CN101073643B - 预防及治疗缺乳、少乳、妇科疾病的中药制剂、其制备方法和用途 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种治疗缺乳、少乳、乳腺增生病/征、子宫肌瘤和防治乳腺癌的中药、其制备方法及其用途，是将黄芪100-487重量份、党参100-487重量份加3-8倍水煎煮0.5-3小时至少两次后，将滤液浓缩得到水煮稠膏；将白术50-196重量份、当归50-196重量份、川芎49-146重量份加60％-90％的乙醇回流提取至少两次后，提取液经浓缩得到提取稠膏。将所得到的稠膏混合成混合稠膏后，按照常规中药制剂的制备方法加入辅料制成颗粒剂、胶囊、口服液、片剂等剂型；本发明的药物还可含有柴胡49-146重量份、王不留行(炒)73-146重量份；也可进一步含有漏芦82-146重量份、萱草根49-98重量份；本发明的中药具有益气养血、通络下乳；健脾益气、养血柔肝、活血通络、软坚散结，治疗缺乳、乳腺增生病/征、子宫肌瘤和防治乳腺癌的功效。

Description

预防及治疗缺乳、少乳、妇科疾病的中药制剂、其制备方法和用途

发明领域

本发明涉及一种治疗缺乳、少乳及预防和治疗妇科疾病的中药制剂、其制备方法和用途，特别是一种治疗妇女产后缺乳、少乳、治疗乳腺增生病/征、子宫肌瘤以及预防和治疗乳腺癌的中药制剂，及其制备方法和用途。

背景技术

母乳是婴儿理想的营养品，其营养价值高于任何代乳品，母乳在营养学、免疫学和心理学等方面都具有特殊的功能，对婴儿健康成长起着极重要的作用，母乳喂养较人工喂养有许多优点，且对产妇的产后恢复有良好作用，并可预防乳腺癌。遗憾的是临床上出现许多产妇分娩后少有或无乳汁的情况，给母乳喂养带来了极大的困难。现代医学则认为产妇分娩后，雌激素(E₂)突然下降，对垂体泌乳素(PRL)的抑制作用解除，乳腺开始泌乳，使乳汁排出。据此，已经开发了多种产后催乳的中药。其中，本发明的发明人发明的，申请号为021294135、CN01127576.6的中国专利中公开的中药制剂，催乳效果明显，但其存在着服用量大，制剂内用糖量多，服用不方便的缺点。

乳腺增生症又称“乳腺结构不良”，在病理上表现为小叶导管和腺泡增多，间质结缔组织增生等而形成一系列病理改变，导致乳腺内部供血变化。为成年妇女常见病、多发病，近年认为，乳腺增生症是乳腺癌发病的重要因素之一，尤其是乳腺增生症非典型增生阶段，为乳腺癌的癌前病变。目前，治疗乳腺增生的中医中药有：乳僻消、乳块消、乳安片、百消丹、逍遥丸、小金丹等。西药有：5％碘化钾、溴隐停、丹那唑。但中药存在着服药周期长，效果不佳的缺陷，西药的副作用较大。

子宫肌瘤(uterine myoma)医学上被称为子宫平滑肌瘤，是女性生殖器官中最常见的良性肿瘤，也是人体中常见的肿瘤之一。子宫肌瘤主要由子宫平滑肌细胞增生而形成。其中有少量结缔组织纤维仅作为一种支持组织而存在。子宫肌瘤的临床表现常随肌瘤生长的部位，大小，生长速度，有无继发变性及合并症等而异。现有的中药的服药期长，疗效慢，治疗子宫肌瘤的药物主要是西药。虽然有若干项中国专利申请涉及治疗子宫肌瘤的中药制剂，但市场上使用较多的仅有修正药业、吉林首席药业等生产的妇康片。

乳腺癌(mammary carcinoma)是人类最常见的一种恶性肿瘤，也是女性主要恶性肿瘤之一。女性的乳房组织与女性的内分泌、雌激素有直接关连。男性患乳腺癌的机会只有女性患者的百分之一。女性乳房的发育是受雌激素的影响。已经证实雌酮与雌二醇对乳腺癌有影响。乳房的恶性肿瘤绝大多数系源于乳腺的上皮组织(乳癌)，少数可源自乳房的各种非上皮组织(各种肉瘤)，偶可见到混合性的癌肉瘤。研究表明，绝经前和绝经后雌激素是刺激发生乳腺癌的明显因素。此外，遗传因素、饮食因素、外界理化因素以及某些乳房良性疾病与乳癌的发生有一定关系。

人民卫生出版社出版的高等医药院校教材“妇产科学”第三版第282页指出：子宫肌瘤确切的发病因素尚不明，......提示子宫肌瘤的生长和发生与雌激素有关，雌激素能使肌细胞增生肥大......所以子宫肌瘤的发生可能是该部位的组织选择性的保留有浓度较高的雌激素，也可能是肌瘤局部的代谢能力不足，以致雌二醇浓度过高......

沈阳出版社出版的中国医学家经验文库的“临床普通外科学”的第415页指出，动物实验证明，用较大剂量的雌激素可引起乳腺发生囊性改变，......”，该文同时指出，乳腺病“甚至被认为是癌(乳腺癌，本案发明人注)变得危险因素之一”。北京人民军医出版社出版的临床常见病症诊疗丛书“乳腺疾病的诊断与治疗”第97页指出，乳腺增生可能与......部分乳腺组织对雌激素作用过分敏感有关......有学者认为是一种癌变得前期病变。

国家科学技术学术著作出版基金资助的北京科学技术文献出版社出版的“临床生殖内分泌学(女性与男性)”的第527页指出：哺乳并闭经的妇女其循环的雌二醇水平......与正常周期妇女......相比明显的低。......低雌二醇状态可产生一些症状......某些依赖于雌二醇的妇科疾病，如......子宫肌瘤是有利的。

通过上面的研究表明，本发明所述的缺乳少乳、乳腺增生症、子宫肌瘤以及乳腺癌产生的机理在低雌激素的状态下是可以得到缓解的，又及，CN02129413.5的提取方法，难以将药物的有效成分充分提取，而且得到的药物虽然指出了可以将所述配方用于各种剂型，但是，其没有具体提及片剂，因此，本发明所述的中药制剂在催乳方面主要是针对片剂的验证和实验，对于其它适应症则不局限于此，有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种治疗妇女产后缺乳、少乳，预防及治疗乳腺增生病/征、子宫肌瘤或乳腺癌的中药制剂，该中药具有疗效明确、服药周期相对较短、副作用小、服用方便的优点。

本发明的另一目的在于提供通过服用本发明所述的中药，适宜的降低雌激素水平，以便达到治疗和改善缺乳、少乳，乳腺增生病/征或子宫肌瘤以及防治乳腺癌的药物的用途。

本发明的第三个目的在于提供上述中药的制备方法，该方法通过水提和醇提，有效提取了各中药药材中的有效成分并制备成适宜给药的各种剂型。

本发明所述的中药，至少包括：

黄芪100-487重量份

党参100-487重量份

白术50-196重量份

当归50-196重量份

川芎49-146重量份，

所述中药通过如下工艺制备：

①将黄芪、党参加水煎煮至少两次，将滤液浓缩得到水煮稠膏，

②将白术、当归、川芎加60％--90％的乙醇回流提取至少两次，提取液经浓缩得到提取稠膏，

③将水煮稠膏1-5重量份和提取稠膏1-5重量份混合得混合稠膏，然后加入辅料制成各种制剂。

其中，黄芪的主要成分为黄芪甲苷、黄酮及黄芪多糖，均为活性成分，除黄酮外均能溶于水及中度醇，可采用水提。党参具有补中益气，健脾益肺的作用，含有党参苷、菊糖、果糖等一般水溶性成分，也可采用水作溶媒。

白术主要含挥发油，挥发油中主含苍术酮、苍术醇等，均易溶于醇难溶于水中。当归主含挥发油，油中成分能增加血流量，改善外周循环。川芎含川芎嗪、藳本内酯、阿魏酸等均为理气活血的主要成分，除阿魏酸能溶于水又能溶于醇外，其它均只能溶于醇。因此，选用醇作溶媒来提取此三种中药中的有效成份，能够较现有技术更充分地提取出有效成分。

本发明的中药还包括：

柴胡60-146重量份

王不留行(炒)60-146重量份

所述的水煮稠膏为将黄芪、党参、柴胡、王不留行加水煎煮至少两次，将滤液浓缩得到稠膏。

其中，王不留行具有行血、通行、下乳的作用，此成分在水及醇中均能溶解，故可使用水作溶媒来提取。

进一步，本发明的中药还包括：

漏芦50-146重量份

萱草根49-98重量份

所述的水煮稠膏为将黄芪、党参、柴胡、王不留行、漏芦、萱草根加水煎煮至少两次，将滤液浓缩得到。

其中，漏芦具有清热解毒，消肿下乳的作用。含有脱皮甾酮，此成分在水及中度醇中均能溶解。萱草具有清热解毒，利尿消肿的作用，含天门冬素、甾类等。故可采用水作溶媒来提取上述两种中药中的有效成分。

优选本发明的中药包括：

黄芪146-250重量份

党参146-300重量份

白术98-130重量份

当归120-160重量份

川芎60-98重量份

柴胡60-146重量份

王不留行(炒)60-146重量份

漏芦50-146重量份

萱草根49-98重量份。

更优选：

黄芪146重量份

党参146重量份

白术98重量份

当归146重量份

川芎98重量份

柴胡98重量份

王不留行(炒)98重量份

漏芦98重量份

萱草根73重量份。

其特征在于所述中药是通过如下工艺制备的：

(1)将黄芪、党参、柴胡、王不留行、漏芦、萱草根加水煎煮至少两次，将滤液浓缩得到水煮稠膏；

(2)将白术、当归、川芎加60％--90％的乙醇回流提取至少两次，提取液经浓缩得到提取稠膏；

(3)将1-5重量份水煮稠膏和1-5重量份醇提取稠膏混合得混合稠膏，然后加入辅料制成各种剂型的制剂。

本发明的中药的制备过程中还包括将稠膏干燥得到干膏，再按照常规中药制剂的制备方法加入辅料制成适宜给药的各种制剂剂型。

其中，在加水煎煮时水的加入量为药材量的3-8倍，在乙醇提取过程中乙醇的加入量为药材量的2-8倍，时间均为0.5-3小时，煎液和提取液过滤后减压浓缩。

优选的，在加水煎煮时水的加入量为药材量的4-6倍，在乙醇提取过程中乙醇的加入量为药材量的3-5倍，时间均为0.5-1.5小时，煎液和提取液过滤后减压浓缩，浓缩条件为50-80℃，0.07-0.09Mpa，滤液浓缩至相对密度为1.20-1.30g/ml的稠膏。

