CN101084911A - 七叶皂苷钠冻干乳剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

一种注射用七叶皂苷钠冻干乳剂，包括治疗有效量的七叶皂苷钠和载体，载体包括磷脂、乳化剂、水溶性辅料和冻干稳定剂。它的制备方法包括先将七叶皂苷钠制成内水相，加入含有磷脂的有机相中制成初乳，再加入外水相制成w/o/w的乳液，通过加入冻干保护剂冻干成固体。使用前，根据需要加注射用水，水合振荡后复原成乳剂。注射用七叶皂苷钠冻干乳剂的特点是七叶皂苷钠受到水溶性辅料中稳定剂和磷脂的保护，注入血管后，不直接与血管壁作用，大大减少了刺激作用，增加了临床应用的耐受性，而且药物本身稳定性增加。

Description

七叶皂苷钠冻干乳剂及其制备方法

技术领域

本发明属于药品制剂领域，具体讲涉及七叶皂苷钠的冻干乳剂及其制备方法。

背景技术

七叶皂苷钠是从七叶树科植物天师粟的干燥成熟种子中提取的一种含酯键的三萜皂苷。主要成分为七叶皂苷钠A和七叶皂苷钠B，具有消肿、抗渗出、抗炎、改善血液循环和增加静脉张力作用。七叶皂苷钠能促使机体提高ACTH和可的松血浆浓度，能促进血管壁增加PGF2α的分泌，能清除机体内自由基，从而起到抗炎、抗渗出，提高静脉张力，加快静脉血流，促进淋巴回流，改善血液循环和微循环的作用，并有保护血管壁的作用。七叶皂苷钠的半衰期仅为1.5小时，但因能促进机体增加ACTH、前列腺素F2a的分泌，使生物效应维持时间较长，静脉注射16小时后，仍有抗渗出、消肿作用。静脉给药，几乎没有生物转化，注射1小时后，有1/3剂量排泄，其中2/3通过胆汁排入肠道，1/3进入尿中。七叶皂苷与血浆蛋白结合率在90％以上。七叶皂苷钠主要用于脑水肿、创伤或手术所致肿胀，临床上还用于治疗脑梗塞、颅脑外伤、面神经炎、脑出血、I型肾病综合征等症。

七叶皂苷钠的不良反应主要有过敏反应、过敏性休克、肝损害、肾损害、心动过缓及静脉炎，肌肉注射疼痛难忍，静脉给药对血管刺激大，几乎所有患者在应用该药后出现不同程度的血管条索状红肿、疼痛，对药物较敏感的患者甚至用药当天即出现血管硬化。常见症状有局部疼痛伴有放射性疼痛，临床检查可见沿输液静脉上行5cm～50cm的皮肤暗红，伴有灼热感和放射性疼痛，血管弹性消失，呈条索状、有硬结、有的甚至造成静脉闭塞，有的患者因此终止治疗，给患者造成不可挽回的损失。李海生等报告应用七叶皂苷钠16例，用20mg七叶皂苷钠溶于5％葡萄糖250ml～500ml液体中，静脉滴注，10次为1疗程，其中5例于输液开始后5.4天发生静脉炎。临床表现为输液侧肢体手背、前臂皮肤肿胀，压之凹陷，有胀痛感觉，无明显发红。经局部热敷后，最短5天，最长10天，平均7天才肿胀消退(河北中西医结合杂志，1999，8(1)：102)。宋长惠等报道1例右侧丘脑出血并破入脑室患者，静脉滴注七叶皂苷钠20mg，用药1小时后，出现过敏性皮疹，患者全身皮肤弥漫性潮红、肿胀，可见粟粒大小密集的红色丘疹，压之褪色，伴瘙痒。停用七叶皂苷钠，给予抗过敏药物治疗，5天后过敏症状才基本消失(中国新药杂志，1999，8(8)：529)。临床上常用山莨菪碱湿敷预防静脉炎或者静脉注射1％盐酸利多卡因减轻静脉输入七叶皂苷钠引起的注射部位疼痛。为了减轻七叶皂苷钠的刺激性，降低其毒副作用，我们经过反复研究，开发了无刺激性型七叶皂苷钠冻干乳剂，由于将七叶皂苷钠包裹于内水相中，减少了药物对血管的刺激，在国内外均未见文献报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种无刺激性型且性质稳定、可采用现有技术工业化生产的七叶皂苷钠冻干乳剂，本发明先将七叶皂苷钠制成细分散的乳液，再将其冻干。

