CN101209260A - 硫酸化多糖在制备抗凝血活性药物中的应用 - Google Patents
硫酸化多糖在制备抗凝血活性药物中的应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN101209260A CN101209260A CNA2006101558133A CN200610155813A CN101209260A CN 101209260 A CN101209260 A CN 101209260A CN A2006101558133 A CNA2006101558133 A CN A2006101558133A CN 200610155813 A CN200610155813 A CN 200610155813A CN 101209260 A CN101209260 A CN 101209260A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- inulin
- anticoagulant active
- preparation
- application
- sulfated polysaccharides
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
本发明涉及生物医药，是一种用于治疗和预防血栓疾病的药物，具体地说是硫酸化多糖在制备抗凝血活性药物中的应用。本发明优点为：菊粉来源丰富，硫酸化菊粉衍生物的制备条件容易操作，可适合大规模生产；抗凝血效果显著，发展前景广阔，意义深远。
Description
技术领域
本发明涉及生物医药，是一种用于治疗和预防血栓疾病的药物，具体地说是硫酸化多糖在制备抗凝血活性药物中的应用。
背景技术
血栓形成或栓塞是导致心、脑和外周血管事件的最后关键环节，是致死和致残的直接原因。动脉和静脉系统发生机制略有区别，动脉系统以血小板的激活为主，静脉血栓以凝血系统的激活为主。
血栓疾病是最常见的心脑血管疾病，严重威胁着人类的健康。据WHO报道，每年心脑血管疾病所致死亡大约1700万例，占各种原因死亡中的1/3。2001年美国因心脑血管疾病所致死亡931108例，远远高于第二位死因的肿瘤。我国1997年资料显示，城市心脏病为第4位死亡原因，脑血管病为第一大死因。自1958年以来，我国心脑血管病发病率上升了4倍，占全年死亡人口的1/3，而目前的发病趋势升高更快，每15秒就有一位中国人被心脑血管病夺取生命，每22秒就有一位中国人因此丧失工作能力，预计到2020年，心脑血管疾病将成为致残和致死的首位因素。因此，血栓疾病患者已日益成为现代都市人的一大健康杀手，应引起我们足够的重视。目前血栓性疾病的治疗主要是抗血小板治疗(阿司匹林、ADP受体拮抗剂、GP II b/IIIa拮抗剂)和抗凝治疗(普通肝素、低分子肝素)。
抗凝血药是一类干扰凝血因子药物，可以阻止血液凝固。主要用于血栓栓塞性疾病的预防与治疗，临床应用主要以肝素类产品为主。肝素具有起效迅速，在体内外均有抗凝的作用。但肝素亦有一些副效应，如1.肝素具有耐药性；2.有一定的降压作用；3.肝素可诱发血小板减少，使得骨髓巨核细胞增生，周围血小板崩解，免疫试验异常。此外，以肝素钠形式出售的肝素类抗凝剂价格昂贵，国际上肝素钠的销售价为900美元/亿单位。所以，寻找一种既具有抗凝血又无其他副作用且价格比较便宜的新药已成为当今研究的热点之一。近几年的研究发现硫酸化多糖具有同肝素一样的抗凝血活性，但却没有肝素的抗血小板副作用。如Martinichen-Herrero等对半乳葡萄甘露聚糖(GGM)进行了硫酸化，Preeyanat Vongchan等制备的三种不同分子量的硫酸化壳聚糖，Han等制备的硫酸化海藻多糖YCP，得到三种硫酸化衍生物：YCP-SL，YCP-SM和YCP-SH，并对其抗凝血活性进行了探索，发现该硫酸化的多糖具有很强的抗凝血活性，所以，硫酸化多糖有望成为肝素在治疗凝血方面的替代品。基于此，本发明对资源丰富，价格便宜的菊粉进行了硫酸化修饰，并对其抗凝血活性进行了研究。
菊粉(Inuin)又名菊糖，是由D-呋喃果糖分子以β-2，1-糖苷键连接而成的果聚糖，每个菊粉分子末端以α-1，2-糖苷键连接1个葡萄糖残基，聚合度(DP)通常为2～60。是一种蔬菜膳食纤维，来源于菊芋、菊苣等植物的一种功能性多糖——果聚糖，也是目前发现的最易溶解的膳食纤维，具有增殖人体内双歧杆菌，促进肠胃功能等作用。由于菊粉资源非常丰富，可以经过化学修饰进行改性，譬如硫酸化、磷酸化、酯化等反应，寻找具有新活性的衍生物。文献1：主要阐述了硫酸化多糖的化学制备方法(文献1.GengyuanT，Shoutong L，Maili S，Mingshi Z，Wen L.Synthesis of Achyranthes bidentata polysaccharidesulfate and its antivirus activity.Acta Pharmaceutica Sinica 1995，30(2)：107-111))。