加水煎煮后合并煎液，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1.10-1.40g/ml的稠膏。

在醇提后合并提取液，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1.10-1.40g/ml的稠膏。

减压浓缩也可以在加热的条件下进行，优选的浓缩条件为40-90℃，0.05-0.1Mpa。

醇提中，浓缩前可对乙醇进行回收，回收乙醇优选在减压条件下进行，更优选在加热下回收乙醇，条件为40-90℃，0.05-0.1Mpa，最优选为在50-80℃，0.07-0.09Mpa条件下减压回收乙醇。

干燥可以采用现有的干燥技术，如真空干燥、通风干燥或加热干燥。优选为真空干燥。

本发明所得到的上述稠膏或干膏可以按照常规中药制剂的制备方法制成颗粒剂、胶囊、口服液、片剂等剂型。

本发明的制剂优选片剂，在用稠膏制备片剂时，由于本发明为全浸膏片，粘度较大，制粒困难。试验发现压片后硬度大，崩解时限很难达到要求，因此需加入稀释剂降低药粉的粘度；同时加入适量润滑剂，增加药粉的流动性，从而减少崩解时间。

在单独加入稀释剂的条件下，片剂的片面硬度达不到包薄膜衣的要求；加入适量粘合剂如羧甲基纤维素钠，实验证明由于其粘性大，压片后硬度虽然增加了，达到了包薄膜衣的要求，但崩解时间超标，所以需加入适量的崩解剂。这样，制粒压片后，基片的硬度符合包薄膜衣的条件，且包衣后崩解时间达到标准要求。

综上所述，选择适量稀释剂、崩解剂和润滑剂作为辅料。

所述片剂包括如下成分：

混合稠膏3-10重量份

稀释剂或吸收剂1-10重量份

崩解剂4-16重量份

润滑剂0.1-1重量份

其中的混合稠膏为水煮稠膏1-5重量份、醇提取稠膏1-5重量份混合所得的混合物，所述片剂的制备方法为：将上述混合稠膏与稀释剂或吸收剂混合、干燥、粉碎、过筛，加入崩解剂并充分混合后制粒、整粒，加入润滑剂，混匀后压成片重为0.65g的片剂基片。

片剂也可以采用混合干膏制备，采用混合干膏制备时，所述片剂中包括混合干膏1-8重量份，其他成分、含量及制备方法与上述配方相同。

片剂制备中所用的稀释剂或吸收剂优选为淀粉、糊精、糖粉或乳糖，崩解剂优选为微晶纤维素或干燥淀粉等，润滑剂优选为硬脂酸镁、滑石粉等。

片剂的制备过程中，优选在40-70℃下减压干燥，粉碎后过60-150目筛。更优选为，片剂在55-65℃下减压干燥，粉碎后过90-110目筛。

如果需要，本发明的片剂还可以进一步在其表面包衣，包衣可以采用现有技术中通用的成分及方法进行，优选采用欧巴代，用量为2-12重量份。

上述重量份可以是钱、克、千克、公斤、吨等计量单位。

CN02129413.5中的制备方法为水提，虽然水提消除了醇沉给生产工艺带来的成本增加及不安全因素，但由于白术中的主要成分为挥发油-苍术酮、苍术醇；当归中的主要成分阿魏酸在中度醇中的溶解性大于水中的溶解性；川芎中的主要成分川芎嗪、藁本内酯、阿魏酸中，除阿魏酸外，其他都只能溶于醇，因此，仅用水提的工艺制备，不能够将中药原药中的有效成分充分提取。本发明在大量实验的基础上，通过对比证明，黄芪、党参、柴胡、王不留行、漏芦、萱草根中的有效成分大都溶于水，采用水提和醇提的工艺其差别并不明显，因此，黄芪、党参、柴胡、王不留行、漏芦、萱草根仍然采取水提的方法。本发明采用中度醇提取白术、当归、川芎中的有效成分，并简化了原水提工艺条件，有效提取了中药原药中的有效成分，改变了制剂中的成分，提高了药效。通过对样品的质量检测和加速稳定性实验，结果表明，制剂的稳定性良好。

下面结合具体实施例详细描述本发明，所述实施例用于理解和描述本发明，而不是限制本发明。

具体实施方式

下面是本发明各种中药制剂的制备方法，所得制剂通用名为乳欣片。

实施例1

将黄芪100克，党参487克，柴胡100克，王不留行(炒)85克，漏芦130克，萱草根98克加水3公斤煎煮1小时，煎煮4次。煎煮后合并煎液，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1.10g/ml的稠膏，冷却至室温备用。

将白术120克，当归100克，川芎110克加60％乙醇0.99公斤回流提取3小时，共提取2次。提取后合并提取液，过滤，滤液于0.05Mpa，90℃下减压回收乙醇、减压浓缩至相对密度为1.10g/ml的稠膏，冷却至室温备用。

将上述两种稠膏按1∶5重量比例混合，取所得混合稠膏3公斤与稀释剂3公斤混合，于70℃下减压干燥、粉碎过60目筛，加入崩解剂16公斤并充分混合后制粒、整粒，加入润滑剂0.5公斤，混匀后压制成片重为0.65g的基片，取欧巴代10公斤，包衣即得片剂。

实施例2

将黄芪166克，党参300克，柴胡60克，王不留行(炒)73克，漏芦102克，萱草根80克加水3.9公斤煎煮0.5小时，煎煮3次。煎煮后合并煎液，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1.30g/ml的稠膏，冷却至室温备用。

将白术196克，当归50克，川芎100克加90％乙醇1.73公斤回流提取1小时，共提取3次。提取后合并提取液，过滤，滤液回收乙醇后减压浓缩至相对密度为1.30g/ml的稠膏，冷却至室温备用。回收乙醇为在0.06Mpa，70℃下减压。

将上述两种稠膏按2∶3重量比例混合，取所得混合稠膏5公斤与稀释剂10公斤混合，于40℃下减压干燥、粉碎过90目筛，加入崩解剂4公斤并充分混合后制粒、整粒，加入润滑剂0.3公斤，混匀后压制成片重为0.65g的基片，包衣即得片剂。

实施例3

将黄芪250克，党参100克，柴胡146克，王不留行(炒)73克，漏芦50克，萱草根49克加水5.76公斤煎煮2小时，煎煮2次。煎煮后合并煎液，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1.50g/ml的稠膏，冷却至室温备用。

将白术130克，当归120克，川芎146克加70％乙醇3.168公斤回流提取0.5小时，共提取4次。提取后合并提取液，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1.50g/ml的稠膏，冷却至室温备用。并于0.1Mpa，40℃下减压回收乙醇。

将上述两种稠膏5∶1重量比例混合，采用实施例1的方式制备成片剂。

实施例4

将黄芪300克，党参195克，柴胡120克，王不留行(炒)60克，漏芦146克，萱草根80克加水7.2公斤煎煮2小时，煎煮2次。煎煮后合并煎液，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1.250g/ml的稠膏，冷却至室温备用。

将白术150克，当归196克，川芎49克加70％乙醇3.16公斤回流提取0.5小时，共提取4次。提取后合并提取液，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1.250g/ml的稠膏，冷却至室温备用。并于0.1Mpa，40℃下减压回收乙醇。

参照实施例1的方法制为片剂。

实施例5

将黄芪400克，党参200克，柴胡60克，王不留行(炒)146克，漏芦120克，萱草根55克加水5.89公斤煎煮3小时，煎煮2次。煎煮后合并煎液，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1.30g/ml的稠膏，冷却至室温备用。

将白术50克，当归160克，川芎60克加80％乙醇1.62公斤回流提取2小时，共提取2次。提取后合并提取液，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1.30g/ml的稠膏，冷却至室温备用。并于0.08Mpa，60℃下减压回收乙醇。

将上述两种稠膏按3∶4重量比例混合，取所得混合稠膏7公斤与稀释剂8公斤混合，于65℃下减压干燥、粉碎过100目筛，加入崩解剂8公斤并充分混合后制粒、整粒，加入润滑剂0.1公斤，混匀后压制成片重为0.65g的基片，取欧巴代4公斤，包衣即得片剂。

实施例6

将黄芪146克，党参146克，柴胡98克，王不留行(炒)98克，漏芦98克，萱草根73克加水1.98公斤煎煮1小时，煎煮4次。煎煮后合并煎液，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1.40g/ml的稠膏，冷却至室温备用。

将白术98克，当归146克，川芎98克加60％乙醇1.03公斤回流提取3小时，共提取2次。提取后合并提取液，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1.40g/ml的稠膏，冷却至室温备用。并于0.05Mpa，90℃下减压回收乙醇。

将上述两种稠膏按1∶1重量比例混合，取所得混合稠膏9公斤与稀释剂5公斤混合，于50℃下减压干燥、粉碎过150目筛，加入崩解剂14公斤并充分混合后制粒、整粒，加入润滑剂0.8公斤，混匀后压制成片重为0.65g的基片，取欧巴代12公斤，包衣即得片剂。

实施例7

将黄芪487克，党参400克加水4.44公斤煎煮0.5小时，煎煮3次。煎煮后合并煎液，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1.150g/ml的稠膏，冷却至室温备用。

将白术110克，当归98克，川芎90克加90％乙醇1.49公斤回流提取1小时，共提取3次。提取后合并提取液，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1.150g/ml的稠膏，冷却至室温备用。并于0.06Mpa，70℃下减压回收乙醇。

参照实施例1的方法，按照常规方法制备片剂。

实施例8

将黄芪487克，党参146克加水5.06公斤煎煮2小时，煎煮2次。煎煮后合并煎液，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1.20g/ml的稠膏，冷却至室温备用。

