CN101352464B - 一种中药组合物的质量检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种治疗病毒性、细菌性皮肤病的中药组合物，该中药组合物是由如下重量份的原料药组成：片仔癀粉220～450重量份、蛇药片200～500重量份。本发明还公开了该中药组合物的制备方法和质量检测方法。药效学试验表明，本发明组合物具有明显的抗炎、镇痛、抑菌作用。临床试验表明本发明中药组合物治疗病毒性、细菌性皮肤病，尤其是带状疱疹、单纯疱疹、脓疱疮、毛囊炎、痤疮五个病种，中医辨证属于皮肤热毒证患者，疗效确切，使用安全，并能通过治疗痤疮、雀斑、黄褐斑改善脸部血液循环而起到美容作用。
Description
技术领域
本发明涉及一种中药组合物及其制备方法和质量检测方法，特别涉及一种治疗病毒性、细菌性皮肤病的中药组合物及其制备方法和质量检测方法。
背景技术
片仔癀为明朝万历年间，漳州璞山岩和尚所创，至今已有四百多年历史，其主要由田七、牛黄、蛇胆、麝香等组成，具有消炎、解毒、镇痛功效，在民间历来是内服、外敷两用，以疗效显著而闻名。为了增强并扩大片仔癀已有作用，本发明在研究总结民间用药经验的基础上，合理配伍，筛选出片仔癀复方，对细菌性、病毒性皮肤病及其它皮肤病疗效显著，并能通过治疗痤疮、雀斑、黄褐斑改善脸部血液循环而起到美容作用，具有很高的经济效益和社会效益。
发明内容
本发明目的在于提供一种治疗病毒性、细菌性皮肤病的中药组合物；本发明第二个目的在于提供一种该中药组合物的制备方法；本发明的目的还在于提供一种该中药组合物的质量检测方法。
本发明目的是通过如下技术方案实现的。
本发明中药组合物是由如下重量份的原料药组成：
片仔癀粉220～450重量份、蛇药片200～500重量份。
本发明中药组合物原料药优选如下重量份：
片仔癀粉250重量份、蛇药片450重量份；或
片仔癀粉330重量份、蛇药片350重量份；或
片仔癀粉400重量份、蛇药片250重量份。
所述片仔癀粉和蛇药片均可从市场购得。所述蛇药片是指季德胜蛇药片，收载于中华人民共和国卫生部药品标准中药成方制剂第十五册107页，标准编号：WS3-B-2914-98。
取上述本发明中药组合物原料药，按常规工艺，加入或不加入常规辅料 制备成临床可接受的任何一种外用剂型，如膏剂、擦剂、膜剂或酊剂等。
本发明中药组合物膏剂的制备方法为：
按重量比例称取片仔癀粉，蛇药片；片仔癀粉，溶解，备用；蛇药片提取1-3小时，取上清液备用；称取甘油750～1100重量份、三乙醇胺60～100重量份，投入水相配料罐，加入蛇药提取的上清液，加热至沸腾，边搅拌边加入上述片仔癀粉液，再次加热至沸腾，混匀成水相，备用；称取白凡士林850～1200重量份、硬脂酸200～420重量份、轻质液状石蜡500～750重量份，投入油相配料罐，加热至全部熔化，搅匀，备用；油相和水相乳化均匀后冷却，出料；灌装，即得膏剂。
本发明中药组合物膏剂的质量检测方法包括如下鉴别方法和/或含量测定方法中的任意一种：
鉴别：取膏体5g，加乙醇10ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取胆酸、去氧胆酸对照品加乙醇制成每1ml各含1mg的混合溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比例为10-20∶5-10∶4-6的异辛烷-醋酸乙酯-冰醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃下加热至斑点显色清晰，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的两个荧光斑点。
含量测定：取膏体2g，精密称定，加乙醚20ml，加热回流30分钟，放冷，弃去乙醚液，残渣再加乙醚20ml加热回流30分钟，放冷，弃去乙醚液，挥干溶剂，药渣加甲醇80ml，加热回流1小时，滤过，滤液挥至5ml，加中性氧化铝2g，搅匀，挥干溶剂，加入已处理好的中性氧化铝柱(100-200目，3g，内径15-20mm)上，用50％乙醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至5ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；另取人参皂甙Rg1对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，精密吸取供试品溶液4-5ul，对照品溶液2μl与4μl，分别交叉点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为60-70∶30-40∶9-11的氯仿-甲醇-水10℃以下放置 过夜的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，取出，在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板，周围用胶布固定，照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB薄层扫描法)进行扫描，波长：λs＝510nm，λR＝700nm，测量供试品吸收度积分值与对照品吸收度积分值，计算，即得；本发明膏剂含三七以人参皂苷Rg1(C42H72O14)计，不得少于0.035％。
