CN101181284A - 注射用伊曲康唑冻干组合物及制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种伊曲康唑注射用纳米混悬剂冻干组合物及其制备方法。在制备伊曲康唑磷脂复合物的基础上，经二氯甲烷或氯仿复溶后加入白蛋白水相中，采用高压均质纳米乳化，旋转薄膜蒸发脱除有机溶剂，使用冷冻干燥技术制备冻干粉。本发明可过滤灭菌，将其配制在药学上可接受的水性稀释剂中，重建后伊曲康唑纳米颗粒的粒径可小于0.3um，制成可供静脉注射的纳米混悬剂。它由以下成分组成：其中伊曲康唑与磷脂的比例为5∶1－1∶10。还包括白蛋白、表面活性剂、支架剂、渗透压调节剂、抗氧剂等其他注射剂添加剂。本发明的纳米混悬剂载药量大，制剂稳定性高，安全、低毒、没有静脉血管刺激性；制备方法简便易行，容易实现产品化。

Description

注射用伊曲康唑冻干组合物及制备方法

技术领域

本发明涉及医药技术领域，确切的说是一种注射用伊曲康唑冻干组合物及其制备方法。

背景技术

伊曲康唑(Itraconazole)为第二代三唑类合成广谱抗真菌药，该药在治疗曲霉菌、

全身性念珠菌以及脑膜炎隐球菌感染上取得了较好疗效。广泛用于浅表性和深部真菌感染，其抗菌谱广，耐受性好，主要代谢产物羟基伊曲康唑也有较高的抗真菌活性，随着广谱抗菌药的大量应用，骨髓或器官移植的开展，糖皮质激素与免疫抑制剂的广泛使用，各种导管介入治疗的普遍采用及艾滋病的出现，使得系统性真菌感染与日俱增。系统性真菌感染的特点是诊断困难，病情进展快，死亡率高，有效药物少，并且一般需要长期用药。市售伊曲康唑口服胶囊剂的生物利用度低，限制了它在难以吞咽(如患有粘膜炎)的重症患者及患有侵袭性感染、需尽快达到最低稳态药物谷浓度，且需维持高血药浓度的患者中的应用。

CTWO85/02767和美国专利4,764,604报道了一种通过将伊曲康唑与羟丙基倍他环糊精包合来增加伊曲康唑溶解度的方法。由伊曲康唑的环糊精包合物制备的注射液，现已上市。但价格昂贵，制备工艺复杂，且由于其大量使用羟丙基倍他环糊精作为增溶剂，不仅加剧了不良反应和毒副作用，同时也增大了制剂成本，运输和储藏不便，临床使用烦琐，不安全因素增加；目前可注射用抗真菌药物制剂十分缺乏，迫切需要开发安全、高效、稳定、可控的可注射的伊曲康唑制剂。

然而，伊曲康唑在水中的溶解度很低(约50ng/ml)，微溶于乙醇，临床剂量大，难以采用传统增溶手段实现大剂量静脉输注，限制了其注射制剂的发展。中国专利公开号1596897报道了一种伊曲康唑注射剂及其制备方法，中国专利公开号1559410报道了一种伊曲康唑软胶囊及其制备方法。中国专利公开号1739519报道了一种伊曲康唑注射乳剂及其制备方法；

中国专利公开号1969830报道了一种伊曲康唑脂质体及其制备方法；但是，伊曲康唑为油水两相皆不易溶解，临床用量每次200mg以上，且初始给药每天两次。伊曲康唑静脉注射用乳剂和脂质体的载药性能和稳定性不佳，药脂比太低。也存在增大了制剂成本，运输和储藏不便的问题。中国专利公开号1041655和1970557将伊曲康唑和硫酸及甲磺酸成盐试图通过改变的伊曲康唑成盐属性，同时也增加了开发成本和疗效不确定性。本发明者对伊曲康唑纳米混悬剂进行深入研究，该剂型是加入适宜表面活性剂的纳米级“纯药物”的稳定胶状分散体系，制备方法和稳定剂选择至关重要，至今未见专利和文献报道能过滤灭菌，用于静脉注射的伊曲康唑冻干纳米混悬剂。

