CN101077063A - 三倍体单体牡蛎规模化培育方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及在已有四倍体牡蛎亲本的基础上发明一整套切合生产需要的三倍体单体牡蛎规模化培育的技术方法；它具有方法中所涉及的设施、设备及技术流程；技术方法包括亲贝培育、获卵和三倍体产生、幼体培育、无附着变态、下降流培养、上升流培养、室外暂养、潮间带筏式养成、商品牡蛎净化。本发明首次将三倍体技术与单体牡蛎养殖技术相结合培育出牡蛎新品种，同时可以规模化生产。三倍体单体牡蛎具有比现有牡蛎品种个体大、体内含糖量高、品质和口味较好等特点，且单体牡蛎外观等方面较原有品种具有难以比拟的优势。这些特点决定了三倍体单体牡蛎具有替代改良现有牡蛎品种的潜力，具有良好的市场前景。

Description

三倍体单体牡蛎规模化培育方法

技术领域

本发明涉及三倍体单体牡蛎，具体地说是一种三倍体单体牡蛎新品种培育和规模化生产方法。

背景技术

现有牡蛎一般以野生二倍体牡蛎为主，以近年来养殖量较大的太平洋牡蛎为例，太平洋牡蛎正常的养殖周期一般为二年，即在采苗后的第二年秋冬收获，但在第二年的春夏就已达到性成熟，在海区排放精卵，使牡蛎软体部消瘦成“水蛎子”，糖元含量降低，质量下降，影响了产品的市场销售。同时由于繁殖后体质衰弱及环境恶化，常诱发大规模的死亡和病害流行，严重影响了牡蛎养殖的经济效益和产业的可持续发展。三倍体技术是国际上一项先进的生物技术。通过技术手段，使正常的二倍体生物的染色体加倍，以达到倍化效果。经过倍化处理得到的三倍体品种具有不育性及许多优良性状，因其性腺不发育或发育得很小，获得的能量和物质大多被用于个体生长，所以其生长速度快、抗逆性强，可食用部分饱满美观，尤其重要的是没有性成熟后的精卵排放，品质稳定，可常年收获。

单体牡蛎即游离的无固着基的牡蛎。牡蛎具有群聚的生活习性，常多个牡蛎固着在一起，由于生长空间的限制，壳形极不规则，大大地影响了美观。群聚还造成牡蛎摄食竞争，影响其生长速度。传统的养殖方法多采用笨重的固着基，让稚贝固着其上生长。固着基的搬运需耗费大量的劳动力，且由于牡蛎在固着基上固着得很牢固，给牡蛎的收获增加了很大的困难。单体牡蛎一般采取筏式养殖方式，由于其游离性而不受生长空间的限制，因而壳形规则美观，大小均匀，易于放养和收获。在日本、韩国、欧洲、北美，单体牡蛎市场需求量巨大，因此，国际上单体牡蛎养殖量较大。

发明内容

本发明的目的在于提供一种品质稳定、壳形规则美观、大小均匀、易于放养和收获的三倍体单体牡蛎规模化培育方法。

为了实现上述目的，本发明采用的技术方案为：

三倍体单体牡蛎规模化培育方法，包括亲贝培育、获卵和三倍体产生、幼体培育、无附着变态、下降流培养、上升流培养、室外暂养、潮间带筏式养成、商品牡蛎净化。

具体为：

1)亲贝培育：包括二倍体和四倍体亲贝的培育；

2)获卵和三倍体产生：利用四倍体与二倍体母本杂交生产100％的三倍体；

3)幼体培育：受精卵孵出后，幼虫经18-20天即出现眼点和足，生长到眼点期幼虫；

4)无附着变态：首先滤出健康的眼点幼虫，然后可利用肾上腺素处理、贝壳粉加下降流设备实现无附着变态；实现三倍体的单体培育，幼虫变态后，生产长度达到0.3±0.05mm的稚贝；

所述肾上腺素处理，肾上腺素浓度：20mg/L海水，诱导处理1-2小时；

所述贝壳粉加下降流设备：选用粒径1mm的贝壳粉，投入下降流培养设备，放入眼点幼虫，使幼虫附着变态，并投饵培养；

所述下降流设备由槽体和筛绢网筛组成，筛绢网筛悬置于V形底槽体内，一进水管置于V形底槽体上部，并且于每一筛绢网筛上方的进水管均设置有加水阀，在槽体的一侧设置有溢水孔；

5)上升流培养：稚贝经过变态附着后进入上升流培养系统，培养15±2天，稚贝生长到2±0.05mm；

所述上升流可为室内中间暂养上升流或室外培养上升流；

所述室内中间暂养上升流设备置于水池中，由集水槽和筛绢网筛组成，筛绢网筛穿插在集水槽底部，在集水槽中部设置有通往水池外的排水孔，在集水槽上部设置有溢水孔；

所述室外培养上升流设备；由V形底槽体和筛绢网筛组成，槽体底部设有排污口，筛绢网筛悬置于V形底槽体内，在筛绢网筛上部设置有通往槽体外的溢水孔。

6)下降流培养：培养10±2天，稚贝生长到5±1mm；

7)室外暂养：稚贝培养到5mm左右后，转移到室外暂养池，在自然环境条件下培育30±3天，稚贝生长到1.5±0.2cm，后进行三倍体单体牡蛎养殖；

8)潮间带筏式养殖：养殖期8-10个月，个体生长到7～8cm即可收获。

亲贝培育过程中，二倍体牡蛎和四倍体牡蛎亲本的配比为10∶1上升流的水流速度400ml-800ml/秒，水体中饵料密度保持在5-15万细胞/ml；下降流的水流速度200-400ml/秒，水体中饵料密度保持在3-3.5万细胞/ml。