本发明的另一目的是提供了七叶皂苷钠冻干乳剂的制备方法。

本发明的七叶皂苷钠冻干乳剂的组分含量(以重量份计)为：

七叶皂苷钠：  0.1-10份

磷脂：        0.5-200份

乳化剂：      0.1-10份

水溶性辅料：  10-500份

冻干稳定剂：  10-200份

磷脂包括卵磷脂、大豆磷脂、大豆卵磷脂、脑磷脂、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰丝氨酸、二肉豆蔻酰卵磷脂、二棕榈酰磷脂酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰胆碱中的一种或几种的混合物。

乳化剂包括阿拉伯胶、大豆磷脂、卵磷脂、聚氧乙烯脂肪醇醚、泊洛沙姆、聚氧乙烯脂肪酸酯、聚乙烯醇、单硬脂酸甘油酯中的一种或它们几种的混合物。

水溶性辅料包括稳定剂、pH调节剂、等张剂、抗氧剂，其中稳定剂选自明胶、阿拉伯胶、海藻酸钠、β环糊精、羟丙基β环糊精、α环糊精、二葡糖基β环糊精、麦芽糖基β环糊精；PH调节剂选自盐酸、氢氧化钠、醋酸、磷酸盐、柠檬酸等，调节pH为4-9；等张剂选自甘油；抗氧剂选自维生素E、无水亚硫酸钠、维生素C、α-生育酚、α-醋酸生育酚。

冻干保护剂选自葡萄糖、乳糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇、蔗糖、海藻糖、右旋糖苷、聚乙烯吡咯烷酮等中的一种或几种的混合物。

有机溶剂可选自乙醇、丙酮、乙酸乙酯、二氯甲烷中的一种或它们几种的混合物；注射用油可选自任何种类的植物油，如：豆油、茶油、橄榄油、红花油中的一种或几种的混合物。

具体制备步骤如下：

(1)将七叶皂苷钠0.1-10份直接加入水中或加入含有稳定剂10-500份的水中制成内水相；

(2)将乳化剂0.1-10份、磷脂0.5-200份溶于5-500份有机溶剂或注射用油中，制成油相；

(3)将内水相加入有机相或油相中，用组织捣碎机(500-1000转/分)、磁力搅拌器(500-1000转/分)或电磁搅拌器(500-1000转/分)处理3分钟制得初乳；

(4)将初乳加入到含有乳化剂、等张剂、抗氧剂的外水相中，再通过高压匀质机(Averstin，C3)将乳液匀化，得到细分散的乳液，加入适量冻干保护剂，经冷冻干燥除去水分，得到干燥的七叶皂苷钠冻干乳剂。

将制得的冻干乳剂按需要量加水，水合振荡后复原成乳剂，用于注射给药。

冻干保护剂如甘露醇、海藻糖等随乳剂的冻结和结晶的生长，逐渐浓缩，并分布在乳滴的周围，阻止乳滴的融合，抑制冰晶的生长，从而减少冰晶对乳滴的损伤，可提高乳剂的玻璃化转变温度，并在一定的降温速率下，使乳剂实现部分玻璃化，避免了晶态固化，减少了在通常的平衡冻结方法中由于冰晶生长而引起的各种损伤；在乳剂冻结过程中，保护剂使溶液的粘性增加，从而弱化了水的结晶过程，达到了保护的目的。

药理试验：

1.对家兔耳缘静脉局部刺激试验：

试验方法：试验组及参照组各取家兔3只，分别在左右耳缘静脉部位各注射一定量药物和相应溶剂(按每公斤0.2ml试液)，即试验组为七叶皂苷钠冻干乳剂及空白冻干乳剂；参照品为注射用七叶皂苷钠及生理盐水，每天一次，连续三天。每次给药后次日观察注射部位刺激情况，并解剖动物取相应的耳缘静脉血管段(取耳最远段1cm处开始，每隔1cm切下0.5cm宽一段)，从远段开始分别标以A～F六段，以10％福尔马林固定，经乙醇逐级脱水，石蜡包埋，切片，作HE染色。镜检应无变性或坏死等刺激性反应。