发明内容
本发明的目的在于提供一种具有显著抗凝血活性作用的硫酸化多糖的制备及其应用。
为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：
硫酸化多糖在制备抗凝血活性药物中的应用
所述硫酸化菊粉具体制备过程为，
1)将附有冷凝管和搅拌装置的容器置冰盐浴中，加入吡啶，搅拌，使之充分冷却，用滴液漏斗慢慢加入氯磺酸，氯磺酸与吡啶的体积比例为1∶5～1∶8；
2)滴加完毕，待瓶中出现大量淡黄色固体后，加入菊粉，氯磺酸与菊粉的体积质量比例为2∶1～5∶1，于0～100℃恒温搅拌，反应时间为0.5～1.5h；
3)将反应液倾入冰水中，NaOH调pH值至7，加入3-5倍体积的95％的乙醇，4℃静置过夜，析出沉淀，离心，收集沉淀，并将沉淀溶于少量水中；醇沉水溶重复3次；产物在60℃减压浓缩得硫酸化菊粉；经过抗凝血实验证明，具有显著的抗凝血活性。
所述反应温度最好为0～60℃。
所述治疗和预防血栓疾病的药物可制备成为治疗血栓疾病的丸剂、散剂、片剂、膏剂、粉剂、针剂、水剂、颗粒剂、注射剂等各种剂型的药物；保健食品形态可以是液体的比如像清凉饮料，乳酸饮料，调味品，作为添加剂，比如加入到面食类，果冻，冰淇淋，腌制品，火腿，点心等。
本发明具有如下优点：
1.效果显著。本发明利用氯磺酸-吡啶法，对菊粉进行化学修饰。通过改变反应温度、反应时间、氯磺酸与吡啶的比例以及氯磺酸与菊粉的比例，得到了不同取代度的硫酸化的菊粉(sulfated Inulin)。对硫酸化菊粉进行抗凝血活性实验发现，不同取代度的硫酸化菊粉都能明显的延长凝血酶原时间(prothrombin time，PT)、凝血酶时间(thrombin time，TT)、活化部分凝血酶原激酶时间(Activated partial thrombinplastin time，APTT)，具有显著的抗凝血活性，这为研究开发抗血栓药物、保健食品或食品添加剂奠定了基础。
2.原料来源广泛，制备方法简便。菊科植物--菊芋块茎中含有15-17％的菊粉，为菊粉含量最高的植物，目前菊粉的市场价格为2.8万元/吨左右。另外，硫酸化菊粉制备所用的试剂均为常见试剂，反应容易操作，可适合大规模生产。
3.发展前景广阔。本发明通过实验研究不同取代度的硫酸化菊粉抗凝血活性，为新的治疗和防治血栓疾病药物的研究与开发提供一定的理论依据，可在此基础之上，对其抗凝血机理进一步研究，以期设计开发出更高效的治疗和防治血栓疾病的药物。
4.意义深远。本发明中的硫酸化菊粉抗凝血活性，不仅对于血栓疾病的治疗和保健，对于其它心血管疾病，如充血性心脏病，心肌梗塞，糖尿病肾病及肾功能障碍等疾病的治疗中均能具有一定的作用。菊粉来源丰富，硫酸化菊粉衍生物的制备条件容易操作，可适合大规模生产；抗凝血效果显著，发展前景广阔，意义深远。
具体实施方式
实施例1
将附有冷凝管和搅拌装置的100ml的三颈烧瓶置于冰盐浴中，加入16ml吡啶，搅拌，使之充分冷却，用滴液漏斗慢慢加入氯磺酸2ml。滴加完毕，待瓶中出现大量淡黄色固体后，加入菊粉1.0g，迅速将三颈瓶移入60℃水浴中，恒温搅拌1h左右，冷至室温，将反应液倾入冰水中，用NaOH调pH值至7.05，加入四倍体积的95％的乙醇，4℃静置过夜，析出沉淀，离心，收集沉淀，并将沉淀溶于少量水中。反复醇沉水溶3次。产物在60℃减压干燥得硫酸化菊粉(SI1)。
实施例2
将附有冷凝管和搅拌装置的100ml的三颈烧瓶置于冰盐浴中，加入30ml吡啶，搅拌，使之充分冷却，用滴液漏斗慢慢加入氯磺酸6ml。滴加完毕，待瓶中出现大量淡黄色固体后，加入菊粉1.0g，迅速将三颈瓶移入100℃水浴中，恒温搅拌1.5h左右，冷至室温，将反应液倾入冰水中，用NaOH调pH值至7.08，加入四倍体积的95％的乙醇，4℃静置过夜，析出沉淀，离心，收集沉淀，并将沉淀溶于少量水中。反复醇沉水溶3次。产物在60℃减压干燥得硫酸化的菊粉(SI2)。
实施例3
90μl抗凝血浆分别和10μl终浓度为1.6mg/ml的SI1、SI2混合后于37℃下孵育1min，然后将预先在37℃下孵育10min的PT试剂200μl加入上述溶液，记录凝固时间。按照经典的抗凝血试验测定方法，SI1、SI2在浓度为1.6mg/ml时所测的PT时间分别为大于600秒和31.4±4.53，均明显的高于空白对照组PT时间10.6±0.52，因而具有显著的抗凝血活性。
实施例4
