CN101209354A - 一种医用创面止血愈创剂及其应用 - Google Patents

Abstract

一种医用创面止血愈创剂，其特征是它由两部分水溶液组成，一部分是含双醛基的氧化多糖水溶液，另一部分是水溶性壳聚糖水溶液。上述医用创面止血愈创剂可以应用于制备创面封闭或创面止血的药物或医疗器械，应用于制备促进创面愈合、预防手术后组织粘连的药物或医疗器械。本发明的医用创面止血愈创剂的在创面封闭、止血、促进创面愈合、预防手术后组织粘连等方面具有显著效果，同时生物相容性好，不引起组织免疫反应，多糖在体内降解后对机体不产生副作用，因此安全性好。

Description

一种医用创面止血愈创剂及其应用

技术领域

本发明涉及一种医疗用品，特别是涉及一种医用创面止血愈创剂及其应用。

背景技术

医用创面止血愈创剂在医疗领域具有许多用途，包括人体和动物体手术创面的封闭止血、生理活性组织创面的封闭修复、生理活性组织间的粘合等。纤维蛋白胶是一种医用创面止血剂，是从人和动物血浆中提取的蛋白生物制品，主要应用于手术创面止血、促进伤口愈合、封闭缺损组织等，已在中国、欧美、日本等世界许多国家的外科领域得到广泛应用，其疗效已经得到了肯定。但来源于异体的人或动物血清制成的纤维蛋白胶可能激发免疫副反应，并存在使病人感染血液病毒的危险，因此其临床使用的安全性受到广泛关注。同时纤维蛋白胶不是以化学键与组织结合，粘接强度较低。因此急需开发生物相容性好、粘接强度高、可生物降解的医用创面止血愈创剂，特别是急需开发以天然生物来源的无免疫原性生物大分子为材料的医用创面止血愈创剂。天然生物多糖具有良好的生物相容性，在体内可生物降解吸收，不产生免疫反应，因此以天然生物多糖作为创面止血愈创剂的原材料是首选方案，但目前尚未见到此类报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种医用创面止血愈创剂及其应用，以满足现有技术的上述需求。

一种医用创面止血愈创剂，其特征是它由两部分水溶液组成，一部分是含双醛基的氧化多糖水溶液，另一部分是水溶性壳聚糖水溶液；所述的含双醛基的氧化多糖是含双醛基的氧化羟乙基纤维素、含双醛基的氧化羟丙基纤维素、含双醛基的氧化羧甲基纤维素钠盐或钾盐、含双醛基的氧化壳聚糖、含双醛基的氧化羟乙基壳聚糖、含双醛基的氧化羟丙基壳聚糖、含双醛基的氧化羧甲基壳聚糖钠盐或钾盐、含双醛基的氧化羟乙基甲壳素、含双醛基的氧化羟丙基甲壳素、含双醛基的氧化羧甲基甲壳素钠盐或钾盐、含双醛基的氧化透明质酸钠盐或钾盐，或含双醛基的氧化海藻酸钠盐或钾盐中的一种；所述的水溶性壳聚糖是羧甲基壳聚糖钠盐或钾盐、羟乙基壳聚糖、羟丙基壳聚糖中的一种。

上述医用创面止血愈创剂在制备创面封闭或创面止血的药物或医疗器械中的应用。

上述医用创面止血愈创剂在制备促进创面愈合的药物或医疗器械中的应用。

上述医用创面止血愈创剂在制备预防手术后组织粘连的药物或医疗器械中的应用。

本发明的医用创面止血愈创剂的创面止血和封闭机理是含双醛基的氧化多糖中的双醛基与水溶性壳聚糖中的氨基之间发生化学共价键合反应，从而起到创面封闭和止血作用，同时由于含双醛基的氧化多糖和水溶性壳聚糖的生物相容性好，不会引起组织免疫反应，在体内降解后对机体不产生副作用，因此本发明的医用创面止血愈创剂在人体和动物体的体内、体表具有广泛的应用。

具体实施方式

本发明的医用创面止血愈创剂由两种水溶液所组成，一种是含双醛基的氧化多糖水溶液，另一种是水溶性壳聚糖水溶液。

一、含双醛基的氧化多糖的制备

1、含双醛基的氧化羧甲基纤维素的制备：称取羧甲基纤维素粉2.2g，加入250ml玻璃三角瓶中，加水97.8g，于电动搅拌器上搅拌溶解，得羧甲基纤维素水溶液。该水溶液用5％(重量百分比，下同)的醋酸溶液调pH值至pH5.0，加入氧化剂NaIO₄固体0.25g，封口，黑纸包裹避光，于室温条件下搅拌氧化反应30h。反应毕，搅拌下加入4倍体积的95％的乙醇水溶液，沉淀，沉淀物抽滤，用95％的乙醇水溶液洗涤脱盐6次，无水乙醇脱水，真空干燥，制得含双醛基的氧化羧甲基纤维素浅黄色粉1.95g，其双醛基百分含量为10.5％(双醛基百分含量是指多糖分子中含双醛基的糖单元占多糖分子总糖单元的百分数，下同)。

