CN101189529A

CN101189529A - 嘧啶衍生物

Info

Publication number: CN101189529A
Application number: CNA2006800199860A
Authority: CN
Inventors: D·纳加拉斯纳姆; 陈元伟; 符文朗; M·王; D·比雷尔; M·布兰兹; Y·王; B·R·比尔; D·米勒; A·施米特; E·穆尔; 赵瑾
Original assignee: Bayer Pharmaceuticals Corp
Current assignee: Bayer Pharmaceuticals Corp
Priority date: 2005-04-08
Filing date: 2006-04-07
Publication date: 2008-05-28
Also published as: WO2006110763A9; CA2604890A1; EP1869482A1; KR20080004585A; WO2006110763A1; US20090258888A1; JP2008535866A

Abstract

本发明涉及新的化合物及其制备方法，治疗疾病、特别是癌症的方法，该治疗方法包括给予所述化合物，以及用于治疗或预防疾病、特别是癌症的药物组合物的制备方法。

Description

嘧啶衍生物

具有多种药学性质和用途的含氮杂环化合物例如嘧啶衍生物在专利和非专利出版物中已有记载。下面例举了一些出版物。

WO 03/062225(Bayer)涉及作为rho激酶抑制剂的嘧啶衍生物及其在治疗包括癌症在内的rho激酶介导的疾病中的用途。

WO 2001/87845(Fujisawa)涉及具有5-HT拮抗活性的含氮杂环化合物。据悉这些化合物能用于治疗或预防中枢神经系统疾病。

WO 95/10506(Du Pont Merck)涉及1N-烷基-N-芳基嘧啶胺及其衍生物，据悉能抑制促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)肽并用于治疗精神病和神经病。

WO 2004/048365(Chiron)涉及作为磷脂酰肌醇(PI)3-激酶抑制剂的2，4，6-三取代嘧啶及其在治疗癌症中的用途。WO 2004/000820(Cellular Genomics)涉及作为激酶调节剂的含氮杂环化合物和其它化合物，及其在治疗包括癌症在内的多种激酶相关疾病中的用途。

WO 01/62233(Hoffmann La Roche)涉及含氮杂环化合物及其在治疗由腺苷受体调节的疾病中的用途。

US 2004/0097504(Vertex)涉及用于治疗各种蛋白激酶介导疾病的含氮杂环化合物。

制药领域始终关注鉴定新的药用活性化合物。这类材料正是本申请的主题。

在一个实施方案中，本发明提供下式(I)的化合物或其药学上可接受的盐：

其中

A表示氧原子或基团-NR^A-，其中R^A表示氢或烷基；

D表示基团-CH-或氮原子；

L为2个碳原子连接基，选自乙二基、乙烯二基和乙炔二基，在乙二基的情况下，可任选被0、1或2个烷基、羟基或烷氧基取代，在乙烯二基的情况下，可任选被0、1或2个烷基或烷氧基取代；

R²表示烷基，其中烷基可被0-3个选自以下的取代基取代：卤素、羟基、烷氧基、氨基、烷基氨基和烷基磺酰基氨基；或

R²表示苯基或杂芳基，其中苯基或杂芳基可任选被0、1或2个选自以下的取代基取代：卤素、三氟甲基、烷基、羟基、烷氧基、氨基、烷基羰基氨基、烷基氨基、氨基羰基、烷基氨基羰基、氨基磺酰基、烷基氨基磺酰基，

其中所述烷基氨基、烷基氨基羰基和烷基氨基磺酰基任选被0、1或2个选自羟基、卤素和烷氧基的取代基取代；

R⁴为氢或烷基；

R⁵为氢或卤素；

R⁶表示烷基、氰基、氨基羰基、烷基氨基羰基、三氟甲基、氨基、烷基羰基氨基、烷基羰基、烯基、炔基或氯。

在另一个实施方案中，本发明提供式(I)化合物或其药学上可接受的盐，其中

A表示氧原子；

D表示基团-CH-；

L为2个碳原子连接基，选自乙二基、乙烯二基和乙炔二基；

R²表示烷基，其中烷基可被0-2个选自以下的取代基取代：卤素、羟基、烷氧基、氨基、烷基氨基和烷基磺酰基氨基；或

R²表示苯基或吡啶基，其中苯基或吡啶基可任选被0、1或2个选自以下的取代基取代：卤素、烷基、羟基和烷氧基；

R⁴为氢；

R⁵为氢；

R⁶表示烷基、氰基、氨基羰基、氯或三氟甲基。

在另一个实施方案中，本发明提供下式(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐，

其中

D表示基团-CH-；

L为2个碳原子连接基，选自乙二基、乙烯二基和乙炔二基；

R⁴为氢；

R⁵为氢；

R⁶表示烷基、氰基、氨基羰基、氯或三氟甲基。

本发明的化合物根据其结构可以立体异构体的形式(对映体或非对映体)存在。因此，本发明涉及对映体或非对映体及其相应的混合物。可以用已知方法将这些对映体或非对映体的混合物分离成为立体异构体的单元组分。

除非另有说明，否则以下定义适用于本说明书和权利要求书中所用的所有技术表述：

盐：用于本发明目的的盐，优选为本发明化合物药学上可接受的盐。

药学上可接受的盐：化合物(I)的药学上可接受的盐包括无机酸、羧酸和磺酸的酸加成盐，例如盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、磷酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、甲苯磺酸盐、苯磺酸盐、萘二磺酸盐、乙酸盐、丙酸盐、乳酸盐、酒石酸盐、苹果酸盐、柠檬酸盐、富马酸盐、马来酸盐和苯甲酸盐。

化合物(I)的药学上可接受的盐还包括常用碱的盐，例如和优选碱金属盐(例如钠盐和钾盐)、碱土金属盐(例如钙盐和镁盐)和衍生自氨或具有1-16个碳原子的有机胺的铵盐，例如示例性和优选的有机胺为乙胺、二乙胺、三乙胺、乙基二异丙胺、单乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、二环己基胺、二甲氨基乙醇、普鲁卡因、二苄胺、N-甲基吗啉、二氢枞胺、精氨酸、赖氨酸、乙二胺和甲基哌啶。

烷基表示通常具有1-6个、1-4个或1-3个碳原子的直链或支链烷基，示例性的有甲基、乙基、正丙基、异丙基、叔丁基、正戊基和正己基。

烯基表示具有一个或多个双键及2-6个、2-4个或2-3个碳原子的直链或支链烷基，示例性的有乙烯基或烯丙基。

炔基表示具有一个或多个三键及通常2-6个、2-4个或2-3个碳原子的直链或支链烷基，示例性的有炔丙基。

烷氧基表示具有1-6个、1-4个或1-3个碳原子并通过氧原子连接的直链或支链烃基，示例性的有甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、异丁氧基、戊氧基、异戊氧基、己氧基、异己氧基。术语“烷氧基”和“烷基氧基”通常作同义词使用。

烷基氨基表示具有1个或2个(独立选自)烷基取代基的烷基氨基，示例性的有甲基氨基、乙基氨基、正丙基氨基、异丙基氨基、叔丁基氨基、正戊基氨基、正己基氨基、N，N-二甲基氨基、N，N-二乙基氨基、N-乙基-N-甲基氨基、N-甲基-N-正丙基氨基、N-异丙基-N-正丙基氨基、N-叔丁基-N-甲基氨基、N-乙基-N-正戊基氨基和N-正己基-N-甲基氨基。

烷基氨基羰基表示具有1个或2个(独立选自)烷基取代基的烷基氨基羰基，示例性的有甲基氨基羰基、乙基氨基羰基、正丙基氨基羰基、异丙基氨基羰基、叔丁基氨基羰基、正戊基氨基羰基、正己基氨基羰基、N ，N-二甲基氨基羰基、N，N-二乙基氨基羰基、N-乙基-N-甲基氨基羰基、N-甲基-N-正丙基氨基羰基、N-异丙基-N-正丙基氨基羰基、N-叔丁基-N-甲基氨基羰基、N-乙基-N-正戊基氨基-羰基和N-正己基-N-甲基氨基羰基。

烷基氨基磺酰基表示氨基部分上具有1个或2个(独立选自)烷基取代基的氨基磺酰基，示例性的有甲基氨基磺酰基、乙基氨基磺酰基、正丙基氨基磺酰基、异丙基氨基磺酰基、叔丁基氨基磺酰基、正戊基氨基磺酰基、正己基-氨基磺酰基、N ，N-二甲基氨基磺酰基、N，N-二乙基氨基磺酰基、N-乙基-N-甲基氨基磺酰基、N-甲基-N-正丙基氨基磺酰基、N-异丙基-N-正丙基氨基磺酰基、N-叔丁基-N-甲基氨基磺酰基、N-乙基-N-正戊基氨基磺酰基和N-正己基-N-甲基氨基磺酰基。

