CN101293089A - 植物血凝素口服剂型的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种植物血凝素口服剂型的制备方法，步骤如下：(1)将植物血凝素溶解在水相缓冲溶液中，该溶液(A)的pH值为2.5－7.0，植物血凝素的含量为1.0－50.0毫克/毫升；(2)将上述含植物血凝素的酸性溶液(A)加入到亲水亲油平衡值为9≤HLB≤15的液态的非离子型表面活性剂溶液中，或双亲性油酯中，或两者混合液中混合为溶液(B)；(3)将溶液(B)加入至亲水亲油平衡值为0≤HLB≤9的液态的油相中，或亲油性乳化剂中，或油相与亲油性乳化剂的混合液中，溶液(B)与其的比例为1∶1至1∶9，使这两种溶液在温度5－30℃下搅拌混合，成为油相制剂(C)；(4)加入稳定剂。本发明使植物血凝素的包埋率提高到70－90％。

Description

植物血凝素口服剂型的制备方法

技术领域

本发明属于生物药物的制备技术领域，特别涉及一种植物血凝素口服剂型的制备方法。

背景技术

植物血凝素多数是指从菜豆属(Phaseolus Vulgaris)如红芸豆(Redkidney bean)和金雀花(P.Communis)中提取的凝集素。提纯后蛋白质含量较高，它具有凝集红血球，促进淋巴细胞的分化、成熟和分裂的作用。植物血凝素为广谱抗病毒和免疫调节药植物血凝素主要为D-甘露糖、氨基葡萄糖酸衍生物所构成的低聚糖辅基与蛋白质的复合物，属于高分子糖蛋白类物质。植物血凝素具有抗病毒、促进细菌感染的恢复以及调节机体免疫功能等达到紧急防治动物疫病作用。适用于猪、牛、羊、鸡、鸭、鹅、鸽等畜禽由于各种病毒感染后的早期治疗和潜伏期感染阶段的紧急预防，如口蹄疫病毒、猪瘟病毒、圆环病毒、病毒性腹泻病毒、痘病毒、新城疫病毒、传染性鸭肝炎病毒、法氏囊病毒、小鹅瘟病毒，传染性支气管炎病毒、流行性感冒病毒、鹅副粘病毒等早期感染的治疗。

植物血凝素都是以注射的途径给药有较好的治疗效果，多者每天需要注射1-2次，连用2-5天，给养殖业主的使用带来很多不便，因此将其制成饮水、口服剂型便成为人们追求的目标。如果在此方面有所突破，将会产生巨大的社会和经济效益。但直接将这些生物药物饮水、口服，由于胃肠道内酶的降解消化及肠道的吸收屏障，使其利用度很低，治疗效果较差。

因此，提供一种植物血凝素口服剂型的制备方法，有效防治各种畜禽病原性疾病，是该技术领域科研人员急需开发的新课题之一。

发明内容

本发明的目的是为克服已有技术的不足之处，提供一种制备简单、应用方便、效果显著的植物血凝素口服剂型的制备方法，

一种植物血凝素口服剂型的制备方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)将一定量的植物血凝素溶解在水相缓冲溶液中，该溶液(A)的pH值为2.5-7.0，植物血凝素的含量为1.0-50.0毫克/毫升；

(2)将上述含植物血凝素的酸性溶液(A)加入到亲水亲油平衡值(HLB)为9≤HLB≤15的液态的非离子型表面活性剂溶液中，或双亲性油酯中，或他们的混合液中；所述溶液(A)与这些表面活性剂，或双亲性油酯，或他们的混合液的比例为1∶4至1∶40；该两种溶液在温度5-30℃下进行搅拌，使其均匀的混合在一起，成为一种透明的溶液(B)；

(3)将溶液(B)加入至亲水亲油平衡值为0≤HLB≤9的液态的油相中，或亲油性乳化剂中，或油相与亲油性乳化剂的混合液中，溶液(B)与其的比例为1∶1至1∶9，使这两种溶液在温度5-30℃下搅拌混合，最终成为一种透明的油相制剂(C)，在4-10℃下保存；

(4)为了保持溶液的稳定，加入一定量的稳定剂；稳定剂直接加入到所述制备步骤(1)溶液中，或者所述的步骤(3)中的溶液中。

所述步骤(2)中的表面活性剂，或双亲性油酯，或他们的混合液采用以下一种或两种以上混合：十甘油单辛酸酯、聚乙二醇-8-甘油辛酸/癸酸酯、吐温80。

所述步骤(2)中的搅拌温度为5-30℃、搅拌速度为100-1800转/分、搅拌时间为0.4-4小时。

所述步骤(3)中的亲油性溶液或乳化剂为：甘油油酸酯、聚甘油-3-油酸酯、聚乙二醇-6-甘油单油酸酯。

所述步骤(3)中的搅拌温度为5-30℃、搅拌速度为100-1800转/分、搅拌时间为0.4-4.0小时。

所述稳定剂选自海藻糖、牛血清白蛋白、鸡蛋清蛋白和聚乙二醇的一种或一种以上。

所述稳定剂的加入量为最终溶液的0.1％-10％。

本发明方法的有益效果是：具有制备工艺简单，容易实现，应用方便，所需成本低等特点，该方法采用毒性小，口服安全的分散剂及油相等材料，使植物血凝素均匀的分散溶解到油相中，最终成为一种透明的植物血凝素油相制剂。采用该方法制成的油相制剂体外实验表明，它在不同的pH(2-11)溶液中，都能发生乳化作用，并且植物血凝素基本上仍然包裹在油中而不进入水相。因此在饮水、口服时，能比较好的抵抗胃肠道酶的降解作用，且容易吸收，更好的发挥抗病毒药效。采用本发明方法制成的植物血凝素微球，可使植物血凝素的包埋率提高到70-90％，在人工胃液中释放药物小于10％，在人工肠液中释放药物80％以上，可实现植物血凝素的肠定向释放。

