CN101249161A - 小儿咳喘灵颗粒的质量控制方法 - Google Patents
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Abstract
小儿咳喘灵颗粒是临床常用的儿科用药。为了更好的保证这种儿科用药的临床应用的安全，本发明提供了改进的质量控制方法。本发明的具体内容为：取小儿咳喘灵颗粒2克，加75％乙醇20毫升超声10分钟溶解，滤过，滤液蒸干，残渣加10毫升甲醇使溶解，作为供试品溶液；另取对照品绿原酸适量，加甲醇制成每1毫升含0.5毫克的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，取供试品溶液、对照品溶液各1微升，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以36％醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，置紫外灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
Description
技术领域
本发明属于中药技术领域，具体涉及小儿咳喘灵颗粒的质量控制方法。
背景技术
小儿咳喘灵颗粒适应小儿生理及病理特点，小儿咳喘大多由风热袭肺或风寒郁而化热壅遏于肺所致，治以清肺泄热、止咳化痰、宣肺平喘。小儿咳喘灵颗粒由麻黄、石膏、苦杏仁、瓜蒌、板蓝根、金银花、甘草组成。方中麻黄苦甘温，宣肺解表平喘；石膏辛甘大寒，清泄肺胃之热以生津；杏仁味苦，降利肺气而平喘咳，与麻黄相配则宣降相固，和石膏相配则清肃协同；瓜蒌化痰通腑；金银花、板蓝根疏散风热、清热解毒。诸药合用，疗效卓著。
现代药效学研究证实，麻黄、杏仁抑制咳嗽中枢而镇咳；石膏具有抗感染作用；金银花、板蓝根具有广谱抗菌、抗病毒作用，板蓝根所含的嘌呤、嘧啶及吲哚类成分，可能有干扰病毒DNA合成作用；甘草镇咳祛痰，具有激素样作用，能减轻炎症反应。
因此，小儿咳喘灵颗粒可使症状、体征改善快，缩短病程，并可减少抗病毒和抗生素药物的剂量，延缓耐药性的产生。小儿咳喘灵为黄棕色的颗粒，气芳香，味甜、微苦辛，患儿易于接受，解决了小儿服用汤剂难的棘手问题，且疗效满意，无明显不良反应，便于临床推广使用。
目前小儿咳喘灵颗粒的处方、制法、功能主治、用法用量、规格以及鉴别如下：
处方：麻黄62.5克 金银花625克 苦杏仁312.5克
板蓝根625克 石膏937.5克 甘草 312.5克 瓜蒌312.5克
制法：以上七味，石膏、苦杏仁、甘草、板蓝根、瓜蒌，加10倍量的水煎煮1小时，滤过，药渣与麻黄、金银花加10倍量的水煎煮1小时，滤过，合并滤液，静置，取上清液，浓缩成相对密度为1.32～1.35的流浸膏，加乙醇1倍量，搅匀，冷藏12～48小时，滤取上清液，回收乙醇，浓缩成相对密度为1.33的稠膏，加入适量的糊精及蔗糖粉制粒，干燥，制成1000克，即得。
性状：本品为黄棕色的颗粒；味甜、微苦、辛。
功能与主治：宣肺、清热、止咳、祛痰、平喘。用于上呼吸道感染，气管炎，肺炎，咳嗽等。
用法与用量：开水冲服，2岁以内一次1克，3至4岁一次1.5克，5至7岁一次2克，一日3～4次。
规格：(1)每袋装10克(2)每袋装2克
鉴别：
(1)取本品颗粒20克，加氨试液2毫升，加三氯甲烷40毫升，加热回流1小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1毫升使溶解，作为供试品溶液。另取盐酸麻黄碱对照品，加甲醇制成每1毫升含1毫克的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述供试品溶液10微升，对照品溶液5微升，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-浓氨试液(20∶5∶0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
(2)取本品颗粒50克，加水200毫升，加氯仿振摇提取3次，每次50毫升，合并氯仿液，蒸干，残渣加甲醇1毫升使溶解，作为供试品溶液。另取靛玉红对照品，加甲醇制成1毫升含1毫克的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述供试品溶液25微升，对照品溶液5微升，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以苯-三氯甲烷-丙酮(5∶4∶1)为展开剂，展开，取出，晾干。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
该项目下的氯仿振摇方法容易发生乳化，导致有机相和水相分离不完全，严重影响检测结果，而且发生乳化的提取液中氯仿回收困难，这对环境的保护也存在威胁。此检测项目下展开剂使用有毒溶剂苯，对药品的生产和流通领域的监控人员的安全也是一种隐患。
(3)取本品颗粒15克，加乙醚40毫升置水浴上回流1小时，滤过，弃去滤液，药渣加甲醇60毫升，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水20毫升使溶解，加正丁醇提取3次，每次15毫升，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇2毫升使溶解，加于中性氧化铝柱(100～200目，8克，内径1.0厘米，干法装柱)上，先用甲醇80毫升洗脱，弃去洗脱液，再用70％甲醇100毫升洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1毫升使溶解，作为供试品溶液。另取甘草对照药材1克，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述供试品溶液5微升，对照药材溶液2微升，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G板上，以苯-丙酮-乙酸乙酯-甲酸-水(20∶25∶30∶3∶3)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
