CN1875022B - 生育酚修饰的治疗性药物化合物 - Google Patents

Abstract

本发明提供了生育酚修饰的治疗性药物化合物；含有所述化合物的乳剂、微乳剂和胶束制剂；制造所述化合物和制剂的方法；所述化合物和制剂的给药方法；和使用所述化合物和制剂治疗疾病的方法。

Description

生育酚修饰的治疗性药物化合物

技术领域

本发明涉及新的治疗性药物；包含新的治疗性药物的组合物；给予和使用这些新的治疗性药物和组合物的方法。

背景技术

对哺乳动物给予在生物相容的溶剂中溶解性差的生物学上有效的药物的能力是药学和药物化学领域的主要障碍。特别是当活性药物既在水中不溶又在其它生物相容的溶剂中不稳定时，困难随之产生。

一种使药剂增溶的方法是对其进行化学修饰或将它们与另一分子连接以改变其在特定溶剂中的溶解度特性。通常称为前体药物的活性药物的结合物(conjugates)包括生物活性母体化合物的化学衍生物，该化学衍生物在体内转化为母体化合物。可通过例如水解或酶切割的方法从前体药物结合物中释放活性母体化合物。释放速率受一些因素影响，包括连接活性母体化合物和结合部分的化学键的类型。

其他人研究了掺入水溶性部分(例如，聚乙二醇、聚谷氨酸盐(polyglutamate)或聚合物)来增加药物的溶解度和循环周期。出于肿瘤靶向的目的而使用连接到与活性药物连接的脂肪酸作为改善治疗性指标(index)的方法也得到研究。

许多有效的药物，例如喜树碱及其类似物(例如，10-羟基喜树碱和7-乙基-10-羟基喜树碱)、紫杉烷(例如，紫杉醇、多烯紫杉醇(docetaxel))、坎地沙坦(candesartan)、两性霉素B、、环孢菌素、恩他卡朋(entacapone)、达那唑、依来曲普坦(eletriptan)和波生坦(bosentan)等的溶解性差或其细胞透过性差。潜在治疗剂的溶解度问题常见并延滞了药物的开发。业已开发了几种技术来帮助向患者输递溶解性差和不溶的化合物。特别设计来解决溶解度问题的技术的例子包括络合剂、纳米颗粒、微乳剂、溶解度增强制剂、前体药物和新颖的聚合物系统。

紫杉醇(见以下结构)，一种在太平洋红豆杉的内树皮中发现的天然产物，是一个重要的化疗剂的例子，它具有对实体肿瘤、原发性乳腺癌、卵巢癌、结肠癌和非小细胞肺癌具有广谱的活性。

紫杉醇通过结合微管蛋白和稳定微管从而阻断细胞有丝分裂来发挥其抗肿瘤活性。然而，与其它有效的生物活性分子一样，紫杉醇具有极其有限的水溶性。

喜树碱(CPT)(见以下结构)是溶解性差并难以配制为抗癌症药物的另一个例子。

CPT是在中国喜树(Chinese camptotheca tree)和亚洲青脆枝(Asiannothapodytes tree)的树皮中发现的喹啉-基的生物碱。CPT具有4个平面环(ABCD)和一个船式构象环(E)。发现CPT具有广谱的抗肿瘤活性，特别是在人实体肿瘤方面。然而，喜树碱及其衍生物的内酯(环E)在碱性条件和生理pH下极不稳定。该环打开形成酸盐或羧酸酯种类导致其抗癌症活性显著丧失。从20世纪60年代早期CPT被Wall和Wani发现以来，人们就致力于提高喜树碱及其类似物的抗癌症活性并降低其有害的毒性。由于其在水和有机溶剂中溶解度差，迄今为止未开发出成功的喜树碱制剂。然而，喜树碱的水溶性类似物，盐酸依立替康(irinotecan hydrochloride)(CAMPTOSAR)和盐酸拓扑替康(topotecanhydrochloride)(HYCAMPTIN)已开发出并且是当前食品和药品管理局唯一批准的喜树碱类似物。

近来开发了用于紫杉醇药物递送的基于维生素E(α-生育酚)的乳剂技术。在该制剂中，紫杉醇溶解于α-生育酚并配制为水包油乳剂。然而，尽管紫杉醇可溶于α-生育酚，其它活性部分(包括喜树碱和其它紫杉烷)在α-生育酚中的溶解性有限。因此，仍需要安全而有效的新方法来稳定并递送溶解性差的活性药物分子。

发明概述

本发明一方面提供经修饰以增加其亲脂性的治疗性药物化合物。本发明的化合物包含一种或多种治疗性药物部分和一种或多种亲脂性部分。治疗性药物部分直接或通过连接部分共价结合于亲脂性部分。也提供了用于制造修饰的治疗性药物的方法。

本发明的另一方面提供了含有本发明化合物的组合物。在一个实施方案中，该组合物包含一种本发明的化合物、任选含有一种或多种其它治疗剂和一种亲脂性介质。也提供了用于制造这种组合物的方法。

本发明的其它方面提供了含有本发明化合物的乳剂和胶束制剂。乳剂包括油相和水相。油相含有本发明的化合物和亲脂性介质。乳剂可是水包油乳剂或油包水乳剂。胶束制剂含有本发明的化合物和水相。也提供了用于制造乳剂和胶束制剂的方法。

在其它方面，也提供了将本发明的化合物给予需要它的受试对象的方法和通过给予本发明的化合物来治疗可治疗的疾病的方法。

附图简述

结合附图并参考以下详述，将更便于并更好地理解本发明上述各方面以及许多相关优点，其中：

图1显示了d-α-生育酚与含羧基的治疗性药物反应以产生生育酚修饰的治疗性药物化合物的流程；

图2显示了用碳酰氯基团(-C(＝O)Cl)和氯化磷基团(-P(＝O)OR₁Cl)使生育酚官能化，以及使得到的酰基氯和合适的官能化的治疗性药物化合物反应以提供生育酚修饰的治疗性药物化合物的流程；

图3显示了用二羧基酸酐(琥珀酐)使生育酚官能化，以及使得到的羧酸和合适的官能化的治疗性药物化合物反应以提供生育酚修饰的治疗性药物化合物的流程；

图4显示了生育酚琥珀酸酯喜树碱的制备流程；

图5显示了生育酚琥珀酸酯10-羟基喜树碱和生育酚琥珀酸酯7-乙基-10-羟基喜树碱的制备流程；

图6显示了10，20-二(生育酚琥珀酸酯)7-乙基-10羟基喜树碱的制备流程；

图7显示了含有聚(环氧乙烷)基团的生育酚琥珀酸酯喜树碱的制备流程；

图8显示了生育酚琥珀酸酯紫杉醇(paclitaxel)的制备流程；

图9显示了生育酚琥珀酸酯多烯紫杉醇(docetaxel)的制备流程；

图10显示了生育酚对苯二酸喜树碱的制备流程；

图11显示了生育酚环己烷-1，2-二羧酸酯7-乙基-10-羟基喜树碱的制备流程；

图12比较了内酯形式的喜树碱与本发明的两个代表性生育酚修饰的治疗性药物化合物(SN2300，生育酚琥珀酸酯喜树碱；和SN2310，生育酚琥珀酸酯7-乙基-10-羟基喜树碱)的体外稳定性；

图13比较了NCI报道的喜树碱、盐酸依立替康(依立替康)和盐酸拓扑替康(拓扑替康)与本发明的两个代表性生育酚修饰的治疗性药物化合物(SN2300和SN2310)对细胞系H460、HCT-116、HT29和OVCAR-3的GI₅₀值；

图14A和14B是静脉内注射13.8毫克/公斤本发明的两个代表性生育酚修饰的治疗性药物化合物(图14A，SN2300；和图14B，SN2310)后的浓度-时间图；和

图15A和15B是显示在两种不同的肿瘤模型中(图15A，NCI-H460；和图15B，HT-29)，在用盐水、依立替康和两个代表性的本发明生育酚修饰的治疗性药物化合物(SN2300和SN2310)处理的异种移植物(xenograph)中肿瘤随时间的生长(mm³)的图。

优选实施方案的详述

本发明一方面提供修饰以增加其亲脂性的治疗性药物化合物。本发明的化合物是修饰的治疗性药物。本发明的化合物包含治疗性药物部分和亲脂性部分。

在一些实施方案中，本发明的化合物含有一个以上的治疗性药物部分。在一些实施方案中，本发明的化合物含有一个以上的亲脂性部分。在其它实施方案中，本发明化合物含有一个以上的治疗性药物部分和一个以上的亲脂性部分。

在一些实施方案中，治疗性药物部分通过连接部分共价连接到亲脂性部分。在其它实施方案中，治疗性药物部分直接共价连接到亲脂性部分而无需连接部分。

在一个实施方案中，亲脂性部分是生育酚部分，化合物是生育酚修饰的治疗性药物化合物。生育酚修饰的治疗性药物化合物(或“生育酚化的”治疗性药物化合物)具有共价连接连接到一个治疗性药物部分的一个或多个生育酚部分或共价连接到一个或多个治疗性药物部分的一个生育酚部分。如上所述，生育酚部分可直接或通过连接部分共价连接到治疗性药物部分。

在一个实施方案中，本发明的生育酚修饰的药物化合物可以通式(1)表示：

(T-L)_n(T)_mD            (1)

其中T是生育酚部分(即，代表性亲脂性部分)；L是连接部分；n是0、1、2或3；m是0，1，2或3；n+m是1、2或3；D是治疗性药物部分。在该实施方案中，化合物含有n个T-L部分(即，生育酚-连接部分)和m个生育酚部分，前提是n+m是1、2或3。每个T-L部分含有共价连接到连接部分的生育酚部分。n个T-L部分中的每个经T-L部分的连接部分共价连接到治疗性药物部分。在该实施方案中，生育酚部分的每一个直接共价连接到治疗性药物部分而无需连接部分。

式(1)所示的代表性化合物包括其中n是0并且m是1、2或3的化合物。这些化合物具有通式：

TmD        (2)

在该实施方案中，一个、两个或三个生育酚部分直接共价连接到治疗性药物部分。

式(1)所示的代表性化合物包括其中m是0并且n是1、2或3的化合物。这些化合物具有通式：

(T-L)_nD        (3)

在该实施方案中，一个、两个或三个T-L部分经T-L部分的连接部分共价连接到治疗性药物部分。

式(1)所示的代表性化合物包括其中m是1或2并且n是1或2的化合物。这些化合物具有通式：

(T-L)(T)D     (4)

(T-L)(T)₂D    (5)

(T-L)₂(T)D    (6)

在这些实施方案中，本发明的化合物具有无需连接物直接共价连接到治疗性药物部分的生育酚部分和经连接物(即，T-L部分)共价连接到治疗性药物部分的生育酚部分。

上述本发明化合物含有一个治疗性药物部分和一个或多个亲脂性部分(即，生育酚部分)。在其它实施方案中，本发明化合物含有一个以上的治疗性药物部分。在一个实施方案中，这些化合物含有两个治疗性药物部分。在另一个实施方案中，这些化合物含有三个治疗性药物部分。就含有一个以上的治疗性药物部分的化合物而言，治疗性药物部分可相同或不同。

就含有一个以上的治疗性药物部分的化合物而言，可用任何合适的方法将治疗性药物部分掺入化合物。在一些实施方案中，治疗性药物部分可直接共价连接(例如，含有-D-D-或-D-D部分的化合物)。在其它实施方案中，治疗性药物部分可被连接部分所隔开(例如，含有-D-L-D-或-D-L-D部分的化合物)、被亲脂性部分所隔开(例如，含有-D-T-D-或-D-T-D部分的化合物)或被亲脂性-连接部分所隔开(例如，含有-D-T-L-D-、-D-T-L-D或-D-L-T-D部分；或者-D-L-T-L-D-或-D-L-T-L-D部分的化合物)。

含有两个或三个治疗性药物部分的代表性化合物具有通式：

(T-L)(D)_p      (7)

其中p是2或3。在该实施方案中，所述两个或三个治疗性药物部分共价连接到连接部分。在该例子中，连接物含有用于连接治疗性药物化合物(或修饰的治疗性药物化合物)的多个位点。如式(7)所清楚地显示的那样，连接部分也共价连接到亲脂性部分(例如，生育酚部分)。如上所述，含有一个以上的治疗性药物部分的本发明化合物可具有除上式(7)以外的其它结构式。例如，这种化合物可含有一个以上(例如，两个或三个)亲脂性(例如，生育酚)部分。

本发明的化合物含有直接共价连接或经连接部分共价连接的一个或多个亲脂性部分和一个或多个治疗性药物部分。

本文使用的术语“亲脂性部分”指具有亲脂性或疏水性特征的化学部分，当该部分共价连接到治疗性药物化合物以提供本发明的化合物时，可增加治疗性药物化合物在亲脂性溶剂或环境中的溶解性。下文描述了用于制造本发明化合物的代表性亲脂性部分。