试验结果：注射用七叶皂苷钠冻干乳剂应用于静脉注射时对家兔耳缘静脉血管刺激性试验，采用临床推荐的0.2mg/kg的剂量，每天一次，连续7天后，实验显示注射用七叶皂苷钠冻干乳剂对家兔耳缘静脉血管无明显的与药物相关的刺激反应；与参照品注射用七叶皂苷钠比较有明显差异。

2.过敏试验：

试验方法：豚鼠30只随机分成5组。第一组注射七叶皂苷钠冻干乳剂，第二组空白冻干乳剂，第三组阳性对照(0.5％鸡卵清蛋白)；第四组参比组注射用七叶皂苷钠，第五组参比组相应溶剂为生理盐水。每组隔日腹腔注射相应试液0.5ml/只，连续共致敏注射3次。然后每组再分成两个小组，分别在第三次致敏注药后14天及21天，从胫静脉注射相应试液1ml。在给药后15分钟内，观察动物不得有抓鼻、咳嗽、兴奋不安、呼吸困难、窒息死亡等症状。

试验结果：

分组	致敏量	激发量	14天攻击反应记录	21天攻击反映记录
					第一组注射用七叶皂苷钠冻干乳剂	0.5ml/只	1ml/只	静脉注射激发量注射液后15分钟内未见明显过敏反应	静脉注射激发量注射液后15分钟内未见明显过敏反应
第二组溶剂对照组(空白冻干乳剂)	0.5ml/只	1ml/只	静脉注射激发量注射液后15分钟内未见明显过敏反应	静脉注射激发量注射液后15分钟内未见明显过敏反应
					第三组阳性对照组0.5％卵清蛋白	0.5ml/只	1ml/只	三只豚鼠即时均分别出现咳嗽、抓鼻、步履不稳等现象，后即痉挛、抽搐，三只动物先后于2～3分钟内死亡	三只豚鼠即时均分别出现咳嗽、抓鼻若干次，并出现呼吸困难、后即痉挛、抽搐，三只动物先后于2～3分钟内死亡
第四组参比对照组注射用七叶皂苷钠	0.5ml/只	1ml/只	三只动物静脉注射激发量注射液后15分钟内未见明显过敏反应	三只动物静脉注射激发量注射液后15分钟内未见明显过敏反应
					第五组参比对照相应溶剂组生理盐水	0.5ml/只	1ml/只	三只动物静脉注射激发量注射液后15分钟内未见明显过敏反应	三只动物静脉注射激发量注射液后15分钟内未见明显过敏反应

试验结论：注射用七叶皂苷钠冻干乳剂注射液对豚鼠过敏试验中，当激发剂量给药后15分钟内未见明显过敏反应。参比组注射用七叶皂苷钠也未见过敏反应，两者相似。

有益效果

1.该冻干乳剂刺激性低，保证了用药的安全性，提高了机体耐受性。

2.该冻干乳剂保证制品在贮藏及运输过程中的稳定性，延长了产品的有效期，提高了药品的质量。

3.该冻干乳剂制备工艺简单，产品质量稳定，便于工业化生产。

具体实施方式

实施例1

将七叶皂苷钠200mg、β环糊精20g，溶于25ml水中搅拌、超声(请提供超声的条件)溶解制成内水相；取大豆磷脂4g溶解于55ml无水乙醇中，制成油相；将内水相加入油相中于20℃磁力搅拌得初乳，取泊洛沙姆0.5g、甘油2ml溶于150ml水中，加入初乳用组织捣碎机搅拌，制成复乳，减压蒸馏去乙醇，再通过高压匀质机将此复乳反复乳匀，得到细分散的乳液；加入20g甘露醇溶解，经冷冻干燥去除水分，得到干燥的七叶皂苷钠冻干乳剂。

