CN101099866A - 泊洛沙姆修饰的胆固醇共聚物及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一类泊洛沙姆接枝修饰的胆固醇共聚物以及作为辅料方面的应用，比如可以制备水溶液分散体比如：纳米乳剂，纳米脂质体；也可以制备能分散于水的胶束、固体脂质纳米粒或纳米粒等。

Description

泊洛沙姆修饰的胆固醇共聚物及其应用

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一类泊洛沙姆接枝修饰的胆固醇共聚物以及作为辅料方面的应用；比如在制备水溶液分散体纳米乳剂，纳米脂质体以及固体能分散体胶束、固体脂质纳米粒或纳米粒等。

背景技术

泊洛沙姆(Poluoshamu)商品名叫pluronic(普流罗尼)F-68。是白色或微黄色半透明蜡状固体，微有异臭。在水中和乙醇中易溶，在无水乙醇和乙酸乙酯中溶解。用途：用作表面活性剂、乳化剂、栓剂基质、赋形剂等。Poloxamer因有显著的防止溶血作用，可用于静脉注射制剂，对某些药可以起到助溶作用。

中国药典规定的泊洛沙姆，它规定了含聚氧乙烯为81.8％±1.9％的一系列产品，Pluronic系列是BASF公司对工业级产品的命名。

泊洛沙姆分子式：H(C2H4O)a(C3H6O)b(C2H4O)cOH，其中a和c为2～130，b为15～67，含聚氧乙烯为81.8％±1.9％。平均分子量为1000～7000的应为标示量的90.0％～110.0％。平均分子量为7000

以上的应为标示量的80.0％～120.0％，结构式如下：

胆固醇又称胆甾醇。一种环戊烷多氢菲的衍生物(结构式如图)。

胆固醇是由留体部分和一条长的侧链组成。在纳米制剂中常作为稳定剂使用。

本发明是将泊洛沙姆和胆固醇通过小分子的脂肪酸连接，具有优良的表面活性作用，其载药能力大大提高。

发明内容

本发明是将泊洛沙姆(Pol)接枝于胆固醇(Cho)合成共聚物(PGC)，其结构为Pol-g-Cho，结构式如下：

其中泊洛沙姆为聚氧乙烯聚氧丙烯醚〔即a-氢-ω-羟聚(氧乙稀)a-聚(氧丙烯)b-聚(氧乙稀)c〕嵌段共聚物，分子式为：H(C2H4O)a(C3H6O)b(C2H4O)cOH；在共聚物中，a和c为2～130，b为15～67。含聚氧乙烯为81.8％±1.9％。平均分子量为1000～7000的应为标示量的90.0％～110.0％。平均分子量为7000以上的应为标示量的80.0％～120.0％。

n为整数，优选数字1～12。

本发明泊洛沙姆接枝修饰的共聚物，可以作为表面活性剂用来制备水溶液分散体比如：纳米乳剂，纳米脂质体；也可以作为载体成分之一用来制备能分散于水的胶束、固体脂质纳米粒或纳米粒。还可以作为长循环纳米、温度或PH敏感性纳米载体成分之一。

本发明泊洛沙姆接枝修饰的共聚物的制备方法，其特征在于：将3～10g胆固醇和0.1～1g 4-二甲胺基吡啶(DMAP)置于0.01～1ml二氯甲烷(或者DMF)中，搅拌，缓慢加入0.5～2.0g脂肪酸酐，氮气保护下反应2h，自然冷却后顺序加入100～150g泊洛沙姆和1.0～3.0g二环己基碳二亚胺(DCC)，缓慢搅拌24hr至1周，反应完成后旋转蒸发，产物以氯仿溶解，经乙醚沉淀得粗品；再经反复沉淀精制即得脂肪酸(氨基脂肪酸)泊洛沙姆胆固醇二酯。