烷基磺酰基氨基表示磺酰基氨基部分上具有烷基取代基的磺酰基氨基，示例性的有甲基磺酰基氨基、乙基磺酰基氨基、正丙基磺酰基氨基、异丙基磺酰基氨基、叔丁基磺酰基氨基、正戊基磺酰基氨基和正己基磺酰基氨基。

芳基表示至少一个环为芳环并通过氧原子连接的单环至三环碳环基，通常具有6-14个碳原子，示例性的有苯基、萘基和菲基。

芳基羰基表示具有芳基取代基的羰基，示例性和优选的为苯基羰基和萘基羰基。

杂芳基表示具有5-10个或5个或6个环原子和最多5个或最多4个选自氮、氧和硫杂原子的单环或三环基团，该基团至少一个环为芳环。它可以通过环碳原子或环氮原子连接。如果它表示二环，则其中一个环为芳环，另一个则不是，它可以连接到任一环上。示例性的实例为噻吩基、呋喃基、吡咯基、噻唑基、唑基、咪唑基、吡啶基、嘧啶基、哒嗪基、吲哚基、吲唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、喹啉基和异喹啉基。

卤素表示氟、氯、溴或碘。

紧跟在键之后的*符号是指分子中的连接点。

为了简便起见，整个文件中，术语前未加数词限定时一般包括复数术语，除非另有说明。例如，术语“一种治疗患者疾病的方法，所述方法包括给予患者有效量的权利要求1的化合物”是指包括同时治疗一种以上的疾病以及给予一种以上的权利要求1的化合物。

在另一个实施方案中，本发明提供一种制备式(I)化合物的方法，该方法包括在合适的Pd催化剂例如Pd₂(dba)₃[三(二亚苄基丙酮)合二钯(0)]、Pd(PPh₃)₄[四(三苯基膦)合钯(0)]或PdCl₂(dppf)·CH₂Cl₂{[1，1’-双(二苯膦基)二茂铁]二氯化钯(II)与二氯甲烷络合物}存在下，使下式(II)的化合物：

[A]与下式(IIIa)的试剂反应：

其中L和R²具有上述含义，R¹¹和R¹²可以为H或烷基，或者

[B]与下式(IIIb)的试剂反应：

其中L和R²具有上述含义，或者

[C]与下式(IIIc)的试剂反应：

其中L、R²和R¹¹具有上述含义。

可使下式(VI)的母体与2-氨基-4，6-二氯嘧啶缩合来制备式(II)的化合物：

其中A、D和R⁴-R⁶具有上述含义。

或者，通过下式(V)的烯烃与硼烷如9-BBN硼氢化，随后在钯催化剂例如Pd₂(dba)₃[三(二亚苄基丙酮)合二钯(0)]、Pd(PPh₃)₄[四(三苯基膦)合钯(0)]、PdCl₂(dppf)·CH₂Cl₂{[1，1’-双(二苯膦基)二茂铁]二氯化钯(II)与二氯甲烷络合物}存在下，与式(II)中间体反应，可得到式(I)化合物，其中L表示乙烷二基，

其中R²具有上述含义，

在式(I)中L表示乙烯二基的情况下，它可通过催化氢化转化成相应的单键。另外，式(I)中的残基R²可能含有可被裂解脱去的保护基。

在式(I)中L表示乙炔二基的情况下，在钯催化剂例如Pd(PPh₃)₂·Cl₂和铜盐例如碘化亚铜(I)存在时，可使下式(VI)的化合物：

与下式(VII)的化合物反应：

来制备式(I)化合物，式(VI)中D和R⁴-R⁶具有上述含义，式(VII)中R²代表任选取代的芳基或杂芳基。

通过母体(IV)与下式(VIII)的化合物缩合反应：

随即用氟盐例如TBAF除去三甲基硅基，便可得到式(VI)化合物。

在钯催化剂例如二氯化双(苄腈)合钯(II)和铜盐例如碘化亚铜(I)存在下，使市售的4-氨基-2，6-二氯嘧啶与三甲基硅乙炔反应，可制备化合物(VIII)。

还应理解的是，原料为市售的或者易通过本领域众所周知的标准方法制备。这些方法包括但不限于本文所列的转化方法。

如未另作说明，则反应通常在惰性有机溶剂中进行，惰性溶剂在反应条件下不发生变化。这些溶剂包括醚(例如乙醚、1，4-二烷或四氢呋喃)、卤代烃(例如二氯甲烷、三氯甲烷、四氯化碳、1，2-二氯乙烷、三氯乙烷或四氯乙烷)、烃类(例如苯、甲苯、二甲苯、己烷、环己烷或矿物油馏分)、醇类(例如甲醇、乙醇或异丙醇)、硝基甲烷、二甲基甲酰胺或乙腈。也可使用溶剂的混合物。

反应通常在0℃-150℃、优选0℃-70℃的温度范围内进行。反应可在大气压、升压或减压下(例如0.5-5巴)进行。一般而言，在空气或惰性气体，通常为氮气的大气压下进行反应。

可以通过以下合成方法说明本发明化合物的制备法：

方法A：

因此，高温下，在碱存在或不存在时，在惰性溶剂(例如异丙醇)中，式(IV)化合物可与式(IX)化合物缩合。随后，在钯催化剂例如Pd₂(dba)₃[三(二亚苄基丙酮)合二钯(0)]、Pd(PPh₃)₄[四(三苯基膦)合钯(0)]或PdCl₂(dppf)·CH₂Cl₂{[1，1’-双(二苯膦基)二茂铁]二氯化钯(II)与二氯甲烷络合物}和碱(例如碳酸钾)存在下，可用硼酸酯(例如式(X)硼酸酯)处理式(II)中间体。可在钯催化剂(例如10％披钯木炭)存在下，通过催化氢化，使式(XI)化合物转化成式(XII)化合物。

方法B：

使式(V)的烯烃与适当的硼烷(例如9-BBN)硼氢化，之后在钯催化剂例如Pd₂(dba)₃[三(二亚苄基丙酮)合二钯(0)]、Pd(PPh₃)₄[四(三苯基膦)合钯(0)]或PdCl₂(dppf)·CH₂Cl₂{[1，1’-双(二苯膦基)二茂铁]二氯化钯(II)与二氯甲烷络合物}和碱(例如碳酸钾或氢氧化钠)存在下，用式(II)中间体通过Suzuki偶合。

方法C：

在钯催化剂(例如二氯化双(苄腈)合钯(II))、合适的配体(例如衍生自[(tBu)₃PH]BF₄)、铜(I)盐(例如碘化亚铜(I))和碱(例如二异丙胺)存在下，用三甲基硅乙炔处理4-氨基-2，6-二氯嘧啶(IX)，得到化合物(VIII)，随后与苯胺(IV)缩合得到中间体(XIV)。经用氟化物源(例如TBAF)处理，据此裂解掉三甲基硅基，在钯催化剂(例如[双(二苯膦基)]二氯化钯(II)络合物)、铜(I)盐(例如碘化亚铜(I))和碱(例如ethyldidopropylamine)存在下，使所得炔与碘苯基衍生物(例如4-氟碘苯)反应，得到化合物(XV)。

本发明的许多化合物表现出有用的药理学性质和药代动力学性质。因此，它们可用于治疗或预防人和动物的疾病，尤其是过度增殖性疾病例如癌症。

在另一个实施方案中，本发明提供药物组合物，该组合物包含至少一种本发明的化合物。在另一个实施方案中，本发明提供药物组合物，该组合物包含至少一种本发明的化合物及一种或多种药理学上安全的赋形剂或载体物质。在又一个实施方案中，本发明提供所述化合物和组合物用于治疗疾病的用途，以及通过给予患者治疗有效量的所述化合物或组合物用于治疗疾病的方法。

如果用作活性化合物，本发明的化合物优选被分离成大致纯的形式，也就是说大致不含合成过程中的残余物。可通过化学技术人员或药剂师已知方法测定纯度(参见Remington′s PharmaceuticalSciences，第18版，1990，Mack Publishing Group，Enolo)。优选化合物的纯度＞99％(重量/重量)，但是必要时，也可使用＞95％、＞90％或＞85％的纯度。

本发明还涉及使用本文所述的化合物或组合物来治疗或预防哺乳动物的过度增殖性疾病的方法，或者在制备治疗或预防哺乳动物过度增殖性疾病的药物中的方法。该方法包括给予有需要的包括人在内的患者(或哺乳动物)一定量的有效治疗或预防疾病的本发明化合物、其药学上可接受的盐或酯或者本发明组合物。

过度增殖性疾病包括但不限于实体瘤，例如乳腺癌、呼吸道癌、脑癌、生殖器癌、消化道癌、尿道癌、眼癌、肝癌、皮肤癌、头颈部癌、甲状腺癌、甲状旁腺癌及其远距离转移癌。这些疾病还包括淋巴瘤、肉瘤和白血病。

本发明还涉及使用本发明的化合物作为预防药物或化学预防药物来预防本文所述哺乳动物过度增殖性疾病的方法。该方法包括给予有需要的包括人在内的哺乳动物一定量的有效延缓或减少疾病发作的本发明化合物或其药学上可接受的盐或酯。