小儿咳喘灵颗粒的质量标准中没有金银花的定性鉴别手段，这也是一个目前存在的不足；而且原此检测项目下展开剂使用有毒溶剂苯，对药品的生产和流通领域的监控而言也存在隐患。原标准中氯仿振摇方法容易发生乳化，导致有机相和水相分离不完全，严重影响检测结果，而且发生乳化的提取液中氯仿回收困难，这对环境的保护也存在威胁。
发明内容：
小儿咳喘灵颗粒的质量标准中没有金银花的定性鉴别手段，这也是一个目前存在的不足；而且原此检测项目下展开剂使用有毒溶剂苯，对药品的生产和流通领域的监控而言也存在隐患。原标准中氯仿振摇方法容易发生乳化，导致有机相和水相分离不完全，严重影响检测结果，而且发生乳化的提取液中氯仿回收困难，这对环境的保护也存在威胁。
基于以上问题，本发明的目的在于提供改进的小儿咳喘灵颗粒的质量控制方法。
具体而言，本发明的质量控制方法为：取本品颗粒2克，加75％乙醇20毫升超声10分钟溶解，滤过，滤液蒸干，残渣加10毫升甲醇使溶解，作为供试品溶液；另取对照品绿原酸适量，加甲醇制成每1毫升含0.5毫克的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，取供试品溶液、对照品溶液各1微升，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以36％醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，置紫外灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
上述方法还可以进一步采用采用以下方法：在与靛玉红对照品比对，制备供试品溶液时，采用回流的方法提取小儿咳喘灵颗粒。
上述方法还可以进一步采用采用以下方法：取小儿咳喘灵颗粒50克，加水150毫升，加热使溶解，沿壁缓缓加入氯仿150毫升，置67℃水浴加热回流2小时，静置分层，分取氯仿液，蒸干，残渣加甲醇1毫升使溶解，作为供试品溶液。另取靛玉红对照品，加甲醇制成1毫升含1毫克的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液25微升，对照品溶液5微升，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-三氯甲烷-丙酮按照5∶4∶1配比展开剂，展开，取出，晾干；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
上述质量控制方法，还可以进一步采用采用以下方法：取小儿咳喘灵颗粒15克，加乙醚40毫升置水浴上回流1小时，滤过，弃去滤液，药渣加甲醇60毫升，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水20毫升使溶解，加正丁醇提取3次，每次15毫升，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇2毫升使溶解，加于中性氧化铝柱，先用甲醇80毫升洗脱，弃去洗脱液，再用70％甲醇100毫升洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1毫升使溶解，作为供试品溶液。另取甘草对照药材1克，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液5微升，对照药材溶液2微升，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G板上，以环己烷-丙酮-乙酸乙酯-甲酸-水按照20∶25∶30∶3∶3配比展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
本发明的质量控制方法提供小儿咳喘灵颗粒的有关金银花的定性检测方法，为这种广泛用于小儿外感风寒的药物提供了更加安全有效的鉴定方法，为药品实际生产、流通领域质量监控和临床应用提供了有效保障。
而且通过将目前的质量控制方法中提取方法和展开剂的改进，为药品实际生产、流通领域质量监控和临床应用提供了有效保障。
具体实施方式：
随机挑选5个批号的小儿咳喘灵颗粒(批号为：20070910-1、20071018-1、20071119-1、20080108-1、20080204-1)。
实验例1
取小儿咳喘灵颗粒不同批号(批号为：20070910-1、20071018-1、20071119-1、20080108-1、20080204-1)的颗粒各2克，加75％乙醇20毫升超声10分钟溶解，滤过，滤液蒸干，残渣加10毫升甲醇使溶解，作为供试品溶液；另取对照品绿原酸适量，加甲醇制成每1毫升含0.5毫克的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，取供试品溶液、对照品溶液各1微升，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以36％醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，置紫外灯365nm下检视，检测结果如下：
表1小儿咳喘灵颗粒中金银花的检测结果