90μl抗凝血浆分别和10μl终浓度为0.4mg/ml的SI1、SI2混合后于37℃下孵育1min，然后将预先在37℃下孵育10min的PT试剂200μl加入上述溶液，记录凝固时间。按照经典的抗凝血试验测定方法，SI1、SI2在浓度为0.4mg/ml时，所测的PT时间分别31.1±1.57和13.9±1.91，均明显的高于空白对照组PT时间10.6±0.52，因而具有显著的抗凝血活性。
实施例5
90μl抗凝血浆分别和10μl终浓度为40μg/ml的SI1、SI2混合后于37℃下孵育1min，将100μlAPTT试剂加入上述混合物，37℃下孵育6min，然后加100μl浓度为25mmol/L CaCl2溶液，记录凝固时间。按照经典的抗凝血试验测定方法，SI1和SI2在浓度为40μg/ml时，测定的APPT时间分别为122.2±7.25和38.6±1.91，均明显高于空白对照组APPT时间25.8±0.46，因而具有显著的抗凝血活性。
实施例6
90μl抗凝血浆分别和10μl终浓度为10μg/ml的SI1、SI2混合后于37℃下孵育1min，将100μlAPTT试剂加入上述混合物，37℃下孵育6min，然后加100μl浓度为25mmol/L CaCl2溶液，记录凝固时间。按照经典的抗凝血试验测定方法，SI1和SI2在浓度为10μg/ml时，测定的APPT时间分别为41.3±1.33和28.4±0.35，均明显高于空白对照组APPT时间25.8±0.46，因而具有显著的抗凝血活性。
实施例7
90μl抗凝血浆分别和10μl终浓度为40μg/ml的SI1、SI2混合后于37℃下孵育2min，提前温育5min的200μl TT试剂加入上述混合物，记录凝固时间。按照经典的抗凝血试验测定方法，SI1和SI2在浓度为40μg/ml时，测定的TT时间分别为36±5.23和20.4±2.71，均明显的高于空白对照组TT时间16.3±0，因而具有显著的抗凝血活性。
实施例8
90μl抗凝血浆分别和10μl终浓度为10μg/ml的SI1、SI2混合后于37℃下孵育2min，提前温育5min的200μl TT试剂加入上述混合物，记录凝固时间。按照经典的抗凝血试验测定方法，SI1和SI2在浓度为10μg/ml时，测定的TT时间分别为21.9±1.70和20.8±2.77，均明显的高于空白对照组TT时间16.3±0，因而具有显著的抗凝血活性。
附文字说明实施例中抗凝血活性的测试过程(参照文献(2)、(3)、(4)、主要阐述了硫酸化多糖的抗凝血活性及其抗凝血活性机理的研究，文献2：(文献2Matsubara K，Matsuura Y.Bacic A，Ming-Long，L，Hori，K，Miyazawa K.Anticoagulant properties of a sulfated galactan preparation from a marine green alga，Codium cylindricum.Biological Macromolecules 2001，28：395-399)；文献3：(文献3.Martinichen-Herrero J.C，Carbonero E.R，Sassaki G.L.Anticoagulant and antithromboticactivities of a chemically sulfated galactoglucomannan obtained from the lichen Cladoniaibitipocae.Biological Macromolecules 2005，35：97-102)；文献4：(文献4.Fang H，WenbingY，Xiaobing Y，Xiaoni L，Xiangdong G..Experimental study on anticoagulant andantiplatelet aggregation activity of a chemically sulfated marine polysaccharide YCP.Biological Macromolecules 2005，36：201-207.)，并调整实验试剂用量进行抗凝血活性测试)：
从DADE BEHRING公司(USA)购买试剂PT、APTT、TT。凝血仪器从日本Sysmex公司购买，型号为CA-6000。
按照经典的测定凝血的方法(文献(2)、(3)、(4))，测定不同取代度和不同浓度的硫酸化菊粉对凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶原激酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)的影响(PT为外源性凝血系统较理想和常用的实验；APTT和TT为内源性凝血系统较敏感和常用的筛选实验)。抗凝血实验以肝素为阳性对照。发现，两种不同取代度的硫酸化菊粉在所试验的不同浓度中都明显的延长了PT、APTT、TT，具有显著的抗凝血活性，其作用效果略弱于肝素；
