CN101225102B - 罗非鱼鱼皮多肽螯合锌盐的制备方法 - Google Patents
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Abstract
一种罗非鱼鱼皮多肽螯合锌盐的制备方法，以罗非鱼鱼皮为原料，采用酶法制备鱼皮多肽(TSP-I)，将鱼皮多肽液和硫酸锌以水浴加热法制备罗非鱼鱼皮多肽螯合锌盐。两者螯合反应的条件是：以TSP-I溶液中多肽含量为指标，按其与硫酸锌质量比为3∶1，螯合温度为60℃，反应pH值为6.0，反应时间为0.5hr。本发明的积极效果：解决了罗非鱼下脚料的资源浪费问题，提供了一种高效的补锌制剂制法，所制得的鱼皮多肽螯合锌盐是一种受大家青睐的天然保健功能产品。
Description
技术领域
本发明涉及一种罗非鱼鱼皮多肽螯合锌盐的制备方法。
背景技术
锌是动物的必需微量元素，由于在体内广泛的生理生化功能而被称为“生命元素”。锌在人体内的生物学功能主要表现在以下几方面：
(1)参加人体内许多金属酶的组成
锌是机体中200多种酶的组成部分，六大酶类(氧化还原酶类、转移酶类、水解醉类、裂解醉类、异构酶类和合成酶类)中均有含锌酶；许多酶必须在有锌存在的条件下才有活性并可达到最大酶活；同时，锌还可维持某些酶的有机分子配位基的结构构型并在酶反应时起到辅酶作用。
(2)促进机体的生长发育和组织再生
锌是调节基因表达的DNA聚合酶的必需组成部分。锌对动物的生长、分裂和分化、蛋白质和核酸的合成、DNA和RNA代谢等作用都是必需的。
(3)维持膜结构的完整性
锌可以和膜蛋白上的疏基、磷脂的磷酸基等结合，以增加膜的稳定性。当过氧化损伤时，膜内的-SH被氧化成二硫键，锌可以与硫形成稳定的硫醇盐，防止被氧化而保护了膜的完整性。
(4)参与体内多种生理生化活动
锌参与维生素A还原酶和视黄醇结合蛋白的合成，对维持人的视力正常有重要作用；锌可以促进脑蛋白质和核酸的合成，对脑的正常发育和细胞膜的稳定起重要的作用；锌促进性器官和性机能的正常发育；锌还可以保护皮肤健康及参加免疫反应过程等。
目前，锌缺乏是我国及许多发展中国家的急待解决的公共卫生问题，我国大部分少年儿童、孕妇及病人都不同程度地存在着营养性锌缺乏。为了改善这些人群的锌营养状况，人们开发了多种锌补剂。
第一代锌补剂是硫酸锌等无机补剂，结构简单，价格低廉，但其与胃酸反应生成的氯化锌是毒性较强的腐蚀剂，服后常伴有胃肠刺激等副作用；另外，无机补剂的生物学效价较低。
第二代锌补剂是有机补剂，如：葡萄糖酸锌、乳酸锌等。其性能优于第一代锌补剂，但吸收利用不及第三代锌补剂。
第三代锌补剂是氨基酸螯合锌补剂和多肽螯合锌补剂，这种鳌合锌的吸收是通过氨基酸(小肽)吸收途径，具有易吸收、向体外排泄率低、稳定性好、毒性小、生物学利用率高等特点，是目前研究开发的补锌热点。
我国是世界最大的罗非鱼生产国，年产量约占世界年产总量的一半。随着鲜鱼片、冻鱼片和条冻鱼出口量的逐年攀升，产生了大量鱼皮、鱼骨、鱼头等下脚料。这些下脚料若不加以有效的利用，不仅会造成极大的浪费，还会造成环境污染。
为了解决罗非鱼下脚料的资源浪费及提供一种高效的补锌制剂等问题，结合鱼皮高蛋白的特点和前人的研究，我们尝试着采用酶法制备鱼皮蛋白酶解物，将鱼皮蛋白酶解液和硫酸锌以水浴加热法制备罗非鱼鱼皮多肽螯合锌盐。鱼皮多肽螯合锌盐，是一种受人青睐的天然保健功能食品，同时也是一种很好的食品辅料和食品添加剂，可用于饮料、保健食品等领域，增加人体蛋白吸收的同时达到补锌的目的。
发明内容
本发明的目的是提供一种鱼皮多肽螯合锌盐的制备方法，以克服传统补锌制剂产生副作用及不易吸收的不足。
本发明是这样来实现的，其方法步骤如下：
1、预处理：清洗后的鱼皮经脱脂后，依次用0.1mol/L的盐酸溶液和0.1mol/L的氢氧化钠溶液浸泡1hr。
2、水提：预处理后的鱼皮经洗涤至中性后，在45℃条件下，用10倍体积的蒸馏水恒温匀浆12hr后，抽滤提取上清液。
3、酶解：在一定条件下，采用木瓜蛋白酶和中性蛋白酶进行酶解，比较两种酶的酶解效果，并确定最佳酶解条件。最佳酶解条件：温度：50℃-55℃，pH值：6.0，时间：2hr，加酶量：0.05％，在此酶解条件下的水解度为：12.3％。
4、灭酶：采用100℃，20min灭酶。
5、脱苦、脱色、脱味：分别采用活性炭和复合脱色剂对酶解液进行脱苦、脱色、脱味处理，比较两种方法的效果。
6、过滤：酶解液经脱苦、脱色、脱味处理后，再经4000r/min离心过滤获得清液。