本文使用的术语“治疗性药物部分”指衍生自治疗性药物化合物的化学部分。下文描述了用于制造本发明化合物的代表性治疗性药物化合物。

本文使用的术语“连接部分”指共价连接到，例如亲脂性部分和治疗性药物部分的一个原子或原子构成的基团上。下文描述了用于制造本发明化合物的代表性连接物。

治疗性药物化合物的亲脂性修饰

治疗性药物化合物可具有一个或多个合适的官能团，或可被修饰成包括一个或多个合适的官能团，用于共价连接到亲脂性部分。合适的官能团包括，例如以下基团：羟基(-OH)、氨基(伯氨基，-NH2；或仲氨基，-NHR₁，其中R₁独立选自H、C_1-6正烷基、C_3-12支链烷基、取代或未取代的C_3-6环烷基、取代或未取代的芳基或芳烷基)、硫醇基团(-SH)、羧基(-COOH)、醛基(-CHO)、异氰酸根基团(-N＝C＝O)、磺酸基团(-SO₃H)、硫酸基团(-OSO₃H)、磷酸基团(-OPO₃H)、膦酸基团(-PO₃H₂)、烯丙基卤化物(allylic halide)基团、苄基卤化物(benzylic halide)基团、取代的苄基卤化物基团和环氧乙基(oxiranyl)(-CH(O)CH₂)。

治疗性药物化合物可通过以下基团直接连接到亲脂性部分(例如，生育酚部分)：酯基(-C(＝O)O-)、氨基甲酸酯基团(-OC(＝O)NH-)、磺酸酯基团(-SO₃-)、硫酸酯基团(-OSO₃-)、磷酸酯基团(-OPO₃R₁-，其中R₁独立选自H、C_1-6正烷基、C_3-12支链烷基、取代或未取代的C_3-6环烷基、取代或未取代的芳基或芳烷基)、膦酸酯基团(-PO₃R₁-，其中R1独立选自H、C_1-6正烷基、C_3-12支链烷基、取代或未取代的C_3-6环烷基、取代或未取代的芳基或芳烷基)或醚基团(-O-)。

生育酚化合物，一种适合于制造本发明化合物的代表性亲脂性化合物，含有羟基(-OH)。修饰后，生育酚化合物可共价连接到含有一个或多个反应性官能团的连接化合物上。合适的反应性官能团包括以下基团：羟基(-OH)、氨基(伯氨基，-NH2；或仲氨基，-NHR₁，其中R₁独立选自H、C_1-6正烷基、C_3-12支链烷基、取代或未取代的C_3-6环烷基、取代或未取代的芳基或芳烷基)、硫醇基团(-SH)、羧基(-C(＝O)OH)、醛基(-CHO)、异氰酸根基团(-N＝C＝O)、磺酸基团(-SO₃H)、硫酸基团(-OSO₃H)、磷酸基团(-OPO₃H)、膦酸基团(-PO₃H₂)、烯丙基卤化物基团、苄基卤化物基团、取代的苄基卤化物基团和环氧乙基(-CH(O)CH₂)。

连接部分

如上所述，在一些实施方案中，本发明的化合物含有通过连接部分共价连接到治疗性药物部分的亲脂性部分(例如，生育酚部分)。除上述实施方案以外，本发明的生育酚修饰的治疗性药物化合物可以通式(8)表示：

T-A-R-A’-D    (8)

其中T是生育酚部分(即，代表性的亲脂性部分)，D是治疗性药物部分，A-R-A’是连接部分。应该理解的是，就其中每个含有连接部分的以上式(1)和(3)-(7)而言，在那些化合物中的连接部分L可是连接部分A-R-A’。

在式8中，基团A和A’独立选自O、S、SO、SO₂、NR₁、羧酸酯基团(-C(＝O)O-)、酰胺基团(-C(＝O)NR₁-)、酸酐基团(-C(＝O)OC(＝O)-)、氨基甲酸酯基团(-OC(＝O)NH-)、碳酰二氧基(-OC(＝O)O-)、次脲基(-NR₁C(＝O)NR₂-)、磷酸酯基(-OP(＝O)(OR₁)O-)、磷酰胺基团(-OP(＝O)(NR₁)O-)、膦酸酯基团(-OP(OR₁)O-)、膦酰胺(phosphonamide)基团(-OP(＝O)NR₁-)、硫酸酯基团(-OSO₂O-)、硫酰胺基团(-SO₂NR₁-)、磺酸酯基团(-SO₃-)、磺酰胺基团(-SO₂NR₁-)和二羰基，-C(＝O)R₃C(＝O)-，其中R₃不存在或是二价烷基(例如，-(CH₂)_n-，n＝1-12)、取代的烷基、支链烷基、环烷基、取代的环烷基、芳基、取代的芳基。就以上基团而言，R是选自以下基团的二价基团：烷基；取代烷基；支链烷基；环烷基；取代的环烷基；杂烷基；取代的杂烷基；芳基；取代的芳基；芳烷基；取代的芳烷基；氨基酸；肽；多肽；蛋白质；单-、二或多糖；乙二醇的寡聚物，聚(乙二醇)；聚(烯化氧)聚合物，例如聚(环氧乙烷)和聚(环氧丙烷)；和聚(环氧乙烷)-聚(环氧丙烷)共聚物。就以上基团而言，R₁和R₂独立选自Na⁺、K⁺、H、C_1-6正烷基、C_3-12支链烷基、取代或未取代的C_3-6环烷基、取代或未取代的芳基和取代或未取代的芳烷基。

本文使用的术语“芳基”指具有6-14个碳原子或杂原子的单环和多环芳香族化合物，并且包括碳环芳基和杂环芳基。代表性的芳基包括苯基、萘基、吡啶基、嘧啶基、噻唑基、吲哚基、咪唑基、呋喃基等。术语“芳烷基”指用芳基取代的烷基。

以下化合物(化合物9-32)是式8所示化合物的代表性例子。

连接部分(L)和治疗性药物部分(D)可经酯基团共价相连。在一个实施方案中，治疗性药物部分含有与连接部分的羧基相连的羟基。连接部分可经醚基团(化合物9)、酯基团(化合物10)、胺基团(化合物11)或酰胺基团(化合物12)连接到生育酚部分上。

在另一个实施方案中，治疗性药物部分(D)含有与连接部分(L)的羟基相连的羧基。连接部分可经醚基团(化合物13)、酯基团(化合物14)、胺基团(化合物15)或酰胺基团(化合物16)连接到生育酚部分。

在以上化合物中，二价基团R选自：烷基；取代烷基；支链烷基；环烷基、取代的环烷基；杂烷基；取代的杂烷基；芳基；取代的芳基；芳烷基；取代的芳烷基；氨基酸；肽；多肽；蛋白质；单-、二或多糖；乙二醇的寡聚物，聚(乙二醇)；聚(烯化氧)聚合物，例如聚(环氧乙烷)和聚(环氧丙烷)；和聚(环氧乙烷)-聚(环氧丙烷)共聚物。在以上化合物中，R₁选自H、C_1-6正烷基、C_3-12支链烷基、取代或未取代的C_3-6环烷基、取代或未取代的芳基和取代或未取代的芳烷基。

尽管已说明并描述了本发明的优选实施方案，应该理解的是可做出各种改变而不脱离本发明的构思和范围。连接部分(L)和治疗性药物部分(D)可经酰胺基团共价相连。在一个实施方案中，治疗性药物部分含有与连接部分的羧基相连的胺基团。连接部分可经醚基团(化合物17)、酯基团(化合物18)、胺基团(化合物19)或酰胺基团(化合物20)连接到生育酚部分。

在以上化合物中，二价基团R选自：烷基；取代烷基；支链烷基；环烷基、取代的环烷基；杂烷基；取代的杂烷基；芳基；取代的芳基；芳烷基；取代的芳烷基；氨基酸；肽；多肽；蛋白质；单-、二或多糖；乙二醇的寡聚物，聚(乙二醇)；聚(烯化氧)聚合物，例如聚(环氧乙烷)和聚(环氧丙烷)；和聚(环氧乙烷)-聚(环氧丙烷)共聚物。在以上化合物中，R₁和R₂独立选自H、C_1-6正烷基、C_3-12支链烷基、取代或未取代的C_3-6环烷基、取代或未取代的芳基和取代或未取代的芳烷基。

连接部分(L)可经醚基团(化合物21)或胺基团(化合物22)共价连接到治疗性药物部分(D)。在一个实施方案中，治疗性药物部分含有羟基，在另一个实施方案中，治疗性药物部分含有胺基团。连接部分可经醚基团连接到生育酚部分。

在以上化合物中，R₁选自H、C_1-6正烷基、C_3-12支链烷基、取代或未取代的C_3-6环烷基、取代或未取代的芳基或芳烷基。

生育酚部分(T)可经碳酰二氧基(-OC(＝O)O-)(化合物23)共价连接到治疗性药物部分(D)。在该情况中，连接部分是碳酰二氧基，治疗性药物部分含有羟基。

生育酚部分(T)可经酸酐基团(-C(＝O)OC(＝O)-)共价连接到治疗性药物部分(D)。在一个实施方案中，治疗性药物部分含有与连接部分的羧基偶联的羧基。连接部分可经醚基团(化合物24)、酯基团(化合物25)、胺基团(化合物26)或酰胺基团(化合物27)连接到生育酚部分。

在以上化合物中，二价基团R选自：烷基；取代烷基；支链烷基；环烷基、取代的环烷基；杂烷基；取代的杂烷基；芳基；取代的芳基；芳烷基；取代的芳烷基；氨基酸；肽；多肽；蛋白质；单-、二或多糖；乙二醇的寡聚物，聚(乙二醇)；聚(烯化氧)聚合物，例如聚(环氧乙烷)和聚(环氧丙烷)；和聚(环氧乙烷)-聚(环氧丙烷)共聚物。在以上化合物中，R选自H、C_1-6正烷基、C_3-12支链烷基、取代或未取代的C_3-6环烷基、取代或未取代的芳基和取代或未取代的芳烷基。

生育酚部分(T)可经磷酸酯、磷酰胺或硫代磷酸酯基团(化合物28)与治疗性药物部分(D)共价相连。

在以上化合物中，X是O、NR₂或S；X₁是O、NR₃或S；R₁选自Na⁺、K⁺、H、C_1-6正烷基、C_3-12支链烷基、取代或未取代的C_3-6环烷基、取代或未取代的芳基、或芳烷基；R₂和R₃独立地选自C_1-6正烷基、C_3-12支链烷基、取代或未取代的C_3-6环烷基、取代或未取代的芳基或芳烷基。

生育酚部分(T)可经硫酸酯、硫代硫酸酯或磺酰胺基团(化合物29)与治疗性药物部分(D)共价相连。

在以上化合物中，X是O、NR₁或S；R₁选自H、C_1-6正烷基、C_3-12支链烷基、取代或未取代的C_3-6环烷基、取代或未取代的芳基或芳烷基。

生育酚部分(T)可经次脲基(-NHC(＝O)NH-)(化合物30)与治疗性药物部分(D)共价相连。

在以上化合物中，R₁和R₂独立选自H、C_1-6正烷基、C_3-12支链烷基、取代或未取代的C_3-6环烷基、取代或未取代的芳基或芳烷基。

生育酚部分(T)可经氨基甲酸酯基团(-NR₁C(＝O)O-或-OC(＝O)NR₂-，分别为化合物31和32)与治疗性药物部分(D)共价相连。

在以上化合物中，R₁和R₂独立选自H、C_1-6正烷基、C_3-12支链烷基、取代或未取代的C_3-6环烷基、取代或未取代的芳基或芳烷基。

亲脂性部分

本发明的化合物含有一个或多个亲脂性部分。亲脂性部分增加了化合物在亲脂性溶剂或环境中的溶解度。在一个实施方案中，亲脂性部分是生育酚部分。

本文使用的术语“生育酚部分”指衍生自天然或合成的化合物，也根据其属名称为母育酚或维生素E家族的化学部分。除了生育酚化合物以外，生育三烯酚也包括在此家族内。这些化合物包括具有酚醇(C-6)的苯并二氢吡喃头和植基尾(C-2)。这些化合物具有以下通式：

生育酚构成一系列相关的苯并吡喃醇(benzopyranols)(或甲基母育酚)，其中C-2植基(16碳)侧链是饱和的。代表性的生育酚包括α-生育酚(d-形、d1-形、1-形)、β-生育酚(d-形、d1-形、1-形)、γ-生育酚(d-形、d1-形、1-形)和δ-生育酚(d-形、d1-形、1-形)。其中α-生育酚是最丰富的。除了三烯甘油酯在C-2植基侧链中具有3个双键之外，生育三烯酚在结构上与生育酚相似。

用于制造本发明化合物的生育酚和生育三烯酚化合物包括以下所示的化合物。

生育酚

生育三烯酚

化合物	R<sub>1</sub>	R<sub>2</sub>	R<sub>3</sub>
				α	CH<sub>3</sub>	CH<sub>3</sub>	CH<sub>3</sub>
β	CH<sub>3</sub>	H	CH<sub>3</sub>
				γ	H	CH<sub>3</sub>	CH<sub>3</sub>
δ	H	H	CH<sub>3</sub>

如上所述，术语“生育酚”指以上生育酚家族的任何成员。

治疗性药物部分

本发明的化合物可含有一个或多个治疗性药物部分。事实上，具有合适的官能团或可被修饰为含有合适的官能团的任何治疗性药物化合物可共价连接到亲脂性化合物上以提供本发明的化合物。代表性的官能团包括，例如以下基团：羟基(-OH)、氨基(伯氨基，-NH2；或仲氨基，-NHR)、硫醇基团(-SH)、羧基(-COOH)、醛基(-CHO)、异氰酸根基团(-N＝C＝O)、磺酸基团(-SO₃H)、硫酸基团(-OSO₃H)、磷酸基团(-OPO₃H)、膦酸基团(-PO₃OR₁R₂，其中R₁和R₂独立选自H、C_1-6正烷基、C_3-12支链烷基、取代或未取代的C_3-6环烷基、取代或未取代的芳基或芳烷基)、烯丙基卤化物基团、苄基卤化物基团、取代的苄基卤化物基团和环氧乙基(-CH(O)CH₂)。

