CN102305839A

CN102305839A - 宣肺平喘的中药组合物的检测方法

Info

Publication number: CN102305839A
Application number: CN201110212967A
Authority: CN
Inventors: 付立家; 付建家
Original assignee: Beijing Asia East Bio Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Beijing Asia East Bio Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2007-09-26
Filing date: 2007-09-26
Publication date: 2012-01-04

Abstract

本发明公开了一种用于宣肺，平喘的药物组合物的检测方法。本发明的药物组合物原料药组成为：麻黄、生姜、桂枝、苦杏仁、五味子(制)、炙甘草组成，其检测方法为：对麻黄、生姜、甘草进行薄层鉴别。

Description

宣肺平喘的中药组合物的检测方法

本发明为分案申请，原案申请号为200710122488.5，原案申请日为2007年09月26日，原案发明名称为：宣肺平喘的中药组合物及其制备方法和质量控制方法。

技术领域

本发明涉及一种用于宣肺，平喘的中药组合物的检测方法，尤其涉及一种用于宣肺，平喘的胶囊剂的检测方法，属于中药技术领域。

背景技术

慢性阻塞性肺疾病是一种内科常见病、多发病，是一种重要的慢性呼吸系统疾病，患病患者数多，死率高，由于其病情迁延，严重影响患者的劳动能力和生活质量，而受到世界各国的普遍重视。

目前，医学界尚无办法有效地控制慢性阻塞性肺疾病病情的发展，寻求防止慢性阻塞性肺疾病的有效方法是国内外医学界急待解决的课题。慢性阻塞性肺疾病发病机制尚未完全明了，目前普遍认为慢性阻塞性肺疾病是以气道、肺实质和肺血管的慢性炎症为特征，在肺的不同部位有肺泡巨噬细胞、T淋巴细胞和中性粒细胞增加。激活的炎症细胞释放多种介质，破坏肺的结构和(或)促进中性粒细胞炎症反应。吸入有害颗粒或气体可导致肺部炎症；吸烟可诱导炎症并直接损害肺脏。除炎症外，肺部的蛋白酶和抗蛋白酶系统失衡，以及氧化抗氧化失衡也起了重要的作用。目前现代医学对于慢性阻塞性肺疾病是通过药物治疗，预防和治疗并发症，改善症状，主要是呼吸困难，提高生活质量，去除慢性阻塞性肺疾病急性加重的诱因，嘱咐患者戒烟。由于该病患者机体免疫力降低和呼吸防御机制受损，容易出现呼吸道感染，反复感染引起支气管黏膜充血水肿，腺体增生肥大，分泌功能亢进，管壁增厚、狭窄，加重气流阻塞。感染的病原体常见为细菌、病毒、支原体等。西医药针对菌主要采用抗菌药物、激素，而对于病毒所致感染尚无有效药物，何况抗菌药物、激素又具有一定的毒副作用，另外，即使急性期经治疗得到缓解，仍不能有效的控制其复发。因此，为了更好的缓解慢性阻塞性肺疾病发展，控制其复发，提高生存质量，使慢性阻塞性肺疾病治疗更加规范化，寻找安全、有效的治疗慢性阻塞性肺疾病患者的中药方药十分必要。

发明内容

本发明目的在于提供一种具有宣肺，平喘作用的中药组合物；

本发明目的还在于提供一种具有宣肺，平喘作用的中药组合物制备方法；

本发明目的还在于提供一种具有宣肺，平喘作用的中药组合物的质量控制方法。

本发明目的是通过如下技术方案实现的：

本发明所述的具有宣肺，平喘作用的中药组合物是由如下重量比的原料药制成的：

麻黄3000-4000重量份、生姜2000-3000重量份、桂枝2000-3000重量份、苦杏仁1000-1500重量份、五味子(制)250-500重量份、炙甘草80-160重量份

上述原料优选配比为：

麻黄3000-3200重量份、生姜2800-3000重量份、桂枝2800-3000重量份、苦杏仁1400-1500重量份、五味子(制)300-400重量份、炙甘草100-120重量份

上述原料优选配比为：

麻黄3000g、生姜3000g、桂枝3000g、苦杏仁1500g、五味子(制)375g、炙甘草112.5g

本发明所述中药组合物的制备方法包括以下步骤：

以上药材除苦杏仁外，其他五味药材，采用逆流循环提取工艺加水煎煮1-3次，每次2-4小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.08(60℃)的清膏，放冷至室温，加入等量乙醇，搅匀，静置12-36小时，取上清液，回收乙醇并浓缩至相对密度为1.34～1.40(60～70℃)的稠膏；苦杏仁漂洗去灰土，沥干水分置盘上，放入热压灭菌锅内，控制蒸汽压力为0.01～0.03kpa/cm²(103℃)，热压蒸煮20-40分钟，取出即放入少量冷水中浸泡，除去种皮，晒干，即得杏仁炮制品。将上述稠膏与杏仁炮制品真空干燥，粉碎，依照本领域常规技术制成临床接受的制剂，如：胶囊剂、片剂、颗粒剂、软胶囊、丸剂。

