CN101343626A - 一种制备复合酶的方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种制备复合酶的方法，①解决了微生物发酵技术现有方法生产成本高、技术要求严等问题。本发明方法是通过形成含有豆粕和/或麸皮和/或面粉和/或青蒿组分的混合物料，在从青蒿中提取的生物催化剂作用下发酵而成。②本发明中原料易得，工艺合理、简单、易操作、生产成本低、无污染。③本发明方法所得复合物是黄曲菌的替代物，活性高、稳定性好、用途广，被用于食品、医药产品及农业的种、养、加工行业，饲料或有机肥料中添加0.2～0.5％的复合酶，即能促进动、植物、蔬菜生长，提高抗病能力和生产效率，改善鱼、禽、畜及农作物品质，并减少粪便恶臭，经济效益明显，市场前景好。

Description

一种制备复合酶的方法

技术领域

本发明涉及微生物发酵技术，特别是涉及用青蒿等农林纤维废物替代黄曲菌制备复合酶的方法。

背景技术

生命活动的基本特征之一是新陈代谢，人体内的物质代谢过程几乎都是在酶催化下进行的。土壤、空气、水、物体表面、动植物体和人体中都有许多种类不同的酶存在，但植物内由生物活细胞产生的具有催化功能的特殊蛋白质，还没有被开发利用。

我国传统的制酱或做酱油所用菌种就是黄曲菌，黄曲菌对蛋白质和淀粉都有较强的分解能力，大量的蛋白质及淀粉，在黄曲菌产生的蛋白酶和淀粉酶的催化下，蛋白质便缓和水解生成氨基酸，对氨基酸的破坏也很少，但黄曲菌要长期驯养于淀粉质和蛋白质的培养基中，因此制备技术要求严，且成本高、不易工业化生产。

专利文献出版社出版的《专利申请文件撰写案例剖析》第312页，揭示了“一种通过在含有甲醇的培养基中培养转化的酵母菌株并分离和纯化其表达产物以生产所需多肽的方法”，由于工艺复杂、成本高，不易在中国推广。

2001年2月7日《农民日报科技周刊》第6版最新报道中指出：中国农业大学教授郝晋珉等承担的国家“九五”重点科技攻关课题“黑龙港上游农业高效持续发展研究”，在高效微生物饲料添加剂及饲料生产技术研究中，他们引进了日本先进的EM高效微生物技术，采用饲料厌氧发酵和EM菌剂发酵饲料相结合的方法对饲料进行了处理，终于研制成功了生物活性饲料添加剂，以其10％添加到畜禽饲料中可提高畜禽的抗病能力，提高了饲料利用率，可基本不用抗生素和生长激素，畜禽粪便恶臭和苍蝇亦可去除。由于有引进生物技术，且活性饲料添加剂添加的量又大，饲养成本相应要高，不易推广。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是要克服现有微生物发酵方法生产成本高、技术要求严、工艺复杂等缺点，提供一种原料易得、生产工艺合理、简单、成本低、易操作的从天然资源青蒿中提取生物催化剂来替代黄曲菌制备具有活性高、稳定性好、用途广且能替代黄曲菌的复合酶的方法。

一种制备复合酶的方法，包括：

(a)以重量计，制成含有下列组分的混合物料：

(1)18～24％水，

(2)50～62％豆粕粉和/或大豆粉，

(3)18～24％的麸皮和/或面粉和/或青蒿；

其中豆粕也可用其它含蛋白质的饼代替，豆粕只需用沸水保温浸焖3～4小时，豆粕取16目/英寸以下粕粉，混合物料中青蒿加入量为0～3％。

(b)豆粕粉用沸水浸焖，出锅后拌入麸皮、面粉等辅助原料，待混合物料温降至30～40℃时放入竹匾或其它发酵容器中，同时放入混合物重0.5～15％的青蒿，使混合物料在装有青蒿的环境中充分发酵，青蒿是黄曲菌的替代物。发酵室温保持在28～40℃，干湿度差保持在1～2℃之间，料温保持在28～50℃，当曲料(混合物料面)上出现菌丝并有曲香味时，即可进行一次翻拌，同时开窗换气，降低料温并调换新鲜空气，经30小时左右，料温不再上升，混合物料面布满白色菌丝时，再发酵18～30小时，曲的外观呈黄绿色，具有曲香味时，说明复合酶已经制成。其中，真正替代黄曲菌的生物催化剂是从青蒿中提取的。

有益效果：

青蒿全国各地均产，原料易得，用青蒿制备复合酶是废物利用，且成本低、工艺合理、简单、无环境污染，有利于工业化生产，复合酶活性高、稳定性好、用途广、易推广，符合我国国情。反复试验发现：用该法制备的复合酶不但能替代黄曲菌进行发酵，还能用作饲料添加剂和有机肥添加剂，大规模生产生物饲料和有机活性肥料。添加0.2～0.5％的复合酶生产的饲料添加剂，在饲料中加入3～5％，对鱼、畜、禽促进生长，减少料耗和粪便恶臭，提高抗病能力和生产率有显著作用。有机活性肥料能促进粮食、经济作物和蔬菜秧苗快速生长，提高抗病能力，改善农作物品质，经济效益明显，市场前景良好。

具体实施方式

实施例1

将200克豆粕粉放入保温容器中，加入沸水150克搅拌均匀后浸焖3小时，焖过的料中再加入60克麸皮、40克面粉，边加边搅拌，待料温降至38℃时，将料和10克青蒿放入竹匾或曲盒中，室温保持在28～35℃，料温保持在30～45℃，当曲料上出现菌丝并有曲香味时，翻料、通风、降温一次，经30小时，料温不再上升，曲面布满白色菌丝时，再发酵20小时，复合酶呈黄绿色并具有曲香味时即可把青蒿拿掉，而后出曲。

实施例2

将100克豆粕粉放入装有80克的沸水锅里浸焖4小时，或蒸半小时、焖2小时，而后边搅拌边加入40克麸皮、15克面粉，搅拌均匀后，待料温降至40℃，将料和15～20克青蒿放入发酵容器内搅匀，室温保持在30～38℃，干湿度差保持在1～2℃，料温保持在36～40℃发酵25小时左右，曲面布满白色菌丝时，再发酵18～30小时，复合酶呈黄绿色并具有曲香味时出曲。

Claims (4)

1.一种制备复合酶的方法，该方法包括：

(a)以重量计，制成含有下列组分的混合物料：

(1)18～24％水，

(2)50～62％豆粕粉和/或大豆粉，

(3)18～24％的麸皮和/或面粉和/或青蒿，

其中豆粕只需用沸水保温浸焖3～4小时；

(b)待以上混合物料温降至30～40℃时放入发酵容器中，同时放入混合物重0.5～15％的青蒿，料温保持在28～50℃，室温28～40℃，干湿度差保持在1～2℃之间，使混合物料在装有青蒿的环境中充分发酵，青蒿是黄曲菌的替代物。

2.根据权利要求1所述的制备复合酶的方法，其特征在于(a)步中使用混合物料中青蒿加入量为0～3％。

3.根据权利要求1所述的制备复合酶的方法，其特征在于(b)步中青蒿用量为混合物料重的2～3％，青蒿与混合物料拌匀后再放入发酵室发酵为好，发酵室温保持在30～38℃，料温保持在36～40℃。

4.根据权利要求1所述的制备复合酶的方法，其特征在于替代黄曲菌的生物催化剂是从青蒿中提取的。