CN101322690A - 一种稳定的药物脂质复合物 - Google Patents

Abstract

一种稳定的药物脂质复合物，将在生理条件下不溶或微溶于水的药物分子与胆固醇衍生物和磷脂类的两性分子形成脂质复合物，进一步制成药物制剂。

Description

一种稳定的药物脂质复合物

技术领域

本发明涉及医药技术领域，确切的说是一种稳定的药物脂质复合物及其制备方法。

背景技术

难溶性药物非肠道给药时因不溶于水，常需将药物制成水溶性盐或采用非水溶媒、复合溶媒、表面活性剂来增加药物的溶解度，这些方法虽然能解决药物的溶解性问题，但通常不能使药物的刺激性、毒性降低，反而使其增加，临床应用时会引起血管刺激等严重副作用，并且使用时有诸多限制：高浓度用量时有疼痛感，用其它静脉注射液稀释又产生药物沉淀；注射速度过快，药物会在血管中沉淀。

为使这些药物能安全的通过静脉注射使用，并意图降低药物的毒、副作用，即解决药物的稳定性及注射用药的刺激性，一般将药物制成脂质体、微球、聚合物微粒等制剂，但是这些药用载体仍然有一些缺陷：微球适合化学栓塞及局部注射，但不适于注射用药；脂质体、可用于多种给药途径和制剂，当它作为抗癌药物载体时可使药物选择性地杀伤癌细胞，提高疗效，但由于磷脂双分子膜的不稳定性，导致药物包裹率很低，不适于高剂量药物，且长期放置容易聚集和渗漏，对于一些临床用量较高的药物，如大环内酯类抗生素，有一定的工艺困难且难以大批量生产而限制了其应用；新近出现的以高熔点脂质材料的为载体的固体脂质纳米粒弥补了脂质体的膜不稳定性，但制备过程需要高温、高剪切力等剧烈条件，使其应用受到了限制。中国专利CN1253018A和CN1579546均采用生物可降解的PLGA(乳酸-羟基乙酸共聚物)等高分子材料为载体制备聚合物纳米粒，但仍存在药物包裹率低及药物在聚合物材料中的不稳定和粒度难以控制等问题。

显然，这些缺陷极大地限制了这类药物的注射剂在临床上的使用。因此，开发一种能增加其于水溶液中稳定性、降低药物对血管壁的刺激性、成本比较低廉的制剂学方法，在临床上具有重要意义。

在前期专利CN1552339研究中，通过对部分大环内酯类抗生素制备胆固醇衍生物复合物来实现降低血管刺激性的目的，进一步研究发现利用以上方法制备的药物脂质复合物不够稳定，产品经稀释之后，很快会有部分药物游离出来，使用时产生血管刺激。进一步研究发现，将药物制备成胆固醇衍生物磷脂复合物后，稳定性增强，更适于临床使用，使用时对血管几乎无刺激性。本专利为前期专利CN1552339的延续。

发明内容

一些药物如克拉霉素、阿奇霉素、罗红霉素、地红霉素、泰利霉素、万古霉素、去甲万古霉素、达托霉素、米诺环素、特拉万辛(telavancin)、两性霉素B、制霉菌素、大观霉素、青蒿素、双氢青蒿素、伊曲康唑、特比萘芬、阿霉素、长春瑞宾、紫杉醇、多烯紫杉醇、水飞蓟素、水飞蓟宾，这些药物本身不溶于水，为制成适于注射使用的液体制剂，通常是将药物与酸或碱成盐，进而溶于水中；或使用有机溶剂来增加药物在水中的溶解度。但是，这些药物通常又存在血管刺激、肾毒性等问题，无法通过增溶来解决，本发明目的是为了克服上述已有技术存在的缺陷，提供一种稳定的脂质复合物及其制备方法。该复合物是药物与两性分子胆固醇的衍生物和磷脂类通过分子间相互作用形成复合物，该复合物以颗粒的形式均匀而稳定地分散于水中，该分散体系可以稀释、浓缩、冻干以及冻干后再溶解和稀释，均呈现稳定、均匀的分散特征；该复合物的制备是通过将药物与胆固醇的衍生物和磷脂类共同溶解于同一溶剂体系中，使药物分子与胆固醇的衍生物和磷脂类分子充分作用，形成复合物，然后将此溶液滴加入水或缓冲液中形成复合物颗粒，或除去溶剂后，再将复合物分散于水或缓冲液中。为了便于保存，这些复合物制剂可使用冻干或喷雾干燥等方法制成固体制剂保存。