本发明所述中药组合物胶囊剂的制备方法为：取原料药麻黄3000g、生姜3000g、桂枝3000g、苦杏仁1500g、五味子(制)375g、炙甘草112.5g

其特征是该方法包括以下步骤：

以上药材除苦杏仁外，其他五味药材，采用逆流循环提取工艺加水煎煮2次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.08(60℃)的清膏，放冷至室温，加入等量乙醇，搅匀，静置24小时，取上清液，回收乙醇并浓缩至相对密度为1.34～1.40(60～70℃)的稠膏；苦杏仁漂洗去灰土，沥干水分置盘上，放入热压灭菌锅内，控制蒸汽压力为0.01～0.03kpa/cm²(103℃)，热压蒸煮30分钟，取出即放入少量冷水中浸泡，除去种皮，晒干，即得杏仁炮制品。将上述稠膏与杏仁炮制品真空干燥，粉碎，加糊精适量，混匀，装入胶囊，制成1000粒，即得。

本发明药物组合物质量控制方法包括如下鉴别方法和/或含量测定中的一种或几种：

(1)取本发明药物相当于原药材9-11g，加浓氨试液1-3ml，再加三氯甲烷30-50ml，加热回流0.5-2小时，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取盐酸麻黄碱，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各3～5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-浓氨试液(15-25∶3-10∶0.5-2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％茚三酮乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的紫红色斑点。

(2)取本发明药物相当于原药材200-220g，加乙醚20-40ml，超声20-40分钟(功率300W，频率50kHz)，滤过，滤液挥干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取干姜对照药材1g，加水80-100ml煎煮1小时，滤过，滤液浓缩至20-30ml，加等体积石油醚(60～90℃)萃取，取上层液，蒸干，残渣加1ml甲醇使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取对照药材溶液5μl、供试品溶液15μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60～90℃)-乙酸乙酯(3-7∶0.5-2)为展开剂，二次展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

(3)取本发明药物相当于原药材200-220g，加石油醚(60～90℃)40-60ml，加热回流0.5-2小时，滤过，残渣加甲醇40-60ml，加热回流0.5-2小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水30-50ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取2-4次，每次10-30ml，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的水洗涤2-4次，每次20-40ml，取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取甘草对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各3～5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(10-15∶5-10∶1-3)的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

【含量测定】

(1)照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VI D)测定。

色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.1％磷酸(含0.1％三乙胺)-乙腈(90-100∶0-10)为流动相；检测波长为210nm。理论板数按盐酸麻黄碱峰计算应不低于2500。

对照品溶液的制备取盐酸麻黄碱对照品适量，精密称定，用甲醇溶解制成每1ml含50μg的溶液，作为对照品溶液，即得。

供试品溶液的制备取本发明药物相当于原药材3-5g，精密称定，至50ml容量瓶中，精密加入0.5mol/L的盐酸溶液1ml，再加甲醇至刻度，塞紧，超声处理20-40分钟，放冷，微孔滤膜(0.45μm)过滤，即得。

测定法分别精密吸取对照品溶液及供试品溶液各5μl～10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

本发明药物日用计量含麻黄以盐酸麻黄碱(C₁₀H₁₅NO·HCl)量计，不得少于8.0mg。

(2)照高效液相色谱法(附录VI D)测定。

色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-甲醇-0.1％磷酸(35-40∶15-20∶40-50)为流动相；检测波长为250nm。理论板数按五味子醇甲峰计算应不低于3000。

对照品溶液的制备取五味子醇甲对照品1.5mg，精密称定，置50ml量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得(每1ml含五味子醇甲0.03mg)。

供试品溶液的制备取本发明药物相当于原药材100-110g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，超声处理(功率250W，频率20kHz)10-30min，取出，放冷，再称定重量，加甲醇补足减少的重量，滤过，精密吸取续滤液20ml，蒸干，残渣加甲醇使溶解，并定溶至5ml，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，取续滤液，即得。

测定法分别精密吸取对照品溶液与供试溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

本发明药物含五味子醇甲(C₂₄H₃₂O₇)不得少于0.40％。

本发明药物组合物质量控制方法优选如下鉴别方法和/或含量测定中的一种或几种：

(1)取本发明药物相当于原药材10.8g，加浓氨试液2ml，再加三氯甲烷40ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取盐酸麻黄碱，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各3～5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-浓氨试液(20∶5∶0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％茚三酮乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的紫红色斑点。

(2)取本发明药物相当于原药材216.25g，加乙醚30ml，超声30分钟(功率300W，频率50kHz)，滤过，滤液挥干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取干姜对照药材1g，加水80ml煎煮1小时，滤过，滤液浓缩至20ml，加等体积石油醚(60～90℃)萃取，取上层液，蒸干，残渣加1ml甲醇使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取对照药材溶液5μl、供试品溶液15μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60～90℃)-乙酸乙酯(5∶1)为展开剂，二次展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

(3)取本发明药物相当于原药材216.25g，加石油醚(60～90℃)50ml，加热回流1小时，滤过，残渣加甲醇50ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水40ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的水洗涤3次，每次30ml，取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取甘草对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各3～5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(13∶7∶2)的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

【含量测定】

(1)照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VID)测定。

色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.1％磷酸(含0.1％三乙胺)-乙腈(97∶3)为流动相；检测波长为210nm。理论板数按盐酸麻黄碱峰计算应不低于2500。

供试品溶液的制备取本发明药物相当于原药材4.3g，精密称定，至50ml容量瓶中，精密加入0.5mol/L的盐酸溶液1ml，再加甲醇至刻度，塞紧，超声处理30分钟，放冷，微孔滤膜(0.45μm)过滤，即得。

(2)照高效液相色谱法(附录VI D)测定。

色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-甲醇-0.1％磷酸(39∶16.7∶44.3)为流动相；检测波长为250nm。理论板数按五味子醇甲峰计算应不低于3000。