发明内容

本发明的主要目的在于提供一种可直接用于静脉注射的制备方便、稳定性好、效果显著的伊曲康唑注射用冻干纳米混悬剂。

本发明重点考查伊曲康唑纳米混悬剂的两类生物相容性稳定剂，磷脂和白蛋白。得到一个惊奇的发现，磷脂和白蛋白与伊曲康唑都能形成非共价的复合物，存在较强的分子间相互作用。利用非共价复合物的解离和吸附平衡的原理，设计伊曲康唑纳米混悬剂的制备工艺，获得成功。

本发明要解决的第一个技术问题是提供注射用伊曲康唑冻干组合物的组成或质量比例：

伊曲康唑0.05-20％

磷脂0.1-40％

白蛋白2-90％

支架剂0-50％

表面活性剂0-5％

渗透压调节剂0-10％

pH调节剂0-0.2％

抗氧剂0-0.05％

其中所述注射用磷脂选自大豆磷脂、蛋黄卵磷脂、羟基卵磷脂、氢化磷脂、合成磷脂等一种或一种以上的混合物。伊曲康唑和磷脂的重量比例为5∶1-1∶10，所述的白蛋白为无病毒、无菌、无热原、无致免原性的合乎人体静脉输注质量标准的动物和人的血清白蛋白。本发明优选人血清白蛋白(HBA)，在临床常用于危重疾病的治疗。由于白蛋白具有表面活性剂作用和冻干支架剂作用，组合物中所含白蛋白的用量可以替代支架剂(冻干保护剂和复溶促进剂)。所述的支架剂为多糖或者多元醇，选自蔗糖、乳糖、葡糖糖、海藻糖、麦芽糖、甘露醇、山梨醇中的一种或其任意混合物。所述渗透压调节剂，选自葡萄糖、氯化纳、甘油、山梨醇、木糖醇中的一种或其任意混合物。渗透压调节剂也可以由复溶稀释的注射用糖水或生理盐水来提供。表面活性剂选自胆固醇，吐温80，泊洛沙姆188，去氧胆酸钠、聚氧乙烯蓖麻油中的一种或其任意混合物。pH调节剂选自盐酸、磷酸、枸橼酸或其碱金属盐、草酸或其碱金属盐、氢氧化钠、氢氧化钾、冰醋酸或其碱金属盐、磷酸盐、甘氨酸等药学上允许的盐中的一种或一种以上的混合物；抗氧剂选自维生素E、乙二胺四乙酸、乙二胺四乙酸的衍生物和甲磺酸去铁胺、盐酸半胱氨酸、维生素C、亚硫酸盐类中的一种或一种以上的混合物。

本发明要解决的第二个技术问题是提供伊曲康唑纳米混悬剂冻干组合物的制备方法，第一步是将伊曲康唑和一种或多种磷脂溶解在一种或多种选自诸如甲醇、乙醇、异丙醇、氯仿、四氯化碳和二氯甲烷等有机溶剂之中，本发明优选大豆卵磷脂和临床毒性小，溶剂残留少的二氯甲烷或氯仿；伊曲康唑和磷脂的重量比例为5∶1-1∶10，将混合液密闭搅拌反应1-4小时，控制反应温度在70℃以下，本发明优选40℃左右，两小时。将混合液导入真空旋转薄膜蒸发器的烧瓶内，优化控制温度低于60℃，旋转蒸发除去有机溶剂，形成均匀的伊曲康唑和磷脂复合物薄膜。

第二步，将上述白蛋白、表面活性剂、抗氧剂等配成水溶液，用渗透压调节剂调整pH在4-7，优选5-6之间。将伊曲康唑和磷脂形成的复合物薄膜用二氯甲烷或氯仿溶解，滴加入高速搅拌的水相中，添加适量乙醇，形成初乳。转入高压均质机在低于60℃的制备温度下，50-1500bar的压力下，一次或多次循环，进行纳米乳化。本发明优选乳剂油相和水相的体积比为1-10％，伊曲康唑在有机相中的浓度大于25mg/ml。本发明高压均质机压力优选200-900bar，保持低于50℃，3-10次循环。形成平均粒径小于500nm的纳米乳剂，优选平均粒径小于200nm，出现蓝白色乳光。