实验例2
1、原质量控制方法的对照实验：
取小儿咳喘灵颗粒不同批号(批号为：20070910-1、20071018-1、20071119-1、20080108-1、20080204-1)的颗粒50克加水200毫升，加氯仿振摇提取3次，每次50毫升，合并氯仿液，蒸干，残渣加甲醇1毫升使溶解，作为供试品溶液。另取靛玉红对照品，加甲醇制成1毫升含1毫克的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述供试品溶液25微升，对照品溶液5微升，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以苯-三氯甲烷-丙酮(5∶4∶1)为展开剂，展开，取出，晾干。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
2、改进质量控制方法的对照实验：
取小儿咳喘灵颗粒不同批号(批号为：20070910-1、20071018-1、20071119-1、20080108-1、20080204-1)的颗粒50克，加水150毫升，加热使溶解，沿壁缓缓加入氯仿150毫升，置67℃水浴加热回流2小时，静置分层，分取氯仿液，蒸干，残渣加甲醇1毫升使溶解，作为供试品溶液。另取靛玉红对照品，加甲醇制成1毫升含1毫克的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液25微升，对照品溶液5微升，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-三氯甲烷-丙酮按照5∶4∶1配比展开剂，展开，取出，晾干；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
发明人通过对提取过程是否发生的乳化对比，实验结果如下：
表2小儿咳喘灵颗粒质量控制方法中提取方法对照
| 批号 | 原质量控制方法 | 改进质量控制方法 |
| 20070910-1 | 乳化，提取液无法分层 | 无乳化，提取液分层完全 |
| 20071018-1 | 乳化，提取液无法分层 | 无乳化，提取液分层完全 |
| 20071119-1 | 乳化，提取液无法分层 | 无乳化，提取液分层完全 |
| 20080108-1 | 乳化，提取液无法分层 | 无乳化，提取液分层完全 |
| 20080204-1 | 乳化，提取液无法分层 | 无乳化，提取液分层完全 |
由此可以看出采用本发明的提取方法后可以完全避免乳化现象的发生，为质量控制方法中的完全提取提供了保障，也避免了由于氯仿分离不完全导致的环境隐患。
另外发明人还对供试品对于靛玉红的比移值进行比对，实验结果如下：
表3小儿咳喘灵颗粒质量控制方法中比移值(Rf)对照
| 批号 | 原质量控制方法 | 改进质量控制方法 |
| 20070910-1 | Rf＝0.41 | Rf＝0.41 |
| 20071018-1 | Rf＝0.40 | Rf＝0.40 |
| 20071119-1 | Rf＝0.40 | Rf＝0.41 |
| 20080108-1 | Rf＝0.41 | Rf＝0.40 |
| 20080204-1 | Rf＝0.42 | Rf＝0.42 |
采用甲苯替代苯作展开剂组分，对薄层层析的分离没有影响，比移值没有显著变化。
实验例3
1、原质量控制方法的对照实验：
取小儿咳喘灵颗粒不同批号(批号为：20070910-1、20071018-1、20071119-1、20080108-1、20080204-1)取小儿咳喘灵颗粒15克，加乙醚40毫升置水浴上回流1小时，滤过，弃去滤液，药渣加甲醇60毫升，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水20毫升使溶解，加正丁醇提取3次，每次15毫升，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇2毫升使溶解，加于中性氧化铝柱(100～200目，8克，内径1.0厘米，干法装柱)上，先用甲醇80毫升洗脱，弃去洗脱液，再用70％甲醇100毫升洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1毫升使溶解，作为供试品溶液。另取甘草对照药材1克，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述供试品溶液5微升，对照药材溶液2微升，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G板上，以苯-丙酮-乙酸乙酯-甲酸-水(20∶25∶30∶3∶3)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
2、改进质量控制方法的对照实验：
取小儿咳喘灵颗粒不同批号(批号为：20070910-1、20071018-1、20071119-1、20080108-1、20080204-1)的颗粒15克，加乙醚40毫升置水浴上回流1小时，滤过，弃去滤液，药渣加甲醇60毫升，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水20毫升使溶解，加正丁醇提取3次，每次15毫升，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇2毫升使溶解，加于中性氧化铝柱，先用甲醇80毫升洗脱，弃去洗脱液，再用70％甲醇100毫升洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1毫升使溶解，作为供试品溶液。另取甘草对照药材1克，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液5微升，对照药材溶液2微升，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G板上，以环己烷-丙酮-乙酸乙酯-甲酸-水按照20∶25∶30∶3∶3配比展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。发明人还对供试品对于靛玉红的比移值进行比对，实验结果如下：