乳腺癌的实例包括但不限于浸润性导管癌、浸润性小叶癌、腺管原位癌和小叶原位癌。

呼吸道癌的实例包括但不限于小细胞肺癌、非小细胞肺癌以及支气管腺瘤和胸膜肺胚细胞瘤。

脑癌的实例包括但不限于脑干神经胶质瘤、垂体(hypophtalmic)神经胶质瘤、小脑星形细胞瘤、大脑星形细胞瘤、成神经管细胞瘤、室管膜瘤以及神经外胚层肿瘤和松果体肿瘤。

男性生殖器肿瘤包括但不限于前列腺癌和睾丸癌。女性生殖器肿瘤包括但不限于子宫内膜癌、宫颈癌、卵巢癌、阴道癌和外阴癌以及子宫肉瘤。

消化道肿瘤包括但不限于肛门癌、结肠癌、结肠直肠癌、食道癌、胆囊癌、胃癌、胰腺癌、直肠癌、小肠癌和涎腺癌。

尿道肿瘤包括但不限于膀胱癌、阴茎癌、肾癌、肾盂癌、输尿管癌和尿道癌。

眼癌包括但不限于眼内黑素瘤和成视网膜细胞瘤。

肝癌的实例包括但不限于肝细胞癌(有或无纤维板层变异的肝细胞癌)、胆管癌(肝内胆管癌)和混合型肝细胞胆管癌。

皮肤癌包括但不限于鳞状细胞癌、卡波西肉瘤(Kaposi’ssarcoma)、恶性黑素瘤、默克尔细胞皮肤癌(Merkel cell skin cancer)和非黑素瘤皮肤癌。

头颈部癌包括但不限于喉/喉咽/鼻咽/口咽癌，以及唇癌和口腔癌。

淋巴瘤包括但不限于AIDS相关淋巴瘤、非霍金奇淋巴瘤(non-Hodgkin’s lymphoma)、皮肤T细胞淋巴瘤、霍金奇病(Hodgkin’s disease)和中枢神经系统淋巴瘤。

肉瘤包括但不限于软组织肉瘤、骨肉瘤、恶性纤维组织细胞瘤、淋巴肉瘤和横纹肌肉瘤。

白血病包括但不限于急性髓细胞性白血病、急性成淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病、慢性髓细胞性白血病和毛细胞白血病。

人类的这些疾病已得到充分表征，其它哺乳动物也存在这些具有相似病因的疾病，也可通过给予本发明的化合物和/或药物组合物进行治疗。

在另一个实施方案中，本发明提供含有至少一种本发明化合物的药物。在另一个实施方案中，本发明提供含有至少一种本发明化合物和一种或多种药理学上安全的赋形剂或载体物质(例如羟丙基纤维素)的药物及其在上述目的中的用途。

活性组分可以系统性和/或局部性地发挥作用。对于该目的，可按合适的方式加以应用，例如口服、胃肠外、肺、鼻、舌下、舌、口腔、直肠、经皮、结膜、耳或作为植入物。

对于这些应用途径，可按合适的应用形式给予活性组分。有关应用形式的概述，参见Remington′s Pharmaceutical Sciences，第18版，1990，Mack Publishing Group，Enolo。

有用的口服应用形式包括快速和/或以改进形式释放活性组分的应用形式，例如片剂(未包衣片剂和包衣片剂，例如具有肠溶衣)、胶囊剂、糖衣片剂、颗粒剂、小丸剂、散剂、乳液剂、混悬剂、溶液剂和气雾剂。这类缓释药物组合物记载于Remington’s PharmaceuticalSciences，第18版，第91章，第8部分，1990，Mack Publishing Group，Enolo。

可实施胃肠外应用以避免吸收步骤(静脉内、动脉内、心脏内、脊柱内或腰椎内)或者同时包括吸收(肌内、皮下、皮内、经皮或腹膜内)。有用的胃肠外应用形式包括以溶液剂、混悬剂、乳液剂、冻干剂和无菌粉针剂形式的注射制剂和输注制剂。这些胃肠外的药物组合物记载于Remington’s Pharmaceutical Sciences，第18版，第84章，第8部分，1990，Mack Publishing Group，Enolo。

在一个实施方案中，本发明涉及活性化合物的静脉内(i.v.)应用，例如推注(也就是单剂，例如每一注射器)、短时间内输注(例如最多1小时)或长时间内输注(例如1小时以上)。可通过间歇性给药实施该应用。所用体积可随疾病而变化，对于推注通常为0.5-30ml或1-20ml，对于短时间内输注通常为25-500ml或50-250ml，对于长时间内输注通常为50-1000ml或100-500ml。

该应用形式必须是无菌无热原的。它们是水性溶剂型或者是水性溶剂和有机溶剂混合型的。实例为乙醇、聚乙二醇(PEG)300或400、含环糊精水溶液或乳化剂，例如卵磷脂、Pluronic F68、SolutolHS15或Cremophor。优选为水溶液。

对于静脉内应用，溶液剂通常是等渗的和富含氢的(euhydric)，例如pH为3-11、6-8或约7.4。

玻璃容器或塑料容器可以用作静脉内溶液剂的包装，例如橡胶密封小瓶。它们可以容纳体积为1-1000ml或5-50ml的液体。可以从小瓶中直接抽取溶液剂用于患者。对于该目的，最好以固体形式(例如作为冻干剂)提供活性化合物，临给药前将溶剂加到小瓶中使之溶解。

输注用溶液剂最好装在用玻璃或塑料制成的容器(例如瓶子)中或者可折叠容器(例如袋子)中。它们可容纳体积为1-1000ml或50-500ml的液体。

适用于其它应用途径的形式包括例如可吸入药物形式(包括粉状吸入剂、喷雾剂)、滴鼻剂/滴鼻液、喷雾剂；舌、舌下或口腔给药的片剂或胶囊剂、栓剂、耳用制剂、眼用制剂、阴道用胶囊剂、水性混悬剂(洗剂、震荡合剂)、亲脂性混悬剂、软膏剂、乳膏剂、乳剂、糊剂、扑粉或植入剂。

活性组分本身可按已知方式转化成所述的应用形式。这可以用惰性无毒、药学上合适的赋形剂进行。这些尤其包括载体(例如微晶纤维素)、溶剂(例如液体聚乙二醇)、乳化剂(例如十二烷基硫酸钠)、分散剂(例如聚乙烯吡咯烷酮)、合成和天然生物聚合体(例如白蛋白)、稳定剂(例如抗氧化剂例如抗坏血酸)、着色剂(例如无机色素例如氧化铁)或味道矫味剂和/或气味矫味剂。本申请第C部分给出了示例性的应用形式。

人用时，在口服给药的情况下，建议给予的剂量为0.001-50mg/kg，或者0.01-20mg/kg。在胃肠外给药的情况下，例如静脉内或通过鼻黏膜、口腔黏膜或者吸入，建议使用剂量为0.001-0.60mg/kg，特别是0.01-30mg/kg。

尽管如此，在某些情况下，可能需要偏离所述剂量，也就是说剂量随体重、应用途径、对于活性组分的个体状况、制备方法及应用发生时的时间或间隔而变化。例如在某些情况下，使用的量小于前述最小量就可能足够了，而在另一些情况下，不得不超过所提及的上限。在应用较大量的情况下，最好将它们在一整天内分成多个单剂。

除非另有说明，否则实验和实施例中的百分数是重量百分数；份是重量份。所给出的液体/液体溶液的溶剂比、稀释比和浓度均按体积计。

A.实施例

缩写词和首字母缩写词

Journal of Organic Chemistry每卷第一期中刊登有本领域普通有机化学技术人员使用的缩写词总目录；该目录通常以表格形式提供，标题名为Standard List of Abbreviations(标准缩写词表)。该表格中所包含的缩写词以及所有本领域普通有机化学技术人员所使用的缩写词都通过引用结合到本文中。

对于本发明的目的，化学元素根据化学元素周期表鉴定(Handbook of Chemistry and Physics，第67版，1986-87，CAS版本)。

更具体地说，当本说明书全文使用下列缩写词时，其含义如下：

2X 2次

3X 3次

AlMe₃ 三甲基铝

Boc 叔丁氧基羰基

n-BuLi 丁基锂

t-BuOK 叔丁醇钾

calcd 计算值

Celite 硅藻土过滤剂，Celite公司的注册商标

CD₃OD 甲醇-d₄

CHCl₃-d 氯仿-d

d 双峰

DBU 1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯

DCC 二环己基碳二亚胺

DEAD 偶氮二羧酸二乙酯

DIBAH 二异丁基氢化铝

DIEA 二异丙基乙胺

DMA 二甲基乙酰胺

DMAP 4-二甲氨基吡啶

DME 二甲氧基乙烷

DME N，N-二甲基甲酰胺

DMSO 二甲亚砜

DMSO-d₆ 二甲亚砜-d₆

EDCI 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐

EtSH 乙硫醇

EtOAc 乙酸乙酯

EtOH 乙醇

Et₃SiH 三乙基硅烷

h 小时

HATU 六氟磷酸O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-

四甲基脲

Hex 己烷

¹H NMR 质子核磁共振

HOAc 乙酸

HPLC 高效液相色谱法

LC-MS 液相色谱/质谱

LDA 二异丙基氨基锂

LiHMDS 六甲基二硅烷氨基锂

m 多重峰

m-CPBA 3-氯过氧苯甲酸

MeOH 甲醇

min 分钟

Me₃SiI 三甲基碘硅烷

MS ES 电喷雾质谱

NaBH(OAc)₃ 三乙酰氧基硼氢化钠

OMs O-甲磺酰基

OTs O-对甲苯磺酰基

OTf O-三氟乙酰基

Pd/C 披钯碳

Pd₂(dba)₃ 三(二亚苄基丙酮)合二钯(0)