胆固醇是一亲脂性分子，将胆固醇分子衍生后可形成一亲水性基团而成为两性分子，其两性化方法是将分子中的羟基衍生成盐，通常可制成硫酸盐、磷酸盐及磺酸盐等。胆固醇衍生物具有无毒、无刺激性、在体液中存在的特点。在水中一些药物分子与两性化的胆固醇分子通过亲脂性部分的疏水力以及可能也通过亲水性部分的极性亲和力，而形成按照一定分子摩尔数比的多分子复合物；磷脂是由一亲水的头部和两个疏水的尾部组成，头部由磷酸骨架与水溶性分子如胆碱、丝氨酸等酯化而成，可以溶于水，向下延伸的两条尾部是脂肪酸链，每条由10-20个炭原子和0-6个双键组成，不溶于水，磷脂的两亲性及链式结构可与药物胆固醇衍生物复合物的亲水和疏水部分结合产生交联作用，增加其稳定性，减少药物的渗漏。所形成的这种复合物以胶体的形式均匀而稳定地分散于水中，可提高药物的稳定性，增加药物的溶解度，降低药物的刺激性。

在药物与胆固醇衍生物形成的复合物中加入磷脂类成份，可以使形成的复合物更加稳定，这些磷脂直接参与或在复合物颗粒表面形成膜来保护复合物。对于一些不能与磷脂类直接形成复合物的药物，通过胆固醇衍生物即可形成脂质复合物，同时保证了复合物的稳定性，也避免了胆固醇衍生物浓度高导致的溶血。对于一些药物如大环内酯类，虽然可以与胆固醇衍生物形成复合物，但由于形成的复合物在体液中不够稳定，且使胆固醇衍生物在体液中浓度增加，形成过饱和，易导致溶血，同时克服血管刺激作用不够强，通过加入磷脂形成复合物可解决这些问题。胆固醇衍生物中胆固醇硫酸钠、胆固醇磷酸钠、胆固醇磺酸钠是比较安全且可用于制备复合物的衍生物，磷脂类中蛋黄卵磷脂、大豆卵磷脂、二硬酯酰胆碱、二棕榈酰胆碱、磷脂酰甘油、磷脂酸、磷脂酰肌醇，为常用于制备脂质体及脂质复合物的材料。在制备药物与胆固醇衍生物和磷脂类的复合物时，药物与胆固醇衍生物须在一定比例范围内方可形成复合物，通常比例为胆固醇衍生物和药物分子的摩尔比为1∶5～20∶1，其中优选的比例为1∶3～3∶1。超出此比例较难形成，对于磷脂类的加入量也应选择合适的比例，磷脂加入的量少，不足以增加复合物稳定性，加入过多成本高，也会析出，实验证实比例应为磷脂分子与药物分子的摩尔比例为0.1∶1～20∶1，其中优选的比例为0.1∶1～3∶1，对于克拉霉素在药物胆固醇硫酸钠∶卵磷脂比例为0.5g∶0.4g∶1g时形成的复合物较稳定。在制备这些复合物时，药物、磷脂类、胆固醇衍生物需溶解于同一溶剂体系时，方可形成复合物，由于三者通常不能同时溶于同一溶剂，如胆固醇硫酸钠易溶于DMSO，而卵磷脂易溶于乙醇，故需分别溶解或选择混合溶剂，溶剂应选DMSO、DMF、四氢呋喃、甲醇、乙醇的一种或几种混合。将溶解于同一溶剂体系的药物与脂质体滴入缓冲液中，以复合物形式析出，或直接除去溶剂形成复合物，进一步分散于缓冲液中。制备时，最好选用缓冲液，尤其是pH6~pH7.5的中性缓冲液作为复合物的分散体系。

