱0.25mg的溶液，作为贮备液。分别精密量取贮备液0.2、0.5、1、2、3ml置10ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，依次进样，记录峰面积。以盐酸丁卡因和盐酸麻黄碱的浓度C和吸收值A做线性回归。
(5)回收率试验：精密称取9份处方量蜂蜜，分别按对照品溶液浓度的80％、100％、120％的量加入对照品，置10ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得样品供试液。照含量测定方法测定其加入量，每个浓度平行3份。
(6)含量测定：取三批样品制成供试品溶液，照含量测定方法测定其含量。
三.结果
(一)特征鉴别：
1.盐酸丁卡因鉴别：供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
2.盐酸麻黄碱鉴别：供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
(二)pH值测定：本制剂三批次样品的的pH值均在3.0～4.5范围内。
(三)含量测定：
1.系统适用性：在上述的液相色谱条件下，盐酸麻黄碱的保留值约为5.4min左右，见附图1-1；盐酸丁卡因的保留值约为32.4min左右，见附图1-2，两者的分离度符合要求。空白辅料的液相色谱图见附图1-3。从图中可知，空白辅料对含量测定没有干扰。在此液相色谱条件下色谱柱的理论塔板数按盐酸丁卡因峰计算为142451(本方法要求：理论塔板数按盐酸丁卡因峰计算应不低于2000)。
2.溶液稳定性试验：见表2，结果表明本品含量测定的供试液在20小时内基本稳定。
表2：溶液稳定性结果
3.精密度试验
盐酸麻黄碱为标示量的100.85％，102.40％，99.93％，101.63％，99.21％，100.15％，平均值为100.70％，RSD＝1.16％(n＝6)，盐酸丁卡因为标示量的94.85％，95.31％，95.40％，97.46％，94.96％，94.29％，平均值为95.37％，RSD＝1.15％(n＝6)，表明本方法重复性较好。
4.线性与范围：结果见图2-1和图2-2。从曲线可知，本法在测定50.26～753.9μg/ml浓度的盐酸丁卡因、51.38～770.7μg/ml浓度的盐酸麻黄碱时有良好的线性关系。
5.回收率试验：结果如表3所示。
表3：回收率试验结果
6.含量测定结果：
测定结果如表4所示。3批样品盐酸丁卡因的含量分别为标示量的96.09％，95.37％，95.37％；盐酸麻黄碱的含量分别为标示量的99.48％，100.7％，99.01％。
表4：三批样品的含量测定结果
Claims (3)
1.蜂地麻滴眼液质量控制方法，其特征在于，采用高效液相色谱法测定含量：
用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.05mol/L磷酸二氢钠溶液用磷酸调节pH值至4.0为流动相A，0.05mol/L磷酸二氢钠溶液用磷酸调节pH值至4.0为流动相B，进行梯度洗脱，柱温40℃，流速为1.0ml/min，检测波长为218nm；其中流动相A含体积比为90：10的三乙胺-乙腈混合液，三乙胺的浓度为0.2％(ml/ml)；流动相B含体积比为70：30的三乙胺-乙腈混合液，三乙胺的浓度为0.2％(ml/ml)；
梯度程序为：流动相A在0-30分钟内由95％降至70％，流动相B在0-30分钟内由5％升至30％；流动相A和B的体积比在此后8分钟保持不变；流动相A在第38-39分钟内由70％升至95％，流动相B在第38-39分钟内由30％降至5％；流动相A和B的体积比在此后保持不变；
取供试品适量，加水制成每1ml含盐酸丁卡因0.25mg的溶液，用自动进样器量取10μl注入色谱仪，记录色谱图；另取对照品盐酸丁卡因和盐酸麻黄碱适量，分别精密称定，各加水溶解并制成每1ml含0.25mg的溶液，同法测定；按外标法以峰面积计算。
2.根据权利要求1所述的蜂地麻滴眼液质量控制方法，其特征在于，还包括特征鉴别和pH值检查：
(一)特征鉴别：
(1)盐酸丁卡因鉴别：取8ml蜂地麻滴眼液供试品，加水42ml，摇匀；加碳酸钠溶液5ml，摇匀，用乙醚振摇提取2次，每次50ml，合并乙醚提取液，用水20ml洗涤1次，分取乙醚层，加盐酸乙醇溶液1-20ml，摇匀，水浴蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取盐酸丁卡因对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；采用薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-浓氨试液为展开剂，三者体积比为30：5：0.5，展开，取出，晾干，喷以改良碘化铋钾试液；
(2)盐酸麻黄碱鉴别：取盐酸麻黄碱对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；采用照薄层色谱法，吸取对照品溶液及步骤(1)中的供试品溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-浓氨试液为展开剂，三者体积比为30：5：0.5，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，于80℃加热至斑点显色清晰；
(二)pH值检查：测定pH值。
3.根据权利要求1所述的蜂地麻滴眼液质量控制方法，其特征在于：所述pH值检查的方法为：取样品，混匀，以磷酸盐标准缓冲液作为pH值测定缓冲液，用精密pH计进行测定。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2007101208399A CN101377482B (zh) | 2007-08-27 | 2007-08-27 | 蜂地麻滴眼液质量控制方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2007101208399A CN101377482B (zh) | 2007-08-27 | 2007-08-27 | 蜂地麻滴眼液质量控制方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN101377482A true CN101377482A (zh) | 2009-03-04 |
| CN101377482B CN101377482B (zh) | 2012-04-25 |
Family
ID=40421127