第三步，在真空旋转薄膜蒸发器上，控制温度低于60℃，旋转蒸发除尽有机溶剂和乙醇，本发明优选低于45℃，真空0.1-4小时除去溶剂。然后添加冻干保护(支架剂)或渗透压调节剂等，或以白蛋白来实现冻干保护和重组辅组剂的双重作用。接着采用过滤灭菌(0.22um膜滤过或无菌操作)，然后通过超滤浓缩药液，达到装样范围，在无菌条件下冻干24-48小时，封装制得成品。冻干组合物的最终含水量一般低于3％，有机溶剂残留合格。另外，本发明组合物中不含乙醇等有机溶剂和环糊精等添加剂，因此避免了毒性和刺激性反应。本发明伊曲康唑纳米混悬剂冻干组合物适合临床上应用。在使用前，可加入适量的无菌药用水稀释(例如注射用水、生理盐水、葡萄糖水等)，重建成供静脉滴注用的胶态分散体，本发明优选5％葡萄糖水作为重组稀释剂。参照市售制剂伊曲康唑环糊精包合注射剂的剂量和给药体积设计临床使用方案，优选200mg/20-100ml，静脉滴注或推注，或按临床疾病发展确定剂量，体积和次数。

本发明伊曲康唑注射用纳米混悬剂冻干组合物较之现有技术所具有的优点：1)由于本发明组合物不含环糊精和乙醇等有机溶剂，因此制成供静脉注射的注射剂时，避免了刺激反应，降低了毒副作用；纳米混悬剂粒径微小，不会堵塞毛细血管，载药量大，从而提高了安全性和疗效；2)本发明组合物含有磷脂和白蛋白作为稳定剂，白蛋白也是优良的冻干支架剂和复溶促进剂，因此制成的冻干产品具有良好的储藏稳定性和重组分散稳定性，从而可以方便使用，有利于药物的运输和储存。3)本发明制备工艺简单，成份单纯，所选用标准化制药设备，易于生产控制，有广阔的产业化前景。

附图说明

图1、实施例1制备得到的样品，5％葡萄糖输液复溶重建后的透射电镜照片。图中黑色不规则块是伊曲康唑的纳米混悬颗粒。

具体实施方式

为阐明本发明的特征，现在描述它的一些非限定性的实施例。但应将处方和条件的变化理解为说明书的精神和权利要求的范围。以下通过实施例形式的具体实施方式再对本发明的上述内容作进一步的详细说明，但不应就此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。在不脱离本发明上述技术思想情况下，根据本领域普通技术知识和惯用手段做出的相应替换或变更的修改，均包括在本发明的范围内。

实施例1

二氯甲烷为溶剂的制备过程

旋转薄膜蒸发器的圆底烧瓶中将伊曲康唑0.6g，大豆卵磷脂3g溶解在50ml二氯甲烷中，水浴控制反应温度40℃左右，旋转反应2小时。打开真空泵，减压旋转蒸发，在烧瓶上产生一层薄膜，然后减压真空干燥30分钟。称取人血清白蛋白6g，乙二胺四乙酸二钠0.03g共同溶于200ml蒸馏水中制成水相，用柠檬酸调节pH到5.6。将6ml二氯甲烷倒入旋转薄膜蒸发器的圆底烧瓶中，缓缓旋转溶解干燥后的薄膜，形成有机溶液。将有机相滴加入高速搅拌的水相中，形成白色乳剂，滴加3ml乙醇，搅拌均匀。将混合物初乳在高压均质机内(适当地灭菌)控制制备温度低于50℃，经50bar压力下循环1次，经200bar循环1次，经500bar循环3次，处理直至得到纳米乳剂，平均粒径小于200纳米，在无菌条件下将其导入旋转薄膜蒸发器的圆底烧瓶中，维持水浴温度40℃左右，启动真空泵，真空旋转蒸发2小时，除尽有机溶剂和乙醇。采用0.22滤膜过滤、除菌，除去不溶物和大颗粒，在无菌操作条件下，超滤浓缩，测定药物含量，达到分装要求后，灌入至25ml西林瓶。快速冷冻到-40℃/24小时，并冻干24小时。将得到含有5.24％(W/W)伊曲康唑的冻干疏松粉末，与0.5％葡萄糖水溶液重制形成伊曲康唑浓度为5mg/ml的溶液。得到平均粒径为0.150微米的纳米颗粒混悬液，4℃放置胶体稳定性＞12小时，达到临床混悬注射剂质量要求。注：说明书附图，图1、为实施例1制备得到的样品，复溶重建后的透射电镜照片。