由上述实施例说明：根据经典的抗凝血活性测试结果表明，硫酸化菊粉具有显著抗凝血活性。氯磺酸与菊粉的比例为2∶1～5∶1，氯磺酸与吡啶的比例为1∶5～1∶8，反应时间为0.5～1.5h，反应温度为0～60℃时制备的硫酸化菊粉衍生物的抗凝血效果与氯磺酸与菊粉的比例为5∶1～10∶1，氯磺酸与吡啶的比例为1∶1～1∶5，反应时间为1.5～3.0h，反应温度为60～100℃时制备的硫酸化菊粉均具有显著的抗凝血效果，且前者效果略强于后者。上述衍生物可以作为治疗和预防血栓疾病的药物、保健食品或食品添加剂。
Claims (6)
1.硫酸化多糖在制备抗凝血活性药物中的应用。
2.按照权利要求1所述硫酸化多糖在制备抗凝血活性药物中的应用，其特征在于：所述硫酸化菊粉具体制备过程为，
1)将附有冷凝管和搅拌装置的容器置冰盐浴中，加入吡啶，搅拌，使之充分冷却，用滴液漏斗慢慢加入氯磺酸，氯磺酸与吡啶的体积比例为1∶5-1∶8；
2)滴加完毕，待瓶中出现大量淡黄色固体后，加入菊粉，氯磺酸与菊粉的体积质量比例为2∶1-5∶1，于0-100℃恒温搅拌，反应时间为0.5-1.5h；
3)将反应液倾入冰水中，NaOH调pH值至7，加入3-5倍体积的95％的乙醇，4℃静置过夜，析出沉淀，离心，收集沉淀，并将沉淀溶于少量水中；醇沉水溶重复3次；产物在60℃减压浓缩得硫酸化菊粉；经过抗凝血实验证明，具有显著的抗凝血活性。
3.按照权利要求2所述硫酸化多糖在制备抗凝血活性药物中的应用，其特征在于：所述反应温度为0-60℃。
4.按照权利要求1所述硫酸化多糖在制备抗凝血活性药物中的应用，其特征在于：所述硫酸化菊粉可以用于制备治疗和预防血栓疾病的药物或保健食品，其能与辅料混合形成的丸剂、散剂、片剂、膏剂，粉剂，针剂、水剂，颗粒剂、胶囊或注射剂。
5.按照权利要求1所述硫酸化多糖在制备抗凝血活性药物中的应用，其特征在于：所述药物在使用时可以采取经口腔或非经口腔的给药方式；非经口腔的方式可以采取皮下、静脉注射或肛肠给药；注射液的使用可以任意选用生理盐水，葡萄糖，稳定剂，防腐剂，悬浮剂或乳化剂。
6.按照权利要求4所述硫酸化多糖在制备抗凝血活性药物中的应用，其特征在于：所述保健食品形态可以是液体的清凉饮料、乳酸饮料或调味品；或固体面食类、果冻、冰淇淋、腌制品、火腿或点心。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CNA2006101558133A CN101209260A (zh) | 2006-12-29 | 2006-12-29 | 硫酸化多糖在制备抗凝血活性药物中的应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CNA2006101558133A CN101209260A (zh) | 2006-12-29 | 2006-12-29 | 硫酸化多糖在制备抗凝血活性药物中的应用 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN101209260A true CN101209260A (zh) | 2008-07-02 |
Family
ID=39609624
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CNA2006101558133A Pending CN101209260A (zh) | 2006-12-29 | 2006-12-29 | 硫酸化多糖在制备抗凝血活性药物中的应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN101209260A (zh) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102702382A (zh) * | 2012-01-17 | 2012-10-03 | 烟台大学 | 一种壳聚糖衍生物的制备方法及其在抗凝血药物上的应用 |
| CN108641005A (zh) * | 2018-04-03 | 2018-10-12 | 华南农业大学 | 一种硫酸化紫锥菊多糖的制备方法及其应用 |
| CN114533756A (zh) * | 2021-07-09 | 2022-05-27 | 南京理工大学 | 硫酸葡半乳寡聚糖在制备抗凝血和/或抗血栓药物中的应用 |
-
2006
- 2006-12-29 CN CNA2006101558133A patent/CN101209260A/zh active Pending
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102702382A (zh) * | 2012-01-17 | 2012-10-03 | 烟台大学 | 一种壳聚糖衍生物的制备方法及其在抗凝血药物上的应用 |