对于克拉霉素等大环内酯类抗生素及一些临床使用剂量高的抗生素如万古霉素、米诺环素、两性霉素和一些抗癌药如长春瑞滨等，由于剂量大等原因，使用脂质体较困难，单独使用磷脂类又较难形成复合物，选胆固醇衍生物与磷脂类共同使用制备复合物具有明显的临床意义。

所制备的复合物可以以液体形式存在，但最好是采用冻干制成冻干制剂，这样可以使制成的制剂更加稳定，易于保存。为临床需要及制剂要求，可在制剂中加入冻干支撑剂等辅料，以满足制剂及临床需要。

附图说明

图1是实施例8的两种药物复合物释放度曲线

具体实施方案

下面给出本发明的稳定的脂质复合物的部份实施例，这些实施例不限制本发明范围。

实施例1：

配方：

胆固醇酰硫酸钠             0.35g(约0.71mmol)

克拉霉素                   0.5g(约0.66mmol)

蛋黄卵磷脂                 0.75g(约0.96mmol)

分别按配方量称取胆固醇硫酸钠与克拉霉素置100ml的烧杯中，加入二甲基亚砜15ml，45℃水浴保温，不断搅拌使溶解；另按配方量称取蛋黄卵磷脂置50ml烧杯中，加入乙醇12ml，不断搅拌使溶解，45℃水浴保温。将磷脂的乙醇溶液缓缓倒入上述二甲基亚砜溶液中，轻轻搅拌使混合均匀，于45℃水浴保温备用。用注射器吸取上述药物溶液，以5ml/min的速度pH7.2tris缓冲液中，直至所有的药物溶液注入完毕即得克拉霉素脂质复合物混悬液。注入过程中，缓冲液应轻轻搅拌以加速有机溶剂的扩散。

将上述药物复合物混悬液中的有机溶剂和少量的游离药物除去，浓缩。在此过程中加入适量乳糖，使最终的药物复合物混悬液中乳糖的浓度为1g/10ml。最终药物浓度为15mg/ml，收率85％上下。将此药物复合物混悬液经0.22μm滤膜过滤除菌，冷冻干燥，得药物复合物冻干品，加注射用水复溶得(约0.71mmol)略带蓝色乳光的药物复合物混悬液，经马尔文激光粒度仪测定，平均粒径105nm，粒径分布均匀。

实施例2：

配方：

胆固醇酰硫酸钠         0.2g(约0.41mmol)

胆固醇酰磷酸钠         0.15g(约0.291mmol)

克拉霉素               0.5g(约0.67mmol)

蛋黄卵磷脂             0.5g(约0.64mmol)

大豆磷脂               0.25g(约0.32mmol)

分别按配方量称取胆固醇硫酸钠、胆固醇磷酸钠、克拉霉素置100ml的烧杯中，加入二甲基亚砜15ml，45℃水浴保温，不断搅拌使溶解；另按配方量称取蛋黄卵磷脂和大豆磷脂置50ml烧杯中，加入乙醇12ml，不断搅拌使溶解，45℃水浴保温。将磷脂的乙醇溶液缓缓倒入上述二甲基亚砜溶液中，轻轻搅拌使混合均匀，于45℃水浴保温备用。用注射器吸取上述药物溶液，以5ml/min的速度注/入pH7.2缓冲液中，直至所有的药物溶液注入完毕即得克拉霉素脂质复合物混悬液。注入过程中，缓冲液应轻轻搅拌以加速有机溶剂的扩散。

将上述药物复合物混悬液中的有机溶剂和少量的游离药物除去，浓缩。在此过程中加入适量乳糖，使最终的药物复合物混悬液中乳糖的浓度为1g/10ml。最终药物浓度为15mg/ml，收率85％上下。将此药物复合物混悬液经0.22μm滤膜过滤灭菌，冷冻干燥，得药物复合物冻干品，加注射用水复溶得略带蓝色乳光的药物复合物混悬液，经马尔文激光粒度仪测定，平均粒径101nm，粒径分布均匀。