实施例2

将七叶皂苷钠100mg、明胶4g、阿拉伯胶8g，溶于30ml水中搅拌制成内水相；取脑磷脂0.5g溶解于55ml无水乙醇中，制成油相；将内水相加入油相中于38℃磁力搅拌得初乳，取泊洛沙姆0.1g、甘油2ml溶于150ml水中，加入初乳用组织捣碎机搅拌，制成复乳，减压蒸馏去乙醇，再通过高压匀质机将此复乳反复乳匀，得到细分散的乳液；加入25g蔗糖溶解，经冷冻干燥去除水分，得到干燥的七叶皂苷钠冻干乳剂。

实施例3

将七叶皂苷钠100mg、β环糊精250g，溶于300ml水中搅拌、超声溶解制成内水相；取磷脂酰乙醇胺100g溶解于450ml无水乙醇中，制成油相；将内水相加入油相中于80℃磁力搅拌得初乳，取泊洛沙姆5g、甘油20ml溶于1000ml水中，加入初乳用组织捣碎机搅拌，制成复乳，减压蒸馏去乙醇，再通过高压匀质机反复乳匀，得到细分散的乳液；加入200g甘露醇溶解，经冷冻干燥去除水分，得到干燥的七叶皂苷钠冻干乳剂。

实施例4

将10g七叶皂苷钠、10g麦芽糖基β环糊精和45g二葡糖基β环糊精，溶于300ml水中搅拌、超声溶解制成内水相；取磷脂酰丝氨酸100g、二肉豆蔻酰卵磷脂100g溶解于450ml无水乙醇中，制成油相；将内水相加入油相中于60℃磁力搅拌器得初乳，取泊洛沙姆0.1g、甘油20ml溶于1000ml水中，加入初乳用组织捣碎机搅拌，减压去除乙醇，制成复乳，再通过高压匀质机将此复乳反复乳匀，得到细分散的乳液；加入100g右旋糖苷溶解，经冷冻干燥去除水分，得到干燥的七叶皂苷钠冻干乳剂。

实施例5

将七叶皂苷钠1g、羟丙基β环糊精50g，溶于50ml水中搅拌、超声溶解制成内水相；取卵磷脂4g溶解于90ml丙酮中，制成油相；将内水相加入油相中于磁力搅拌器上搅拌得初乳，取阿拉伯胶0.01g、甘油2ml溶于250ml水中，加入初乳用组织捣碎机搅拌，减压除去丙酮，制成复乳，再通过高压匀质机将此复乳反复乳匀，得到细分散的乳液；加入10g甘露醇和10g山梨醇溶解，经冷冻干燥去除水分，得到干燥的七叶皂苷钠冻干乳剂。

实施例6

将七叶皂苷钠0.1g，海藻酸钠50g溶于85ml水中搅拌、超声溶解制成内水相；取大豆卵磷脂10g溶解于120ml乙酸乙酯中，制成油相；将内水相加入油相中于高速搅拌器搅拌得初乳，加聚氧乙烯脂肪醇醚10g、醋酸5ml，加入到450ml水中，加入初乳用组织捣碎机搅拌，制成复乳，减压除去乙酸乙酯，再通过高压匀质机将此复乳反复乳匀，得到细分散的乳液；加入10g木糖醇、70g蔗糖溶解，经冷冻干燥去除水分，得到干燥的七叶皂苷钠冻干乳剂。

实施例7

将七叶皂苷钠0.2g，海藻酸钠20g溶于50ml水中搅拌、超声溶解制成内水相；取磷脂酰乙醇胺10g溶解于80ml乙酸乙酯中，制成油相；将内水相加入油相中于高速搅拌器搅拌得初乳，加聚氧乙烯脂肪醇醚3g、醋酸5ml，加入到250ml水中，加入初乳用组织捣碎机搅拌，减压除去乙酸乙酯，制成复乳，再通过高压匀质机将此复乳反复乳匀，得到细分散的乳液；加入10g木糖醇、10g蔗糖溶解，经冷冻干燥去除水分，得到干燥的七叶皂苷钠冻干乳剂。