供试品溶液的制备取本发明药物相当于原药材108.1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，超声处理(功率250W，频率20kHz)20min，取出，放冷，再称定重量，加甲醇补足减少的重量，滤过，精密吸取续滤液20ml，蒸干，残渣加甲醇使溶解，并定溶至5ml，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，取续滤液，即得。

本发明药物含五味子醇甲(C₂₄H₃₂O₇)不得少于0.40％。

具体实施方式

下述实验例和实施例进一步说明但不下限于本发明

实验例1.本发明中药组和物胶囊制备工艺的优选实验

1.水提加水量的筛选

配置5份药材每份648.8g，分三组进行试验，第一组加水量6倍量、4倍量，第二组加水量8倍量、6倍量，第三组加水量10倍量、8倍量，第四组逆流循环提取工艺加水2倍量，第五组逆流循环提取工艺加水4倍量，第六组逆流循环提取工艺加水6倍量，以水提后出清膏量为指标，确定加水量，结果见表1：

表1：水提加水量

以出膏量为指标，可以看出逆流循环提取工艺的用水量明显减少，出膏率得以提高，并且可以减少浓缩时间，生产中选用逆流循环提取工艺加水4倍量。

2、醇沉加醇量的筛选

配置3份药材每份648.8g，分三组进行试验，第一组加乙醇量0.5倍量，第二组加乙醇量1倍量，第三组加乙醇量2倍量，以醇沉后出稠膏量为指标，确定加醇量，结果见表2：

表2：醇沉加醇量

以出膏量为指标，可以看出加乙醇1倍量出膏量较好，生产中选用加乙醇量1倍量。

表3：主要技术参数

3、中试

表4：批中试生产数据

实验例2.本发明中药组和物中苦杏仁的炮制工艺的优选实验

中药苦杏仁含有止咳成份苦杏仁苷，在适当条件下，如受潮、煎煮和水浸等，其本身所含有的苦杏仁苷酶易使苦杏仁苷分解，从而降低甚至失去药效。因此，苦杏仁需经炮制达到灭酶保苷的目的。由于目前传统的炮制方法：水煎煮法和清炒法灭酶保苷效果不佳，且质量难于控制，故本文中引入蒸汽热压法与传统方法进行对比实验，以探索更好的炮制方法。

1仪器和试药

1.1仪器：YXQ.GY22.600型卧式圆形压力蒸汽消毒器(衡阳医疗器械厂)。

1.2试药：硝酸银为AR级；碘化钾，浓氨溶液均为CP级；苦杏仁生品及制品。

2方法和结果

2.1苦杏仁中苦杏仁苷的含量测定。

取苦杏仁(生品)粗粉约15g，精密称重，置凯氏烧瓶中，加水150ml，立即密塞，置37℃水浴中保温2h，连接冷凝管，通水蒸汽蒸馏，馏出液导入水10ml和氨试液2ml的吸收液中，接受瓶置冰浴中冷却，至馏出液达60ml时停止蒸馏，馏出液中加碘化钾试液(16.5％)2ml，用硝酸银液(0.1mol/L)缓缓滴定，至溶液显出的黄色浑浊不消失。1ml硝酸银液(0.1mol/L)相当于91.48mg苦杏仁苷(C₂₀H₂₇NO₁₁)。结果见表5。

表5苦杏仁中苦杏仁苷含量测定

*硝酸银滴定液为0.1008mol/L

由表1可知，生苦杏仁中苦杏仁苷的平均含量为4.343％。

2.2传统炮制法制品中苦杏仁苷和含量测定分别将水煎煮法制和清炒法制苦杏仁碾成粗粉，各取粗粉约15g。照上述方法进行含量测定。结果见表6。

表6苦杏仁传统炮制法苦杏仁苷测定结果

由表2可知，清炒法制苦杏仁中苦杏仁苷的平均含量为3.061％；水煎煮法制苦杏仁中苦杏仁苷的平均含量为2.989％。

2.3蒸汽热压法制品中苦杏仁苷的含量测定

苦杏仁200g净选后漂洗去灰土，沥干水分置盘上，放入热压灭菌锅内，控制蒸汽压力为0.03kpa/cm²(103℃)，热压蒸煮30分钟，取出即放入少量冷水中浸泡，除去种皮，晒干。并按上述方法测定苦杏仁苷的含量，结果见表7。

表7蒸汽热压法炮制苦杏仁后苦杏仁苷测定结果

由表3可知，蒸汽热压法炮制苦杏仁中苦杏仁苷的平均含量为4.059％。

3结果

3.1苦杏仁目前常用的炮制方法为水煎煮法及清炒法，该两种方法简便易行，适用性强，但灭酶效果差，残酶还能继续分解苷。水煎煮法炮制苦杏仁投入沸水中，造成水温下降，严重者可降至70℃，这为酶解作用提供了机会，用水量大，部分苷溶于水而损失。清炒法要炒至全黄，才能达到灭酶效果，且火候温度不易控制，制品外观变成黄色，影响药品质量。由于操作时人为因素(温度、时间由人为判定)影响较大，品质难于均一。

3.2蒸汽热压灭酶法炮制苦杏仁，温度较水煎煮法高，且不用水浸泡，灭酶效果好，苷流失极少。根据实验结果，热压(103℃)灭酶30min，灭酶率可达97.5％。

实验例3.药效学实验

为了证明本发明的疗效，我们进行了以下药效学实验。

以下药效试验所用本发明药物组为依实施例4制备的胶囊剂；

阳性对照药：以下方法制得的颗粒剂：

麻黄1200g、生姜1200g、五味子(制)150g、炙甘草45g

蔗糖627g、糊精260g制成1000g

以上四味药材，加水煎煮二次，第一次3小时，第二次2小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.08(60℃)的清膏，放冷至室温，加入等量乙醇，搅匀，静置24小时，取上清液，减压回收乙醇并浓缩至相对密度为1.34～1.40(60～70℃)的稠膏。加蔗糖、糊精，混匀，制成颗粒，干燥，即得。