本发明泊洛沙姆接枝修饰的共聚物的应用，其特征在于能够与疏水药物组合成纳米乳剂，纳米脂质体以及能分散于水的胶束或纳米粒，其中药物占0.001-30％，粒径在10～1000nm。

可以使用本发明泊洛沙姆接枝修饰的共聚物的疏水药物有：紫杉醇、多稀紫杉醇、布洛芬、阿霉素系列、替尼泊苷、依托泊苷、道诺霉素、丝裂霉素、甲氨蝶呤、丝裂霉素C、茚甲新、环孢菌素、前列地尔、丙泊酚、尼莫地平、异长春花碱、羟基喜树碱、阿糖胞苷、雷替曲塞、克拉霉素、伏立康唑、伊曲康唑、两性霉素B、卡泊、顺泊、奥沙利泊、奈达泊等。

本发明泊洛沙姆接枝修饰的共聚物与药物制成的制剂，其给药途径可以口服、注射、经皮或粘膜给药，现将制备方法介绍如下：

一、本发明泊洛沙姆接枝修饰的共聚物(PGC)，其与疏水药物组合制备成纳米乳剂的方法如下：

1、本发明的注射用亚纳米乳制剂，其制备方法如下：

a)将药物溶于适量溶剂中，加入脂肪酸甘油酯、甘油三酯、脂肪酸、PGC和磷脂，加热熔融制成油相，除去挥发性溶剂，甘油适量溶于适量水(PH10-11)中，于50～90℃高速搅拌制成水相，油水两相混合于50～90℃高速搅拌制成初乳剂，调节PH值4.5～8.0。

b)取上述(a)中初乳剂，注射用水定容至处方量，转移至高压乳匀机中，反复乳化。至乳滴平均粒径≤0.5微米。

C)取上述(b)的乳剂过滤后，充氮气灌装，灭菌既得。

2、本发明泊洛沙姆接枝修饰的共聚物(PGC)制成的纳米乳制剂，其制备方法如下：

a)将药物用适量溶剂溶解，加入PGC，加热熔融，再加入处方量的水(PH10-11)，充分搅拌，加入适量助表面活性剂(乙醇或丙二醇)得澄明或半澄明溶液，调节PH值4.0～9.0。

b)取上述(a)的微乳制剂除菌过滤后，充氮气灌装，灭菌既得。

口服乳剂中还可以含芳香剂和防腐剂，其中芳香剂包括橘子香精、香蕉香精、草莓香精、奶油香精中的一种或几种，防腐剂包括尼泊金酯类、苯甲酸类中的一种或几种。

二、本发明泊洛沙姆接枝修饰的共聚物(PGC)，其与疏水药物组合制备成胶束的制备方法如下：

a)将疏水药物和泊洛沙姆接枝修饰的共聚物、适量稳定剂如：聚乳酸与聚乙二醇的嵌段共聚物或聚氧乙烯-聚氨基酸共聚物用适量溶剂溶解，减压蒸去溶剂，加入处方量的水溶液，搅拌均匀，高速搅拌至乳滴平均粒径≤0.5微米。

b)取上述的乳剂过滤后，充氮气灌装，灭菌既得。

三、本发明泊洛沙姆接枝修饰的共聚物(PGC)，其与疏水药物组合制备成脂质体的方法如下：

a)将药物和泊洛沙姆接枝修饰的共聚物加入适量处方量的磷脂和胆固醇用适量溶剂溶解，减压蒸去溶剂，加入处方量的磷酸缓冲盐溶液，充分搅拌，形成多室脂质体。

b)取上述(a)中的多室脂质体，转移至高压乳匀机中，反复乳化。至乳滴平均粒径≤0.5微米。

C)取上述(b)的乳剂过滤后，充氮气灌装，灭菌既得。

四、本发明泊洛沙姆接枝修饰的共聚物(PGC)，其与疏水药物组合制备成钠米粒的方法如下：

a)将处方量的单硬脂酸甘油脂、脂肪酸、卵磷脂、泊洛沙姆胆固醇酯及药物加热熔融，加入处方量的注射用水(PH10-11)和甘露醇搅拌制成初乳，调节PH值4.5～8.0，再用高压均质机对初乳体系进行循环高压均质乳化至粒度符合规定。

b)上述乳剂过滤后，加入适量冻干保护剂低分子右旋糖苷，冷冻干燥充氮气压盖既得。

具体实施例

实施例一(亚纳米乳剂型)