实施例2

氯仿为溶剂的制备过程

旋转薄膜蒸发器的圆底烧瓶中将伊曲康唑0.6g，大豆卵磷脂3g溶解在50ml氯仿中，水浴控制反应温度40℃左右，旋转反应4小时。打开真空泵，减压旋转蒸发，在烧瓶上产生一层伊曲康唑和磷脂的复合物薄膜，然后减压真空干燥30分钟。称取人血清白蛋白3g，维生素C 0.03g，3g甘露醇，共同溶于200ml蒸馏水中制成水相，用柠檬酸调节pH到5.6。将5ml氯仿倒入旋转薄膜蒸发器的圆底烧瓶中，旋转溶解干燥后的薄膜，形成有机溶液。将有机相滴加入高速搅拌的水相中，形成白色乳剂，滴加2ml乙醇，高速搅拌制备初乳。将混合物初乳在高压均质机内(适当地灭菌)控制制备温度低于50℃，经200bar循环2次，经800bar循环2次，处理直至得到纳米乳剂，平均粒径小于200纳米，出现蓝白色乳光，近似透明液体。在无菌条件下将其导入旋转薄膜蒸发器的圆底烧瓶中，维持水浴温度40℃左右，启动真空泵，真空旋转蒸发2小时，除尽有氯仿和乙醇。采用0.22滤膜过滤、除菌，除去不溶物和大颗粒，在无菌操作条件下，旋转蒸发水分，浓缩样品，测定含量，达到分装要求后，灌入至25ml西林瓶。快速冷冻到-40℃/24小时，并冻干24小时。将得到含有4.02％(W/W)伊曲康唑的冻干疏松粉末，与0.5％葡萄糖水溶液重制形成伊曲康唑浓度为2mg/ml的溶液。得到的制剂具有0.180微米的纳米颗粒混悬液，pH＝5.6，4℃放置稳定性＞12小时，达到临床注射剂质量要求。

实施例3

氯仿为溶剂的制备过程

旋转薄膜蒸发器的圆底烧瓶中将伊曲康唑0.5g，大豆卵磷脂3g溶解在50ml氯仿中，水浴控制反应温度40℃左右，旋转反应4小时。打开真空泵，减压旋转蒸发，在烧瓶上产生一层伊曲康唑和磷脂的复合物薄膜，然后减压真空干燥30分钟。称取人血清白蛋白3g，维生素C 0.03g，共同溶于95ml蒸馏水中制成水相，用柠檬酸调节水相pH到5.6。将5ml氯仿倒入旋转薄膜蒸发器的圆底烧瓶中，旋转溶解干燥后的薄膜，形成有机溶液。边搅拌边将有机相与水相混合，同时滴加5ml乙醇。将混合物初乳使用探头超声，控制制备温度于50℃，经400W、超声5分钟形成白色乳剂，转入高亚均质机中，经800bar循环2次，处理直至得到纳米乳剂，平均粒径小于200纳米，出现蓝白色乳光，近似透明液体。在无菌条件下将其导入旋转薄膜蒸发器的圆底烧瓶中，维持水浴温度40℃左右，启动真空泵，真空旋转蒸发2小时，除尽有氯仿和乙醇。采用0.22滤膜过滤、除菌，除去不溶物和大颗粒，在无菌操作条件下，添加3g甘露醇。测定药物含量，旋转蒸发水分，浓缩达到分装要求后，灌入至25ml西林瓶。快速冷冻到-40℃/24小时，并冻干24小时。将得到含有2.87％(W/W)伊曲康唑的冻干疏松粉末，与0.5％葡萄糖水溶液重制形成伊曲康唑浓度为2mg/ml的溶液。得到的制剂具有0.180微米的纳米颗粒混悬液，pH＝5.6，4℃放置稳定性＞12小时，达到临床注射剂质量要求。

