CN102283842A - 一种复方乙酰甲喹氟苯尼考纳米乳抗菌药物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种复方乙酰甲喹氟苯尼考纳米乳抗菌药物,该纳米乳粒径在1~100nm之间,由下列质量百分比的原料组成:乙酰甲喹0.01%~5.00%、氟苯尼考0.01%~5.00%、表面活性剂20.00%~45.00%、二甲基亚砜0.10%~10.00%、油1.00%~15.00%,余量为蒸馏水,上述原料的质量百分比之和为100%。本发明的纳米乳外观为黄色澄清透明的液体,具有稳定性好,分散性强,渗透性好,生物利用度高等特点,使药物疗效增强,毒性降低,并具有透皮和靶向作用,同时,生产能耗低,安全性高,可大量生产。
Description
技术领域
本发明属于医药领域,涉及两种具有广谱抗菌效果的抗生素的新剂型,具体涉及一种复方乙酰甲喹氟苯尼考纳米乳抗菌药物及其制备方法。
背景技术
乙酰甲喹(Mequindox),又名痢菌净,是治疗仔猪黄白痢病的特效药,具有广谱抗菌、高效、低毒、体内分布广、低耐药性的特点,是治疗仔猪黄白痢病的特效药。乙酰甲喹的抗菌机理是抑制菌体的脱氧核糖核酸(DNA)合成。对多数细菌具有强大的抑制作用,对革兰氏阴性菌作用更强,对密螺旋体也有效。但乙酰甲喹的微溶水,在动物体内消除快,半衰期约2h,给药8h血液中已检测不到药物。目前市场上主要有乙酰甲喹预混剂、混悬型粉剂、注射液等剂型。上述剂型存在的主要问题是:第一,由于乙酰甲喹在水中溶解度极低,所以水溶液的载药量极低;第二,对于新生的仔猪注射给药,给药不方便且仔猪的应激性大。第三,乙酰甲喹在体内半衰期短,因此需连续给药。因此,乙酰甲喹普通剂型的生物利用度低,治疗效果和药效时间有待提高。
氟苯尼考,又名氟甲砜霉素,是在八十年代后期成功研制的一种新的兽医专用氯霉素类的广谱抗菌药,通过脂溶性可弥散进入细菌细胞内,主要作用于细菌70s核糖体的50s亚基,抑制转肽酶,使肽酶的增长受阻,抑制了肽链的形成,从而阻止蛋白质的合成,达到抗菌目的。本品抗菌谱广,对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌及支原体均有强效。本品口服吸收迅速,分布广泛,半衰期长,血药浓度高,血药维持时间长。目前市场销售的主要氟苯尼考制剂有注射剂(主要规格含氟苯尼考为30%、10%和5%),粉剂(含氟苯尼考10%)、溶液剂(含氟苯尼考2.0%)和预混剂(含氟苯尼考5.0%)等4种剂型。上述剂型存在的主要问题是:一、由于氟苯尼考在水中溶解度极低,所以水溶液的载药量低;而且遇金属阳离子,会形成不溶性络合物。二、上述剂型的生物利用度普遍较低,给药量较大。三、上述剂型的稳定性较差,尤其是预混剂,影响氟苯尼考的药效。
发明内容
本发明的目的是针对现有技术的问题及缺陷,提供一种溶解度高、缓释性好,生物利用度高的复方乙酰甲喹氟苯尼考纳米乳抗菌药物。
实现上述发明目的的技术方案是一种复方乙酰甲喹氟苯尼考纳米乳抗菌药物,该纳米乳粒径在1~100nm之间,由下列质量百分比的原料组成:乙酰甲喹0.01%~5.00%、氟苯尼考 0.01%~5.00%、表面活性剂20.00%~45.00%、二甲基亚砜 0.10%~10.00%、油1 .00%~15.00%,余量为蒸馏水,上述原料的质量百分比之和为100%。
所述的表面活性剂是非离子型表面活性剂RH40、EL40 、吐温-80中的任一种。
所述的油是乙酸乙酯、三乙酸甘油酯、肉豆蔻酸异丙酯(IPM)、橄榄油、肉桂醛、香芹酚的任一种或几种混合物。
本发明复方乙酰甲喹氟苯尼考纳米乳抗菌药物的优选配比是:乙酰甲喹 0.1%~4.50%、氟苯尼考 0.1%~4.50%、表面活性剂 25.00%~40.00%、二甲基亚砜 0.5%~9.00%、油 1.50%~13.00%,余量为蒸馏水,上述原料的质量百分比之和为100%。