本发明中药组合物具有清热、解毒、止痛功效。药效学试验表明，本发明组合物具有明显的抗炎、镇痛、抑菌作用。临床试验表明本发明中药组合物治疗病毒性、细菌性皮肤病，尤其是带状疱疹、单纯疱疹、脓疱疮、毛囊炎、痤疮五个病种，中医辨证属于皮肤热毒证患者，疗效确切，使用安全，并能通过治疗痤疮、雀斑、黄褐斑改善脸部血液循环而起到美容作用。
本发明膏剂的技术工艺有其独到之处。将大剂量的复方中药制成乳化型软膏，目前国内较少，主要原因是由于中药中含有纤维、多糖、鞣质及大分子解离物质等，其成分复杂易与乳膏其它成分发生理化反应使乳膏遭破坏，产生油水分层现象，而本发明经多年研究试验，解决了上述技术问题。
下述实验例用于进一步说明但不限于本发明。
实验例1本发明中药组合物抗炎试验
1、对二甲诱发小鼠耳廓炎症的抑制作用：
实验用小白鼠，体重26-30g，雄性10只/组×4致炎前1小时和30分钟各涂药一次，用二甲苯0.05ml滴于右耳(前后两侧)，左耳对照。致炎后30分钟再局部涂药一次。2小时后将小鼠颈椎脱臼处死，剪下两耳，用直径8mm的橡皮塞开孔器，冲下两耳同一部位的园耳片，分析天平称重，以每鼠左右两耳片重量差，作为肿胀度计算，比较组间差异，结果见表1：
表1本发明软膏对小鼠二甲苯诱发肿胀的抗炎作用
结果证明本发明软膏(原膏剂和14％浓度)局涂有明显的抗炎作用，抑 制率＞30％，p＜0.01。
2、对大鼠足跖角叉菜胶(carrageenin)致肿的抑制作用
实验用大白鼠雄性、体重150-180g，10只/组。致炎前左足跖涂药，每15分钟一次，其3次。致炎剂用1％角叉菜胶(灭菌生理盐水配制)0.05ml注射于左后足跖腱膜下。致炎后每小时再涂药一次。用自制的小窄尺测量踝关节周长，以左右关节周长之差为肿胀度，进行t测验，比较组间差异。结果见表2：
表2 本发明软膏对大鼠角叉菜胶关节肿的抑制作用
与正常对照组比较*P＞0.05，**P＜0.05，***P＜0.01
结果证明：本发明软膏7％(原膏剂)、14％浓度局部涂药对角叉菜胶引起的大白鼠关节肿胀有明显的抑制作用。
实验例2 本发明中药组合物镇痛试验
1、热板法
实验用雌性小白鼠，体重18-22g。用YSD-4型药理生物实验多用仪金属测痛器，调节温度55°±0.5℃，以小鼠舔后足为痛指标，给药前隔5分钟测定一次痛阀，共二次，取均值。选取痛阀值在10-30秒间，反应稳定，不跳跃的小鼠供实验用。分10只/组。双侧后足底涂药0.1g/只，每15分钟一次，连续2次，涂药后30、60、90分钟时重测痛阀。(每5分钟测二次，取均数作痛阀值)。比较组间差异。结果见表3：
表3 本发明软膏对小鼠热板法痛阀的提高作用
与正常对照组比较*P＞0.05 **P＜0.05 ***P＜0.01
结果证明：本发明软膏(14％浓度)局部涂药可提高小鼠热板法引起足跖的痛阀值。
2、小白鼠尾部电刺激法：
实验用小白鼠、18-22g雌和雄各半，分10只/组。将小鼠置于固定器内，尾部用75％酒精擦去皮脂，待酒精挥干后，再涂上一均匀薄层的导电糊，用YSD-S型药理多用仪，刺激方法是“定时”，100Hz，波宽100ms，50V，给药前调节电压，选择连续三次(隔5分钟)均引起甩尾定为该鼠的痛阈，测定痛阈后即给小鼠尾部局涂药膏0.05g，15分钟1次，连续2次，30’重测痛阈，比较组间差异，结果见表4。
表4 本发明软膏对小鼠尾部电刺激的镇痛作用
与正常组比较*P＞0.05 **P＜0.05 ***P＜0.01
结果证明：本发明软膏7％(原膏剂)和14％浓度局部涂药能明显的提高电刺激引起的小鼠痛阈值。
实验例3 本发明中药组合物抑菌试验
试验方法：
1、称取本发明软膏10克于烧杯中，加入灭菌生理盐水10ml溶解，制成1∶1药液。
2、制备平皿：
(1)取上述制成的本发明软膏药液20ml，加入56℃溶化营养培养基20ml，混匀，制成平皿两块(每块10ml)。
(2)加入营养琼脂20ml，混匀，制成1∶4平皿培养基两块，依法稀释倍数，制1∶8、1∶16、1∶32平皿各两块。
3、菌液的制备：挑取一白金耳菌落接种于2ml的肉汤中，37℃培养8小时后，将其稀释为106CFU/ml试验菌液。