2、含双醛基的氧化海藻酸钠的制备：称取海藻酸钠粉2.0g，加入250ml玻璃三角瓶中，加水98.0g，于电动搅拌器上搅拌溶解，得海藻酸钠水溶液。该水溶液用1mol/L的盐酸水溶液调pH值至pH5.5，加入氧化剂KIO₄固体0.27g，封口，黑纸包裹避光，于4℃条件下搅拌氧化反应36h。反应毕，将反应液体装入截留分子量为8000道尔顿的透析带中，避光、4℃条件下于装有2L蒸馏水的5L烧杯中透析30h，其中每6h更换蒸馏水一次。透析结束后，将透析袋内的液体放入冷冻干燥机内，进行冷冻干燥20h，制得含双醛基的氧化海藻酸钠淡黄色粉状制品1.78g，其双醛基百分含量为11.2％。

本发明所述的含双醛基的氧化多糖可分别由羟乙基纤维素、羟丙基纤维素、羧甲基纤维素(钠盐或钾盐)、壳聚糖、羟乙基壳聚糖、羟丙基壳聚糖、羧甲基壳聚糖(钠盐或钾盐)、羟乙基甲壳素、羟丙基甲壳素、羧甲基甲壳素(钠盐或钾盐)、透明质酸(钠盐或钾盐)或海藻酸(钠盐或钾盐)，经氧化剂氧化后，在分子中形成双醛基而制得，所制得的含双醛基的氧化多糖分别是含双醛基的氧化羟乙基纤维素、含双醛基的氧化羟丙基纤维素、含双醛基的氧化羧甲基纤维素(钠盐或钾盐)、含双醛基的氧化壳聚糖、含双醛基的氧化羟乙基壳聚糖、含双醛基的氧化羟丙基壳聚糖、含双醛基的氧化羧甲基壳聚糖(钠盐或钾盐)、含双醛基的氧化羟乙基甲壳素、含双醛基的氧化羟丙基甲壳素、含双醛基的氧化羧甲基甲壳素(钠盐或钾盐)、含双醛基的氧化透明质酸(钠盐或钾盐)或含双醛基的氧化海藻酸(钠盐或钾盐)。氧化反应所使用的氧化剂可以是高碘酸盐、次氯酸盐、臭氧或过氧化物，氧化反应中多糖和氧化剂的加入量是根据氧化多糖中双醛基含量要求而定，通常多糖与氧化剂的摩尔比为1∶(0.01～1)，反应温度可以是4℃～室温，反应时间为2～72h。本发明所述的含双醛基的氧化多糖是指氧化多糖中含双醛基的糖单元占多糖分子总糖单元的百分数为5％～100％。

二、医用创面止血愈创剂的制备

含双醛基的氧化多糖水溶液的制备：称取制得的含双醛基的氧化海藻酸钠(双醛基含量为11.2％)粉1.0g，置于100ml的玻璃烧杯中，加入无菌生理盐水溶剂50ml，搅拌下溶解，将所得溶液用孔径为0.22um的微孔滤膜过滤，得重量百分比浓度为2.0％的无菌含双醛基的氧化海藻酸钠水溶液，将该水溶液40ml分别装入5ml规格的无菌双联注射器的一个注射管中，得含双醛基的氧化海藻酸钠水溶液，即含双醛基的氧化多糖水溶液。

水溶性壳聚糖水溶液的制备：称取水溶性壳聚糖羟丙基壳聚糖粉(青岛博益特生物材料有限公司医用级原料产品)1.0g，置于100ml的玻璃烧杯中，加入无菌生理盐水溶剂50ml，搅拌下溶解，将所得溶液用孔径为0.22um的微孔滤膜过滤，得重量百分浓度为2％的无菌羟丙基壳聚糖水溶液，将该水溶液分别装入5ml规格的双联注射器的另一个注射管中，即得水溶性壳聚糖水溶液。