虽然本发明的生育酚修饰物特别适用于配制和输递水不溶的化合物，但是用于制造本发明化合物的治疗性药物化合物无需是基本上水不溶的。

在一个实施方案中，治疗性药物部分衍生自基本上不溶于水的治疗性化合物。在另一个实施方案中，治疗性药物部分衍生自基本上不溶于有机溶剂的治疗性化合物。在另一个实施方案中，治疗性药物部分衍生自基本上不溶于水和基本上不溶于有机溶剂的治疗性化合物。在一个实施方案中，治疗性药物化合物在室温下的水溶解度低于约1000微克/毫升。在一个实施方案中，治疗性药物化合物在室温下的水溶解度低于约500微克/毫升。在一个实施方案中，治疗性药物化合物在室温下的水溶解度低于约100微克/毫升。在一个实施方案中，治疗性药物化合物在室温下的水溶解度低于约25微克/毫升。

用于制造本发明化合物的代表性治疗性化合物药物包括抗癌化合物(例如，紫杉醇及其衍生物，包括多烯紫杉醇；喜树碱及其衍生物，包括7-乙基-10-羟基喜树碱(SN38)和10-羟基喜树碱和阿霉素及其衍生物)、抗真菌化合物(例如，氟康唑(flucanazole))、抗菌化合物(例如，青霉素G、青霉素V)、抗高血压化合物(例如，肼苯达嗪、坎地沙坦和卡维地洛)、抗炎化合物(例如，伊索昔康)、抗糖尿病化合物(例如，二甲双胍)、抗病毒化合物(例如，拉夫米定(lamivudine))、抗抑郁化合物(例如，氟西汀(fluoxetine))、抗组胺化合物(例如，羟嗪)、抗心率失常化合物(例如，盐酸普鲁卡因胺)、抗抗高脂蛋白血症化合物(例如，普罗布考)、用于恢复健康的化合物(例如，达那唑)与治疗帕金森疾病的化合物(例如，拉扎贝胺(lazabemide))和治疗免疫抑制的化合物(例如，咪唑巯嘌呤和环孢菌素)和治疗呼吸道疾病和病症的化合物(例如，波生坦)。其它可按照本发明修饰的治疗有用的生物物质包括生物活性蛋白质、酶和肽。

在一个实施方案中，治疗性药物部分衍生自抗癌化合物。代表性的抗癌治疗性化合物包括紫杉烷。紫杉烷包括任何抗有丝分裂的紫杉烷、紫杉烷衍生物或类似物。本文使用的术语“紫杉烷”指紫杉烷、紫杉碱和taxoid以及它们的衍生物或类似物。

紫杉醇及其衍生物和类似物是紫杉烷家族的成员。紫杉醇衍生物包括，例如紫杉醇的苯甲酸衍生物，如2-脱苯甲酰基-2-芳酰基和C-2-乙酸基-C-4-苯甲酸酯紫杉醇、7-脱氧紫杉醇、C-4氮丙啶紫杉醇以及与天然和合成的聚合物，特别是脂肪酸、磷脂、甘油酯和1，2-二酰氧基丙烷-3-胺形成的各种结合物。其它紫杉醇衍生物包括多烯紫杉醇；蛇鞭菊种素；与丙酮、乙酸酯形成的紫杉烷-2，13-二酮，5β，9β，10β-三羟基-，环形9，10-乙缩醛；与丙酮形成的紫杉烷-2，13-二酮，5β，9β，10β-三羟基-，环形9，10-乙缩醛；与丙酮形成的紫杉烷-2β，5β，9β，10β-四醇，环形9，10-乙缩醛；紫衫烷；三尖杉宁碱-7-木糖苷；7-表-10-脱乙酰基三尖杉宁碱；10-脱乙酰基三尖杉宁碱；三尖杉宁碱；紫杉醇B；13-(2′，3′-二羟基-3′苯基丙酰基)浆果赤霉素III；云南杉醇(yunnanxol)；7-(4-叠氮基苯甲酰基)浆果赤霉素III；N-脱苯甲酰基紫杉醇A；O-乙酰基浆果赤霉素IV；7-(三乙基甲硅烷基)浆果赤霉素III；7，10-二-O-[(2，2，2，-三氯乙氧基)羰基]浆果赤霉素III；浆果赤霉素III 13-O-乙酸酯；浆果赤霉素二乙酸酯；浆果赤霉素；浆果赤霉素VII；浆果赤霉素VI；浆果赤霉素IV；7-表-浆果赤霉素III；浆果赤霉素V；浆果赤霉素I；浆果赤霉素III；浆果赤霉素A；10-脱乙酰基-7-表紫杉醇；表紫杉醇(epitaxol)；10-脱乙酰基紫杉醇C；7-木糖基-10-脱乙酰基紫杉醇、10-脱乙酰基紫杉醇-7-木糖苷；7-表-10-脱乙酰基紫杉醇；10-脱乙酰基紫杉醇；或10-脱乙酰基紫杉醇B。

其它用于制造本发明化合物的抗癌化合物包括喜树碱及其衍生物，包括7-乙基-10-羟基喜树碱(SN38)和10-羟基喜树碱，与阿霉素及其衍生物。

在某些实施方案中，治疗性药物部分衍生自紫杉醇、多烯紫杉醇、喜树碱或它们的衍生物。

就式(2)(m＝1)、式(3)(n＝1)和式8所示化合物而言，某些化合物排除在外并且不在本发明的范围内。当连接部分是2-羟基丙烯(-CH₂CH(OH)CH₂-)时，治疗性药物部分不是α-氨基酸(例如，甘氨酸、丙氨酸、脯氨酸、半胱氨酸、氨基丁酸、天冬氨酸、谷氨酸)、ω-氨基酸(例如，β-丙氨酸、γ-氨基丁酸、ε-氨基己酸、2-氨基乙磺酸(牛磺酸))或含有通过其N-末端或硫醇基团相连的半胱氨酸残基的肽(例如，-谷胱甘肽)。当连接部分是琥珀酸酯时，治疗性药物部分不是与脂族琥珀酸碳中的一个相连的S-连接的氨基或氨基酸化合物。当连接部分是琥珀酸酯时，治疗性药物部分不是阿魏酸或其酯。

另一方面提供了制造本发明化合物的方法。将亲脂性化合物(例如，生育酚化合物)共价连接到治疗性药物化合物以形成本发明的化合物有许多方法。在一个实施方案中，代表性的生育酚，d-α-生育酚，含有可直接连接到治疗性药物的羧基以形成生育酚修饰的治疗性药物化合物的羟基。从含有羧酸的治疗性药物化合物制备代表性的生育酚修饰的本发明治疗性化合物示于图1。

在另一个实施方案中，可用试剂在生育酚的羟基加上活性基团，例如氯化磷(-P(O)OR₁Cl)、膦酰氯(-P(O)R₁Cl)、磺基氯(sulfonic chloride)(-SO₂Cl)或碳酰氯(carbonyl chloride)(-COCl)使之官能化。得到的酰基氯然后可与合适的官能化的治疗性药物化合物反应以提供生育酚修饰的治疗性药物化合物。

在图2中，X是O、S或NH；R₁独立选自H、C_1-6正烷基、C_3-12支链烷基、取代或未取代的C_3-6环烷基、取代或未取代的芳基和取代或未取代的芳烷基。

在另一个实施方案中，可用二羧酸、酯或酸酐试剂使生育酚在羟基处官能化。用于加羧基(-COOH)的合适的试剂包括琥珀酸酐、1，2-环己烷二羧酸酐、2，3-二甲基琥珀酸酐、3，3-四亚甲基戊二酸酐、戊二酸酐、马来酸酐、邻苯二甲酸酐、对苯二甲酸或间苯二甲酸。得到的羧基可直接与合适官能化的治疗性药物反应或者羧基可转化为更具活性的碳酰氯基团(-COCl)，然后碳酰氯基团可与治疗性药物的官能团相连以形成图3所示的生育酚修饰的治疗性药物化合物。在图3中，X是O、S、NH或C(＝O)O。

在另一个实施方案中，连接可连接到生育酚的羟基，然后治疗性药物可连接到连接物的可接近官能团上。官能团可是，例如(但不限于)羧基(-COOH)、聚(环氧乙烷)基团(-(CH₂CH₂O)_n-H)、醛基(-CHO)、异氰酸根基团(-N＝C＝O)、磷酸基团(-OPO₃H₂)或氯化磷基团(-OPO₂R₁Cl，其中R₁是取代或未取代的烷基或环烷基、取代或未取代的芳基或是芳烷基)、膦酰氯基团(-PO₂RCl，其中R₁是取代或未取代的烷基或环烷基、取代或未取代的芳基或是芳烷基)、硫酸基团(-OSO₃H₂)、氯硫酸基团(-SO₃Cl)或环氧乙基(-CH(O)CH₂)。

代表性的本发明生育酚修饰的治疗性药物化合物的合成示于图4-11并描述于实施例1-13。

图4描述了生育酚琥珀酸酯喜树碱化合物的制备。生育酚琥珀酸(维生素E琥珀酸)具有可与羟基、氨基、硫醇基团或碳酰氯的基团连接以形成生育酚修饰的治疗性药物的游离羧基，所述药物具有琥珀酸酯基团作为连接。在图4中，生育酚酸琥珀酸酯与喜树碱的羟基偶联。生育酚琥珀酸酯喜树碱的制备描述于实施例1。

图5描述了生育酚琥珀酸酯10-羟基喜树碱和生育酚琥珀酸酯7-乙基-10-羟基喜树碱(SN38)的制备。生育酚琥珀酸转化为对应的酰基氯，然后与10-羟基喜树碱或7-乙基-10-羟基喜树碱(SN38)反应。生育酚琥珀酸酯10-羟基喜树碱和生育酚琥珀酸酯7-乙基-10-羟基喜树碱的制备分别描述于实施例2和3。

图6描述了含有一个治疗性药物(SN38)部分、两个生育酚部分和两个连接部分(琥珀酰基团)的10，20-二(生育酚琥珀酸酯)SN38的制备。10，20-二(生育酚琥珀酸酯)SN38的制备描述于实施例4。

合适的连接部分可包括寡聚物或聚合物，例如肽、多肽、蛋白质、单-、二-或多糖、乙二醇的寡聚物、聚(乙二醇)、聚(烯化氧)聚合物、如聚(环氧乙烷)和聚(环氧丙烷)、和聚(环氧乙烷)-聚(环氧丙烷)共聚物。图7描述了含有连接部分的生育酚修饰的喜树碱的制备，所述连接物含有聚(烯化氧)基团。含有包括聚(烯化氧)基团的连接部分的生育酚琥珀酸酯喜树碱的制备描述于实施例5。

图8描述了生育酚琥珀酸酯紫杉醇的制备。在制备过程中，生育酚琥珀酸转化为对应的酰基氯，然后与紫杉醇反应。生育酚琥珀酸酯紫杉醇的制备描述于实施例6。图9描述了生育酚琥珀酸酯多烯紫杉醇的制备。生育酚琥珀酸酯多烯紫杉醇的制备描述于实施例7。

图10描述了生育酚对苯二甲酸酯喜树碱的制备。在制备过程中，生育酚首先与对苯二甲酸酯相连形成生育酚对苯二甲酸酯(实施例9)，然后与喜树碱偶联以形成生育酚对苯二甲酸酯喜树碱。生育酚对苯二甲酸酯喜树碱的制备描述于实施例10。

图11描述了生育酚环己烷-1，2-二羧酸酯SN38的制备。生育酚环己烷-1，2-二羧酸酯SN38的制备描述于实施例11。

生育酚琥珀酸酯阿霉素和生育酚琥珀酸酯羟嗪的制备分别描述于实施例12和13。

本发明的另一方面提供了包含本发明化合物的组合物。这些组合物包含一种或多种本发明的化合物、任选的一种或多种额外的治疗性药物和亲脂性介质。在一个实施方案中，生育酚修饰的治疗性药物化合物溶解于亲脂性介质。由于亲脂性部分的存在，与未修饰的治疗性药物化合物相比，该化合物的亲脂性有所改善。组合物的亲脂性介质(或载体)可为各种亲脂性介质，包括，例如油。在一个实施方案中，亲脂性介质包括生育酚(例如，α-生育酚)。用作亲脂性介质的代表性的油包括以下物质；

脂肪酸及其酯，包括各种链长(大多数是直链的，但也可是支链)的羧酸，其例子包括癸酸、辛酸、己酸、月桂酸、肉豆蔻酸、硬脂酸、油酸、亚油酸、山萮酸以及饱和或不饱和的脂肪酸及其酯；

与甘油酯化以形成单-、二-或甘油三酯的合成或天然来源的脂肪酸，包括(但不限于)，例如甘油酯，诸如豆油、棉籽油、油菜籽油、鱼油、蓖麻油、CapmulMCM、Captex 300、Miglyol 812、一油酸甘油酯、三醋精、乙酰化的单甘油酯、硬脂精、山嵛酸甘油酯和单酸甘油酯的二乙酰基酒石酸酯；