4、细菌敏感性测定：
吸取试验菌液(106CFU/ml-0.01ml)点种于平皿上，37℃温箱18-24小时培养，观察其生长情况。 (白色念珠菌为48小时)。试验结果见表5：
表5 本发明软膏对皮肤常见致病菌的抗菌作用
-：不生长 +：细菌生长
实验结果表明，本发明软膏对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和白色念珠菌有一定的抑制作用。
实验例4 本发明中药组合物对二硝基氟苯(DNFB)诱发的小鼠迟发型变态反应(DTH)的作用
试验方法：
1、小白鼠按体重随机分10只/组，设
(1)正常对照组：本发明软膏基质，0.3g只局涂。
(2)病模组：本发明软膏基质，0.3g/只局涂
(3)病模+本发明软膏1/2浓度原膏组，0.3g/只局涂。
(4)病模+本发明软膏原膏组，0.3g/只局涂.
(5)病模+本发明软膏倍浓度原膏组，0.3g/只局涂。
(6)病模+氢化可的松20mg.Kg-1.SC组。
致敏前24小时腹部皮肤脱毛(8％Na2S溶液)3×3cm2，局部涂药，上、下午各1次。
2、致敏：除正常对照组外，各组动物用1％DNFB丙酮∶麻油(1∶1)新鲜配制溶液50μl局涂脱毛区皮肤，应注意用力涂擦，使皮肤充分接触。第2天同法强化一次。每天局部涂药上、下午各一次。
3、DTH反应测定：第1次致敏5日后，将1％DNFB新鲜配制溶液10μl/只，局涂小鼠右侧耳朵进行攻击(包括正常对照组)。24小时后脱颈椎处死小鼠，剪下双耳，于同一部位，用8mm橡皮塞开孔器打下一耳片，分析天平称重，以左右耳片重量差值作为肿胀度，比较组间差别的显著性。同时摘取胸腺和脾脏，以脏器重量(mg/10g.bw)计算指数。实验结果：见表6：
表6 本发明软膏对二硝基氟苯(DNFB)诱发的小鼠迟发型免疫反应的作用 
1、与正常对照组比较，△p＞0.05， △△△p＜0.01
2、与病模组比较，*p＞0.05，**p＜0.05，***p＜0.01
结果表明本发明软膏三个浓度剂量(1/2原膏浓度、原膏、倍浓度原膏)局部涂药对二硝基氟苯诱发的小鼠迟发型免疫反应具有减轻廓肿胀的抑制作用。
实验例5 本发明中药组合物对皮肤毛细血管通透性的影响
试验方法：
1、剂量和分组：
(1)正常(基质)对照组。
(2)本发明软膏(倍浓度)组。
(3)本发明软膏(原膏)组。
(4)本发明软膏(1/2浓度)组。
(5)扑尔敏50mg.Kg-1，给药1次，30’前，ig。
测试前24小时腹部皮肤脱毛(10％Na2S溶液)
3×3cm2，同时局部涂药上、下午各1次。0.3/只。
试验当天先局部涂药2次，隔30分钟，0.3/只。
2、1％磷酸组织胺30μl/只皮内注射后，立即由尾静脉注射1％伊文思兰(Evans)0.1ml/10g.bw。
3、计时20分钟后脱颈椎处死小鼠，剪下局部皮肤兰色斑块，剪碎，浸入生理盐水-丙酮(3∶7)溶液2ml试管中，加塞浸泡24小时，其间不时振摇混匀脱色。
4、比色：将浸泡液2000rpm，10分钟离心，取上清液于722分光光度计(610μm)比色测定吸收度。试验结果见表7。
表7 本发明软膏对皮肤毛细血管通透性增加的作用 
与正常对照组比较，*P＞0.05， **p＜0.05， ***p＜0.01
实验结果表明，本发明软膏高浓度有抑制组织胺诱发的毛细血管通透性增加的作用。
实验例6 本发明中药组合物临床试验
目的：进一步观察本发明软膏治疗带状疱疹、单纯疱疹、脓疱疮、毛囊炎、痤疮，中医辩证属于皮肤热毒证患者的临床疗效和安全性。
方法：采用开放试验。共150例，各病种各30例，用本发明软膏适量涂于患处，一日2-3次。单纯疱疹、脓疱疮、毛囊炎疗程1周，带状疱疹、痤疮疗程2周。
结果：
1、总体疗效见表8
表8 总体疗效
2、症状体征治疗前后改善情况见下表。
表9 水疮(丘诊)治疗前后改善情况
痤疮治疗前后比较有显著性差异。
表10 脓疮治疗前后改善情况
各项治疗前后比较均有非常显著性差异。
表11疼痛治疗前后改善情况
脓疱疮治疗前后比较有显著性差异，其余各项治疗前后比较，均有非常显著性差异。
表12 皮肤红晕治疗前后改善情况
各项治疗前后比较，均有非常显著性差异。
表13 口干、口苦治疗前后改善情况
带状疱疹、单纯疱疹、脓疱疮治疗前后比较，均有非常显著性差异。
表14 尿黄治疗前后改善情况
带状疱疹、单纯疱疹、脓疱治疗前后比较，均有非常显著性差异。
表15 便秘治疗前后改善情况
脓疱疮治后有显著性差异，带状疱疹、单纯疱疹、治疗前后比较，均有非常显著性差异。
表16 舌质红治疗前后改善情况
带状疱疹、单纯疱疹、脓疱治疗前后比较，均有非常显著性差异。
表17 脉滑数治疗前后改善情况
痤疮、毛囊炎治疗前后比较无非常显著性差异，其余各项治疗前后比较，均有非常显著性差异。