实施例8

将七叶皂苷钠10g、羟丙基β环糊精250g，溶于300ml水中搅拌、超声溶解；二硬脂酰磷脂酰胆碱50g溶解于500ml豆油和25ml茶油中，制成油相；将油相与水相于65℃磁力搅拌得初乳，加5g大豆磷脂和5g卵磷脂，用二氯甲烷溶解，维生素C7mg、柠檬酸2mg溶于1000ml水中，加入初乳用高速搅拌机中搅拌，制成复乳，再通过高压匀质机将此复乳反复乳匀，得到细分散的乳液；加入50g甘露醇和150g右旋糖苷溶解，经冷冻干燥去除水分，得到干燥的七叶皂苷钠冻干乳剂。

实施例9

将七叶皂苷钠1.5g、羟丙基β环糊精95g，溶于250ml水中搅拌、超声溶解；二棕榈酰磷脂酰胆碱4g溶解于500ml橄榄油中，制成油相；将油相与水相于55℃磁力搅拌得初乳，聚氧乙烯脂肪酸酯5g、无水亚硫酸钠4mg、甘油2ml溶于1000ml水中，加入初乳用组织捣碎机搅拌，制成复乳，再通过高压匀质机将此复乳反复乳匀，得到细分散的乳液；加入55g葡萄糖、10g乳糖溶解，经冷冻干燥去除水分，得到干燥的七叶皂苷钠冻干乳剂。

实施例10

将七叶皂苷钠8g、β环糊精15g，溶于60ml水中搅拌、超声溶解；大豆磷脂0.5g，维生素E5mg溶解于90ml红花油中，制成油相；将油相与水相于75℃磁力搅拌得初乳，单硬脂酸甘油酯0.15g、a-生育酚6mg和a-醋酸生育酚10mg溶于10ml乙醇，加入250ml磷酸氢二钠缓冲液中，加入初乳用组织捣碎机搅拌，制成复乳，再通过高压匀质机将此复乳反复乳匀，得到细分散的乳液；加入50g甘露醇、50g聚乙烯吡咯烷酮溶解，经冷冻干燥去除水分，得到干燥的七叶皂苷钠冻干乳剂。

实施例11

将七叶皂苷钠100mg、β环糊精15g，溶于100ml水中搅拌、超声溶解；卵磷脂6g溶解于200ml无水乙醇中，制成油相；将油相与水相于60℃磁力搅拌得初乳，泊洛沙姆3g、甘油2ml溶于500ml水中，加入初乳用组织捣碎机搅拌，制成复乳，减压去除乙醇，再通过高压匀质机将此复乳反复乳匀，得到细分散的乳液；加入50g甘露醇溶解，经冷冻干燥去除水分，得到干燥的七叶皂苷钠冻干乳剂。

实施例12

将七叶皂苷钠200mg、羟丙基β环糊精25g，溶于50ml水中搅拌、超声溶解；大豆磷脂8g溶解于90ml无水乙醇中，制成油相；将油相与水相于25℃磁力搅拌得初乳，吐温8010ml、甘油2ml溶于200ml水中，加入初乳用组织捣碎机搅拌，减压去除乙醇，制成复乳，再通过高压匀质机将此复乳反复乳匀，得到细分散的乳液；加入15g甘露醇溶解，经冷冻干燥去除水分，得到干燥的七叶皂苷钠冻干乳剂。

实施例13

将七叶皂苷钠180mg、β环糊精20g，溶于100ml水中搅拌、超声溶解；卵磷脂10g溶解于200ml二氯甲烷中，制成油相；将油相与水相于55℃磁力搅拌得初乳，聚乙烯醇6g、甘油2ml溶于500ml水中，加入初乳用组织捣碎机搅拌，制成复乳，再通过高压匀质机将此复乳反复乳匀，得到细分散的乳液；减压去除二氯甲烷，加入35g甘露醇溶解，经冷冻干燥去除水分，得到干燥的七叶皂苷钠冻干乳剂。

实施例14

将七叶皂苷钠100mg、、吐温-80 7.5ml、甘油2ml，溶于80ml水中搅拌、超声溶解；卵磷脂1.0g、羟丙基-β-环糊精30g溶解于100ml无水乙醇中，将两相混合，常温下搅拌得初乳，0.5M氢氧化钠2ml加入200ml水中，高速剪切机搅拌，减压去除乙醇，再通过高压匀质机将乳液反复匀化，得到细分散的乳液；加入10g海藻糖和5g右旋糖苷，经冷冻干燥去除水分，得到干燥的七叶皂苷钠冻干乳剂。