与其它部分相连的甘油酯，所述其它部分例如是聚乙二醇(如Labrasol、Labrafac、Cremophor EL)；

天然或合成的磷脂，例如二肉豆蔻基磷脂酰胆碱、卵磷脂和peg化的磷脂；

包括脂肪醇(肉豆蔻酸肉豆蔻酯、棕榈酸异丙酯)或糖(脱水山梨聚糖单油酸酯、SPAN 80、Tween 80、蔗糖月桂酸酯)的其它脂肪酯；

诸如十八烷醇、月桂醇、苄醇的脂肪醇或其酯或其醚，例如苯甲酸苄酯；

脂溶性维生素及衍生物，例如维生素E(包括所有生育酚和生育三烯酚，以及生育酚和生育三烯酚衍生物，如维生素E琥珀酸酯、维生素E乙酸酯和维生素E琥珀酸酯聚乙二醇(TPGS))。

任选与水组合的有机助溶剂也可用于组合物中，包括，例如乙醇、聚乙二醇、丙二醇、甘油、N-甲基吡咯烷酮和二甲基亚砜。

实施例14比较了两个代表性的本发明生育酚修饰的喜树碱化合物和喜树碱的在一些介质中的溶解性。

本发明的其它方面提供了含有本发明化合物的乳剂、微乳剂和胶束制剂。也提供了用于制造乳剂、微乳剂和胶束制剂的方法。

本文使用的术语“乳剂”指两种不混溶的液体，例如滴状形式的油和水的胶状分散体，每一滴的直径一般是0.1和3.0微米之间，除非分散相和连续相的折射率匹配，乳剂通常不透明。这种系统的稳定性有限，一般受限于应用或相关的参考系统，加入两性分子或粘度增强剂可提高其稳定性。

术语“微乳剂”指热力学稳定的两种不混溶液体，例如油和水的各向同性的清澈分散体，由表面活性剂分子的界面膜使其稳定。微乳剂滴的平均直径小于200nm，一般在10-50nm之间。在不含水时，油和非离子表面活性剂的混合物形成称为自乳化药物递送系统(SEDDS)的清澈且各向同性的溶液，并且该系统可用于改善亲脂性药物的溶解和口服吸收。

乳剂和微乳剂含有油相和水相。乳剂或微乳剂可是水包油乳剂或油包水乳剂。油相含有一种或多种本发明化合物和如上所述的亲脂性介质。在一个实施方案中，以制剂的总重量计，制剂中存在的化合物的量是约0.005-3.0重量％。在一个实施方案中，以制剂的总重量计，制剂中存在的化合物的量是约0.01-2.5重量％。在一个实施方案中，以制剂的总重量计，制剂中存在的化合物的量是约0.1-1.5重量％。在一个实施方案中，以制剂的总重量计，制剂中存在的亲脂性介质的量是约2-20重量％。在一个实施方案中，以制剂的总重量计，制剂中存在的亲脂性介质的量是约4-12重量％。在一个实施方案中，以制剂的总重量计，制剂中存在的亲脂性介质的量是约6-10重量％。

在乳剂或微乳剂的一个实施方案中，化合物是生育酚修饰的治疗性药物化合物，亲脂性介质含有生育酚，水性介质是水。

除本发明的化合物以外，乳剂或微乳剂可含有通常用于乳剂和微乳剂中，特别是用于药物乳剂和微乳剂中的其它组分。这些组分包括表面活性剂和助溶剂等。代表性的表面活性剂包括非离子表面活性剂，例如表面活性的生育酚衍生物和表面活性的聚合物。

合适的表面活性的生育酚衍生物包括生育酚聚乙二醇衍生物，例如维生素E琥珀酸酯聚乙二醇(例如，d-α-生育酚聚乙二醇1000琥珀酸酯，TPGS)，该物质是一种维生素E衍生物，其中聚乙二醇通过琥珀酸酯连接在维生素E的环羟基上。本文使用的术语“维生素E琥珀酸酯聚乙二醇”包括维生素E琥珀酸酯聚乙二醇和具有各种酯和醚键的维生素E聚乙二醇的衍生物。TPGS是非离子表面活性剂(HLB＝16-18)。TGPS据报道可抑制造成多药抗性的P-糖蛋白。因此，含有TPGS的本发明制剂的具体形式包含P-糖蛋白抑制剂。以制剂的总重量计，本发明制剂中可存在约1-10重量％、约2-6重量％或约5重量％的表面活性的生育酚衍生物(例如，TPGS)。

合适的非离子表面活性剂包括称为POLOXAMERS或PLUROINICS的环氧乙烷和环氧丙烷的嵌段共聚物。这些合成的嵌段共聚物具有以下通式：H(OCH₂CH₂)_a(OC₃H₆CH₂)_b(OCH₂CH₂)_aOH。以下基于a和b的数值的变体可以PLURONIC的商品名购自BASF Performance Chemicals(Parsippany，New Jersey)并由CTFA指定名为POLOXAMER 108、188、217、237、238、288、338、407、101、105、122、123、124、181、182、183、184、212、231、282、331、401、402、185、215、234、235、284、333、334、335、和403的表面活性剂所构成。就最常用的POLOXAMERS 124、188、237、338和407而言，a和b的数值分别是12/20、79/28、64/37、141/44和101/56。在一个实施方案中，以制剂的总重量计，制剂中存在约0.5-5重量％的非离子表面活性剂。

用于制剂中的助溶剂包括乙醇、聚乙二醇、丙二醇、甘油、N-甲基吡咯烷酮、二甲酰胺和二甲基亚砜等。聚乙二醇(PEG)是乙二醇的亲水性聚合形式，由化学结构：(-CH₂CH₂O-)所示的重复单元构成。聚乙二醇的通式是H(OCH₂CH₂)_nOH。其分子量范围是200-10,000。各种形式由其分子量表示，例如PEG-200、PEG-300、PEG-400等。

紫杉醇乳剂和其组分描述于每篇均明确地全文纳入本文作为参考的美国专利号6,458,173和6,660,286。

实施例15描述了含有生育酚修饰的治疗性药物化合物(例如，生育酚琥珀酸酯多烯紫杉醇、生育酚琥珀酸酯紫杉醇、生育酚琥珀酸酯喜树碱、生育酚琥珀酸酯7-乙基-10-羟基喜树碱和生育酚琥珀酸酯10-羟基喜树碱)的代表性乳剂。实施例16描述了代表性的生育酚修饰的治疗性药物化合物(例如，生育酚琥珀酸酯7-乙基-10-羟基喜树碱和生育酚琥珀酸酯喜树碱)的体外细胞毒性。

本发明的其它方面提供了含有本发明化合物和水相的胶束制剂。胶束是溶液中的一种或多种表面活性剂的有组织的聚集体。在一个实施方案中，以制剂的总重量计，化合物在制剂中的存在量是约0.005-3.0重量％。在一个实施方案中，以制剂的总重量计，化合物在制剂中的存在量是约0.01-2.5重量％。在一个实施方案中，以制剂的总重量计，化合物在制剂中的存在量是约0.01-1.0重量％。合适的表面活性剂包括上述的表面活性剂并以上述量存在。在胶束制剂的一个实施方案中，化合物是生育酚修饰的治疗性药物化合物，表面活性剂是生育酚聚乙二醇琥珀酸酯(TPGS)。实施例15描述了含有生育酚修饰的治疗性药物化合物的代表性胶束制剂。

胶束制剂也可含有额外的组分，例如包括上述在内的助溶剂。在一个实施方案中，胶束制剂含有聚乙二醇和低级烷醇(例如，乙醇)。在一个实施方案中，以制剂的总重量计，助溶剂的存在量是约2-20重量％。胶团、乳剂和微乳剂含有水相。在一个实施方案中，水相含有去离子水。在另一个实施方案中，水相含有盐水。在另一个实施方案中，水相是用有机酸(例如，琥珀酸盐、柠檬酸盐)缓冲的盐水。

本发明也提供了本发明化合物在生产药物中的应用，例如，就含有治疗性药物部分的本发明化合物而言，所述药物部分衍生自在治疗细胞增殖性疾病中有效的治疗性药物化合物，本发明提供了这种化合物在生产用于治疗细胞增殖性疾病中的药物的应用。

在其它方面，也提供了将本发明化合物给予需要它的受试对象的方法和通过给予本发明的化合物来治疗可治疗的疾病的方法。这些方法包括给予本文所述的化合物、组合物、乳剂、微乳剂和胶束制剂。

在一个实施方案中，本发明提供用于治疗疾病的方法，所述疾病可由母体、未修饰的药物化合物来治疗(例如，细胞增殖性疾病，如癌症)。在该方法中，治疗有效量的本发明化合物给予需要它的受试对象。

在一个实施方案中，本发明提供通过给予具有治疗性药物部分的本发明化合物来治疗细胞增殖性疾病的方法，所述药物部分衍生自在治疗细胞增殖性疾病中有效的治疗性药物。可由本发明的化合物治疗的代表性细胞增殖性疾病包括血液癌症，例如白血病、淋巴瘤和骨髓瘤；与非血液癌症，例如实体肿瘤癌(如，乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌、结肠癌、结肠直肠癌、非小细胞肺癌和膀胱癌)、肉瘤和神经胶质瘤。

所述化合物的治疗有效量一般可高达最大耐受剂量，但浓度不是关键的并且变化很大。主治医师使用的精确量当然可视化合物、给药途径、患者的身体状况和其它因素而变。每日的剂量可以单次剂量给予或可分多次剂量给予。

实际给予的化合物的量是治疗有效量，本文使用该术语来表示产生实质性有益作用的所需量。有效剂量可从得自体外或动物模型测试系统的剂量-应答曲线外推得到。通常也使用动物模型来确定所需剂量范围和给药途径。然后这种信息可用于确定人或其它哺乳动物中有用的剂量和给药途径。确定有效剂量对于本领域的技术人员来说是公知的。因此，实际给药量取决于要给予治疗的个体，并且优选最佳量从而可得到所需作用而无明显的副作用。

本发明化合物的治疗效果和可能的毒性可通过标准药学方法在细胞培养物或实验动物中测定(例如，ED₅₀，在50％种群中治疗有效的剂量；LD₅₀，50％种群致死的剂量)。治疗作用和毒性作用之间的剂量比是治疗指数，并且该指数可表示为LD₅₀与ED₅₀之比。显示治疗指数大的修饰的治疗性药物化合物特别适用于实践本发明。得自细胞培养物测定和动物研究的数据可用于设计用于人或其它哺乳动物的剂量范围。这些化合物的剂量最好在循环浓度范围内，所述循环浓度包括具有极少或无毒性的ED50。剂量通常视所用剂量的形式、患者的敏感性和给药途径而在该范围内变动。因此，最佳量随给药方法而变，并且通常与以相同或相似形式给予的常规药物的量一致。

本发明的化合物可单独给予或与一种或多种其它治疗剂联合给予。例如，在治疗癌症中，所述化合物可与以下治疗剂联合给予，所述治疗剂包括(但不限于)：雄激素抑制剂，例如氟他坦和luprolide；抗雌激素，例如塔莫西芬(tomoxifen)；抗代谢物和细胞毒药物，例如柔红霉素、氟尿嘧啶、氟尿苷、干扰素α、氨甲喋呤、普卡霉素、mecaptopurine、硫鸟嘌呤、阿霉素(adriamycin)、卡氮芥、洛莫司汀、阿糖胞苷、环磷酰胺、阿霉素(doxorubicin)、雌氮芥磷酸钠、六甲基嘧啶、羟基脲、异环磷酰胺、丙卡巴肼、丝裂霉素C、白消安、米托蒽醌、碳铂、顺铂、链佐星、博来霉素、放线菌素D和盐酸伊达比星；激素，例如甲羟孕酮、雌氮芥磷酸钠、乙炔雌二醇、雌二醇、亮丙瑞林(leuprolide)、甲地孕酮、奥曲肽、乙烯雌酚、氯烯雌醚、足叶乙苷、鬼臼毒素和戈舍瑞林；氮芥衍生物，例如美法仑、瘤可宁、methlorethamine和塞替哌；类固醇，例如倍他米松；和其它抗肿瘤药物，例如活的牛分枝杆菌、dicarbazine、天冬酰胺酶、甲酰四氢叶酸、米托坦(mitotane)、长春新碱、长春碱和紫杉特尔(taxotere)。每种情况中的合适量随具体试剂而变，这些对本领域技术人员来说是易于了解的或易于通过常规实验确定。

可通过任何有效的途径例如非胃肠道、局部或口服途径来实现本发明化合物的给药。给药方法包括吸入、含服(buccal)、髓内、静脉内、鼻内、直肠内、眼内、腹内、动脉内、关节内、囊内、宫颈内、颅内、管内、硬膜内、伤口内(intralesional)、肌肉内、腰髓内、壁内(intramural)、眼内、手术进行时(intraoperative)、顶骨内(intraparietal)、腹膜内、胸膜内、肺内、脊柱内、胸腔内、气管内、鼓室内、子宫内、血管内、和心室内给药和其它常规方法。具有抗肿瘤活性的本发明化合物可直接注射入肿瘤、注射入肿瘤附近或注射入向肿瘤供血的血管。

本发明的乳剂、微乳剂和胶束制剂可使用本领域已知易于肺部递送化合物的合适的气溶胶推进剂来喷雾。

本发明的化合物可配制入额外含有包括赋形剂和有助于化合物施用至受试对象的其它化合物的合适的药学上可接受的载体的组合物。配制和给药技术的其它细节可见最新版的《雷明顿药学科技》“Remington′s PharmaceuticalSciences”，(Maack Publishing Co.，Easton，PA)。