| CN102702382B (zh) * | 2012-01-17 | 2014-04-23 | 烟台大学 | 一种壳聚糖衍生物的制备方法及其在抗凝血药物上的应用 |
| CN108641005A (zh) * | 2018-04-03 | 2018-10-12 | 华南农业大学 | 一种硫酸化紫锥菊多糖的制备方法及其应用 |
| CN114533756A (zh) * | 2021-07-09 | 2022-05-27 | 南京理工大学 | 硫酸葡半乳寡聚糖在制备抗凝血和/或抗血栓药物中的应用 |
| WO2023280084A1 (zh) * | 2021-07-09 | 2023-01-12 | 南京理工大学 | 硫酸葡半乳寡聚糖在制备抗凝血和/或抗血栓药物中的应用 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Carvalhal et al. | Antithrombotics from the sea: Polysaccharides and beyond | |
| JPH06506685A (ja) | 新規な非抗凝固剤ヘパリン誘導体 | |
| CA2608136A1 (en) | Process for the production of a low molecular weight heparin | |
| CN101328227A (zh) | 一种礁膜多糖及其制备方法和应用 | |
| Spadarella et al. | From unfractionated heparin to pentasaccharide: Paradigm of rigorous science growing in the understanding of the in vivo thrombin generation | |
| JPH03243601A (ja) | 血液凝固の制御能をもつムコ多糖組成物およびその製造方法 | |
| CN101209260A (zh) | 硫酸化多糖在制备抗凝血活性药物中的应用 | |
| JP2022545578A (ja) | 低分子ナマコ由来グリコサミノグリカン及びその応用 | |
| CN100486593C (zh) | 一种可提高免疫功能的厚壳贻贝提取物 | |
| AU2018202402B2 (en) | Homogeneous polysaccharide with immunoregulation activity and preparation method thereof | |
| KR100882462B1 (ko) | 제주산 홍조류의 효소적 추출물을 이용한 항혈액응고성설페이티드 갈락탄조성물 | |
| CN104861085A (zh) | 板栗种仁α-1,6-葡聚糖及其制备方法以及在抗肿瘤药物中的应用 | |
| CN101328225A (zh) | 一种硫酸鼠李聚糖及其制备方法和应用 | |
| EP4360638A1 (en) | Application of sulfate gluco-galacto-oligosaccharide in preparation of anticoagulant and/or antithrombotic drug | |
| JPS6353970B2 (zh) | ||
| KR102075391B1 (ko) | 아스피린을 함유하는 랜덤 공중합체를 포함하는 나노입자 및 이의 용도 | |
| CN109200058B (zh) | 聚古罗糖醛酸丙酯硫酸盐在制备抗凝血药物中的应用 | |
| CN104974270B (zh) | 一种硫酸酯化粒毛盘菌胞外多糖及其在抗凝血医药方面的用途 | |
| CN104610459A (zh) | 一种低分子量仿刺参糖胺聚糖及其制备方法和应用 | |
| JP2655592B2 (ja) | 極めて高分子量の硫酸化多糖類の製造方法 | |
| Thiagarajan | Antithrombotic Drugs | |
| CN110878129A (zh) | 一种氨基葡萄糖肝素盐及其应用 | |
| JP2009057285A (ja) | 血管新生阻害剤及びその利用 | |
| KR102162128B1 (ko) | 음양곽을 유효성분으로 함유하는 혈전증 예방 또는 치료용 조성물 | |
| JP6249691B2 (ja) | フィブロネクチン結合性の大豆由来の水溶性多糖類 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Open date: 20080702 |