组方1：紫杉醇0.01％～3.0％、共溶剂0.01％～5.0％、磷脂0.5％～6.0％、PGC1.0％～6.0％、甘油三酯5％～30％、甘油1.0％～6.0％、油酸1.0％～6.0％，注射用水添至100ml。

称取紫杉醇100-500mg溶于适量共溶剂(无水乙醇)1中，溶入15g甘油三酯和0.1-5g油酸中，于50℃～80℃高速搅拌使混合均匀，制成油相；蒸发除去乙醇；称取蛋黄卵磷脂1.0g、PGC1.0g、甘油3g，加入处方量的水于50℃～80℃高速搅拌使充分分散，制成水相。油水两相混合，于50℃～80℃高速搅拌制成初乳剂。取初乳剂，注射用水定容至处方量，调节PH值为5.0～7.0，转移至高压乳匀机中，反复乳化至乳滴平均粒径≤0.5微米，除菌过滤，充氮气灌装，灭菌既得。

实施例二(纳米微乳剂型)

组方1：阿霉素0.01％～2.0％、阿霉素共溶剂0.01％～5.0％、PGC2.0％～6.0％、助表面活性剂(无水乙醇、丙二醇)适量，注射用水添至100ml。

称取阿霉素100-500mg溶于阿霉素共溶剂(无水乙醇)中，加入PGC3.0g、丙二醇1.0g及适量水于20℃-80℃搅拌使混合均匀，不断搅拌，加适量无水乙醇滴定至呈半透明溶液，调节PH值为5.0～7.0，除菌过滤充氮气灌装，灭菌既得。

实施例三(胶束)

组方1：尼莫地平0.01％～2.0％、尼莫地平共溶剂0.01％～5.0％、PGC2.0％～6.0％、聚氧乙烯-聚氨基酸共聚物适量，注射用水添至100ml。

尼莫地平、PGC和聚氧乙烯-聚氨基酸共聚物用适量溶剂溶解，减压蒸去溶剂，加入处方量的水溶液，搅拌均匀，高速搅拌至乳滴平均粒径≤0.5微米，乳剂过滤后，充氮气灌装，灭菌既得。

实施例四(脂质体)

组方1：异长春花碱0.01％～2.0％、PGC1.0％～6.0％、卵磷脂2.0％～6.0％、胆固醇0.5％～2.0％、，注射用水添至100ml。

称取异长春花碱50-100mg、PGC1.0g、卵磷脂3.0g、胆固醇1.0g溶于溶于适量有机溶剂中，减压蒸去溶剂，加入处方量的磷酸缓冲盐溶液，充分搅拌，形成多室脂质体，转移至高压乳匀机中，反复乳化至乳滴平均粒径≤0.5微米，乳剂过滤后，充氮气灌装，灭菌既得。

实施例五(固体脂质纳米粒)

组方1：羟基喜树碱0.01％～2.0％、PGC1.0％～6.0％、单硬脂酸甘油酯1.0％～6.0％、脂肪酸1.0％～6.0％、卵磷脂2.0％～6.0％、甘露醇2.0％～6.0％，注射用水添至30ml。

a)将处方量的单硬脂酸甘油酯2.0g、脂肪酸1.0g、卵磷脂1.0g、PGC2.0g及羟基喜树碱100mg加热熔融，加入处方量的注射用水(PH10-11)和甘露醇5.0g搅拌制成初乳，调节PH值4.5～8.0，再用高压均质机对初乳体系进行循环高压均质乳化至粒度符合规定。

b)上述乳剂加入适量冻干保护剂低分子右旋糖苷，过滤后，冷冻干燥，充氮气压盖既得。

实施例六(血管刺激性试验)