实施例3：

配方：

两性霉素B              0.5g(约0.54mmol)

胆固醇磷酸钠           0.3g(约0.58mmol)

蛋黄卵磷脂             0.5g(约0.64mmol)

按配方量称取两性霉素B和胆固醇磷酸钠置100ml的烧杯中，加入二甲基亚砜15ml，于45℃水浴保温，不断搅拌使溶解；另按配方量称取蛋黄卵磷脂溶于10ml微热的乙醇中，缓缓加入上述药物的二甲基亚砜溶液中，搅拌使混合均匀。45℃水浴保温备用。用注射器吸取上述药物溶液，缓缓注入pH7.2的缓冲液中，此过程应缓慢搅拌以加速有机相的扩散。药物溶液注入完毕即得两性霉素B脂质复合物混悬液，将有机溶剂和少量的游离药物除去，浓缩。最终药物浓度为10mg/ml的略带蓝色乳光的混悬液。经马尔文激光粒度仪测定，药物复合物微粒的平均粒径为112nm，粒径分布均匀。

实施例4：

配方：

两性霉素B                  0.5g(约0.54mmol)

胆固醇硫酸钠               0.26g(约0.53mmol)

蛋黄卵磷脂                 2g(约2.5mmol)

按配方量称取两性霉素B和胆固醇硫酸钠置100ml的烧杯中，加入15ml二甲基亚砜，于45℃水浴保温，不断搅拌使溶解；另按配方量称取蛋黄卵磷脂置50ml烧杯中，加30ml乙醇使溶解，于45℃水浴保温。将上述二甲基亚砜溶液缓缓加入磷脂的乙醇溶液中，搅拌使混合均匀，用注射器吸取上述药物溶液以5ml/min的速度注入pH7.2的缓冲液中，注入完毕即得药物复合物混悬液，将有机溶剂和少量的游离药物除去，浓缩。加入乳糖适量，使最终乳糖浓度为1g/10ml，药物浓度为10mg/min。将此药物复合物混悬液经0.22μm滤膜过滤除菌，冷冻干燥得两性霉素B冻干品。加注射用水复溶得淡白色乳光的药物复合物混悬液，经马尔文激光粒度仪测定，药物复合物微粒的平均粒径为127nm，粒径分布均匀。

实施例5：

配方：

罗红霉素                 0.5g(约0.59mmol)

胆固醇硫酸钠             1.5g(约3.1mmol)

磷脂酰胆碱               0.2g(约0.64mmol)

按配方量称取罗红霉素和胆固醇硫酸钠置100ml烧杯中，加DMSO50ml，于45℃水浴放置，不断搅拌使溶解。另按配方量称取磷脂酰胆碱溶于少量乙醇中，于45℃水浴保温并与上述药物的甲醇溶液混合均匀。将此溶液，在pH7.2的缓冲液分散，得颗粒大小平均值为95nm的药物复合物悬浮液，除去有机溶剂。加入适量乳糖，冷冻干燥，形成白色块状冻干品，使用时加入注射用水复溶。

实施例6：

配方

胆固醇磺酸钠          0.3g(约0.61mmol)

蛋黄卵磷脂            2g(约2.5mmol)

紫杉醇                0.5g(约0.58mmol)

按配方量称取胆固醇硫酸钠和紫杉醇置100ml烧杯中，加入甲醇适量，水浴加热，不断搅拌使溶解；另按配方量称取二硬脂酰胆碱，加入适量的乙醇，水浴保温备用。将上述两种溶液混合均匀，在pH7.2的缓冲液中分散制得平均粒径为110nm的药物复合物混悬液。加入适量乳糖，冷冻干燥即得紫杉醇复合物冻干品。

