CN101120650A - 一种海带的引种方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种海带的引种方法，它可以解决现有技术存在的选取叶片具有成熟孢子囊的藻体片段，进行长距离运输，容易发生腐烂、孢子放散，导致引种的失败等问题。本发明所采用的引种方法是：在引种地点，先将海带的成熟孢子囊叶，在控温实验室内经阴干刺激后，放入加入新鲜消毒海水的水槽中，控制水温在8～12℃，令其放散孢子，再将孢子经培育形成配子体，将附着配子体的苗帘放入低温密封袋中，低温保藏运输至目的地，海带苗帘上的配子体形态全部正常，成功率高，成活率接近100％。
Description
技术领域
本发明涉及一种海藻的引种方法，具体地说涉及一种海带的引种方法。
背景技术
海带是一种大型褐藻，具有较高的营养价值。不仅可供人类食用，而且也是食品、化学、医药、饲料及海藻工业的原料。海带藻体中含有多种陆生蔬菜中没有的植物化合物，其中所含的海带多糖，具有较强的增强免疫力和抗肿瘤功效，因而全世界对海带的开发利用正在呈上升趋势。我国自二十世纪50年代就开展了海带人工养殖生产，并最先成为水产养殖的支柱产业。但多年来，我国海带养殖品种只有一种，近50年的海带育苗和海带养殖生产，基本上是重复利用这个品种，由于缺乏选育复壮技术，导致品种严重退化、产量降低、病害频发。而国内和国外许多国家海带的自然资源分布较多，其中，日本北海道海区中自然分布着14种优良海带物种，如何从国内外成功引进新的海带优良物种，推广于生产或作为新的种质资源，应用于海藻遗传育种研究，是增加我国海藻养殖品种、提高海藻养殖品质产量的关键技术，海带新物种的引进，将会丰富我国海藻物种多样性，有利于我国海带养殖业的发展，同时海带养殖不仅可创造巨大经济效益，还可起到降低海区富营养化，维护海区生态平衡的效果。具有重大的生态效益、社会效益和经济效益。
海带长距离引种的传统方法是，在海带成熟季节，选取叶片具有成熟孢子囊的藻体片段，经低温保鲜保温包装，进行长距离运输。由于运输时间较长，很难保证藻体的新鲜程度，藻体易受环境条件改变而发生性状改变，中途会发生腐烂、孢子放散等情况，风险大，成功率低，经常导致引种的失败。
发明内容
本发明提供一种海带的引种方法，它可以解决现有技术存在的选取叶片具有成熟孢子囊的藻体片段，进行长距离运输，体积大不宜携带、藻体叶片容易发生腐烂、孢子中途放散死亡，导致引种的失败等问题。
为了达到解决上述问题的目的，本发明的方法按下述步骤进行：
(1)在引种海区，采集带有成熟孢子囊的海带叶片；
(2)运到室内，用海水清洗带有成熟孢子囊的海带叶片，经阴干刺激50-70分钟，放入盛有消毒海水的容器中，控制水温在8-12℃，令其孢子放散；
(3)当镜检海水中游孢子密度为5-15个/100X时，用纱布过滤孢子水，把黏液和杂物滤出，放入附苗器和载玻片，用以检查孢子附着发育情况和雌、雄配子体的分离；
(4)孢子附着密度控制在30-60个/100X，孢子附着后的附苗器和载玻片，放入控温光照培养箱中培育，光照强度控制在800-1200lx，每天控制光照8-14小时，水温控制在9-10℃，经培育7-9天后，形成配子体；
(5)形成配子体后的附苗器和载玻片，准备进行长距离运输，将附苗器分别装入塑料袋(2层)中，注入9-10℃的低温海水，海水以浸没苗帘为宜，用橡皮筋密封袋口；将载玻片放入试管中，注入低温海水后，用橡皮塞封口，与密封塑料袋一同放入保温箱中。将海水制成的冰块用塑料袋包裹严密后放到泡沫箱内的四周，密封箱盖防止水温上升；
(6)从引种区向目的地运输，途中观察冰块溶化状况和塑料袋水温，若冰块溶化应及时换冰，保持塑料袋中水温为5-7℃，直至运输到目的地；
(7)将运回的海带配子体苗帘放入低温室内培养，采用人工光源，光照强度控制在800-1200lx，每天光照8-14小时，水温控制在8-12℃，前期施肥，加入氮和磷，6-8天后，光照调至1800-2200lx，每日光照8-14小时，后期施肥，加入氮和磷，直到培育附苗器上的配子体形成孢子体。