1材料

1.1试剂氨水、拘椽酸、苯酚红、磷酸组织胺、氯化乙酰胆碱、磷酸组织胺。

1.2仪器721分光光度计，上海第三分析仪器厂出品。

1.3动物昆明种小鼠，雌雄各半，体质量18-22g；大鼠，雌雄各半，体质量200-250g。豚鼠150～200g，♀♂兼用。

2镇咳作用对小鼠氨水所致咳嗽的影响。小鼠48只，雌雄各半，随机分成4组，按下表剂量灌胃给药，第1天上、下午各1次，第2天给药后30min时将小鼠置于5000ml玻璃钟罩内，恒压将氨水(28％)喷人钟罩，喷雾5s，观察小鼠的咳嗽潜伏期及咳嗽次数(3min)。结果见表8。

表8本发明药物组对小鼠因氨水所致咳嗽的影响(x±s)

注：与生理盐水组相比较*P＜0.05，**P＜0.01。

结果：本发明药物组可使小鼠氨水所致咳嗽潜伏期延长，3min咳嗽次数减少。

3祛痰作用对小鼠呼吸道酚红排痰量的影响，小鼠48只，雌雄各半，随机分成4组，按表1的不同剂量灌胃药，第1天上、下午各1次，第2天给完药后0.5h腹腔注射酚红溶液0.5ml/只。30min后，脱椎处死，从甲状软骨处插人气管内约0.3cm，用1ml注射器吸取NaHCO₃溶液0.5ml推注入气管内，反复连续推抽3次，最后用注射器将灌洗液抽出注人试管中，按上述方法操作3次，冲洗9次，共吸取碳酸钠溶液1.5ml，合并洗出液约1.2-1.5ml，离心后取上清液，721分光光度计测气管酚红分泌量，结果见表9。

表9本发明药物组对小鼠呼吸道酚红排痰量的影响(x±s)

注：与生理盐水组相比较：*P＜0.05，**P＜0.01，与阳性对照组比较※P＜0.05。

结果：本发明药物组可使小鼠呼吸道酚红排痰量增加。

4平喘作用

4.2本发明药物组对豚鼠引喘潜伏期的影响

豚鼠哮喘模型制备按喷雾致喘法，选用幼年豚鼠，体重＜200g，置入20cm×20cm×150cm的有机玻璃箱内，超声雾化喷入2％乙酰胆碱和0.2％磷酸组胺混合液15s，进行筛选，引喘潜伏期超过120s者不予选用。次日，豚鼠随机分组，用药组经口给予本发明药物组和阳性对照组(按生药量计算，下同)，阴性对照组给予等容积的生理盐水，氨茶碱组腹腔注射氨茶碱(25mg·kg^-1)。用药后1h超声雾化喷入2％乙酰胆碱和0.2％磷酸组胺混合液15s测定引喘潜伏期(即从喷雾开始到哮喘发作，呼吸困难，直至抽搐倒地的时间)，结果见表10。

表10本发明药物组对豚鼠哮喘潜伏期的影响(x±s，n＝8)

与生理盐水组比较^**P＜0.01

结果：本发明药物组可使豚鼠哮喘潜伏期明显延长，对组织胺乙酰胆碱混合刺激所致哮喘有对抗作用。

4.3对豚鼠离体气管平滑肌条收缩的影响

豚鼠离体气管平滑肌条收缩试验制备豚鼠离体气管条，置于盛有充氧克-亨氏液离体器官测定浴槽内(37℃)，负荷2.0g平衡，分别注入胆碱或组胺(终浓度分别为2.5×10^-7和5×10^-7mmol·L^-1)，记录最大收缩高度，在此基础上分别加入本发明药物组和阳性对照组、氨茶碱组，平衡后记录收缩高度，结果见表11。

在此基础上，按一定的比例分设4个剂量组，记录其收缩高度。以口服液的对数剂量与其对应的收缩抑制率进行回归计算，得出其IC50分别为0.095g·L^-1(胆碱，n＝4，r＝0.989)和0.345g·L^-1(组胺，n＝4，r＝0.965)。

表11本发明药物组对豚鼠离体气管平滑肌收缩的影响(x±s，n＝6)

乙酰胆碱终浓度：2.5×10^-7mmol·L^-1；组胺终浓度：5×10^-7mmol·L^-1；与生理盐水组比较*P＜0.05，**P＜0.01

结果：乙酰胆碱或组织胺可引发气管平滑肌条强烈收缩，而本发明药物组对痉挛的气管平滑肌具有明显的松弛作用。

4.4对豚鼠离体回肠平滑肌条收缩的影响

豚鼠离体回肠平滑肌条收缩试验制备豚鼠离体回肠2cm，置于盛有充氧台氏液器官测定浴槽内(37℃)，描记其收缩曲线，待肠管自发舒缩稳定平衡后开始实验，分别注入胆碱或组胺(终浓度均为5×10^-7mmol·L^-1)，记录最大收缩高度，在此基础上分别加入本发明药物组和阳性对照组、阿托品组，平衡后记录收缩高度，结果见表12。