Pd(PPh₃)₄ 四(三苯基膦)合钯(0)

PdCl₂(dppf)·CH₂Cl₂ [1，1’-双(二苯膦基)二茂铁]二氯化钯(II)与二

氯甲烷络合物

RT 保留时间

rt 室温

R_f TLC保留因子

s 单峰

t 三重峰

TFA 三氟乙酸

THF 四氢呋喃

TLC 薄层色谱法

通用分析法

用下述方法确定本发明代表性化合物的结构。

用配备了Hewlett Packard 5890气相色谱仪的Hewlett Packard5989A质谱仪，获得电子碰撞质谱(EI-MS)，使用J&W DB-5柱(0.25uM涂层；30m×0.25mm)。离子源保持在250℃下，在50-800amu区间按每次扫描2秒进行光谱扫描。

用下述方法获得高压液相色谱-电喷雾质谱(LC-MS)：

(A)配备四级泵的Hewlett-Packard 1100 HPLC，可变波长检测器设置为254nm，YMC pro C-18柱(2×23mm，120A)，带电喷雾电离的Finnigan LCQ离子阱质谱仪。根据离子源的离子数，用可变离子时间(variable ion time)，在120-1200amu区间进行光谱扫描。洗脱液A：2％乙腈水溶液+0.02％TFA，B：2％水乙腈溶液+0.018％TFA。用10％-95％B梯度洗脱3.5分钟，流速1.0ml/分钟，最初保持0.5分钟，最终保持在95％B中0.5分钟。总操作时间为6.5分钟。

或者

(B)配备2个Gilson 306泵、Gilson 215自动取样器、Gilson二级管阵列检测器、YMC Pro C-18柱(2×23mm，120 A)的Gilson HPLC系统，配备z型喷雾的电喷雾电离Micromass LCZ单四极质谱仪。在120-800amu区间进行光谱扫描1.5秒。另获得ELSD(蒸发光散射检测器(Evaporative Light Scattering Detector))数据作为模拟通道。洗脱液为A：2％乙腈水溶液+0.02％TFA，或者为B：2％水乙腈溶液+0.018％TFA。用10％-95％B梯度洗脱3.5分钟，流速为1.5ml/分钟，最初保持0.5分钟，最终保持在90％B中0.5分钟。总操作时间为4.8分钟。另一个切换阀用于柱切换和再生。

常规单向NMR波谱法用400MHz Varian Mercury-plus分光计进行。将样品溶解于得自Cambridge Isotope Labs的氘代溶剂中，并转移到5mm ID Wilmad NMR管中。于293K获得光谱。参照适当的溶剂信号，在ppm数值范围记录化学位移，例如¹H光谱中对于DMSO-d₆为2.49ppm或对于CD₃CN-d₃为1.93ppm，对于CD₃OD为3.30ppm，对于CD₂Cl₂-d₂为5.32 ppm，对于CHCl₃-d为7.26ppm。

通用HPLC纯化方法

制备型反相HPLC色谱法用Gilson 215系统完成，通常使用YMCPro-C18 AS-342(150×20mm I.D.)柱。通常，所用流动相为(A)含0.1％TFA水溶液和(B)乙腈的混合物。常用梯度为：

时间[分钟]	A：％	B：％	流速[ml/分钟]
时间[分钟]	A：％	B：％	流速[ml/分钟]	0.50	90.0	10.0	1.0
11.00	0.0	100.0	1.0	0.50	90.0	10.0	1.0
11.00	0.0	100.0	1.0	14.00	0.0	100.0	1.0
15.02	100.0	0.0	1.0	14.00	0.0	100.0	1.0

中间体1A：4-{4-[(2-氨基-6-氯嘧啶-4-基)氨基]苯氧基}吡啶-2-甲腈

步骤1：4-(4-氨基苯氧基)吡啶-2-甲腈的制备

将4-氨基苯酚(41.35g，0.38mol)和N，N-二甲基乙酰胺(500ml)装入安装了机械搅拌器和回流冷凝器的3L三颈圆底烧瓶中。通入氮气使所得溶液脱气后，分批加入叔丁醇钾(44.54g，0.40mol)。溶液最初变成绿色，然后变成灰白色悬浮液，向其中一次性加入4-氯吡啶-2-甲腈(50.00g，0.36mol)的N，N-二甲基乙酰胺溶液(300ml)。混合物在数分钟内变为褐色，将其加热至90℃过夜。次日上午，使混合物冷却至室温，真空除去溶剂。使所得残余物在水(1.5L)和EtOAc(1.5L)之间分配。加入K₂CO₃调节pH至微碱性，分离各层。水层用EtOAc(1L)萃取。合并的有机相经MgSO₄干燥，过滤后浓缩。将所得残余物溶于二氯甲烷，并用硅胶塞(～1kg)吸收。然后用25％-75％EtOAc/己烷洗脱，得到4-(4-氨基苯氧基)吡啶-2-甲腈(18.9g，25％)：¹H NMR(DMSO-d₆)δppm 8.48(d，1H)，7.51(d，1H)，7.04(dd，1H)，6.83(dd，2H)，6.60(dd，2H)，5.18(s，2H)；MS ES 212(M+H)，保留时间0.97分钟。

步骤2：标题化合物的制备

将4-(4-氨基苯氧基)吡啶-2-甲腈(70.00g，0.33mol)、4，6-二氯嘧啶-2-胺(54.35g，0.33mol)、水(2.5L)和2-丙醇(500ml)装入安装了机械搅拌器和回流冷凝器的3L三颈圆底烧瓶中。将悬浮液加热至91℃4小时后，使之冷却至室温过夜。将反应混合物过滤，所收集的固体用EtOH、乙醚和己烷洗涤。固体经吸气干燥45分钟，得到4-{4-[(2-氨基-6-氯嘧啶-4-基)氨基]苯氧基}吡啶-2-甲腈(84.1g，75％)：¹H NMR(DMSO-d₆)δppm 9.45(s，1H)，8.55(d，1H)，7.80(d，2H)，7.64(d，1H)，7.12-7.15(m，3H)，6.76(s，2H)，6.00(s，1H)，3.34(s，2H)；MS ES 339(M+H)，保留时间2.49分钟。

中间体1B：6-氯-N⁴-(4-{[2-(三氟甲基)吡啶-4-基]氧基}苯基)嘧啶-2，4-二胺

按类似于中间体1A的两步顺序制备：¹H NMR(DMSO-d₆)δppm9.46(s，1H)，8.59(d，1H)，7.81(d，2H)，7.37(d，1H)，7.17(d，2H)，7.11(dd，1H)，6.78(s，2H)，6.00(s，1H)。MS ES 382(M+H)，计算值382，保留时间2.93分钟。

中间体1C：6-氯-N⁴-{4-[(2-甲基吡啶-4-基)氧基]苯基}嘧啶-2，4-二胺

按类似于中间体1A的两步顺序制备：¹H NMR(DMSO-d₆)δ9.40(s，1H)，8.27(d，1H)，7.76(d，2H)，7.06(d，2H)，6.75(brs，2H)，6.72(d，1H)，6.66(s，1H)，5.98(s，1H)；MS ES 328(M+H)⁺，计算值328，保留时间＝1.45分钟。

中间体1D：4-{3-[(2-氨基-6-氯嘧啶-4-基)氨基]苯氧基}吡啶-2-甲腈

按类似于中间体1 A的两步顺序制备：¹H NMR(DMSO-d₆)δ9.52(s，1H)，8.57(d，1H)，7.72(dd，1H)，7.69(d，1H)，7.53(dd，1H)，7.38(dd，1H)，7.18(dd，1H)，6.77-6.80(m，3H)，6.01(s，1H)；MS ES 339(M+H)⁺，计算值339，保留时间＝2.65分钟。