口服给药的组合物可使用本领域熟知的药学上可接受的载体配制为适合于口服给药的剂量。这种载体使得含有本发明化合物的组合物可配制为适合于受试对象摄入的片剂、丸剂、糖锭、胶囊、液体、凝胶剂、糖浆、膏剂、悬浮剂。可这样配制口服使用的组合物：例如与固体赋形剂混合，优选磨碎得到混合物，如果需要，可在加入合适的其它化合物后将混合物加工为颗粒以获得片剂或糖锭核心。合适的赋形剂包括碳水化合物或蛋白质填料。所述物质包括(但不限于)糖，包括乳糖，蔗糖，甘露醇或山梨醇，来自玉米、小麦、大米、土豆或其它植物的淀粉；纤维素，例如甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素或羧甲基纤维素钠；和树胶，包括阿拉伯胶和黄蓍胶；以及蛋白质，例如明胶和胶原。如果需要，可加入崩解剂或加溶剂，例如交联的聚乙烯吡咯烷酮、琼脂、海藻酸或其盐，例如海藻酸钠。

糖锭核心可具有合适的包衣，例如浓缩的糖溶液，该溶液也可含有阿拉伯胶、滑石粉、聚乙烯吡咯烷酮、聚羰乙烯凝胶(carbopol gel)、聚乙二醇和/或二氧化钛、漆(lacquer)溶液与合适的有机溶剂或溶剂混合物。染料或色素可加入片剂或糖锭包衣以便识别产品或用于鉴定活性化合物的量(即，剂量)。

口服给药的化合物可配制为，例如由明胶制成的轻压配合(push-fit)胶囊，以及由明胶和包衣，例如甘油或山梨醇制成的软的密封胶囊。轻压配合胶囊可含有与以下物质混合的化合物：填料或粘合剂，例如乳糖或淀粉；润滑剂，例如滑石粉或硬脂酸镁；和任选的稳定剂。在软胶囊中，共价连接物可在有或没有稳定剂时溶解或悬浮在合适的液体中，例如脂肪油、液体石蜡或液体聚乙二醇。

就局部和鼻部给药而言，制剂中通常使用合适于待渗透屏障的渗透剂。这些渗透剂的例子是2-吡咯烷酮、N-甲基-2-吡咯烷酮、二甲基乙酰胺、二甲基甲酰胺、丙二醇、甲醇或异丙醇、二甲基亚砜和氮酮(azone)。该制剂还可包含其它试剂以使之成为美容上可接受的制剂。这些其它试剂的例子包括脂肪、蜡、油、颜料、香精、防腐剂、稳定剂和表面活性剂。也可含有角质软化剂，例如本领域已知的角质软化剂。其例子是水杨酸和硫。就局部给药而言，组合物可以用于全身性输递化合物的经皮软膏或贴剂并可以常规方式制备(参见，例如Barry，“皮肤制剂”(Dermatological Formulations)，(Drugs and the PharmaceuticalSciences--Dekker)；Harry′s Cosmeticology(Leonard Hill Books))。

就直肠给药而言，组合物可以栓剂或保留灌肠剂给予。这种组合物可通过将化合物与合适的非刺激性赋形剂混合来制备，所述赋形剂在常温下是固体，但在直肠温度下是液体，因此会在直肠中融化以释放药物。合适的赋形剂包括(但不限于)可可油和聚乙二醇。

各种类型添加剂的量易于为本领域技术人员所了解，最佳量与为同一给药类型所设计的其它已知制剂相同。

含有本发明化合物的组合物可以类似于本领域已知的方式(例如，通过常规的混合、溶解、粒化、制糖锭、磨细(levigating)、乳化、装入胶囊、包埋或冻干处理)生产。也可通过常规方法(例如包衣)改进组合物以提供合适的释放特性、缓释或靶向释放。如上所述，在一个实施方案中，化合物配制为乳剂。

含有所述化合物的组合物可以盐的形式提供并且可用多种酸来形成，包括(但不限于)盐酸、硫酸、乙酸、乳酸、酒石酸、苹果酸和琥珀酸。盐在水性或其它质子溶剂中比相应的游离碱形式更易溶。

含有化合物和可接受的载体的组合物制备好后，这些组合物可置于合适的容器中并做使用标记。因此另一方面，本发明提供试剂盒。

本发明生育酚修饰的治疗性药物化合物适合于以水包油乳剂和胶束制剂给药。化合物可以高药物载荷提供以降低给药体积。

与喜树碱给药的常规方法相比，含有本发明生育酚修饰的喜树碱的乳剂提高了化合物的内酯的稳定性。生育酚修饰的喜树碱化合物实现了长期的血浆半衰期从而延长了肿瘤与化合物的接触时间。生育酚修饰的化合物实现了经肿瘤细胞的类脂膜的高渗透性。与未修饰的喜树碱和当前可用的喜树碱类似物相比，生育酚修饰的喜树碱化合物提供了增强的抗肿瘤应答而未增加毒性。

虽然式(2)(m＝1)、式(3)(n＝1)或式(8)所示化合物不包括上述特定排除的化合物，应该理解的是组合物、乳剂、微乳剂和胶束制剂含有本发明的式(1)-(8)所示的化合物而无这种限制。根据本发明的化合物，组合物、乳剂、微乳剂和胶束制剂的给药方法，通过组合物、乳剂、微乳剂和胶束制剂的给药来治疗可治疗疾病的方法类似地不受限制。

提供以下实施例是为了说明，而非限制本发明。

实施例

实施例1

制备代表性的生育酚修饰的喜树碱化合物：生育酚琥珀酸酯喜树碱

一只500毫升的烧瓶装有10.6克d-α-生育酚琥珀酸、6.97克喜树碱、6.13克碘化2-氯-1-甲基吡啶鎓(CMPI)、5.86克4-(二甲基氨基)吡啶(DMAP)和200毫升干燥(dry)的N，N-二甲基乙酰胺。混合物于室温搅拌24小时，然后于50℃加热4小时。混合物冷却至室温，然后过滤以除去沉淀物并收集滤液。向滤液中加入250毫升氯仿和150毫升去离子水以将产物萃取入氯仿并用分液漏斗除去水相。在分液漏斗中用去离子水(3×150毫升)洗涤氯仿相、收集并用无水MgSO₄干燥过夜。过滤除去MgSO₄，减压下用旋转蒸发仪除去氯仿，得到暗黄色固体。产物经硅胶柱层析纯化。(产量：9.50克，55.2％)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ8.318(s，1H)，8.163-8.135(d，J＝8.4Hz，1H)，7.927-7.901(d，J＝7.8Hz，1H)，7.842-7.787(m，1H)，7.682-7.632(m，1H)，7.263-7.242(d，J＝6.3Hz，1H)，5.702-5.410(ABq，J₁＝17.4，J₂＝70Hz，2H)，5.190(s，2H)，3.014-2.938(m，4H)，2.368-0.809(m，54H)。

C₅₃H₆₈N₂O₈的元素分析计算：C，73.92；H，7.96；N，3.25。

实测值(Found)：C，73.61；H，7.90；N，3.17。

实施例2

制备代表性的生育酚修饰的喜树碱化合物：生育酚琥珀酸酯10-羟基喜树 碱

方法1.一只100毫升的烧瓶装有1.06克d-α-生育酚琥珀酸、0.476克亚硫酰氯和50毫升甲苯。混合物于室温搅拌过夜。用旋转蒸发仪于50℃除去溶剂并收集残留物。向残留物中加入0.728克10-羟基喜树碱和40毫升干燥的四氢呋喃并搅拌。然后向反应混合物中滴入0.404克三乙胺在10毫升四氢呋喃中的溶液。混合物于室温搅拌过夜。过滤混合物并用乙酸乙酯(3×10毫升)洗涤白色粉末。收集滤液。用旋转蒸发仪除去溶剂。收集残留物并以丙酮和氯仿(1∶4，v/v)为流动相经硅胶柱层析纯化。(产量：0.85克，48.4％)。

MS(正ESI)：m/z 877(M)⁺。

C₅₃H₆₈N₂O₉的元素计算：C，72.58；H，7.81；N，3.19。实测值：C，72.52；H，7.84；N，3.21。

或者可按下文所述制备生育酚琥珀酸酯10-羟基喜树碱。

方法2.一只100毫升的烧瓶装有2.65克d-α-生育酚琥珀酸酯、0.89克亚硫酰氯和20毫升甲苯。混合物于室温搅拌24小时。用旋转蒸发仪于50℃真空蒸馏除去甲苯和任何剩余的亚硫酰氯。剩下的残留物溶解于15毫升氯代甲烷得到溶液A。向一只100毫升的烧瓶中装入0.9克10-羟基喜树碱、0.5毫升三乙胺和25毫升新鲜的干燥N，N-二甲基乙酰胺并搅拌。然后将15毫升溶液A经滴液漏斗在5分钟期间缓慢加入混合物。反应混合物于室温搅拌24小时。真空蒸馏浓缩混合物。向残留物中加入150毫升乙酸乙酯。用饱和的NaCl水溶液(3×100毫升)洗涤混合物。用无水MgSO₄干燥混合物。过滤除去MgSO₄并通过真空蒸馏除去乙酸乙酯。粗产物经硅胶柱层析纯化。(产量：1.14克，52.5％)。

实施例3

制备代表性的生育酚修饰的喜树碱化合物：生育酚琥珀酸酯7-乙基-10-羟 基喜树碱

方法1.一只500毫升的烧瓶装有22.5克d-α-生育酚琥珀酸酯、7.6克亚硫酰氯和200毫升甲苯。混合物于室温搅拌24小时。甲苯和任何剩余的亚硫酰氯通过真空蒸馏除去。剩下的残留物溶解于100毫升氯代甲烷得到溶液A。溶液A立即使用，不与空气接触。向一只500毫升的烧瓶中装入7.8克7-乙基-10-羟基喜树碱、7毫升三乙胺和250毫升新鲜的干燥N，N-二甲基乙酰胺并搅拌。然后将100毫升溶液A经滴液漏斗在30分钟期间缓慢加入混合物。反应混合物于室温搅拌24小时。真空蒸馏浓缩溶剂。向残留物中加入500毫升乙酸乙酯。用饱和的NaCl水溶液(3×200毫升)洗涤混合物。用无水MgSO₄干燥混合物。过滤除去MgSO₄并通过真空蒸馏除去乙酸乙酯。粗产物经丙酮重结晶纯化。(产量：15.18克，83.9％)。

熔点：171°-173℃。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ8.236-8.206(d，J＝9Hz，1H)，7.809-7.801(d，J＝2.4Hz，1H)，7.648(s，1H)，7.572-7.533(dd，J₁＝2.7Hz，J₂＝9.3Hz，1H)，5.781-5.280(ABq，J₁＝16.2Hz，J₂＝134.0Hz，2H)，5.253(s，2H)，3.863(s，1H)，3.136-3.113(m，6H)，2.588(t，2H)，2.091(s，3H)，2.037(s，3H)，1.994(s，3H)，1.970-1.852(m，2H)，1.821-1.725(m，2H)，1.654-0.833(m，42H)。

MS(正ESI)：m/z 905(M)⁺，928(M+Na)⁺。

C₅₅H₇₂N₂O₉的元素计算：C，72.98；H，8.02；N，3.09。实测值：C，72.87；H，8.01；N，2.88。

或者可按下文所述制备生育酚琥珀酸酯7-乙基-10-羟基喜树碱。

方法2.一只500毫升的烧瓶装有8.48克d-α-生育酚琥珀酸酯、3.81克亚硫酰氯和250毫升甲苯。混合物于室温搅拌过夜。用旋转蒸发仪于50℃除去甲苯和任何剩余的亚硫酰氯并收集残留物。向残留物中加入6.27克7-乙基-10-羟基喜树碱和250毫升钠盐干燥的四氢呋喃并搅拌。然后向混合物中滴入3.23克三乙胺在50毫升四氢呋喃中的溶液。混合物于室温搅拌过夜。过滤混合物并用乙酸乙酯(3×50毫升)洗涤白色粉末。收集滤液。用旋转蒸发仪除去溶剂。粗产物经丙酮重结晶纯化。(产量：8.28克，57.2％)。

实施例4

制备代表性的生育酚修饰的喜树碱化合物：10，20-二(生育酚琥珀酸酯)7- 乙基-10-羟基喜树碱

一只100毫升的烧瓶装有0.905克生育酚琥珀酸酯7-乙基-10-羟基喜树碱、0.53克d-α-生育酚琥珀酸、0.255克碘化2-氯-1-甲基吡啶鎓、0.244克4-(二甲基氨基)吡啶和50毫升二噁烷。混合物于室温搅拌24小时。薄层层析显示反应完成。过滤混合物以除去固相并收集滤液。真空蒸馏除去溶剂。粗产物用30％乙酸乙酯的环己烷溶液经硅胶柱层析纯化。(产量：0.64克，44.82％)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ8.168-8.138(d，J＝9.0Hz，1H)，7.813-7.805(d，J＝2.4Hz，1H)，7.754-7.536(dd，J₁＝2.1Hz，J₂＝11.4Hz，1H)，7.197(s，1H)，5.703-5.409(ABq，J₁＝17.4Hz，J₂＝71.0Hz，2H)，5.243-5.088(m，2H)，3.113-2.857(m，10H)，2.606-2.564(t，J＝6Hz，2H)，2.383-2.184(m，2H)，2.090-1.723(m，22H)，1.588-0.785(m，80H)。