将白术120克，当归98克，川芎100克加70％乙醇2.544公斤回流提取0.5小时，共提取4次。提取后合并提取液，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1.20g/ml的稠膏，冷却至室温备用。并于0.1Mpa，40℃下减压回收乙醇。

参照实施例2的方法制为片剂。

实施例9

将黄芪400克，党参487克加水5.06公斤煎煮2小时，煎煮2次。煎煮后合并煎液，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1.33g/ml的稠膏，冷却至室温备用。

将白术98克，当归196克，川芎146克加70％乙醇2.544公斤回流提取0.5小时，共提取4次。提取后合并提取液，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1.33g/ml的稠膏，冷却至室温备用。并于0.1Mpa，40℃下减压回收乙醇。

参照实施例5的方法制为片剂。

实施例10

将黄芪160克，党参200克，柴胡60克，王不留行(炒)100克加水3.12公斤煎煮3小时，煎煮2次。煎煮后合并煎液，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1.35g/ml的稠膏，冷却至室温备用。

将白术100克，当归100克，川芎90克加80％乙醇2.03公斤回流提取2小时，共提取2次。提取后合并提取液，过滤，于0.08Mpa，60℃下减压回收乙醇，并减压浓缩至相对密度为1.35g/ml的稠膏，冷却至室温备用。

参照实施例5的方法制为片剂。

实施例11

将黄芪146克、党参146克、柴胡98克、王不留行(炒)98克、漏芦98克、萱草根73克加水3.30公斤煎煮0.5小时，煎煮3次。煎煮后合并煎液，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1.35g/ml的稠膏，冷却至室温备用。

将白术98克、当归146克、川芎98克加90％乙醇0.684公斤回流提取1小时，共提取3次。提取后合并提取液，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1.35g/ml的稠膏，冷却至室温备用。并于0.06Mpa，70℃下减压回收乙醇。

参照实施例6的方法制为片剂。

实施例12

按照实施例6的方法制备两种稠膏，再按照中药制剂的一般方法分别制备颗粒剂、口服液、胶囊等其它中药常用剂型。

实验例1片剂催乳药效学和颗粒剂相比

本实验例通过动物实验研究本发明中药片剂的催乳药效学。

本实验例以及以下可能用到的用来做对比实验的催乳颗粒，是按照中国专利申请CN02129413.5制备的。

本研究以怀孕大鼠为受试对象，待产仔后连续给予本发明实施例6所得乳欣片，(剂量为2.4、0.8、0.3g/kg，分别相当于生药20.5、6.8、2.6g/kg)和上市对照药催乳颗粒(6.6g/kg，相当于生药6.6g/kg)11天，观察对大鼠泌乳量、血清激素水平的影响。

结果表明，本发明中药对大鼠具有明显的催乳作用，而且其中以中剂量给药为佳。本发明的中药对血清雌二醇水平有明显降低作用，对泌乳素水平有升高作用，激素水平的变化进一步说明本发明中药催乳的作用与激素水平调控有关。实验证明，本发明中药中剂量组催乳效果优于催乳颗粒，且片剂服用比颗粒剂更方便。

1、试验目的

以大鼠为受试对象，观察产后大鼠经口灌胃给予本发明中药对其泌乳量的影响，为临床用于治疗产妇泌乳缺乏提供参考。

2、供试品

本实施例6所制得的本发明中药片剂。

阳性对照药：催乳颗粒，每袋20g，按照中国专利申请CN02129413.5制备。

3、试验系统及选择理由

选择大鼠作为动物模型。因为该动物模型成熟、背景资料丰富，有利于与催乳颗粒药效学结果进行比较。

4、试验动物的种系数量年龄性别体重范围及来源和等级。

品种：受孕15天左右的怀孕大鼠

品系：wistar

等级：清洁级

供给源：山东大学实验动物中心，动物合格证号：鲁动质[20021024]

购入数量：70只

使用数量：60只

购入时周龄：12周龄，体重300-340g

5、试验动物的识别方法

检疫期采用涂抹法标记动物编号。正式试验采用染色标记法，并在盒具上标明试验编号、试验名称、供试品名称、给药量、动物编号、分组及性别。

6、实验动物饲养管理的环境条件

6.1环境条件

饲养室：屏障动物室

温度设定：22土2℃

湿度设定：50％士10％

换气次数：≥14次/小时

照明时间：12小时(上午8点开灯-下午8点关灯)

6.2饲养条件：

笼具：鼠盒(长×宽×高＝350×220×180mm)

放置动物数：1只(窝)/盒

笼具交换：2次/周

粪便处理方法：垫料更换，每天1次

7、饲料名称或代号

名称(批号)：钴⁶⁰放射性灭菌大鼠颗粒饲料

生产者：山东大学实验动物中心

地址：济南市文化西路44号

灭菌时的灭菌方法：钴⁶⁰辐射

杂质的限度及分析：饲料供应商提供，确定在规定的标准范围之内。

给料方法：自由摄取

饲料污染物含量的确认：饲料提供商提供，确定在规定的标准范围之内。

饮水：自来水(高压蒸汽灭菌)

供水方法：由动物饮水瓶自由摄取

水中污染物确认：确定在水质规定的标准范围之内

除喂饲标准饲料外，另加鸡蛋半个/鼠·天。

8、供试品配制

8.1供试品：本发明实施例6中药片剂

8.2溶剂：蒸馏水

8.3配制方法：每1000片用颗粒粉碎机粉碎混匀后装瓶备用，配制时根据每片重0.67g(辅料0.084g)，相当于生药5.005g计算，用电子天平定量称取本发明中药粉末，加蒸馏水充分混匀配成混悬液。

8.4配制频率：每天配制1次

8.5混合物的标签：标有试验编号、供试品名称、配制浓度、配制时间、配制人、使用时间。

9、供试品的给药途径、方法、剂量、频率和用药期限以及选择理由

9.1给药途径：经口灌胃给予本发明中药

9.2给药途径的选择理由：与人给药途径一致

9.3给药方法：灌胃给药

9.4给药次数、给药时间及设定理由：

怀孕大鼠产后次日开始给药，每天给药1次，于am9-10时，连续11天。

9.5给药体积：给药容量为2ml/100g体重

9.6给药量设计及分组

根据预试及“催乳颗粒”主要药效学实验结果，确定给药剂量。将待分娩的70只大鼠随机分成5组，留每窝产仔8-10只仔鼠的鼠为实验鼠，产后次日给药。

本发明实施例5中药给药组：3个剂量组，高剂量组(2.4g/kg)、中剂量组(0.8g/kg)、低剂量组(0.3g/kg)；分别相当于生药20.5、6.8、2.6g/kg。

催乳颗粒组：催乳颗粒，6.6g/kg(相当于生药6.6g/kg)；相当于本发明中药中剂量组。

辅料对照组：片剂的辅料

10、观察指标：

10.1仔鼠体重及泌乳量变化

每天上午8时把母鼠与仔鼠分开，顺序称每窝仔鼠体重，记录在卡上，每窝仔鼠后一天减去前一天的重量差除这一窝的仔鼠数得每天每仔鼠净增体重，再求取10窝仔鼠净增体重的平均值(表1)；2小时后再称每窝仔鼠体重，记录在卡上，分笼时每窝仔鼠重量减去分笼2小时后每窝仔鼠重量之差除这一窝的仔鼠数得平均值，反映仔鼠吃饱与饥饿时的乳量，再求取10窝仔鼠的总平均值(表2)；然后把母鼠与仔鼠合笼，哺乳2小时后再称仔鼠体重，记录在卡上，合笼后每窝仔鼠重量减去合笼前重量除这一窝仔鼠数得平均值，再求取10窝仔鼠的总平均值，反映仔鼠饥饿与哺乳后的乳量(表3)。

10.2对母鼠激素水平的影响

给药11天后颈静脉抽血2ml，分离血清，采用双抗放免试剂盒测血清雌二醇、孕酮和泌乳素水平。

11、结果

11.1本发明中药对母鼠泌乳量的影响

本发明中药对母鼠泌乳量的测定结果见表1、2、3。

表1是各组仔鼠每天净增体重的平均值，本发明中药给药组各组仔鼠净增体重均高于空白对照组，但经方差分析差异无显著性。

表2是分笼时与分笼2小时后各组仔鼠的体重差值，中剂量组(B)仔鼠体重增长最明显，第1、3、9天均有显著差异(P＜0.05)，其次是高剂量组，其它各组都类似。

表3是合笼时与合笼2小时后各组仔鼠的体重差值，即饥饿2小时再哺乳时，各组差异很明显(方差分析P值均小于0.01)，以中剂量组(B)仔鼠饥饿再哺乳仔鼠体重增长最快，其次是高剂量组，其它各组都类似。

以上数据表明母鼠灌服本发明中药后仔鼠的体重增长比空白对照组明显，仔鼠体重的增长与母鼠泌乳量的多少直接有关，因此间接地反映了给药组对母鼠增乳有较好的效果，尤其表现在饥饿后再哺乳时本发明中药催乳效果更明显；同时表中也反映了大剂量本发明中药的仔鼠增重并不比中剂组好，仔鼠增重效果以中剂量组最好，大、中剂量组比小剂量组为好，说明本发明中药的催乳作用有一个合适的剂量。11.2本发明中药对母鼠血清中激素水平影响

乳汁的分泌受内分泌激素的调控，雌二醇对乳汁分泌起抑制作用，而泌乳素则促进乳汁的分泌。放射免疫药盒测得激素结果表明(表4)，四个给药组雌二醇水平都低于辅料对照组，且本发明中药各组、催乳颗粒对照组与辅料对照组差分析比较，差异都有显著意义(P＜0.001)；泌乳素水平以中剂量为最高，其余依次为高剂量组、催乳颗粒对照组和低剂量组，且本发明中药中剂量组与催乳颗粒组相比，差异显著(P＜0.01)。