在此基础上，按一定的比例分设4个剂量组，记录其收缩高度，以本发明药物组的对数剂量和其相对应的收缩抑制率进行回归计算，得出其IC50分别为0.183g·L^-1(胆碱，n＝4，r＝0.982)和0.249g·L^-1(组胺，n＝4，r＝0.948)。

表12本发明药物组对豚鼠离体回肠平滑肌收缩的影响(x±s，n＝6)

乙酰胆碱终浓度：5×10^-7mmol·L^-1；组胺终浓度5×10^-7mmol·L^-1；与对照组比较**P＜0.01

结果：本发明药物组可对抗乙酰胆碱或组织胺所致离体回肠平滑肌的收缩作用，具有明显的舒张作用。

4.5对乙酰胆碱致豚鼠离体气管容积的影响

豚鼠离体气管容积试验仿离体完整气管毛细管法，击昏豚鼠，制备离体完整气管标本，置于恒温(37℃)的充氧克-亨氏液的浴槽中，观察连接0.1cm毛细管内液面高度。注入胆碱后，气管收缩，气管容积减少，液面抬高，再注入本发明药物组或生理盐水，记录给药后5min的液面高度差，结果见表13。

表13本发明药物组对乙酰胆碱致豚鼠离体气管容积的影响(x±s，n＝6)

乙酰胆碱终浓度：2.5×10^-7mmol·L^-1；与对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01

结果：乙酰胆碱使气管平滑肌收缩，容积减小，本发明药物组可使抬高的液面下降，有对抗乙酰胆碱所致豚鼠离体气管容积缩小的显著作用。

4.6对离体豚鼠肺支气管灌流的影响

离体豚鼠肺支气管灌流试验豚鼠击晕，颈动脉放血，分离气管并连同心肺一并取出，以37℃，予含氧乐氏液进行灌流，通过灌流瓶高度调节灌流量(10ml·min^-1左右)。待灌流量稳定后，注入一定量的乙酰胆碱溶液(3×10^-7mmol·L^-1)，灌流量明显减少，再分别注入一定量的本发明药物组(0.16g·L^-1)和氨茶碱(0.025g·L^-1)，观察灌流量的变化，结果见表14。表14本发明药物组对豚鼠离体肺支气管灌流的影响(x±s，n＝6)

胆碱浓度：3×10^-7mmol·L^-1；本发明药物组浓度：0.16g·ml^-1；氨茶碱浓度：0.025g·ml^-1；

与对照组+胆碱组比较**P＜0.01。

结果：加入胆碱后，因气管和支气管平滑肌收缩离体肺支气管灌流量明显减少，本发明药物组具有明显对抗乙酰胆碱收缩而增加肺支气管灌流量的作用。

实验例4鉴别试验筛选

一、干姜鉴别试验筛选

供试品溶液的制备：

供试品溶液一：取本发明药物相当于原药材216.25g，加乙醚30ml，超声30分钟(功率300W，频率50kHz)，滤过，滤液挥干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；

供试品溶液二：取本发明药物相当于原药材216.25g，加石油醚(60～90℃)50ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；

供试品溶液三：取本发明药物相当于原药材216.25g，加乙醚50ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；

供试品溶液四：取本发明药物相当于原药材216.25g，加石油醚(60～90℃)30ml，超声30分钟(功率300W，频率50kHz)，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。

另取干姜对照药材1g，加水80ml煎煮1小时，滤过，滤液浓缩至20ml，加等体积石油醚(60～90℃)萃取，取上层液，蒸干，残渣加1ml甲醇使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取对照药材溶液5μl、供试品溶液15μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60～90℃)-乙酸乙酯(5∶1)为展开剂，二次展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，结果见表15。

表15供试品溶液的筛选结果

对照药材溶液的制备：

对照药材溶液一：干姜对照药材1g，加水80ml煎煮1小时，滤过，滤液浓缩至20ml，加等体积石油醚(60～90℃)萃取，取上层液，蒸干，残渣加1ml甲醇使溶解，作为对照药材溶液；

对照药材溶液二：干姜对照药材1g，加石油醚(60～90℃)50ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液。

照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取对照药材溶液一、二各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60～90℃)-乙酸乙酯(5∶1)为展开剂，二次展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，结果见表16。

表16对照药材溶液的筛选结果

对照药材溶液	1	2
			显色效果	显色效果好	显色不清晰，有干扰。

展开剂的选择

展开剂一：石油醚(60～90℃)-乙酸乙酯(5∶1)

展开剂二：石油醚(60～90℃)-乙酸乙酯(5∶1)

展开剂三：环己烷-乙醚(1∶1)

展开剂四：环己烷-乙醚(1∶1)

取本发明药物相当于原药材216.25g，加乙醚30ml，超声30分钟(功率300W，频率50kHz)，滤过，滤液挥干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取干姜对照药材1g，加水80ml煎煮1小时，滤过，滤液浓缩至20ml，加等体积石油醚(60～90℃)萃取，取上层液，蒸干，残渣加1ml甲醇使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，在四块硅胶G薄层板上，点对照药材溶液5μl、供试品溶液15μl，分别以展开剂一、二、三、四，二次展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，结果见表17。

表17展开剂的筛选结果

展开剂	1	2	3	4
					展开效果	较差	差	好	差

二、甘草鉴别试验筛选，

展开剂的选择

展开剂一：三氯甲烷-甲醇-水(13∶7∶2)的下层溶液；

展开剂二：正丁醇-3mol/L氨溶液-乙醇(5∶2∶1)；

展开剂三：三氯甲烷-甲醇-水(13∶7∶2)的上层溶液。

取本发明药物相当于原药材216.25g，加石油醚(60～90℃)50ml，加热回流1小时，滤过，残渣加甲醇50ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水40ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的水洗涤3次，每次30ml，取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取甘草对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，取以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板两个，吸取上述两种溶液各3～5μl，分别点于薄层板上，分别以展开剂一、二、三，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，结果见表18。