表18 苔黄治疗前后改善情况
痤疮、毛囊炎治疗前后比较无非常显著性差异、各项治疗前后比较，均有非常显著性差异。
表19 毛囊炎面积等级治疗前后改善情况
治疗前后比较有非常显著性差异。
表20 带状疱疹、单纯疱疹、脓疱疮、痤疮数目治疗前后改善情况 
各项治疗前后比较，均有非常显著性差异。
总体病例分析，本发明软膏能改善患者各项临床症状与体征，治疗前后比较，有非常显著性差异，P均小于0.01。
3、各病种疗效值， 
见下表
表21 各病种疗效 值
以总体病例为标准组，病种的 
值排序由高而低，分别为单纯疱疹、带状疱疹、脓疱疮、毛囊炎、痤疮。
4、安全性检测表明，本发明软膏无明显的毒副作用。
5、结论：本发明软膏能治疗带状疱疹、单纯疱疹、脓疱疮、毛囊炎、痤疮五个病种，中医辩证属于皮肤热毒证患者，疗效确切，使用安全。
下述实施例均能实现上述实验例的效果。
具体实施方式
实施例1：本发明膏剂
片仔癀粉250Kg、蛇药片450Kg；取上述重量的原料药，按常规工艺加入常规辅料制备成膏剂。每支5g，外用，涂于患处，一日4-6次。
实施例2：本发明擦剂
片仔癀粉330Kg、蛇药片350Kg；取上述重量的原料药，按常规工艺加入常规辅料制备成擦剂。
实施例3：本发明膜剂
片仔癀粉400Kg、蛇药片250Kg；取上述重量的原料药，按常规工艺加入常规辅料制备成膜剂。
实施例4：本发明膏剂
片仔癀粉330Kg 蛇药片350Kg
1.按投料量领取蛇药，提取2小时，取上清液备用。
2.按投料量称取片仔癀粉，溶解，备用。
3.按投料量称取甘油900Kg、三乙醇胺80Kg，投入水相配料罐，加入蛇药提取的滤液的上清液，加热至沸腾，边搅拌边加入上述片仔癀粉液，再次加热至沸腾，混匀成水相，备用。
4.按投料量称取白凡士林1000Kg、硬脂酸300Kg、轻质液状石蜡600Kg，投入油相配料罐，加热至全部熔化，搅匀，备用。
5.把油相和水相乳化均匀后冷却，出料。膏体倒入灌装机中灌装，每支10g，即得。
外用，涂于患处，一日2-3次。
实施例5：本发明膏剂的质量检测方法
鉴别：取按实施例4制成的软膏5g，加乙醇10ml，超声处理30分钟，滤过，滤液浓缩至1ml，作为供试品溶液。另取胆酸、去氧胆酸对照品，加乙醇制成每1ml各含1mg的混合溶液，作为对照品溶液，八为对照品溶液。照薄层色谱法(附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以异辛烷-醋酸乙酯-冰醋酸(15∶7∶5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃烘约5分钟，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的两个荧光斑点。
含量测定：取按实施例4制成的软膏2g，精密称定，加乙醚20ml，加热回流30分钟，放冷，弃去乙醚液，残渣再加乙醚20ml加热回流30分钟，放冷，弃去乙醚液，挥干溶剂，药渣加甲醇80ml，加热回流1小时，滤过，滤液挥至近5ml，加中性氧化铝2g，搅匀，挥干溶剂，加入已处理好的中性氧化铝柱(100-200目，3g，内径15-20mm)上，用50％乙醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至5ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。另取人参皂甙Rg1对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，精密吸取供试品溶液4-5ul，对照品溶液2μl与4μl，分别交叉点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-水(65∶35∶10)10℃以下放置过夜的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑 点显色清晰，取出，在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板，周围用胶布固定，照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB薄层扫描法)进行扫描，波长：λs＝510nm，λR＝700nm，测量供试品吸收度积分值与对照品吸收度积分值，计算，即得。
本品含三七以上人参皂苷Rg1(C42H72O14)，不得少于0.035％。
Claims (2)
1.一种治疗皮肤病的中药组合物膏剂的质量检测方法，其特征在于该方法包括如下鉴别方法和/或含量测定方法中的任意一种：