表4小儿咳喘灵颗粒质量控制方法中薄层检测对照
| 批号 | 原质量控制方法 | 改进质量控制方法 |
| 20070910-1 | 供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点 | 供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点 |
| 20071018-1 | 供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点 | 供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点 |
| 20071119-1 | 供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点 | 供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点 |
| 20080108-1 | 供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点 | 供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点 |
| 20080204-1 | 供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点 | 供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点 |
采用甲苯替代苯作展开剂组分，对薄层层析的分离没有影响。本发明的质量控制方法提供小儿咳喘灵颗粒的检测方法，为这种广泛用于小儿外感风寒的药物提供了更加安全有效的鉴定方法，为药品实际生产、流通领域质量监控和临床应用提供了有效保障。
Claims (4)
1. 小儿咳喘灵颗粒的质量控制方法，其特征在于采用以下方法：取小儿咳喘灵颗粒2克，加75％乙醇20毫升超声10分钟溶解，滤过，滤液蒸干，残渣加10毫升甲醇使溶解，作为供试品溶液；另取对照品绿原酸适量，加甲醇制成每1毫升含0.5毫克的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，取供试品溶液、对照品溶液各1微升，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以36％醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，置紫外灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
2. 根据权利要求1所述质量控制方法，其特征在于采用以下方法：在与靛玉红对照品比对，制备供试品溶液时，采用回流的方法提取小儿咳喘灵颗粒。
3. 根据权利要求2所述质量控制方法，其特征在于采用以下方法：取小儿咳喘灵颗粒50克，加水150毫升，加热使溶解，沿壁缓缓加入氯仿150毫升，置67℃水浴加热回流2小时，静置分层，分取氯仿液，蒸干，残渣加甲醇1毫升使溶解，作为供试品溶液。另取靛玉红对照品，加甲醇制成1毫升含1毫克的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液25微升，对照品溶液5微升，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-三氯甲烷-丙酮按照5∶4∶1配比展开剂，展开，取出，晾干；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
4. 根据权利要求1-3任一所述质量控制方法，其特征在于采用以下方法：取小儿咳喘灵颗粒15克，加乙醚40毫升置水浴上回流1小时，滤过，弃去滤液，药渣加甲醇60毫升，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水20毫升使溶解，加正丁醇提取3次，每次15毫升，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇2毫升使溶解，加于中性氧化铝柱，先用甲醇80毫升洗脱，弃去洗脱液，再用70％甲醇100毫升洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1毫升使溶解，作为供试品溶液。另取甘草对照药材1克，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液5微升，对照药材溶液2微升，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G板上，以环己烷-丙酮-乙酸乙酯-甲酸-水按照20∶25∶30∶3∶3配比展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
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