7、离子交换：取一定体积的超滤液在常温下以8倍柱体积/h的流速通过001*7(732)强酸性苯乙烯系阳离子交换树脂，收集流出液，测定其氮回收率，再将脱阳离子后的水解液以8倍柱体积/h的流速通过201*7(717)强碱性I型阴离子交换树脂，收集流出液，测定其氮回收率及脱盐率。
8、浓缩：使用旋转蒸发仪，浓缩温度为50℃，蒸发溶液至粘稠状。
9、螯合：以鱼皮蛋白酶解液中多肽含量为指标，按其与硫酸锌的质量比3∶1，pH值为6，水浴恒温60℃，磁力搅拌0.5-1hr，所得溶液经过多次无水乙醇洗涤，析出黄色粘稠状鱼皮多肽螯含锌盐，硫酸锌螯合率为83.2％，螯合物得率为22.5％。
10、测定螯合率：
(1)准确移取螯合锌浓缩液10mL于100mL容量瓶中，定容，摇匀。用EDTA络合滴定法测定微量元素的总量。
(2)另移取螯合锌浓缩液10mL于100mL烧杯中，继续加热浓缩至近干。加入50mL无水乙醇，水浴温热(略低于体温)充分搅拌后，离心分离，将沉淀用水溶解，转移至100mL容量瓶中，定容，摇匀。用EDTA络合滴定法测定螯合态微量元素的含量。
EDTA络合滴定
准确移取25mL试液于250mL锥形瓶中，加入50mL水，滴加2-3滴二甲酚橙作指示剂，用0.02mol/L EDTA标准溶液滴定，溶液颜色由紫红变为亮黄色即为滴定终点。
螯合率(％)＝(螯合态微量元素的含量/微量元素的总量)×100
＝(CV1/CV0)×100＝(V1/V0)×100
C-EDTA溶液的浓度，mol/L；
V1-滴定螯合态微量元素所消耗的EDTA溶液体积，mL；
V0-滴定微量元素的总量所消耗的EDTA溶液体积，mL。
11、醇洗：螯合物用无水乙醇洗涤2-3次。
12、烘干：醇洗后螯合物于电热恒温鼓风干燥箱中恒温80℃干燥30min即得产品。
13、测定螯合物得率：
多肽螯合锌盐的得率(％)＝W1/W0×100
W1：多肽螯合锌盐总重量(g)；
W0：反应物总重量(g)。
本发明的积极效果：解决了罗非鱼下脚料的资源浪费问题，提供一种高度的补锌制法，所制得的鱼皮多肽螯合锌盐是一种受大家青睐的天然保健功能产品。
具体实施方式
下面结合实例对本发明作进一步详细说明。
实施案例：
称取100.0008g冲洗干净的罗非鱼鱼皮，脱脂处理后依次用700ml的0.1mol/L的盐酸溶液和0.1mol/L的氢氧化钠溶液浸泡1hr，蒸馏水洗涤至中性后，在45℃条件下，用1000ml的蒸馏水恒温匀浆12hr，抽滤提取上清液，升温至50℃-55℃，调节pH值为6.0的条件下加入0.04671g木瓜蛋白酶酶解2hr，然后在100℃高温条件下水浴加热20min，终止酶解反应，得到鱼皮蛋白酶解液即TSP-I溶液，罗非鱼鱼皮蛋白水解度为12.3％。
采用复合脱色剂(3g/L的活性炭酵母和环糊精等混合而成)对酶解液进行脱苦、脱色、脱味处理，4000r/min离心过滤收集上清液。常温下以8倍柱体积/h的流速通过001*7(732)阳离子交换树脂，收集流出液，测得其氮回收率为95.40％，再将脱阳离子后的水解液以8倍柱体积/h的流速通过201*7(717)阴离子交换树脂，收集流出液，测得其氮回收率为93.31％及脱盐率为93.15％。
按鱼皮蛋白酶解液中多肽质量与硫酸锌的质量比3∶1，调节反应pH值为6.0，水浴恒温60℃，磁力搅拌0.5-1hr得到螯合物溶液，再用5倍的无水乙醇洗涤2-3次，溶液进行抽滤处理后，将滤渣放于电热恒温鼓风干燥箱中恒温80℃干燥30min即得产品I-Zn2+，测得硫酸锌的螯合率为83.20％，螯合物得率为22.54％。I-Zn2+和TSP-I的粒径测定结果分别为5330.5nm和1542.5nm，Zeta电位为-0.99mv和-6.31mv，原料和水的比例为1∶5，25℃恒温条件下测定粘度为5.12cp和2.80cp。
产品特性分析
分别取TSP-I和I-Zn2+进行对比分析，分析结果如下：
1、色泽
TSP-I呈淡黄色粉末，I-Zn2+为黄色粉末。
2、流变性
采用DV-III ULTRA流变仪(美国BROOKFIELD)分别对TSP-I溶液(原料∶水＝1∶5)和I-Zn2+溶液(原料∶水＝1∶5)的流变特性进行测定，选用CP52型转子，恒温在25±0.5℃下测定。测定结果表明：TSP-I与I-Zn2+均为牛顿流体，I-Zn2+溶液的粘度大于TSP-I溶液。粘度分别为：5.12cp和2.80cp。
3、粒度分布和Zeta电位
采用激光粒度测定仪(美国pss公司)分别对TSP-I溶液和I-Zn2+溶液的粒度分布进行测定，从粒度分布图可以看出TSP-I的粒径为1542.5nm，I-Zn2+粒径为5330.5nm，大小分布均匀。