鉴别：取膏体5g，加乙醇10ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取胆酸、去氧胆酸对照品加乙醇制成每1ml各含1mg的混合溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比例为10-20：5-10：4-6的异辛烷—醋酸乙酯—冰醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃下加热至斑点显色清晰，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的两个荧光斑点；
含量测定：取膏体2g，精密称定，加乙醚20ml，加热回流30分钟，放冷，弃去乙醚液，残渣再加乙醚20ml加热回流30分钟，放冷，弃去乙醚液，挥干溶剂，药渣加甲醇80ml，加热回流1小时，滤过，滤液挥至5ml，加中性氧化铝2g，搅匀，挥干溶剂，加入已处理好的中性氧化铝柱上，用50%乙醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至5ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；另取人参皂甙Rg1对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，精密吸取供试品溶液4-5ul，对照品溶液2μl与4μl，分别交叉点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为60-70：30-40：9-11的氯仿-甲醇-水10℃以下放置过夜的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，取出，在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板，周围用胶布固定，照薄层色谱法进行扫描，波长：λs=510nm,λR=700nm，测量供试品吸收度积分值与对照品吸收度积分值，计算，即得；本膏剂含三七以人参皂苷Rg1计，不得少于0.035%；
其中，所述中药组合物是由如下重量份的原料药组成：
片仔癀粉330重量份、蛇药片350重量份；按常规工艺，加入或不加入常规辅料制备成膏剂。
2.如权利要求1所述的中药组合物膏剂的质量检测方法，其特征在于该方法包括如下鉴别方法和/或含量测定方法中的任意一种：
鉴别：取膏体5g，加乙醇10ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取胆酸、去氧胆酸对照品加乙醇制成每1ml各含1mg的混合溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比例为15：7：5的异辛烷—醋酸乙酯—冰醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃下加热至斑点显色清晰，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的两个荧光斑点；
含量测定：取膏体2g，精密称定，加乙醚20ml，加热回流30分钟，放冷，弃去乙醚液，残渣再加乙醚20ml加热回流30分钟，放冷，弃去乙醚液，挥干溶剂，药渣加甲醇80ml，加热回流1小时，滤过，滤液挥至5ml，加中性氧化铝2g，搅匀，挥干溶剂，加入已处理好的中性氧化铝柱上，用50%乙醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至5ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；另取人参皂甙Rg1对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，精密吸取供试品溶液4-5ul，对照品溶液2μl与4μl，分别交叉点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为65：35：10的氯仿-甲醇-水10℃以下放置过夜的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，取出，在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板，周围用胶布固定，照薄层色谱法进行扫描，波长：λs=510nm,λR=700nm，测量供试品吸收度积分值与对照品吸收度积分值，计算，即得；本膏剂含三七以人参皂苷Rg1计，不得少于0.035%。
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