在本发明的技术方案中，还具有以下技术特征：在引种海区，当海水温度到达16℃以上时，采集带有成熟孢子囊的海带叶片。
在本发明的技术方案中，还具有以下技术特征：所述的附苗器为棕帘附苗器，规格：20×15cm。
在本发明的技术方案中，还具有以下技术特征：途中打开塑料袋及试管塞进行气体交换。
在本发明的技术方案中，还具有以下技术特征：所述前期施肥保持氮浓度为1.5-2.5ppm，磷浓度为0.15-0.25ppm；后期施肥保持氮浓度为3.0-5.0ppm，磷浓度为0.3-0.5ppm。
在本发明的技术方案中，还具有以下技术特征：将附着在载玻片上的海带配子体，于显微镜下进行雌雄配子体的分离，分离出的雌、雄配子体分别放入加有消毒海水的烧瓶中，置于控温实验室进行雌、雄配子体单独培育，培育海水温度控制在7-9℃，用人工光源连续光照，控制光照强度为300-500lx、营养盐控制在氮浓度1.5-2.5ppm，磷浓度为0.15-0.25ppm，每月至少换水一次，约30-50天后，可形成肉眼可见的配子体克隆，达到长期保种之用。
由本发明的技术方案可以看出，本发明所采用的引种方法是：在引种地点，先将海带的成熟孢子囊叶，在控温实验室内经阴干刺激后，放入加入新鲜消毒海水的水槽中，控制水温在8-12℃，令其放散孢子，孢子附着量为40个/100X左右，附着孢子的苗帘和载玻片同时放入低温光照培养箱中，控制光强1000lx，每天光照12小时左右，水温9.5℃左右，一周后全部形成配子体。将附有海带配子体的苗帘装入塑料袋中，注入低温海水后将口扎紧，将玻片放入玻璃试管中注入低温海水后用橡皮塞封口，一同放入四周布满冰块的保温箱中，密封运输。途中两次打开保温箱换冰，打开塑料袋及试管透气，使水温始终保持在6℃左右，经48小时以上的长距离运输后，运抵目的地低温实验室。海带苗帘及载玻片上的配子体形态全部正常，无死亡现象。
本发明与现有技术相比具有以下优点和积极效果：海带的配子体，是海带生长史中的一种藻体阶段，在低温、弱光环境下可长期保存不死亡，其抵御恶劣环境能力比孢子体要高很多。利用海带配子体进行引种，简便、易行、稳定、成功率高，运输成活率可达到100％，是一种实用可行的引种方法。
具体实施方式
实施例1
(1)在引种海区，当海水温度到达16℃以上时，采集带有成熟孢子囊的海带叶片；
(2)运到室内，用海水清洗带有成熟孢子囊的海带叶片，经阴干刺激60分钟，放入盛有消毒海水的容器中，控制水温在8-12℃，令其孢子放散；
(3)当镜检海水中游孢子密度为10个/100X时，用纱布过滤孢子水，把黏液和杂物滤出，放入棕帘附苗器和载玻片；
(4)孢子附着密度控制在30-60个/100X，孢子附着后的附苗器和玻片，放入控温光照培养箱中培育，光照强度控制在1000lx，每天控制光照12小时，水温控制在9.5℃，经培育7天后，形成配子体；
(5)形成配子体后的附苗器和载玻片，准备进行长距离运输，将附苗器分别装入塑料袋中，注入低温海水9.5℃，将载玻片放入盛有低温消毒海水的试管中，用橡皮塞封口，与密封塑料袋一起放入保温箱中，将海水制成的冰块放到泡沫箱内的四周，密封箱盖防止水温上升；
(6)从引种区向目的地运输，途中观察冰块溶化状况和塑料袋水温，若冰块溶化应及时换冰，保持塑料袋中水温为6℃，直至运输到目的地；
(7)将运回的海带配子体苗帘放入低温室内培养，光照强度控制在1000lx，每天光照12小时，水温控制在8-12℃，前期施肥，加入氮和磷，保持氮浓度为2.0ppm，磷浓度为0.20ppm，6天后，光照调至2000lx，每日光照12小时，后期施肥，加入氮和磷，保持氮浓度为4.0ppm，磷浓度为0.4ppm，直到培育附苗器上的配子体形成孢子体幼苗。