MS(正ESI)：m/z 1418(M+H)⁺。

C₈₈H₁₂₄N2O₁₃的元素分析：C，74.54；H，8.81；N，1.98。实测值：C，74.31；H，8.96；N，1.75。

IRv_最大 ^KBrcm^-1：2925、2867、1751、1665、1615、1657、1510、1458、1413、1376、1330、1218、1128、1075、1060、1035、992、943、923、829、812、758、724、668。

实施例5

制备代表性的生育酚修饰的喜树碱化合物：生育酚-喜树碱与六(乙二醇) 连接物的连接

制备六(乙二醇)生育酚琥珀酸酯。在一只250毫升的烧瓶中装入溶解于100毫升甲苯的2.65克d-α-生育酚琥珀酸和2.82克六(乙二醇)并搅拌。用旋转蒸发仪除去甲苯(通过共沸蒸馏干燥)。向混合物中加入100毫升氯仿、1.08克N，N-二环己基碳二亚胺和100毫克4-(二甲基氨基)吡啶。混合物搅拌过夜。用40％丙酮的己烷溶液进行的薄层层析显示反应完成。混合物用去离子水(3×100毫升)洗涤三次，收集氯仿部分并用无水MgSO₄干燥2小时。过滤后，用旋转蒸发仪除去氯仿。粗产物依次用使用30％乙酸乙酯的己烷溶液，50％乙酸乙酯的己烷溶液和30％丙酮的己烷溶液的硅胶柱层析纯化。(产量：0.53克，13.33％)。

制备生育酚-琥珀酰基-六(乙二醇)琥珀酸。在一只100毫升的烧瓶中装入上述制备的1.42克六(乙二醇)生育酚琥珀酸酯、0.2克琥珀酸酐、两滴乙基己酸锡(II)和25毫升二甲苯。混合物回流4小时。反应完成后，用旋转蒸发仪除去溶剂。粗产物经硅胶柱层析纯化。(产量：0.864克，54％)。

制备具有六(乙二醇)连接物的生育酚琥珀酸酯喜树碱。在100毫升烧瓶中装入上述制备的0.822克生育酚-琥珀酰基-六(乙二醇)琥珀酸、0.3克喜树碱、0.47克碘化2-氯-1-甲基吡啶鎓、0.45克4-(二甲基氨基)吡啶和40毫升干燥的N，N-二甲基乙酰胺。反应混合物于室温搅拌过夜。反应完成后，真空蒸馏除去溶剂并收集残留物。向残留物中加入100毫升乙酸乙酯。搅拌30分钟后，过滤混合物以除去沉淀物，收集滤液并浓缩。粗产物经硅胶柱层析纯化。(产量：0.342克，30.4％)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ8.388(s，1H)，8.240-8.213(d，J＝8.1Hz，1H)，7.951-7.923(d，J＝8.4Hz，1H)，7.861-7.805(dt，J₁＝1.5Hz，J₂＝8.4Hz，1H)，7.694-7.640(dt，J₁＝1.2Hz，J₂＝8.1Hz，1H)，7.269(s，1H)，5.708-5.365(ABq，J₁＝17.1Hz，J₂＝85.8Hz，2H)，5.283(s，2H)，4.273-4.169(m，4H)，3.705-3.673(t，2H)，3.631-3.550(m，18H)，2.926-2.654(m，8H)，2.597-2.552(t，J＝6.9Hz，2H)，2.381-2.2.113(m，2H)，2.074(s，3H)，2.004(s，3H)，1.964(s，3H)，1.827-1.683(m，2H)，1.655(s，3H)，1.544-0.964(m，24H)，0.875-0.830(m，12H)。

MS(正ESI)：m/z 1225(M)⁺。

C₈₈H₁₂₄N₂O₁₃的元素分析计算：C，67.62；H，7.90；N，2.29。实测值：C，67.08；H，8.04；N，2.07。

IRv_最大 ^KBrcm^-1：2925、2867、1735、1667、1618、1563、1500、1457、1405、1366、1349、1232、1204 1141、1107、1060、994、945、859、813、787、761、723、707。

实施例6

制备代表性的生育酚修饰的紫杉醇化合物：生育酚琥珀酸酯紫杉醇

一只250毫升的烧瓶装有5.83克生育酚琥珀酸、2.38克亚硫酰氯(thionylchloride)和50毫升甲苯。混合物于室温搅拌过夜。用旋转蒸发仪于50℃除去溶剂并收集残留物。向残留物中加入8.54克紫杉醇和100毫升无水的四氢呋喃并搅拌。然后向反应混合物中滴入1.52克三乙胺在50毫升四氢呋喃中的溶液。混合物于室温搅拌过夜。过滤混合物并用乙酸乙酯(3×10毫升)洗涤白色粉末。收集滤液。用旋转蒸发仪除去溶剂。收集残留物并经丙酮和己烷重结晶纯化。(产量：11.56克，84.6％)。

C₈₀H₁₀₃NO₁₈的元素计算：C，70.31；H，7.59；N，1.02。实测值：C，70.02；H，7.83；N，0.93。

实施例7

制备代表性的生育酚修饰的多烯紫杉醇化合物：生育酚琥珀酸酯多烯紫杉 醇

一只250毫升的烧瓶装有9.86克d-α-生育酚琥珀酸、5.0克多烯紫杉醇、3.83克干燥的N，N-二环己基碳二亚胺、500毫克4-(二甲基氨基)吡啶和150毫升氯仿。混合物于室温搅拌过夜。过滤混合物以除去沉淀物并收集滤液。用旋转蒸发仪除去溶剂并收集残留物。此粗产物经硅胶柱层析纯化。

实施例8

制备单生育酚邻苯二甲酸酯

在一只100毫升的烧瓶中装入8.61克d1-α-生育酚、2.96克邻苯二甲酸酐、50毫克2-乙基己酸锡(II)和50毫升干燥的N，N-二甲基乙酰胺。混合物于约140℃搅拌24小时。混合物冷却至室温后，将其倒入150毫升乙酸乙酯中。粗产物用30％乙酸乙酯的己烷溶液经硅胶柱层析纯化。(产量：3.6克，31.1％)。

¹H NMR(300MHz，CDCl3)δppm：10.80(bs，1H)，8.119-8.063(m，1H)，7.883-7.828(m，1H)，7.678-7.616(m，2H)，2.627-2.582(t，2H)，2.123(s，3H)，2.112(s，3H)，2.081(s，3H)，1.868-1.702(m，2H)，1.616-1.020(m，24H)，0.874-0.834(m，12H)。

C₃₇H₅₄O₅的分析计算：C，76.78；H，9.40。实测值：C，76.57；H，9.29。

IRv_max ^KBrcm^-1：3073、2919、2858、1737、1701、1578、1455、1409、1373、1276、1230、1107、1071、913、738。

实施例9

制备单生育酚对苯二甲酸酯

一只100毫升的烧瓶装有4.30克d1-α-生育酚、3.32克对苯二甲酸、2.55克碘化2-氯-1-甲基吡啶鎓、0.244克4-(二甲基氨基)吡啶和50毫升干燥的N，N-二甲基乙酰胺。混合物于50℃搅拌4小时。薄层层析显示反应完成。混合物冷却至室温后倒入150毫升乙酸乙酯中。混合物用饱和的NaCl水溶液(3×100毫升)洗涤三次并用无水MgSO₄干燥过夜。粗产物用30％乙酸乙酯的己烷溶液经硅胶柱层析纯化。(产量：1.60克，27.62％)。

¹H NMR(300MHz，CDCl3)δppm：11.80(bs，1H)，8.374-8.259(q，J₁＝8.4Hz，J₂＝26.1Hz，4H)，2.650-2.607(t，2H)，2.130(s，3H)，2.066(s，3H)，2.024(s，3H)，1.895-1.783(m，2H)，1.532-1.083(m，24H)，0.878-0.839(m，12H)。

C₃₇H₅₄O₅的分析计算：C，76.78；H，9.40。实测值：C，76.64；H，9.39。

IRv_最大 ^KBrcm^-1：3062、2924、2858、1737、1696、1573、1460、1424、1373、1276、1240、1097、928、774、723。

实施例10

制备代表性的生育酚修饰的喜树碱化合物：生育酚对苯二甲酸酯喜树碱

一只100毫升的烧瓶装有1.16克上述制备的单生育酚对苯二甲酸酯、0.70克喜树碱、0.511克碘化2-氯-1-甲基吡啶鎓和0.489克4-(二甲基氨基)吡啶。混合物于50℃搅拌过夜。薄层层析显示反应完成。混合物冷却至室温后倒入150毫升乙酸乙酯中。过滤混合物并收集滤液。滤液用饱和的NaCl水溶液(3×100毫升)洗涤并用无水MgSO₄干燥过夜。粗产物经硅胶柱层析纯化。(产量：0.560克，30.8％)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δppm：8.387(s，1H)，8.370-8.242(q，J₁＝8.4Hz，J₂＝30.3Hz，4H)，8.167-8.139(d，J＝8.4Hz，1H)，7.937-7.910(d，J＝8.1Hz，1H)，7.823-7.774(t，1H)，7.672-7.625(t，1H)，7.260(s，1H)，5.823-5.462(ABq，J₁＝17.4Hz，J₂＝90.9Hz，2H)，5.302(s，2H)，2.461(t，2H)，2.559-2.312(m，2H)，2.123(s，3H)，2.056(s，3H)，2.015(s，3H)，1.844-1.801(m，2H)，1.629-1.085(m，27H)，0.938-0.789(m，12H)。

C₅₇H₆₈N₂O₈的分析计算：C，75.30；H，7.54；N，3.08。实测值：C，74.91；H，7.56；N，3.02。

IRv_最大 ^KBrcm^-1：3057、2924、2858、1757、1737、1675、1614、1558、1450、1399、1266、1235、1163、1102、1020、723。

实施例11

制备代表性的生育酚修饰的喜树碱化合物：生育酚环己烷-1，2-二羧酸酯 7-乙基-10-羟基喜树碱

制备生育酚环己烷-1，2-二羧酸。1.54克1，2-环己烷二羧酸酐、8.6克d-α-生育酚、1.34克三氯化铝和100毫升环己烷的混合物在250毫升烧瓶中加热回流约30分钟。混合物冷却至室温后过滤。滤液用稀释的盐酸水溶液洗涤，然后以无水MgSO₄干燥。浓缩混合物，粗产物经硅胶柱层析纯化。(产量：3.325克，56.9％)。

制备生育酚环己烷-1，2-二羧酸酯7-乙基-10-羟基喜树碱。1.08克上述制备的生育酚环己烷-1，2-二羧酸、0.44克亚硫酰氯和20毫升甲苯的混合物在氮气环境中搅拌过夜。真空蒸馏除去甲苯和剩余的亚硫酰氯，残留物溶解于10毫升二氯甲烷得到溶液A。将0.350克SN38在100毫升烧瓶中溶解于25毫升干燥的N，N-二甲基乙酰胺得到溶液B。将溶液A和0.186克三乙胺加入溶液B。混合物于室温搅拌过夜。粗产物经硅胶柱层析纯化。(产量：0.59克，68.9％)。

实施例12

制备代表性的生育酚修饰的阿霉素化合物：生育酚琥珀酸酯阿霉素

一只100毫升的烧瓶中装入等摩尔(1毫摩尔)的生育酚琥珀酸、阿霉素、N，N-二环己基碳二亚胺和50毫升干燥的N，N二甲基乙酰胺。混合物于室温搅拌直至反应完成。过滤混合物以除去白色沉淀物并收集滤液。用旋转蒸发仪除去溶剂并收集残留物。产物经重结晶或硅胶柱层析纯化。

实施例13

制备代表性的生育酚修饰的羟嗪化合物：生育酚琥珀酸酯羟嗪

一只100毫升的烧瓶中装入等摩尔(1毫摩尔)的生育酚琥珀酸、亚硫酰氯和50毫升甲苯。混合物于室温搅拌过夜。用旋转蒸发仪于50℃除去溶剂并收集残留物。向残留物中加入1毫摩尔羟嗪和40毫升氯仿，同时搅拌。然后于0-5℃下向反应混合物中滴入1毫摩尔三乙胺在10毫升氯仿中的溶液。然后于室温搅拌混合物过夜。混合物用饱和的NaHCO₃水溶液(3×50毫升)洗涤。收集有机相并用无水MgSO₄干燥。除去MgSO₄后应旋转蒸发仪除去溶剂。收集残留物，粗产物经重结晶或硅胶柱层析纯化。

实施例14

代表性的生育酚修饰的治疗性药物化合物的溶解性

该实施例比较了代表性的本发明生育酚修饰的治疗性药物化合物：生育酚琥珀酸酯喜树碱和生育酚琥珀酸酯7-乙基-10-羟基喜树碱与喜树碱在各种溶剂中的溶解度。

在一些溶剂中测定喜树碱、生育酚琥珀酸酯喜树碱和生育酚琥珀酸酯7-乙基-10-羟基喜树碱的溶解度。化合物在恒速搅拌和温度下溶解于每种溶剂至饱和。离心得到溶液，并通过高效液相(HPLC)分析上清液。

喜树碱、生育酚琥珀酸酯喜树碱和生育酚琥珀酸酯7-乙基-10羟基喜树碱在各种溶剂中的相对溶解度(毫克/克)示于表1。

表1.喜树碱和生育酚琥珀酸酯喜树碱的溶解性比较

溶剂	喜树碱(毫克/克)	VESA-SN38<sup>1</sup>(毫克/克)	VESA-CPT38<sup>2</sup>(毫克/克)	温度(℃)
					PEG-400NF	-	0.017	17.5	室温
TPGS	-	27.6	＞133.3	65
					维生素EUSP/NF	1.96	398.2	＞288.3	65
豆油USP	0.00	3.3	45.2	室温
					Captex300EP	-	4.4	96.7	室温
吐温80NF	-	2.7	48.3	65→室温
					变性乙醇	-	4.2	57.1	室温