4、TSP-I和I-Zn2+红外扫描结果
将2mgI-Zn2+放入玛瑙研钵中，放入干燥的光谱纯KBr 200mg，混合研磨均匀(在红外灯下进行)，使其粒径在2.5um以下，装入压片模具，抽气加压，压力约为600kg/cm2，维持3-5min，卸掉压力则可得透明的KBr样品片，利用红外分光光度计进行定性分析，TSP-I的检测亦采用上述方法。红外图谱扫描显示，与TSP-I相比较，I-Zn2+在2100.3cm-1处一较强吸收峰消失。
以上所测各项指标显示TSP-I和硫酸锌螯合后已生成不同于TSP-I的新物质，TSP-I和I-Zn2+的性质比较见表1。
表1TSP-I和I-Zn2+的性质比较
| 原料 | 色泽 | 粒径(nm) | Zeta电位(mv) | 粘度(cp) |
| TSP-II-Zn2+ | 淡黄色黄色 | 1542.55330.5 | -6.31-0.995 | 2.805.12 |
Claims (1)
1.一种罗非鱼鱼皮多肽螯合锌盐的制备方法，它是以罗非鱼鱼皮为原料，采用酶法制备鱼皮蛋白酶解液，将鱼皮蛋白酶解液和硫酸锌以水浴加热法制备鱼皮多肽螯合锌盐，其特征在于方法步骤如下：
(1)预处理：清洗后的鱼皮经脱脂后，依次用0.1mol/L的盐酸溶液和0.1mol/L的氢氧化钠溶液浸泡1hr；
(2)水提：预处理后的鱼皮经洗涤至中性后，在45℃条件下，用10倍体积的蒸馏水恒温匀浆12hr后，抽滤提取上清液；
(3)酶解：温度：50℃-55℃，pH值：6.0，时间2hr，加木瓜蛋白酶量0.05％，在此酶解条件下的水解度为12.3％；
(4)灭酶：采用100℃，20min灭酶；
(5)脱苦、脱色、脱味：采用复合脱色剂对酶解液进行脱苦、脱色、脱味处理，所述复合脱色剂是由活性炭、酵母和环糊精混合而成；
(6)过滤：酶解液经脱苦、脱色、脱味处理后，再经4000r/min离心过滤获得清液；
(7)离子交换：取一定体积的超滤液在常温下以8倍柱体积/h的流速通过001*7(732)强酸性苯乙烯系阳离子交换树脂，收集流出液，测定其氮回收率，再将脱阳离子后的水解液以8倍柱体积/h的流速通过201*7(717)强碱性I型阴离子交换树脂，收集流出液，测定其氮回收率及脱盐率；
(8)浓缩：使用旋转蒸发仪，浓缩温度为50℃，蒸发溶液至粘稠状；
(9)螯合：以鱼皮蛋白酶解液中多肽含量为指标，其与硫酸锌的质量比为3：1，pH值为6，水浴恒温60℃，磁力搅拌0.5-1hr，所得溶液经过多次无水乙醇洗涤，析出黄色粘稠状鱼皮多肽螯含锌盐，硫酸锌的螯合率为83.2％，螯合物得率为22.5％；
(10)醇洗：螯合物用无水乙醇洗涤2-3次；
(11)烘干：醇洗后螯合物于电热恒温鼓风干燥箱中恒温80℃干燥30min即得产品。
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| CN104152520B (zh) * | 2014-07-30 | 2017-01-18 | 华南理工大学 | 一种具有抗肿瘤活性的核桃多肽‑锌螯合物的制备方法 |
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Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2004024866A2 (en) * | 2002-09-11 | 2004-03-25 | Genentech, Inc. | Protein purification |
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
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| CN1590408A (zh) * | 2003-08-28 | 2005-03-09 | 南京宝生药业有限公司 | 河豚肽的制备工艺及其医药保健用途 |
| CN1749275A (zh) * | 2004-09-15 | 2006-03-22 | 天津科技大学 | 水解鱼皮胶原蛋白的加工方法 |
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| 刘成梅，等，.罗非鱼鱼皮多肽（TSP-I）抗氧化活性的研究.《食品研究与开发》.2007,第28卷(第11期),148-151. * |
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