11.3与催乳颗粒疗效比较

催乳颗粒给药剂量为6.6g/kg，相当于生药6.6g/kg；本发明中药片剂中剂量组给药量为0.8g/kg，相当于生药6.8g/kg；结果显示，本发明中药中剂量给药对泌乳量刺激作用比相同剂量的催乳颗粒要强(表1、2、3)；本发明中药中剂量组给药后雌二醇激素水平明显低于催乳颗粒，而泌乳素水平高于催乳颗粒组(表4)。该结果证实本发明中药片对怀孕大鼠确有催乳作用，且催乳作用比催乳颗粒要强；因制剂剂型的改变，可减少服用量，使用更方便。

12、结论与评价

以怀孕大鼠为受试对象，待产仔后给予中药制剂本发明中药(片剂，剂量为2.4、0.8、0.3g/kg；分别相当于生药20.5、6.8、2.6g/kg)和对照药催乳颗粒(6g/kg，相当于生药6g/kg)，观察对大鼠泌乳量、血清内分泌激素水平的影响。结果表明，本发明中药对大鼠具有明显的催乳作用，其中以中剂量给药为佳；对血清雌二醇水平有降低作用，对泌乳素水平有升高作用。激素水平变化进一步说明本发明中药催乳作用与激素水平调控有关；本发明中药中剂量组催乳效果优于催乳颗粒，且片剂服用比颗粒剂更方便。

对本发明其它实施例的片剂以及其它剂型分别进行试验，得到基本相似的结果。

实验例2催乳临床效果和安全性

本实验例通过临床实验研究本发明中药治疗产妇产后缺乳、少乳的临床效果和安全性。

一、药品及用法

(一)试验组：

药物：本发明实施例6的中药乳欣片剂。

规格：每次剂量为2.4g/kg，分别相当于生药20.5g/kg，产后72小时开始用药，每日三次，温开水冲服，4天为一疗程。

(二)药物对照组：

药物：催乳颗粒

来源：按照中国专利申请CN02129413.5制备的。

规格：颗粒剂，每包15克，产后72小时开始用药

每次2包，一日三次，温开水冲服，4天为一疗程

二、观察项目及指标

(一)用药前

1.临床观察：

常规询问病史，妊娠及分娩期经过，作体格检查，着重注意乳房和子宫复旧情况，中医辨证。

2.实验室检查

①素水平测定：PRL(泌乳素)E₂(雌二醇)；抽血前1小时内禁止吸吮

②血尿常规

③肝肾功能指标：ALT(谷丙转氨酶)BUN(尿素氮)Cr(血肌酐)

④心电图

(一)用药后

每日检查乳房充盈情况，乳汁量，子宫复旧，饮食，大便及舌脉象等指标，用药后不良反应，用药4天后，重复用药前检查内容，抽血测PRL，E₂前1小时内禁哺乳。

三、疗效和安全性评价标准

(一)疗效判定

1.以用药4天后较用药前乳汁分泌量增分情况作为疗效判断标准。

(1)显效：乳汁量积分升高2分或2分以上，能满足婴儿食用吃饱，不需加用牛奶者，有的尚能剩余乳汁。

(2)有效：乳汁量积分升高1分，基本能满足婴儿食用，有的尚需时而添加牛奶，但每次不超过20ml。

(3)无效：无变化，基本上需要人工喂乳，每次加奶＞20ml。

2.乳房充盈程度

乳房充盈程度不一定与乳汁量的变化呈一致性，故其增分作为疗效的参考评价。

附：乳汁分泌量和乳房充盈程度不同分4个分级：

0分＝极少量乳汁分泌；乳房空虚

1分＝有很少量乳汁；乳房轻度充盈

2分＝有中等量乳汁；乳房中度充盈

3分＝乳汁多量；乳房胀满

3.两组新生儿体重变化

比较两组在用药4天后新生儿体重比用药前增加情况(哺乳前测)。

4.两组新生儿在每次哺乳前后体重变化的比较。

5.用药4天后两组哺乳前一次吸乳汁量的比较。

6.症状和体征改善判断标准。

(1)显效：主要症状和体重积分平均减少2分或症状体征完全消失。

(2)有效：主要症状和体征积分平均减少1分，但尚未完全消失。

(3)无效：主要症状和体征积分无变化。

(4)恶化：主要症状和体征积分平均增加1分或1分以上。

(二)安全性

1.用药前后生命体征血压、脉搏、呼吸等变化。

2.子宫复归和恶露情况。

3.全身性副反应，如恶心、呕吐、腹痛、腹泻、头疼、头晕、过敏等表现。

4.化验室各项指标和心电图变化。

四、数据收集和统计方法

研究方案、表格、病历和随机表均统一设计，资料统一收集进行计算机数据处理，用SAS软件进行t检验、配对t检验、秩和检验和CPD检验。

结果

一、两组对象资料

1.年龄、妊娠、孕周、身高和体重资料比较见表5

表5、两组对象年龄、妊次、孕周、身高和体重资料比较

从表5数据看出，两组对象无论是年龄、妊次、孕周、身高和体重均较接近，无统计学差异，故两组资料具有可比性。

2.分娩方式见表6

表6、两组对象分娩情况比较

两组分娩方式之间均无显著差异

3.新生儿体重和Apgar评分见表7

表7、两组新生儿体重及Apgar评分比较

两组新生儿体重之间无统计学差异(P＞0.05)，出生5分钟时，Apgar评分均在8分或8分以上，无一例发生明显新生儿窒息。故分娩3天后，全部新生儿均为母乳喂养。

4.两组开服药时间比较

试验组开始服药时间为产后74.11±5.22h，对照组为产后73.31±4.28h，两组之间无统计学差异(P＝0.5015)，均符合方案规定。

二、治疗效果

1.两组乳汁量增分和乳房充盈程度的比较见表8-9

表8、两组用药后的乳汁量增分和疗效比较

两组乳汁量增分数据经CPD分析，P值＜0.01，试验组优于对照组。

试验组显效为86％，对照组为59％，两组之间有显著差异P＜0.01。

表9、两组用药后乳房充盈程度增分情况

表9乳房充盈程度和表8乳汁量增分基本上一致，CPD分析结果P＜0.01，试验组也优于对照组。

2.新生儿体重变化见表10

表10、两组用药后新生儿体重增加的比较

a:b  c:d  P值均＜0.001

e:f  P值＜0.01

表10结果说明：两组用药后新生儿体重均显著大于用药前。但试验组新生儿体重增加显著大于对照组。

3.哺乳前后新生儿体重见表11

表11、用药后两组新生儿哺乳前后体重的变化比较

试验组哺乳后新生儿体重增加为38±8.6g，对照组28±6.4g，试验组多于对照组。

4.用药4天后哺乳前一次吸空乳汁量

(吸乳机为瑞士AMEDA公司Egnell KG95/60型)，试验组有30例，对照组有10例，在用药4天后，任意选择一次在哺乳前人工吸出乳汁，计算吸出乳汁量，试验组为65.3±6.4ml，对照组为52.5±7.4ml。试验组多于对照组。

5.症状和体重改善情况见表12

表12、两组症状和体重积分改善情况比较

两组在症状和体重积分的改善情况很相似。其中症状和体重完全消失，舌象和脉象恢复正常者，试验组254例，对照组78例。两组间无明显差异(P＞0.05)。

三、安全性

1.生命指征

用药前后，试验组和对照组在血压、脉搏、呼吸等生命指征均未出现有临床意义的异常变化。

2.子宫复旧和恶露情况

两组对象的子宫复旧情况均为正常复旧，子宫底高度每天下降均在1-2cm范围内，无一例复旧不良。在用药前的恶露均为正常产后3天的血性恶露，用药后均逐渐转变经浆性恶露，无1例出现异常恶露。

3.副反应

两组对象服药后无1例有恶心、呕吐胃肠反应等副反应，无1例过敏。两种药物的接受性均良好。

4.化验室指标见表13

表13、两组用药前后实验室指标的变化

两组在用药后，各次化验指标均在正常生理范围内波动，未出现有临床意义的异常。

尿常规，两组对象均为产后，故有恶露的干扰，试验组5例和对照组3例用药后有微量的尿蛋白和少许RBC，均未见有管型。

5.心电图变化

两组对象在用药前和用药后未出现有临床意义的异常。

四、用药前后血生乳素(PRL)和雌二醇(E₂)水平的变化见表14

表14、两组用药前后血PRL和E₂的变化

A:b    c；d    e:f    g:h    I:j    k:l    p＝0.0001

无论试验组或对照组在用药后血PRL和E2水平均有显著下降P＜0.001。

用药后血PRL下降在两组之间无明显差异(P＞0.05)，而血E2下降则试验组明显大于对照组P＜0.01，血PRL/E2比值试验组也明显高于对照组P＜0.01。

对本发明其它实施例的片剂以及其它剂型分别进行试验，得到基本相似的结果。

实验例3鼠乳腺增生研究

本实验例为本发明中药治疗大鼠乳腺增生病/症的实验研究。

本研究通过对中药本发明中药治疗大鼠乳腺增生病/症(模型)疗效进行研究，为临床治疗应用提供科学依据。将模型大鼠50只，分为本发明中药治疗组(高、中、低3个剂量组)、阳性对照药乳块消治疗组和模型空白对照组，每组10只，与阴性空白对照组，正常大鼠10只；血清激素测定雌二醇、泌乳素、孕酮水平；病理学检察本发明中药治疗组与模型空白对照组在乳腺小叶数、乳腺腺泡数、腺泡腔直径等指标的变化情况；比较本发明中药各治疗组与乳块消治疗组的疗效差异。

结果表明，本发明中药治疗后对血清激素水平有一定调节作用，乳腺小叶数、乳腺腺泡数、腺泡腔直径等指标经用本发明中药治疗后疗效显著(P＜0.01)，本发明中药治疗组疗效优于乳块消治疗组(P＜0.01)。即本发明中药治疗大鼠乳腺增生病/症疗效显著，且优于乳块消。