实施例15

将七叶皂苷钠6g、维生素C 5ml、β环糊精20g，溶于20ml水中搅拌，柠檬酸调节pH5～7，二棕榈酰磷脂酰胆碱6g溶解于50ml无水氯仿中，两相混合搅拌，然后加入2％泊洛沙姆100ml，继续搅拌，减压去除氯仿得复乳，再通过高压匀质机将乳液匀化，加入8g甘露醇，经冷冻干燥去除水分，得到干燥的七叶皂苷钠冻干乳剂。

实施例16

将七叶皂苷钠0.1g、羟丙基β环糊精20g，甘油5ml溶于100ml丙酮中充分搅拌，加入卵磷脂8g，溶解。取泊洛沙姆3g溶解于50ml水中，两相混合于40℃磁力搅拌得初乳，泊洛沙姆3g，0.5M氢氧化钠2ml加入300ml水中，高速搅拌，减压去除丙酮，再通过高压匀质机将乳液反复匀化，得到细分散的乳液；加入8g甘露醇和8g葡萄糖溶解，经冷冻干燥去除水分，得到干燥的七叶皂苷钠冻干乳剂。

Claims (7)

1.一种以重量份数计由下述配方组成的七叶皂苷钠冻干乳剂：

七叶皂苷钠：0.1-10份

磷脂：      0.5-200份

乳化剂：    0.1-10份

水溶性辅料：10-500份

冻干稳定剂：10-200份。

2.根据权利要求1所述的七叶皂苷钠冻干乳剂，其特征在于磷脂包括卵磷脂、大豆磷脂、大豆卵磷脂、脑磷脂、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰丝氨酸、二肉豆蔻酰卵磷脂、二棕榈酰磷脂酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰胆碱中的一种或它们几种的混合物。

3.根据权利要求1所述的七叶皂苷钠冻干乳剂，其特征在于乳化剂选自阿拉伯胶、大豆磷脂、卵磷脂、聚氧乙烯脂肪醇醚、泊洛沙姆、聚氧乙烯脂肪酸酯、聚乙烯醇、单硬脂酸甘油酯中的一种或它们几种的混合物。

4.根据权利要求1所述的七叶皂苷钠冻干乳剂，其特征在于水溶性辅料包括稳定剂、pH调节剂、等张剂、抗氧剂，其中稳定剂选自明胶、阿拉伯胶、海藻酸钠、β环糊精、羟丙基β环糊精、α环糊精、二葡糖基β环糊精、麦芽糖基β环糊精；PH调节剂选自盐酸、氢氧化钠、醋酸、磷酸盐、柠檬酸，调节pH为4-9；等张剂选自甘油；抗氧剂选自维生素E、无水亚硫酸钠、维生素C、a-生育酚、a-醋酸生育酚。

5.根据权利要求1所述的七叶皂苷钠冻干乳剂，其特征在于冻干保护剂选自葡萄糖、乳糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇、蔗糖、海藻糖、右旋糖苷、聚乙烯吡咯烷酮中的一种或它们几种的混合物。

6.如权利要求1所述的七叶皂苷钠冻干乳剂的制备方法，由如下步骤组成：

(1)将七叶皂苷钠直接加入水中或加入含有稳定剂的水中制成内水相；

(2)将乳化剂、磷脂溶于适量有机溶剂或注射用油中，制成油相；

(3)将内水相加入有机相或油相中，用组织捣碎机、磁力搅拌器或电磁搅拌器制得初乳；

(4)将初乳加入到含有乳化剂、等张剂、抗氧剂的外水相中，再通过高压匀质机将乳液匀化，得到细分散的乳液，加入适量冻干保护剂，经冷冻干燥去除水分，得到干燥的七叶皂苷钠冻干乳剂。

7.根据权利要求6所述的七叶皂苷钠冻干乳剂的制备方法，其特征在于有机溶剂可选自乙醇、丙酮、乙酸乙酯、二氯甲烷中的一种或几种混合物；注射用油可选自任何种类的植物油，如：豆油、茶油、橄榄油、红花油中的一种或几种混合物。