中间体2A：4-{3-[(2-氨基-6-氯嘧啶-4-基)氨基]苯氧基}吡啶-2-甲酰胺

向100ml圆底烧瓶中加入4-{3-[(2-氨基-6-氯嘧啶-4-基)氨基]苯氧基}吡啶-2-甲腈(中间体1D，5.00g，14.8mmol)和浓硫酸(40ml)。将混合物加热至70℃2小时后，使之冷却至室温。然后缓慢倒入NaHCO₃和冰水的混合物中，再边搅拌边加入EtOAc。分离有机层，经MgSO₄干燥后过滤。真空浓缩滤液，得到4-{3-[(2-氨基-6-氯嘧啶-4-基)氨基]苯氧基}吡啶-2-甲酰胺(4.50g，85％，无色粉末)：δ9.51(s，1H)，8.49(d，1H)，8.13(d，1H)，7.72(d，1H)，7.66-7.68(m，1H)，7.54(dd，1H)，7.43(d，1H)，7.38(dd，1H)，7.18(dd，1H)，6.77-6.81(m，3H)，6.00(s，1H)；MS ES357(M+H)⁺，计算值357，保留时间＝2.32分钟。

实施例1：6-(1-乙氧基乙烯基)-N⁴-(4-{[2-(三氟甲基)吡啶-4-基]氧基}苯基)嘧啶-2，4-二胺的制备

将6-氯-N⁴-(4-{[2-(三氟甲基)吡啶-4-基]氧基}苯基)嘧啶-2，4-二胺(100mg，0.26mmol)、Pd(PPh₃)₄(15.2mg，0.01mmol)、K₂CO₃(43.5mg，0.31mmol)、甲苯(3ml)和DMA(1ml)装入8ml微波小瓶中。使混合物脱气数分钟，然后加入三丁基(1-乙氧基)锡(113.5mg，0.31mmol)，在微波反应器(Emrys optimizer，由Personal Chemistry公司生产)中，将反应混合物于180℃加热15分钟。使混合物冷却，并经硅藻土过滤，蒸发溶剂。所得混合物用硅胶色谱法纯化(3∶2己烷∶EtOAc，然后EtOAc)，得到标题化合物，为浅黄色油状物。¹H NMR(DMSO-d₆)δ9.42(s，1H)，8.58(m，1H)，7.90(m，2H)，7.30(m，1H)，7.15(m，3H)，6.25(s，1H)，5.21(s，2H)，530(s，1H)，4.25(s，1H)，8.32(q，2H)，1.35(t，3H)；MSES 417.9(M+H)⁺，计算值418.1。

实施例2：1-{2-氨基-6-[(4-{[2-(三氟甲基)吡啶-4-基]氧基}苯基)氨基] 嘧啶-4-基}乙醇的制备

步骤1：1-{2-氨基-6-[(4-{[2-(三氟甲基)吡啶-4-基]氧基}苯基)氨基]嘧啶-4-基}乙酮的制备

将6-(1-乙氧基乙烯基)-N⁴-(4-{[2-(三氟甲基)吡啶-4-基]氧基}苯基)嘧啶-2，4-二胺(实施例1)溶于5ml THF中，加入3ml 2N HCl水溶液。将反应混合物在室温下搅拌过夜。蒸发掉大部分THF，混合物用饱和NaHCO₃碱化，用EtOAc萃取，用水、盐水洗涤，干燥并过滤。浓缩滤液，得到1-{2-氨基-6-[(4-{[2-(三氟甲基)吡啶-4-基]氧基}苯基)氨基]嘧啶-4-基}乙酮，为浅黄色固体。¹H NMR(CD₃OD)δ8.55(m，1 H)，7.85(m，2H)，7.31(s，1H)，7.15(m，2H)，7.12(m，1H)，6.62(s，1H)，2.55(s，3H)；MS ES 389.9(M+H)⁺，计算值389.1。

步骤2：标题化合物的制备

将1-{2-氨基-6-[(4-{[2-(三氟甲基)吡啶-4-基]氧基}苯基)氨基]嘧啶-4-基}乙酮(30mg，0.08mmol)、丙胺(9.11mg，0.15mmol)、NaBH₃CN(9.7mg，0.15mmol)溶于1ml MeOH和1ml THF中。将反应混合物在室温下搅拌过夜。蒸发溶剂，所得混合物用制备型HPLC纯化，得到6-[1-(丙基氨基)乙基]-N⁴-(4-{[2-(三氟甲基)吡啶-4-基]氧基}苯基)嘧啶-2，4-二胺(8.5mg，收率25％)和标题化合物(15mg，收率48％)。¹HNMR(CD₃OD)δ8.55(m，1H)，7.90(m，2H)，7.35(s，1H)，7.25(m，2H)，7.15(m，1H)，6.25(s，1H)，4.75(q，1H)，1.55(d，3H)；MS ES 391.9(M+H)⁺，计算值391.3。

实施例3：4-[4-({2-氨基-6-[(E)-2-(4-氟苯基)乙烯基]嘧啶-4-基}氨基) 苯氧基]吡啶-2-甲腈的制备

向8ml微波反应容器内的1当量4-{4-[(2-氨基-6-氯嘧啶-4-基)氨基]苯氧基}吡啶-2-甲腈(100mg)、2当量[(E)-2-(4-氟苯基)乙烯基]硼酸和0.06当量PdCl₂(dppf)·CH₂Cl₂络合物及2.3ml无水N，N-二甲基乙酰胺的混合物中，加入3.1当量2M K₂CO₃水溶液。所得混合物用氮气脱气10分钟后，将小瓶密封后在微波反应器(Emrys optimizer，由Personal Chemistry公司生产)中于140℃加热20分钟。将反应混合物过滤，浓缩滤液，用制备型HPLC纯化(使用Phenomenex Luna 5μ C18150×30mm柱，15％-85％乙腈洗脱)，得到最终产物。

采用适当的原料，用实施例3所述方法制备实施例4。

实施例5：6-[(E)-2-(4-氟苯基)乙烯基]-N⁴-(4-{[2-(三氟甲基)吡啶-4-基]氧基}苯基)嘧啶-2，4-二胺

向5ml微波反应容器内的1当量6-氯-N⁴-(4-{[2-(三氟甲基)吡啶-4-基]氧基}苯基)嘧啶-2，4-二胺(100mg)、2当量[(E)-2-(4-氟苯基)乙烯基]硼酸和0.06当量PdCl₂(dppf)·CH₂Cl₂络合物及2.3ml无水N，N-二甲基乙酰胺的混合物中，加入3.1当量2M K₂CO₃水溶液。所得混合物用氮气脱气10分钟后，将小瓶密封后在微波反应器(Emrysoptimizer，由Personal Chemistry公司生产)中于150℃加热20分钟。将反应混合物过滤，浓缩滤液，用制备型HPLC纯化(使用PhenomenexLuna 5μ C18150×30mm柱，15％-85％乙腈洗脱)，得到最终产物。

采用适当的原料，用实施例4所述方法制备实施例6-7。

实施例8：(3E)-4-{2-氨基-6-[(4-{[2-(三氟甲基)吡啶-4-基]氧基}苯基) 氨基]嘧啶-4-基}丁-3-烯-1-醇

步骤1：6-((1E)-4-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}丁-1-烯-1-基)-N⁴-(4-{[2-(三氟甲基)吡啶-4-基]氧基}苯基)嘧啶-2，4-二胺的制备

通过使用市售的反-1-丁烯-1-基-(4-叔丁基二甲基甲硅烷基氧基-4′，4′，5′，5′-四甲基-(1′，3′，2′)-二氧杂硼杂环戊烷和6-氯-N⁴-(4-{[2-(三氟甲基)吡啶-4-基]氧基}苯基)嘧啶-2，4-二胺，按类似于实施例3所述方法制备上述化合物：¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.48(d，1H)，7.42(m，2H)，7.15(d，1H)，7.01(m，2H)，6.91(m，1H)，6.76(m，1H)，6.49(s，1H)，6.15(m，2H)，5.92(s，1H)，4.82(br s，2H)，3.67(dd，2H)，2.39(m，2H)，0.83(s，9H)，0.00(s，6H)。

步骤2：标题化合物的制备

向6-((1E)-4-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}丁-1-烯-1-基)-N⁴-(4-{[2-(三氟甲基)吡啶-4-基]氧基}苯基)嘧啶-2，4-二胺(128mg，0.24mmol)的2.4ml无水二氯甲烷溶液中加入0.5ml TFA，将溶液置于室温下搅拌2小时后，用EtOAc和5％NaHCO₃水溶液稀释。分离两层，水层用EtOAc萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤后浓缩。所得残余物用50％EtOAc/己烷研磨，得到99mg产物，为白色固体。¹H NMR(CD₃OD)δ8.4(d，1H)，7.83(d，2H)，7.32(d，1H)，7.17(m，2H)，7.12(m，1H)，6.75(m，1H)，6.31(d，1H)，6.15(s，1H)，3.72(t，2H)，2.51(q，2H)；MS ES 418(M+H)⁺，计算值418，保留时间＝2.05分钟。