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN2007101208399A Expired - Fee Related CN101377482B (zh) | 2007-08-27 | 2007-08-27 | 蜂地麻滴眼液质量控制方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN101377482B (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106841405A (zh) * | 2015-12-03 | 2017-06-13 | 康普药业股份有限公司 | 一种盐酸麻黄碱片有关物质检测方法 |
| CN110470779A (zh) * | 2019-09-27 | 2019-11-19 | 江西珍视明药业有限公司 | 四味珍层冰硼滴眼液指纹图谱的建立方法及其指纹图谱 |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB2404022B (en) * | 2004-06-14 | 2005-08-10 | Cozart Bioscience Ltd | Competitive assays for the detection of methamphetamine group drugs |
| CN100570358C (zh) * | 2006-04-06 | 2009-12-16 | 贵州同济堂制药有限公司 | 治疗视疲劳的药物制剂的检测方法 |
-
2007
- 2007-08-27 CN CN2007101208399A patent/CN101377482B/zh not_active Expired - Fee Related
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106841405A (zh) * | 2015-12-03 | 2017-06-13 | 康普药业股份有限公司 | 一种盐酸麻黄碱片有关物质检测方法 |
| CN106841405B (zh) * | 2015-12-03 | 2021-06-01 | 康普药业股份有限公司 | 一种盐酸麻黄碱片有关物质检测方法 |
| CN110470779A (zh) * | 2019-09-27 | 2019-11-19 | 江西珍视明药业有限公司 | 四味珍层冰硼滴眼液指纹图谱的建立方法及其指纹图谱 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN101377482B (zh) | 2012-04-25 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN100362346C (zh) | 检测夏桑菊制剂中氨基酸类成分的方法 | |
| CN115144507B (zh) | 桑仁清肺口服液中活性成分的同时测定方法 | |
| CN101377482A (zh) | 蜂地麻滴眼液质量控制方法 | |
| CN102707006B (zh) | 穿破石配方颗粒的质量检测方法 | |
| CN107703242A (zh) | 一种五指毛桃中补骨脂素和芹菜素的含量检测方法 | |
| CN112730674A (zh) | 一种罗汉茶的质量检测方法 | |
| CN103630648B (zh) | 一种抗感染药物的检测方法 | |
| CN104597197B (zh) | 一种消积通便药物制剂的检测方法 | |
| CN102879517A (zh) | 一种复方氨酚烷胺颗粒的质量检测方法 | |
| CN103823016B (zh) | 一种丹天颈舒口服制剂的检测方法 | |
| Yu et al. | Study on the plasma protein binding rate and compatibility regularity of the constituents migrating to blood of Simiao Yong’an decoction | |
| CN101766708A (zh) | 一种治疗风湿的中药制剂的质量控制方法 | |
| CN104360033A (zh) | 那如三味丸质量标准及其检验方法 | |
| CN111323508B (zh) | 艾纳香油中2,4-二羟基-6-甲氧基苯乙酮的含量测定方法 | |
| CN107064325A (zh) | 一种芪葛颗粒的质量控制方法 | |
| CN103983735A (zh) | 一种制备宫炎平胶囊的检测方法 | |
| CN111707768B (zh) | 检测白芍总苷原料药中22种有机氯农药残留的方法 | |
| CN103424487B (zh) | 一种盐酸氨基葡萄糖硫酸软骨素片的成分测定方法 | |
| CN109507356B (zh) | 首荟通便胶囊的质量检测方法 | |
| Olga et al. | The Development of Identification and Quantitative Definition Methodic of Active substances of the Ointment “Allergolic” | |
| CN110208397A (zh) | 一种同时测定土霉素氟尼辛注射液中两种主药含量的高效液相色谱法 | |
| CN118033020B (zh) | 一种清瘟解毒口服液的指纹图谱构建方法及应用 | |
| Ahmad et al. | RP-UHPLC and HPTLC method development and validation for analysis of andrographolide from herbal hepatoprotective formulation | |
| CN103901155B (zh) | 一种治疗胃病的中药组合物的检测方法 | |
| Rasal et al. | Validated HPTLC Method for Simultaneous Estimation of Ivermectin and Albendazole in Formulation. |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20120425 Termination date: 20210827 |
|
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |