CN111323508B - 艾纳香油中2,4-二羟基-6-甲氧基苯乙酮的含量测定方法 - Google Patents
艾纳香油中2,4-二羟基-6-甲氧基苯乙酮的含量测定方法 Download PDFInfo
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Abstract
本申请公开了检测技术领域中的一种2,4‑二羟基‑6‑甲氧基苯乙酮的含量测定方法，主要是在检测在艾纳香油中2,4‑二羟基‑6‑甲氧基苯乙酮的含量测定方法，包括：配制标准品溶液、供试品溶液，高效液相色谱检测，计算供试品中2,4‑二羟基‑6‑甲氧基苯乙酮的含量几个步骤，该方法能特异性检测艾纳香油中2,4‑二羟基‑6‑甲氧基苯乙酮的含量，色谱峰分离良好、无干扰、线性好、精确度高、重复性、回收率、稳定性高。
Description
技术领域
本发明属于检测技术领域，具体涉及艾纳香油中2,4-二羟基-6-甲氧基苯乙酮的含量测定方法。
背景技术
艾纳香为菊科植物艾纳香Blumea balsamifera的干燥地上部分，性“辛、苦、温”，具“温中活血、调经、祛风除湿”功效，用于治疗“外感风寒、泻痢、腹痛、肠鸣、肿胀、月经不调、筋骨疼痛”等症。该药材主要含挥发油（单萜）、黄酮、倍半萜类成分，艾纳香在现有成方制剂中的应用主要体现在两个方面，一是提取冰片(艾片)，然后以后者入药；其二以艾纳香药材，特别是以艾纳香挥发性成分入药。显然，艾纳香挥发性成分以及其中主要化学物质冰片应当是艾纳香“温中活血”的物质基础之一。
艾纳香油是以艾纳香的叶的粗升华物经压榨分离而得到的油，含有左旋龙脑、樟脑、油脂等成分，具有清热解毒、消肿止痛、止痒等功效，用于咽喉肿痛、口疮、烧伤、烫伤、皮肤损伤及蚊虫叮咬等症。经对艾纳香油的活性成分深入研究发现，艾纳香油中含有2,4-二羟基-6-甲氧基苯乙酮，该成分具有显著的抗炎镇痛作用，是艾纳香油的主要活性成分之一。但目前还没有对艾纳香油中2,4-二羟基-6-甲氧基苯乙酮的含量测定的报道。
发明内容
本发明针对现有技术的不足，提供一种利用高效液相色谱测定艾纳香油中2,4-二羟基-6-甲氧基苯乙酮含量的方法。
为实现上述目的，本发明所述方法包括以下步骤：
1）将2,4-二羟基-6-甲氧基苯乙酮标准品溶于甲醇溶液制成标准品溶液，以所述标准品溶液在下述色谱条件下进行系统适用性试验，校定检测系统；
色谱条件：色谱柱的固定相为碳十八烷基硅烷键合硅胶，所述碳十八烷基硅烷键合硅胶的粒径≤5µm；以体积比为20%~50%的乙腈-酸水混合溶液为流动相进行梯度洗脱，检测波长为280nm；
所述梯度洗脱为：以乙腈为流动相A，以体积百分比0.1%的冰醋酸水溶液为流动相B；
梯度洗脱包括：时间梯度为0min→20min→35min；对应的梯度洗脱液，流动相A的体积百分比梯度为20%→50%→50%，流动相B的体积百分比梯度为80%→50%→50%。
2）将待测的含有2,4-二羟基-6-甲氧基苯乙酮的待测物溶于甲醇溶液制成供试品溶液；
3）按照步骤（1）的色谱条件，取等体积的标准品溶液和供试品溶液注入高效液相色谱仪，测定所述标准品溶液和供试品溶液的峰面积并进行计算，得到所述供试品中2,4-二羟基-6-甲氧基苯乙酮的含量。
本发明的方法包括：配制标准品溶液、供试品溶液，高效液相色谱检测，计算供试品中2,4-二羟基-6-甲氧基苯乙酮的含量几个步骤，该方法能特异性检测艾纳香油中2,4-二羟基-6-甲氧基苯乙酮的含量，色谱峰分离良好、无干扰、线性好、精确度高、重复性、回收率、稳定性高。
本发明的测定方法不但可用于对艾纳香油中2,4-二羟基-6-甲氧基苯乙酮的含量测定，也可用于艾纳香药材及同属植物、提取物、以及其它含2,4-二羟基-6-甲氧基苯乙酮制剂的检测。
进一步，所述甲醇溶液为体积比为80%以上的甲醇水溶液或纯甲醇。
进一步，所述碳十八烷基硅烷键合硅胶的粒径为5µm、4µm或3.5µm。优选的，所述碳十八烷基硅烷键合硅胶的粒径为5µm。
进一步，所述色谱柱的理论塔板数按2,4-二羟基-6-甲氧基苯乙酮峰计算不低于3000。
进一步，梯度洗脱使用的流动相是以乙腈和冰醋酸溶液混合而成，冰醋酸溶液含0.1%（V /V)的冰醋酸。
进一步的，本发明确定了待测物为艾纳香药材及同属植物、提取物、以及其它含2,4-二羟基-6-甲氧基苯乙酮制剂的物质。
本发明的待测物优选为艾纳香油。
本发明还提供了艾纳香油中2,4-二羟基-6-甲氧基苯乙酮的含量测定方法，具体包括以下步骤：1）取2,4-二羟基-6-甲氧基苯乙酮标准品，以甲醇溶液配制成1ml含有0.2mg2,4-二羟基-6-甲氧基苯乙酮的标准溶液；在下述色谱条件下进行系统适用性试验，校定检测系统：
色谱条件：固定相为碳十八烷基硅烷键合硅胶，所述色谱柱的规格为250×4.6mm，碳十八烷基硅烷键合硅胶的粒径为5µm；以乙腈为流动相A，以体积比为0.1%的冰醋酸水溶液为流动相B；梯度洗脱程序为：时间梯度0min→20min→35min；对应的梯度洗脱液，流动相A的体积百分比梯度为20%→50%→50%，流动相B的体积百分比梯度为80%→50%→50%；检测波长为280nm，理论塔板数按2,4-二羟基-6-甲氧基苯乙酮峰计算不低于3000；
2）取待测的艾纳香油，以甲醇溶液配制成供试品溶液；
3）按照步骤1）的色谱条件，分别将等体积的标准品溶液和供试品溶液，注入高效液相色谱仪，测定标准品溶液及供试品溶液的峰面积，按外标法计算艾纳香油中的2,4-二羟基-6-甲氧基苯乙酮含量。
其中，2,4-二羟基-6-甲氧基苯乙酮的结构式如下：
附图说明
图1为2,4-二羟基-6-甲氧基苯乙酮标准品和艾纳香油样品的HPLC色谱图（A: 2,4-二羟基-6-甲氧基苯乙酮标准品、B: 艾纳香油样品）。
具体实施方式
下面通过具体实施方式进一步详细说明：
实施例1
艾纳香油（贵州苗药生物技术有限公司，批号：20181120）中2,4-二羟基-6-甲氧基苯乙酮的含量测定
（1）色谱条件及系统适应性试验：
以碳十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（250×4.6mm，5μm）；以乙腈-冰醋酸溶液为流动相，如表1所示设置梯度洗脱。
表1：流动性组成
| 时间（min） | 乙腈(% V/V) | 0.1%冰醋酸溶液（% V/V） |
| 0-20 | 20-50 | 80-50 |
| 20-35 | 50 | 50 |
流动相是以乙腈和冰醋酸溶液混合而成，冰醋酸溶液含0.1%（V /V)的冰醋酸；检测波长为280nm，理论塔板数按2,4-二羟基-6-甲氧基苯乙酮峰计算不低于3000。
1）供试品溶液的制备：精密量取艾纳香油1ml，置于50ml量瓶中，加入甲醇溶液至刻度溶解、摇匀、滤过，取续滤液作为供试品溶液。
2）标准品溶液的制备：精密称取2,4-二羟基-6-甲氧基苯乙酮标准品适量，加甲醇溶液溶解，制成每1ml含0.2mg的标准品溶液。
3）含量测定：分别精密吸取标准品溶液和供试品溶液10µl，注入高效液相色谱仪，测定标准品溶液及供试品溶液的峰面积，按外标法计算。检测结果显示，艾纳香油样品中2,4-二羟基-6-甲氧基苯乙酮的含量为：15.63mg/ml。
实施例2
艾纳香药材（贵州苗药生物技术有限公司，批号：20181028）中2,4-二羟基-6-甲氧基苯乙酮的含量测定
1）供试品溶液的制备：取艾纳香药材，粉碎，过三号筛，精密称取艾纳香药材1.0g，置50ml三角瓶中，精密加入甲醇溶液20ml，超声30min，放冷，加甲醇溶液补足重量，滤过，取续滤液作为供试品溶液。
2）标准品溶液的制备：精密称取2,4-二羟基-6-甲氧基苯乙酮标准品适量，加甲醇溶液溶解，制成每1ml含0.2mg的标准品溶液。
3）含量测定：分别精密吸取标准品溶液和供试品溶液10µl，注入高效液相色谱仪，测定标准品溶液及供试品溶液的峰面积，按外标法计算。检测结果显示，艾纳香药材中2,4-二羟基-6-甲氧基苯乙酮的含量为：0.012%。
验证
艾纳香油（贵州苗药生物技术有限公司，批号：20181120）中2,4-二羟基-6-甲氧基苯乙酮的测定方法学验证
对实施例的检测方法进行验证。
①专属性
如图1所示，在优选的色谱条件下，艾纳香油中2,4-二羟基-6-甲氧基苯乙酮的色谱峰分离良好，无干扰，表明该方法具有较好的专属性。
②线性
精密配成不同浓度的2,4-二羟基-6-甲氧基苯乙酮标准品溶液。准确吸取上述标准品溶液10 µL进行测定，以每个对照品的进样浓度（X）为横坐标，峰面积积分值（Y）为纵坐标，绘制标准曲线，得到2,4-二羟基-6-甲氧基苯乙酮的线性回归方程及线性范围，Y =9.0046 X +1104.5，R2=0.999。其中Y为峰面积，X为浓度(mg/ml)。如表2所示，试验结果表明，2,4-二羟基-6-甲氧基苯乙酮在0~723.2mg/ml浓度范围内，峰面积与浓度之间呈良好的线性关系。
表2 2,4-二羟基-6-甲氧基苯乙酮测定的线性范围试验结果
③精密度
日内精密度(n=5)
准确吸取同一供试品溶液 10 μl，连续进样5次，测定2,4-二羟基-6-甲氧基苯乙酮的峰面积，计算相对标准偏差分别为0.38%。
日间精密度（n=15）
准确吸取同一供试品溶液 10 μl，连续测定3天、每天测定5次，测定2,4-二羟基-6-甲氧基苯乙酮的峰面积，计算相对标准偏差分别为1.03%。
④重复性
取同一样品（批号：20181120）6份，按“供试品溶液的制备”项下进行测定，测定2,4-二羟基-6-甲氧基苯乙酮的峰面积，计算相对标准偏差分别为1.34%。
⑤加样回收率
取2,4-二羟基-6-甲氧基苯乙酮含量已确定的艾纳香油（批号：20181120）0.5 ml，置50ml容量瓶中，每份加入等量的2,4-二羟基-6-甲氧基苯乙酮标准品，加入甲醇溶液至刻度，摇匀、滤过，按“含量测定”项下方法操作，测定各色谱峰面积，计算加样回收率分别为：102.15%，相对标准偏差分别为：2.24%。
⑥稳定性
准确吸取同一供试品溶液 10 μl，于0 h、1 h、2 h、4 h、8 h、12 h、16 h、24 h进行测定，以2,4-二羟基-6-甲氧基苯乙酮的峰面积进行考察，计算相对标准偏差1.98%，表明样品在24 h内稳定性良好。
方法学研究结果表明：本发明的“艾纳香油中2,4-二羟基-6-甲氧基苯乙酮的含量测定方法”，快速、准确、可靠，可以用于含艾纳香油制剂中2,4-二羟基-6-甲氧基苯乙酮的含量测定。
Claims (6)
1.艾纳香油中2,4-二羟基-6-甲氧基苯乙酮的含量测定方法，其特征在于：包括以下步骤：
1）将2,4-二羟基-6-甲氧基苯乙酮标准品溶于甲醇溶液制成标准品溶液，以所述标准品溶液在下述色谱条件下进行系统适用性试验，校定检测系统；
色谱条件：色谱柱的固定相为碳十八烷基硅烷键合硅胶，所述碳十八烷基硅烷键合硅胶的粒径≤5µm；进行梯度洗脱，检测波长为280nm；
所述梯度洗脱为：以乙腈为流动相A，以体积百分比0.1%的冰醋酸水溶液为流动相B；
梯度洗脱包括：时间梯度为0min→20min→35min；对应的梯度洗脱液，流动相A的体积百分比梯度为20%→50%→50%，流动相B的体积百分比梯度为80%→50%→50%；
2）将待测的含有2,4-二羟基-6-甲氧基苯乙酮的待测物溶于甲醇溶液制成供试品溶液，所述待测物为艾纳香油；
3）按照步骤1）的色谱条件，取等体积的标准品溶液和供试品溶液注入高效液相色谱仪，测定所述标准品溶液和供试品溶液的峰面积并进行计算，得到所述供试品中2,4-二羟基-6-甲氧基苯乙酮的含量。
2.根据权利要求1所述的艾纳香油中2,4-二羟基-6-甲氧基苯乙酮的含量测定方法，其特征在于：所述甲醇溶液为体积比为80%以上的甲醇水溶液或纯甲醇。
3.根据权利要求2所述的艾纳香油中2,4-二羟基-6-甲氧基苯乙酮的含量测定方法，其特征在于：所述碳十八烷基硅烷键合硅胶的粒径为5µm、4µm或3.5µm。
4.根据权利要求3所述的艾纳香油中2,4-二羟基-6-甲氧基苯乙酮的含量测定方法，其特征在于：所述碳十八烷基硅烷键合硅胶的粒径为5µm。
5.根据权利要求4所述的艾纳香油中2,4-二羟基-6-甲氧基苯乙酮的含量测定方法，其特征在于：所述色谱柱的理论塔板数按2,4-二羟基-6-甲氧基苯乙酮峰计算不低于3000。
6.根据权利要求5所述的艾纳香油中2,4-二羟基-6-甲氧基苯乙酮的含量测定方法，其特征在于：具体包括以下步骤：1）取2,4-二羟基-6-甲氧基苯乙酮标准品，以甲醇溶液配制成1ml含有0.2mg 2,4-二羟基-6-甲氧基苯乙酮的标准溶液；在下述色谱条件下进行系统适用性试验，校定检测系统：
色谱条件：固定相为碳十八烷基硅烷键合硅胶，所述色谱柱的规格为250×4.6mm，碳十八烷基硅烷键合硅胶的粒径为5µm；以乙腈为流动相A，以体积比为0.1%的冰醋酸水溶液为流动相B；梯度洗脱程序为：时间梯度0min→20min→35min；对应的梯度洗脱液，流动相A的体积百分比梯度为20%→50%→50%，流动相B的体积百分比梯度为80%→50%→50%；检测波长为280nm，理论塔板数按2,4-二羟基-6-甲氧基苯乙酮峰计算不低于3000；
2）取待测的艾纳香油，以甲醇溶液配制成供试品溶液；
3）按照步骤1）的色谱条件，分别将等体积的标准品溶液和供试品溶液，注入高效液相色谱仪，测定标准品溶液及供试品溶液的峰面积，按外标法计算艾纳香油中的2,4-二羟基-6-甲氧基苯乙酮含量。
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Citations (3)
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|---|---|---|---|---|
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|---|---|---|---|---|
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| CN107561196A (zh) * | 2017-09-04 | 2018-01-09 | 贵州医科大学 | 一种同时测定艾纳香中7种成分含量的hplc方法 |
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Non-Patent Citations (5)
| Title |
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| Bioassay-Guided Charomatographic Isolation and Identification of Antibacterial Compounds from Artomisia Compounds from Artemisia annua L. That Inhibit Clostridium perfringens Growth;Elise Ivarsen 等;《Journal of AOAC INTERNATIONAL》;20140901;第97卷(第5期);第1282-1290页 * |
| HPLC法测定中药有效成分的应用;王小仙 等;《中国基层医药》;20030630(第6期);第1-2页 * |
| Quantitative Determination of Bioactive Compounds in Some Artemisia capillaris by High-Performance Liquid Chromatography;Kim Sang-Won 等;《Natural Product Sciences》;20101231;第4卷(第16期);第233-238页 * |
| 民族药材青阳参的化学成分研究;昝珂 等;《中国中药杂志》;20160115;第41卷(第1期);第101-105页 * |
| 艾纳香化学成分的研究;谭道鹏 等;《天然产物研究与开发》;20120630;第24卷(第6期);第718-721页 * |
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