溶剂	喜树碱(毫克/克)	VESA-SN38<sup>1</sup>(毫克/克)	VESA-CPT38<sup>2</sup>(毫克/克)	温度(℃)
					甲醇	-	3.8	14.4	室温
乙腈	0.09	3.1	49.6	室温
					氯仿	0.71	＞97.0	＞372.5	室温
DMSO	50	30.5	＞255.5	室温
					二氯甲烷	0.9	＞99.7	＞336.5	室温
丙二醇，USP	-	3.2	0.4633	室温
					甘油USP/EP/BP/JP	-	2.8	2.541	室温

1VESA-SN38：生育酚琥珀酸酯7-乙基-10-羟基喜树碱

2VESA-CPT：生育酚琥珀酸酯喜树碱

表1中的结果表明生育酚琥珀酸酯喜树碱和生育酚琥珀酸酯7-乙基-10-羟基喜树碱在油中均具有充分的溶解度，并且在维生素E(α-生育酚)中具有特别高的溶解度。

实施例15

含有生育酚修饰的治疗性药物化合物的代表性乳剂

该实施例描述了含有本发明生育酚修饰的治疗性药物化合物的代表性乳剂。

A.生育酚琥珀酸酯7-乙基-10-羟基喜树碱乳剂

如实施例3所述制备的生育酚琥珀酸酯7-乙基-10-羟基喜树碱溶解于维生素E，然后使用微流化器(M110Y Microfluidics)在存在d-α-生育酚聚乙二醇1000琥珀酸酯(TPGS)、Poloxamer 407和盐水时使之乳化以产生具有以下组成(重量％)的乳剂：

生育酚琥珀酸酯-7-乙基-10-羟基喜树碱    0.69％

维生素E                                7.31％

TPGS                                   5％

Poloxamer 407                          1％

盐水                                   86％

乳剂经0.2微米过滤器过滤并装入无菌玻璃小瓶。用亚微米颗粒分粒器(Nicomp Model 370)检测到平均粒径是约50纳米，99％的颗粒小于80纳米。4℃保存至少3个月后HPLC检测未观察到沉淀或浓度丧失。

B.生育酚琥珀酸酯7-乙基-10-羟基喜树碱乳剂

如实施例3所述制备的生育酚琥珀酸酯7-乙基-10-羟基喜树碱溶解于维生素E，然后使用微流化器(M110YMicrofluidics)在存在TPGS和盐水时使之乳化以产生具有以下组成(重量％)的乳剂：

生育酚琥珀酸酯-7-乙基-10-羟基喜树碱    0.69％

维生素E                                7.31％

TPGS                                   5％

盐水                                   87％

该制剂是比上述含有Poloxamer 407的乳剂颜色更黄且更稠的乳剂。乳剂经0.2微米过滤器过滤并装入无菌玻璃小瓶。用亚微米颗粒分粒器(NicompModel 370)检测到平均粒径是约75纳米，99％的颗粒小于170纳米。4℃保存至少3个月后HPLC检测未观察到沉淀或浓度丧失。

C.生育酚琥珀酸酯喜树碱乳剂

如实施例1所述制备的生育酚琥珀酸酯喜树碱溶解于维生素E，然后使用微流化器(M110Y Microfluidics)在存在TPGS、Poloxamer 407和盐水时使之乳化以产生具有以下组成(重量％)的乳剂：

生育酚琥珀酸酯喜树碱                0.74％

维生素E                             7.26％

TPGS                                5％

Poloxamer 407                       1％

盐水                                86％

乳剂经0.2微米过滤器过滤并装入无菌玻璃小瓶。用亚微米颗粒分粒器(Nicomp Model 370)检测到平均粒径是约40纳米，99％的颗粒小于75纳米。4℃保存至少3个月后HPLC检测未观察到沉淀或浓度丧失。

D.生育酚琥珀酸酯喜树碱乳剂

如实施例1所述制备的生育酚琥珀酸酯喜树碱溶解于维生素E，然后使用微流化器(M110Y Microfluidics)在存在TPGS、Poloxamer 407和盐水时使之乳化以产生具有以下组成(重量％)的乳剂：

生育酚琥珀酸酯喜树碱                1.48％

维生素E                             6.52％

TPGS                                5％

Poloxamer 407                        1％

盐水                                 86％

乳剂经0.2微米过滤器过滤并装入无菌玻璃小瓶。用亚微米颗粒分粒器(Nicomp Model 370)检测到平均粒径是约30纳米，99％的颗粒小于100纳米。4℃保存至少3个月后HPLC检测未观察到沉淀或浓度丧失。

E.生育酚琥珀酸酯7-乙基-10-羟基喜树碱乳剂

如实施例3所述制备的生育酚琥珀酸酯7-乙基-10-羟基喜树碱溶解于维生素E，然后使用微流化器(M110Y Microfluidics)在存在TPGS和柠檬酸缓冲的盐水时使之乳化以产生具有以下组成(重量％)的乳剂：

生育酚琥珀酸酯-7-乙基-10-羟基喜树碱    0.69％

维生素E                                7.31％

TPGS                                   5％

柠檬酸缓冲的盐水，pH3.0                87％

乳剂经0.2微米过滤器过滤并装入无菌玻璃小瓶。用亚微米颗粒分粒器(Nicomp Model 370)检测到平均粒径是约60纳米，99％的颗粒小于150纳米。4℃和25℃保存至少3个月后HPLC检测未观察到沉淀或浓度丧失。

F.生育酚琥珀酸酯7-乙基-10-羟基喜树碱乳剂

如实施例3所述制备的生育酚琥珀酸酯7-乙基-10-羟基喜树碱溶解于维生素E，然后使用微流化器(M110Y Microfluidics)在存在TPGS和琥珀酸缓冲的盐水时使之乳化以产生具有以下组成(重量％)的乳剂：

制剂1

生育酚琥珀酸酯-7-乙基-10-羟基喜树碱    0.69％

维生素E                                7.31％

TPGS                                   5％

琥珀酸盐缓冲的盐水，pH4.0              87％

乳剂经0.2微米过滤器过滤并装入无菌玻璃小瓶。用亚微米颗粒分粒器(Nicomp Model 370)检测到平均粒径是约70纳米，99％的颗粒小于170纳米。4℃和25℃保存至少3个月后HPLC检测未观察到沉淀或浓度丧失。

制剂2

生育酚琥珀酸酯-7-乙基-10-羟基喜树碱    1％

维生素E                                7％

TPGS                                   5％

琥珀酸盐缓冲的盐水，pH4.0              87％

乳剂经0.2微米过滤器过滤并装入无菌玻璃小瓶。用亚微米颗粒分粒器(Nicomp Model 370)检测到平均粒径是约70纳米，99％的颗粒小于170纳米。4℃和25℃保存至少1个月后HPLC检测未观察到沉淀或浓度丧失。

制剂3

生育酚琥珀酸酯-7-乙基-10-羟基喜树碱    1％

维生素E                                6％

TPGS                                   4％

琥珀酸盐缓冲的盐水，pH4.0              89％

乳剂经0.2微米过滤器过滤并装入无菌玻璃小瓶。用亚微米颗粒分粒器(Nicomp Model 370)检测到平均粒径是约95纳米，99％的颗粒小于220纳米。4℃、25℃和40℃保存至少1个月后HPLC检测未观察到沉淀或浓度丧失。

G.生育酚琥珀酸酯7-乙基-10-羟基喜树碱(VESA-SN38)胶束制剂

生育酚琥珀酸酯7-乙基-10-羟基喜树碱于约50℃-60℃溶解于含有TPGS、PEG(300)和乙醇的混合物中同时搅拌约1小时以形成透明的溶液。向溶液中加入去离子水(DI-水)、Poloxamer 407和DI-水、Poloxamer 188和DI-水，或0.9％NaCl水溶液以分别形成以下制剂1-5。制剂搅拌几分钟以形成具有以下组成(重量％)的透明胶束溶液：

制剂1

VESA-SN38                    0.2％

TPGS                         5％

乙醇                         5％

PEG(300)                     5％

DI-水                        84.8％

制剂溶液经0.2微米过滤器过滤并装入无菌玻璃小瓶。4℃保存至少11周后HPLC检测未观察到沉淀或浓度丧失。

制剂2

VESA-SN38                0.2％

TPGS                     5％

Poloxamer 407            1.7％

乙醇                     5％

PEG(300)                 5％

DI-水                    83.1％

制剂溶液经0.2微米过滤器过滤并装入无菌玻璃小瓶。4℃保存至少11周后HPLC检测未观察到沉淀或浓度丧失。

制剂3

VESA-SN38                0.2％

TPGS                     5％

PEG(300)                 5％

乙醇                     5％

Poloxamer188             1.7％

DI-水                    83.1％

制剂溶液经0.2微米过滤器过滤并装入无菌玻璃小瓶。4℃和25℃保存至少11周后HPLC检测未观察到沉淀或浓度丧失。

制剂4

VESA-SN38                0.2％

TPGS                     2％

PEG(300)                 2％

乙醇                     4％

盐水                     91.8％

制剂溶液经0.2微米过滤器过滤并装入无菌玻璃小瓶。4℃、25℃或40℃保存至少1周后HPLC检测未观察到沉淀或浓度丧失。

制剂5

VESA-SN38                0.5％

TPGS                     5％

PEG(300)                5％

乙醇                    10％

盐水                    79.5％

制剂溶液经0.2微米过滤器过滤并装入无菌玻璃小瓶。4℃保存至少3周后HPLC检测未观察到沉淀或浓度丧失。

H.生育酚琥珀酸酯7-乙基-10-羟基喜树碱(VESA-SN38)胶束制剂

生育酚琥珀酸酯7-乙基-10-羟基喜树碱于约50℃-60℃溶解于含有TPGS、PEG(300)和乙醇的混合物中同时搅拌约1小时以形成透明的溶液。向溶液中加入琥珀酸盐缓冲的盐水以形成以下制剂1和2。制剂搅拌几分钟以形成具有以下组成(重量％)的透明胶束溶液：

制剂1

VESA-SN38                    0.2％

TPGS                         2％

乙醇                         4％

PEG(300)                     2％

琥珀酸盐缓冲的盐水，pH4.0    91.8％

制剂溶液经0.2微米过滤器过滤并装入无菌玻璃小瓶。

制剂2

VESA-SN38                    0.5％

TPGS                         5％

乙醇                         10％

PEG(300)                     5％

琥珀酸盐缓冲的盐水，pH4.0    79.5％

制剂溶液经0.2微米过滤器过滤并装入无菌玻璃小瓶。

实施例16

代表性的生育酚修饰的治疗性药物化合物内酯在存在人白蛋白时的体外 稳定性

该实施例比较了代表性的本发明生育酚修饰的治疗性药物化合物：生育酚琥珀酸酯喜树碱和生育酚琥珀酸酯7-乙基-10-羟基喜树碱的内酯形式与喜树碱的内酯形式在存在人白蛋白时的体外稳定性。

由于内酯(环E)是喜树碱活性的重要部分并且据报道其在生理条件下(pH＝7.4)不稳定，因此测定生育酚琥珀酸酯喜树碱和生育酚琥珀酸酯7-乙基-10羟基喜树碱的内酯的稳定性。生育酚琥珀酸酯喜树碱和生育酚琥珀酸酯7-乙基-10羟基喜树碱在油相中的溶解作用认为保护了内酯免于水解，因此增加了内酯在生理条件下的稳定性。为评价内酯的稳定性，含有4％人血清白蛋白的盐水缓冲的溶液(10mM，pH7.4)在存在喜树碱(溶解于DMSO)、生育酚琥珀酸酯喜树碱乳剂(如实施例15C所述制备，本文称为“SN2300乳剂”)或生育酚琥珀酸酯7-乙基-10羟基喜树碱乳剂(如实施例15A所述制备，本文称为“SN2310乳剂”)时于37℃孵育。使用带有荧光检测的高效液相色谱来分析内酯形式的浓度随时间的降低情况。

图12描述了在存在人血清白蛋白时喜树碱、生育酚琥珀酸酯喜树碱(SN2300)和生育酚琥珀酸酯7-乙基-10羟基喜树碱(SN2310)的内酯形式随时间变化的百分率。生育酚琥珀酸酯喜树碱和生育酚琥珀酸酯7-乙基-10羟基喜树碱的内酯形式的稳定性高于喜树碱的。与未修饰的喜树碱母体化合物相比，内酯稳定性的极大增加可能导致活性增加。

实施例17

代表性的生育酚修饰的治疗性药物化合物的体外细胞毒性

该实施例将代表性的本发明生育酚修饰的治疗性药物化合物：生育酚琥珀酸酯喜树碱和生育酚琥珀酸酯7-乙基-10-羟基喜树碱的体外细胞毒性与喜树碱、10-羟基喜树碱、SN38、依立替康和拓扑替康的体外细胞毒性进行比较。