无菌条件下装上双联注射器的注射针头，并进行无菌包装，制得医用创面止血愈创剂。该医用创面止血愈创剂由两种水溶液组成，一种是含双醛基的氧化多糖水溶液，另一种是水溶性壳聚糖水溶液，该两种水溶液共同组成医用创面止血愈创剂。使用该医用创面止血愈创剂时，推动双联注射器的注射柄，将氧化多糖的水溶液和水溶性壳聚糖的水溶液一同推出，两种水溶液在推出过程中混合并到达创面，氧化多糖的双醛基与水溶性壳聚糖的氨基发生反应并交联固化，起到创面封闭止血的作用。

将剩余的含双醛基的氧化海藻酸钠水溶液10ml分别装入5ml规格的单管无菌注射器的注射管中，无菌条件下装上注射针头，并进行无菌包装，得单剂含双醛基的氧化海藻酸钠溶液，用于动物实验研究。

本发明的医用创面止血愈创剂的制备中，所述的含双醛基的氧化多糖可以是含双醛基的氧化羟乙基纤维素、含双醛基的氧化羟丙基纤维素、含双醛基的氧化羧甲基纤维素(钠盐或钾盐)、含双醛基的氧化壳聚糖、含双醛基的氧化羟乙基壳聚糖、含双醛基的氧化羟丙基壳聚糖、含双醛基的氧化羧甲基壳聚糖(钠盐或钾盐)、含双醛基的氧化羟乙基甲壳素、含双醛基的氧化羟丙基甲壳素、含双醛基的氧化羧甲基甲壳素(钠盐或钾盐)、含双醛基的氧化透明质酸(钠盐或钾盐)或含双醛基的氧化海藻酸(钠盐或钾盐)中的一种，上述氧化多糖分子中含双醛基的糖单元占多糖分子总糖单元的百分数为5％～100％；所述的水溶性壳聚糖可以是羧甲基壳聚糖(钠盐或钾盐)、羟乙基壳聚糖、羟丙基壳聚糖中的任意一种；所述的水溶液的溶剂可以是蒸馏水、注射用水、生理盐水、林格氏液中的一种。含双醛基的氧化多糖水溶液中的含双醛基的氧化多糖的重量百分比浓度为0.5％-20％，水溶性壳聚糖水溶液中水溶性壳聚糖的重量百分比浓度为0.5％-20％。

医用创面止血愈创剂的含双醛基的氧化多糖水溶液和水溶性壳聚糖水溶液也可以分别装入两个小瓶中或其它两种容器中，使用时快速混合，并立即将混合溶液施在创面上；或者将含双醛基的氧化多糖粉和水溶性壳聚糖粉按一定剂量分别装入一定规格的两个小瓶中，使用前加入溶剂溶解，两者混合使用，均能达到同样的交联固化效果，达到创面止血的效果。

三、动物组织器官缺损创面封闭止血实验

取Wistar大鼠20只，雌雄兼半，体重250～300g，随机分为两组：第1组(施用本发明的单剂含双醛基的氧化海藻酸钠溶液)和第2组(施用本发明的医用创面止血愈创剂)，每组10只。全部大鼠分别按30mg/Kg体重的剂量腹腔注射重量百分浓度为2％戊巴比妥钠水溶液麻醉，将大鼠腹部朝上固定在手术架上，用剃须刀将大鼠的两后腿内侧去毛，用新洁尔灭棉球进行去毛皮肤的消毒。消毒后用手术刀在大鼠的两后腿内侧的去毛部位分别切约30mm长、3mm深的切口，有血液流出。第1组在大鼠切口部位用注射器推出单剂含双醛基的氧化海藻酸钠溶液0.5ml，覆盖切口创面，约12分钟单剂含双醛基的氧化海藻酸钠溶液凝固形成凝胶，血流止住，用手术镊子轻轻触及形成的凝胶，凝胶硬度低，创面封闭不够牢固。第2组在大鼠切口部位用双联注射器推出医用创面止血愈创剂0.5ml，覆盖切口创面，约1分钟医用创面止血愈创剂凝固形成凝胶，血流止住，用手术镊子轻轻触及形成的凝胶，凝胶硬度较大，粘合牢固。术后大鼠正常饲养，大鼠创面在5～6天愈合。本试验结果表明，本发明的医用创面止血愈创剂比单剂含双醛基的氧化海藻酸钠溶液凝固时间短，在创面封闭止血作用上效果更好，时间更短。