Claims (9)

1.注射用伊曲康唑冻干组合物，其特征在于伊曲康唑与磷脂的比例为5∶1-1∶10，其他组分包含以下组分和质量百分比：

伊曲康唑0.05-20％

磷脂0.1-40％

白蛋白2-90％

支架剂0-50％

表面活性剂0-5％

渗透压调节剂0-10％

pH调节剂0-0.2％

抗氧剂0-0.1％。

2.根据权利要求1所述的注射用伊曲康唑冻干组合物，其特征在于：采用5％葡萄糖输液或临床可接受的输液复溶重建，复溶重建后的胶体化纳米混悬体系中伊曲康唑纳米颗粒的粒径小于1微米，胶体体系稳定超过6小时。

3.根据权利要求1所述的注射用磷脂选自大豆磷脂、蛋黄卵磷脂、羟基卵磷脂、氢化磷脂、合成磷脂等一种或一种以上的混合物，所述的白蛋白为合乎人体静脉输注质量标准的动物和人的血清白蛋白。

4.根据权利要求1所述的pH调节剂选自盐酸、磷酸、枸橼酸或其碱金属盐、草酸或其碱金属盐、氢氧化钠、氢氧化钾、冰醋酸或其碱金属盐、磷酸盐、甘氨酸等药学上允许的盐中的一种或一种以上的混合物，所述的表面活性剂选自卵磷脂、吐温80、泊洛沙姆188、脱氧胆酸纳、聚氧乙烯蓖麻油中的一种或其任意混合物。

5.根据权利要求1所述的支架剂为多糖或者多元醇，选自蔗糖、乳糖、葡糖糖、海藻糖、麦芽糖、甘露醇、山梨醇中的一种或其任意混合物，所述的所述渗透压调节剂，选自葡萄糖、氯化纳、甘油、山梨醇、木糖醇中的一种或其任意混合物。

6.根据权利要求1所述的抗氧剂选自维生素E、乙二胺四乙酸、乙二胺四乙酸的衍生物和甲磺酸去铁胺、盐酸半胱氨酸、维生素C、亚硫酸盐类中的一种或一种以上的混合物。

7.权利要求1所述的注射用伊曲康唑冻干组合物的制备方法，包括如下步骤：

第一步，将伊曲康唑和磷脂溶解在有机溶剂1之中，将混合液密闭搅拌反应1-4小时，控制反应温度在70℃以下，将混合液导入真空旋转薄膜蒸发器的烧瓶内，控制温度低于70℃，旋转蒸发除去有机溶剂，形成均匀的伊曲康唑和磷脂的复合物薄膜，

第二步，将上述白蛋白、表面活性剂、抗氧剂等配成水溶液，用渗透压调节剂调整pH在4-7，将伊曲康唑和磷脂形成的复合物薄膜用二氯甲烷或氯仿溶解，将有机相与水相混合搅拌，添加适量乙醇，形成初乳，将初乳混合物转入高压均质机，压力50-1500bar，控制温度低于60℃，一次或多次循环，进行纳米乳化，形成平均粒径小于500nm的纳米乳剂，

第三步，通过在真空旋转薄膜蒸发器上，控制温度低于60℃，真空1-4小时旋转蒸发除尽有机溶剂和乙醇，所得混合物采用0.22um膜滤过，除菌，通过滤过除去注射剂限制的大颗粒和不溶物，然后在无菌操作条件下，浓缩药液，达到装样范围，分装后真空冻干，得到伊曲康唑纳米混悬剂冻干组合物的疏松粉末，封装。

8.根据权利要求7所述的方法，所述的有机溶剂1是一种或多种选自诸如甲醇、乙醇、异丙醇、氯仿、四氯化碳和二氯甲烷等其任意混合物。

9.根据权利要求1所述的注射用伊曲康唑冻干组合物在制备伊曲康唑注射剂中的应用，其特征在于加入选自氯化钠注射液或者葡萄糖注射液或临床可接受的等渗液或高渗输液，复溶重建制成可直接静脉滴注的制剂。

Images