1、目的：

研究中药本发明中药治疗大鼠乳腺增生病/症的效果，为临床治疗乳腺增生病/征的应用提供科学的依据。

2、材料

2.1药物

2.1.1实验用药

本发明实施例6所制得的乳欣片

2.12阳性对照药

乳块消，片剂，每片0.35g，北京中医药大学药厂生产

2.13大鼠乳腺增生病/症模型制备用药

苯甲酸雌二醇0.2mg/ml；黄体酮20mg/ml，上海通用药业股份有限公司生产。

2.2动物

选择雌性成年未孕Wistar大鼠，体重180-200g，共80只，山东大学实验动物中心提供，动物合格证号为：鲁动质[20021024]。

2.3试剂盒

雌二醇、孕酮、泌乳素(双抗法)放免测定试剂盒，天津德普生物技术和医学产品有限公司生产。

2.4病理诊断仪器：莱卡切片机、脱水机，Olympus显微镜，莱卡摄像及图像处理系统。

3、实验方法

3.1乳腺增生病/症动物模型的制备

根据《实验动物的疾病模型》文中(P392，1997，天津科技译文出版公司)大鼠乳腺增生病模型制备。

雌性Wistar大鼠70只，肌肉注射苯甲酸雌二醇0.5mg/kg体重，每天1次，连续25天；继而改用肌肉注射黄体酮4mg/kg体重，每天1次，连续5天。

3.2分组与给药

将确诊为乳腺增生病/症的大鼠于停止给予黄体酮24小时后随机分为6组，每组10只。本发明实施例3中药治疗组：给药剂量分别为1.6g/kg·天、0.8g/kg·天、0.4g/kg·天(相当于生药13.7、6.8、3.4g/kg·天，其中0.8g/kg·天相当于催乳颗粒给药量70g/kg·天)；阳性对照组：乳块消，3.0g/kg·天；模型空白对照组：灌服等容量辅料混悬液；以及阴性空白对照组：正常大鼠10只，灌服等容量辅料混悬液。本发明中药片及乳块消片粉碎后用蒸馏水制成混悬液灌服，连续灌胃给药2周。

3.3疗效观察

3.3.1血清激素水平检测

末次给药24小时后，动物用戊巴比妥钠麻醉后处死，采血制备血清；采用放免药盒测血清雌二醇、泌乳素、孕酮水平。

3.3.2病理观察

末次给药24小时后将动物用戊巴比妥钠麻醉后处死，肉眼检查乳房情况后，取每只动物第二对乳房活检，20％福尔马林固定，石蜡切片，HE染色，光镜检查，并对乳腺组织作图像处理。

(1)模型组病理要求：小叶明显增大几乎融合，间质较少，腺泡明显增多、增大、扩张，腺管变形呈多形性。乳腺导管管腔，腺泡腔扩张明显，乳腺导管上皮细胞排列紊乱，上皮增生明显可呈不规则状突起，管腔中可见脱落的上皮细胞及其分泌物，小叶体积增大，分叶增多，小叶腺数平均5-8个叶，导管上皮细胞层数明显增多，间质纤维组织增生明显。

(2)乳腺增生分级标准：

0级：乳腺小叶不增生，腺体数量极少，腺胞不扩张，处于静止期状态。

I级：乳腺小叶轻度增生，个别腺泡轻度增生或导管轻度扩张，腺泡及导管内有少量分泌物存在。

II级：乳腺小叶大部分增生，腺泡及导管内分泌物较少，部分腺泡或导管仍处于轻度扩张状态但无明显囊泡形成，腺泡上皮增生但无明显乳头状突起。

III级：乳腺小叶明显增生，数量增加，腺泡或导管处于极度扩张状态，部分呈囊泡状，腺管上皮增生，增生的上皮突入管腔呈乳头状，层次增多，腺泡内及导管内有分泌物存在。

(3)疗效评定：乳腺增生分级为I级(含I级)以下判为有效。

3.4数据分析

根据治疗结果，统计本发明中药治疗组、乳块消治疗组、模型组的血清激素水平、乳腺组织病理变化，并经图像处理系统计算腺体小叶数、腺泡数及腺泡泡腔直径，比较本发明中药治疗组与模型空白对照组及与乳块消治疗组的疗效，并作显著性检验。

4、结果与讨论

4.1给药后各组血清激素水平变化

4.1.1血清雌二醇(E₂)变化

E₂(¹²⁵I)双抗放免测定标准曲线，r＝0.9986，NSB/T(％)＝1.972％；模型空白对照组大鼠血清E₂水平明显低于其它各组，给予本发明中药(中、低剂量组)治疗后E₂向正常方向恢复，但方差分析各组无明显差异(表16)。此现象表明，在模型制备过程中给予大量雌孕激素造成动物体内雌孕激素代谢紊乱，但给予适量本发明中药治疗后有一定调节作用。

4.1.2血清孕酮(PrG)变化

孕酮(¹²⁵I)双抗放免测定其标准曲线，r＝0.9993，NSB/T(％)＝2.653％；模型空白对照组大鼠血清PrG水平明显低于阴性空白对照组，亦明显低于本发明中药、乳块消各治疗组；本发明中药、乳块消治疗组PrG水平明显低于阴性空白对照组(表1，P＜0.01)；本发明中药治疗组明显调高血清PrG并似有剂量效应关系趋势。本发明中药各剂量组高于乳块消组F＜0.05)。

4.1.3血清泌乳素变化

泌乳素(¹²⁵I)双抗放免测定标准曲线，r＝0.9985，NSB/T(％)＝2.666％；模型空白对照组泌乳素明显高于其它各组(P＜0.01)，各治疗组血清泌乳素水平高于阴性空白对照组(P＜0.01，表15)。

总之，因在模型制备过程中给大鼠注射了大量E₂、PrG，造成大鼠内分泌严重紊乱，给予本发明中药治疗后有一定调节作用，但变化不规律。

4.2乳腺病理改变

4.2.1阴性空白对照组：乳头部被复鳞状上皮，表面不平，乳腺管的开口部也被复鳞状上皮。乳头部的输乳管被复柱状上皮，有皱襞，间质内可见成束的平滑肌。乳腺小叶由小导管及腺泡组成，小叶清晰，小叶内间质疏松。导管上皮细胞排列规则，导管璧较薄，小叶体积较小、分叶少，小叶数多为1-3个叶，导管上皮细胞层数较少。

4.2.2模型空白对照组：小叶明显增大几乎融合，间质较少，腺泡明显增多、增大，扩张、导管变形呈多形性。模型组乳腺导管管腔、腺泡腔扩张明显，乳腺导管上皮细胞排列紊乱，上皮增生明显可呈不规则状突起，管腔中可见脱落的上皮细胞及其分泌物，小叶体积增大，分叶增多，小叶腺泡数平均5-8个，导管上皮细胞层数明显增多，间质纤维组织增生明显。导管增生、腺泡增生、囊性增生和混合型出现率较高。

4.2.3本发明中药治疗组：高剂量组大鼠乳腺小叶数及导管上皮细胞层数减少，与模型空白组比较明显减轻，比乳块消组抑制乳腺增生程度要强；中剂量组小叶数及导管上皮细胞层数减少，与模型空白组比较明显减轻，比乳块消组抑制乳腺增生程度更强；低剂量组小叶数及导管上皮细胞层数减少，与模型空白组比较明显减轻，与乳块消组比较有一定程度的减轻。

4.2.4乳块消组：小叶数及导管上皮细胞层数减少，与模型空白组比较有减轻作用。

将上述病理改变按乳腺增生分级标准计数(表16)及组织细胞变化经图像处理后(表17)表明，模型空白对照组大鼠乳腺增生明显，大部分达III级增生，各治疗组明显比模型组减轻，本发明中药中剂量组较乳块消组亦明显减轻(P＜0.05)；各治疗组乳腺小叶数、腺泡数及腺泡腔直径明显比模型对照组减轻；按疗效标准统计处理表明，本发明中药各治疗组疗效皆在70％以上，且明显优于乳块消组(表18)。

表15、实验各组给药结束时大鼠血清激素水平变化(n＝10，±S)

组别	雌二醇(pg/ml)	孕酮(ng/ml)	泌乳素(ng/ml)
				①本发明中药高剂量组	29.4士21.9	5.0士3.9	2.98士1.66
②本发明中药中剂量组	17.6士14.2	3.6土4.3	2.46士0.85
				③本发明中药低剂量组	21.0土22.5	3.8士5.8	3.72士1.87
④乳块消组	30.5士16.1	2.7士1.8	2.89士0.86

组别	雌二醇(pg/ml)	孕酮(ng/ml)	泌乳素(ng/ml)
				⑤模型空白对照组	10.2士10.1	2.8土2.6	4.15士1.07
⑥阴性空白对照组	29.7士22.7	11.0士6.7	1.95士0.73
				方差F值	1.97	4.84	4.14
分析P值	＞0.05	＜0.01	＜0.01

表16、大鼠乳腺病理增生分级

表17.实验各组大鼠乳腺组织细胞变化

组别	乳腺小叶数	乳腺腺泡数	腺泡腔直径(um)
				①本发明中药高剂量组	3.12士1.05	4.06士1.75	98.75士12.14
②本发明中药中剂量组	2.98士0.85	5.79土1.96	97.25士11.04
				③本发明中药低剂量组	4.25土1.25	6.08士2.17	121.46士11.28
④乳块消组	6.67士1.74	8.26士2.15	110.02士12.62
				⑤模型空白对照组	8.76士1.65	11.57土2.63	215.61士26.55

组别	乳腺小叶数	乳腺腺泡数	腺泡腔直径(um)
				⑥阴性空白对照组	1.52士0.63	3.26士1.25	96.75士10.60
F值	45.31	4.84	4.14

P值	＜0.0001	＜0.0001	＜0.001
				方差分析	a.①②③组间无差别b.①②③小于④⑤P＜0.05c.①②③④⑤大于⑥P＜0.05d.④少于⑤，P＜0.01	a.①②③组间无差别b.①②③小于④⑤P＜0.01c.②③④⑤大于⑥P＜0.05d.④大于⑥，P＜0.01	a.①②小于③⑤，P＜0.01b.③④小于⑤P＜0.01c.③大于⑥，P＜0.05d.⑤大于⑥，P＜0.01

表18、本发明中药各治疗组及乳块消组疗效比较

组别	实验大鼠数(只)	有效大鼠数(只)	有效率(％)
				本发明中药高剂量组	10	8	80
本发明中药中剂量组	10	8	80
				本发明中药低剂量组	10	7	70
乳块消组	10	3	30