实施例14：6-(3-氨基丙基)-N⁴-(4-{[2-(三氟甲基)吡啶-4-基]氧基}苯基)嘧啶-2，4-二胺盐酸盐

步骤1：(3-{2-氨基-6-[(4-{[2-(三氟甲基)吡啶-4-基]氧基}苯基)氨基]嘧啶-4-基}丙基)氨基甲酸叔丁酯的制备

在氮气氛下，向N-烯丙基氨基甲酸叔丁酯(75mg，0.48mmol)的1.5ml无水THF溶液中加入9-BBN(0.5M THF溶液，0.71mmol)，将所得溶液于室温下搅拌3小时。向上述混合物中加入6-氯-N⁴-(4-{[2-(三氟甲基)-吡啶-4-基]氧基}苯基)嘧啶-2，4-二胺(150mg，0.39mmol)、1ml THF、Pd(PPh₃)₄(20mg，0.017mmol)和NaOH(47mg溶于0.5ml水中，1.18mmol)，将所得混合物加热至70℃过夜。次日上午，使反应混合物冷却至室温，加入EtOAc和水，混合物经硅藻土过滤。分离各层，水层用EtOAc萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤后浓缩。所得残余物用Biotage柱纯化(使用25-100％EtOAc/己烷)，得到78mg(39％)所需化合物。¹H NMR(CD₂Cl₂)δ8.55(d，1H)，7.53(m，2H)，7.25(d，1H)，7.12(m，2H)，7.03(m，1H)，6.75(bs，1H)，6.01(s，1H)，5.11(bs，1H)，5.0(bs，2H)，3.15(m，2H)，2.53(t，2H)，1.85(m，2H)，1.21(s，9H)；MS ES 505(M+H)⁺，计算值505，保留时间＝2.69分钟。

步骤2：标题化合物的制备

向(3-{2-氨基-6-[(4-{[2-(三氟甲基)吡啶-4-基]氧基}苯基)氨基]嘧啶-4-基}丙基)氨基甲酸叔丁酯(50mg，0.10mmol)的0.4ml无水MeOH溶液中，加入4M HCl/二烷(0.37ml，1.49mmol)溶液，将所得溶液在室温下搅拌1小时。真空浓缩所得溶液，得到33mg标题化合物，为黄褐色固体。¹H NMR(CD₂Cl₂)δ12.92(bs，1H)，10.98(bs，1H)，8.61(d，1H)，7.96(m，6H)，7.39(m，1H)，7.26(m，2H)，7.13(m，1H)，6.28(s，1H)，2.85(m，2H)，2.67(m，2H)，1.93(m，2H)；)；MS ES 405(M+H)⁺，计算值405，保留时间＝2.1 7分钟。

实施例15：4-{2-氨基-6-[(4-{[2-(三氟甲基)吡啶-4-基]氧基}苯基)氨基] 嘧啶-4-基}丁-1-醇

向充满氮气的烧瓶中加入10％(重量)钯/活性碳(6mg)和(3E)-4-{2-氨基-6-[(4-{[2-(三氟甲基)吡啶-4-基]氧基}苯基)氨基]嘧啶-4-基}丁-3-烯-1-醇(实施例8，59mg，0.14mmol，溶于1ml EtOAc中)。烧瓶用气罐中的氢气净化，并搅拌3小时。过滤混合物以除去催化剂，浓缩滤液，得到40mg(67％)所需化合物，为灰色固体。¹H NMR(DMSO-d₆)δ9.14(s，1H)，8.58(d，1H)，7.83(m，2H)，7.35(d，1H)，7.11(m，3H)，6.16(s，2H)，5.86(s，1H)，4.37(t，1H)，3.39(m，2H)，2.34(t，2H)，1.6(m，2H)，1.46(m，2H)；MS ES 420(M+H)⁺，计算值420，保留时间＝2.24分钟。

实施例16：4-{2-氨基-6-[(4-{[2-(三氟甲基)吡啶-4-基]氧基}苯基)氨基] 嘧啶-4-基}丙-1-醇

步骤1：6-(3-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}丙基)-N⁴-(4-{[2-(三氟甲基)吡啶-4-基]氧基}苯基)嘧啶-2，4-二胺的制备

通过用(烯丙氧基)(叔丁基)二甲基硅烷和6-氯-N⁴-(4-{[2-(三氟甲基)-吡啶-4-基]氧基}苯基)嘧啶-2，4-二胺，按实施例14步骤1所述的类似方法制备上述化合物：¹H NMR(CD₂Cl₂)δ 8.47(d，1H)，7.48(m，2H)，7.17(d，1H)，7.03(m，2H)，6.94(m，1H)，6.61(s，1H)，5.92(s，1H)，5.20(br s，2H)，3.59(t，2H)，2.48(m，2H)，1.81(m，2H)，0.84(s，9H)，0.00(s，6H)；MS ES 520(M+H)⁺，计算值520，保留时间＝3.20。

步骤2：标题化合物的制备

从6-(3-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}丙基)-N⁴-(4-{[2-(三氟甲基)吡啶-4-基]氧基}苯基)嘧啶-2，4-二胺开始，按实施例8步骤2所述的类似方法制备标题化合物：¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.61(d，1H)，7.87(s，2H)，7.39(s，1H)，7.26(m，2H)，7.14(m，1H)，6.11(s，1H)，3.46(t，2H)，2.58(m，2H)，1.73(m，2H)；MS ES 406(M+H)⁺，计算值406，保留时间＝2.32。

实施例17：4-{2-氨基-6-[(4-{[2-(三氟甲基)吡啶-4-基]氧基}苯基)氨基] 嘧啶-4-基}丁烷-1，2-二醇

步骤1：2，2，3，3，8，8，9，9-八甲基-5-乙烯基-4，7-二氧杂-3，8-二硅杂癸烷的制备

向圆底烧瓶中加入80ml THF、咪唑(3.09g，45.4mmol)、1eq R，S-3-丁烯-1，2-二醇(1.0g，11.4mmol)和叔丁基二甲基氯硅烷(6.84g，45.4mmol)。将所得混合物在室温下搅拌72小时后，真空除去溶剂。加入乙醚并将混合物过滤。浓缩滤液，所得残余物用硅胶柱纯化(0-50％EtOAc/己烷)，得到2.1g(58％)所需产物，为透明油状物。¹H NMR(CD₂Cl₂)δ5.80(m，1H)，5.22-5.17(m，1H)，5.05-5.0(m，1H)，4.09(m，1H)，3.43(m，2H)，0.84(m，18H)，0.0(m，12H)。

步骤2：6-(3，4-双{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}丁基)-N⁴-(4-{[2-(三氟甲基)吡啶-4-基]氧基}苯基)嘧啶-2，4-二胺的制备

通过用2，2，3，3，8，8，9，9-八甲基-5-乙烯基-4，7-二氧杂-3，8-二硅杂癸烷和6-氯-N⁴-(4-{[2-(三氟甲基)-吡啶-4-基]氧基}苯基)嘧啶-2，4-二胺，按实施例14步骤1所述的类似方法制备上述化合物：¹H NMR(CD₂Cl₂)δ8.46(d，1H)，7.46(m，2H)，7.16(d，1H)，7.02(m，2H)，6.93(m，1H)，6.51(s，1H)，5.89(s，1H)，4.84(s，2H)，3.66(m，1H)，3.37-3.53(m，2H)，2.36-2.57(m，2H)，1.86(m，1H)，1.65(m，1H)，0.84(m，18H)，0.01(m，12H)；MS ES 664(M+H)⁺，计算值664，保留时间＝3.80。

步骤3：标题化合物的制备

从6-(3，4-双{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}丁基)-N⁴-(4-{[2-(三氟甲基)吡啶-4-基]氧基}苯基)嘧啶-2，4-二胺开始，按实施例8步骤2所述的类似方法制备标题化合物：¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.61(d，1H)，7.89(m，2H)，7.39(m，1H)，7.25(d，2H)，7.14(m，1H)，6.15(s，1H)，4.62(s，1H)，3.45(m，1H)，3.26(m，1H)，2.66(m，1H)，2.56(m，1H)，1.92(m，1H)，1.55(m，1H)；MS ES 436(M+H)⁺，计算值436，保留时间＝2.20。

实施例22：6-[(4-氟苯基)乙炔基]-N⁴-(4-{[2-(三氟甲基)吡啶-4-基]氧基}苯基)嘧啶-2，4-二胺

步骤1：4-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]乙炔基}-6-氯嘧啶-2-胺的制备

在氩气氛下，将1-氨基-2，6-二氯嘧啶(5.00g，30.5mmol)、二氯化双(苄腈)合钯(II)(351mg，0.91mmol)、[(tBu)₃PH]BF₄(575mg，1.98mmol)与碘化亚铜(I)(116mg，0.61mmol)混合。加入1，4-二烷(40ml)、二异丙胺(5.1 3ml，36.6mmol)和三甲基硅乙炔(5.17ml，36.6ml)，将混合物加热至40℃48小时。使粗产物通过硅胶垫，用二氯甲烷(dichlor methane)洗脱，真空浓缩，得到褐色玻璃状物，无需纯化即可直接用于下一步骤。