将附着孢子体的附苗器挂到海区培育，至幼苗长度达到15～20cm左右，开始分苗培育种海带，翌年夏季种海带收获；至此海带引种获得成功。
实施例2
(1)在引种海区，当海水温度到达16℃以上时，采集带有成熟孢子囊的海带叶片；
(2)运到室内，用海水清洗带有成熟孢子囊的海带叶片，经阴干刺激50分钟，放入盛有消毒海水的容器中，控制水温在8-12℃，令其孢子放散；
(3)当镜检海水中游孢子密度为5个/100X时，用纱布过滤孢子水，把黏液和杂物滤出，放入棕帘附苗器；
(4)孢子附着密度控制在30-60个/100X，孢子附着后的附苗器，放入控温光照培养箱中培育，光照强度控制在800lx，每天控制光照14小时，水温控制在9.0℃，经培育8天后，形成配子体；
(5)形成配子体后的附苗器，准备进行长距离运输，将附苗器分别装入塑料袋中，注入低温海水9.0℃，将密封塑料袋放入保温箱中，将海水制成的冰块放到泡沫箱内的四周，密封箱盖防止水温上升；
(6)从引种区向目的地运输，途中观察冰块溶化状况和塑料袋水温，若冰块溶化应及时换冰，保持塑料袋中水温为5℃，直至运输到目的；
(7)将运回的海带配子体苗帘放入低温室内培养，采用人工光源，光照强度控制在800lx，每天光照14小时，水温控制在8-12℃，前期施肥，加入氮和磷，保持氮浓度为1.5ppm，磷浓度为0.15ppm，6天后，光照调至1800lx，每日光照14小时，后期施肥，加入氮和磷，保持氮浓度为3.0ppm，磷浓度为0.3ppm，直到培育附苗器上的配子体形成孢子体。
将附苗器挂到海区培育，至幼苗长度达到15cm左右，开始分苗培育种海带，翌年夏季种海带收获，至此海带引种获得成功。
实施例3
(1)在引种海区，当海水温度到达17℃以上时，采集带有成熟孢子囊的海带叶片；
(2)运到室内，用海水清洗带有成熟孢子囊的海带叶片，经阴干刺激70分钟，放入盛有消毒海水的容器中，控制水温在8-12℃，令其孢子放散；
(3)当镜检海水中游孢子密度为15个/100X时，用纱布过滤孢子水，把黏液和杂物滤出，放入棕帘附苗器；
(4)孢子附着密度控制在30-60个/100X，孢子附着后的附苗器，放入控温光照培养箱中培育，光照强度控制在1200lx，每天控制光照10小时，水温控制在10℃，经培育6天后，形成配子体；
(5)形成配子体后的附苗器，准备进行长距离运输，将附苗器分别装入塑料袋中，注入低温海水10℃，将密封塑料袋放入保温箱中，将海水制成的冰块放到泡沫箱内的四周，密封箱盖防止水温上升；
(6)从引种区向目的地运输，途中观察冰块溶化状况和塑料袋水温，若冰块溶化换冰，保持塑料袋中水温为7℃，直至运输到目的地；
(7)将运回的海带配子体苗帘放入低温室内培养，光照强度控制在1200lx，每天光照10小时，水温控制在8-12℃，前期施肥，加入氮和磷，保持氮浓度为2.5ppm，磷浓度为0.25ppm，6天后，光照调至2200lx，每日光照10小时，后期施肥，加入氮和磷，保持氮浓度为5.0ppm，磷浓度为0.5ppm，直到培育附苗器上的配子体形成孢子体。
将附苗器挂到海区培育，至幼苗长度达到15cm左右，开始分苗培育种海带，翌年夏季种海带收获，至此海带引种获得成功。
在上述实施例中，可以将附着在玻片上的海带配子体，于显微镜下进行雌雄配子体的分离，分离出的雌、雄配子体分别放入加有消毒海水的150ml三角烧瓶中，置于控温实验室进行雌、雄配子体单独培育，培育海水温度控制在8℃，用人工光源连续光照，光照强度控制在300～500lx、营养盐控制在N-2ppm，P-0.2ppm，每月至少换水一次，约30～50天后，可形成肉眼可见的配子体克隆，达到长期保种之用。
以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非是对本发明作其它形式的限制，任何熟悉本专业的技术人员可能利用上述揭示的技术内容加以变更或改型为等同变化的等效实施例。但是凡是未脱离本发明技术方案内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与改型，仍属于本发明技术方案的保护范围。
Claims (6)
1.一种海带的引种方法，其特征在于所述方法按下述步骤进行：
(1)在引种海区，采集带有成熟孢子囊的海带叶片；
(2)运到室内，用海水清洗带有成熟孢子囊的海带叶片，经阴干刺激50-70分钟，放入盛有消毒海水的容器中，控制水温在8～12℃，令其孢子放散；
(3)当镜检海水中游孢子密度为5～15个/100X时，用纱布过滤孢子水，把黏液和杂物滤出后，放入附苗器和载玻片；
(4)孢子附着密度控制在30～60个/100X，孢子附着后的附苗器和载玻片，放入控温光照培养箱中培育，采用人工光源光照强度控制在800-1200lx，每天控制光照8-14小时，水温控制在9-10℃，经培育7-9天后，形成配子体；
(5)形成配子体后的附苗器和载玻片，准备进行长距离运输，将附苗器分别装入塑料袋中，注入低温海水9-10℃，海水以浸没苗帘为宜，密封袋口；将载玻片放入试管中，注入低温海水后，封口，与密封塑料袋一同放入保温箱中，将海水制成的冰块用塑料袋包裹严密后放到泡沫箱内的四周，密封箱盖防止水温上升；
(6)从引种区向目的地运输，途中观察冰块溶化状况和塑料袋水温，若冰块溶化及时换冰，保持塑料袋中水温为5-7℃，直至运输到目的地；
(7)将运回的海带配子体苗帘放入低温室内培养，用人工光源将光照强度控制在800-1200lx，每天光照8-14小时，水温控制在8-12℃，前期施肥，加入氮和磷，4-8天后，光照调至1800-2200lx，每日光照8-14小时，后期施肥，加入氮和磷，直到培育附苗器上的配子体形成孢子体。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于在引种海区，当海水温度到达16℃以上时，采集带有成熟孢子囊的海带叶片。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于所述的附苗器为棕帘附苗器，规格：20×15cm。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于途中打开塑料袋及试管进行气体交换。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于所述前期施肥保持氮浓度为1.5-2.5ppm，磷浓度为0.15-0.25ppm；后期施肥保持氮浓度为3.0-5.0ppm，磷浓度为0.3-0.5ppm。
6.根据权利要求1至5中任意一项权利要求所述的方法，其特征在于将附着在载玻片上的海带配子体，于显微镜下进行雌雄配子体的分离，分离出的雌、雄配子体分别放入加有消毒海水的烧瓶中，置于控温实验室进行雌、雄配子体单独培育，培育海水温度控制在7-9℃，用人工光源连续光照，光照强度控制在300～500lx、营养盐控制在氮浓度1.5-2.5，磷浓度为0.15-0.25ppm，每月至少换水一次，约30～50天后，可形成肉眼可见的配子体克隆，达到长期保种之用。
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| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
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| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| C17 | Cessation of patent right | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20090930 Termination date: 20100907 |