X²检验，4组间比较，P＜0.05；

结论：本发明中药各剂量组疗效无差异；本发明中药各剂量组疗效优于乳块消组。

对本发明其它实施例的片剂以及其它剂型分别进行试验，得到基本相似的结果。

实验例4子宫肌瘤研究

本实验例为本发明中药片剂对治疗子宫肌瘤的实验研究。

1实验材料

动物：雌性健康成年未孕豚鼠、体重350g～400g；健康Wistar大白鼠、体重180g～220g，雌雄兼用；昆明种小白鼠、体重18g～22g，雌雄各半；以上动物由中国药品生物制品检定所实验动物中心提供。药品与试剂：

本发明实施例6所制得的乳欣片，对照组：桂枝茯苓丸(山西省临汾中药厂生产，批号：040502)；苯甲酸雌二醇注射液(1mg/ml，上海第九制药厂生产，批号：040603)；黄体酮注射液(10mg/ml，天津氨基酸公司生产，批号：040506)；阿斯匹林肠溶片(0.5g/片，天津中美史克制药有限公司生产，批号：040501)。

2方法与结果

2.1抗子宫平滑肌瘤样增生作用的研究

将60只豚鼠随机分为空白对照组、模型组、桂枝茯苓丸组、乳欣片高剂量组和低剂量组，每组12只动物。参照李氏法制作子宫平滑肌瘤样增生模型。造模方法为：肌内注射苯甲酸雌二醇，0.2mg/只，每周3次，连续3个月后，加黄体酮1.5mg/只肌注，2次/周，连续1个月。在造模同时，模型组每日灌喂生理盐水2ml/只，桂枝茯苓丸组每日灌喂桂枝茯苓丸1g/只(约相当于60kg体重成人常规用量的25倍)，乳欣片高剂量组和低剂量组，每日分别灌喂乳欣片1g/只、0.5g/只(约相当于60kg体重成人常规量的25倍、12.5倍)。空白对照组常规饲养，并每日灌喂生理盐水2ml。4个月后，所有动物称重，击头处死，剖腹观察子宫大体形态，沿子宫膀胱连接处剪取子宫，称重，计算子宫系数(子宫重/100g体重)，量取子宫颈以上及分角子宫根部横径，然后固定于10％中性福尔马林，子宫分角以上相同部位横切取材0.3mm，石蜡包埋，HE染色，光镜观察子宫组织形态，每张切片选取5个部位在10×10倍镜下显微测微尺测量平滑肌厚度，取平均值。数据采用MINITAB SOFTEARE统计软件进行单因素方差分析Q检验处理。结果如下：

2.1.1乳欣片对子宫重量的影响

见表19a。模型组子宫重量增加，与对照组相比，有极显著性差异(P＜0.01)，乳欣高剂量组子宫重量较模型组显著减轻(P＜0.05)，乳欣片低剂量组，桂枝茯苓丸组子宫较模型组有减轻趋势，但统计分析无显著差异(P＞0.05)。

表19a  子宫重量比较(x±s)

注：**与对照组比较P＜0.01；*与模型组比较P＜0.05。下同。

2.1.2乳欣片对子宫横径变化的影响

见表19b。模型组两处子宫横径较空白组增粗、差异有非常显著意义(P＜0.01)，而治疗组横径均小于模型组，差异有显著意义(P＜0.05)。

表19b  子宫横径比较(cm，x±s)

2.1.3乳欣片对子宫组织形态学的影响

镜下观察，造模组分角子宫根部平滑肌层明显呈不均匀增厚，且平滑肌细胞排列系乱，其中有7只平滑肌排列呈卷云状或编织状，病变近似瘤样增生；乳欣片高剂量组和低剂量组及桂枝茯苓丸组分角子宫平滑肌层薄于造模组，排列规整，乳欣片低剂量组和桂枝茯苓丸组分别有个别区域出现瘤样增生病变。

2.1.4乳欣片对子宫平滑肌厚度化影响

见表19c。模型组子宫平滑肌较空白对照组明显增厚(P＜0.01)，桂枝茯苓丸和乳欣片高剂量组和低剂量组子宫平滑肌厚度较模型组薄(P＜0.05)。

表19c  子宫平滑肌厚度比较

观察本发明中药组乳欣片对雌、孕激素诱发的豚鼠子宫平滑肌瘤的作用。灌胃给药，连续灌服120天，结果发现本发明中药乳欣片能抑制雌、孕激素诱发的豚鼠子宫平滑肌瘤样增生、减轻增重子宫的重量及其平滑肌层增厚等病理现象。以低、中、高系列剂量灌胃给药具有基本相同的作用。

2.2止血作用的研究

2.2.1乳欣片对小鼠断尾出血的影响

取小鼠60只，雌雄各半，随机分为空白组(生理盐水1ml/只)、桂枝茯苓丸组(10g/kg)、实施例8的乳欣低、高剂量组(5g/kg、10g/kg)，每组15只。每日灌胃给药1次，连续3天，于最后一次给药后2小时，分别以利剪将小鼠尾尖0.5cm处横断，待血液自行流出时，每隔15sec用滤纸吸去血滴1次，直至血液自然停止，比较各组出血时间(见表19d)。结果表明：与空白组相比较，乳欣可显著缩短小鼠尾出血时间(P＜0.05)，桂枝茯苓丸具有使小鼠出血时间缩短的趋势，但差异不显著(P＞0.05)。

2.2.2乳欣片对小鼠凝血的影响

取小鼠60只，随机分为4组，每组雌雄各半，分组及给药同2.2.1；最后一次给药2小时后，采用毛细血管法测凝血时间：取长5cm，内径1mm玻管插入小鼠内毗静脉丛取血，满后每隔15sec折断玻管一段，检查有无血凝丝出现，计算从采血到出现血凝丝时间，为凝血时间。比较各组凝血时间(见表4)。结果表明：用药组和对照组比较，凝血时间无显著性差异。

表19d  乳欣片对出凝血时间的影响(min，x±s)

分组	n	出血时间(n)	凝血时间(n)
				空白对照组	15	11.12±1.38(15)	0.43±0.09(15)
桂枝茯苓丸组	15	11.09±1.78(14)	0.59±0.13(12)
				乳欣片低剂量组	15	9.70±1.02(14)*	0.58±0.27(14)
乳欣片高剂量组	15	7.93±1.86(15)*	0.47±0.04(14)

*：与对照组比P＜0.05。

2.3抗炎作用的研究

2.3.1乳欣片对二甲苯引起小鼠耳肿的影响

方法与结果：取小鼠50只，随机分为5组(每组雌雄各半)，空白对照组(生理盐水1ml/只)；阿斯匹林组(0.2g/kg)，桂枝茯苓丸组(10g/kg)，实施例8的乳欣片组(5g/kg、10g/kg)，每日灌胃给药1次，连续3日，最后1次给药后30分钟，将二甲苯滴于小鼠右耳背15钟后处死动物，用5mm打孔器沿左右耳廓相同部位打孔取材，分别称重，以两耳片重差代表肿胀程度，比较各组肿胀程度并求出抑制率(MinitabSoftware统计软件包进行单因素方差分析和Q检验)。结果见表19e，用药组与空白组比较，阿斯匹林、乳欣片高、低剂组均可使二甲苯所致的小鼠耳肿显著减轻(P＞0.05)，桂枝茯苓丸组变化无显著意义(P＜0.05)。

表19e乳欣片对二甲苯引起小鼠耳肿的影响

本发明同时观察了本发明中药乳欣片(实施例6)对小鼠毛细血管通透性、对二甲苯诱发小鼠耳廓水肿以及对鸡蛋清引起大鼠的足踞肿胀的影响。实验结果表明，冶疗本发明中药乳欣片能降低小鼠毛细血管通透性，减少渗出；对二甲苯诱发的小鼠耳廓肿胀及蛋清导致的大鼠足踞肿胀均有明显的抑制作用，本发明中药的抗炎作用随剂量加大而增强。

2.3对雌激素所致小鼠子宫增重的影响

用sc雌二醇的方法，制备小鼠子宫增重模型。本发明实施例11的中药乳欣片以低、中、高系列剂量给昆明种雌性小鼠ig(灌胃给药)给药，连续灌服10天，实验结果发现冶疗本发明中药中剂量组(13.569生药/kg)和高剂量组(27.129生药/kg)小鼠的子宫系数比模型对照组明显降低。表明冶疗本发明中药对雌激素引起的小鼠子宫增重有一定程度的抑制。

2.3对大鼠离体子宫平滑肌的影响

本实验通过大鼠离体子宫收缩试验，观察中药复方制剂宫瘤消颗粒对子宫平滑肌的影响。结果表明，本发明实施例6的中药乳欣片低剂量组(终浓度为12.5mg生药/ml)对正常子宫平滑肌的收缩幅度、频率和活动力均无明显影响。中剂量组(25mg生药/mI)和高剂量组(50mg生药/ml)对正常子宫平滑肌收缩的幅度、频率和活动力均表现一定的抑制作用。对于催产素引起的子宫收缩状态，本发明中药中剂量组即表现明显的抑制作用。实验结果提示，本发明中药低剂量对正常子宫无明显影响，较高剂量时对子宫平滑肌呈抑制作用。本发明中药的作用与子宫所处的机能状态有一定关系，当子宫平滑肌处于收缩状态时，较低剂量即可呈现抑制作用。

3讨论

现代医学认为子宫肌瘤的生长和发生与雌激素有关，子宫肌瘤组织中雌激素受体和雌二醇的含量较正常肌组织高，故本实验观察了乳欣对苯甲酸雌二醇并黄体酮诱发的豚鼠子宫平滑肌瘤样增生的影响，以证实该药有无抗子宫平滑肌瘤样增生作用；由于粘膜下、肌壁间肌瘤，影响子宫内膜，干扰月经周期，临床表现月经量过多，经期延长或不规则出血，持续淋漓不净等，故进行了止血与凝血两项实验，以观察本品对出凝血的影响。由实验结果可以看出，乳欣片对雌激素诱发的豚鼠子宫平滑肌瘤样增生有显著的抑制作用；可显著缩短小鼠出血时间，而对凝血时间无显著影响；对二甲苯所致小鼠炎症有明显的抑制作用。乳欣片治疗子宫肌瘤的临床效果有待进一步观察。