本发明具有如下优点：

本发明在已有四倍体牡蛎亲本的基础上发明一整套切合生产需要的三倍体单体牡蛎规模化培育的技术方法；首次将三倍体技术与单体牡蛎苗种培育技术相结合培育出牡蛎新品种，同时可以规模化生产。

三倍体单体牡蛎具有比现有牡蛎品种生长速度快、个体大、多糖含量高、品质和口味较好等特点，因为其性腺不发育或发育很小，不存在繁殖期大量排出精、卵影响牡蛎品质的情况，所以可以常年进行定单式的养殖和收获；单体牡蛎较现有牡蛎壳形规则、美观，壳深肉肥等明显的优点。这些特点决定了三倍体单体牡蛎有条件进入国内、国际高档牡蛎市场，替代改良现有牡蛎养殖品种，从而真正带动庞大的国内牡蛎养殖业实现产业升级。

附图说明

图1a为下降流结构立体示意图

图1b为下降流结构俯视图；

图2、室内中间暂养上升流结构示意图；

图3、室外上升流结构示意图；

图中：1为进水，2为网箱，3为溢水孔，4为出水，5为加水阀，6为排污口。

具体实施方式

1、亲贝培育

亲贝催熟培育大概需要35天时间，二倍体牡蛎和四倍体牡蛎亲本的配比为10∶1，一个二倍体母贝可产生约0.12亿粒可产生幼贝的D幼虫。

二倍体亲贝：选择壳长在10厘米以上的太平洋牡蛎分成单体，去除表面附着物，洗净，装在网箱或扇贝笼里，待稳定后再逐渐升温促熟，并加大投饵量。且应多次投放。饵料种类有小新月菱形藻、三角褐指藻、金藻、扁藻。由于牡蛎排粪便量大，应及时吸底(并补充新水)，为保持水质，每天倒池一次。

四倍体亲贝：产业化阶段采用二倍体和三倍体杂交或细胞融合技术获取四倍体，培育方法与二倍体相同；

四倍体获得方法：用物理或化学方法获得少量三倍体牡蛎，再利用三倍体牡蛎少量卵子与雄性二倍体牡蛎杂交受精，并抑制第一极体的排出，培养出成体四倍体牡蛎。

四倍体苗种的倍性需通过倍性检查是否成功获得四倍体商品苗种。

2、获卵及三倍体的产生：四倍体亲本与二倍体亲本杂交产生100％的三倍体稚贝。

利用太平洋牡蛎父本四倍体与二倍体母本杂交生产100％的三倍体，利用流式细胞仪倍性检测技术进行快速、准确、批量倍性检测。

三倍体苗种的倍性需通过倍性检查是否成功获得三倍体商品苗种。

3、幼虫培育：

受精卵孵出后，用浮选或虹吸法选取优质D形幼虫，并转移到新池中，早期投喂小型金藻，4天以后可加投其他大型种类如塔胞藻、扁藻等。每两天左右彻底倒池清底一次，并用漂白液消毒。幼虫培育期间，定期筛选去掉小个体群体(每6天一次)。在这样的条件下，幼虫经18-20天即出现眼点和足，准备附着，此阶段幼虫的成活率为75％左右。

4、无附着变态：

首先滤出健康的眼点幼虫，然后可分别采取三种方法进行无附着变态，实现三倍体的单体培育，幼虫变态后，生产长度达到0.3mm的稚贝，此阶段培育成活率为50％左右。

——肾上腺素处理：

在50升的塑料箱内，一次处理牡蛎眼点幼虫500万；加上肾上腺素诱导处理1-2小时后，滤出幼虫，转入下降流无附着变态系统中投饵培养。

肾上腺素EPI处理浓度：20mg/L海水，2000ml药物溶液可处理100万眼点幼虫。

——贝壳粉加下降流设备：

选用一定规格(粒径1mm)的贝壳粉，投入下降流培养设备，放入眼点幼虫，使幼虫附着变态，并投饵培养；

下降流(如图1a和1b所示)：上述EPI处理后的眼点幼虫放入下降流系统中的筛绢网筛内，密度500-700万个/m²一次可处理3200万眼点幼虫，眼点幼虫在下降流环境中变态，发育成稚贝，变态率可达到50％，3-4天可以全部变态完毕，移至上升流，该设备继续培育下一批眼点幼虫。

加入灰色PVC长条附着基：在三倍体单体牡蛎幼苗培育后期，为了充分利用水池，当剩余的浮游幼虫基本发育到眼点幼虫后，池中加入PVC长条附着基后，使其自然附着变态后，正常换水培养到一个半月后达1cm以上时，人工剥离直接进入中间暂养系统。