表18展开剂的筛选结果

展开剂	1	2	3
				展开效果	好	差	较差

实验例4麻黄含量测定方法学考察

检测仪器：岛津公司SPD-10ATvp型高效液相色谱仪

色谱柱：迪玛公司(ZorbaxC184.6×250mm，5μm)

流动相：0.1％磷酸(含0.1％三乙胺)-乙腈(97∶3)

检测波长：210nm 柱温：室温流速：1.000ml/min

对照品来源：盐酸麻黄碱对照品，购于中国药品生物制品检定所

测定方法：取制备样品液；并制备缺麻黄的空白制剂，制备阴性对照液。用微孔滤膜(0.45μm)过滤，分别精密吸取阴性对照液、对照品溶液与供试品溶液各5～10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

1.含量测定方法考察：

(1)空白试验空白溶液的制备是取缺麻黄的群药，按工艺制成空白制剂，再按供试品溶液制备方法制备，上述色谱条件测定，结果空白溶液在与盐酸麻黄碱对照品溶液相同保留时间处无色谱峰，故认为无干扰。

(2)稳定性试验取供试品溶液，分别于配制后0、2、4、6、12、24小时，依法测定，注射相同体积，结果见表19。

表19稳定性试验结果

结果表明，盐酸麻黄碱在24小时内基本稳定。

(3)线性关系考察取对照品溶液(51.28μg/ml)摇匀，分别精密吸取2、4、6、8、10μl注入高效液相色谱仪，测定峰面积，结果见表20，并绘制标准曲线，见附图1，结果表明盐酸麻黄碱在0.103μg～0.513μg范围内线性关系良好，其回归方程为：Y＝1942305X+23805(r＝0.9995)。

表20线性关系考察结果

(4)精密度试验精密吸取盐酸麻黄碱对照品溶液，重复进样5次，每次5μl，求得相对标准偏差＜2％，结果见表21：

表21精密度试验结果

(5)重现性试验按正文方法，取小试同一批样品5份，对每份进行测定，求得相对标准偏差＜2％，结果见表22：

表22重现性试验结果

(6)回收率试验称取已知含量的小试样品0.2g，精密称定，精密加入盐酸麻黄碱对照品溶液(0.4024mg/ml)5ml，按正文供试品溶液的制备方法操作，测定其含量，并计算其回收率，测定结果见表23：

表23回收率试验结果

结果表明：回收率试验合格，本试验方法可用于检测本品中盐酸麻黄碱的含量。

2、样品含量测定

照正文含量测定方法测定实施例5所制备的3批样品。结果见表24：

表24盐酸麻黄碱含量测定结果表

结论：通过3批实施例5中盐酸麻黄碱的含量测定，每粒制剂中，麻黄以盐酸麻黄碱量计为2.70mg～2.85mg，本发明药物组日用计量中含麻黄以盐酸麻黄碱量计，不得少于8.0mg。

实验例5五味子含量测定方法学考察

1.仪器与试药

日本岛津LC-10AT高效液相色谱仪；SPD-10A紫外检测器；KQ-250型超声波处理器；五味子醇甲对照品；甲醇为色谱纯，其他试剂均为分析纯。

2.方法与结果

2.1色谱条件

色谱柱：Shim-pack-C18柱(5μm，4.6mmX150mm)，流动相：乙腈-甲醇-0.1％磷酸(39∶16.7∶44.3)；流速1ml/min；检测波长为250nm；理论板数按五味子醇甲峰计算应不低于3000；柱温为30℃。

2.2对照品溶液的制备

精密称取五味子醇甲对照品适量，加甲醇配制成每1ml含0.03mg溶液，即得。

2.3供试品溶液的制备

取本发明药物相当于原药材108.1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，超声处理20min，取出，放冷，再称定重量，加甲醇补足减少的重量，滤过，精密吸取续滤液20ml，蒸干，残渣加甲醇使溶解，并定溶至5ml，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，取续滤液，即得。

2.4阴性对照溶液的制备

按处方比例制备不含五味子药材的阴性样品，按供试品溶液的制备方法制备阴性对照溶液。分别精密吸取阴性对照溶液、供试品溶液及对照品溶液各10μl，注入液相色谱仪中，按液相色谱条件测定，结果表明，阴性对照溶液色谱图中与对照品相同保留时间处无干扰。

2.5线性关系考察

精密吸取五味子醇甲对照品溶液(0.03mg/ml)4、8、12、16、20μl，分别注入高效液相色谱仪中进行分析，以对照品进样量(μg)为横坐标，以对照品的锋面积积分值为纵坐标作图，绘制标准曲线，其回归方程为：Y＝1327476.55X-9683.109，r＝0.9998，结果表明，五味子醇甲在0.11792-0.5896μg间呈良好的线性关系。