试验药物：按照实施例(一、二、四、五)提供方法制备，羟基喜树碱注射液，从市场购得，试验时用0.9％氯化钠注射液配制成5％溶液。

试验动物：健康家兔，体重2.3～2.4kg。

试验方法：取健康家兔10只，雌雄各半。按体重及性别分为0.9％氯化钠注射液对照组、羟基喜树碱注射液组和实施例(一、二、四、五)组，每组2只，于家兔左耳耳缘按临床给药浓度静脉滴注10ml/kg，滴注速度1ml/分，每日1次，连续7日。对照组同法静脉滴注0.9％氯化钠注射液。除每次给药时及给药后观察给药局部表现外，于末次静脉滴注后剪下药侧耳廓，常规固定后，在距静脉滴注入针近心端1cm处，每隔1cm切取0.5cm宽标本，共取3块标本。切片染色，进行镜下病理观察，结果见下表：

血管刺激性试验

项目	兔耳廓血管扩张	红肿	有无炎细胞浸润
				0.9％氯化钠注射液对照组	-	-	-
羟基喜树碱注射液	++	++	+
				实施例一	-	-	-
实施例二	-	-	-
				实施例三	-	-	-
实施例四	-	-	-

备注：“++”严重、“+”少许、“-”无

以上试验结果表明，本发明制备的制剂具有刺激性小的优点。

Claims (5)

1、一类泊洛沙姆(Pol)接枝修饰的胆固醇共聚物，其特征在于这类共聚物包含泊洛沙姆(Pol)和胆固醇(Cho)，组成结构为Pol-g-Cho，其结构式如下：

其中泊洛沙姆为聚氧乙烯聚氧丙烯醚〔即a-氢-ω-羟聚(氧乙稀)a-聚(氧丙烯)b-聚(氧乙稀)c〕嵌段共聚物；在共聚物中，a和c为2～130，b为15～67。含聚氧乙烯为81.8％±1.9％。平均分子量为1000～7000的应为标示量的90.0％～110.0％。平均分子量为7000以上的应为标示量的80.0％～120.0％。

n为整数，优选数字1～12。

2、根据权利要求1中的泊洛沙姆接枝修饰的共聚物，其特征在于可以作为表面活性剂用来制备水溶液分散体比如：纳米乳剂，纳米脂质体；也可以作为载体成分之一用来制备能分散于水的胶束、固体脂质纳米粒或纳米粒；还可以作为长循环纳米、温度或PH敏感性纳米载体成分之一。

3、根据权利要求1中的泊洛沙姆接枝修饰的共聚物的制备方法，其特征在于：将3～10g胆固醇和0.1～1g 4-二甲胺基吡啶(DMAP)置于0.01～1ml二氯甲烷(或者DMF)中，搅拌，缓慢加入0.5～2.0g脂肪酸酐，氮气保护下反应2h，自然冷却后顺序加入100～150g泊洛沙姆和1.0～3.0g二环己基碳二亚胺(DCC)，缓慢搅拌24hr至1周，反应完成后旋转蒸发，产物以氯仿溶解，经乙醚沉淀得粗品；再经反复沉淀精制即得脂肪酸(氨基脂肪酸)泊洛沙姆胆固醇二酯。

4、根据权利要求2中的泊洛沙姆接枝修饰的共聚物的应用，其特征在于能够与疏水药物组合成纳米乳剂，纳米脂质体以及能分散于水的胶束、固体脂质纳米粒或纳米粒，其中药物占0.001-30％，粒径在10～1000nm。

5、根据权利要求4中的泊洛沙姆接枝修饰的共聚物与药物制成的制剂，其特征在于可以口服、注射、经皮或粘膜给药。