具体实施方式

以下结合实施例，对依据本发明提供的具体实施方式详述如下：

实施例1

一种植物血凝素口服剂型的制备方法，其特征在于具体实施步骤如下：

(1)在12ml pH为4.5的溶液中加入40.0mg植物血凝素，使其溶解(A溶液)；

(2)取聚乙二醇-8-甘油辛酸/癸酸酯40.0ml，将A溶液加入搅拌混合成48ml。搅拌速度：500转/分；时间：3.0小时；温度：20℃(B溶液)；

(3)取聚甘油-3-油酸酯152ml，将B溶液加入搅拌混合成200ml，搅拌速度：500转/分，时间：3.0小时，温度：20℃(C溶液)；

(4)在C溶液加入500mg海藻糖和500mg鸡蛋清蛋白；并混合均匀，存放于冰箱中冷藏。

采用该本方法制成植物血凝素微球，可使植物血凝素的包埋率提高到75.6％，在人工胃液中2h内释放药物为41.5％，在人工肠液中释放药物88.2％，可实现植物血凝素的肠定向释放。

实施例2

一种植物血凝素口服剂型的制备方法，其特征在于具体实施步骤如下：

(1)在5ml pH＝3.5的溶液中加入天然植物血凝素15.0mg，使其溶解(溶液A)；

(2)取吐温80 14ml，十甘油单辛酸酯26ml，混合均匀，然后将溶液A加入混合，搅拌均匀；搅拌速度：1000转/分；时间：2.5小时；温度：18℃(溶液B)；

(3)取甘油油酸酯150ml，将上述B溶液加入混合成200ml；搅拌速度：1000转/分；时间：2.5小时；温度：18℃(C溶液)；

(4)在C溶液中加入100mg海藻糖和200mg牛血清蛋白，混合均匀，存放于冰箱中冷藏。

采用该本方法制成植物血凝素微球，可使植物血凝素的包埋率提高到86.1％，在人工胃液中2h内释放药物为44.9.2％，在人工肠液中释放药物82.6％，可实现植物血凝素的肠定向释放。

上述参照实施例对该植物血凝素口服剂型的制备方法进行的详细描述，是说明性的而不是限定性的，可按照所限定范围列举出若干个实施例，因此在不脱离本发明总体构思下的变化和修改，应属本发明的保护范围之内。

Claims (5)

1、一种植物血凝素口服剂型的制备方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)将一定量的植物血凝素溶解在水相缓冲溶液中，该溶液(A)的pH值为2.5-7.0，植物血凝素的含量为1.0-50.0毫克/毫升；

(2)将上述含植物血凝素的酸性溶液(A)加入到亲水亲油平衡值(HLB)为9≤HLB≤15的液态的非离子型表面活性剂溶液中，或双亲性油酯中，或他们的混合液中；所述溶液(A)与这些表面活性剂，或双亲性油酯，或他们的混合液的比例为1∶4至1∶40；该两种溶液在温度5-30℃下进行搅拌，使其均匀的混合在一起，成为一种透明的溶液(B)；

(3)将溶液(B)加入至亲水亲油平衡值为0≤HLB≤9的液态的油相中，或亲油性乳化剂中，或油相与亲油性乳化剂的混合液中，溶液(B)与其的比例为1∶1至1∶9，使这两种溶液在温度5-30℃下搅拌混合，最终成为一种透明的油相制剂(C)，在4-10℃下保存；

(4)为了保持溶液的稳定，加入一定量的稳定剂；稳定剂直接加入到所述制备步骤(1)溶液中，或者所述的步骤(3)中的溶液中。

2、根据权利要求1所述的植物血凝素口服剂型的制备方法，其特征在于所述步骤(2)中的表面活性剂，或双亲性油酯，或他们的混合液采用以下一种或两种以上混合：聚乙二醇-8-甘油辛酸/癸酸酯、吐温80、十甘油单辛酸酯。

3、根据权利要求1所述的植物血凝素口服剂型的制备方法，其特征在于所述步骤(3)中的亲油性溶液或乳化剂为：甘油油酸酯、聚甘油-3-油酸酯、聚乙二醇-6-甘油单油酸酯。

4、根据权利要求1所述的植物血凝素口服剂型的制备方法，其特征在于所述稳定剂选自海藻糖、牛血清白蛋白、鸡蛋清蛋白和聚乙二醇的一种或一种以上。

5、根据权利要求1所述的植物血凝素口服剂型的制备方法，其特征在于所述稳定剂的加入量为最终溶液的0.1％-10％。