对本发明其它实施例的片剂以及其它剂型分别进行类似试验，得到基本相似的结果。

实验例5乳腺癌研究

本实验例通过研究本发明所述的中药对人乳腺癌细胞株MCF27裸鼠移植瘤的抑制作用及其对细胞增殖的影响，从而验证本发明所述中药对治疗或预防乳腺癌的作用。

1材料与方法

1.1材料来源

未交配雌性Balb/c-n/n裸小鼠，鼠龄4～6周，体重10-20g，共40只，购自中国药品生物制品检定所实验动物中心；人乳腺癌细胞株MCF27购自武汉典型动物保藏中心；试验用药为本发明所述的中药，按照实施例6的方式制备；多柔比星为阳性对照药，由浙江海正制药股份有限公司生产；丙二醇(分析纯)为重庆东方试剂厂生产；抗Ki267单克隆抗体(鼠抗人，即用型)和SP试剂盒(通用型)购自福州迈新生物技术开发公司。

1.2实验方法

1.2.1MCF27裸鼠移植瘤的复制将MCF27细胞株培养于含10％小牛血清的RPM1 1640培养液中，并按16U/100mL加入精制胰岛素。待传代至足够数量后，取对数生长期细胞用0.25％的胰酶消化成1.0×10⁷mL^-1的细胞悬液，于裸小鼠右侧第1乳腺部位皮下注射，0.2mL/只。

1.2.2实验分组肿瘤细胞接种后28d，有36只可见接种部位移植瘤生长，4只未成瘤。将移植瘤接种成功的裸鼠随机分组。I组(溶剂对照组)：给予20％内二醇，0.1mL/d，腹腔注射，1次/d，连续15d；II组(本发明所述中药)：给予本发明实施例1所述中药乳欣50mg/(kg·d)溶于0.1mL20％丙二醇中，腹腔注射，1次/d，连用15d；III组(多柔比星组)：给予多柔比星5.23mg/(kg·d)溶于0.1mL生理盐水，腹腔注射，d₁、d₈、d₁₅；给予20％丙二醇0.1mL/d，腹腔注射，1次/d，连用15d；IV组(联合用药组)：给予多柔比星5.33mg/(kg·d)溶于0.1mL生理盐水，腹腔注射，d₁、d₈、d₁₅；给予本发明所述中药50mg/(kg·d)溶于0.1mL 20％丙二醇中，腹腔注射，1次/d，连用15d。

1.2.3移植瘤生长情况及药物抑瘤作用观察用药前及用药后每3d测量一次移植瘤最小径(a)和最大径(b)，计算移植瘤体积(V＝a²*b/2)，并据此绘制移植瘤生长曲线。药物处理结束后1d，脱颈椎处死裸鼠，观察记录各组裸鼠乳腺包块形态大小，将每个肿块剥出称重，计算抑瘤率。

抑瘤率(％)＝(1-实验组瘤重/对照组瘤重)×100％

1.2.4组织学及电镜观察取新鲜的移植瘤组织，10％甲醛固定，石蜡包埋，切片(5μm)，HE染色。4℃4％戊二醛预固定，1％锇酸固定，浸透包埋，半薄切片，光镜定位，超薄切片，染色，以Hitachi2600透射电镜观察。

1.2.5免疫组化检测Ki267的表达按福州迈新生物技术开发公司提供的SP法进行免疫组化的检测。结果判断：Ki267以细胞核内出现棕黄色颗粒为阳性。判断标准：400倍镜下5个视野中各计100个肿瘤细胞的阳性百分数，取其均值作为Ki267标记指数(Ki267 LI)。

1.3统计学方法

采用SPSS 10.0统计软件包进行分析，各项数据均以x±s表示，用方差分析进行显著性检验。

2结果

2.1移植瘤生长情况

接种MCF27乳腺瘤细胞株后10d，于接种处可见微小突起，以后逐渐明显，40只裸鼠中有36只先后出现肿块，接种成功率90％。接种28d后36只裸鼠移植瘤长径长至0.8cm左右，再分组给予不同的药物处理。药物处理后，各组移植瘤继续生长增大，但对照组移植瘤生长明显快于其它3组(表20)。

表20移植瘤生长体积(mm³)

2.2药物的抑瘤作用

I组移植瘤质量明显高于II、III、IV组。II、III、IV组抑瘤率分别为36.46％、53.88％和41.49％。IV组抑瘤率高于II组抑瘤率，差异无显著意义，P＞0.05，提示本发明所述中药可抑制移植瘤的生长，但在此剂量水平及用药时间上，联合用药无明显协同作用(表21)。

表21各组裸鼠移植瘤质量比较

组别	n	移植瘤质量(g)	抑瘤率(％)
				I	9	0.614±0.129	--
II	9	0.391±0.107	36.32
				III	9	0.286±0.091	53.42
IV	9	0.363±0.106	40.88

(SPSS 10.AVONA分析，II、III、IV组与I组比较有显著差异，P＜0.01，II、III、IV组之间无显著性差异，P＞0.05)

2.3移植瘤组织病理学观察

2.3.1巨检  移植瘤呈圆形、椭圆形或分叶状生长，质地硬，切面灰白，大部分与周围组织分界清楚。对照组可见胸壁浸润，其中1只还发现腋窝肿大淋巴结1枚。

2.3.2光镜  移植瘤细胞形状不规则，大小不一，核大，浓染，核异形性明显，可见病理性核分裂相，核质比例明显增大。各组内均可见组织坏死区，对照组相对较少。对照组发现的腋窝肿大淋巴结经病理证实为淋巴结转移癌。

2.3.3电镜  移植瘤细胞形态大小不一，核大不规则，核质比例增大。对照组瘤细胞形态不规则，排列紊乱，核仁大，有的细胞可见2个核仁。本发明中药组可见局灶性坏死区，核仁连集，常染色质多，细胞器少，可见腺样分化及内包涵物，并可见凋亡现象。多柔比星组局灶性坏死区明显，核仁大小不一，有的可见双核仁，核仁边集明显，可见核膜破裂，部分粗面内质网、线粒体肿胀，细胞器部分崩解。

2.4移植瘤组织Ki-67免疫组化检测结果

移植瘤组织中Ki-67阳性表达主要位于细胞核。对照组表达率高于本发明中药组、多柔比星组及联合用药组，联合用药组低于单用本发明中药组(表22)。

表22各组裸鼠移植瘤组织抗Ki-67免疫组化结果比较

组别	n	Ki-67LI(％)
			I	9	84.56±5.04
II	9	67.98±4.96
			III	9	64.51±4.01
IV	9	59.72±5.53

(SPSS10.0AWONA分析，II、III、IV组与I组比较有显著差异，P＜0.01，II、III组与IV之间比较有显著差异，P＜0.01，II、III组之间无显著性差异，P＞0.05

3讨论

本实验通过复制人乳腺癌细胞株MCF27裸鼠移植瘤，观察本发明中药的抗癌作用，对照组瘤重明显高于本发明中药组、多柔比星组多联合用药组，P＜0.01，表明本发明中药及联合用药均可明显抑制移植瘤的生长。本实验用的MCF27细胞株不是耐多柔比星的细胞株，因此没有体现出联合用药的协同作用。

尽管MCF27细胞株不是高侵袭性的细胞株，但我们仍然观察到对照组裸鼠有胸壁浸润的现象，其中1只尚有腑窝肿大淋巴结，经病理证实系淋能结转移癌，而其他各药组均未发现此现象，反映本发明所述中药及联合用药对移植瘤生长、浸润甚至转移有抑制作用。Ki-67存在于细胞周期的G₁后期、S、G₂和M期，而不存在于静止的G₀期细胞，是应用最广泛的增殖标记之一。它在G₁后期开始出现，在S期和G₂期逐渐升高，M期达到高峰，有丝分裂结束后，迅速降解消失。Ki267指数与肿瘤良、恶性程度有关，与肿瘤的恶性程度呈正相关。而且Pierga等提出，Ki-67表达情况可用为鉴别良恶性肿瘤的一个指标，或作为判断肿瘤侵袭能力的一种标志。本实验结果Ki-67指数对照组最高，本发明中药组次之，均高于联合用药组，P＜0.01，表明本发明所述中药有抑制移植瘤细胞增殖的作用，而且可协同多柔比星提高其抗增殖作用。

对本发明其它实施例的片剂以及其它剂型分别进行试验，得到基本相似的结果。

实验例6毒理研究

本实验例涉及本发明药物的毒理学研究。

以小鼠为受试动物，采用最大给药剂量法，对中药本发明中药单次经口灌胃给药毒性进行观察。本发明实施例2中药乳欣片给药剂量30g/kg(相当于生药256.2g/kg体重)，20只动物，雌雄各半；经口灌胃给药，给药1天，上午、下午各1次，连续观察14天。

给药后对小鼠的一般症状、体重等进行观察。本发明中药给药后30min内、1-4h时及此后14天内均未见明显中毒症状，观察14天后体重增加无降低。结果表明，本发明中药单次给药的最大给药剂量大于30g/kg，本发明中药用药不会产生急性毒性反应。

本发明中药重复给药毒性很低，大剂量给药时可引起一过性肝功能、血清CHOL改变，血液学、血清生化指标无异常变化，大体解剖、脏器系数及病理组织学检查未见异常。初步推定本发明中药作用靶器官为肝脏，但改变属可逆性。本发明中药大鼠经口给药安全剂量在4-8g/kg，相当于人生药给药量为34.2-68.3g/kg，折算为人生药用量的6-12倍，比催乳颗粒用药更安全。