表25线性关系考察结果

2.6精密度试验

精密吸取供试品溶液连续6次重复进样，每次10μl，求得相对标准偏差＜2％，结果见表26：

表26精密度试验结果

2.7稳定性试验

取供试品溶液，于放置0、2、4及6h，分别进样10μl，记录色谱图，结果五味子醇甲峰面积的RSD＝0.49％，结果见表27。

表27稳定性试验结果

结果表明，五味子醇甲在6小时内基本稳定。

2.8重现性试验

取同一批样品，按本文方法独立测定五次，依次进样测定，样品中五味子醇甲含量，，求得相对标准偏差＜2％，见表28。

表28重现性试验结果

结果表明其重现性良好。

2.9回收率试验

取五味子醇甲对照品适量，加入到已测五味子醇甲含量的本发明药物组样品中，按供试品溶液的制备方法制备，并测得五味子醇甲含量，计算回收率，测定结果见表29。

表29加样回收率测定结果

平均回收率＝98.22％，RSD＝0.60％

2.10样品测定

按本文2.2与2.3项下制备对照品溶液和供试品溶液，按上述色谱条件，依法进行测定，共测定三批样品，结果见表30。

表30样品测定结果

结论

(1)五味子是本发明药物组中的主要药味，其所含五味子醇甲是主要有效成分之一，因此以本品五味子醇甲含量作为本发明药物组质量控制指标。在本文中采用高效液相色谱法测定制剂中五味子醇甲的含量，此法操作简单，重现性好，回收率高。

(2)有关五味子醇甲HPLC含量测定方法的报导中，流动相多采用甲醇、水等系统。我们通过实验摸索，确定以甲醇、乙腈、0.1％磷酸三种系统为流动相，在样品色谱中，五味子醇甲分离效果较为满意，分离度高，峰形对称性较好。

附图说明

图1：盐酸麻黄碱标准曲线

下述实施例均能实现以上发明效果

实施例1

麻黄3000g生姜3000g五味子(制)375g炙甘草112.5g

以上四味药材，加水煎煮二次，第一次3小时，第二次2小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.08(60℃)的清膏，放冷至室温，加入等量乙醇，搅匀，静置24小时，取上清液，回收乙醇并浓缩至相对密度为1.34～1.40(60～70℃)的稠膏。真空干燥，粉碎，依照本领域常规技术制成临床接受的制剂，如：胶囊剂、片剂、颗粒剂、软胶囊、丸剂。

实施例2

麻黄3000g、生姜3000g、桂枝2800重量份、苦杏仁1000重量份、五味子(制)375g、炙甘草112.5g

以上药材除苦杏仁外，其他五味药材，加水煎煮3次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.08(60℃)的清膏，放冷至室温，加入等量乙醇，搅匀，静置24小时，取上清液，回收乙醇并浓缩至相对密度为1.34～1.40(60～70℃)的稠膏；苦杏仁漂洗去灰土，沥干水分置盘上，放入热压灭菌锅内，控制蒸汽压力为0.03kpa/cm2(103℃)，热压蒸煮30分钟，取出即放入少量冷水中浸泡，除去种皮，晒干，即得杏仁炮制品。将上述稠膏与杏仁炮制品真空干燥，粉碎，依照本领域常规技术制成临床接受的制剂，如：胶囊剂、片剂、颗粒剂、软胶囊、丸剂。

实施例3

麻黄3000g、生姜3000g、五味子(制)375g、炙甘草112.5g

以上四味药材，加水煎煮二次，第一次3小时，第二次2小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.08(60℃)的清膏，放冷至室温，加入等量乙醇，搅匀，静置24小时，取上清液，回收乙醇并浓缩至相对密度为1.34～1.40(60～70℃)的稠膏。真空干燥，粉碎，加入糊精300g、蔗糖粉600g，混匀，得药物混合物，制成颗粒，干燥，制成1000袋，即得。

实施例4片剂

麻黄3000g、生姜3000g、五味子(制)375g、炙甘草112.5g

以上四味药材，采用逆流循环提取技术加水煎煮二次，第一次3小时，第二次2小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.08(60℃)的清膏，放冷至室温，加入等量乙醇，搅匀，静置24小时，取上清液，回收乙醇并浓缩至相对密度为1.34～1.40(60～70℃)的稠膏。真空干燥，粉碎，加入羧甲基纤维素纳20g，混匀，得药物混合物，制成颗粒，干燥，整粒，压片，包衣，制成1000片，即得。

实施例5胶囊剂

麻黄3000g、生姜3000g、五味子(制)375g、炙甘草112.5g

以上四味药材，加水煎煮二次，第一次3小时，第二次2小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.08(60℃)的清膏，放冷至室温，加入等量乙醇，搅匀，静置24小时，取上清液，回收乙醇并浓缩至相对密度为1.34～1.40(60～70℃)的稠膏。真空干燥，粉碎，加入糊精150g，混匀，得药物混合物，制粒、装胶囊，制成1000粒，即得。

实施例6软胶囊

麻黄3000g、生姜3000g、五味子(制)375g、炙甘草112.5g、

以上四味药材，加水煎煮二次，第一次3小时，第二次2小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.08(60℃)的清膏，放冷至室温，加入等量乙醇，搅匀，静置24小时，取上清液，回收乙醇并浓缩至相对密度为1.34～1.40(60～70℃)的稠膏，减压干燥，粉碎，与细粉混匀，加入植物油200g，搅匀，制成软胶囊660粒，即得。

实施例7颗粒剂

麻黄3000g、生姜3000g、五味子(制)375g、炙甘草112.5g

以上四味药材，加水煎煮二次，第一次3小时，第二次2小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.08(60℃)的清膏，放冷至室温，加入等量乙醇，搅匀，静置24小时，取上清液，回收乙醇并浓缩至相对密度为1.34～1.40(60～70℃)的稠膏。真空干燥，粉碎，加入蔗糖粉600g、糊精300g，混匀，得药物混合物，制成颗粒，干燥，制成1000g，即得。