本项目以前二种方法为主，然后进入下一工序。

5、上升流系统培育

稚贝经过变态附着后进入上升流培养系统，培养15天左右，稚贝生长到2mm左右，此阶段稚贝的成活率为50％左右。

上升流：刚变态稚贝移入该系统，在上升水流环境下高密度培育。水流速度400ml-800ml/秒，通过水流供给饵料，水体中饵料密度保持在5-15万细胞/ml，上升流系统中筛绢网筛的目数不同，用以培育不同规格的苗种，密度保持在700-1400万个/m²，苗种生长迅速，培育60天可达0.5-1.5cm，共计1亿稚贝。

如图2和3所示，图2为室内中间暂养上升流；说明：往池中加水，水位提升，使水通过圆筛底部筛绢网流入圆筛中，溢入集水槽流出池外，借此形成上升流环境，单体牡蛎在圆筛中高密度培育。筛绢网目数不同用以培养不同规格牡蛎；

图3为室外上升流；说明：加水口采用动力泵，使槽内圆筛中产生上升流，该设施适用于室外虾池中间培育1cm苗种。

6、下降流系统培养

从上升流系统培养的稚贝进入下降流系统，培养10天左右，稚贝生长到5mm左右，此阶段稚贝的成活率为80％左右。

如图1a和1b所示，图1a和1b为下降流立体图、平面图；说明：直径800mm的圆筛放入V形底槽中，水加入圆筛通过圆筛底部筛绢网流出，在圆筛中形成下降流。眼点幼虫在此环境下变态发育成稚贝。

7、室外暂养

稚贝培养到5mm左右后，转移到室外暂养池，在自然环境条件下培育30天，稚贝生长到1.5cm左右，直接向养殖户销售。

8、潮间带筏式养殖

三倍体单体牡蛎适宜采用潮间带筏式养殖，养殖8个月，个体生长到7～8cm即可收获。

9、成品牡蛎进行粗加工出售。

Claims (7)

1.三倍体单体牡蛎规模化培育方法，其特征在于：

1)亲贝培育：包括二倍体和四倍体亲贝的培育；

2)获卵和三倍体产生：利用四倍体与二倍体母本杂交生产100％的三倍体；

3)幼体培育：受精卵孵出后，幼虫经18-20天即出现眼点和足，生长到眼点期幼虫；

4)无附着变态：首先滤出健康的眼点幼虫，然后可利用肾上腺素处理、贝壳粉加下降流设备实现无附着变态；实现三倍体的单体培育，幼虫变态后，生产长度达到0.25-0.35mm的稚贝；

5)上升流培养：稚贝经过变态附着后进入上升流培养系统，培养15±2天，稚贝生长到1.95-2.05mm；

6)下降流培养：培养8-12天，稚贝生长到4-6mm；

7)室外暂养：稚贝培养到5mm左右后，转移到室外暂养池，在自然环境条件下培育27-33天，稚贝生长到1.3-1.7cm，后进行三倍体单体牡蛎养殖；

8)潮间带筏式养殖：养殖期8-10个月，个体生长到7～8cm即可收获。

2.按照权利要求1所述的三倍体单体牡蛎规模化培育方法，其特征在于：亲贝培育过程中，二倍体牡蛎和四倍体牡蛎亲本的配比为10∶1。

3.按照权利要求1所述的三倍体单体牡蛎规模化培育方法，其特征在于：所述肾上腺素处理，肾上腺素浓度：20mg/L海水，诱导处理1-2小时。

4.按照权利要求1所述的三倍体单体牡蛎规模化培育方法，其特征在于：所述贝壳粉加下降流设备：选用粒径1mm的贝壳粉，投入下降流培养设备，放入眼点幼虫，使幼虫附着变态，并投饵培养。

5.按照权利要求1或4所述的三倍体单体牡蛎规模化培育方法，其特征在于：所述下降流设备由槽体和筛绢网筛组成，筛绢网筛悬置于V形底槽体内，一进水管置于V形底槽体上部，并且于每一筛绢网筛上方的进水管均设置有加水阀，在槽体的一侧设置有溢水孔。

6.按照权利要求1所述的三倍体单体牡蛎规模化培育方法，其特征在于：所述上升流可为室内中间暂养上升流或室外培养上升流；

所述室内中间暂养上升流设备置于水池中，由集水槽和筛绢网筛组成，筛绢网筛穿插在集水槽底部，在集水槽中部设置有通往水池外的排水孔，在集水槽上部设置有溢水孔；

所述室外培养上升流设备；由V形底槽体和筛绢网筛组成，槽体底部设有排污口，筛绢网筛悬置于V形底槽体内，在筛绢网筛上部设置有通往槽体外的溢水孔。

7.按照权利要求1所述的三倍体单体牡蛎规模化培育方法，其特征在于：所述上升流的水流速度400ml-800ml/秒，水体中饵料密度保持在5-15万细胞/ml；所述下降流的水流速度200-400ml/秒，水体中饵料密度保持在3-3.5万细胞/ml。

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