本发明复方乙酰甲喹氟苯尼考纳米乳抗菌药物的最佳配方是:表面活性剂35.00%、油5%、乙酰甲喹2.5%、氟苯尼考2.5%、二甲基亚砜2.5%、蒸馏水52.5%。
本发明的另一目的是提供复方乙酰甲喹氟苯尼考纳米乳抗菌药物的制备方法,包括以下步骤:
1)按配方比例称取乙酰甲喹,氟苯尼考,表面活性剂,二甲基亚砜 ,油,蒸馏水,备用;
2)将氟苯尼考加入二甲基亚砜中,搅拌溶解,制成溶液;
3)将乙酰甲喹,表面活性剂,油搅拌均匀,制成溶液(适当超声乳化及加热有助于药物溶解);
4)将步骤2)和步骤3)所得的两种溶液混合并搅拌均匀,再缓慢加入蒸馏水,同时不断搅拌,直至形成均匀透明的液体,即得。
本发明采用的纳米乳基质由表面活性剂、油相、和水3部分组成。处方设计原则:作为药物载体,纳米乳首先应符合一般药物载体的要求,即无毒、无刺激、无不良药理作用、具有良好的生物相容性、不影响主药的药效和稳定性;另外由于纳米乳自身的特性,它对处方组成还有特殊的要求,对药物有较强的增溶能力并能在较大范围内形成稳定的纳米乳区。本发明遵循此原则。
在表面活性剂的选择上,本发明选用无毒性和生物相容性好的非离子型表面活性剂。非离子型表面活性剂在溶液中比较稳定,不易受强电解质、无机盐类的影响,也不易受酸碱的影响,并且与其他表面活性剂的相容性好,溶血作用较小。理论上,O/W型纳米乳状液的制备需要表面活性剂的HLB值介于8-18之间,考虑到制备工艺的简单性,即纳米乳的易形成性和制备出来的纳米乳的稳定性,本发明选用HLB介于10-15之间的液态非离子型表面活性剂,或者与一种HLB< 10的非离子表面活性剂复配。可选用的表面活性剂有:聚氧乙烯(40)氢化蓖麻油(RH40)、聚氧乙烯醚(40)蓖麻油(EL40)、吐温-80中的一种或几种混合物。
本发明根据当乳化油相所需的HLB值与表面活性剂HLB值相近时,所形成的乳状液稳定的原则,所述的油是乙酸乙酯,三乙酸甘油酯,肉豆蔻酸异丙酯(IPM)、橄榄油、肉桂醛、香芹酚的任一种或几种混合物。
本发明所述的复方乙酰甲喹氟苯尼考纳米乳抗菌药物中,表面活性剂和油相的质量比是9.5:0.5~7:3。
本发明采用伪三元相图法筛选出最佳复方乙酰甲喹氟苯尼考纳米乳。当表面活性剂和油相的质量比是9:1~8:2时,形成的纳米乳区最大,体系最稳定,同时载药量最高。
将本发明的复方乙酰甲喹氟苯尼考纳米乳抗菌药物进行高速离心和在-4℃、室温25℃、60℃条件下进行留样观察看其稳定性,是否有分层、浑浊或结晶析出。
1. 高速离心试验对复方乙酰甲喹氟苯尼考纳米乳抗菌药物稳定性的影响取制备的复方乙酰甲喹氟苯尼纳米乳抗菌药物药液适量于离心管中,密封管口,置高速离心机中,以12000r/min的转速进行离心,经30min离心复方乙酰甲喹氟苯尼纳米乳抗菌药物保持澄清透明,未见分层、浑浊或结晶析出现象。
2.取制备的复方乙酰甲喹氟苯尼纳米乳抗菌药物,分装于若干玻璃瓶中,密封后分别置于冰箱-4℃、室温25℃、60℃条件下考察60d,每个5d观察样品。结果表明,该纳米乳在三种温度条件下均保持澄清透明的外观,未见分层、浑浊或结晶析出现象。可见本发明复方乙酰甲喹氟苯尼纳米乳抗菌药物是一种稳定的药物;且制备工艺简单,能耗低,安全性高,可大量生产,从而用于畜禽临床疾病。
用途:该药物主要用于猪、牛、鸡、鱼等动物由敏感菌引起的感染性疾病,特别涉及畜禽消化道感染,呼吸道感染,如仔猪黄白痢、猪红痢、犊牛腹泻病,动物副伤寒病、动物巴氏杆菌病、鸡白痢病、鸡大肠杆菌病、猪气喘病、猪传染性胸膜性肺炎、猪萎缩性鼻炎、猪肺疫、猪链球菌病、鸡支原体等引起的慢性呼吸道病、牛呼吸系统疾病、奶牛乳房炎等。
本发明复方乙酰甲喹氟苯尼纳米乳抗菌药物的使用方法及用量:混饮,用本品(1:1)100ml(2%)兑水300L,供畜禽自由饮用,连用三天。喷涂,用本品100ml(2%)兑温水1L喷洒或涂抹在仔猪背部,治疗仔猪黄白痢,连用三天。
本发明的复方乙酰甲喹氟苯尼考纳米乳抗菌药物与现有技术相比,具有以下优点:
(1)本品具有粘度低,稳定性好,分散性强,吸收迅速,靶向释放药物的特点,并可提高乙酰甲喹和氟苯尼考的生物利用度,延长药物在体内的半衰期,降低毒副作用。
(2)本品具有表面张力低,浸润性好,透皮性高的特点,所以能使药物通过经皮给药治疗仔猪黄白痢。
附图说明
图1是本发明复方乙酰甲喹氟苯尼考纳米乳抗菌药物的透射电镜图。
具体实施方式
以下通过药效学试验和对比试验来进一步阐明本发明所述药物的有益效果。
试验例1
图1是本发明复方乙酰甲喹氟苯尼考纳米乳抗菌药物的透射电镜图,其形态为球形,分布均匀,无粘连,粒径均小于100nm,符合纳米乳的粒径要求。
试验例2本发明复方乙酰甲喹氟苯尼考纳米乳的体外抗菌活性试验
以乙酰甲喹纳米乳、氟苯尼考纳米乳、乙酰甲喹氟苯尼考(1:1)复合溶液为对照,测定本发明复方乙酰甲喹氟苯尼考(1:1)纳米乳抗菌药物对致病性大肠杆菌、沙门氏菌、痢疾杆菌、巴氏杆菌的抗菌效果,以最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)表示,见表1。
表1 最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC) (单位:μg/ml)
由表1可知,复方乙酰甲喹氟苯尼考纳米乳对致病性大肠杆菌、沙门氏菌、痢疾杆菌、巴氏杆菌的抗菌效果,明显优于乙酰甲喹纳米乳、氟苯尼考纳米乳、复方乙酰甲喹氟苯尼考溶液。
试验例3本发明复方乙酰甲喹氟苯尼考纳米乳治疗鸡大肠杆菌病试验
将120只未经鸡大肠杆菌病疫苗免疫的雏鸡随机分为4组,即健康对照组(不感染,不给药),感染对照组(感染,不给药),试验组(感染,给复方乙酰甲喹氟苯尼考纳米乳抗菌药物),阳性药物对照组(感染,给复方乙酰甲喹氟苯尼考溶液)。采用人工诱发雏鸡感染致病性大肠杆菌。
给鸡感染大肠杆菌后,除健康对照组外,其余各组均出现临床症状时,进行投药治疗,采用自由饮水给药方式,按5mg/kg/d(以乙酰甲喹和氟苯尼考总计)给药,连用3天。
疗效评价指标
死亡:在试验期间出现鸡大肠杆菌病的典型症状并死亡。尸体剖检有典型的病变特征,并从肝、脾及心分离培养出鸡大肠埃希氏菌,判定为感染该菌而死亡。根据死亡鸡数计算各组的死亡率。
治愈:在试验期间经内服给药后鸡精神状态、食欲恢复正常,不再出现排稀粪等临床症状,均属治愈。根据治愈鸡占试验组的比率计算治愈率。
有效:经内服绐药后,完全治愈的鸡和没有死亡但有临床症状表现者,均为有效;试验结束时,每组存活的鸡数占试验鸡数的百分率,为有效率。
经过临床疗效观察和统计,结果显示在表2。
表2 复方乙酰甲喹氟苯尼考纳米乳和复方乙酰甲喹氟苯尼考溶液对鸡大肠杆菌病的疗效
组别 | 死亡率(%) | 治愈率(%) | 有效率(%) |
健康对照组 | 0 | — | — |
感染对照组 | 93.3 | 0 | 6.7 |
试验组 | 3.3 | 83.3 | 96.7 |
阳性药物对照组 | 13.3 | 60 | 86.7 |
由表2可知,复方乙酰甲喹氟苯尼考纳米乳治疗鸡大肠杆菌病的疗效显著优于复方乙酰甲喹氟苯尼考溶液。
以下通过实施例来进一步阐述本发明复方乙酰甲喹氟苯尼考纳米乳及其制备方法。以下实施例主要是用于进一步说明本发明,而不是限制本发明的范围。
实施例1
1)将氟苯尼考2.50g加入二甲基亚砜2.50g中,搅拌溶解,制成溶液;
2)将乙酰甲喹2.50g,吐温-80 35.00g,乙酸乙酯2.00g、肉桂醛3.00g搅拌均匀,制成溶液;
3)将步骤1)和步骤2)所得的两种溶液混合并搅拌均匀,再缓慢加入蒸馏水52.50g,同时不断搅拌,直至形成均匀透明的体系,即得。
实施例2
乙酰甲喹 0.01g、氟苯尼考0.01g、RH-40 22.78g、二甲基亚砜 0.1g、肉桂醛1.00g、蒸馏水76.1g。
实施例3
乙酰甲喹 0.10g、氟苯尼考4.5g、EL-40 27.0g、二甲基亚砜 8.0g、乙酸乙酯3.1g、蒸馏水57.30g。