以Wistar大鼠为试验动物，制作肝组织缺损模型，评价本发明的医用创面止血愈创剂和商品纤维蛋白胶对肝组织缺损创面的封闭止血作用。试验选择体重为250～300g的大鼠20只，均为雄性，随机分为对照组(使用商品纤维蛋白胶封闭剂)、试验组(使用本发明的医用创面止血愈创剂)，每组10只大鼠。全部动物均采用腹腔注射2％的戊巴比妥钠水溶液进行麻醉，剂量为30mg/Kg。在各组大鼠腹部正中切长约3cm的切口，打开腹腔，无菌条件下游离出肝脏左叶，用手术组织钳于肝脏中偏下部夹取5mm×5mm×2mm大小的肝组织块，造成肝组织缺损，自组织切下计出血时间5秒钟，用医用棉纱布吸血，并立即推注创面止血剂，封闭肝缺损创面。对照组推注纤维蛋白胶0.3ml，试验组推注本发明的医用创面止血愈创剂0.3ml，观察创面2分钟，纤维蛋白胶和本发明的医用创面止血愈创剂均能在1分钟内凝固，渗血止住，本发明的医用创面止血愈创剂与创面粘合牢固，牢固度优于纤维蛋白胶。手术大鼠关腹，正常饲养，于术后2周处死实验大鼠，开腹检查肝组织缺损创面愈合情况，试验组大鼠肝创面愈合，表面光滑，对照组大鼠肝创面愈合，创面有粘连。试验结果表明，本发明的医用创面止血愈创剂具有显著的创面封闭作用、止血作用、促进创面愈合作用，同时具有预防组织粘连作用。

动物试验表明，本发明的医用创面止血愈创剂在创面封闭时间和止血时间方面优于单剂含双醛基的氧化海藻酸钠溶液；医用创面止血愈创剂与商品纤维蛋白胶相比，具有更优越显著的创面封闭作用、止血作用、促进创面愈合作用和预防组织粘连作用。因此本发明的医用创面止血愈创剂可在制备创面封闭或创面止血的药物或医疗器械中应用，也可在制备促进创面愈合或预防手术后组织粘连的药物或医疗器械应用，作为药物或医疗器械进行开发。

由于本发明所选用的含双醛基的氧化多糖和水溶性壳聚糖的生物相容性好，不引起组织免疫反应，在体内降解后最终被降解吸收，不产生副作用，因此本发明的医用创面止血愈创剂制备成药物或医疗器械，在人体和动物体的体内、体表应用，具有广泛的应用前景。

Claims (8)

1.一种医用创面止血愈创剂，其特征是它由两部分水溶液组成，一部分是含双醛基的氧化多糖水溶液，另一部分是水溶性壳聚糖水溶液；所述的含双醛基的氧化多糖是含双醛基的氧化羟乙基纤维素、含双醛基的氧化羟丙基纤维素、含双醛基的氧化羧甲基纤维素钠盐或钾盐、含双醛基的氧化壳聚糖、含双醛基的氧化羟乙基壳聚糖、含双醛基的氧化羟丙基壳聚糖、含双醛基的氧化羧甲基壳聚糖钠盐或钾盐、含双醛基的氧化羟乙基甲壳素、含双醛基的氧化羟丙基甲壳素、含双醛基的氧化羧甲基甲壳素钠盐或钾盐、含双醛基的氧化透明质酸钠盐或钾盐，或含双醛基的氧化海藻酸钠盐或钾盐中的一种；所述的水溶性壳聚糖是羧甲基壳聚糖钠盐或钾盐、羟乙基壳聚糖、羟丙基壳聚糖中的一种。

2.如权利要求1所述的医用创面止血愈创剂，其特征是所述的含双醛基的氧化多糖分子中含双醛基的糖单元占多糖分子总糖单元的百分数大于5％。

3.如权利要求1所述的医用创面止血愈创剂，其特征是所述的含双醛基的氧化多糖水溶液中含双醛基的氧化多糖的重量百分比浓度为0.5％-20％。

4.如权利要求1所述的医用创面止血愈创剂，其特征是所述的水溶性壳聚糖水溶液中水溶性壳聚糖的重量百分比浓度为0.5％-20％。

5.如权利要求1所述的医用创面止血愈创剂，其特征是所述的水溶液的溶剂是蒸馏水、注射用水、生理盐水、林格氏液中的一种。

6.权利要求1所述的医用创面止血愈创剂在制备创面封闭或创面止血的药物或医疗器械中的应用。

7.权利要求1所述的医用创面止血愈创剂在制备促进创面愈合的药物或医疗器械中的应用。

8.权利要求1所述的医用创面止血愈创剂在制备预防手术后组织粘连的药物或医疗器械中的应用。