实施例8丸剂

麻黄3000g、生姜3000g、五味子(制)375g、炙甘草112.5g

以上四味药材，加水煎煮二次，第一次3小时，第二次2小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.08(60℃)的清膏，放冷至室温，加入等量乙醇，搅匀，静置24小时，取上清液，回收乙醇并浓缩至相对密度为1.34～1.40(60～70℃)的稠膏。60℃减压干燥，粉碎，与上述细粉混匀以3％PVP的乙醇溶液为粘合剂制成1000丸，即得。

Claims

1.一种具有宣肺，平喘作用的药物组合物的检测方法，其特征在于该药物组合物的检测方法包括如下方法中的一种或几种：

(1)取本发明药物相当于原药材9-11g，加浓氨试液1-3ml，再加三氯甲烷30-50ml，加热回流0.5-2小时，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取盐酸麻黄碱，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录ⅥB)试验，吸取上述两种溶液各3～5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷—甲醇—浓氨试液(15-25∶3-10∶0.5-2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％茚三酮乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的紫红色斑点；

(2)取本发明药物相当于原药材200-220g，加乙醚20-40ml，超声20-40分钟(功率300W，频率50kHz)，滤过，滤液挥干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取干姜对照药材1g，加水80-100ml煎煮1小时，滤过，滤液浓缩至20-30ml，加等体积石油醚(60～90℃)萃取，取上层液，蒸干，残渣加1ml甲醇使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录ⅥB)试验，吸取对照药材溶液5μl、供试品溶液15μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60～90℃)—乙酸乙酯(3-7∶0.5-2)为展开剂，二次展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

(3)取本发明药物相当于原药材200-220g，加石油醚(60～90℃)40-60ml，加热回流0.5-2小时，滤过，残渣加甲醇40-60ml，加热回流0.5-2小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水30-50ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取2-4次，每次10-30m]，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的水洗涤2-4次，每次20-40ml，取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取甘草对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录ⅥB)试验，吸取上述两种溶液各3～5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷—甲醇—水(10-15∶5-10∶1-3)的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

药物组合物原料药组成为：

麻黄3000-4000重量份、生姜2000-3000重量份、桂枝2000-3000重量份、苦杏仁1000-1500重量份、制五味子250-500重量份、炙甘草80-160重量份。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于该药物组合物中的原料药组成为：

麻黄3000-3200重量份、生姜2800-3000重量份、桂枝2800-3000重量份、苦杏仁1400-1500重量份、制五味子300-400重量份、炙甘草100-120重量份。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于该药物组合物的原料药组成为：

麻黄3000g、生姜3000g、桂枝3000g、苦杏仁1500g、制五味子375g、炙甘草112.5g。

4.如权利要求1-3任意一项所述的方法，其特征在于中药组合物的制备方法为：

药材除苦杏仁外，其他五味药材，采用逆流循环提取工艺加水煎煮1-3次，每次2-4小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至60℃相对密度为1.08的清膏，放冷至室温，加入等量乙醇，搅匀，静置12-36小时，取上清液，回收乙醇并浓缩至60～70℃相对密度为1.34～1.40的稠膏；苦杏仁漂洗去灰土，沥干水分置盘上，放入热压灭菌锅内，控制蒸汽压力在103℃下为0.01～0.03kpa/cm²，热压蒸煮20-40分钟，取出即放入少量冷水中浸泡，除去种皮，晒干，即得杏仁炮制品；将上述稠膏与杏仁炮制品真空干燥，粉碎，依照本领域常规技术制成胶囊剂、片剂、颗粒剂、丸剂。

5.如权利要求4所述的方法，其特征在于制备方法为：

药材除苦杏仁外，其他五味药材，采用逆流循环提取工艺加水煎煮2次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至60℃相对密度为1.08的清膏，放冷至室温，加入等量乙醇，搅匀，静置24小时，取上清液，回收乙醇并浓缩至60～70℃相对密度为1.34～1.40的稠膏；苦杏仁漂洗去灰土，沥干水分置盘上，放入热压灭菌锅内，控制蒸汽压力在103℃下为0.01～0.03kpa/cm²，热压蒸煮30分钟，取出即放入少量冷水中浸泡，除去种皮，晒干，即得杏仁炮制品；将上述稠膏与杏仁炮制品真空干燥，粉碎，加糊精适量，混匀，装入胶囊，制成1000粒，即得。

6.如权利要求1-3任一项所述的方法，其特征在于该方法包括如下方法中的一种或几种：

鉴别：(1)取本发明药物相当于原药材10.8g，加浓氨试液2ml，再加三氯甲烷40ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取盐酸麻黄碱，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录ⅥB)试验，吸取上述两种溶液各3～5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷—甲醇—浓氨试液(20∶5∶0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％茚三酮乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的紫红色斑点；

(2)取本发明药物相当于原药材216.25g，加乙醚30ml，超声30分钟(功率300W，频率50kHz)，滤过，滤液挥干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取干姜对照药材1g，加水80ml煎煮1小时，滤过，滤液浓缩至20ml，加等体积石油醚(60～90℃)萃取，取上层液，蒸干，残渣加1ml甲醇使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录ⅥB)试验，吸取对照药材溶液5μl、供试品溶液15μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60～90℃)—乙酸乙酯(5∶1)为展开剂，二次展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

(3)取本发明药物相当于原药材216.25g，加石油醚(60～90℃)50ml，加热回流1小时，滤过，残渣加甲醇50ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水40ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的水洗涤3次，每次30ml，取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取甘草对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录ⅥB)试验，吸取上述两种溶液各3～5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷—甲醇—水(13∶7∶2)的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。