综上表明，本发明中药用药无急性毒性反应，重复用药安全。

对本发明其它实施例的片剂以及其它剂型分别进行试验，得到基本相似的结果。

实验例7稳定性试验

本实验例涉及本发明药物的初步稳定试验。

1.方法：

取样品置温度37-40℃，相对湿度75％的恒温恒湿箱中定期检查各项指标进行加速试验。

每月观察一次，观察外观，崩解时间，并对成分进行鉴别和含量测定，连续观察六个月。

2.结果：

本发明实施例1-13的中药制剂中各项指标在六个月的加速试验中结果如下

外观：         无变化，

崩解时间：     31-40min，

鉴别：         阳性，

黄芪甲苷含量： 无明显波动，

阿魏酸含量：   无明显波动

细菌总数个/克：＜50，

霉菌总数个/克：＜50，

大肠杆菌活螨： 未检出。

3.结论：

本制剂经加速稳定性试验六个月指标无明显改变，上述结果说明本发明的催乳药物稳定性良好。

同样的试验表明，本发明其它实施例的制剂稳定性良好。

实验例8

乳腺增生病70例的临床研究

乳腺增生病是临床最常见的乳房疾病之一，部分类型与乳腺癌的发生密切相关。本发明中药制剂乳欣片用于治乳腺增生病具有健脾益气、养血柔肝、活血通络、软坚散结的作用。现报告如下。

1资料与方法

1.1诊断标准自觉乳房胀痛，多有周期性胀痛特点，胀痛程度不一，一侧或双侧乳房内可扪及多个散在大小不等的结节状肿块，质韧而不硬，边界不清，但与皮肤和基底不相连，可推动，多数有轻压痛。

1.2临床资料70例均为门诊女性患者，年龄在16～65岁，平均36.5岁；病程最短2个月，最长20年，平均8.5年。多以双乳多发性的乳腺结节、乳房胀痛等症状就诊。

1.3治疗方法70例乳腺增生患者均口服乳欣片，1次3片，1日3次，饭后服用，经期停服。3个月为1个疗程，每月来院复诊1次。

2治疗效果

2.1疗效标准

根据中华全国中医学会外科学会乳腺病专题组制定的疗效评定标准判定。治愈：乳房结节消失，乳痛消失；显效：乳房结节变软，直径缩小1/2以上，乳痛消失；有效：乳房结节变软，直径缩小不足1/2，乳痛减轻；无效：乳房结节无缩小，乳痛无缓解。

2.2结果

70例患者均遵医嘱服药，未同时服用其他药物。结果见表23。

表23疗效与服用疗程

从表24可看出服药时间越长，疗效越好，总有效率越高。这与中药本身特点有关，虽起效慢，但能标本同治；疗效与患者病程长短亦有关，病程较长者，相对疗程亦长。在整个服药期间，未见明显不良反应。

3讨论

乳腺增生以中青年女子多见，为妇女常见病、多发病，易恶变。它的发生与卵巢功能失调有密切关系，正常的乳腺组织随着月经周期性激素的变化(主要是雌激素及孕激素)周而复始地进行增生-复旧-增生的循环过程。若因各种原因，该生理过程被打乱，进而体内内分泌紊乱，卵巢功能失调，雌激素分泌过多，致使雌激素长期刺激乳腺组织，导致正常乳腺组织过度增生而复旧不全，因而发生乳腺增生病。本发明的乳欣片能够通过健脾益气、养血柔肝、活血通络、软坚散结，对乳腺增生有标本兼治之功效，未见明显不良反应。同时，还具有抗慢性增生性炎症的作用，可抑制纤维结缔组织增生，因而有消肿散结的作用。我们认为，乳欣片不失为一种可供乳腺增生患者选择的较佳药物。

临床试验表明，本发明其它实施例的乳欣片也具有基本的效果。

实验例9

子宫肌瘤的临床研究

对确诊为子宫肌瘤(uterine myoma)的患者服用本发明的实施例6的中药乳欣片，月经后第七天开始服用，每次3片，每日3次，2-3周为一个疗程，可以连续服用2-3个疗程，其药效较妇康片组提高30％。

对本发明其它实施例的片剂以及其它剂型分别进行试验，得到基本相似的结果。

实验例10

乳腺癌62例的临床研究

一、病例选择：

62例病人，均经各大医院确诊为乳腺癌患者，全部为女性，年龄最小者35岁，最大者66岁。

二、治疗方法：

对确诊为乳腺癌的患者，服用本发明实施例6的中药乳欣片，月经后第七天开始服用，每次3片，每日3次。每40天为一个疗程，连续服用2个疗程后停药休息一周，详细观察病情变化进行检查。然后进行第三个疗程治疗，在服药期间停服其它药品。

三、疗效标准：

临床治愈：肿瘤完全消失，维持时间在6个月至一年，无复发征象。

临床显效：肿瘤缩小1/2以上，维持时间在1个月以上者。

临床有效：肿瘤缩小不足1/2，维持时间在1个月以上者。

临床无效：肿瘤无变化，或短期内有效后又继续增大者。

四、疗效观察结果：

表24疗效结果

从表25可以看出，本发明选用天然中草药为原料，其组方配伍得当，剂量准确，标本兼治，疗效独特，并且对人体无毒无害，无副作用，服用方便，总有效率达92％。

对本发明其它实施例的片剂以及其它剂型分别进行试验，得到基本相似的结果。

Claims (16)

1.一种预防及治疗缺乳、少乳、妇科疾病的中药制剂，其特征在于，所述制剂的原料中包括：

黄芪100-487重量份

党参100-487重量份

白术50-196重量份

当归50-196重量份

川芎49-146重量份，

漏芦50-146重量份

萱草根49-98重量份

柴胡49-146重量份

炒王不留行60-146重量份

所述中药通过如下工艺制备：

①黄芪、党参、柴胡、王不留行、漏芦、萱草根加水煎煮至少两次，将滤液浓缩得到水煮稠膏，

②将白术、当归、川芎加60％--90％的乙醇回流提取至少两次，提取液经浓缩得到提取稠膏，

③将水煮稠膏1-5重量份和提取稠膏1-5重量份混合得混合稠膏，然后加入辅料制成各种制剂。

2.根据权利要求1所述的中药制剂，其特征在于，所述制剂的原料中包括：

黄芪146-250重量份

党参146-300重量份

白术98-130重量份

当归120-160重量份

川芎60-98重量份

柴胡60-146重量份

炒王不留行60-146重量份

漏芦50-146重量份

萱草根49-98重量份。

3.根据权利要求1所述的中药制剂，其特征在于，所述制剂的原料中包括：

黄芪146重量份

党参146重量份

白术98重量份

当归146重量份

川芎98重量份

柴胡98重量份

炒王不留行98重量份

漏芦98重量份

萱草根73重量份。

4.根据权利要求1-3任何一项所述的中药制剂，其特征在于所述的制备过程中还包括将稠膏干燥得到干膏，再按照常规中药制剂的制备方法加入辅料制成适宜给药的各种制剂剂型。

5.根据权利要求1或2所述的中药制剂，其特征在于所述中药制剂为片剂，所述的片剂包括如下成分：

混合稠膏3-10重量份

稀释剂或吸收剂1-10重量份

崩解剂4-16重量份

润滑剂0.1-1重量份

或者在用混合干膏制备片剂时，所述的片剂中包括混合干膏1-8重量份。

6.根据权利要求4所述的中药制剂，其特征在于所述中药制剂为片剂，所述的片剂包括如下成分：

混合稠膏3-10重量份

稀释剂或吸收剂1-10重量份

崩解剂4-16重量份

润滑剂0.1-1重量份

或者在用混合干膏制备片剂时，所述的片剂中包括混合干膏1-8重量份。

7.一种预防及治疗缺乳、少乳、妇科疾病的中药制剂的制备方法，其特征在于，所述制剂的原料中包括：

黄芪100-487重量份

党参100-487重量份

白术50-196重量份

当归50-196重量份

川芎49-146重量份，

漏芦50-146重量份

萱草根49-98重量份

柴胡49-146重量份

炒王不留行60-146重量份

所述中药通过如下工艺制备：

①黄芪、党参、柴胡、王不留行、漏芦、萱草根加水煎煮至少两次，将滤液浓缩得到水煎稠膏，

②将白术、当归、川芎加60％--90％的乙醇回流提取至少两次，提取液经浓缩得到提取稠膏，

③将水煮稠膏1-5重量份和提取稠膏1-5重量份混合得混合稠膏，然后加入辅料制成各种制剂。

8.根据权利要求7所述的中药制剂的制备方法，其特征在于所述的制备过程中还包括将稠膏干燥得到干膏，再按照常规中药制剂的制备方法加入辅料制成适宜给药的各种制剂剂型。

9.根据权利要求7或8所述的中药制剂的制备方法，其特征在于，在加水煎煮时水的加入量为药材量的3-8倍，在乙醇提取过程中乙醇的加入量为药材量的2-8倍，时间均为0.5-3小时，煎液和提取液过滤后减压浓缩；优选在加水煎煮时水的加入量为药材量的4-6倍，在乙醇提取过程中乙醇的加入量为药材量的3-5倍，时间均为0.5-1.5小时，煎液和提取液过滤后减压浓缩，浓缩条件为50-80℃，0.07-0.09Mpa，滤液浓缩至相对密度为1.20-1.30g/ml的稠膏。

10.根据权利要求9所述的中药制剂的制备方法，其特征在于，加水煎煮后合并煎液，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1.10-1.40g/ml的水煮稠膏。

11.根据权利要求9所述的中药制剂的制备方法，其特征在于，在醇提后合并提取液，过滤，滤液减压浓缩至相对密度为1.10-1.40g/ml的提取稠膏。

12.根据权利要求9所述的中药制剂的制备方法，其特征在于，所述的减压浓缩在加热的条件下进行。

13.根据权利要求9所述的中药制剂的制备方法，其特征在于，所述的浓缩条件为40-90℃，0.05-0.1Mpa。

14.根据权利要求5所述的一种中药制剂，其特征在于，片剂中所用的稀释剂或吸收剂为淀粉、糊精、糖粉或乳糖，崩解剂为微晶纤维素或干燥淀粉，润滑剂为硬脂酸镁或滑石粉。

15.权利要求1-5任何一项所述的一种中药制剂在制备治疗妇女产后缺乳、少乳和治疗或预防妇科疾病的药物中的应用。

16.权利要求1-5任意一项所述的一种中药制剂在制备治疗或预防乳腺增生病/症、子宫肌瘤以及乳腺癌的药物中的应用。