实施例7：

将0.5g胆固醇硫酸钠，0.6g青蒿素和0.2g磷脂酰胆碱加热溶于乙醇中，减压除去乙醇，所得固体在pH7.5的缓冲液中分散，制成含药浓度为10mg/ml.平均粒径为106nm的均匀分散体，加入乳糖适量，冷冻干燥。

实施例8：稳定性试验

分别取克拉霉素胆固醇硫酸钠复合物(克拉霉素与胆固醇硫酸钠的摩尔比为1∶1)混悬液和克拉霉素胆固醇硫酸钠磷脂复合物混悬液(实施例1)适量，以葡萄糖输液为释放介质，浆法，温度为37℃士0.5℃，转速为50r/min.分别于15min，30min，1h，2h，4h，8h，12，24，36，48，60，72h取样0.5mL(同时补加0.5mL释放介质)置超滤膜中，于3000r/min条件下离心10min。取续滤液20μl进液相色谱仪。计算不同时间点药物的累积百分释放量。

结果见说明书附图1

由图1可见，克拉霉素胆固醇硫酸钠磷脂复合物与克拉霉素胆固醇硫酸钠复合物相比，药物渗漏减慢，稳定性增强。

实施例9：大鼠脚掌刺激性试验

取大鼠40只，分为4组，每组10只，雌雄各半，分别脚掌注射10mg/mL克拉霉素胆固醇硫酸钠(克拉霉素与胆固醇硫酸钠的摩尔比为1∶1)复合物混悬液、10mg/mL克拉霉素胆固醇硫酸钠蛋黄卵磷脂复合物混悬液(实施例1)、10mg/mL乳糖酸克拉霉素注射液、0.9％氯化钠溶液0.05mL。记录各组大鼠10分钟内舔脚掌的平均次数和平均总时间，结果如下表所示

大鼠脚掌刺激性试验结果

结果表明，克拉霉素胆固醇硫酸钠磷脂复合物与克拉霉素胆固醇硫酸钠复合物相比，刺激性降低，基本与0.9％氯化钠相当。说明磷脂增加了克拉霉素胆固醇硫酸钠的稳定性，避免了因药物渗漏而导致的配方刺激性的产生。

Claims (6)

1.一种稳定的药物脂质复合物，其特征在于将在生理条件下不溶或微溶于水的药物分子与胆固醇衍生物和磷脂类的两性分子形成脂质复合物，使用时该复合物以微粒形式稳定、均匀地分散于水或缓冲液中。

2.如权利要求1所述的稳定的药物脂质复合物，两性分子中胆固醇衍生物包括胆固醇硫酸钠、胆固醇磷酸钠、胆固醇磺酸钠中的一种或两种以上混合使用；磷脂类包括蛋黄卵磷脂、大豆磷脂、二硬酯酰胆碱、二棕榈酰胆碱、磷脂酰甘油、磷脂酸、磷脂酰肌醇的一种或两种以上混合使用。

3.如权利要求1所述的稳定的药物脂质复合物，胆固醇衍生物和药物分子的摩尔比为1∶5～10∶1；磷脂分子与药物分子的摩尔比例为0.1∶1～10∶1。

4.如权利要求1所述的稳定的药物脂质复合物，其中药物为克拉霉素、阿奇霉素、罗红霉素、地红霉素、泰利霉素、万古霉素、去甲万古霉素、达托霉素、米诺环素、特拉万辛、两性霉素B、制霉菌素、大观霉素、青蒿素、双氢青蒿素、伊曲康唑、特比萘芬、阿霉素、长春瑞宾、紫杉醇、多烯紫杉醇、水飞蓟素、水飞蓟宾的一种。

5.如权利要求1所述的稳定的药物脂质复合物，可以根据需要和许可程度制成不同规格、形态的制剂；这些形态的制剂包括但不限制于液体制剂、冰冻保存制剂、不同浓度的浓缩或稀释制剂、干燥成粉末制剂。

6.如权利要求1所述的稳定的药物脂质复合物，可以根据具体制剂的需要加入一种或几种药物辅料。

Images