研究了以GI₅₀(50％的生长抑制)值测定的生育酚琥珀酸酯喜树碱和生育酚琥珀酸酯7-乙基-10-羟基喜树碱的体外细胞毒性并与国家癌症研究院(NCI)的喜树碱、10-羟基喜树碱、SN38、依立替康和拓扑替康的GI₅₀值进行比较，所述研究和比较在以下癌细胞系中进行：NCI-H460(ATCC#HTB-177)(非小细胞肺癌)、HCT-15(ATCC#CCL-225)(结肠直肠癌)、HT-116(ATCC#CCL-247)(结肠直肠癌)、HT-29(ATCC#HTB-38)(结肠直肠癌)、MCF-7(ATCC#HTB-22)(乳腺癌)和OVCAR-3(ATCC#HTB-161)(卵巢癌)。

使用在相应细胞培养基中稀释的生育酚琥珀酸酯7-乙基-10-羟基喜树碱(如实施例15A所述)和生育酚琥珀酸酯喜树碱(如实施例15C所述)的乳剂进行该项研究。细胞与各种浓度的测试物品接触48小时。在48小时结束时，用ALAMAR BLUE染色以检测存活细胞的数目，计算与对照组相比的细胞生长的抑制程度。将抑制百分比对浓度应用于Hill方程来确定产生50％生长抑制(GI₅₀)时的浓度。

所测试细胞系对生育酚琥珀酸酯喜树碱(SN2300)、生育酚琥珀酸酯7-乙基-10-羟基喜树碱(SN2310)、喜树碱、依立替康和拓扑替康的敏感性描述于表2和图13。

表2的结果表明本发明的生育酚修饰的治疗性药物化合物的制剂提供有效的抗肿瘤活性。

图13是对生育酚琥珀酸酯喜树碱和生育酚琥珀酸酯7-乙基-10羟基喜树碱在4种被测试的细胞系中检测到的GI₅₀值(产生50％生长抑制的浓度)所作的图。也包括NCI报道的喜树碱、依立替康和拓扑替康在这些相同的癌细胞系中的值作为比较。高GI₅₀值对应于产生50％抑制的低药物浓度。从图中可明显看出本发明的化合物：生育酚琥珀酸酯喜树碱和生育酚琥珀酸酯7-乙基-10-羟基喜树碱显示类似于喜树碱的高水平细胞毒活性。

实施例18

代表性生育酚修饰的治疗性药物化合物的药代动力学

该实施例比较了代表性的本发明生育酚修饰的治疗性药物化合物：生育酚琥珀酸酯喜树碱和生育酚琥珀酸酯7-乙基-10羟基喜树碱与喜树碱、依立替康和拓扑替康的药代动力学。

在Sprague-Dawley大鼠中以约14毫克药物化合物/公斤体重的剂量，经侧面尾静脉静脉注射药物化合物的乳剂(SN2300乳剂和SN2310乳剂)来研究生育酚琥珀酸酯喜树碱和生育酚琥珀酸酯7-乙基-10-羟基喜树碱的药代动力学特性。给药后120小时内经颈静脉收集血液样品。用带有荧光检测的高效液相色谱(HPLC)测定血浆中每种喜树碱衍生物的浓度。使用WinNonlin(4.1版)进行非间隔(noncompartmental)分析。

生育酚琥珀酸酯喜树碱(SN2300)和生育酚琥珀酸酯7-乙基-10羟基喜树碱(SN2310)的药代动力学特性分别示于图14A和14B。图14A和14B分别描述了以13.8毫克药物化合物/公斤体重静脉内注射生育酚琥珀酸酯喜树碱(SN2300乳剂)和生育酚琥珀酸酯7-乙基-10羟基喜树碱(SN2310乳剂)后的浓度-时间关系。图14A和14B特别显示了静脉内给药后生育酚琥珀酸酯喜树碱延长的血浆半衰期。

表3提供了生育酚琥珀酸酯喜树碱(SN2300)、生育酚琥珀酸酯7-乙基-10羟基喜树碱(SN2310)、喜树碱、依立替康和拓扑替康的计算的血浆清除半衰期、平均残留时间和廓清率。

术语“血浆清除半衰期”指达到平衡后将血浆中的药物浓度减低50％所需的时间。术语“清除速率常数”指每单位时间清除的药物的份额(fraction)。对于一级清除，清除速率直接与血清药物浓度成比例。清除速率和血清药物浓度之间呈线性关系。虽然在一级过程中所清除的药物量随浓度而变，但所清除的药物份额维持恒定。

术语“廓清率”指身体清除药物的能力的度量并且是通过任何清除药物的途径每单位时间清除的药物的假定分布体积(即，毫升/分钟)。要澄清的是廓清率不表明有多少药物正被除去，而是表明因清除而完全不含药物的生物液体，例如血液或血浆的体积。术语“分布体积”指溶解药物总量以达到血液中发现的相同浓度所需体液的计算体积。这是涉及的体内药物量与生物液体(血液、血浆、血清)中所检测浓度的比例常数。

表3.与喜树碱、依立替康和拓扑替康相比，在大鼠中静脉内给予生育酚琥珀酸酯喜树碱(SN2300)和生育酚琥珀酸酯7-乙基-10羟基喜树碱(SN2310)的比较药代动力学参数

化合物	t1/2(小时)(清除)	MRT(小时)	廓清率(升/小时/公斤)
				SN2300	29.08	9.40	0.0081

化合物	t1/2(小时)(清除)	MRT(小时)	廓清率(升/小时/公斤)
				SN2310	3.49	5.15	0.0067
喜树碱<sup>a</sup>	1.7	-	8.81
				拓扑替康<sup>a</sup>	1.06	-	3.22
依立替康<sup>b</sup>	1.54	1.43	2.22

^aEl-Gizawy SA，Hedaya MA.Cancer Chemother.Pharmacol.，43：364-370(1999)。

^bAtsumi R，Okazaji O Hakusui H.Biol.Pharm.Bull.，18(8)：1114-1119(1995)。

表3表明生育酚琥珀酸酯喜树碱(SN2300)和生育酚琥珀酸酯7-乙基-10羟基喜树碱(SN2310)的计算得到的血浆清除半衰期分别比市售可得的类似物长约30倍和3倍。较高的平均残留时间(MRT)和较低的廓清率说明肿瘤与这些新的衍生物的接触时间较长，这可能意味着化疗效果增加。

可通过治疗性药物化合物的亲脂性修饰来增加母体治疗性药物化合物的血浆清除半衰期。与母体治疗性药物相比，本发明的化合物因其亲脂性部分(例如，生育酚部分)而增加了血浆清除半衰期。如上所述，与母体化合物相比，生育酚琥珀酸酯喜树碱和生育酚琥珀酸酯7-乙基-10羟基喜树碱的血浆清除半衰期显著增加。

实施例19

代表性的生育酚修饰的治疗性药物化合物在人肿瘤异种移植物中的体内 抗肿瘤活性

该实施例比较了代表性的本发明生育酚修饰的治疗性药物化合物：生育酚琥珀酸酯喜树碱和生育酚琥珀酸酯7-乙基-10羟基喜树碱的体内抗肿瘤活性与依立替康抗肿瘤作用。

NCI-H460人肿瘤异种移植。无胸腺小鼠皮下植入细胞悬浮液(10⁷细胞/小鼠)。当肿瘤达到合适大小时，将动物随机分为8组并按照q1dx5时间表以15毫克药物化合物/公斤体重的剂量连续两周经静脉内给予以下化合物：

盐水对照组

依立替康

SN2300乳剂

SN2310乳剂

HT-29人肿瘤异种移植.用12规格的套针针头将30-40毫克肿瘤片段皮下植入无胸腺小鼠。片段植入的小鼠的数量要充足，从而使得可在分级日(stagingday)(SD)为试验选择重量范围窄(100-200毫克)的肿瘤进行试验。具有合适大小的肿瘤的所选择动物随机分为6组，每组10只，并静脉内给予以下化合物：

盐水对照组(q1dx5，2周)

依立替康(15毫克/公斤，q1dx5，2周)

SN2300乳剂(15毫克/公斤，q1dx5，2周)

SN2310乳剂(15毫克/公斤，q1dx5，2周)

SN2300乳剂(15毫克/公斤，q3dx10)

SN2310乳剂(15毫克/公斤，q3dx10)

在两个异种移植物研究中，初次给药后每周检测动物体重和肿瘤两次。使用卡尺(毫米)进行肿瘤检测；基于下式计算肿瘤体积：(长度×宽度²)/2＝体积(mm³)。

给予植入有NCI-H460人肿瘤细胞和HT-29人肿瘤细胞的无胸腺小鼠的SN2300和SN2310乳剂的抗肿瘤作用分别图示于图15A和15B。虽然在该模型中SN2300乳剂显示极低或没有抗肿瘤作用，但是与盐水对照和依立替康相比，SN2310乳剂显示了明显的抗肿瘤活性。

HT-29异种移植物研究的计算的肿瘤应答参数示于表4。初次给药55天后，由于肿瘤尺寸(＞4000mm³)而处死了对照组中30％的小鼠，肿瘤的中值尺寸是3136mm³。与此同时，SN2310(q3dx10)组中80％的小鼠不存在可检测到的肿瘤。此外，SN2310(q1dx5)组的肿瘤尺寸中值是126mm³，40％的小鼠没有可检测到的肿瘤。同时，依立替康组显示肿瘤的中值尺寸是1637mm³。结果表明给予SN2310产生显著的抗肿瘤活性。

表4.HT-29异种移植物研究的计算的肿瘤应答参数

组	时间表	肿瘤生长滞后(T-C)(天)	肿瘤生长抑制(T/C％)	在第55天无可检测的肿瘤的动物数
					盐水	q1dx5(2周)	…	…	0/10
依立替康	q1dx5(2周)	14	52	0/10
					SN2300	q1dx5(2周)	8.5	79	0/10
SN2300	q3dx10	0	102	0/10
					SN2310	q1dx5(2周)	＞28*	4	4/10
SN2310	q3dx10	＞28*	2	8/10

*在该组中90％的肿瘤仍未达到最大的预计尺寸。

T-C＝处理组(T)和对照组(C)达到预计尺寸的中值时间。

T/C％＝(处理的中值肿瘤重量)/(对照的中值肿瘤重量)×100(在第55天时)。

尽管已说明并描述了本发明的优选实施方案，应该理解的是可从中做出各种变化而不脱离本发明的构思和范围。

Claims (21)

1.一种如下式所示的化合物

T-L-D

其中T是生育酚部分；

L是琥珀酸酯连接部分；

D是选自紫杉醇、多烯紫杉醇、喜树碱、10-羟基喜树碱、7-乙基-10-羟基喜树碱、阿霉素或羟嗪的治疗性药物部分；

其中生育酚部分经琥珀酸酯连接部分共价偶联于治疗性药物部分。

2.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，所述治疗性药物部分是紫杉醇。

3.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，所述治疗性药物部分是多烯紫杉醇。

4.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，所述治疗性药物部分是喜树碱。

5.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，所述治疗性药物部分是10-羟基喜树碱。

6.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，所述治疗性药物部分是7-乙基-10-羟基喜树碱。

7.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，所述治疗性药物部分是阿霉素。

8.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，所述治疗性药物部分是羟嗪。

9.一种包含以下部分的乳剂：

(a)一种包含以下部分的油相

(i)如权利要求1-8任一所述的化合物；

(ii)一种亲脂性介质；和

(b)一种水相。

10.如权利要求9所述的乳剂，其特征在于，所述治疗性药物化合物部分是紫杉醇、多烯紫杉醇、喜树碱、10-羟基喜树碱、7-乙基-10-羟基喜树碱、阿霉素或羟嗪中的至少一种。

11.如权利要求9所述的乳剂，其特征在于，所述亲脂性介质含有生育酚。

12.一种包含以下部分的胶束制剂：

(a)一种如权利要求1-8任一所述的化合物；和

(b)一种水相。

13.如权利要求12所述的制剂，其特征在于，所述治疗性药物化合物部分是紫杉醇、多烯紫杉醇、喜树碱、10-羟基喜树碱、7-乙基-10-羟基喜树碱、阿霉素或羟嗪中的至少一种。

14.权利要求1-8中任一项所述的化合物在生产治疗细胞增殖性疾病的药物中的应用。

15.一种如下式所示的化合物

T-L-D

其中T是生育酚部分；

L是六(乙二醇)连接部分；

D是喜树碱治疗性药物部分；

其中生育酚部分经六(乙二醇)连接部分共价偶联于喜树碱治疗性药物部分。

16.一种如下式所示的化合物

T-L-D

其中T是生育酚部分；

L是对苯二甲酸酯连接部分；

D是喜树碱治疗性药物部分；

其中生育酚部分经邻苯二甲酸酯连接部分共价偶联于喜树碱治疗性药物部分。

17.一种如下式所示的化合物

T-L-D

其中T是生育酚部分；

L是环己烷-1，2-二羧酸酯连接部分；

D是7-乙基-10-羟基喜树碱治疗性药物部分；

其中生育酚部分经环己烷-1，2-二羧酸酯连接部分共价偶联于7-乙基-10-羟基喜树碱治疗性药物部分。

18.一种包含以下部分的乳剂：

(a)一种包含以下部分的油相

(i)如权利要求15-17任一所述的化合物；

(ii)一种亲脂性介质；和

(b)一种水相。

19.如权利要求18所述的乳剂，其特征在于，所述亲脂性介质含有生育酚。

20.一种包含以下部分的胶束制剂：

(a)一种如权利要求15-17任一所述的化合物；和

(b)一种水相。

21.权利要求15-17中任一项所述的化合物在生产治疗细胞增殖性疾病的药物中的应用。

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