步骤2：6-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]乙炔基}-N⁴-(4-{[2-(三氟甲基)吡啶-4-基]氧基}苯基)嘧啶-2，4-二胺的制备

将步骤1所得粗产物(1.53g，6.7mmol)和4-{[2-(三氟甲基)吡啶-4-基]氧基}苯胺(1.03g，4.1mmol)(按中间体1A步骤1所述的类似方法制备)溶于异丙醇(10ml)，加热至50℃16小时。真空除去溶剂，得到深黄色固体。用30ml二氯甲烷和5ml三乙胺的混合物处理该固体后，真空浓缩，残余物用柱色谱法纯化(硅胶，二氯甲烷∶异丙醇98∶2)，得到1.57g(86％)中间体。

步骤3：6-乙炔基-N⁴-(4-{[2-(三氟甲基)吡啶-4-基]氧基}苯基)嘧啶-2，4-二胺的制备

将步骤2所得产物(3.46g，7.8mmol)溶于THF(30ml)水溶液中，加入四丁基氟化铵(3.06g，11.7mmol)的THF(10ml)溶液。将混合物在室温下搅拌1小时。真空浓缩后，残余物用硅胶色谱法纯化(乙酸乙酯∶己烷4∶1)，得到所需中间体6-乙炔基-N⁴-(4-{[2-(三氟甲基)吡啶-4-基]氧基}苯基)嘧啶-2，4-二胺(2.73g，94％)。¹H NMR(DMSO-d₆)δ9.38(s，1H)，8.59(d，1H)，7.84(m，2H)，7.36(d，1H)，7.16(m，2H)，7.11(m，1H)，6.47(s，2H)，6.3(s，1H)，4.23(s，1H)。

步骤4：标题化合物的制备

在抽真空并充满氮气的小瓶中装入6-乙炔基-N⁴-(4-{[2-(三氟甲基)吡啶-4-基]氧基}苯基)嘧啶-2，4-二胺(150mg，0.40mmol)、Pd(PPh₃)₂Cl₂(15mg，0.020mmol)、CuI(4mg，0.020mmol)、4-氟碘苯(0.44mmol)和4ml无水DMF溶液。向上述混合物中加入N，N-二异丙基乙胺(0.21ml，1.2mmol)，将反应混合物加热至80℃过夜。次日上午，使混合物冷却至室温，并真空浓缩。所得残余物用Biotage 25M柱纯化(EtOAc/己烷(1/1)洗脱)，得到116mg标题化合物(62％)。¹H NMR(DMSO-d₆)δ9.40(s，1H)，8.59(d，1H)，7.85(m，2H)，7.62(m，2H)，7.37(d，1H)，7.28(m，2H)，7.16(m，2H)，7.12(m，1H)，6.49(s，1H)，6.21(s，2H)；MS ES 466(M+H)⁺，计算值466，保留时间＝2.89。

通过采用上述方法并替换适当的原料，来制备实施例9、10、11、20、21、23、24、25、26、33。

实施例29：6-[2-(4-氟苯基)乙基]-N⁴-(4-{[2-(三氟甲基)吡啶-4-基]氧基}苯基)嘧啶-2，4-二胺

向充满氮气的圆底烧瓶中加入10％(重量)钯/活性碳(9mg)、6-[(4-氟苯基)乙炔基]-N⁴-(4-{[2-(三氟甲基)吡啶-4-基]氧基}苯基)嘧啶-2，4-二胺(实施例22，90mg，0.19mmol)和2ml EtOAc/MeOH(10∶1)。烧瓶用气罐中的氢气净化并搅拌过夜。次日上午，将反应混合物过滤后，真空浓缩，得到77mg(85％)标题化合物，为固体：¹H NMR(DMSO-d₆)δ 9.14(s，1H)，8.58(d，1H)，7.82(m，2H)，7.35(d，1H)，7.22(m，2H)，7.14-7.04(m，5H)，6.21(s，2H)，5.84(s，1H)，2.89(m，2H)，2.64(m，2H)；MS ES 470(M+H)⁺，计算值470，保留时间＝2.69分钟。

通过采用上述方法并替换适当的原料，来制备实施例12、13、18、27、28、30、31、32、34、37和38。

实施例35：3-(2-{2-氨基-6-[(4-{[2-(三氟甲基)吡啶-4-基]氧基}苯基)氨基]嘧啶-4-基}乙基)苯酚

在氮气氛下，在圆底烧瓶中，将6-[2-(3-甲氧基苯基)乙基]-N4-(4-{[2-(三氟甲基)吡啶-4-基]氧基}苯基)嘧啶-2，4-二胺(实施例31，38mg，0.079mmol)溶于0.8ml无水二氯甲烷中。向上述混合物中，滴加三溴化硼-二甲硫醚络合物(0.79ml，0.79mmol)，将混合物搅拌过夜。次日上午，加入水(2ml)，再加入饱和NaHCO₃水溶液直到停止冒泡为止。所得混合物用EtOAc稀释，分离两层。水层用EtOAc萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤后浓缩。粗制残余物用制备型HPLC纯化(乙腈/水/0.1％TFA)。含产物的部分用NaHCO₃水溶液制成游离碱，用EtOAc萃取。有机层用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤后浓缩，得到10mg(27％)标题化合物，为固体：¹H NMR(DMSO-d₆)δ9.36(s，1H)，9.17(s，1H)，8.6(d，1H)，7.85(m，2H)，7.38(d，1H)，7.14(m，3H)，7.02(m，2H)，6.78(m，1H)，6.7(m，1H)，6.24(s，2H)，5.9(s，1H)，2.84(m，2H)，2.63(m，2H)；MS ES468(M+H)⁺，计算值468，保留时间＝2.64分钟。

通过采用上述方法并替换适当的原料，同样制备了实施例19和36。

实施例39A：6-[(E)-2-(4-氨基苯基)乙烯基]-N⁴-(4-{[2-(三氟甲基)吡啶-4-基]氧基}苯基)嘧啶-2，4-二胺三氟乙酸盐

实施例39B：6-[(Z)-2-(4-氨基苯基)乙烯基]-N⁴-(4-{[2-(三氟甲基)吡啶-4-基]氧基}苯基)嘧啶-2，4-二胺三氟乙酸盐

步骤1：4，4，5，5-四甲基-2-[(E)-2-(4-硝基苯基)乙烯基]-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷的制备

向1-溴-4-硝基苯(3.23g，16mmol)、乙酸钯(II)(0.22g，0.97mmol)和Ph₃P(0.51g，1.95mmol)的无水甲苯(70ml)溶液中加入三正丁胺(6.03g，32.53mmol)和乙烯基硼酸频哪醇环酯(3g，19.48mmol)。然后将该混合物于110℃加热60小时。使之冷却至室温，用EtOAc(120ml)稀释，用1N HCl(100ml)搅拌10分钟。分离有机层，用水和盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤后浓缩，得到红褐色胶状物。粗产物用硅胶色谱法(CH₂Cl₂)纯化，得到1.13g(22％)所需产物。

步骤2：6-[(E)-2-(4-硝基苯基)乙烯基]-N⁴-(4-{[2-(三氟甲基)吡啶-4-基]氧基}苯基)嘧啶-2，4-二胺的制备

将6-氯-N⁴-(4-{[2-(三氟甲基)吡啶-4-基]氧基}苯基)嘧啶-2，4-二胺(198mg，0.52mmol)、4，4，5，5-四甲基-2-[(E)-2-(4-硝基苯基)乙烯基]-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷(200mg，0.73mmol)、Na₂CO₃(2.0M，0.91ml)和PdCl₂dppf(85mg，0.10mmol)及DMA(5ml)的混合物于130℃加热过夜后，使之冷却至室温并浓缩。然后，残余物用硅胶色谱法纯化(4％MeOH/CH₂Cl₂)，得到79mg(31％)所需产物。MS ES：495.3(M+H)⁺，计算值494.1，保留时间＝3.34分钟。

步骤3：标题化合物的制备

将6-[(E)-2-(4-硝基苯基)乙烯基]-N⁴-(4-{[2-(三氟甲基)吡啶-4-基]氧基}苯基)嘧啶-2，4-二胺(79mg，0.16mmol)和SnCl₂·2H₂O(180mg，0.80mmol)及EtOH(15ml)的混合物于70℃加热30分钟后，使之冷却至室温，过滤后浓缩。粗制残余物用制备型HPLC纯化，得到25.2mg(34％)标题化合物，为顺式烯烃和反式烯烃异构体的混合物。MS ES：465.3(M+H)⁺，计算值464.1，保留时间＝2.43分钟。