实施例4
乙酰甲喹4.50g、氟苯尼考0.10g、EL-40 45.00g、二甲基亚砜 0.50g、香芹酚4.00g、肉桂醛 9.00g、蒸馏水36.90g。
实施例5
乙酰甲喹1.00g、氟苯尼考3.5g、RH-40 20.0g、二甲基亚砜 4.0g、三乙酸甘油酯3.39g、蒸馏水68.11g。
实施例6
乙酰甲喹5.00g、氟苯尼考0.10g、吐温-80 40.00g、二甲基亚砜 0.10g、肉桂醛12.00g、乙酸乙酯 3.00g、蒸馏水39.8g。
实施例7
乙酰甲喹1.8g、氟苯尼考5.0g、EL-40 34.5g、二甲基亚砜 10.00g、香芹酚6.0g、乙酸乙酯0.7g、蒸馏水42.00g。
实施例8
乙酰甲喹0.69g、氟苯尼考0.69g、RH-40 30.96g、二甲基亚砜 0.7g、香芹酚3.44g、蒸馏水63.52g。
实施例9
乙酰甲喹 0.68g、氟苯尼考1.03g、RH-40 30.78g、二甲基亚砜 9.00g、肉桂醛3.42g、橄榄油1.1g、蒸馏水53.99g。
实施例10
乙酰甲喹 1.09g、氟苯尼考0.32g、EL-40 25.00g、二甲基亚砜 0.52g、三乙酸甘油酯 0.45g、肉桂醛5.0g、蒸馏水67.62g。
实施例11
乙酰甲喹 1.10g、氟苯尼考0.97g、EL-40 26.83g、二甲基亚砜 1.0g、肉桂醛5.5g、蒸馏水64.60g。
实施例12
乙酰甲喹 0.58g、氟苯尼考0.29g、吐温-80 26.1g、二甲基亚砜 0.40g、香芹酚 1.8g、IPM 1.1g、蒸馏水69.73g。
实施例13
乙酰甲喹 0.60g、氟苯尼考0.60g、吐温-80 27.0g、二甲基亚砜 1.0g、肉桂醛3.0g、香芹酚1.0g、蒸馏水66.80g。
Claims (4)
1.一种复方乙酰甲喹氟苯尼考纳米乳抗菌药物,其特征在于,该纳米乳的粒径在1~100nm之间,由下述质量百分比的原料制成:
乙酰甲喹 0.01%~5.00%
氟苯尼考 0.01%~5.00%
表面活性剂 20.00%~45.00%
二甲基亚砜 0.10%~10.00%
油 1.00%~15.00%
余量为蒸馏水,上述原料的质量百分比之和为100%;
所述的表面活性剂是聚氧乙烯(40)氢化蓖麻油、聚氧乙烯(40)蓖麻油、吐温-80的任一种;
所述的油是乙酸乙酯、三乙酸甘油酯、肉豆蔻酸异丙酯、橄榄油、肉桂醛、香芹酚的任一种或几种混合物。
2.根据权利要求1所述的复方乙酰甲喹氟苯尼考纳米乳抗菌药物,其特征在于,由下述质量百分比的原料制成:
乙酰甲喹 0. 10%~4.50%
氟苯尼考 0. 10%~4.50%
表面活性剂 25.00%~40.00%
二甲基亚砜 0. 50%~9.00%
油 1.50%~13.00%
余量为蒸馏水,上述原料的质量百分比之和为100%。
3.一种复方乙酰甲喹氟苯尼考纳米乳抗菌药物,其特征在于,由下述质量百分比的原料制成:
表面活性剂 35.00%
油 5.00%
乙酰甲喹 2.50%
氟苯尼考 2.50%
二甲基亚砜 2.50%
蒸馏水 52.5%。
4.权利要求1所述复方乙酰甲喹氟苯尼考纳米乳抗菌药物的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)按配方比例称取乙酰甲喹,氟苯尼考,表面活性剂,二甲基亚砜 ,油,蒸馏水,备用;
2)将氟苯尼考加入二甲基亚砜中,搅拌溶解,制成溶液;
3)将乙酰甲喹、表面活性剂和油搅拌均匀,制成溶液;
4)将步骤2)和步骤3)所得的两种溶液混合并搅拌均匀,再缓慢加入蒸馏水,同时不断搅拌,直至形成均匀透明的液体,即得。
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Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20111221 |