实施例40：6-[2-(4-氨基苯基)乙基]-N⁴-(4-{[2-(三氟甲基)吡啶-4-基]氧基}苯基)嘧啶-2，4-二胺三氟乙酸盐

将6-[(E)-2-(4-硝基苯基)乙烯基]-N⁴-(4-{[2-(三氟甲基)吡啶-4-基]氧基}苯基)嘧啶-2，4-二胺、6-[(Z)-2-(4-硝基苯基)乙烯基]-N⁴-(4-{[2-(三氟甲基)吡啶-4-基]氧基}苯基)嘧啶-2，4-二胺(80mg，0.16mmol)和10wt％Pd/活性碳(8mg)及MeOH(16ml)的混合物在氢气气罐下通气搅拌4.5小时。然后将其过滤后浓缩。粗制残余物用制备型HPLC纯化，得到28mg(30％)标题化合物，为灰白色固体。MS ES：467.3(M+H)⁺，计算值466.2，保留时间＝2.16分钟。

实施例 41：N⁴-{4-[(2-甲基吡啶-4-基)氧基]苯基}-6-[(E)-2-苯基乙烯基]-嘧啶-2，4-二胺

在氮气氛下，将5ml微波反应容器内的1当量6-氯-N⁴-{4-[(2-甲基吡啶-4-基)氧基]苯基}嘧啶-2，4-二胺、2当量[(E)-2-苯基乙烯基]硼酸和0.1当量PdCl₂(dppf)-CH₂Cl₂络合物及2.5ml无水N，N-二甲基乙酰胺的混合物与0.5ml 2M K₂CO₃水溶液在专用(personal)微波反应器(Emrys optimizer，由Personal Chemistry公司生产)中，于140℃加热20分钟。将反应混合物过滤，浓缩滤液，用制备型HPLC纯化(采用Phenomenex Luna 5μ C18 150×30mm柱，用含有0.1％TFA的15％-85％乙腈洗脱)，得到最终产物。

通过采用上述方法并替换适当的原料，同样制备实施例42-46。

实施例列表如下：

B.生理学活性

可以举例说明本发明化合物的实用性，例如通过下述体外肿瘤细胞增殖实验中化合物的体外活性。本领域对体外肿瘤细胞增殖实验的活性与临床上抗肿瘤活性之间的关系已了解得十分透彻。例如应用体外肿瘤增殖实验证实了以下药物的治疗功效：泰素(Silvestrini等，Stem Cells 1993，11(6)，528-35)、泰素帝(Bissery等，Anti CancerDrugs 1995，6(3)，339)和拓扑异构酶抑制剂(Edelman等，CancerChemother.Pharmacol.1996，37(5)，385-93)。

下面的实验可以证实本发明化合物的体外功效：

本发明化合物的细胞毒活性

以下部分介绍了可用于表征本发明化合物的试验，例如测试化合物对细胞的细胞毒活性。

将人肿瘤细胞例如HCT116细胞，按3.0×10³个细胞/孔接种到96孔板中并在37℃、5％CO₂培养箱内，在含有10％胎牛血清(Hyclone，Logan，Utah)和10mM HEPES的100μl RPMI完全培养基(InvitrogenCorporation，Grand Island，NY)中生长16小时。再向各孔加入50μl生长培养基，该培养基中含有浓度为20μM-60nM的化合物与0.2％DMSO。让细胞于37℃再生长72小时。向各孔加入20μl Alamar Blue(Trek Diagnostic Systems，Inc.，Cleveland，Ohio)试剂，于37℃孵育4小时。用SpectraMax Gemini(Molecular Devices，CA)，在544nm激发波长和590nm发射波长下读板。通过药物浓度的对数对抑制百分数的线性回归分析确定IC₅₀值。

用上述实验方法测试本发明代表性化合物的细胞毒性，得到以下结果：

在HCT116细胞毒活性实验中，实施例3、4、5、6、7、8、15、16、18、19、20、21、22、23、26、27、28、29、30、31、32、33、34、36、37、38、40、41、44、45和46显示的结果是IC₅₀≤500nM。

在HCT116细胞毒活性实验中，实施例1、2、9、10、11、12、13、14、17、24、25、35、42、43、39A和39B显示的结果是500nM＜IC₅₀≤10μM。

C.药物组合物相关操作性实施例

可以将本发明化合物转化成如下的药物制剂：

片剂：

组成：

100mg实施例1的化合物、50mg乳糖(一水合物)、50mg玉米淀粉(本地产)、10mg聚乙烯吡咯烷酮(PVP 25)(得自BASF，Ludwigshafen，Germany)和2mg硬脂酸镁。

片剂重量212mg，直径8mm，曲率半径12mm。

制备：

将活性组分、乳糖和淀粉的混合物与5％(重量/重量)的PVP水溶液一起造粒。干燥后，将颗粒与硬脂酸镁混合5分钟。用常规压片机模压该混合物(片剂形式，参见上文)。所施加的模压力通常为15kN。

口服给药用混悬液：

组成：

1000mg实施例1的化合物、1000mg乙醇(96％)、400mg Rhodigel(黄原胶，得自FMC，Pennsylvania，USA)和99g水。

10ml口服混悬液提供单剂100mg的本发明化合物。

制备：

将Rhodigel悬浮在乙醇中，将活性组分加入到混悬液中。边搅拌边加入水。继续搅拌约6小时直到Rhodigel完全溶胀。

静脉内给药用溶液剂1：

组成：

100-200mg实施例1的化合物、15g聚乙二醇400和250g水。盐水中，任选与最多15％的聚氧乙烯蓖麻油(Cremophor EL)、任选最多15％的乙醇和任选最多2当量的药学上合适的酸(例如柠檬酸或盐酸)。

制备：

边搅拌边将实施例1的化合物和聚乙二醇400溶于水中。溶液经过滤除菌(孔径大小0.22μm)，在无菌条件下，装入热灭菌的输注瓶中。用橡皮封口将输注瓶密封。

静脉内给药用溶液剂2

组成：

100-200mg实施例1的化合物、盐水溶液、任选最多15％(重量)的聚氧乙烯蓖麻油、任选最多15％(重量)的乙醇和任选最多2当量的药学上合适的酸(例如柠檬酸或盐酸)。

制备：

边搅拌边将实施例1的化合物溶于盐水溶液中。任选加入聚氧乙烯蓖麻油、乙醇或酸。溶液经过滤除菌(孔径大小0.22μm)，在无菌条件下，装入热灭菌的输注瓶中。用橡皮封口将输注瓶密封。

从本文所公开的本说明书或本发明的实践考虑，本发明的其它实施方案对于本领域技术人员而言是显而易见的。一般认为本说明书和实施例仅是示例性的，本发明的真实范围和精神以所附权利要求书的内容为准。

Claims

1.一种下式(I)的化合物或其药学上可接受的盐：

其中

A表示氧原子或基团-NR^A-，其中R^A表示氢或烷基；

D表示基团-CH-或氮原子；

R⁴为氢或烷基；

R⁵为氢或卤素；

2.权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐，其中

A表示氧原子；

D表示基团-CH-；

L为2个碳原子连接基，选自乙二基、乙烯二基和乙炔二基；

R⁴为氢；

R⁵为氢；

R⁶表示烷基、氰基、氨基羰基、氯或三氟甲基。

3.一种下式(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐：

其中

D表示基团-CH-；

L为2个碳原子连接基，选自乙二基、乙烯二基和乙炔二基；

R⁴为氢；

R⁵为氢；

R⁶表示烷基、氰基、氨基羰基、氯或三氟甲基。

4.一种制备权利要求1的化合物的方法，该方法包括在合适的Pd催化剂存在下，使下式(II)的化合物：

[A]与下式(IIIa)的试剂反应：

其中L和R²具有上述含义，R¹¹和R¹²可以为H或烷基，或者

[B]与下式(IIIb)的试剂反应：

其中L和R²具有上述含义，或者

[C]与下式(IIIc)的试剂反应：

其中L、R²和R¹¹具有上述含义。

5.用于治疗或预防疾病的权利要求1的化合物。

6.一种药物组合物，所述组合物包含权利要求1的化合物。

7.权利要求6的药物组合物，所述组合物另外还包含至少一种药学上可接受的载体或赋形剂。

8.权利要求6的药物组合物，所述组合物的形式适于口服或静脉内给药。

9.用于治疗或预防疾病的权利要求6的药物组合物。

10.一种制备权利要求7的药物组合物的方法，该方法包括将至少一种权利要求1的化合物与至少一种药学上可接受的载体或赋形剂混合，将所得混合物制成适于所述药物组合物的形式。

11.权利要求1的化合物在制备用于治疗或预防疾病的药物组合物中的用途。

12.权利要求11的用途，其中所述疾病是癌症。

13.一种治疗哺乳动物的疾病或病症的方法，该方法包括给予有需要的哺乳动物有效量的权利要求1的化合物。

14.权利要求13的方法，其中所述疾病或病症是癌症。

15.一种包装的药物组合物，所述包装的药物组合物包括容器和使用说明书，其中容器内装有权利要求7的药物组合物，使用说明书上注明所述药物组合物用于治疗哺乳动物的疾病或病症。